RSV感染的治疗的制作方法

发明领域本发明提供了用于治疗幼儿中的rsv感染的方法。更具体地，本发明提供了用于肺部施用至幼儿的中和rsv的免疫球蛋白单可变结构域的具体剂量方案。发明背景呼吸道合胞病毒(rsv)是婴儿和很小的幼儿中严重呼吸道感染反复发作的原因，并且导致每年冬季月份期间的流行疫情。rsv通常在进入点：沿着鼻腔和气道的纤毛上皮细胞(black2003，respir.care48：209-31；discussion231-3)引起其原发感染。原发感染通常症状为从温和的上呼吸道疾病到更严重的下呼吸道感染(lrti)的临床迹象，包括支气管肺炎和细支气管炎(aliyu，等人2010，bayerojournalofpureandappliedsciences3：147-155)，其主要在婴儿中发生。跨膜糖蛋白f和g是rsv的主要表面抗原。附着蛋白(g)介导对细胞受体的结合，而f蛋白促进与细胞膜的融合，使得可以穿透进入宿主细胞(lopez等人1998，72：6922-8)。基于g蛋白的抗原和遗传变异性，已经鉴定出2种rsv的血清型(a和b)，以及若干种亚型。与g蛋白相反，f蛋白在rsv血清型a和b之间是高度保守的(89%氨基酸同一性)，并且因此被认为是开发病毒进入抑制剂的主要靶标。糖蛋白f还诱导受感染细胞与相邻未受感染细胞的融合。此标志性特征导致出现多核细胞形成(上皮细胞合胞体)，其允许复制的病毒核糖核酸(rna)的细胞间的传播，从而赋予针对宿主免疫应答的额外防护(black2003)。rsv感染给卫生保健基础设施造成了显著的负担，并且对于治疗选择仍有很高的医疗需求，尤其是因为还没有可用的疫苗来预防rsv感染。市场上可用的唯一药物产品是针对病毒糖蛋白f的人源化的单克隆抗体(synagis®(帕利珠单抗))，其预防性地用于有很高风险遭受严重hrsv感染的儿童。synagis®的使用受到限制(至少部分)是由于这种产品的高成本。由于可用于rsv感染的治疗的药物不足，对于住院婴儿的标准护理大多数都是支持性的(例如，补液/补食、观察、以及需要时的呼吸支持)。显然需要改善的和/或更便宜的预防和/或治疗剂，用于预防和/或治疗hrsv感染。本公开的seqidno:65-85是针对人类呼吸道合胞病毒融合蛋白的免疫球蛋白单可变结构域。seqidno:65-85由3个通过弹性接头重组连接的抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成。seqidno:65-85在体内和体外经过广泛地表征(参见例如wo2010/139808；其内容整体上通过引用并入)。所述抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域特异性地且强力地结合呼吸道合胞病毒(rsv)f蛋白。在hep2细胞中的体外微中和研究表明，这些抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域抑制病毒生命周期的早期活动，防止细胞外病毒感染无病毒的(virusnaïve)细胞。seqidno:65-85的功效在rsv-感染的棉鼠中得到确认。由于seqidno:65-85是要用于中和并抑制rsv，因而认为通过气溶胶装置直接递送并在呼吸道中沉积是优选的且最适宜的施用途径。作为雾化器溶液的免疫球蛋白单可变结构域(包括seqidno:65-85)的制剂在wo2011/098552中已有广泛描述。seqidno:71吸入的安全性、耐受性和药代动力学(pk)参数已经在成年志愿者中的三个i期临床研究进行了进一步评估。这些研究显示出seqidno:71的吸入和静脉(i.v.)输注一般都耐受良好。然而，不可能将功效从成年人向儿童，或者从较年长儿童向较年幼儿童外推，因为由rsv引起的下呼吸道疾病很少在这些群体中发生。发明概述为了应对对于rsv感染的有效预防和/或治疗的这种长期存在却未得以解决的需求(特别是在高风险群体如儿童中)，本发明提供了用于将生物制剂向儿童群体肺部施用的剂量方案。更具体地，本发明提供了用于将免疫球蛋白单可变结构域向幼儿(如婴儿和幼童(toddler))肺部施用的剂量方案。如上文所述，对于rsv中和药物，不可能将功效从成年人向儿童，或者从较年长儿童向较年幼儿童外推，因为由rsv引起的下呼吸道疾病很少在这些群体中发生。因此，只能基于建模方法确定剂量。对于儿科群体的剂量确定通常是使用与体重、身高、或年龄相关的函数从成人剂量来按比例确定的。某些治疗剂(例如，如pulmozyme®(阿法链道酶))，对所有年龄，包括婴儿，均以固定的剂量给予。与这些通常的剂量确定不同，在本发明中设计了建模的方法，其中也考虑了生长及发育的过程，如器官成熟、血流的变化、机体组成、以及消除机制的个体发生学，包括药物在发育中的肺泡腔中的递送和沉积以及其从该处的吸收。本发明出乎意料地确定了，用于将生物制剂向幼儿肺部施用的剂量方案主要是由儿童的生理学以及其成熟中器官的差异来推动的。更特别地，本发明人确定了，本发明中的剂量确定主要是由药物在发育中儿童的肺部中肺部递送、分布和吸收与在成人的肺部中递送、分布和吸收相比的差异来指引的。因此，在rsv感染的儿童中推动全身以及局部pk的首要参数看起来是肺泡吸收腔中药物的量。基于本发明的建模方法，估计使用0.024mg/kg体重的沉积剂量，在肺泡腔中达到目标浓度(9µg/ml)，在该浓度下获得在临床上有意义的rsv活性降低。由于肺泡表面积(以及相应的肺泡体积)，随着体重而按比例变化，对于经体重归一化的剂量，肺泡浓度实际上并不依赖于年龄。基于上文设计的模型和观测，本发明提供了用于将中和rsv的免疫球蛋白单可变结构域向儿科对象肺部施用的剂量方案，该剂量方案在观测到病毒活性的下呼吸道产生局部药物浓度。因此，本发明涉及用于治疗幼儿中的rsv感染的方法，所述方法包括向患有rsv感染的儿童施用多肽，所述多肽以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白，所述多肽以90ng/ml或更低的ic90中和hrsv，并且所述多肽包含三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域、基本由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成，其中所述多肽以每天0.020-0.040mg/kg、优选每天0.020-0.035mg/kg、如例如每天0.024mg/kg的沉积剂量，通过吸入施用于儿童。在此方法的某些方面，可以通过免疫测定测量kd。或者或另外，在此方法的某些方面，可以在微量中和测定中测量ic90。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染的多肽，其以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白，其以90ng/ml或更低的ic90中和hrsv，并且其包含三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域、基本由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成，其中所述多肽以每天0.020-0.040mg/kg、优选每天0.020-0.035mg/kg、如例如每天0.024mg/kg的沉积剂量，通过吸入施用于患有rsv感染的儿童。在此多肽的某些方面，可以通过免疫测定测量kd。或者或另外，在此多肽的某些方面，可以在微量中和测定中测量ic90。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染的方法，所述方法包括向患有rsv感染的儿童施用多肽，所述多肽以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白，所述多肽以90ng/ml或更低的ic90中和hrsv，并且所述多肽包含三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域、基本由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成，其中所述多肽以每天0.20-0.40mg/kg、优选每天0.20-0.35mg/kg、如例如每天0.24mg/kg的吸入剂量，通过吸入施用于儿童。在此方法的某些方面，可以通过免疫测定测量kd。或者或另外，在此方法的某些方面，可以在微量中和测定中测量ic90。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染的多肽，其以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白，其以90ng/ml或更低的ic90中和hrsv，并且其包含三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域、基本由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成，其中所述多肽以每天0.20-0.40mg/kg、优选每天0.20-0.35mg/kg、如例如每天0.24mg/kg的吸入剂量，通过吸入施用于患有rsv感染的儿童。在此多肽的某些方面，可以通过免疫测定测量kd。或者或另外，在此多肽的某些方面，可以在微量中和测定中测量ic90。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染的方法，所述方法包括向患有rsv感染的儿童施用多肽，所述多肽以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白，所述多肽以90ng/ml或更低的ic90中和hrsv，并且所述多肽包含三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域、基本由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成，其中所述多肽以每天1.00-2.00mg/kg、优选每天1.00-1.75mg/kg、如例如每天1.20mg/kg的标称剂量，通过吸入施用于儿童。在此方法的某些方面，可以通过免疫测定测定kd。或者或另外，在此方法的某些方面，可以在微量中和测定中测量ic90。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染的多肽，其以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白，其以90ng/ml或更低的ic90中和hrsv，并且其包含三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域、基本由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成，其中所述多肽以每天1.00-2.00mg/kg、优选每天1.00-1.75mg/kg、如例如每天1.20mg/kg的标称剂量，通过吸入施用于患有rsv感染的儿童。在此多肽的某些方面，可以通过免疫测定测量kd。或者或另外，在此多肽的某些方面，可以在微量中和测定中测量ic90。rsv感染包括上呼吸道的rsv感染，下呼吸道的rsv感染，包括细支气管炎和支气管肺炎，以及与rsv感染相关的疾病和/或病症，如与hrsv相关的呼吸系统病、上呼吸道感染、下呼吸道感染、细支气管炎(肺中小气道的炎症)、肺炎、呼吸困难、咳嗽、(反复发作的)哮鸣和(加重的)哮喘或copd(慢性阻塞性肺病)。在一方面，所述rsv感染是下呼吸道rsv感染。因此，本发明涉及用于治疗幼儿中的下呼吸道rsv感染的方法，所述方法包括向患有下呼吸道rsv感染的儿童施用多肽，所述多肽以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白，所述多肽以90ng/ml或更低的ic90中和hrsv，并且所述多肽包含三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域、基本由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成，其中所述多肽以每天0.020-0.040mg/kg、优选每天0.020-0.035mg/kg、如例如每天0.024mg/kg的沉积剂量；以每天0.20-0.40mg/kg、优选每天0.20-0.35mg/kg、如例如每天0.24mg/kg的吸入剂量；以每天1.00-2.00mg/kg、优选每天1.00-1.75mg/kg、如例如每天1.20mg/kg的标称剂量，通过吸入施用于儿童。在此方法的某些方面，可以通过免疫测定测量kd。或者或另外，在此方法的某些方面，可以在微量中和测定中测量ic90。本发明还涉及用于治疗幼儿中的下呼吸道rsv感染的多肽，其以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白，其以90ng/ml或更低的ic90中和hrsv，并且其包含三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域、基本由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成，其中所述多肽以每天0.020-0.040mg/kg、优选每天0.020-0.035mg/kg、如例如每天0.024mg/kg的沉积剂量；以每天0.20-0.40mg/kg、优选每天0.20-0.35mg/kg、如例如每天0.24mg/kg的吸入剂量；以每天1.00-2.00mg/kg、优选每天1.00-1.75mg/kg、如例如每天1.20mg/kg的标称剂量，通过吸入施用于患有下呼吸道rsv感染的儿童。在此多肽的某些方面，可以通过免疫测定测量kd。或者或另外，在此多肽的某些方面，可以在微量中和测定中测量ic90。在一方面，所述幼儿的年龄小于24个月。在一方面，所述幼儿的年龄小于36个月。在一方面，所述幼儿年龄为1个月至小于24个月。在一方面，所述幼儿年龄为1个月至小于36个月。在一方面，所述幼儿年龄为5个月至小于24个月。在一方面，所述幼儿年龄为5个月至小于36个月。在一方面，所述幼儿是婴儿。在一方面，所述幼儿是幼童。在一方面，所述幼儿经诊断患有下呼吸道rsv感染但在其它方面是健康的。在一方面，所述幼儿由于下呼吸道rsv感染而住院。所述多肽(也称作“本发明的多肽”)包含三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域、基本上由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或者由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成。在一方面，本发明的多肽以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白。在一方面，本发明的多肽以90ng/ml或更低的ic90中和hrsv。在优选的方面，本发明的多肽以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白并且以90ng/ml或更低的ic90中和hrsv。在此多肽的某些方面，可以通过免疫测定测量kd。或者或另外，在此多肽的某些方面，可以在微量中和测定中测量ic90。本发明优选的多肽涵盖至少一个(优选两个，最优选三个)抗-rsv免疫球蛋白单可变结构域，其包含具有seqidno:46的氨基酸序列的cdr1、具有seqidno:49-50之一的氨基酸序列的cdr2、和具有seqidno:61的氨基酸序列的cdr3。在一方面，本发明优选的多肽涵盖至少一个(优选两个，最优选三个)抗-rsv免疫球蛋白单可变结构域，其选自seqidno:1-34的氨基酸序列之一。在一方面，本发明的多肽选自seqidno:65-85的氨基酸序列之一、优选seqidno:71。本发明的多肽可以作为单一疗法施用或者与另一种治疗剂组合施用。在一方面，本发明的多肽作为单一疗法进行施用。在一方面，本发明的多肽作为组合疗法进行施用。因此，本发明还提供了用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的方法，所述方法包括通过吸入向患有rsv感染的儿童同时、分别或依次施用抗-rsv多肽和支气管扩张剂(bronchodilator)，所述多肽以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白，其以90ng/ml或更低的ic90中和rsv，并且其包含三个抗-rsv免疫球蛋白单可变结构域、基本由三个抗-rsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或由三个抗-rsv免疫球蛋白单可变结构域组成，其中将所述多肽以每天0.020-0.040mg/kg、每天0.020-0.035mg/kg、或每天0.024mg/kg的沉积剂量，通过吸入施用于儿童。在此方法的某些方面，可以通过免疫测定测量kd。或者或另外，在此方法的某些方面，可以在微量中和测定中测量ic90。因此，在另一方面，本发明还提供了用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的方法，所述方法包括通过吸入向患有rsv感染的儿童同时、分别或依次施用抗-rsv多肽和支气管扩张剂，所述多肽以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白，所述多肽以90ng/ml或更低的ic90中和rsv，并且所述多肽包含三个抗-rsv免疫球蛋白单可变结构域、基本由三个抗-rsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或由三个抗-rsv免疫球蛋白单可变结构域组成，其中将所述多肽以每天0.20-0.40mg/kg、每天0.20-0.35mg/kg、或每天0.24mg/kg的吸入剂量，通过吸入施用于儿童。在此方法的某些方面，可以通过免疫测定测量kd。或者或另外，在此方法的某些方面，可以在微量中和测定中测量ic90。因此，在另一方面，本发明还提供了用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的方法，所述方法包括通过吸入向患有下呼吸道rsv感染的儿童同时、分别或依次施用抗-rsv多肽和支气管扩张剂，所述多肽以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白，所述多肽以90ng/ml或更低的ic90中和rsv，并且所述多肽包含三个抗-rsv免疫球蛋白单可变结构域、基本由三个抗-rsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或由三个抗-rsv免疫球蛋白单可变结构域组成，其中将所述多肽以每天1.00-2.00mg/kg、每天1.00-1.75mg/kg、或每天1.20mg/kg的标称剂量，通过吸入施用于儿童。在此方法的某些方面，可以通过免疫测定测量kd。或者或另外，在此方法的某些方面，可以在微量中和测定中测量ic90。在一方面，连续2至5天或更多天，每天施用所述多肽，如连续2天、连续3天、连续4天、连续5天，或更多天，每天施用，如例如连续3天。支气管扩张剂优选属于β2-模拟物类别或者属于抗胆碱剂类别。在一方面，支气管扩张剂是长效的β2-模拟物，如例如福莫特罗或其溶剂化物、沙美特罗或其盐、或者其混合物。在另一方面，支气管扩张剂是短效的β2-模拟物，如例如沙丁胺醇、特布他林、吡布特罗、非诺特罗、妥布特罗、左旋沙丁胺醇、或者其混合物。在另一方面，支气管扩张剂是抗胆碱剂，如例如噻托溴铵、氧托铵、异丙托溴铵或者其混合物。