2-甲氧基雌二醇类似物及其制备方法与用途
【专利摘要】本发明涉及2-甲氧基雌二醇类似物及其制备方法与用途，可有效解决2-甲氧基雌二醇类似物的制备及实现2-甲氧基雌二醇类似物在制备抗肿瘤药物中的应用，方法是，以2-甲氧基-3-苄氧基-雌甾-1,3,5(10)-三烯-17β-醇或17β-胺为原料，溶于有机溶剂中，在Lewis碱存在下与化合物（1）进行酰化反应得到2-甲氧基-3-苄氧基-雌甾-1,3,5(10)-三烯-17β-酯或17β-酰胺化合物（2），然后经催化加氢反应得到化合物（3），最后再经酰化反应或烃化反应得到化合物2-甲氧基雌二醇类似物（4），反应式为：本发明2-甲氧基雌二醇类似物的制备方法简单，条件温和，收率高，可有效用于抗肿瘤药物制剂的开发。
【专利说明】2-甲氧基雌二醇类似物及其制备方法与用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及医药，特别是一种2-甲氧基雌二醇类似物及其制备方法与用途。
【背景技术】
[0002]20世纪70年代，在研究雌激素代谢过程中，发现了雌二醇的内源性代谢产 物2-甲氧基雌二醇（2-methoxyestradiol, 2-ME),它是在体内的细胞色素P450s氧化 酶和儿茶酚-0-甲基转移酶（C0MT)的作用，雌二醇进行有序的羟基化和甲基化而产生 的。2-甲氧基雌二醇存在于正常人的尿液、血液中，据报道2-甲氧基雌二醇在男性及未 怀孕的妇女血衆中含量较低（分别为10?35pg ? mF1和18?138pg ? mF1),而在孕妇 血楽中含量较高（可达 216 ?10690pg ? mr1) (Dubey R. K. et al. Trends Endocrinol Metab. 2009，20 (80) : 374-379 )。研究发现2ME具有广谱的抗肿瘤作用，且治疗的耐受 性较好。Cushman M.等报道2-ME可以对多达55种不同肿瘤细胞有抑制作用（Cushman M. et al. J Med Chem. 1995，38 (12) : 2041-2049)，2-ME 单独或联合其他化疗药物可用于 治疗乳腺癌、胃癌、肺癌、肝癌、前列腺癌、多发性骨髓瘤及白血病等。Susan等研究发现 2ME只作用于活跃增殖期的癌细胞，并有相对较高的特异性，而对静止期的细胞无作用， 因而不良反应较小（Susan, et al. Drug Resist Updates. 2003，6 (6) : 355-361 )，具有高效 低毒、靶向性强、不易耐药等优点。另外，2ME对雌激素受体的亲和力较弱，并且没有雌二 醇或其他的雌二醇代谢物相关的一些雌激素活性（Pribluda V. S. et al. Cancer Metast Rev. 2000, 19:173-200)，因此2ME有可能成为一种高效低毒的抗癌新药。目前，2-甲氧雌 二醇已由EntreMed公司注册，以商品名Panzem进行开发，作为单一疗法用于稳定的或复发 的多发性骨髓瘤和前列腺癌治疗、与多西他赛（docetaxel，Taxotere)联合用于激素难治 性前列腺癌的II期临床研究阶段，新适应症抗风湿性关节炎研究处于I期临床试验阶段。 Sanofi-aventis (赛诺菲-安万特）公司，Allergan (眼力健）公司等获得部分适应症授权 并分别进入I、II或III期临床试验。
[0003]然而，2-ME要广泛应用于临床还存在一些急需解决的问题：（1) 2-ME是一种浓 度时间依赖性的抗肿瘤药物，在水中溶解度极低（37°C水中约为1. 669 u g ? ml—1，脂水分 配系数约2. 86 (郭新红等，郑州大学学报（医学版)，2010，45(1): 141-143)) (2) 口服吸 收和剂量之间缺乏相关性，在体内又易快速羟基化、脱氢等生物变化产生非活性的代谢 产物，导致半衰期较短(约20min)，生物利用度较低，口服血药及组织药物浓度极低（小 于100ng ? mr1),不能满足药物本身的时间剂量依赖性的药理学作用特点（James J, et al. Invest New Drugs，2007，25:41-48)。