本发明涉及一种治疗和/或预防猪腹泻的中药组合物及其制备方法、包括该中药组合物的中药制剂，以及其在制备治疗和/或预防猪腹泻的药物中的用途。
背景技术：
猪腹泻是集约化、规模化养猪生产条件下的一种典型的多因素性疾病，也是引起仔猪死亡的重要原因。临床上普遍采用抗生素等化学药，或在饲料中添加这些药物进行治疗，但这些药物长期使用可使病原微生物产生耐药性，使养殖成本增加，疾病防控难度加大，且造成畜产品中药物残留，损害人类自身健康。近年来，治疗仔猪腹泻的中药研发成为热点，但有些治标不治本，有些价格昂贵，有些成分复杂不利于质量控制。因此有必要开发疗效确切、安全方便、价格低廉、质量可控的治疗仔猪腹泻的纯中药复方药物。
技术实现要素：
为实现上述目的，本发明提供一种用于治疗仔猪腹泻的中药组合物，其特征在于该中药组合物由以下成分组成：地锦草200-2000份、儿茶10-200份、乌梅10-100份、焦山楂10-200份、茯苓20-400份、白芍10-200份、甘草10-100份。
优选地，所述地锦草为1000份、儿茶44份、乌梅60份、焦山楂90份、茯苓180份、白芍90份、甘草36份。
本发明的另外一方面提供上述中药组合物的制备方法。
所述的中药组合物的提取方法，其特征在于，所述的提取方法包括以下步骤：
1)取地锦草、乌梅、焦山楂、白芍、茯苓和甘草用水提取，提取液加入壳聚糖胶体溶液，滤过得到提取液；
2)取儿茶用水提取，得到儿茶提取液；
合并1)和2)得到中药组合物的提取物。
优选地所述的所述的壳聚糖胶体溶液加入量为提取液的10％(v/v)-40％(v/v)。
优选地，所述的壳聚糖胶体溶液的壳聚糖含量为1％(w/v)。
本发明另外一方面是提供一种中药制剂，所述的中药制剂包含中药组合物的提取液，所述的中药组合物组成为：地锦草200-2000份、儿茶10-200份、乌梅10-100份、焦山楂10-200份、茯苓20-400份、白芍10-200份、甘草10-100份。
优选地，所述的中药组合物由地锦草1000份、儿茶44份、乌梅60份、焦山楂90份、茯苓180份、白芍90份和甘草36份组成。
所述的中药提取物的制备方法、提取方法包括以下步骤：
1)取地锦草、乌梅、焦山楂、白芍、茯苓和甘草用水提取，提取液加入壳聚糖胶体溶液，滤过得到提取液；
2)取儿茶用水提取，得到儿茶提取液；
合并1)和2)得到中药组合物的提取物。
优选地，所述的壳聚糖胶体溶液加入量为提取液的10％(v/v)-40％(v/v)。
优选地，所述的壳聚糖胶体溶液的壳聚糖含量为1％(w/v)。
本发明的中药制剂还包括药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂，所述载体优选为盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇或其组合。
本发明的中药制剂，其特征在于，所述中药制剂为药丸、片剂、包有肠溶衣的片剂、薄膜片剂、层片剂、持续释放制剂、长效制剂、糖锭剂、栓剂、膏药、糊剂、颗粒剂、微胶囊、微制剂、纳米制剂、胶囊、肠溶衣胶囊、舌下含片、冻干粉、粉末、软膏剂、油膏剂、凝胶剂、霜剂、分散剂、脂质体、糖浆、甘香洒剂、溶液、用于向眼、耳或鼻给药的滴液、悬浮液、体液、茶剂、口服液、酒剂或注射液，优选为颗粒剂、片剂、冻干粉、栓剂、胶囊、舌下含片、口服液或注射液，最优选为颗粒剂、口服液或注射液。
作为本发明的另外一方面，本发明提供上述中药物组合物或中药制剂在猪病原性腹泻、非病原性腹泻、湿热型腹泻或者脾虚型腹泻药物中的应用。
优选地，所述的应用为所述的中药制剂作为制备治疗和/或预防猪湿热型腹泻药物中的应用。
优选地，所述的应用治疗和/或预防猪流行性腹泻药物中的应用。
本发明的再一个目的在于，提供上述中药组合物和/或上述中药制剂作为制备治疗和/或预防猪流行性腹泻的药物中的应用。