本发明还涉及雾化器，其包含0.150-0.400ml的以50mg/ml的浓度包含本发明多肽的组合物。在一方面，所述雾化器是振动筛式雾化器。在一方面，所述雾化器具有固定的空气或氧气流。本发明还涉及用于本发明方法的此类雾化器，其包含0.150-0.400ml的以50mg/ml的浓度包含本发明多肽的组合物。本发明示例性的雾化器包含0.150-0.400ml的50mg/ml组合物、基本由0.150-0.400ml的50mg/ml组合物组成、或由0.150-0.400ml的50mg/ml组合物组成，所述组合物包含多肽、基本由多肽组成、或由多肽组成，所述多肽以5x10-10m或更低的kd结合hrsv的f-蛋白，所述多肽以90ng/ml或更低的ic90中和hrsv，并且所述多肽包含三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域、基本由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成、或由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成。在此雾化器的某些实施方案中，可以通过免疫测定测量kd。或者或另外，在此雾化器的某些实施方案中，可以在微量中和测定中测量ic90。附图简述图1是描述本发明中使用的建模策略概览的示意图。标称剂量：填充至雾化器中的seqidno:71的量；递送剂量：在由振动筛式雾化器生成的，并且在面罩中可用于吸入的气溶胶颗粒中的seqidno:71的量；吸入剂量：上呼吸道处可用的气溶胶颗粒中seqidno:71的量(也即，吸入的剂量)；沉积剂量：下呼吸道中沉积的气溶胶颗粒中seqidno:71的量；全身剂量：经下呼吸道的肺泡衬液吸收的并释放进入循环的seqidno:71的量。图2是本发明用于肺部施用的模型中肺器官的图示。模型结构与标准pk-sim®模型相比的扩展由代表肺泡衬液的粗体框标注(alf室)。图3是描述pbpk模型构建和拓展步骤的示意图。ip：肺内；iv：静脉内；物化数据：seqidno:71的表征。图4是描述如使用mppd工具计算的，对于静息鼻吸入，沉积在呼吸道不同区域的吸入剂量的分数的图。年龄特异性肺模型：3个月、21个月、23个月和28个月。图5是描述如使用mppd工具计算的，与来自正常呼吸的结果相比，对于不同的呼吸困难境况，依赖于年龄的沉积在肺泡腔中的吸入剂量的分数的图。图6a-6b是一对图，其提供了实验的与模拟的seqidno:71的血浆浓度-时间谱的比较，其中(a)在单一剂量iv应用于大鼠(剂量5mg/kg)之后。符号：实验数据，线：模拟；(b)在多剂量iv应用于狗(3mg/kg、10mg/kg、和30mg/kg的增量剂量)之后。符号：实验数据，线：模拟。图7是系列图，其提供在肺部应用于大鼠之后(表b-1：研究1)，实验的与模拟的seqidno:71的血浆浓度-时间谱的比较。符号：实验数据，线：模拟。图8是系列图，其提供在肺部应用于大鼠后seqidno:71在balf中的实验量(表b-1：研究1)与seqidno:71在肺泡吸收室中模拟量的比较。符号：实验数据(根据肺叶的重量，将来自右肺的实验balf数据拓展至整个肺部)，线：模拟。图9是系列图，其提供了在肺部应用于大鼠后第1天和第14天实验的与模拟的seqidno:71的血浆浓度-时间谱的比较(表b-1：研究4)。符号：实验数据，线：模拟。图10是系列图，其提供了在肺部应用于大鼠后seqidno:71在balf中的实验量(表b-1：研究4)与在第1和14天肺泡吸收室中的模拟量的比较。符号：实验数据，线：模拟。图11a-11c是系列图，其提供了在以(a)70mg；(b)140mg；(c)210mg肺部应用seqidno:71之后(表b-2：研究5)，单一个体的实验的与模拟的血浆浓度-时间谱的比较。符号：实验数据，线：模拟。图12是提供了在iv施用后个体的实验seqidno:71的血浆浓度-时间谱(表b-1：研究6)与从大鼠拓展的人类模型的模拟结果的比较的图。灰线标注了lloq。图13是提供了在iv施用后实验个体排出至尿液中的剂量的累积分数(表b-1：研究6)与从大鼠拓展至人类模型的模拟结果的比较的图。图14a-14b是一对图，其提供了来自第二个临床研究，在单一剂量吸入(a)和多剂量吸入(b)后，个体实验的seqidno:71血浆(圆)和alf(方格)浓度-时间谱(表b-1：研究6)与从大鼠拓展的人类模型的模拟结果(线)的比较。图15是提供了在iv施用后个体实验的seqidno:71的血浆浓度-时间谱(表b-1：研究6)与优化的人类iv模型(流体动力学半径：2.46nm；肾清除率：5%的gfr和另外的血浆清除过程)的模拟结果的比较的图。灰线标注了lloq。图16是提供了在iv施用后实验个体排出至尿液中的剂量的累积分数(表b-1：研究6)与优化的人类iv模型(流体动力学半径：2.46nm；肾清除率：5%的gfr和另外的血浆清除过程)的模拟结果的比较。图17a-b是一对图，其提供了来自第二个临床研究，在单一剂量吸入(a)和多剂量吸入(b)后，个体实验的seqidno:71血浆(圆)和alf(方格)浓度-时间谱(表b-1：研究6)与优化的人类吸收模型(流体动力学半径：2.46nm，肾清除率：5%的gfr，另外的血浆清除过程，以及肺泡厚度的可选值：0.2µm)的模拟结果(线)的比较。图18a-18b是一对图，其提供了个体实验的seqidno:71血浆浓度-时间谱(a)和累积尿液排出(b)与iv应用后群体模拟的结果(表b-1：研究6)的比较。阴影区：第5-95百分位的群体模拟，实线：群体模拟的中值，圆：个体实验数据。图19a-19b是一对图，其提供了对于单一剂量肺部应用，个体实验的seqidno:71血浆(a)和alf(b)浓度-时间谱与对第二个临床研究的群体模拟结果(表b-1：研究6)的比较。阴影区：第5-95百分位的群体模拟，实线：群体模拟的中值，空心圆：个体实验数据。实心的符号(血浆谱)：实验数据的中值，第5和第95百分位(仅在所有个体(n=23)的数据都可得时，才显示)。图20a-20b是一对图，其提供了对于多剂量肺部应用，个体实验的seqidno:71血浆(a)和alf(b)浓度-时间谱与对第二个临床研究群体的模拟结果(表b-1：研究6)的比较。阴影区：第5-95百分位的群体模拟，实线：群体模拟的中值，空心圆：个体实验数据。实心的符号(血浆谱)：实验数据的中值，第5和第95百分位(仅在所有个体(n=15)的数据都可得时，才显示)。图21a-21b是一对图，其提供了个体实验的seqidno:71的血浆浓度-时间谱与对第一个人类研究的单一剂量吸入(a)和多剂量吸入(b)的群体模拟结果(表b-1：研究5)的比较。阴影区：第5-95百分位的群体模拟，实线：群体模拟的中值，空心圆：个体实验数据，实心的符号：实验数据的中值，第5和第95百分位(仅在所有个体的数据都可得时才显示，对于单一剂量n=18而对于多剂量n=12)。图22a-22b是一对图，其提供了对于0-1周岁的儿童组的alf浓度-时间曲线。灰线标注了9µg/ml的目标浓度。a：线性浓度标度；b：对数浓度标度。图23a-23b是一对图，其提供了对于汇集的群体(5-24个月大的儿童)的血浆浓度-时间曲线。施用方案：0-24-48h。a：线性浓度标度；b：对数浓度标度。图24a-24b是一对图，其提供了对于汇集的群体(5-24个月大的儿童)的alf浓度-时间曲线。施用方案：0-24-48h。a：线性浓度标度；b：对数浓度标度。图25a-25b是一对图，其提供了对于汇集的群体(5-24个月大的儿童)的血浆浓度-时间曲线。施用方案：0-24h。a：线性浓度标度；b：对数浓度标度。图26a-26b是一对图，其提供了对于汇集的群体(5-24个月大的儿童)的alf浓度-时间曲线。施用方案：0-24h。a：线性浓度标度；b：对数浓度标度。图27a-27b是一对图，其提供了对于汇集的群体(5-24个月大的儿童)血浆浓度-时间曲线。施用方案：单一剂量。a：线性浓度标度；a：对数浓度标度。图28a-28b是一对图，其提供了对于汇集的群体(5-24个月大的儿童)的alf浓度-时间曲线。施用方案：单一剂量。a：线性浓度标度；b：对数浓度标度。图29是描述在hrsv-感染的新生羔羊肺中检测病毒抗原的图。在感染后第6天，从右上叶、左上叶、左中叶和左下叶，对每叶取样2个肺片。通过免疫组织化学检测病毒抗原并且对每个视野的受感染的支气管/细支气管或肺泡的数目进行计数。结果表示为组合的三个研究中所有动物的所有经评估的肺叶的均值±sem。图30a-30b是对实施例12中描述的分析的结果进行说明的一对图。a.病毒病变的裸眼肺检查：rtcr：右上叶；rtmid：右中叶；rtcd：右下叶；acc：副叶；ltcr：左上叶；ltmid：左中叶；ltcd：左下叶。结果表示为组合的三个研究中所有动物每剂量水平和每肺叶的均值±sem。b.hrsv-感染的新生羔羊中的组织学肺实变得分。对2期羊的肺进行病变评分。实变得分是典型hrsv病变的整体得分。其意味着将若干特征组合成一个整体得分。结果表示为组合的三个研究中所有动物的均值±sem。图31是显示临床综合评分的图。临床综合评分是基于表b-4中所示标准来确定的。结果表示为组合的三个研究中所有动物的每剂量水平的均值±sem。图32是描述在hrsv-感染的新生羔羊中，连续3天或5天，每天通过吸入施用之后，上皮细胞肺衬液中seqidno:71浓度的图。elf中seqidno:71浓度衍生自在balf(在尸检后取样)中测量的浓度(在基于urea校正法而对稀释归一化之后(值经rbc校正))。balf是在最后剂量之后24小时取样的。对于组合的所有3个研究，将结果显示为均值±sd。阴影线代表目标浓度。图33显示了根据本发明的吸入装置的具体实施方案的横截面侧视图。图34显示了根据本发明的吸入装置的具体实施方案的透视图。图35显示了根据本发明的吸入装置的具体实施方案的俯视图。图36显示了根据本发明的吸入装置的具体实施方案的侧视图。图37显示了根据本发明的吸入装置的具体实施方案的仰视图。图38显示了根据本发明的吸入装置的具体实施方案的前视图。图39显示了根据本发明的吸入装置的具体实施方案的后视图。附图中使用的数字标记的列表100吸入装置101气溶胶发生器102振动筛103储库(reservoir)104气体入口开口105面罩106壳体107气溶胶入口开口108患者接触面109阀(单向呼气或双向吸气/呼气阀)110流动通道111侧向开口112开关113管接头114盖115钥匙锁116usb-端口117孔118基部单元119混合通道单元200saint模型201saint模型的面部/喉部分202saint模型的鼻部分300玻璃纤维过滤组件。发明详述定义除非另有明示或定义，所使用的所有术语都具有其在本领域中的通常含义，其将是技术人员清楚的。可参考例如标准教科书，如sambrook等人"molecularcloning：alaboratorymanual"(2nd.ed.),vols.1-3,coldspringharborlaboratorypress(1989)；f.ausubel等人eds.,"currentprotocolsinmolecularbiology",greenpublishingandwileyinterscience,newyork(1987)；lewin“genesii”，johnwiley&sons,newyork，n.y.,(1985)；old等人“principlesofgenemanipulation:anintroductiontogeneticengineering”,第二版,universityofcaliforniapress，berkeley,ca(1981)；roitt等人“immunology”(6thed.),mosby/elsevier,edinburgh(2001)；roitt等人roitt'sessentialimmunology,10thed.blackwellpublishing,uk(2001)；andjaneway等人“immunobiology”(6thed.),garlandsciencepublishing/churchilllivingstone,newyork(2005)，以及本文引用的一般
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：。除非另有明示，可以进行所有没有具体描述细节的方法、步骤、技术和操作，并且已经按照本身已知的方式来进行，如技术人员清楚的那样。同样可以参考例如标准手册和本文提到的一般技术背景以及其中引用的另外的参考文件；以及还有例如以下综述：presta2006(adv.drugdeliv.rev.58(5-6):640-56)，levin和weiss2006(mol.biosyst.2(1):49-57)，irving等人2001(j.immunol.methods248(1-2):31-45)，schmitz等人2000(placenta21suppl.a:s106-12)，gonzales等人2005(tumourbiol.26(1):31-43)，其描述了蛋白工程的技术，如亲和性成熟和其它用于改善蛋白如免疫球蛋白的特异性和其它期望性质的技术。核酸序列或氨基酸序列被认为是“(处于)基本上分离的(形式)”-例如，与其所得自的反应介质或培养基相比-当其已经与至少一种在所述来源或介质中通常与其关联的其它成分分开时，如另一种核酸，另一种蛋白/多肽，另一种生物成分或大分子或者至少一种污染物、杂质或微量成分。特别是，当其已经被纯化至少2倍、特别是至少10倍、更特别是至少100倍、以及高达1000倍或更多时，则认为核酸序列或氨基酸序列是“基本上分离的”。“处于基本上分离的形式”的核酸序列或氨基酸序列优选是基本上同质的，如使用适宜的技术确定的，如适宜的层析技术，如聚丙烯酰胺凝胶电泳。当核苷酸序或氨基酸序列分别被描述为“包含”另一核苷酸序列或氨基酸序列时，或者被描述为“基本上由另一核苷酸序列或氨基酸序列组成”时，这意味着后者的核苷酸序或氨基酸序列已经分别掺入至首先提到的核苷酸序列或氨基酸序列内，但是更通常的是这一般意味着首先提到的核苷酸序列或氨基酸序列分别在其序列中包含核苷酸或氨基酸残基的区段，所述区段分别具有与后者的序列相同的核苷酸序列或氨基酸序列，而不论首先提到的序列实际上是如何产生或获得的(其例如可以是通过任何适宜的方法)。通过非限制性实例的方式，当本发明的多肽被描述为包含免疫球蛋白单可变结构域，这可以意味着所述免疫球蛋白单可变结构域序列已经被掺入至本发明多肽的序列内，但是更通常的是这一般意味着本发明的多肽在其序列中含有所述免疫球蛋白单可变结构域的序列，而不论所述本发明的多肽是如何产生或获得的。另外，当核酸或核苷酸序列被描述为包含另一核苷酸序列时，首先提到的核酸或核苷酸序列优选为这样：当其表达为表达产物(例如多肽)时，由后者的核苷酸序列编码的氨基酸序列形成所述表达产物的一部分(换句话说，后者的核苷酸序列与首选提到的较大核酸或核苷酸序列处在同一阅读框中)。“基本上由……组成("essentiallyconsist(s)of"或"consist(s)essentiallyof")”是指本发明方法中所用的免疫球蛋白单可变结构域与本发明的多肽完全相同，或者对应于本发明的多肽，其具有有限数目的氨基酸，如1-20个氨基酸残基、例如1-10个氨基酸残基以及优选1-6个氨基酸残基、如1、2、3、4、5或6个氨基酸残基，添加在免疫球蛋白单可变结构域的氨基末端、添加在羧基末端、或添加在氨基末端和羧基末端二者。另外，如本文所用的术语“序列”(例如在术语如“免疫球蛋白序列”、“可变结构域序列”、“免疫球蛋白单可变结构域序列”，“vhh序列”或“蛋白序列”中)，应当一般性地理解为包括相关的氨基酸序列以及编码其的核酸序列或核苷酸序列，除非上下文要求更加局限的理解。将能够(特异性地)结合具体的抗原决定簇、表位、抗原或蛋白(或至少其一部分、片段或表位)，或者对其具有亲和性和/或对其具有特异性的氨基酸序列(如免疫球蛋白单可变结构域、抗体、本发明的多肽、或者一般性地抗原结合蛋白或多肽或者其片段)，称作是“抗”或“针对”所述抗原决定簇、表位、抗原或蛋白。所述亲和性表示分子相互作用的强度或稳定性。亲和性通常以kd或解离常数给出，其具有摩尔/升(或m)的单位。亲和性也可以表示为缔合常数ka，其等于1/kd并且具有(摩尔/升)-1(或m-1)的单位。在本说明书中，两种分子(如免疫球蛋白单可变结构域或本发明的多肽与hrsv的f-蛋白)之间相互作用的稳定性将主要以它们相互作用的kd值的方式来表示；技术人员清楚，考虑到ka=1/kd的关系，通过其kd值来明确分子相互作用的强度也可以用于计算相应的ka值。所述kd-值也从特动力学的意义上表征了分子相互作用的强度，因为其通过众所周知的关系式dg=rt.ln(kd)(等价于dg=-rt.ln(ka))而与结合的自由能(dg)相关，其中r等于气体常数，t等于绝对温度以及ln表示自然对数。被认为有意义(例如特异性的)的生物学相互作用的kd通常在10-10m(0.1nm)至10-5m(10000nm)的范围。相互作用越强，其kd越低。所述kd也可以表示为复合物的解离速率常数(表示为koff)与其缔合速率(表示为kon)的比例(也即kd=koff/kon和ka=kon/koff)。解离速率koff具有单位s-1(其中s是秒的si单位标注)。缔合速率kon具有单位m-1s-1。缔合速率可在102m-1s-1至大约107m-1s-1之间变化，接近生物分子相互作用的受扩散限制的缔合速率常数。解离速率与给定分子相互作用的半衰期相关，其关系为t1/2=ln(2)/koff。解离速率可以在10-6s-1(具有数天的t1/2的接近不可逆的复合物)至1s-1(t1/2=0.69s)之间变化。抗原结合蛋白对抗原或抗原决定簇的特异性结合可以通过本身已知的任何适宜方式来确定，包括例如，scatchard分析和/或竞争性结合测定，如放射性免疫测定(ria)，酶免疫测定(eia)和夹心竞争性测定，以及本领域中本身已知的其不同的变式；以及本文提到的其它技术。两种分子间分子相互作用的亲和性可以经本身已知的不同技术来测量，如众所周知的表面等离子共振(spr)生物传感器技术(参见例如ober等人2001，intern.immunology13：1551-1559)，其中一种分子固定在生物传感器芯片上而另一种分子在流动条件下经过所述固定的分子，产生kon、koff的测量值并因此产生kd(或ka)值。这可以例如使用熟知的biacore仪器(pharmaciabiosensorab，uppsala，sweden)来进行。动力学排斥测定(kinexa)(drake等人2004，analyticalbiochemistry328：35-43)测量溶液中的结合活动而无需标记结合配偶体，并且是基于复合物解离的动态排斥。gyrolab™免疫测定系统提供了用于自动化的生物分析和快速样品周转的平台(fraley等人2013，bioanalysis5：1765-74)。技术人员也清楚，如果测量过程以某种方式影响所指分子的内在结合亲和性(例如通过与一种分子的生物传感器上的涂层相关的人工假象)，所测量的kd可对应于表观kd。另外，如果一种分子含有超过一个对另一种分子的识别位点，可以测量表观kd。在此情形中，所测量的亲和性可以受到两种分子相互作用的亲合力的影响。可用于评估亲和性的另一方法是friguet等人1985(j.immunol.methods77：305-19)的2-步elisa(酶联免疫吸附测定)方法。此方法建立了溶液相结合平衡测量，并避免了与分子之一吸附至支持物如塑料上相关的可能的人工假象。然而，对kd的准确测量可能是非常劳动力密集的，并且因此经常确定表观kd值来评估两种分子的结合强度。应当注意的是，只要所有的测量都是以一致的方式进行的(例如保持测定条件不变)，表观kd测量值就可以用作真实kd的近似，并且因而在本文中的kd和表观kd应当以同样的重要性或相关性来对待。术语“病毒的感染性”，如本文所用是指当暴露于所述病毒时，实际被所述病毒感染的活体对象的比例。