另外，在对2-ME衍生物的构效关系（SAR)研究中发 现，2-ME存在的主要问题不是其抗肿瘤活性较低，而是其在体内较快的首过代谢(Agoston G.E.et al. Bioorg Med Chem Lett, 2009，19:6241-6244)。这提示我们在对 2-ME 的结构进 行修饰时应着重减缓2-ME衍生物在体内的代谢，而不仅是提高其体外干扰微管聚合或抑 制增殖作用。2-ME的水溶性低、口服剂量大、吸收无规律、半衰期较短、存在首过效应及生物 利用度低等缺点限制着2-ME的临床应用。因此，以2-ME为先导化合物对其进行结构修饰和改造是一个可行的并且有价值的途径。
[0004]国外早在20世纪80年代就有关于2-甲氧基雌二醇衍生物研究的报道，有关其衍生物的研究主要是在近20年中进行的。研究者主要是针对其2-位、3-位、16-位和17-位等进行结构修饰研究。在这些研究成果中，有代表性的是ENMD-1198 (Zhou Q.etal.1nvest New Drugs.2011，29:340-346)和STX140(Newman S.P.et al.Cell Clin CancerRes.2008，14:597-606)，目前已进入I期临床实验阶段，有较好的耐受性，毒副作用小。另外还有部分2-ME衍生物也显示了较好的抗肿瘤活性。因此对2-甲氧基雌二醇进行结构修饰和改造是一种获得新型抗肿瘤药物的有效途径，具有现实意义和研究价值。
【发明内容】
[0005]针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种2-甲氧基雌二醇类似物及其制备方法与用途，可有效解决2-甲氧基雌二醇类似物的制备及实现2-甲氧基雌二醇类似物在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0006]本发明解决的技术方案是，本发明的2-甲氧基雌二醇类似物其结构通式为:
[0007]
【权利要求】
1.一种2-甲氧基雌二醇类似物，其特征在于，其结构通式为:
2.根据权利要求1所述的2-甲氧基雌二醇类似物，其特征在于，为下列通式化合物的一种:
3.根据权利要求2所述的2-甲氧基雌二醇类似物，其特征在于，所述的通式(I)化合物为下列中的一种:
4.权利要求1所述的2-甲氧基雌二醇类似物的制备方法，其特征在于，反应式为:
5.根据权利要求4所述的2-甲氧基雌二醇类似物的制备方法，其特征在于，在冰浴条件下，将0.48g2-甲氧基-3-苄氧基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-17 β-醇溶于IOml 二氯甲烷中，边搅拌边滴加入0.417ml三乙胺；慢慢滴加含0.14ml氯乙酰氯的二氯甲烷溶液，控制滴速约I滴/2s，30min内滴加完毕；室温下继续搅拌，薄层检测至完全反应，向反应液中加入适量水，并用二氯甲烷萃取3次，合并有机相，再依次蒸馏水、饱和碳酸氢钠、饱和食盐水各洗I次，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，再用适量甲醇重结晶，得白色针状2-甲氧基-3-苄氧基-17 β -羟基-雌甾-1, 3，5 (10)-三烯-氯乙酸酯0.52g，收率92.98% ； 在60°C条件下，将2-甲氧基-3-节氧基-17 β -羟基_雌留-1, 3, 5 (10) - 二稀_氣乙酸酯溶于50ml乙醇中，加入0.03g质量含量为10%钯碳催化剂，维持氢气压力为50psi，薄层检测至完全反应，抽滤除`去钯碳，减压浓缩溶剂，经甲醇重结晶析出白色粉末状2-甲氧基-3，17 β - 二羟基-雌甾-1, 3，5 (10)-三烯-17-氯乙酸酯0.38g，收率90%。