本发明的有益效果为：
1.本发明所述的治疗和/或预防猪腹泻的中药组合物制备方法简单、方便，节约了成本，在治疗和/或预防猪腹泻实际工作中，更能得到养殖户的认同。
2.本发明所述的制备方法能够提高有效成分的含量，从而使中药制剂疗效更为确切。
3.该制备方法获取的组合物质量可控，临床应用安全，用于猪病原性腹泻，非病原性腹泻、湿热型腹泻和脾虚型腹泻，具有很好的治疗作用，能降低发病死亡率，弥补现有疫苗和其他防治药物不能有效防治猪腹泻的不足，且长期使用不易造成畜产品中药物残留。
附图说明
图1.rt-pcr/pcr的检测结果，从左至右1.保育猪伪狂犬病毒rt-pcr；2.仔猪猪瘟病毒检测结果；3.仔猪流行性腹泻检测结果；4.m.dnamarkerdl2000
具体实施方式
如本发明所述的，术语“含有”、“包括”、“包含”、“主要由……组成”可以替换地使用，本发明的组合物或混合物中还可以含有并未指出的某些成分，即该术语是开放式的；而术语“由……组成”则表示仅由所指出的成分表示，但可以带有杂质，而该杂质只允许以通常的含量存在，即该术语是封闭式的。
如本发明所述的，“药学上可接受的”是指适用于人和/或动物而无过度不良副反应(如毒性、刺激和变态反应)，即有合理的效益/风险比的物质。
如本发明所用的术语“有效量”是指组合物和/或制剂治疗、缓解或预防目标疾病或状况的量，或是表现出可检测的治疗或预防效果的量。对于某一主体的精确有效量取决于该主体的年龄、体型和健康状况、病症的性质和程度、以及选择给予的治疗剂和/或治疗剂的组合。对于某给定的状况而言，本领域的技术人员可以用常规实验来确定该有效量。
出于本发明的目的，向主体施用有效量的本发明的活性物质。本发明的活性物质为本发明的中药组合物。此外，本发明的活性物质还可与其他治疗剂一起使用。
本发明的中药制剂还可含有任何药学上可接受的载体。术语“药学上可接受的载体”是指具有合理的效益/风险比的用于向主体施用治疗剂的载体。应理解的是，“药学上可接受的载体”也包括可用于保健品中的各种载体，其符合如下条件：本身不诱导产生对接受该制剂的个体有害的抗体，且施用后或给予保健品后没有过分的毒性。这些载体是本领域普通技术人员所熟知的。在《雷明顿药物科学》(remington’spharmaceuticalsciences，mackpub.co.，n.j.1991年)中可找到关于药学上可接受的载体的充分讨论。这类载体包括(但并不限于)：盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、佐剂、及其组合。
治疗性制剂中药学上可接受的载体可含有液体，如水、盐水、甘油和乙醇。另外，这些载体中还可能存在辅助性的物质，如润湿剂或乳化剂、ph缓冲物质等。
所述化合物或其药学上可接受的盐及其组合物可通过口服以及静脉内、肌内或皮下等途径给药；优选的是口服给药。固态载体包括：淀粉、乳糖、磷酸二钙、微晶纤维素、蔗糖和白陶土，而液态载体包括：无菌水、聚乙二醇、非离子型表面活性剂和食用油(如玉米油、花生油和芝麻油)，只要适合活性成分的特性和所需的特定给药方式。在制备药物组合物中通常使用的佐剂也可有利地被包括，例如调味剂、色素、防腐剂和抗氧化剂如维生素e、维生素c、bht和bha。
如本发明所述的，“病原性腹泻”是指由病原微生物如病毒、细菌、寄生虫等引起的猪腹泻。临床上最常见的是由流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、轮状病毒感染引起的水样腹泻和大肠杆菌感染引起的仔猪黄、白痢。“非病原性腹泻”是指由饲养环境、营养因素、断奶应激等非病原性因素引起的腹泻。
“湿热型腹泻”是中兽医理论中外感暑湿之邪、湿热蕴结肠内导致的腹泻，症状表现为水样便，或如水注、或有粘液、味臭、夹有不消化乳食，时有腹痛、口渴、肛门灼热发红等。“脾虚型腹泻”是中兽医理论中由脾虚引起的腹泻，症状表现为时泻时止或久泻不愈，粪中带水或水谷不化。