“病毒的中和”，如本文所用是指通过将中和性化合物结合至病毒体来对病毒的感染性(如本文所定义的)进行调节和/或降低和/或防止和/或抑制，如使用适宜的体外、细胞或体内测定(如进一步提到的那些)所测量的。术语“剂量”是指施用于对象的本发明多肽的量。“标称剂量”是指填充至雾化器中的本发明多肽的量。标称剂量可以容易地基于填充体积(填充至雾化器中的治疗组合物的体积)和治疗组合物中本发明多肽的浓度来确定。“递送剂量”是指由振动筛式雾化器所生成的并且在面罩中可用于吸入的气溶胶颗粒中的本发明多肽的量。“吸入剂量”是指上呼吸道处可用的气溶胶颗粒中本发明多肽的量(也即，吸入的剂量)。吸入剂量可以作为百分比(%)从标称剂量计算，并且将取决于雾化器的特征。吸入剂量通常在填充剂量的10%至20%或更多之间变化。吸入剂量可以例如，使用幼儿上气道的气道模型来进行确定。此种模型为例如sophia解剖学婴儿鼻喉(saint)模型(janssens等人2001，j.aerosolmed.14:433-41)。所述saint模型是9个月大的儿童上气道的解剖学正确的铸型/再现，其使用光固化立体成型技术(stereolithographictechnique)构建并且用于研究在幼儿中的气溶胶沉积。可以对应用于本发明方法中的施用条件进行接近地模拟。例如用fox雾化器施用，显示出从填充至雾化器的总剂量中，预期有大约20%被吸入。“沉积剂量”是指沉积于下呼吸道的气溶胶颗粒中本发明多肽的量。沉积剂量可以从吸入剂量计算并且将取决于所吸入的颗粒的特征以及患有rsv感染的幼儿的呼吸模式。感染rsv的儿童中的呼吸模式描述于例如amirav等人2002(j.nucl.med.43：487-91)，amirav等人2012(arch.dis.child97：497-501)，chua等人1994(eur.respir.j.7：2185-91)，fok等人1996(pediatr.pulmonol.21：301-9)，wildhaber等人1999(j.pediatr.135：28-33)，totapally等人2002(crit.care6：160-5)，mundt等人2012(pediatr.2012：721295)中。沉积剂量应最好使用建模进行确定，将肺的形态学(年龄特异的)、颗粒性质(大小和密度)、以及呼吸模式(频率、容积)考虑在内。考虑了这些参数的模型例如是多路径粒子剂量测定(multi-pathparticledosimetry,mppd)。所述mppd工具是年龄特异的对称肺模型，由nih信息技术中心(nihcentreforinformationtechnology)(cit,us)以及国家公共健康与环境研究院(nationalinstituteofpublichealthandtheenvironment)(荷兰rivm)所开发，并且可用于计算气溶胶在呼吸道中的沉积。其使得可以对于不同的儿科年龄组、以及对于不同大小的颗粒，来描述头部、气管支气管和肺泡区中的平均区域沉积、以及每个气道等级(airwaygeneration)的平均分布。总的来说，区域沉积取决于肺部的形态学(其是年龄特异的)、颗粒性质(大小和密度分布)和呼吸模式(频率、容积)。对于感染rsv的儿童的静息鼻吸入以及2.63微米的颗粒mad(质量中值直径)，沉积于肺泡腔中的分数(fraction)计算为大约10%的吸入剂量。“全身剂量”是指经下呼吸道的肺泡衬液吸收并释放至循环中的本发明多肽的量。所述全身剂量可以容易地通过测量体循环中本发明多肽的浓度来确定。如本发明中所用的“体循环”是心血管系统的部分，其将携氧血液从心脏输送至身体，并将脱氧血液带回心脏。术语“给药”是指施用本发明的多肽。除非有明确的不同指示，在本发明的背景下，术语“给药”是指本发明多肽的肺部施用。儿童一般是介于出生和青春期之间，或处于儿童发育期的人类对象。在本发明的背景下，“幼儿”是指小于24个月或小于36个月(3岁)的儿童。“婴儿(infant)”是很小的人类后代。通常认为该术语与婴孩(baby)同义。术语“婴儿”通常适用于年龄介于1个月至12个月之间的幼儿。当人类儿童学习走路时，可以换为使用术语“幼童”。“幼童”是年龄介于1岁至3岁之间的儿童。在本发明的背景下，“幼童”是年龄介于1岁至小于24个月之间，或者年龄介于1岁至小于36个月(3岁)的儿童。“儿科”是处理婴儿和儿童的医疗护理的医学分科。“呼吸道”对于本发明的目的而言等同于“呼吸系统”、“气道组织”或“气道”。所述呼吸系统包含2个不同的区域：传导区，以及气道和血管腔隙位于其中的呼吸区(参见例如“pulmonarydrugdelivery”，由karolinebechtold-peters和henrikluessen编辑，2007，isbn978-3-87193-322-6，16-28页)。传导区由鼻、咽部、喉部、气管、支气管、和细支气管组成。这些结构形成了气体进出肺部的连续通道。所述呼吸区见于肺内深处，并且由呼吸性细支气管、肺泡管、和肺泡组成。这些薄壁结构允许吸入的氧气扩散至肺毛细血管来替换二氧化碳。在解剖学上，同样的结构常常分为上呼吸道和下呼吸道。上呼吸道结构见于头部和颈部，并且由鼻、咽部、和喉部组成。下呼吸道结构位于胸部或胸腔，并且包括气管、支气管、和肺(即，细支气管、肺泡管、和肺泡)。因此，下呼吸道是指从气管到肺部的气道部分。“肺泡(alveolus，复数："alveoli")”是具有空腔形式的解剖学结构。位于肺实质中的肺泡是呼吸树的末端，其从肺泡囊或肺泡管(二者也都是与血液交换气体的部位)凸出。肺泡膜是气体交换界面。富含二氧化碳的血液从身体的其他部分泵至肺泡血管中，其在此通过扩散释放其二氧化碳并吸收氧。所述“肺泡衬液(alf)”形成覆盖肺泡粘膜、小气道、和大气道的薄流体层。其构成了肺部和外部世界的第一道屏障。在本发明的背景下，此术语是指较深层的肺部。支气管肺泡灌洗(bal)是医疗过程，其中将支气管镜穿过嘴或鼻进入肺部并将液体喷入肺部的小部分，并且随后收集用于检验。bal是对肺泡衬液(alf)的成分进行取样的最常见方式。如本发明中所用的“通过吸入施用”、“肺部施用”、“通过吸入递送”、和“肺部递送”是指将本发明的多肽施用至呼吸道。在本发明中，在这种递送方法中，本发明的多肽存在于(用雾化器)将本发明的多肽雾化而获得的气溶胶中。“吸入装置”是用于经肺部将药物递送至体内的医疗装置。如本文所用的“气溶胶”是指分散在气体中细颗粒形式的液体的悬浮液(也即含有微小颗粒的细雾或喷雾)。如本文所用，术语“颗粒”是指液体，例如，小滴。用于将本发明的多肽递送至肺部的药物气溶胶可以经嘴和/或鼻吸入。在肺部递送中，认为生成小于约5或6微米的颗粒对于实现细颗粒级分(fpf)的沉积(也即在呼吸性细支气管和肺泡区域中)而言是必须的(o'callaghan和barry，1997，thorax52：s31–s44)。气溶胶中的颗粒大小可以表示为体积中值直径(vmd)。所述“体积中值直径”定义为气溶胶的几何颗粒直径，其中50%的气溶胶体积大于此值，并且50%小于此值。“质量中值空气动力学直径(mmad)”定义为几何平均空气动力学直径，其中50重量%的颗粒小于此值，并且50%大于此值。当气溶胶颗粒的密度为1g/cm3时，vmd和mmad是相等的。如本发明中所用的术语“雾化”是指通过雾化器(如本文所进一步定义的)将液体转化为薄雾或细喷雾。“气溶胶发生器”是能够从液体制剂生成气溶胶的装置或装置组件；例如用于吸入用途的药物组合物。作为同义词，可以使用术语“雾化器”或“雾化工具”。除非另有明确指出，“气体”是指适宜吸入的任何气体或气体混合物。“侧向的”或“侧向地”，是指离开装置或装置组件的中间、中心或中轴。如本文所用，术语“对象”和“患者”可互换使用。如本文所用，术语“对象(subject或subjects)”是指人类。如本文所用的短语“药物可接受的”是指由联邦或国家政府的监管机构批准的，或者在美国药典、欧洲药典或其它一般公认的药典中所列的用于动物的，以及更特别是用于人类的。就此而言，其应当与制剂的其它组分相容并且不在对象中引起不可接受的有害作用。在健全医疗监管范围内，其是指，适宜用于接触人类和动物组织而没有过量毒性、刺激性、变应反应、或者其它问题或并发症，与合理的益处/风险比相称的那些化合物、材料、组合物、和/或剂型。如本文所用，术语“药学活性量”是指足以降低一或多种疾病和/或病症的严重性和/或持续时间的治疗剂(例如本发明的多肽)的量。本发明的多肽本发明的多肽可以是非天然存在的。因而，本发明的多肽可以经过设计、制造、合成、和/或重组以产生非天然存在的序列。免疫球蛋白单可变结构域除非另有明示，术语“免疫球蛋白序列”-用于本文无论是指重链抗体还是指常规的4-链抗体-是用作概括性的术语以包括完整大小的抗体，其单个链，以及所有其部分、结构域或片段(分别包括但不限于抗原结合结构域，或片段如vhh结构域或vh/vl结构域)。另外，如本文所用的术语“序列”(例如在术语如“免疫球蛋白序列”，“抗体序列”，“可变结构域序列”，“vhh序列”或“蛋白序列”中)，应当一般性地理解为包括相关的氨基酸序列以及编码其的核酸或核苷酸序列，除非上下文要求更加局限的理解。术语“免疫球蛋白单可变结构域”与“单可变结构域”可互换使用，定义了其中抗原结合位点存在于单个免疫球蛋白结构域上并且由所述单个免疫球蛋白结构域形成的分子。这将免疫球蛋白单可变结构域与“常规的”免疫球蛋白或其片段(其中两个免疫球蛋白结构域，特别是两个可变结构域相互作用以形成抗原结合位点)区分开。通常，在常规免疫球蛋白中，重链可变结构域(vh)和轻链可变结构域(vl)相互作用以形成抗原结合位点。在此情形中，vh和vl二者的互补决定区(cdr)都促成抗原结合位点，也即总共6个cdr会参与抗原结合位点的形成。相反，免疫球蛋白单可变结构域的结合位点是由单个vh或vl结构域形成的。因而，免疫球蛋白单可变结构域的抗原结合位点是由不超过3个cdr形成的。术语“免疫球蛋白单可变结构域”和“单可变结构域”因而不包含常规免疫球蛋白或其片段，其需要至少两个可变结构域的相互作用来形成抗原结合位点。然而，这些术语却包含其中抗原结合位点由单可变结构域形成的常规免疫球蛋白的片段。一般来说，单可变结构域将是氨基酸序列，其基本上由4个框架区(分别是fr1至fr4)和3个互补决定区(分别是cdr1至cdr3)组成。此种单可变结构域和片段最优选是它们包含免疫球蛋白折叠(immunoglobulinfold)，或者能够在适宜条件下形成免疫球蛋白折叠。由此，所述单可变结构域可以例如包含轻链可变结构域序列(例如vl-序列)或其适宜的片段；或者重链可变结构域序列(例如vh-序列或vhh序列)或其适宜的片段；只要其能够形成单一抗原结合单元(也即基本上由单可变结构域组成的功能性抗原结合单元，从而单一抗原结合结构域不需要与另一可变结构域相互作用以形成功能性抗原结合单元，如在例如需要与另一可变结构域相互作用(例如通过vh/vl相互作用)来形成功能性抗原结合结构域的可变结构域(例如存在于常规抗体和scfv片段中)的情形)。在本发明的一个实施方案中，所述免疫球蛋白单可变结构域是轻链可变结构域序列(例如vl-序列)，或重链可变结构域序列(例如vh-序列)；更具体地，所述免疫球蛋白单可变结构域可以是衍生自常规四链抗体的重链可变结构域序列或者衍生自重链抗体的重链可变结构域序列。例如，所述单可变结构域或免疫球蛋白单可变结构域(或适宜用作免疫球蛋白单可变结构域的氨基酸)可以是(单一)结构域抗体(或适宜用作(单一)结构域抗体的氨基酸)，“dab”或dab(或适宜用作dab的氨基酸)或纳米抗体(nanobody)(如本文所定义的，且包括但不限于vhh)；其它单可变结构域，或者其任意一个的任何适宜的片段。对于(单一)结构域抗体的一般性描述，同样可以参考本文所引用的现有技术，以及还有ep0368684。对于术语“dab's”，可以参考例如ward等人1989(nature341：544-546)，holt等人2003(trendsbiotechnol.21：484-490)；以及例如wo04/068820、wo06/030220、wo06/003388、wo06/059108、wo07/049017、wo07/085815以及domantisltd.的其它公开的专利申请。还应注意，尽管因为并非来自哺乳动物来源而在本发明的背景下是次优选的，但是单可变结构域可以衍生自鲨鱼的某些物种(例如，所谓的“ignar结构域”，参见例如wo05/18629)。特别地，所述免疫球蛋白单可变结构域可以是nanobody®(如本文所定义的)或其适宜的片段[注：nanobody®、nanobodies®和nanoclone®是ablynxn.v.的注册商标]。对于纳米抗体的一般性描述，可以参考下文进一步的描述，以及参考本文引用的现有技术，如例如wo08/020079(16页)中的描述。对于vhh's和纳米抗体的进一步描述，可以参考muyldermans2001(reviewsinmolecularbiotechnology74：277-302)的综述文章，以及参考作为一般
背景技术：
提及的以下专利申请：vrijeuniversiteitbrussel的wo94/04678、wo95/04079和wo96/34103；unilever的wo94/25591、wo99/37681、wo00/40968、wo00/43507、wo00/65057、wo01/40310、wo01/44301、ep1134231和wo02/48193；vlaamsinstituutvoorbiotechnologie(vib)的wo97/49805、wo01/21817、wo03/035694、wo03/054016和wo03/055527；algonomicsn.v.和ablynxn.v.的wo03/050531；加拿大国家研究委员会(nationalresearchcouncilofcanada)的wo01/90190；instituteofantibodies的wo03/025020(=ep1433793)；以及ablynxn.v.的wo04/041867、wo04/041862、wo04/041865、wo04/041863、wo04/062551、wo05/044858、wo06/40153、wo06/079372、wo06/122786、wo06/122787和wo06/122825以及ablynxn.v.的其它的公开的专利申请。还参考这些申请中提到的其它现有技术，以及特别是国际申请wo06/040153的41-43页中提到的参考文献列表，该列表和参考文献通过引用并入本文。如这些参考文献中所描述的，纳米抗体(特别是vhh序列和部分人源化的纳米抗体)可特别由存在于一或多个框架序列中的一或多个“标志性残基”来表征。对于纳米抗体的进一步描述，包括纳米抗体的人源化和/或骆驼源化、以及其它修饰、部分或片段、衍生物或“纳米抗体融合体”、多价构建物(包括接头序列的一些非限制性的实例)和用于增加纳米抗体及其制品的半衰期的不同修饰可见于例如wo08/101985和wo08/142164中。因而，在本发明的含义中，术语“免疫球蛋白单可变结构域”或“单可变结构域”包含衍生自非人类来源(优选骆驼)的多肽，优选骆驼重链抗体。它们可以被人源化，如此前所述。另外，该术语包含衍生自非骆驼来源(例如小鼠或人类)的多肽，其已经被“骆驼源化”，如例如在davies和riechmann1994(febs339：285-290)，1995(biotechono.13：475-479)，1996(prot.eng.9：531-537)以及riechmann和muyldermans1999(j.immunol.methods231：25-38)中所述的。术语“免疫球蛋白单可变结构域”涵盖不同来源的免疫球蛋白序列，包括小鼠、大鼠、兔、驴、人类和骆驼免疫球蛋白序列。其也包括完全人类的、人源化的、或嵌合的免疫球蛋白序列。例如，其包含骆驼免疫球蛋白序列和人源化的骆驼免疫球蛋白序列，或骆驼源化的免疫球蛋白单可变结构域，例如骆驼源化的dabs，如ward等人1989中所述(参见例如wo94/04678以及davies和riechmann1994，1995和1996)以及骆驼源化的vh。此种免疫球蛋白单可变结构域同样可以任何适宜的方式以及从任何适宜的来源进行衍生，并且可例如是天然存在的vhh序列(也即来自适宜的骆驼物种)，或者是合成的或半合成的氨基酸序列，包括但不限于部分或完全“人源化的”vhh，“骆驼源化的”免疫球蛋白序列(以及特别是骆驼源化的vh)，以及纳米抗体和/或通过如亲和性成熟(例如，从合成的、随机的或天然存在的免疫球蛋白序列，如vhh序列开始)的技术获得的vhh，cdr嫁接，镶嵌(veneering)，将衍生自不同免疫球蛋白序列的片段组合，使用重叠引物的pcr组装，以及技术人员熟知的用于免疫球蛋白序列工程化的类似技术；或任何前述的任意适宜组合。免疫球蛋白单可变结构域中氨基酸残基的总数目可以是在110-120个的区间，优选112-115个，且最优选113个(然而，基于本文以及wo08/020079、wo06/040153和其中引用的免疫球蛋白单可变结构域相关的参考文献中给出的免疫球蛋白单可变结构域序列的实例，将会清楚氨基酸残基的准确数目也将取决于免疫球蛋白单可变结构域中存在的具体cdr's的长度)。免疫球蛋白单可变结构域的氨基酸序列和结构可以认为是(然而并不限于)包含四个框架区或“fr's”，其在现有技术和本文中分别称作“框架区1”或“fr1”；“框架区2”或“fr2”；“框架区3”或“fr3”；以及“框架区4”或“fr4”；所述框架区被三个互补决定区或“cdr's”所隔断，其在现有技术中分别称作“互补决定区1”或“cdr1”；“互补决定区2”或“cdr2”；以及“互补决定区3”或“cdr3”。如wo08/020079(通过引用并入本文)的58和59页的段落q)中进一步描述的，免疫球蛋白单可变结构域的氨基酸残基是根据kabat等人(“sequenceofproteinsofimmunologicalinterest”,uspublichealthservices,nihbethesda,md,publicationno.91)给出的vh结构域一般编号来进行编号的，如在riechmann和muyldermans2000(j.immunol.methods240：185-195；参见例如此出版物的图2)的文章中应用于来自骆驼的vhh结构域，并且相应地，免疫球蛋白单可变结构域的fr1包含位置1-30处的氨基酸残基，免疫球蛋白单可变结构域的cdr1包含位置31-35处的氨基酸残基，免疫球蛋白单可变结构域的fr2包含位置36-49处的氨基酸，免疫球蛋白单可变结构域的cdr2包含位置50-65处的氨基酸残基，免疫球蛋白单可变结构域的fr3包含位置66-94处的氨基酸残基，免疫球蛋白单可变结构域的cdr3包含位置95-102处的氨基酸残基，以及免疫球蛋白单可变结构域的fr4包含位置103-113处的氨基酸残基。在本发明的方法中，所述免疫球蛋白单可变结构域结合hrsv的f-蛋白并且因此也称作“抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域”或“本发明的抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域”。更具体地，所述抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域可以优选以这样的亲和性(经适宜测量的和/或表示为kd-值(实际的或表观的)、ka-值(实际的或表观的)、kon-速率和/或koff-速率)结合hrsv的f蛋白：-其以1000nm至1nm或更低、优选100nm至1nm或更低、更优选15nm至1nm或者甚至10nm至1nm或更低的解离常数(kd)结合hrsv的f蛋白；和/或-其以104m-1s-1至大约107m-1s-1之间、优选105m-1s-1至107m-1s-1之间、更优选大约106m-1s-1或更高的kon-速率结合hrsv的f蛋白；和/或-其以10-2s-1(t1/2=0.69s)至10-4s-1(提供具有数天的t1/2的接近不可逆的复合物)之间、优选10-3s-1至10-4s-1之间、或更低的koff速率结合hrsv的f蛋白。