6.根据权利要求4所述的2-甲氧基雌二醇类似物的制备方法，其特征在于，冰浴下将无水甲酸169.8μ I逐滴加入到氯磺酰异氰酸酯391.8μ I中，快速搅拌，15分钟后往体系加入乙腈6ml，室温搅拌7小时；然后在冰浴条件下，慢慢加入含有1.50g的2-甲氧基-3-苄氧基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-17 β -醇的N，N- 二甲基乙酰胺溶液8ml，继续搅拌反应两小时；然后加入蒸馏水20ml，用乙酸乙酯萃取三次，有机相加入无水硫酸钠干燥过夜，抽滤，蒸干溶剂，用柱层析硅胶过柱，流动相为乙酸乙酯:石油醚=1:3，得白色粉末状固体2-甲氧基-3-苄氧基-17 β-羟基-雌甾_1，3，5 (10)-三烯-17-氨基磺酸酯1.56g，产率87% ; 用50ml乙醇将2-甲氧基-3-苄氧基-17 β-羟基-雌留_1，3，5 (10)-三烯-17-氨基磺酸酯1.0Og溶解，放置在钢瓶中，加入质量含量为10%的钯碳50mg，搅拌，油浴60°C，在50-60psi氢气压力下反应；4小时后，由体积比计二氯甲烷:丙酮=15: I作薄层色谱检测，反应完全后，将混合物用200-300目的柱硅胶过滤，滤液浓缩得到白色粉末2-甲氧基-3，17 β - 二羟基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-17-氨基磺酸酯0.72g，收率90% ； 在冰浴条件下，将120mg2-甲氧基-3，17 β - 二羟基-雌甾_1，3，5 (10)-三烯-17-氨基磺酸酯溶于二氯甲烷中，边搅拌边滴加入65 μ I三乙胺；取50μ I正丁酰氯，用5ml 二氯甲烧稀释后，加入恒压滴液漏斗中，控制滴速约I滴/2s,30min内滴加完毕,将反应体系置于室温下，继续搅拌2h，然后分别用蒸馏水、10%碳酸氢钠溶液、饱和氯化钠溶液各洗涤2次，IOml/次，取有机层加入无水硫酸镁干燥4-5h后，过滤，旋蒸除去溶剂，得透明油状物，经柱层析，得化合物2-甲氧基-3- 丁酰氧基-17 β -羟基-雌留-1, 3，5 (10)-三烯-17-氨基磺酸酯116mg，收率82%。
7.根据权利要求4所述的2-甲氧基雌二醇类似物的制备方法，其特征在于，在冰浴条件下，将0.300g2-甲氧基-3-节氧基-雌留-1, 3, 5 (10) -二烯-17 β _胺溶于IOml乙酸乙酯中，边搅拌边滴加入0.1Oml吡啶；然后慢慢滴加0.159ml正丁酰氯的乙酸乙酯溶液，控制滴速约I滴/2s，30min内滴加完毕；室温搅拌，薄层检测至完全反应，向反应液中加入适量水，并用二氯甲烷萃取3次，合并有机相，再依次水洗、饱和碳酸氢钠、饱和食盐水各洗I次，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，再用甲醇重结晶，得2-甲氧基-3-苄氧基-17 β -N-正丁酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯0.253g，收率71.5% ； 在60°C，将0.200g2-甲氧基-3-苄氧基-17 β -N-正丁酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯溶于50ml乙醇中，加入0.02gl0%钯碳催化剂，并在氢气压力为50psi的作用下反应，薄层检测至完全反应，抽滤除去钯碳，减压浓缩溶剂，经体积比计乙酸乙酯:石油醚=1:2柱层析得2-甲氧基-17 β -N-正丁酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-3-醇0.138g，收率85.7%。
8.根据权利要求4所述的2-甲氧基雌二醇类似物的制备方法，其特征在于，在冰浴条件下，将0.300g2-甲氧基-3-苄氧基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-17 β -胺溶于IOml四氢呋喃中，边搅拌边滴加入0.10ml4-二甲氨基吡啶；然后慢慢滴加76mg丁二酸酐的四氢呋喃溶液，控制滴速约I滴/2s，30min内滴加完毕；室温搅拌，薄层检测至完全反应，向反应液中加入适量水，并用二氯甲烷萃取3次，合并有机相，再依次水洗、饱和碳酸氢钠、饱和食盐水各洗I次，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，再用乙醇重结晶，得到2-甲氧基-3-苄氧基-17β-Ν-3'-羧基丙酰胺基-雌甾_1，3，5 (10)-三烯0.30g，收率80.3% ; 在60 °C，将0.30g2-甲氧基-3-苄氧基-17 β -Ν-3 !