实施例
下列实施例中所使用的地锦草、儿茶、乌梅、焦山楂、茯苓、白芍和甘草为购自洛阳康鑫饮片有限公司的地锦草、儿茶、乌梅、焦山楂、茯苓、白芍和甘草饮片，它们经检验符合《中华人民共和国兽药典》项下的规定，其它试验材料为本领域技术人员的常规试验选择。
实施例一
1.1.配方
按重量份数(每份为1g时)称取地锦草1000份、儿茶44份、乌梅60份、焦山楂90份、茯苓180份、白芍90份、甘草36份。1.2.制备方法
第一步：取地锦草、乌梅、焦山楂、白芍、茯苓、甘草加10倍量水煎煮3次，每次1小时，滤过，滤液合并，在60℃-70℃减压浓缩至相对密度1.08-1.10(70℃)，于70℃搅拌加入1％(w/v)壳聚糖胶体溶液，加入量为药液的30％(v/v)，充分搅拌20min，70℃静置12h，滤过；儿茶加6倍量水煎煮二次，每次1小时，煎液滤过，滤液合并，在60℃-70℃减压浓缩至相对密度1.08-1.10(70℃)，离心；上清液与上述药液合并，在60℃-70℃减压浓缩至相对密度1.20-1.25(70℃)。
第二步：将上述浓缩液加蔗糖500g与适量糊精、甜菊素，制成颗粒，干燥，制成1000g，即得。
实施例二
2.1.配方
按重量份数(每份为1g时)称取地锦草800份、儿茶100份、乌梅100份、焦山楂100份、茯苓200份、白芍100份、甘草100份。
2.2.制备方法
同实施例一。
实施例三
3.1.配方
按重量份数(每份为1g时)称取地锦草1200份、儿茶20份、乌梅50份、焦山楂50份、茯苓100份、白芍50份、甘草30份。
3.2.制备方法
第一步：同实施例一。
第二步：将上述浓缩液加入甜菊素2g，加水至1000ml，搅匀，滤过，灌装，灭菌，即得。
实施例四
4.1.配方
按重量份数(每份为1g时)称取地锦草1000份、儿茶44份、乌梅60份、焦山楂90份、茯苓180份、白芍90份、甘草36份。
4.2.制备方法
第一步：同实施例一。
第二步：将上述浓缩液加入2g甜菊素，加水至1000ml，搅匀，滤过，灌装，灭菌，即得。
实施例五：对比实施例
5.1.配方
按重量份数(每份为1g时)称取地锦草1000份、儿茶44份、乌梅60份、焦山楂90份、茯苓180份、白芍90份、甘草36份。
5.2.制备方法
第一步：取乌梅、焦山楂、白芍加10倍量水煎煮1小时，滤过，药渣加入地锦草，再加10倍量水煎煮二次，每次1小时，滤过，滤液合并，滤液在60℃-70℃减压浓缩至相对密度1.08-1.10(70℃)，放冷至室温，加乙醇使含醇量达60％，静置冷藏24h，取上清液，回收乙醇至无醇味。儿茶加6倍量水煎煮二次，每次1小时，煎液滤过，滤液合并，在60℃-70℃减压浓缩至相对密度1.08-1.10(70℃)，冷藏24h，滤过；茯苓、甘草加8倍量水煎煮二次，每次1h，煎液滤过，滤液合并，在60℃-70℃减压浓缩至相对密度1.08-1.10(70℃)，冷藏24h，滤过，滤液与上述药液合并，在60℃-70℃减压浓缩至相对密度1.20-1.25(70℃)。
第二步：将上述浓缩液加蔗糖500g与适量糊精、甜菊素，制成颗粒，干燥，制成l000g，即得。
实施例一与对比实施例的处方相同，就制备方法而言，实施例一采用澄清剂吸附法纯化更为简便，节约了大量乙醇，且降低了出膏率，方便了颗粒的制备；且实施例一所制备颗粒含儿茶以儿茶素(c15h1406)和表儿茶素(c15h1406)的总量(9.2mg)高于对比实施例(7.9mg)。
实施例六：
试验药品：
本发明实施例一制得的颗粒，批号为20160101；小儿泻速停颗粒，按照实施例5制备，批号为20160101；杨树花口服液，四川通达动物保健科技有限公司。
试验动物：