在一方面，所述免疫球蛋白单可变结构域能够中和hrsv。测定分子的中和能力的测定法包括例如anderson等人(1985，j.clin.microbiol.22：1050-1052；1988，j.virol.62：4232-4238)描述的微中和测定，或者此测定的变式，如例如wo2010/139808中描述的，或例如johnson等人(1997，j.inf.dis.176：1215-1224)描述的蚀斑减少测定，以及其变式。例如，在对hrsvlong的微中和测定中(如例如wo2010/139808中所述的；375页，实施例6)，抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域可具有100nm至1000nm之间、优选100nm至500nm之间、或更低的ic50值。优选的抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域的cdr1、cdr2和cdr3序列的组合显示在表a-1中。在优选的方面，所述抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域具有seqidno:46的cdr1、选自seqidno:49和50的cdr2、以及seqidno:61的cdr3。最优选地，cdr1是seqidno:46、cdr2是seqidno:49、以及cdr3是seqidno:61。表a-1还显示了cdr序列和框架序列的优选组合。非限制性地，用于本发明多肽中的有利免疫球蛋白单可变结构域描述于wo2010/139808中。优选地，所述抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域选自表a-2中seqidno:1-34中的任一个。本发明的多肽用于本发明方法的免疫球蛋白单可变结构域可形成多肽(在本文称作“本发明的多肽”)的部分，其可以包含特异性结合hrsv的f-蛋白的一个或多个免疫球蛋白单可变结构域或(基本上)由其组成，并且其可任选进一步包含一或多个其它氨基酸序列(全都任选经一或多个适宜的接头连接)。术语“免疫球蛋白单可变结构域”还可以涵盖本发明的此类多肽。例如且并非限制性地，所述一个或多个免疫球蛋白单可变结构域可以用作此种多肽中的结合单元，其可任选含有一或多个可用作结合单元的其它氨基酸序列，从而分别提供单价的、多价的或多特异性的本发明的多肽(对于含有一或多个vhh结构域的多价和多特异性多肽及其制备(制品)，还可以参考conrath等人2001(j.biol.chem.276：7346-7350)，以及参考例如wo96/34103，wo99/23221和wo2010/115998)。优选地，本发明的多肽涵盖包含三个或更多个单可变结构域形式的抗原结合单元的构建物，如上文所概述的。例如，可以将三个或更多个结合hrsv的免疫球蛋白单可变结构域(在本文也称作“抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域”)连接起来形成三价的或多价的构建物。优选本发明的多肽由三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域组成。在上文所述的多肽中，所述三个或更多个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域可以直接彼此连接和/或经一或多个适宜的接头或间隔区连接。适宜用于多价多肽的间隔区或接头将是技术人员清楚的，并且一般可以是本领域中用于连接氨基酸序列的任何接头或间隔区。优选地，所述接头或间隔区适宜用于构建意图用于药物用途的蛋白或多肽。一些特别优选的间隔区包括本领域中用于连接抗体片段或抗体结构域的间隔区和接头。这些包括上文引用的一般
背景技术：
中提到的接头，以及例如本领域中用于构建双抗体(diabodies)或scfv片段的接头(然而，在此方面，需要注意的是，虽然在双抗体和scfv片段中，所使用的接头序列应当具有允许相关的vh和vl结构域在一起形成完整抗原结合位点的长度、弹性度和其它性质，但对于本发明多肽中使用的接头的长度或弹性没有特定的限制，因为每个免疫球蛋白单可变结构域本身即形成完整的抗原结合位点)。例如，接头可以是适宜的氨基酸序列，以及特别是1-50个之间、优选1-30个之间、如1-20个之间或1-10个之间的氨基酸残基的氨基酸序列。广泛使用的肽接头包含gly-ser重复，例如1个、2个、3个、4个、5个、6个或更多个重复的(gly)4-ser，或者例如(glyxsery)z的类型，如(例如(gly4ser)3或(gly3ser2)3，如wo99/42077中所述的，或者铰链样区域如天然存在的重链抗体的铰链区域或类似序列(如wo94/04678中所述的)。其它一些特别优选的接头有聚丙氨酸(如aaa)，以及表a-4中提到的接头。其它适宜的接头一般包括有机化合物或聚合物，特别是适宜用在用于药物用途的蛋白质中的那些。比如，聚(乙二醇)部分已用于连接抗体结构域，参见例如wo04/081026。在一方面，本发明的多肽结合hrsv的f-蛋白。更特别地，本发明的多肽可以优选以这样的亲和性(经适宜测量的和/或表示为kd-值(实际的或表观的)、ka-值(实际的或表观的)、kon-速率和/或koff-速率)结合hrsv的f蛋白：-其以100nm至0.1nm或更低、优选10nm至0.1nm或更低、更优选1nm至0.1nm或更低、如例如5x10-10m(0.5nm)或更低的解离常数(kd)结合hrsv的f蛋白；-其以104m-1s-1至大约107m-1s-1之间、优选105m-1s-1至107m-1s-1之间、更优选大约106m-1s-1或更高的kon-速率结合hrsv的f蛋白；和/或-其以10-2s-1(t1/2=0.69s)至10-4s-1(提供具有数天的t1/2的接近不可逆的复合物)之间、优选10-3s-1至10-4s-1之间、更优选5x10-3s-1至10-4s-1之间、或更低的koff速率结合hrsv的f蛋白。在一方面，本发明的多肽能够中和hrsv。测定分子的中和能力的测定包括例如anderson等人(1985，j.clin.microbiol.22：1050-1052；1988，j.virol.62：4232-4238)描述的微中和测定，或者此测定的变式，如例如wo2010/139808中描述的，或例如johnson等人(1997，j.inf.dis.176：1215-1224)描述的蚀斑减少测定，以及其变式。例如，在对hrsvlong的微中和测定中(如例如wo2010/139808中所述的；375页，实施例6)，本发明的多肽可具有10pm至1000pm之间、优选10pm至250pm之间、更优选50pm至200pm之间或更低的ic50值。本发明的多肽可以具有1nm至100nm之间、优选1nm至10nm之间、更优选1nm至5nm之间或更低的，如例如2nm或更低的、或90ng/ml或更低的ic90值。在优选的方面，本发明的多肽优选以这样的亲和性(经适宜测量的和/或表示为kd-值(实际的或表观的)，如本文所述)结合hrsv的f-蛋白，其以100nm至0.1nm或更低、优选10nm至0.1nm或更低、更优选1nm至0.1nm或更低、如例如5x10-10m(0.5nm)或更低的解离常数(kd)结合hrsv的f蛋白；以及另外，本发明的多肽能够以10pm至1000pm之间、优选10pm至250pm之间、更优选50pm至200pm之间或更低的ic50值中和hrsv，或者以1nm至100nm之间、优选1nm至10nm之间、更优选1nm至5nm之间或更低，如例如2nm或更低、或90ng/ml或更低的ic90值中和hrsv。在一方面，本发明的多肽以5x10-10m(0.5nm)或更低的亲和性结合hrsv的f-蛋白并且以90ng/mm或更低的ic50值中和hrsv。在具体的方面，本发明的多价的(如三价的)多肽可以包含选自seqidno:1-34(表a-2)中任一者的至少三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域或基本由其组成。非限制性地，用于本发明方法的有利的多肽在wo2010/139808中描述。优选本发明的多肽选自seqidno:65-85(表b-2)中任一者，优选seqidno:71。seqidno:71是三价多肽，其由衍生自仅重链的美洲驼抗体的三个抗-hrsv免疫球蛋白可变结构域组成。所述三个抗-hrsv免疫球蛋白单可变结构域的每一个都结合hrsv的f-蛋白。本发明的多肽可以通过包括以下步骤的方法生产：a)在适宜的宿主细胞或宿主生物体或在另一适宜的表达系统中，表达核酸或核苷酸序列，或者编码本发明多肽的遗传构建物；任选地随后：b)分离和/或纯化由此获得的本发明多肽。用于生产本发明多肽的方法可包括以下步骤：a)将宿主或宿主细胞培养和/或保持在这样的条件下，从而所述宿主或宿主细胞表达和/或产生至少一种本发明的多肽，任选地随后：b)分离和/或纯化由此获得的本发明多肽。根据本发明一个优选的但非限制性的实施方案，本发明的多肽在细菌细胞中生产，特别是在适宜用于大规模药物生产的细菌细胞中。根据本发明另一优选的但非限制性的实施方案，本发明的多肽在酵母细胞中生产，特别是在适宜用于大规模药物生产的酵母细胞中。根据本发明又另一优选的但非限制性的实施方案，本发明的多肽在哺乳动物细胞中生产，特别是在人细胞中或者在人细胞系的细胞中，以及更特别是在适宜用于大规模药物生产的人细胞中或者人细胞系的细胞中。对于工业规模的生产，用于免疫球蛋白单可变结构域或含有免疫球蛋白单可变结构域的蛋白治疗剂的(工业化)生产的优选的异源宿主包括适宜用于大规模的表达/生产/发酵，并且特别是适宜用于大规模的药物表达/生产/发酵的大肠杆菌(e.coli)、毕赤酵母(pichiapastoris)、酿酒酵母(s.cerevisiae)的菌株。此类菌株的适宜实例将是技术人员清楚的。此类菌株以及生产/表达系统也可得自公司，如biovitrum(瑞典uppsala)。或者，哺乳动物细胞系，特别是中国仓鼠卵巢(cho)细胞，可用于大规模的表达/生产/发酵，以及具体用于大规模的药物表达/生产/发酵。此类表达/生产系统同样也可以通过一些上文提及的公司获得。随后，可以使用本身已知的蛋白分离和/或纯化技术，如(制备性的)层析和/或电泳技术，示差沉淀技术，亲和性技术(例如使用与本发明多肽融合的特异性、可切割的氨基酸序列来)和/或制备性的免疫学技术(也即使用针对待分离的氨基酸序列的抗体)，从所述宿主细胞/宿主生物体和/或从其中培养所述宿主细胞或宿主生物体的培养基中分离本发明的多肽。本发明的方法本发明提供了用于向幼儿肺部施用本发明多肽的方法和剂量方案。由此，这些方法和剂量方案可用于治疗(如本文所定义的)这些幼儿中的rsv感染。rsv感染包括轻度的上呼吸道病，以及更严重的下呼吸道感染(lrti)。下呼吸道rsv感染可包括细支气管炎和支气管肺炎，可能显示出典型的临床迹象和症状如呼吸急促、哮鸣、咳嗽、湿罗音、使用辅助肌，和/或鼻翼煽动。rsv感染还可以包括与rsv感染相关的疾病和/或病症。此类与hrsv感染相关的疾病和/或病症的实例将是技术人员清楚的，并且例如包括以下疾病和/或病症：与hrsv相关的呼吸系统病、上呼吸道感染、下呼吸道感染、细支气管炎(肺中小气道的炎症)、肺炎、呼吸困难、咳嗽、(反复发作的)哮鸣和(加重的)哮喘或copd(慢性阻塞性肺病)。因此，本发明还提供了方法和剂量方案，其用于治疗与hrsv相关的呼吸系统病、上呼吸道感染、下呼吸道感染、细支气管炎(肺中小气道的炎症)、肺炎、呼吸困难、咳嗽、(反复发作的)哮鸣和/或(加重的)哮喘或copd(慢性阻塞性肺病)。在本发明的背景下，术语“治疗”不仅包括治疗疾病，还一般包括延缓或逆转疾病的进展，延缓与疾病相关联的一或多种症状的发作，减轻和/或缓解与疾病相关联的一或多种症状，降低疾病和/或与之相关联的任何症状的严重性和/或持续时间，和/或防止疾病和/或与之相关联的任何症状的严重性的进一步增加，防止、减少、或逆转由疾病所引起的生理学损害，以及一般对受治疗的患者有益的任何药物作用。本发明的方法提供了将本发明的多肽向对象的呼吸道的递送，以及更具体地，向对象的下呼吸道的递送。用于递送至呼吸道和/或通过吸入递送的方法是技术人员已知的并且例如描述于手册“drugdelivery：principlesandapplications”(2005)bybinghewang，terunasiahaanandrichardsoltero(eds.wileyinterscience(johnwiley&sons))中；在“pharmacologypretesttmself-assessmentandreview”(11thed.)byrosenfeldg.c.,loose-mitchelld.s.中；以及在“pharmacology”(3rdedition)bylippincottwilliams&wilkins,newyork;shlaferm.mcgraw-hillmedicalpublishingdivision,newyork;yangk.y.,graffl.r.,caugheya.b.blueprintspharmacology，blackwellpublishing中。在本发明的方法中，本发明的多肽以可吸入的形式递送。更特别地，所述可吸入形式是通过(使用雾化器)使本发明的多肽雾化而获得的气溶胶。要治疗的对象是人类、更特别是幼儿。如技术人员所清楚的，待治疗的对象将特别是患有rsv感染的幼儿。例如，所述对象可以是患有rsv感染、如下呼吸道rsv感染的幼儿。在一方面，所述对象是年龄小于24个月或小于36个月(3岁)的幼儿。在一方面，所述对象是年龄5个月至小于24个月(如例如5个月至23个月)的幼儿。在一方面，所述对象是婴儿。在一方面，所述对象是幼童。在一方面，对象是经诊断患有rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)的幼儿。在一方面，对象是年龄小于24个月或小于36个月(3岁)的幼儿，其经诊断患有rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)。在一方面，对象为幼儿，其年龄为5个月至小于24个月(如例如5个月至23个月)、其年龄为5个月至小于36个月(如例如5个月至35个月)、其年龄为1个月至小于24个月(如例如1个月至23个月)、或者其年龄为1个月至小于36个月(如例如1个月至35个月)，其经诊断患有rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)。在一方面，对象是经诊断患有rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)的婴儿。在一方面，对象是诊断患有rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)的幼童。在一方面，对象是经诊断患有rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)但其它方面健康的幼儿。在一方面，对象是年龄小于24个月或小于36个月(3岁)的幼儿，其经诊断患有rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)，但其它方面是健康的。在一方面，对象为幼儿，其年龄为5个月至小于24个月(如例如5个月至23个月)、其年龄为5个月至小于36个月(如例如5个月至35个月)、其年龄为1个月至小于24个月(如例如1个月至23个月)、或者其年龄为1个月至小于36个月(如例如1个月至35个月)，其经诊断患有rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)，但其它方面是健康的。在一方面，对象是经诊断患有rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)但其它方面健康的婴儿。在一方面，对象是经诊断患有rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)但在其它方面健康的幼童。在一方面，所述对象是幼儿，其由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院。在一方面，对象是年龄小于24个月或小于36个月(3岁)的幼儿，其由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院。在一方面，对象为幼儿，其年龄为5个月至小于24个月(如例如5个月至23个月)、其年龄为5个月至小于36个月(如例如5个月至35个月)、其年龄为1个月至小于24个月(如例如1个月至23个月)、或者其年龄为1个月至小于36个月(如例如1个月至35个月)，其由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院。在一方面，对象是由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院的婴儿。在一方面，对象是由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院的幼童。在一方面，对象是由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院并且经诊断患有rsv感染的幼儿。在一方面，对象是年龄小于24个月或小于36个月(3岁)的幼儿，其由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院并且经诊断患有rsv感染。在一方面，对象为幼儿，其年龄为5个月至小于24个月(如例如5个月至23个月)、其年龄为5个月至小于36个月(如例如5个月至35个月)、其年龄为1个月至小于24个月(如例如1个月至23个月)、或者其年龄为1个月至小于36个月(如例如1个月至35个月)，其由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院并且经诊断患有rsv感染。在一方面，对象是由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院并且经诊断患有rsv感染的婴儿。在一方面，对象是由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院并且经诊断患有rsv感染的幼童。在一方面，对象是由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院并且经诊断患有rsv感染但在其它方面健康的幼儿。在一方面，对象是年龄小于24个月或小于36个月(3岁)的幼儿，其由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院并且经诊断患有rsv感染，但在其它方面是健康的。在一方面，对象为幼儿，其年龄为5个月至小于小于24个月(如例如5个月至23个月)、其年龄为5个月至小于36个月(如例如5个月至35个月)、其年龄为1个月至24个月(如例如1个月至23个月)、或者其年龄为1个月至小于36个月(如例如1个月至35个月)，其由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院并且经诊断患有rsv感染，但在其它方面是健康的。在一方面，对象是婴儿，其由于感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院并且经诊断患有感染，但在其它方面是健康的。在一方面，对象是幼童，其由于rsv感染(例如下呼吸道rsv感染，如细支气管炎或支气管肺炎)而住院并且经诊断患有rsv感染，但在其它方面是健康的。在本发明的方法中，按照经选择的给药方案，将本发明的多肽，如seqidno:71，通过吸入施用于患有rsv感染，如下呼吸道rsv感染的对象，从而实现治疗。