一种补骨脂提取物及其制备、应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于中药提取【技术领域】，具体涉及一种补骨脂提取物及其制备、应用。该补骨脂提取物为补骨脂的石油醚部位和/或乙酸乙酯部位和/或正丁醇部位，实验证明补骨脂三个部位均有抗凝血作用，三个部位可单独或组合用于制备抗凝血剂。
【专利说明】一种补骨脂提取物及其制备、应用
[0001]【技术领域】
本发明属于中药提取【技术领域】，具体涉及一种补骨脂提取物及其制备、应用。
[0002]【背景技术】
补骨脂Fructus为豆科植物补骨脂corylifolia Linn.的干燥果实，又名破故纸、黑故子等，为常用中药，味辛、苦，性温，归肾、脾经，具有补肾助阳，纳气平喘，温脾止泻的功效。现代研究表明，补骨脂含黄酮类、香豆素类、脂肪酸类和单萜酚类等多种化学成分，具有抗氧化、降血糖、保肝、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、雌激素样和抑制葡萄糖苷酶等作用。
[0003]正常人由于有完整的血液凝固系统和抗凝及纤溶系统，所以血液在血管内既不凝固也不出血，始终自由流动完成其功能，但当机体处于高凝状态或抗凝及纤溶减弱时，则发生血栓栓塞性疾病。使用抗凝血药可以防治血管内栓塞或血栓形成的疾病，预防中风或其它血栓性疾病。目前常用的抗凝血药有肝素、香豆素类(双香豆素、华法林和新抗凝等)和抗血小板药(阿司匹林和潘生丁等)，此外蛇毒溶栓剂如去纤酶、抗栓酶和清栓酶可溶解已形成的血栓使血管再通。其中肝素对凝血过程的各环节均有抑制作用，主要依赖于抗凝血酶III;香豆素类是维生素K拮抗剂，在肝脏抑制维生素K由环氧化物向氢醌型转化，从而阻止维生素K的反复利用，影响含有谷氨酸残基的凝血因子I1、νπ、IX、X的羧化作用，使这些因子停留于无凝血活性的前体阶段，从而影响凝血过程；抗血小板药通过抑制血小板环氧化酶的作用，并可防 止血小板环氧化酶将花生四烯酸转化成前列腺素中间体，从而起到防止血栓的形成。
[0004]目前尚无补骨脂对血浆复钙时间及体外溶栓作用的报道。
[0005]
【发明内容】
本发明的目的在于提供一种有抗凝血作用的补骨脂提取物，同时提供该提取物的制备方法和应用。
[0006]本发明采用以下技术方案:
一种补骨脂提取物，为补骨脂的石油醚部位和/或乙酸乙酯部位和/或正丁醇部位。
[0007]所述石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位是指将补骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到的萃取物。
[0008]所述石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位是指将补骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到的萃取物。
[0009]补骨脂甲醇浸膏的制备方法为:补骨脂粉碎后，用甲醇(90% ν/ν以上)浸提2-3次，每次2-4d，浸提液合并、过滤、浓缩得甲醇浸膏。
[0010]甲醇浸提时采用室温冷浸的方式。
[0011]补骨脂提取物的制备方法，将补骨脂甲醇浸膏分散于(75-85%v/v)甲醇水溶液中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，所得石油醚萃取物即为石油醚部位，所得乙酸乙酯萃取物即为乙酸乙酯部位，所得正丁醇萃取物即为正丁醇部位。
[0012]补骨脂提取物在抗凝血方面的应用。[0013]补骨脂提取物在制备溶栓(或纤溶)药物方面的应用。
[0014]本发明从补骨脂中提取出了石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位，并采用体外血浆复钙时间法对三个部位的体外凝血效果进行了考察，结果表明，补骨脂三个部位均有抗凝血作用，尤以正丁醇部位的抗凝血作用最强，石油醚部位、乙酸乙酯部位的抗凝血作用稍弱于正丁醇部位。可见，补骨脂的石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位三个部位可单独或组合用于制备抗凝血剂。
[0015]本发明还以尿激酶为阳性对照，利用纤维蛋白平板法考察了补骨脂三个部位的溶栓作用，结果表明，正丁醇部位有一定的溶栓作用，可应用于制备溶栓(或纤溶)药物药物。
[0016]【专利附图】
【附图说明】
图1为系列浓度尿激酶标准曲线。
[0017]【具体实施方式】
实施例1补骨脂提取部位的制备
补骨脂提取部位由以下方法提取得到:取补骨脂，用甲醇室温冷浸提取3次，每次3 d，提取液合并、过滤、浓缩，得甲醇总浸膏。将甲醇总浸膏分散于75%甲醇水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取3次，浓缩，回收溶剂，分别得到补骨脂石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位。