25-28日龄三元杂交仔猪，选自河南省洛阳市伊滨区某两家养殖场。临床表现为精神不佳，行走缓慢或呆立不动，食欲减退，泻粪稀薄，或粪中带水，味腥臭黏腻，临床诊断为湿热型腹泻。动物分组：
对100例自然患腹泻的仔猪随机分成四组，三个治疗组，每组30只，第1组服用实施例一制得的本发明药物，临用前加水溶解，制成浓度为0.4g/ml的药液，每次1ml/kg体重，2次/d，连用3d；第2组服用小儿泻速停颗粒作为对比例1，临用前加水溶解，制成浓度为0.4g/ml的药液，每次1ml/kg体重，2次/d，连用3d；第3组服用市售杨树花口服液作为对比例2，每次0.4ml/kg体重，2次/d，连用3d，第4组为空白对照组，不灌药，其它饲养管理及消毒措施均相同。
疗效判断标准：
治疗期间，每天早晚两次仔细观察各组病猪的精神状态、食欲、大便状况。
显效：治疗24-48h粪便呈条状，且颜色、气味正常，仔猪精神、吃料正常，症状完全消失。
有效：治疗48-72h粪便性状转好、水分明显减少，临床症状缓解或基本消失。
无效：治疗72h后，粪便次数与性状无好转，病情加重或改用其它药物，甚至死亡。
治疗结果：
使用卡方检验对试验数据进行统计分析，结果见表1。
表1本发明所得药物对仔猪腹泻的治疗效果
注：**表示与对实施例一药物组比，差异极显著(p<0.01)，*表示与对实施例一药物组比，差异显著(0.05<p<0.01)。
结果显示，本发明药物治疗仔猪腹泻，实施例一药物总有效率为90％，和空白对照组(20％)相比差异极显著，表明本发明药物对仔猪腹泻具有良好的效果；
和对比例1小儿泻速停颗粒(63％)相比差异显著，表明本发明制备方法更合理、疗效更确切；和对比例2(43％)相比差异极显著，表明本发明药物较市售同类药疗效更优。
实施例七：
试验药品：
本发明实施例一制得的颗粒，批号为20160101；小儿泻速停颗粒，自制，批号为20160101；杨树花口服液，四川通达动物保健科技有限公司，由本公司采购部采购。
试验动物：
5-10日龄三元杂交仔猪，选自河南省驻马店市某两家养殖场。临床表现为精神沉郁，食欲减退，呕吐，腹泻，粪便呈水样状和脱水。对病死猪进行剖检，眼观小肠扩张，肠内有黄色液体，肠壁变薄，肠系膜充血，肠系膜淋巴结水肿，小肠绒毛缩短。镜检未发现细菌，rt-pcr/pcr检测结果表明，伪狂犬和猪瘟未检出，流行性腹泻病毒检出，结果如图一。临床诊断为猪流行性腹泻。
动物分组：
对70例自然患腹泻的仔猪随机分成四组，第1组服用实施例一制得的本发明药物，临用前加水溶解，制成浓度为0.4g/ml的药液，每次1ml/kg体重，2次/d，连用3d；第2组服用自制小儿泻速停颗粒作为对比例1，临用前加水溶解，制成浓度为0.4g/ml的药液，每次1ml/kg体重，2次/d，连用3d；第3组服用市售杨树花口服液作为对比例2，每次0.4ml/kg体重，2次/d，连用3d，其它饲养管理及消毒措施均相同。
疗效判断标准：
治疗期间，每天早晚两次仔细观察各组病猪的精神状态、食欲、大便状况。
显效：治疗24-48h粪便呈条状，且颜色、气味正常，仔猪精神、吃料正常，症状完全消失。
有效：治疗48-72h粪便性状转好、水分明显减少，临床症状缓解或基本消失。
无效：治疗72h后，粪便次数与性状无好转，病情加重或改用其它药物，甚至死亡。
治疗结果：
使用卡方检验对试验数据进行统计分析，结果见表2。
表2本发明所得药物对猪流行性腹泻的治疗效果
注：**表示与实施例一药物组比，差异极显著(p<0.01)。
结果显示，本发明药物治疗仔猪流行性腹泻，实施例一药物有效率为87％，和空白对照组(0％)相比差异极显著，说明本发明药物对流行性腹泻具有较好的疗效，本发明药物较对比例1(55％)相比差异极显著，表明本发明制备方法更合理、疗效更确切；和对比例2(35％)相比差异极显著，表明本发明药物较市售同类药疗效更优。