本发明多肽的活性可以通过在治疗期间测量病毒负载的减少来进行评估。所述病毒负载可以，例如在幼儿的鼻粘液中进行确定。可以例如通过使用吸鼻器的鼻抽吸，橡胶球注射器或鼻拭子，从鼻中取出粘液。所述病毒负载可以通过本领域已知的任何方法来确定，如例如聚合酶链反应，或者培养。本发明多肽的活性也可以通过测量血清中的某些生物标志物如例如il-8和kl-6来进行评估。白细胞介素-8(il-8)是宿主对损伤和感染应答的重要的介质。血清中的il-8水平可以通过本身已知的任何方法，使用技术人员已知的技术来测量，如例如依照商业可用的测定：人il-8elisa试剂盒(lifetechnologies；cat#khc0081)，人il-8elisa试剂盒(thermofisherscientificinc.；cat#eh2il8，eh2il82，eh2il85)，或者alphalisail8免疫测定研究试剂盒(perkinelmerinc.；cat#al224c，al224f)。kerbsvonlungren6抗原(kl-6)是高分子量糖蛋白，表达在肺泡ii型细胞的表面上。kl-6的血清水平在以肺泡上皮细胞损伤为特征的多种间质性肺病中提升。血清kl-6已经与rsv细支气管炎的严重性相关联，并且提出其可以是rsv细支气管炎严重性的有用的生物标志物(kawasaki等人2009，j.med.virol.81：2104-8)。血清中的kl-6水平可以通过本身已知的任何方法，使用技术人员已知的技术测量，如例如依照商业可用的测定：kl-6人elisa(biovendor；cat#rscyk243882r),krebsvondenlungen6免疫测定试剂盒(biotrendchemikaliengmbh；cat#e05k0061)，或kl-6elisa试剂盒(biorbyt；cat#orb153677)。可以进行以下评估，来估计本发明多肽的临床活性：心率和外周毛细血管o2饱和(spo2)水平；进食：(进食辅助的类型，进食的充足性)，特别注意进食期间的水分和呼吸舒适度；呼吸率；哮鸣(在呼气/吸气期间)；肺部听诊期间的湿罗音/捻发音；白天咳嗽；夜间咳嗽(引起的睡眠障碍)；(呼吸肌)收缩(锁骨上，肋间，和肋下)；整体表现(活动性，刺激，对环境的兴趣，和反应性)；以及住院的持续时间。基于临床活性参数，可以计算另外的得分，如临床反应、呼吸窘迫评估仪器(rdai)得分和呼吸评估变化得分(racs)。本发明的多肽抑制病毒生命周期中的早期活动，通过抑制病毒体融合至目标细胞来防止细胞外病毒感染无病毒的细胞。本发明的方法和给药方案用于抑制病毒生命周期中的这些早期活动，并通过抑制病毒体融合至目标细胞来防止细胞外病毒感染无病毒的细胞。在中和测定中(在hep-2细胞培养物中，如下文进一步描述的)，90ng/ml的体外浓度被确定为本发明的多肽达到90%的其最大抑制性抗病毒效应的浓度(ic90)。随后，体外确定的ic90乘以100，来虑及未知的且难以评估的变量，因为(i)rsv在hep-2细胞培养物中的复制率可能未完全反应体内的状况，(ii)广泛的临床菌株的感染性和复制率可以有可观的变化，以及(iii)虽然已经评估了一定数目的(n=6)临床病毒株对本发明多肽的抑制作用的敏感性，但是它们不能代表临床毒株的整个谱系。认为所得的值(9微克/ml或更高)是在下呼吸道中导致临床上有意义的rsv感染性减少所需的目标浓度。此浓度计算为足以完全渗透在rsv-感染的婴儿中峰值病毒滴度时存在的所有靶标，并且还得到了在rsv-感染的新生羔羊和棉鼠的非临床研究中显示出功效的局部目标浓度的支持。因此，本发明涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的方法，所述方法包括向患有rsv感染的儿童施用本发明的多肽，其中所述多肽以9微克/ml(其中此值理解为任选涵盖±0.5微克/ml的范围)或更高的目标浓度，通过吸入施用于儿童。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的本发明的多肽，其中所述多肽以9微克/ml(其中此值理解为任选涵盖±0.5微克/ml的范围)或更高的目标浓度，通过吸入施用于患有rsv感染的儿童。在本发明中，开发了儿科模型(参见图1)以提供适当给药方案的指引，以及预计本发明多肽的局部和全身的pk指数，以及其相关的可变性。主要目标是确保浓度值(c低谷)在估计的下呼吸道中目标浓度(9µg/ml)之上，考虑到生长和发育过程如器官成熟、血流中的变化、机体组成、以及消除机制的个体发生学。所述儿科模型是经多步骤的拓展而开发的，初始使用非临床数据、继而使用预测的和测量的本发明多肽在成人中的临床pk参数，以及随后通过拓展(i)解剖学和生理学参数、(ii)清除过程、和(iii)吸收过程而外推至儿童。所开发的儿科模型用于评估在整个治疗期间95%的个体中达到并保持等于或高于估计的目标浓度的局部浓度所需的剂量。基于用此儿科模型进行的模拟，一次施用之后下呼吸道中需要存在的沉积剂量为每kg体重0.024mg本发明的多肽。因此，本发明涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的方法，所述方法包括向患有rsv感染的儿童施用本发明的多肽，其中所述多肽以每天0.020-0.040mg/kg的沉积剂量、更具体地以每天0.020-0.035mg/kg的沉积剂量、如例如每天0.024mg/kg的沉积剂量(其中此值理解为任选涵盖±0.002mg/kg的范围)，通过吸入施用于儿童。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的本发明的多肽，其中所述多肽以每天0.020-0.040mg/kg的沉积剂量、更具体地以每天0.020-0.035mg/kg的沉积剂量、如例如每天0.024mg/kg的沉积剂量(其中此值理解为任选涵盖±0.002mg/kg的范围)，通过吸入施用于患有rsv感染的儿童。进一步的模拟显示出代表rsv-感染的婴儿和幼童的呼吸模式，导致本发明多肽吸入量的~10%沉积在下呼吸道(7-13%，取决于年龄和颗粒大小)。相应地，将需要吸入0.24mg/kg的剂量(吸入剂量)以在一次施用后于下呼吸道达到0.024mg/kg的沉积剂量。因此，本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的方法，所述方法包括向患有rsv感染的儿童施用本发明的多肽，其中所述多肽以每天0.20-0.40mg/kg的吸入剂量、更具体地以每天0.20-0.35或0.20-0.45mg/kg的吸入剂量、如例如每天0.24mg/kg的吸入剂量(其中此值理解为任选涵盖±0.02mg/kg的范围)，通过吸入施用于儿童。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的本发明的多肽，其中所述多肽以每天0.20-0.40mg/kg的吸入剂量、更具体地每天0.20-0.45或0.20-0.45mg/kg的吸入剂量、如例如每天0.24mg/kg的吸入剂量(其中此值理解为任选涵盖±0.02mg/kg的范围)，通过吸入施用于感染rsv的儿童。对于气溶胶沉积的研究用sophia解剖学婴儿鼻喉(saint)模型完成，其中使用振动筛式雾化器，更具体地使用具有2l/min另外的空气或o2恒定流的振动筛式雾化器，如例如fox雾化器(janssens等人2001，journalofaerosolmedicine：theofficialjournaloftheinternationalsocietyforaerosolsinmedicine14：433-41)施用所述多肽。结果显示出，从填充至雾化器的总剂量中，预期有大约20%被吸入。为确保0.24mg/kg吸入剂量，填充至雾化器的标称剂量因此将是1.2mg/kg。因此，本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的方法，所述方法包括向患有rsv感染的儿童施用本发明的多肽，其中所述多肽以每天1.00-2.00mg/kg的标称剂量、更具体地以每天1.00-1.75mg/kg的标称剂量、如例如每天1.20mg/kg的标称剂量(其中此值理解为任选涵盖±0.06mg/kg的范围)，通过吸入施用于儿童。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的本发明的多肽，其中所述多肽以每天1.00-2.00mg/kg的标称剂量、更具体地以每天1.00-1.75mg/kg的标称剂量、如例如每天1.20mg/kg的标称剂量(其中此值理解为任选涵盖±0.06mg/kg的范围)，通过吸入施用于患有rsv感染的儿童。在一方面，连续2至5天或更多天，每天施用所述多肽，如连续2天、连续3天、连续4天、连续5天或更多天，优选连续3天，每天施用。上述剂量方案在本文也称作“经选择的给药方案”或“经选择的剂量”。在优选的方面，用于本发明上述方法的本发明的多肽是seqidno:71。因此，本发明涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的方法，所述方法包括向患有rsv感染的儿童施用seqidno:71，其中seqidno:71以9微克/ml(其中此值理解为任选涵盖±0.5微克/ml的范围)或更多的目标浓度，通过吸入施用于儿童。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的seqidno:71，其中seqidno:71以9微克/ml(其中此值理解为任选涵盖±0.5微克/ml的范围)或更多的目标浓度，通过吸入施用于患有rsv感染的儿童。因此，本发明涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的方法，所述方法包括向患有rsv感染的儿童施用seqidno:71，其中seqidno:71以每天0.020-0.040mg/kg的沉积剂量、更具体地以每天0.020-0.035mg/kg的沉积剂量、如例如每天0.024mg/kg的沉积剂量(其中此值理解为任选涵盖±0.002mg/kg的范围)，通过吸入施用于儿童。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的seqidno:71，其中seqidno:71以每天0.020-0.040mg/kg的沉积剂量、更具体地以每天0.020-0.035mg/kg的沉积剂量，如例如每天0.024mg/kg的沉积剂量(其中此值理解为任选涵盖±0.002mg/kg的范围)，通过吸入施用于患有rsv感染的儿童。因此，本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的方法，所述方法包括向患有rsv感染的儿童施用seqidno:71，其中seqidno:71以每天0.20-0.40mg/kg的吸入剂量、更具体地以每天0.20-0.35或0.20-0.45mg/kg的吸入剂量、如例如每天0.24mg/kg的吸入剂量(其中此值理解为任选涵盖±0.02mg/kg的范围)，通过吸入施用于儿童。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的seqidno:71，其中seqidno:71以每天0.20-0.40mg/kg的吸入剂量、更具体地以每天0.20-0.35或0.20-0.45mg/kg的吸入剂量、如例如每天0.24mg/kg的吸入剂量(其中此值理解为任选涵盖±0.02mg/kg的范围)，通过吸入施用于患有rsv感染的儿童。因此，本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的方法，所述方法包括向患有rsv感染的儿童施用seqidno:71，其中seqidno:71以每天1.00-2.00mg/kg的标称剂量、更具体地以每天1.00-1.75mg/kg的标称剂量、如例如每天1.20mg/kg的标称剂量(其中此值理解为任选涵盖±0.06mg/kg的范围)，通过吸入施用于儿童。本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染，如下呼吸道rsv感染的seqidno:71，其中seqidno:71以每天1.00-2.00mg/kg的标称剂量、更具体地以每天1.00-1.75mg/kg的标称剂量、如例如每天1.20mg/kg的标称剂量(其中此值理解为任选涵盖±0.06mg/kg的范围)，通过吸入施用于患有rsv感染的儿童。在一方面，连续2至5天或更多天，每天施用具有seqidno:71的多肽，如连续2天、连续3天、连续4天、连续5天或更多天，如例如连续3天，每天施用。药物组合物和制剂本发明还涉及组合物(在本文也是指“本发明的组合物”或“本发明的制剂”)，其以某种浓度包含本发明的多肽、以及任选存在的本身已知的此类组合物的一或多种其它成分。一般来说，对于药物用途，本发明的多肽可以可以配制为制剂或组合物(也称作“本发明的药物组合物”或“本发明的药物制剂”)其以某种浓度包含本发明的多肽和至少一种药物可接受的载体、稀释剂或赋形剂和/或佐剂，以及任选存在的一或多种其它药物学活性组分。本发明的多肽可以本身已知的任何适宜的方式进行配制和施用，其中可以参考例如标准手册，如remington'spharmaceuticalsciences1990(18thed.，mackpublishingcompany，usa)，remington2005(thescienceandpracticeofpharmacy，21sted.，lippincottwilliamsandwilkins)；或者治疗性抗体的手册(s.dubel,ed.)，wiley，weinheim，2007(参见例如252-255页)。由于本发明的多肽和/或包含其的组合物是通过吸入施用的(也即施用至呼吸道)，因此所述制剂优选是适宜于通过吸入施用的形式。就此而言，所述药物组合物将包含本发明的多肽和适宜于通过吸入施用至对象的至少一种载体、稀释剂或赋形剂，以及任选存在的一或多种其它活性组分。术语“赋形剂”如本文所用是指惰性物质，其通常作为用于药物稀释剂、载剂、防腐剂、粘合剂或稳定剂，其给予制剂有益的物理性质，如提高的蛋白稳定性、提高的蛋白溶解度、和/或减低的粘度。赋形剂的实例包括但不限于，蛋白(例如，血清白蛋白)，氨基酸(例如，天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸、甘氨酸)，表面活性剂(例如，十二烷基硫酸钠(sds)，聚山梨醇酯如tween20和tween80，泊洛沙姆如pluronics，和其它非离子表面活性剂如聚(乙二醇)(peg))，糖(例如，葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和海藻糖)，多元醇(例如，甘露醇和山梨醇)，脂肪酸和磷脂(例如，烷基磺酸酯和辛酸酯)。关于赋形剂的另外的信息，参见remington'spharmaceuticalsciences(josephp.remington,18thed.,mackpublishingco.,easton，pa)，其以整体通过引用并入本文。短语“适宜通过吸入施用的载体”如本文所用是指药物可接受的材料、组合物或载剂，如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、或溶剂，其参与例如在呼吸道中物质(例如预防或治疗剂)的携带或传送道。每种载体必须在与制剂的其它组分相容且对患者无毒害的意义上是“可接受的”。本发明组合物中包含的载体优选是水成载体，如例如蒸馏水、milliq®水或注射用水(wfi)。所述组合物可以用任何药物可接受的缓冲剂来进行缓冲。用于本发明组合物的优选的缓冲剂包括(而并不限于)pbs、磷酸盐缓冲剂、trishcl、组氨酸缓冲剂和柠檬酸盐缓冲剂，如例如组氨酸ph6.0-6.5、磷酸盐缓冲剂ph7.0、trishclph7.5和柠檬酸盐缓冲剂/磷酸盐缓冲剂ph6.5，特别是磷酸盐(nah2po4/na2hpo4)缓冲剂ph7.0。其它药物可接受的载体也可以可用于本申请的制剂。可用作药物可接受载体的材料的一些实例包括：糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；甘醇，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，如油酸乙酯和十二酸乙酯；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；无至热原水；等渗盐水；ringer溶液；乙醇；磷酸盐缓冲剂溶液；和其它用于药物制剂的非毒性相容性物质。如实施例中所演示的，已使用50mg/ml的浓度用于本发明多肽的肺部施用。因此预期也可以使用具有这些浓度周围的值的其它浓度(也即还有在这些值之外的，也即，高于或低于这些值)。例如，可以使用25、30、35、40、45、55、60、65、70、75mg/ml的浓度。技术人员将清楚，考虑到本发明中确定的具体标称剂量(mg/kg)，填充至雾化器中的药物组合物的体积(填充体积)将取决于所述药物组合物中本发明多肽的浓度。在本发明的方法中，要填充至雾化器以确保临床上有意义的rsv感染性减少的标称剂量确定为每天1.00-2.00mg/kg、更具体地为每天1.00-1.75mg/kg、如例如每天1.20mg/kg(其中此值理解为任选涵盖±0.06mg/kg的范围)。取决于所述幼儿的重量，应载入至雾化器中的药物组合物(以特定的浓度，如例如50mg/ml的本发明的多肽)的体积(也称作“填充体积”)将会改变。依照其它吸入产品，本发明多肽的施用剂量(以及由此的填充体积的药物组合物(以特定浓度包含本发明的多肽))可以针对(精准的)体重类别进行标准化(对于50mg/ml的药物组合物参见例如表b-2和表b-6)。吸入装置-雾化器本发明还涉及药物装置，其适宜用于通过吸入递送本发明的多肽以及适宜用于包含本发明多肽的组合物。因此，本发明涉及以选定的剂量包含本发明多肽的此类装置。各种吸入系统例如在综述(“pulmonarydrugdelivery”，bechtold-petersandluessen，eds.，supra)的129-148页中有描述。在本发明的方法中，所述装置是用于液体(例如细固体颗粒或小滴的悬液)的包含本发明多肽的吸入器。优选此装置是气溶胶递送系统或者包含本发明多肽的雾化器。用于本发明方法的气溶胶递送系统可可以包含容纳本发明组合物的容器以及与其连接的气溶胶发生器。所述气溶胶发生器经构建和安置以产生本发明组合物的气溶胶。在优选的方面，所述气溶胶递送系统是雾化器。雾化器产生含有药物的液体小滴的薄雾以用于吸入。“雾化”，如本发明所用，是指将液体转化成细雾。雾化器将药品与压缩的空气混合以建立细薄雾(患者通过面罩或吸嘴来将其吸入)。优选使用振动筛式雾化器。振动筛式雾化器分为被动和主动振动筛式装置(newman2005，j.appl.her.res.5：29-33)。被动振动筛式装置(例如omronmicroair®ne-u22雾化器)利用具有6000微米大小的孔的穿孔盘。附着至换能器变幅杆(transducerhorn)的振动压电晶体在位于其之前的穿孔盘中诱导“被动的”振动，导致液体从孔基础以及气溶胶的生成。主动振动筛式装置(例如aeroneb®pro雾化器)可以利用包含气溶胶发生器的“微泵”系统，所述气溶胶发生器由具有达1000个圆顶状缝隙的盘和振动元件(其在应用电流时收缩和扩张)组成。这导致筛网上移或下移几微米，挤出液体并生成气溶胶。振动筛式雾化器的其它实例包括akita2apixneb(activaero，现在为德国vectura)、eflow®(德国parigmbh，gräfelingen；也参见us5,586,550)、aeroneb®(aerogen,inc.,sunnyvale,california；也参见us5,586,550;us5,938,117;us6,014,970;us6,085,740;us6,205,999)、或fox雾化器(activaero，现在为德国vectura)，全都适于儿科用途。