一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法
【专利摘要】本发明涉及一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法，该方法包括以下步骤：⑴将粉碎的牛蒡子粉末用自来水提取、过滤后，弃水溶液，沥干，得牛蒡子渣；⑵在牛蒡子渣中加入酒精进行提取，经过滤后，得到提取液；⑶将提取液减压蒸干至恒重，得到牛蒡子苷元提取物；⑷将牛蒡子苷元提取物干法上样100~300目硅胶柱；⑸将硅胶柱依次用石油醚、质量浓度为20%丙酮、质量浓度为40%丙酮溶液洗脱，收集40%的丙酮洗脱液；⑹将洗脱液经减压蒸干至恒重后，得到牛蒡子苷元精提物浸膏；牛蒡子苷元精提物浸膏中加入无水乙醇-石油醚-丙酮进行重结晶，静置2~96小时，放于通风厨中，即得到牛蒡子苷元棱柱状晶体。本发明方法工艺简单、安全性良好、重复性良好。
【专利说明】一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种提取牛蒡子苷元的方法，尤其涉及一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法。
【背景技术】
[0002]牛蒡子是菊科植物牛蒡(Arctium lappa Z)的干燥成熟果实,属辛凉解表药，具疏散风热、宣肺透疹、消肿解毒之功效，用于治疗风热感冒、咳痰多、咽喉肿痛、斑疹不透、风疹作痒、痈肿疮毒等症，在我国分布广泛。研究资料表明，牛蒡子中主要化学成分有牛蒡子苷，牛蒡子苷元、邻苯二甲酸二异丁酯、9- 12，15-十八碳三烯酸、二十六烷酸、亚油酸乙酯、十八烷酸甘油酯【齐艳明，柏玲，张文治，齐齐哈尔大学学报，2012，28 (2):19-21】。牛蒡子苷和牛蒡子苷元都对由DMBA(7，12-二甲基苯并蒽)和TPA(12_0-十四酰-13-醋酸盐)诱导产生的皮肤癌有良好的抑制效应。与对照组相比较，在用药后10周、15周、20周，小鼠的致癌率均有所下降。用药20周后，小鼠的致癌率减少50%。牛蒡子苷兀对肺肿瘤也有明显的抑制作用【Midori Takasaki, Takao Konoshima, et al.Cancerletters.2000，158:23-29】。牛蒡子苷元可抑制结肠癌细胞SW 480细胞的增殖能力，诱导P21基因表达上调【张和平，王敬敏，西部中医药，2012，25 (6):17-20】。
[0003]目前，提取牛蒡子苷元的方法主要有微波提取、回流提取、超声提取、冷浸提取、超高压辅助离子液体提取、超临界CO2萃取等方法，提取溶剂有甲醇以及乙醇水等。微波提取、超声提取法及溶剂甲醇多使用于牛蒡子苷元含量分析方面，不适合牛蒡子苷元的大量制备。在分离纯化方面，基本利用传统硅胶分离，洗脱溶剂有氯仿甲醇等，得到牛蒡子苷元单体所用时间较长。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、安全性良好的从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法。
[0005]为解决上述问题，本发明所述的一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法，包括以下步骤:
⑴将粉碎的牛蒡子粉末用自来水按1:5~20的固液质量比在20-55°C下提取f 3次，每次1-3小时，经过滤后，弃水溶液，浙干，得牛蒡子渣；
⑵在所述牛蒡子渣中加入质量浓度为50、8%的酒精，按1:5~20的固液质量比在75~85°C下提取1~4次，每次f 3小时，经过滤后，合并得到提取液；
⑶将所述提取液在温度为4(T80°C、压力为0.05、.0SMPa的条件下减压蒸干至恒重，得到牛蒡子苷元提取物；
⑷将所述步骤⑶所得的牛蒡子苷元提取物干法上样10(T300目硅胶柱；
(5)将所述步骤⑷所得的硅胶柱依次用石油醚、质量浓度为20%丙酮、质量浓度为40%丙酮溶液洗脱，收集40%的丙酮洗脱液；(6)将所述洗脱液经减压蒸干至恒重后，得到牛蒡子苷元精提物浸膏；所述牛蒡子苷元精提物浸膏中按I g:10 mL~50 mL的固液比加入无水乙醇-石油醚-丙酮进行重结晶，静置2~96小时，放于通风厨中，即得到牛蒡子苷元棱柱状晶体。
[0006]所述步骤⑴中的牛蒡子粉末是指粒度1(T100目的干燥牛蒡子粉末。
