1.一种脱细胞异种真皮制备方法,其特征在于:依次包括以下步骤,
步骤A:制取猪真皮片;
步骤B:对猪真皮片进行消毒处理;
步骤C:使用磷酸盐缓冲盐水充分清洗消毒后的猪真皮片;
步骤D:将猪真皮片与冷冻防护剂充分混合后保存在冻箱中备用;
步骤E:取出冷冻猪真皮片在室温下融化,然后加入磷酸盐缓冲盐水充分清洗猪真皮片;
步骤F:加入脱细胞液,将猪真皮片与脱细胞液充分混合以及反应,所述脱细胞液含有温和洗涤剂;
步骤G:吸出脱细胞液,然后加入磷酸盐缓冲盐水充分清洗猪真皮片。
2.根据权利要求1所述的一种脱细胞异种真皮制备方法,其特征在于:所述冷冻防护剂为甘油水溶液或多糖,当冷冻防护剂为甘油水溶液时,甘油的体积百分比浓度为20%或大于等于30%;当冷冻防护剂为多糖时,所述冷冻防护剂为葡聚糖凝胶、蔗糖和天然蜂蜜中的一种或者几种。
3.根据权利要求2所述的一种脱细胞异种真皮制备方法,其特征在于:所述步骤D中还添加有乙二胺四乙酸。
4.根据权利要求1所述的一种脱细胞异种真皮制备方法,其特征在于:所述脱细胞液为4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液,其PH值为8,每升4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液含20毫摩尔4-羟乙基哌嗪乙磺酸,所述温和洗涤剂为十二烷基聚乙二醇醚、乙基苯基聚乙二醇和脱氧胆酸钠中的一种或者几种,当所述温和洗涤剂为脱氧胆酸钠时,脱氧胆酸钠的质量体积百分比溶度为2%。
5.根据权利要求4所述的一种脱细胞异种真皮制备方法,其特征在于:所述脱细胞液中还添加有乙二胺四乙酸。
6.根据权利要求1所述的一种脱细胞异种真皮制备方法,其特征在于:所述脱细胞液体积与猪真皮片体积之比为30:1。
7.根据权利要求1所述的一种脱细胞异种真皮制备方法,其特征在于:步骤G之后还依次具有下列步骤,
步骤H:加入核糖核酸酶溶液,并进行充分混合以及反应,所述核糖核酸酶溶液内的核糖核酸酶通过人工重组合成或直接从动物组织提取,所述核糖核酸酶溶液为4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液,每升4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液含20毫摩尔4-羟乙基哌嗪乙磺酸、2.5毫摩尔氯化镁、0.5毫摩尔氯化钙以及0.5克核糖核酸酶,其PH值为8,核糖核酸酶溶液体积与猪真皮片体积之比为20:1;
步骤I:吸出核糖核酸酶溶液,然后加入磷酸盐缓冲盐水充分清洗猪真皮片。
8.根据权利要求7所述的一种脱细胞异种真皮制备方法,其特征在于:步骤I之后还依次具有下列步骤,
步骤J:加入alpha-半乳糖苷酶溶液进行充分混合以及反应,所述alpha-半乳糖苷酶溶液通过柠檬酸盐缓冲液添加alpha-半乳糖苷酶制得;
步骤K:吸出alpha-半乳糖苷酶溶液,然后加入磷酸盐缓冲盐水充分清洗猪真皮片。
9.根据权利要求8所述的一种脱细胞异种真皮制备方法,其特征在于:步骤K之后还依次具有下列步骤,
步骤M:加入保存液进行充分混合,保存液为磷酸盐缓冲盐水,其内含乙二胺四乙酸以及体积百分比溶度为20%的甘油;
步骤N:取出猪真皮片,包装在铝箔里外双层袋中;
步骤O:对步骤N中包装好的铝箔里外双层袋进行灭菌处理,所述灭菌处理为在防辐射保护剂里进行电子束灭菌、在干冰条件下的γ辐照灭菌、超临界二氧化碳处理和环氧乙烷灭菌中的一种。
10.一种脱细胞异种真皮,其特征在于:采用权利要求1~9任一项所述的方法制得。