在优选的方面，施用连续流雾化器。考虑到患有细支气管炎的年幼婴儿可能需要额外的氧气或空气供应，推荐通过递送系统保持2l/min的连续氧气或空气供应。因此，可以在有或者无额外空气或o2流的情况下使用所述雾化器。优选地，在有额外空气或o2流的情况下使用所述雾化器，如2l/min的额外空气或o2流。用于将本发明多肽递送至患者的示例性的吸入装置可以包含(a)具有振动筛的气溶胶发生器；(b)用于要雾化的液体的储库，所述储库与振动筛有流体连接；(c)气体入口开口；(d)面罩，其具有壳体、气溶胶入口开口、患者接触面、和壳体中的单向呼出阀或双向吸入/呼出阀(具有在0.5-5mbar的范围内选择的呼出阻力)；和(e)从气体入口开口延伸至面罩的气溶胶入口开口的流动通道，所述流动通道具有侧向开口，通过该侧向开口气溶胶发生器至少部分地插入至流动通道内，以及以1至20l/分钟的流速在气体入口开口和面罩的气溶胶入口开口之间的恒定流动阻力。此种吸入装置一个示例性实施方案的横截面侧视图可见图33。图33显示了吸入装置(100)；具有振动筛(102)的气溶胶发生器(101)；与所述振动筛(102)有流体联通的储库(103)；气体入口开口(104)；面罩(105)，其具有壳体(106)、气溶胶入口开口(107)、患者接触面(108)、和单向呼出阀或双向吸入/呼出阀(109)；和流动通道(110)，其从气体入口开口(104)导向面罩(105)的气溶胶入口开口(107)。所述流动通道(110)具有侧向开口(111)，通过该侧向开口气溶胶发生器(101)至少部分地插入至其下游末端。在所示的实施方案中，储库覆盖有旋盖(114)以及气体入口开口(104)形状为(或装配有)管接头(113)。图33的示例性的吸入装置分别在图34的透视侧视图中、图35-37的侧视图和底视图中进进一步展示。此示例性吸入装置的前视图和后视图分别在图38和39中提供。在一方面，本发明方法中使用的吸入装置的振动筛(102)可以包含1,000至4,000个开口，其最小直径主要是在1.5至3.0µm的范围。在一方面，本发明方法中使用的吸入装置的储库(103)可以具有0.1至10ml、或0.5至5ml的体积，来容纳液体(其通常是包含活性组分的药物组合物)。优选地，储库(103)位于相对于气溶胶发生器(101)主体的高位。其可以通过旋盖或者卡扣盖来关闭；参见例如图33中所示的旋盖(114)。由于至18个月大的婴儿基本上都是强制鼻呼吸者，因此不适合通过吸嘴来进行受控的吸入，并且界面在面罩类型和用于不同年龄的适宜大小方面需要特别的关注。本发明方法中使用的吸入装置的面罩(105)可以配置为允许换种通过面罩进行呼出。这是通过阀(展现出相当小的呼出阻力)来实现的。所述阀、或所述阀的呼出阻力，可以在上文明确的范围内并虑及患者来进行选择。优选地，面罩的标称内部体积为不超过大约120ml。如本文所用，标称内部体积理解为是由壳体从气溶胶入口开口到患者接触面所封闭的内部体积(当患者接触面置于平表面上时)。此体积稍微大于有效内部体积(或所谓的死腔(deadspace))，其是当面罩置于患者面部时所封闭的体积，并且其因此取决于患者面部的大小和形状。如果患者是在校儿童，标称内部体积优选分别为不超过大约90ml、或者甚至是不超过大约80ml、或者不超过大约70ml、或者不超过大约60ml、或者不超过大约50ml、或者不超过大约40ml，取决于患者面部的大小。如果患者是新生儿，则目前优选选择具有不超过大约40或50ml的标称内部体积的面罩。还优选根据患者的平均潮气量(tidalvolume)来选择面罩的标称内部体积。有利的是，标称内部面罩体积小于潮气量。例如，如果患者是在正常呼吸期间具有大约80ml平均潮气量的儿科患者，所述标称内部面罩体积应当小于此。特别是，各自的体积可以在平均潮气量的大约10%至大约80%的范围内。在另外的实施方案中，所述标称内部面罩体积不超过患者平均潮气量的大约60%、或者甚至不超过大约50%。在一个实施方案中，所述面罩可以具有双向吸入-和呼出阀，其在任一方向具有不超过3mbar的阻力，并且其中面罩的标称内部体积不超过大约50ml。此实施方案特别适宜于小的儿科患者如新生儿、婴儿、和幼童。在另一实施方案中，所述面罩可以具有一或多个吸入阀以及一或多个呼出阀，其中所述呼出阀具有不超过3mbar的阻力，并且其中面罩的标称内部体积不超过大约70ml。此实施方案特别适宜于幼童和儿童。任选地，所述面罩还可以包含另外的吸入和/或呼出阀。若如此，则组合阀的有效呼出压力应当在指定的范围内，也即在大约0.5至5mbar之间。任选地，所述呼出压力可以分别选自大约0.5mbar至大约3mbar、如大约1mbar或大约2mbar。面罩中所提供的阀可以具有任何适宜于提供此呼出阻力的结构；例如狭缝阀，鸭嘴阀或隔膜阀(仅列举几个)。例如，所述阀可以是具有交叉狭缝和重叠隔膜的单向阀，如硅酮隔膜。在一个方向，从交叉狭缝到隔膜，所述阀开放，而在相反方向，隔膜将被压紧在交叉上并因而封闭所述阀。取决于所述阀以何种方向插入面罩，其可以用作吸入或呼出阀。本发明方法中使用的吸入装置可以连接至以恒定流速(在1-5l/min的范围内)提供气体的气体源；所述气体源连接至少是吸入装置，从而使气体通过气体入口开口进入流动通道。由所述气体源提供的气体可以选自氧气、空气、氧气富集的空气、氧气和氮气的混合物、以及氦和氧气的混合物。气体入口开口(104)优选可连接至外部气体源(直接地或者经管子或其它导管间接地)。所述气体入口开口(104)形状可以是(或装配有)管接头(113)，以便辅助对气体源的附着，如例如图33和34中可见的。所述气体入口开口(104)可以位于吸入装置(100)后部的位置，如图33-37和图39所示的示例性的实施方案。在优选的实施方案中，所述气体入口开口(104)是允许气体流入流动通道(110)的仅有入口，除了气溶胶发生器(或与气溶胶发生器的储库)是例外，很小量的气体(通常是空气)可以通过其进入装置来置换雾化的液体。在一个本发明未示出的实施方案中，所述装置可以在侧向开口上游的流动通道中包含流限制器，其经调试来将流动通道中的气体流限制成恒定的流速(选自1-5l/min的范围)。在一方面，本发明方法中使用的吸入装置可以具有流动通道(110)，其从气体入口开口(104)延伸至面罩(105)的气溶胶入口开口(107)。所述流动通道可具有侧向开口(111)，如图34中所示的装置中所示例的，气溶胶发生器通过该侧向开口至少部分地插入至流动通道内。另外，所述流动通道可在气体入口开口和面罩的气溶胶入口开口之间，以1-20l/min的流速、以及特别是以大约1l/min至大约5l/min范围内的流速展现出恒定的流动阻力。所述流动通道可以配置为通过气体入口开口(形成流动通道的上游末端)从外部气体源接收气体。流动通道的上游部分，也即从(且包括)气体入口开口(104)到侧向开口(111)的区段(气溶胶发生器(101)通过其而至少部分插入)，优选经大小调节和形状调节，以实现气体的层流，其以恒定的流速(选自1-20l/min的范围内、且特别是以大约1l/min至大约5l/min的恒定流速)传导穿过流动通道。所述流动通道还可以在气体入口开口与面罩的气溶胶入口开口之间具有恒定的流动阻力。接收气溶胶发生器(101)的侧向开口(111)可优选位于流动通道(110)的上部(相对于所使用装置的正常取向)，如例如图33和34中所示。该开口优选经大小调节以匹配气溶胶发生器的尺寸，从而当接收气溶胶发生器时该开口完全且紧密地闭合。优选地，所述气溶胶发生器在使用期间处于部分插入的位置，并且气溶胶发生器的下游末端朝着流动通道的纵向中轴突出(甚至是突出至流动通道的纵向中轴)。在一个实施方案中，所述气溶胶发生器可以取向为例如以与流动通道的纵轴呈大约90°的角度将雾化的气溶胶发射至流动通道内。在此情形中，所述气溶胶发生器安置为大约垂直的取向而振动筛为大约水平的。任选地，对气溶胶发生器进行选择和操作，如具有至少约0.1ml/min、或至少0.2ml/min的气溶胶生成速率(或雾化速率)。在一些实施方案中，所述气溶胶发生器具有至少0.3ml/min、0.4ml/min、0.5ml/min、0.6ml/min、或者甚至至少0.7ml/min的雾化速率。所述流动通道尺寸可以是使得侧向开口与面罩的气溶胶入口开口之间通道的总内部体积不超过大约30ml。任选地，其分别不超过大约25ml、或者不超过大约20ml。在一些情形中，流动通道的内部体积可以小于大约18ml、或者甚至小于大约15ml。在具体的实施方案中，所述流动通道可以在侧向开口的紧上游的位置具有大约10mm至大约13mm的内部直径；任选与具有6mm至大约8mm总直径的振动筛组合。注意到具有开口、或缝隙的网孔区域的直径可以小于总直径，例如小大约1至3mm。在具体的实施方案中，紧接着侧向开口上游的流通通道的内部直径与振动筛直径的比例可以分别是是从大约1至大约2.5、或从大约1.2至大约2。另外，紧接着侧向开口上游的流通通道的内部直径与振动筛的缝隙区域直径的比例可以是从大约1.2至大约4，如从大约1.6至大约3。本发明方法中使用的吸入装置还可以包含用于启动和停止气溶胶发生器(101)的操作的开关(112)，如例如在图34中所示。在此背景下，气溶胶发生器的操作包括振动筛的连续振动。在一方面，本发明方法中使用的吸入装置可以包含a)基部单元(118)，其包含用于控制气溶胶发生器(101)的电子控制器，以及包括气体入口开口(104)的流动通道的上游部分；和b)混合通道单元(119)，其包含包括侧向开口(111)的流动通道的下游部分，其中所述下游部分包含其中流动通道在下游变宽得区段，所述区段位于侧向开口的下游。任选地，具有电子控制器的基部单元还可以包含或者容纳，电池(例如可充电电池)、数据存储设施和/或用于充电和数据读取的usb-端口(116)，如图39中所示。还任选地，可任选提供小孔(117)，例如在图34和39所示吸入装置的后部，和/或在图37所示吸入装置的底部；以便使得可以对例如可发热的电子控制器以及基部单元(118)的任何其它部分进行空气冷却。然而，这些小孔(117)与流动通道(110)没有流体连接。对于用于本发明方法的吸入装置的实例，可以参考有ablynxn.v.和vecturagmbh与本申请同一申请日提交的共同在审国际专利申请，题目为“用于呼吸系统疾病的气溶胶疗法的吸入装置”。所述吸入装置或雾化器装载有本发明的药物组合物。因此，本发明还涉及吸入装置或雾化器，其含有包含本发明多肽的药物组合物。在优选的方面，所述吸入装置或雾化器含有包含seqidno:71的药物组合物。如上文所述，本发明的多肽可以任何适宜的浓度存在于雾化器中，如25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75mg/ml，优选50mg/ml的浓度。为了确保如本文所述的临床上有意义的rsv的减少，本发明的多肽以每天1.00-2.00mg/kg、优选每天1.00-1.75mg/kg、如例如每天1.20mg/kg(其中此值理解为任选涵盖±0.06mg/kg的范围)的标称剂量进行施用。取决于幼儿的重量，要载入至雾化器中的药物组合物的体积(也称作“填充体积”)(以50mg/ml浓度的本发明的多肽)将如下(也参见表b-2):重量类别填充体积填充剂量标称剂量(mg/kg)5.0-6.0kg0.150ml7.5mg1.50-1.256.1-8.0kg0.200ml10.0mg1.64c-1.258.1-10.0kg0.250ml12.5mg1.54-1.2510.1-12.0kg0.300ml15.0mg1.49-1.2512.1-14.0kg0.350ml17.5mg1.45-1.2514.1-16.0kg0.400ml20.0mg1.42-1.25或者如下(也参见表b-6):重量类别填充体积填充剂量标称剂量(mg/kg)3.5-3.9kg0.100ml5.0mg1.43-1.284.0-5.0kg0.130ml6.5mg1.63-1.305.1-6.0kg0.150ml7.5mg1.47-1.256.1-8.0kg0.200ml10.0mg1.64-1.258.1-10.0kg0.250ml12.5mg1.54-1.2510.1-12.0kg0.300ml15.0mg1.49-1.2512.1-14.0kg0.350ml17.5mg1.45-1.2514.1-16.0kg0.400ml20.0mg1.42-1.2516.1–19.0kg0.500ml25.0mg1.32-1.55上述剂量在本文也称作“经选择的剂量方案”。因此，本发明涉及吸入装置或雾化器，其包含0.150-0.400ml或0.100-0.500ml(如0.100ml、0.130ml、0.150ml、0.200ml、0.250ml、0.300ml、0.350ml、0.400ml、0.500ml)的本发明多肽50mg/ml的组合物、优选seqidno:71。更具体地，本发明涉及用于治疗幼儿中的rsv感染(如例如下呼吸道rsv感染)的吸入装置或雾化器，其包含0.150-0.400ml或0.100-0.500ml(如0.100ml、0.130ml、0.150ml、0.200ml、0.250ml、0.300ml、0.350ml、0.400ml)的本发明多肽50mg/ml的组合物、优选seqidno:71。在一方面，所述幼儿的年龄小于24个月。在一方面，所述幼儿的年龄小于36个月(3岁)。在一方面，所述幼儿年龄为1个月至小于24个月。在一方面，所述幼儿年龄为1个月至小于36个月(3岁)。在一方面，所述幼儿年龄为5个月至小于24个月。在一方面，所述幼儿年龄为5个月至小于36个月(3岁)。在一方面，所述幼儿是婴儿。在一方面，所述幼儿是幼童。在一方面，所述幼儿经诊断患有下呼吸道rsv感染但在其它方面是健康的。在一方面，所述幼儿由于下呼吸道rsv感染而住院。另外的治疗剂本发明的多肽可以作为单一疗法施用或者与其它要用于或可用于rsv感染治疗的药物活性化合物或成分组合进行施用，其结果是可以或者不会获得协同效应。医师会清楚此类化合物和成分的实例，以及用于施用它们的途径、方法和药物制剂或组合物。当两种或更多种物质或成分要用作组合治疗方案的一部分时，它们可以经相同的使用途径或者经不同的施用途径、在基本相同的时间或在不同的时间(例如基本上同时地、连续地、或依照交替的方案)来进行施用。当时是物质或成分要以相同施用路线同时施用时，它们可以作为不同的药物制剂或组合物或者组合的药物制剂或组合物的一部分来进行施用，如技术人员所清楚的那样。另外，当两种或更多种活性物质或有效成分要用作组合治疗方案的一部分时，每种所述物质或成分可以相同的量施用并且依照当该化合物或成分自己单独使用时所用的相同方案，并且此种组合使用可以或者不会导致协同效应。然而，两种或更多种活性物质或有效成分的组合使用导致协同效应时，也可以减少要施用的一种、多种或所有物质或成分的量，而又依然实现期望的治疗作用。这可以用于避免、限制或减少任何不期望的副作用(与所述一或多种物质或成分以其常规量使用时相关联的)，而又依然获得期望的药物或治疗效果。由此，本发明还提供了用于对结合并中和hrsv本发明多肽进行肺部施用的方法和剂量方案，其中所述多肽与至少一种另外的治疗剂组合施用。非限制性地，另外的治疗剂可以选自由于rsv感染(如rsv下呼吸道感染)而住院期间的护理标准，包括(但不限于)支气管扩张剂、抗生素(例如在住院期间次生细菌感染[二重感染]的情形)、肾上腺素、抗胆碱剂、退烧药和/或非类固醇抗炎性药物。在一方面，本发明的多肽于支气管扩张剂组合进行施用。因此，本发明还涉及用于治疗幼儿中的rsv感染的方法，所述方法包括向患有rsv感染的儿童施用本发明的多肽，其中所述多肽与支气管扩张剂组合通过以经选择的剂量方案吸入来施用于儿童。在本发明的方法中，本发明的多肽和支气管扩张剂作为组合疗法(试剂盒)施用于呼吸道(也即通过吸入)。在此方法中，本发明的多肽和支气管扩张剂用作组合治疗方案的一部分。更具体地，此组合疗法的两个部分都同时、分别或依次施用于呼吸道(也即通过吸入)。有两种主要类型的支气管扩张剂，也即拟交感神经剂，包括短效的和长效的β2-模拟物，以及抗胆碱剂。短效的模拟物包括(但不限于)沙丁胺醇、特布他林、非诺特罗、吡布特罗和妥布特罗。它们可以用作基底(base)或用作可接受的药物盐。长效的β2-模拟物包括(但不限于)福莫特罗和沙美特罗。它们也可以用作基底或用作可接受的药物盐。抗胆碱药物包括(但不限于)异丙托铵，氧托铵和噻托溴铵。非限制性地，用于本发明方法的另外的支气管扩张剂包括阿库吸入剂(accuhale)、沙丁胺醇(albuterol)、比托特罗、麻黄碱、肾上腺素、异他林、异丙肾上腺素、间羟异丙肾上腺素、吡布特罗、消旋肾上腺素、羟苄羟麻黄碱、特布他林、左旋沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇(levabuterol)、克仑特罗、安非他明、甲基苯丙胺、可卡因、茶碱、咖啡因、可可碱、thc、和mdpv。具有很长效用期的支气管扩张剂分子类别将必须每天仅施用一次(例如噻托溴铵)。长效的β2-模拟物通常每天施用两次如福莫特罗和沙美特罗。最终，有短效的支气管扩张剂如沙丁胺醇、特布他林、异丙托铵或氧托铵，其必须每天施用4-6次。基于此信息，可以对治疗方案进行设计以便最佳利用所述组合疗法。所述治疗方案可涵盖本发明的多肽和支气管扩张剂的同时、分别或依次施用。用于施用所述组合疗法(试剂盒)的最常用装置是雾化器、计量剂量吸入器(mdi)、以及这些的组合。在一方面，本发明的多肽和支气管扩张剂同时施用。在此实施方案中，本发明的多肽和支气管扩张剂以可吸入形式的混合物进行施用。非限制性地，本发明多肽和支气管扩张剂的可吸入形式可以是同时将本发明的多肽和支气管扩张剂雾化(例如用雾化器)而获得的气溶胶，其中二者都优选存在于同一(本发明的)组合物中。在另一方面，本发明的多肽和支气管扩张剂分别施用。在此实施方案中，本发明的多肽和支气管扩张剂以分别的可吸入形式施用。非限制性地，本发明的多肽和/或支气管扩张剂分别的可吸入形式，可以是将本发明的多肽或支气管扩张剂雾化(例如用雾化器)而获得的气溶胶，其中二者分别存在于(本发明的)组合物中。或者，本发明的多肽和/或支气管扩张剂分别的可吸入形式可以是将本发明的多肽雾化(例如用雾化器)而获得的气溶胶，和将溶解于或悬浮于挥发性推进剂中的支气管扩张剂分解成小滴(例如用计量剂量吸入器(mdi))随后再快速蒸发这些小滴而获得的分别的气溶胶。由此，本发明的多肽和支气管扩张剂用两种不同(类型的)吸入器来进行施用，其中每种产生分别的可吸入形式。非限制性地，可以提议一下的组合：-用mdi吸入支气管扩张剂和用雾化器吸入本发明的多肽；-用雾化器吸入支气管扩张剂和用另一雾化器吸入本发明的多肽。在另一方面，本发明的多肽和支气管扩张剂依次施用。在此实施方案中，本发明的多肽和支气管扩张剂以可吸入的形式分别和依次施用。非限制性地，本发明的多肽的和/或支气管扩张剂的的可吸入形式可以是通过将本发明的多肽或支气管扩张剂雾化(例如用雾化器)而获得的气溶胶，其中二者分别存在于(本发明的)组合物中。或者，本发明的多肽和/或支气管扩张剂分别的可吸入形式，可以是将本发明的多肽雾化(例如用雾化器)而获得的气溶胶，和将溶解于或悬浮于挥发性推进剂中的支气管扩张剂分解成小滴(例如用计量剂量吸入器(mdi))随后再快速蒸发这些小滴而获得的分别的气溶胶。对于组合疗法的此种依次施用，本发明的多肽和支气管扩张剂应当存在于两种不同的(分别的)本发明组合物中，其分别载入至吸入器装置中，以便生成两种分别的、依次的可吸入形式。在此实施方案中，本发明的多肽和支气管扩张剂可以用两种不同(类型的)吸入器来施用。然而，使用两种不同的吸入器并非是必然需要的，因为在一些装置中(如例如在雾化器中)所述分别的组合物可以依次载入。非限制性地，可以提议以下组合：-用mdi吸入支气管扩张剂随后是用雾化器吸入本发明的多肽；-用雾化器吸入支气管扩张剂随后是用雾化器(其可以是相同的或不同的)吸入本发明的多肽；-用雾化器吸入本发明的多肽随后是用mdi吸入支气管扩张剂；-用雾化器吸入本发明的多肽随后是用雾化器(其可以是相同的或不同的)吸入支气管扩张剂。