[0007]所述步骤⑶中减压蒸干的条件是指温度为4(T80°C、压力为0.05^0.08MPa。
[0008]所述步骤⑷中干法上样的条件是硅胶柱中填充材料的用量为样品牛蒡子苷元提取物的4~30倍质量。
[0009]所述步骤(5)中洗脱的流速为3(T200mL/min。
[0010]所述步骤(6)中减压蒸干的条件是指温度为4(T60°C、压力为0.05^0.08MPa。
[0011]所述步骤(6)中无水乙醇-石油醚-丙酮三者的体积比为广3:(T2:(Tl。
[0012]如上所述的一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法制得的牛蒡子苷元在作为抗肿瘤及治疗糖尿病的原料药中的应用。
[0013]本发明与现有技术相比具有以下优点:
1、本发明采用真空反应器回流提取、10(T200目硅胶分离、石油醚丙酮作为洗脱溶剂，利用结晶法快速大量制备牛蒡子苷元。
[0014]2、本发明采用硅胶柱层析及结晶重结晶分离技术，与高速逆流色谱(HSCCC)等分离技术相比，能够得到大量牛蒡子苷元单体，有效地缩短了制备时间(参见表1)。
[0015]表1
【权利要求】
1.一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法，包括以下步骤: ⑴将粉碎的牛蒡子粉末用自来水按1:5~20的固液质量比在20~55°C下提取1~3次，每次1~3小时，经过滤后，弃水溶液，浙干，得牛蒡子渣； ⑵在所述牛蒡子渣中加入质量浓度为50~98%的酒精，按1:5~20的固液质量比在75~85°C下提取1~4次，每次1~3小时，经过滤后，合并得到提取液； ⑶将所述提取液经减压蒸干至恒重，得到牛蒡子苷元提取物； ⑷将所述步骤⑶所得的牛蒡子苷元提取物干法上样100~300目硅胶柱； (5)将所述步骤⑷所得的硅胶柱依次用石油醚、质量浓度为20%丙酮、质量浓度为40%丙酮溶液洗脱，收集40%的丙酮洗脱液； (6)将所述洗脱液经减压蒸干至恒重后，得到牛蒡子苷元精提物浸膏；所述牛蒡子苷元精提物浸膏中按1g:10 mL~50 mL的固液比加入无水乙醇-石油醚-丙酮进行重结晶，静置2~96小时，放于通风厨中，即得到牛蒡子苷元棱柱状晶体。
2.如权利要求1所述的一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法，其特征在于:所述步骤⑴中的牛蒡子粉末是指粒度10~100目的干燥牛蒡子粉末。
3.如权利要求1所述的一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法，其特征在于:所述步骤⑶中减压蒸干的条件是指温度为40~80°C、压力为0.05~0.08MPa。
4.如权利要求1所述的一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法，其特征在于:所述步骤⑷中干法上样的条件是硅胶柱中填充材料的用量为样品牛蒡子苷元提取物的4~30倍质量。
5.如权利要求1所述的一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法，其特征在于:所述步骤(5)中洗脱的流速为30~200mL/min。
6.如权利要求1所述的一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法，其特征在于:所述步骤(6)中减压蒸干的条件是指温度为40~60°C、压力为0.05~0.08MPa。
7.如权利要求1所述的一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法，其特征在于:所述步骤(6)中无水乙醇-石油醚-丙酮三者的体积比为1~3:0~2:0~1。
8.如权利要求1所述的一种从牛蒡子中快速制备牛蒡子苷元的方法制得的牛蒡子苷元在作为抗肿瘤及治疗糖尿病的原料药中的应用。
【文档编号】A61P35/00GK103524463SQ201310447928
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2013年9月27日 优先权日:2013年9月27日
【发明者】于瑞涛, 陶燕铎, 梅丽娟, 邵赟, 苑祥, 史强强 申请人:中国科学院西北高原生物研究所