-羧基丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯溶于50ml乙醇中，加入0.03gl0%钯碳催化剂，并在氢气压力为50psi的作用下反应，薄层检测至完全反应，抽滤除去钯碳，减压浓缩溶剂，经体积比计乙酸乙酯:石油醚=1: 2柱层析得2-甲氧基-17 β -Ν-3，-羧基丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-3-醇 0.214g，收率 87.5%。
9.根据权利要求4所述的2-甲氧基雌二醇类似物的制备方法，其特征在于，在室温的条件下，将0.605g的N-叔丁氧擬基-β _丙氨酸和1.16g2-甲氧基-3-节氧基-雌留-1, 3, 5(10)-三烯-17 β -胺溶于75ml乙酸乙酯中，边搅拌边先后加入0.93g缩合剂1，3- 二环己基碳二亚胺和0.01Og催化剂4- 二甲氨基吡啶，搅拌10小时，反应完全后，过滤，滤液减压浓缩，得淡黄色油状物，经柱色谱纯化，得到2-甲氧基-3-苄氧基-17 β -Ν-3' - (N-叔丁氧羰基)氨基-丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯白色固体1.51g，收率为89.3%； 然后将1.51g2-甲氧基-3-苄氧基-17β-Ν-3' -(N-叔丁氧羰基)氨基-丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯白色固体溶于无水乙醇中，加入0.5g的质量含量10%钯碳催化剂，加氢至压力为60Psi，反应4小时，过滤，滤液减压浓缩，得灰白色固体，用乙酸乙酯-石油醚混合溶剂重结晶，得到2-甲氧基-17 β-N_3' -(N-叔丁氧擬基)氨基-丙酸胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-3-醇白色固体1.19g，收率94% ；将1.0g2-甲氧基-17β-Ν-3 ' -(N-叔丁氧羰基)氨基-丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-3-醇白色固体溶于二氯甲烷，然后慢慢滴加1.31g甲基膦酸二异丁酯，然后加入15.46ml氨基磺酰氯，混合液在室温下搅拌反应20小时，然后分别用乙酸乙酯和蒸馏水萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，干燥，浓缩，然后经色谱柱纯化得到2-甲氧基-17 β -Ν-3/ - (N-叔丁氧羰基)氨基-丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-3-氨基磺酸酯 1.04g，收率 90% ； 然后将1.04g2-甲氧基-17β-Ν-3，-(N-叔丁氧羰基)氨基-丙酰胺基-雌甾-1，3，5 (10)-三烯-3-氨基磺酸酯溶于IOml 二氯甲烷溶液，滴加2ml85%磷酸水溶液，室温下剧烈搅拌反应8小时，混合物用25ml蒸馏水稀释并冷却到0°C，用乙酸乙酯萃取3次，每次用量30ml，有机层用硫酸镁干燥，浓缩得到白色固体2-甲氧基-17 β-Ν-3'-氨基-丙酰胺基-雌留-1, 3，5 (10)-三烯-3-氨基磺酰酯0.75g，收率88%。
10.权利要求1或2-4所 述的2-甲氧基雌二醇类似物在制备抗肿瘤药物中的应用。
【文档编号】A61K31/565GK103772463SQ201310753425
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2013年12月30日 优先权日:2013年12月30日
【发明者】施秀芳, 张振中, 姚海峰, 孙帅军, 吴丹丹, 景飞, 路翔, 李鹏 申请人:郑州大学