本发明多肽和支气管扩张剂依次施用的优选间隔将取决于所使用的本发明的多肽和支气管扩张剂(如上文所述)，并且可以包括从5分钟至24小时或更长，如例如5分钟、10分钟、15分钟、20分钟、30分钟、1小时、4小时、6小时、8小时、12小时等。在优选的方面，所述支气管扩张剂是短效的β2激动剂，如例如沙丁胺醇。在优选的方面，在用雾化器施用本发明多肽之前，用mdi施用支气管扩张剂，如短效的β2激动剂。例如，可以在施用本发明多肽之前15分钟施用支气管扩张剂(短效的β2激动剂)。例如，可以在施用本发明多肽之前15分钟，以200微克(例如喷两次100微克)的剂量将所述短效的β2激动剂如沙丁胺醇施用于幼儿。在另一优选的方面，在用雾化器施用本发明多肽之前用雾化器施用支气管扩张剂。在此优选的方面，本发明的多肽和支气管扩张剂可以用同一雾化器施用(也即每种本发明的多肽和支气管扩张剂可以存在于依次载入至雾化器的分离的组合物中)或者用两种不同的雾化器施用。在另一优选的方面，本发明的多肽和支气管扩张剂用雾化器同时施用。在此优选的方面，本发明的多肽和支气管扩张剂优选存在于装载入雾化器内的本发明的一个单一组合物中。又或者，本发明的多肽和支气管扩张剂存在于都装载入雾化器内的本发明的两个不同组合物中。实施例实施例1：用于在儿科群体中的剂量确定的模型的开发使用临床前以及预测的和测量的临床数据(表b-1)，以多步骤的拓展途径(图3；实施例2-10)，开发用于患病儿童的pbpk模型。基于从典型的体外微中和测定产生的ic90值的倍数进行剂量选择，以实现功效。如在微量中和测定中所测量的，seqidno:71对最不敏感的原型rsvb18537毒株的平均ic90值为~90ng/ml(n=20)。取高于此ic90100倍的值(9µg/ml)作为目标浓度，以将rsv临床分离物敏感性的可能差异计算在内。由于靶标(rsvf蛋白)不在人类中表达，并且不可能将功效从成人向儿童外推，剂量确定只能是基于建模方法。在本方法中，开发了模型，该模型考虑了幼儿的解剖学和生理学，生长和发育过程，如器官成熟、血流中的变化、机体组成、以及消除机制的个体发生学，包括呼吸系统中的变化(参见图1，以及下文进一步更详细的解释)。pbpk建模(barrett等人2012，clin.pharmacol.ther.92：40-9；khalilandläer2011，j.biomed.biotechnol.epub2011jun1)用于跨越儿科和成人的药物学。这是通过建立成人的吸入pbpk模型，随后将其拓展至儿童而完成的。使用软件pk-sim®(bayertechnologyservices，leverkusen，germany；www.pk-sim.com，版本5.1.3用于pbpk模型构建，而版本5.2.2和5.3.2用于群体模拟)来构建所述pbpk模型。pk-sim®是商业可得的工具，其用于在实验室动物和人类中药物的pbpk建模。pk-sim®包括用于蛋白治疗剂和大分子的通用pbpk模型(图2)。对于pk-sim®中执行的一般pbpk模型结构的详细描述参见willmann等人(2007，j.pharmacokinet.pharmacodyn.34：401-431；2005，1：159-168；2003，biosilico1：121-124)。使用此模型来构建用于静脉(iv)施用的pbpk模型和用于肺部施用的基础模型。为了描述从肺泡腔的吸收，将代表肺泡衬液(alf)的另外的室插入由pk-sim®输出的标准全身pbpk模型的肺部(图2)。所述肺泡衬液含有吸入后沉积在肺泡腔中的剂量的量。从肺泡表面积和肺泡衬液厚度的文献值计算对不同物种的所述alf室的体积(tschumperlin和margulies1999，j.appl.physiol.，86：2026-33；patton1996，advanceddrugdeliveryreviews19：3-36；bastacky等人1995，j.appl.physiol.79：1615-28)。假定由于对所吸入的水的快速重吸收，alf室的体积在气溶胶的吸入之后是恒定的。还将连接肺泡腔与肺组织(间质组织)的扩散交换途径插入至所述模型中。扩散速率通过以下的一阶方程来计算：dn/dt=palv*aalv*(calf–cint)且n：药物的量palv：肺泡通透性(上皮细胞屏障)。将该参数值与大鼠中吸入后的血浆浓度-时间谱拟合。aalv：来自文献的肺泡表面积。calf：alf中药物的浓度。cint：肺间质中的药物的浓度。在吸入后，气溶胶颗粒沉积于呼吸道的各个区域。为了评估在吸入seqidno:71后，沉积在下呼吸道中的分数，使用并入pbpk模型的专用工具，多路径粒子剂量测定(mppd)v2.11(2002-2009，详细描述可见于http://www.ara.com/products/mppd.htm)，对不同儿科年龄组的气溶胶沉积进行了拓展。所述mppd模型是由appliedresearchassociates,inc.和美国哈姆纳健康科学研究院(thehamnerinstitutesforhealthsciences，usa)，与荷兰国家公共健康与环境研究院(rivm)，以及荷兰住宅、空间计划及环境部合作开发的。其允许对于不同的儿科年龄组，以及对于不同大小的颗粒，来描述头部、气管支气管和肺泡区中的平均区域沉积、以及每个气道等级的平均分布。总的来说，区域沉积取决于肺的形态学(其是年龄特异的)、颗粒性质(大小和密度分布)以及呼吸模式(频率，容积)。由此，所述mppd工具计算对于不同大小的颗粒，气溶胶在成人和儿童(年龄：3、21、23和28个月，3、8、9、14和18岁)的呼吸道中的沉积。使用通过气道或气道分叉内的扩散、沉降和压紧，从理论上衍生的沉积效率，来计算沉积。使用经验效率函数确定头部对气溶胶的过滤。实施例2：pbpk模型评估：pbpkiv模型使用以下信息建立pbpkiv模型：i)关于seqidno:71的物化特征的化合物特异性的信息，ii)来自大鼠中的初始pk研究(表b-1：研究1)的数据，iii)来自大鼠中的毒性研究(表b-1：研究2)的数据，以及iv)iv施用后在狗中的心血管安全性药物学研究(表b-1：研究3)。这个第一水平的模型构建(iv模型)考虑分布和清除过程。通过拟合实验血浆浓度谱评估两个参数：seqidno:71的流体动力学半径和肾清除率(cl)(图6a和b)。所获得的seqidno:71的流体动力学半径为2nm，其小于3.5nm的预期实验值。所述2nm的半径匹配三价多肽的单价单元的半径。参数鉴别之后所获得的小药物半径因而可以由多肽的弹性来解释。在大鼠中，最好的结果是用58%的肾小球滤过率(gfr)的肾cl获得的。实施例3：pbpk模型评估：在大鼠中的肺部递送为了解释吸收过程，在第二水平的模型构建中对肺部递送进行了建模。通过添加实施例1中所述的肺室，将使用如实施例2中所述的2mm的流体动力学药物半径和58%的gfr的肾清除率的iv应用模型，扩展至肺部吸收。此部分是基于来自在大鼠中进行的单一剂量(表b-1：研究1)和重复剂量毒性研究(表b-1：研究4)的实验血浆浓度-时间谱以及肺中局部药物量而建立的。将肺泡通透性与沉积在肺泡吸收腔中的剂量分数拟合以匹配在大鼠中肺部施用后的实验血浆浓度-时间谱(表b-1：研究1)(图7)。所述实验数据与模拟曲线匹配良好，产生了4.58e-9cm/min的肺泡通透性palv以及0.37%的沉积在肺泡吸收腔中的剂量分数。使用相同的模型比较seqidno:71在alf吸收室中的模拟量与支气管肺泡灌洗液(balf)中实验发现的量(图8)。对所有剂量，seqidno:71的计算量均匹配实验值，且模拟的半衰期仅比观察到的稍大。对于重复剂量研究的模拟(表b-1：研究4)，所使用的肺泡通透性的值与上述单一剂量研究相同(4.58e-9cm/min)。在调节沉积于肺泡吸收腔中的剂量分数后，对于每天一次肺部应用进行14天后的seqidno:71血浆浓度曲线的模拟，产生了与第1天和第14天的实验数据出色的匹配(图9)。与此前的研究相比，需要假定沉积的剂量分数的不同数值，以获得合理的拟合(对于15mg/kg是1.8%、对于50mg/kg是0.93%以及对于150mg/kg是0.47%)。随着气溶胶颗粒直径的增加而更小的肺泡沉积的趋势可以解释不同剂量组的不同血浆pk曲线。将使用与图9相同模型的alf吸收室中模拟的量，与支气管肺泡灌洗液(balf)中实验发现的量进行比较(图10)。模拟的曲线强烈偏离(幅度一个数量级)实验量。此种差异可以由balf数据中来自气管/支气管的贡献来解释，因为balf中的实验量含有来自整个呼吸道的贡献，而模拟量仅涉及肺泡吸收腔中的量。实验和模拟之间的偏差比研究1中大得多。这可以由研究4中较大的药物回收来解释，其可能是由于不同的balf取样过程(研究4中为整个肺，包括气管，而研究1中为右肺)造成的。实验balf数据的累积/半衰期得到模拟很好的描述，并且类似于血浆中的累积/半衰期。实施例4：pbpk模型评估：健康成年人中的肺部施用4.1第一个临床研究(表b-1：研究5)首先，在健康男性志愿者中的i期研究(表b-1：研究5)中评估seqidno:71吸入的安全性、耐受性和pk。所述i期研究包括在44个对象中的单一递增剂量部分，其中测试范围在2.1mg至210mg的6个剂量水平。随后，在16个健康男性中起始多剂量部分，其中对象分别以150mg和210mg的每天总剂量，每天两次接受seqidno:71，进行5天。4.2模型评估通过调适生理学参数，如来自人类pk-sim®数据库的器官体积、器官中的血液和淋巴流，将大鼠中的pbpk模型拓展至人类。如之前所有在大鼠中的计算，将seqidno:71的流体动力学半径和肾脏cl设置为2nm和58%的gfr。通过与大鼠中相同的机制来描述肺泡吸收。假定alf的厚度和肺泡通透性与大鼠的相同，而将肺泡表面积拓展至102.2m2(patton1996，advanceddrugdeliveryreviews19：3-36)。来自这个在人类中的第一个临床研究的人类血浆pk数据(表b-1：研究5)被用于评估所述模型和拓展原理。沉积于肺泡腔中的分数必须与实验数据拟合。然而，此参数的改变(等价于有效剂量的改变)仅仅导致模拟的谱沿浓度轴的移位，而谱的形状得以保留。因而，模拟对于浓度谱(包括通过吸收率确定的末端半衰期)具有预测性。在图11中，将模拟的seqidno:71血浆浓度-时间谱与来自单一健康志愿者在肺部施用seqidno:71后的实验数据进行比较。对于沉积在肺泡腔中的剂量分数，使用15%的值获得了最佳拟合结果。图11显示从大鼠模型拓展而来的pbpk模型非常好地预测了在健康人类志愿者中的吸收率，并且因此可以假定在人类中用于肺泡通透性的值与大鼠中相同。实施例5：pbpk模型评估：健康成年人类中的iv和肺部施用5.1第二个临床研究(表b-1：研究6)进行另一个i期研究，以评估通过吸入施用至健康成年男性志愿者的单一和重复剂量的seqidno:71的pk。seqidno:71的单一i.v.施用也包括在该研究中，以提供用于随后的pk建模和模拟的额外的信息。对44个对象进行随机化和治疗：23个对象接受seqidno:71单一剂量吸入，15个对象接受seqidno:71多剂量吸入，以及6个对象接受seqidno:71i.v.输注。该研究调查了当经口吸入或静脉施用时，局部seqidno:71的浓度(在支气管和肺泡腔中)和/或全身seqidno:71的浓度。5.2模型评估使用来自iv和肺部施用后的第二个临床试验的尿液和肺泡衬液(alf)数据，对该模型进行进一步的验证和优化(表b-1：研究6)。将使用第一次临床来评估的相同的人类模型(表b-1：研究5)，与第二个临床研究的iv施用后的血浆浓度-时间曲线和尿液排出数据进行了比较(表b-1：研究6)。对于施用后的前12小时，用拓展自大鼠的人类模型进行的模拟与实验iv数据匹配很好。然而，模拟低估了施用后24h的实验数据点，并且此后的时间点看起来也低估(图12)。经实验发现的尿液中的药物量(6-23%)比模拟中少得多(91%)(图13)。因而，模型的肾清除率(58%的gfr)似乎过大。经过考虑在此第二个临床研究中可得的尿液数据(表b-1：研究6)，必须降低模型的肾清除率。为了仍然描述血浆浓度时间曲线，必须要将另外的清除方法引入至所述模型中。还使用来自第二个临床研究的吸入数据(表b-1：研究6)评估原始开发的平均人类模型(图14)。使用未经任何变化(包括沉积在肺泡腔中的15%的剂量分数)的原始模型。用尿素稀释方法校正用于比较的实验alf浓度(conte等人1995，antimicrob.agentschemother.39：334-8)。吸入后模拟的血浆浓度-时间曲线良好匹配实验数据。在初始阶段，实验血浆浓度稍微被低估。在初始阶段，来自第一个临床研究的实验血浆浓度(表b-1：研究5)也稍微低于来自第二个临床研究的那些(表b-1：研究6)。模拟alf浓度也与实验数据相符，虽然实验数据稍微被高估，也即平均模型匹配较高的个体alf浓度。实施例6：pbpk模型优化6.1模型优化在模型评估之后对以下模型特征进行了优化：1.对流体动力学半径进行了调适，以便更好地描述晚于iv施用后24h的时间点的血浆浓度时间谱。2.降低了肾清除率，以匹配尿液中实验观测的剂量分数。对于具有大约40kda大小的蛋白，文献中报道肾清除率<10%(galaske等人1979，kidneyint.16：394-403；maack等人1979，kidneyint.16：251-70)，证明了肾清除率的降低。为了能够在iv施用后依然描述观测的血浆浓度，将所有血浆室内的另外的第一级清除率方法添加至少是模型中。所述另外的清除率方法可归因于血浆蛋白酶。将第一级速率常数与iv施用后的血浆浓度谱拟合。3.对于吸入模型，肺泡厚度的另一文献被用于更好地描述吸入后的alf浓度。在原始建立的模型中，使用了如patton1996(advanceddrugdeliveryreviews19：3-36)的综述中所引用的0.068µm的肺泡厚度。0.2µm的值被用于优化的模型。这另外的值同样由patton所引用。同样的值经独立地报道为大鼠肺泡厚度的面积加权的平均值(dall'acqua等人j.biol.chem.281：23514-24)。使用较大的0.2µm的厚度，导致增加的肺泡体积以及因此降低的肺泡浓度。如果肺泡通透性相应地提高了，整体吸收率以及因此的全身浓度并未改变。因而，在优化的模型中使用了以下经拓展的肺泡通透性：4.58e-9cm/minx0.2/0.068=1.35e-8cm/min。用优化的模型进行的模拟产生了与第二个临床研究(表b-1：研究6)由很好匹配的平均血浆和尿液浓度-时间谱(图15和16)。对于拟合的流体动力学半径，获得了2.46nm的值，对于肾清除率5%的gfr的值以及对于另外的血浆清除率常数0.0142min-1。使用肺泡厚度的另一文献值，对实验alf浓度进行了很好的描述(图17)。对于用优化的模型的模拟，肺泡腔中沉积的剂量分数还另外经稍微调适(10.6%)，以便获得对血浆浓度更好的描述。6.2用优化的模型群体模拟为了评估优化的成人模型的群体模拟，将群体模拟结果与来自第二个临床研究的(表b-1：研究6)以及第一临床研究的(表b-1：研究5)pk数据进行了比较。生成了包含1000个欧洲icrp2002种群男性个体的群体，其具有在所述两个研究的范围内均匀分布的人口统计学参数。seqidno:71个体实验的血浆浓度-时间谱与累积尿液排出的比较(表b-1：研究6)对比来自iv应用后群体模拟的结果在图18中显示。群体模拟与实验血浆和alf浓度(来自第二个人类研究(表b-1：研究6)单一吸入和多次吸入后)的比较分别在图19和图20中显示。使用优化模型的群体模拟也通过与来自第一个人类研究的数据(表b-1：研究5)比较而重新进行了评估(图21)。对于两个研究，群体模拟都与实验数据有相当好的一致。实施例7：将成人pbpk模型拓展至健康儿童随后将优化的成人pbpk模型外推至儿童，其中是通过拓展(i)解剖学和生理学参数，(ii)清除过程，和(iii)吸收过程，大多是基于可得自文献的已有参数和方程(edginton等人2006，clin.pharmacokinet.45：1013-1034；rhodin等人2009，pediatr.nephrol.24：67-76；hislop等人1986，earlyhum.dev.13：1-11)。为了评估肺泡吸收腔中沉积的吸入剂量分数，使用了mppd工具。年龄3个月、21个月、23个月和28个月在mppd工具中是可用的。所使用的颗粒大小分布是2.63µmmad(质量中值直径)和1.46的几何标准差。静息鼻吸入用于呼吸参数。对于其它参数，使用了mppd默认设置。肺泡腔中的吸入剂量分数经计算为大约20%(图4)。使用了具有人体测量学和生理学参数(例如器官体积、血流、gfr)的标准变异性的儿科pk-sim群体。生成了8个年龄组(每个具有1000个体以及两种性别的等比例)的虚拟高加索人群体，以用于评估群体药代动力学。所述年龄组为：0-1周、1-2周、2-4周、1-3个月、3-6个月、6-9个月、9-12个月、12-24个月、2-3岁、3-4岁、4-5岁和5-6岁(排除早产儿)。三个另外的参数在群体模拟中有变化：肺泡通透性、肺泡腔中沉积的剂量分数和另外的血浆清除过程。对于所有三个参数，假定了对数分布。对于肺泡通透性(几何平均：1.35e-8cm/min)使用了1.4的几何标准差，其是从对第一个人类成人临床研究(表b-1：研究5)的拟合评估的。对肺泡腔中的剂量进行选择以达到肺泡目标浓度。2的几何标准差用于所有年龄组肺泡腔中的剂量分数。使用了每天一次吸入达5天作为用于模拟的应用方案(吸入时间：每次吸入3min)。对于多剂量方案的每次施用，肺泡腔中的剂量分数的值取自从其它施用的值的独立分布。对于另外的血浆清除，使用1.1的几何标准差来用于成人群体(几何平均：0.0142min-1)。根据建模目标，对剂量进行了选择，以便在整个给药间隔95%的个体会达到至少9µg/ml(100*ic90)。对于剂量，在pbpk模型中推动全身以及局部pk的首要参数看起来是肺泡吸收腔中药物的量。基于pbpk模拟，对于所有年龄组在肺泡腔使用0.024mg/kg体重的量(沉积剂量)达到了9µg/ml的目标浓度。由于肺泡表面积(以及与其相关的肺泡体积)，随着体重而拓展，因而肺泡浓度对于体重归一化的剂量基本上是不依赖于年龄的。肺泡吸收腔0.024mg/kg体重的沉积剂量因而用于血浆浓度的所有模拟(图22)。实施例8：将成人pbpk模型拓展至患病儿童继而将成人pbpk模型拓展至患病儿童，应用于解释与疾病相关的潜在生理学差异。由于将rsv-感染的儿童与健康儿童进行直接比较的文献数据是稀少的，进行了敏感性分析以用于在模型开发过程中对关键参数进行调适/拟合(肺泡腔中沉积的部分、清除率、肺泡通透性、肺泡腔的厚度、和流体动力学药物半径)。基于可用的非临床结果、可用的文献(kilani等人2004,chest126：186-91；singh等人2007,am.j.physiol.lungcellmol.physiol.293：l436-45；domachowskeandrosenberg1999,clin.microbiol.rev.12：298-309；johnson等人2007,mod.pathol.20：108-19)，并考虑已经并入模型中的pk指数的变异性，不需要对清除率和/或从肺泡腔的吸收进行具体的改变来解释rsv感染。对于肺泡腔中沉积的部分，考虑可变呼吸模式反应rsv感染的mppd计算，被用于评估感染rsv的儿童肺泡腔中沉积的吸入剂量分数。在第一种情形中，使用了由totapally等人2002(crit.care6：160-5)观测的小于1岁儿童的呼吸频率和潮气量。在第二种情形中，使用了mundt等人2012(isrnpediatr.2012p.721295)等人用来模拟细支气管炎的作用时所利用的呼吸频率和潮气量相同的相对变化(采用各自的mppd默认值)。mppd工具以受迫呼吸模式而预测的在肺泡腔中沉积的部分与正常呼吸的结果相比较低，尤其是对于使用mundt等人2012所采用的呼吸模式的情形(图5)。