[0018]实施例2补骨脂提取部位的制备
补骨脂提取部位由以下方法提取得到:取补骨脂，用甲醇室温冷浸提取2次，每次4 d，提取液合并、过滤、浓缩，得甲醇总浸膏。将`甲醇总浸膏分散于85%甲醇水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取5次，浓缩，回收溶剂，分别得到补骨脂石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位。
[0019]效果实验I
补骨脂三个部位体外抗凝血活性应用
补骨脂三个部位(实施例1石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位)对血浆复钙时间的影响的实验。
[0020]方法:家兔体外血浆复钙时间
仪器和材料:TGL-16高速离心机(江苏金坛中大仪器厂)、秒表计时器、LRH-150生化培养箱(上海一恒科技有限公司)、注射生理盐水(山东齐都药业有限公司，2012053107)、维生素kl注射液(天津药业集团新郑股份有限公司，1109051)、注射用灯盏花素(湖南恒生制药有限公司，20110202)、38 g/L枸橼酸钠溶液(自制)、2.775 g/L氯化钙溶液(自制)。
[0021]实验动物:獭兔，雄性，体重2.0-2.5 kg。
[0022]样品溶液配制:分别称取补骨脂三个部位各I mg，分别加入溶剂(乙醇:丙二醇:生理盐水体积比=1:1:3) I mL，混悬，超声至溶解或分散均匀，备用。
[0023]药品溶液配制:量取一定体积的维生素kl注射液，加入一定体积的溶剂(乙醇:丙二醇:生理盐水体积比=1:1:3)，配成维生素kl浓度为I mg/mL溶液；称取注射用灯盏花素I mg，加入溶剂(乙醇:丙二醇:生理盐水体积比=1:1:3) I mL，混悬，超声至溶解或分散均匀，备用。
[0024]取家兔耳缘静脉取血3.6 mL,加38 g/L枸橼酸钠溶液400 μ L,混匀，1000 r/min离心15 min,取上清液(下述血衆)备用。样品组加入血衆0.1 mL及样品溶液各0.1 mL,阳性对照组加入血浆0.1 mL及药品溶液0.1 mL，空白组加入血浆0.1 mL及空白溶剂(乙醇:丙二醇:生理盐水体积比=1:1:3) 0.1 mL。各组于37°C温育I min后分别向每管加入2.775 g/L CaCl2溶液0.1 mL，计时，直到检测到弥漫性蛋白颗粒时停止计时，维生素K1、灯盏花素对照组重复3次，样品组重复6次，求算术平均值和标准差，即为血浆复钙时间。结果采用平均值和标准差表示，采用SPSS17.0软件单因素方差分析法(One-WayANOVA)进行统计学分析，测定结果详见表1。
[0025]表1
【权利要求】
1.一种补骨脂提取物，其特征在于:为补骨脂的石油醚部位和/或乙酸乙酯部位和/或正丁醇部位。
2.如权利要求1所述的补骨脂提取物，其特征在于:所述石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位是指将补骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到的萃取物。
3.如权利要求1所述的补骨脂提取物，其特征在于:所述石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位是指将补骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到的萃取物。
4.如权利要求1-3任一项所述的补骨脂提取物，其特征在于:补骨脂甲醇浸膏的制备方法为:补骨脂粉碎后，用甲醇浸提2-3次，每次2-4d，浸提液合并、过滤、浓缩得甲醇浸膏。
5.制备权利要求1所述的补骨脂提取物的方法，其特征在于:将补骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，所得石油醚萃取物即为石油醚部位，所得乙酸乙酯萃取物即为乙酸乙酯部位，所得正丁醇萃取物即为正丁醇部位。
6.如权利要求5所述的补骨脂提取物的制备方法，其特征在于:所述补骨脂甲醇浸膏的制备方法为:补骨脂粉碎后，用甲醇浸提2-3次，每次2-4d，浸提液合并、过滤、浓缩得甲醇浸膏。
7.权利要求1-4任一项所述的补骨脂提取物在抗凝血方面的应用。
8.权利要求1-4任一项所述的补骨脂提取物在制备溶栓药物方面的应用。
【文档编号】A61P7/02GK103623045SQ201310540110
【公开日】2014年3月12日 申请日期:2013年11月5日 优先权日:2013年11月5日
【发明者】康文艺, 张伟, 尹震花, 彭涛 申请人:黄河科技学院