该模拟显示出代表rsv-感染的婴儿和幼童(5-24个月的年龄范围)的呼吸模式导致了在下呼吸道中seqidno:71的吸入量的~10%沉积(7-13%，取决于年龄和颗粒大小)。相应地，将会需要吸入0.24mg/kg的剂量(吸入剂量)，来在一次施用后再下呼吸道达到0.024mg/kg的沉积剂量。实施例9：用于治疗幼儿中的下呼吸道rsv感染的剂量确定认为振动筛式雾化器是用于将免疫球蛋白单可变结构域如seqidno:71雾化的最适宜的技术(wo2011/098552)。在进一步描述的研究中(参见实施例11)，使用调适为儿科用途的fox雾化器(activaero，现在是vectura，germany)来施用seqidno:71。所述雾化器总是以2l/min的额外空气或o2流来使用，并且装配有儿科面罩(2种大小)。使用sophia解剖学婴儿鼻喉(saint)模型来产生特异地用于以上述雾化器来施用seqidno:71的数据(janssens等人2001)。thesaint模型是9个月大儿童上气道的解剖学正确的铸型/代表，使用光固化立体成型技术构建并且用于在幼儿中研究气溶胶沉积。可以对要用于临床设定的施用条件进行接近地模拟，包括代表健康和rsv-感染的婴儿和幼童的呼吸模式。结果显示出，从填充至雾化器的总剂量中，预期有大约20%被吸入。为确保0.24mg/kg吸入剂量，填充至雾化器的剂量因此将会是1.2mg/kg(标称剂量)。依照其它吸入产品，将seqidno:71的施用剂量对于(进准的)体重类别(6个剂量组，以1或2kg的增量步骤，参见表b-2和表b-6)进行标准化。这达到安全边际的支持，并且也考虑了准确测量并将适宜的量填充(用(0.01ml)的带刻度1ml注射器)至雾化器中的可行性。体重类别的适宜性也经过了另外的pbpk模拟的确认。考虑到装置的规格，对应于基于重量类别的施用时间在45秒(5.0-6.0kg对象)至120秒(14.1-16.0kg对象)之间变化。~7µl的残余体积(不取决于填充体积)残留在雾化器的储库中，并且已经考虑到表b-2中所列填充体积之内。考虑到装置的规格，对应于基于重量类别的施用时间在30秒(3.5-3.9kg对象)至150秒(16.1-19.0kg对象)之间变化。~7µl的残余体积(不取决于填充体积)残留在雾化器的储库中，并且已经考虑到表b-6中所列填充体积之内。实施例10：群体模拟在如实施例9所述的六个剂量组中进行了群体模拟，在幼儿(年龄5-24个月)中评估血浆和alf浓度。对表不同的施用方案进行了模拟：·三次施用每天一次(0、24、48h)；·两次施用每天一次(0和24h)；·单次施用(0h)；对于0、24、48h施用计划的血浆和alf浓度时间谱分别在图23和图24中给出。在72h(3x24h)期间，第一次吸入后，对于95%的个体肺泡浓度大于14µg/ml。这大于此前的模拟(9µg/ml)，这是由于沉积部分缩小的几何标准差以及六个剂量组的给药(由于组内的体重范围，肺泡腔中的剂量可稍微大于0.024mg/kg)。在最后一次施用后仅34h，第5浓度百分位降低至低于9µg/ml的目标浓度。对于0-24h施用计划的血浆和alf浓度时间谱分别在图25和图26中给出。对于0-24h施用计划，总群体的第5百分位肺泡浓度在57小时后降低至低于9µg/ml的目标浓度。在第一次施用后的72小时期间，其在20%的时间里低于9µg/ml的目标浓度。总群体的中值肺泡浓度在91小时后降低至低于9µg/ml的目标浓度。对于单一剂量施用计划的血浆和alf浓度时间谱分别在图27和图28中给出。对于单一剂量，总群体的第5百分位肺泡浓度在31小时后降低至低于9µg/ml的目标浓度。在第一次施用后的72小时期间，其在57%的时间里低于9µg/ml的目标浓度。总群体的中值肺泡浓度在59小时后降低至低于9µg/ml的目标浓度。在第一次施用后的72小时期间，其在18%的时间里低于9µg/ml的目标浓度。实施例11：在婴儿和幼童中的rsv感染治疗如上文所述，在儿童中，预计seqidno:71在肺泡吸收腔中的量(0.024mg/kg体重)会在肺泡目标腔中达到预先确定的seqidno:71浓度(9µg/ml)。这些预测是使用pbpk建模方法以经验证的模型(掺入了来自若干研究和来自若干物种的观测数据)来进行的。进行了研究以评估seqidno:71肺部施用于住院且诊断有下呼吸道rsv感染的婴儿和幼童的此剂量方案的安全性和耐受性。另外，还评估了seqidno:71的此剂量方案对于临床效果、药代动力学(pk)、药物动力学(pd)、和seqidno:71的免疫原性的影响。11.1研究设计在住院且诊断有呼吸道合胞病毒下呼吸道感染(其它方面健康)的婴儿和幼童(年龄5个月至小于24个月或者年龄3个月至小于24个月)中进行了多中心研究，来评估(在标准护理之外)经吸入施用的seqidno:71的安全性、耐受性和临床活性。该研究由2部分组成：开放式标记导入部分，随后是双盲安慰剂对照部分。依照可应用的committeeformedicinalproductsforhumanuse(chmp)的指引，任命了独立数据监测委员会(dmc)。·所述研究的开放式标记导入部分(组i，n=5)：初始5个对象纳入了开放式标记导入部分，并仅接受活性的研究药物(seqidno:71)。在起始研究的双盲安慰剂对照部分之前，将可从研究的此部分得到的数据由dmc审阅。·所述研究的双盲安慰剂对照部分(组ii，n=30)：在得到dmc的正面推荐之后，将30个对象纳入随后的研究的双盲安慰剂对照部分。对象随机分配以2:1的比例接受seqidno:71或安慰剂(n=20接受seqidno:71，n=10接受安慰剂)。在施用研究药物之前大约15分钟，施用了短效的β2-激动剂沙丁胺醇的吸入剂量。经剂量计量的吸入器(有间隔区)给予了两喷(2x100µg)。在标准护理之外，seqidno:71经吸入来施用，每天一次达连续3天。使用专门的振动筛式雾化器(调适为儿科用途的fox装置)来施用seqidno:71或匹配的安慰剂。要填充至雾化器中适宜体积的总结(每个体重类别)以及适宜的雾化时间在表b-2中示出。seqidno:71以配制缓冲剂(nah2po4/na2hpo410mm，nacl130mm，ph7.0)中50mg/mlseqidno:71的浓度存在。以固定的2-l/min空气(若需要时，o2，由研究者基于对象对o2的需求来决定)流来使用雾化器。对每个对象的计划研究期间为大约15天(包括筛选)，聚焦于准确的感染期(并考虑了研究药物的暴露和seqidno:71的半衰期)。对每个对象的最大研究药物治疗期间为3天。在施用研究药物之前的24小时内，对于对象的资格进行筛选。对象连续3天每天接受一次研究药物的剂量。对于研究药物治疗期之后仍未出院的对象，预先安排额外的给药后随诊。在离开医院前安排出院随诊(如果可行的话)。安排一次院外随诊(第14天)。11.2主要安全性评估通过治疗突发不良事件(teae)、临床实验室测试结果(临床化学和血液学)、体检结果(包括肺部听诊)以及心率继而外周毛细血管o2饱和(spo2)等来对安全性进行评估。11.3主要临床活性评估通过进食、呼吸率(超过1-分钟间隔)、哮鸣(在呼气/吸气期间)、湿罗音/捻发音(肺部听诊勤俭)、白天咳嗽、夜间咳嗽(引起的睡眠障碍)、呼吸肌收缩(锁骨上、肋间、和肋下)、和整体表现(活动性、刺激、对环境的兴趣、和反应性)等来对临床活性进行评估。基于研究期间所测量的临床活性参数，计算了另外的得分如临床反应、呼吸窘迫评估仪器(rdai)得分和呼吸评估变化得分(racs)。11.3探查性药代动力学在血清中评估了seqidno:71的全身浓度，作为用于评估局部(肺部)浓度的替代。11.4探查性药物动力学在经鼻拭子获得的样品中评估病毒负载，作为探查性pd参数。其它探查性生物标志物(血清)包括白细胞介素-8(il-8)和krebsvondenlungen(kl-6)。11.5探查性免疫原性对于潜在的免疫原性(ada)也进行了全身评估(血清)。实施例12：seqidno:71纳米抗体在新生羔羊rsv-感染模型中的体内功效使用新生羔羊rsv-感染模型来评估seqidno:71(通过吸入递送之后)的体内功效。总共进行了三个独立的功效研究。简言之，用parilcsprint™雾化器(parirespiratoryequipment,inc.，lancaster，pa，usa)，通过雾化在第0天以rsv感染2-5日龄的初乳剥离(colostrum-deprived)的羔羊。以16psi(philipsrespironicsaircompressor,andover,ma,usa)，将三份2-ml的含病毒介质(或对照介质)的等分试样在23分钟的时间段以4l/min施用于每个动物，导致每只羔羊总共吸入大约6ml。对每只羔羊使用相等的病毒接种剂量(在具有20%w/v蔗糖的介质中，1.27x107ffu/ml的hrsvmemphis37毒株)。seqidno:71治疗在感染后第1天(在1个研究中)或第3天(在2个研究中)开始，并每天重复直至感染后第5天。使用基于aeroneb®solosystem(aerogenltd，galway，ireland)的振动筛式，通过雾化进行施用。总共测试了3个剂量水平，并对应于11mg(低剂量)、36mg(中剂量)和110mg(高剂量)递送的seqidno:71剂量。每天监测羔羊的整体健康并记录呼吸速率、心率、体温、血氧饱和、体重、哮鸣和呼气尝试。在接种后第6天收集了呼吸道组织和支气管肺泡灌洗(bal)液用于对病毒病变、肺部病毒滴度、病毒抗原和肺部组织病理学的定量。所有的评估如表b-3和b-4中所述进行。在经rsv-感染的溶媒-治疗的羔羊中，对于所进行的所有研究，在第6天，病毒rna和可培养的病毒都一直存在于所有肺叶中(表b-5)。另外，裸眼肺检查揭示涉及所有肺叶的~12-40%的广泛病毒病变，其与支气管/肺泡中病毒抗原的表达以及组织学实变并发(图29和30)。在感染后第3-4天，检测到第一个感染的临床迹象，其包括呼吸速率和呼气尝试、哮鸣和不适的增加，但是这些症状在研究之间是可改变的。在用seqidno:71治疗的组中，向羔羊施用三种不同的剂量。无关于治疗的起始日期，每种剂量水平都强烈降低病毒滴度(表b-5)、病毒抗原表达(图29)、裸眼可见病毒病变和组织病理学得分(图30)。另外，虽然临床迹象以不同的方式发作，对于所有测试的剂量都观测到对综合临床得分的积极效果(图31)。对于所有的剂量，来自组合的所有动物的肺上皮细胞衬液中的平均seqidno:71浓度接近或高于9µg/ml(图32)。此9µg/ml定义为来自使用rsv-b原型毒株(18537)的体外中和测定的ic90x100。所述memphis37毒株的数据显示出，其比rsv-b18537敏感~6倍。作为结论，当每天递送于新生羔羊，进行3天或5天时，seqidno:71治疗对rsv感染-诱导的改变发挥了有益的作用。并未显现出预期中的剂量依赖性，因为在所有剂量下，在目标组织(elf)中达到的浓度都达到或高于预期给予完全功效的目标浓度。序列listing<110>ablynxnvablynxnv<120>rsv感染的治疗<130>p8374pc00/34074.1<150>us62/062,469<151>2014-10-10<150>ep14193094.1<151>2014-11-13<150>us62/074,842<151>2014-11-04<150>us62/067,096<151>2014-10-22<160>101<170>patentinversion3.5<210>1<211>126<212>prt<213>人工序列<220><223>纳米抗体序列<400>1gluvalglnleuvalgluserglyglyglyleuvalglnalaglygly151015serleuserilesercysalaalaserglyglyserleuserasntyr202530valleuglytrppheargglnalaproglylysgluargglupheval354045alaalaileasntrpargglyaspilethrileglyproproasnval505560gluglyargphethrileserargaspasnalalysasnthrglytyr65707580leuglnmetasnserleualaproaspaspthralavaltyrtyrcys859095glyalaglythrproleuasnproglyalatyriletyrasptrpser100105110tyrasptyrtrpglyargglythrglnvalthrvalserser115120125<210>2<211>126<212>prt<213>人工序列<220><223>纳米抗体序列<400>2aspvalglnleuvalgluserglyglyglyleuvalglnalaglygly151015serleuserilesercysalaalaserglyglyserleuserasntyr202530valleuglytrppheargglnalaproglylysgluargglupheval354045alaalaileasntrpargglyaspilethrileglyproproasnval505560gluglyargphethrileserargaspasnalalysasnthrglytyr65707580leuglnmetasnserleualaproaspaspthralavaltyrtyrcys859095glyalaglythrproleuasnproglyalatyriletyrasptrpser100105110tyrasptyrtrpglyargglythrglnvalthrvalserser115120125<210>3<211>126<212>prt<213>人工序列<220><223>纳米抗体序列<400>3gluvalglnleuleugluserglyglyglyleuvalglnproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyglyserleuserasntyr202530valleuglytrppheargglnalaproglylysglyargglupheval354045alaalaileasntrpargglyaspilethrileglyproproasnval505560gluglyargphethrileserargaspasnalalysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleualaprogluaspthralavaltyrtyrcys859095glyalaglythrproleuasnproglyalatyriletyrasptrpser100105110tyrasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserser115120125<210>4<211>126<212>prt<213>人工序列<220><223>纳米抗体序列<400>4gluvalglnleuleugluserglyglyglyleuvalglnproglygly151015serleuargilesercysalaalaserglyglyserleuserasntyr202530valleuglytrppheargglnalaproglylysglyargglupheval354045alaalaileasntrpargglyaspilethrileglyproproasnval505560gluglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleualaprogluaspthralavaltyrtyrcys859095glyalaglythrproleuasnproglyalatyriletyrasptrpser100105110tyrasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserser115120125<210>5<211>126<212>prt<213>人工序列<220><223>纳米抗体序列<400>5gluvalglnleuleugluserglyglyglyleuvalglnproglygly151015serleuargilesercysalaalaserglyglyserleuserasntyr202530valleuglytrppheargglnalaproglylysglyargglupheval354045alaalaileasntrpargglyaspilethrileglyproproasnval505560gluglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargprogluaspthralavaltyrtyrcys859095glyalaglythrproleuasnproglyalatyriletyrasptrpser100105110tyrasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserser115120125<210>6<211>126<212>prt<213>人工序列<220><223>纳米抗体序列<400>6aspvalglnleuleugluserglyglyglyleuvalglnproglygly151015serleuargilesercysalaalaserglyglyserleuserasntyr202530valleuglytrppheargglnalaproglylysglyargglupheval354045alaalaileasntrpargglyaspilethrileglyproproasnval505560gluglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargprogluaspthralavaltyrtyrcys859095glyalaglythrproleuasnproglyalatyriletyrasptrpser100105110tyrasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserser115120125<210>7<211>126<212>prt<213>人工序列<220><223>纳米抗体序列<400>7gluvalglnleuleugluserglyglyglyleuvalglnproglygly151015serleuserilesercysalaalaserglyglyserleuserasntyr202530valleuglytrppheargglnalaproglylysglyargglupheval354045alaalaileasntrpargglyaspilethrileglyproproasnval505560gluglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr65707580leuglnmetasnserleuargproaspaspthralavaltyrtyrcys859095glyalaglythrproleuasnproglyalatyriletyrasptrpser100105110tyrasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserser115120125<210>8<211>126<212>prt<213>人工序列<220><223>纳米抗体序列<400>8gluvalglnleuleugluserglyglyglyleuvalglnproglygly151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