本发明涉及一种中药炮制方法,特别涉及一种附子总生物碱提取方法,属于中药材加工技术领域。
背景技术:
附子是毛茛科植物乌头Aconitum carmichaeli Debx.的子根的加工品。外形一般呈圆锥形,长4~7cm,直径3~5cm。表面灰黑色,被盐霜,顶端有凹陷的芽痕,周围有瘤状突起的支根或支根痕。体重,横切面灰褐色,可见充满盐霜的小空隙及多角形形成层环纹,环纹内侧导管束排列不整齐。气微,味咸而麻,剌舌。
附子中的活性成分包括了大量的乌头总碱,具有很强的镇静、镇痛作用,但是其中的双酯型生碱物碱毒性很大,临床上中毒量和治疗量很接近。目前如何合理运用乌头总碱开发新的药物是对于附子应用开发的关键所在,已有一些研究对于附子的毒性降低控制提出了改善方案,但是多存在提取效率低,附子提取物药效成分损失大的不足。
同时现有研究发现乌头的中还含有双酯生物碱,有心脏毒性。对于附子的炮制应用也应当对于乌头中所含有的毒性成分进行关注,避免附子应用的时候出现于乌头类似的毒害作用。通常而言,经过炮制以后可以很大程度的降低双酯生物碱的含量,从而达到降低药物毒性的作用。
现有技术中,附子的炮制方法主要有火炮法、水漂法、水漂加蒸煮法、辅料炮制法等,其中辅料炮制法根据应用的辅料不同可以达到不同的炮制效果。现有技术中提取乌头总生物碱的方法一般是采取新鲜附子切片,可以直接制成父子切片,或者进一步用乙醇水提取,液体的用量较大,必须反复提取多次,需要的时间也较长。
技术实现要素:
本发明的目的在于克服现有技术中所存在的对于附子生物碱提取方法中提取效率及品质表现不佳的问题,提供一种附子总生物碱提取方法。降低附子提取物中的双酯生物碱的含量,降低附子可能引起的毒性作用。
为了实现上述发明目的,本发明提供了以下技术方案:
一种附子提取方法,包括以下步骤:
S1、取新鲜附子,洗净,磨浆,第一次过滤进行浆渣分离,将滤渣再打浆一次,第二次过滤分离,二次渣弃去,合并两次的滤液。
S2、将S1所得到的滤液离心分离,得到淀粉和清液。
S3、将S2所得到的清液调节pH=1-4,振摇,离心分离蛋白质沉淀,收集离心后的溶液。
S4、将S3所得到的溶液,调节pH=6-7,上大孔吸附树脂柱,去离子水洗1-4次,然后用乙醇洗脱,洗脱液减压蒸馏回收溶剂,然后浓缩至干既得附子生物碱。
进一步,S1中,新鲜附子洗净后,用苏打水冲洗,然后再次清水冲洗,然后进行磨浆。
进一步,S1中,磨浆过程中的温度15-35℃。
进一步,第一次过滤使用的是40-200目的筛网。
进一步,第二次过滤使用40-200目的筛网。
进一步,S2中,离心处理的转速至少2000r/min。最好是超过3000r/min的转速进行离心分离。
进一步,S3中,调节pH使用的是无机酸,无机酸对于生物碱的性质破坏较小,有利于保持提取物的品质优良。优选的,无机酸是盐酸、硫酸等,其中又优选使用盐酸。
进一步,进一步,S3中,离心处理的转速至少2000r/min。最好是超过3000r/min的转速进行离心分离。
进一步,所述大孔吸附树脂柱的填料是D101型树脂,XAD-4大孔吸附树脂,D4020大孔吸附树脂等,可以是其中的一种,也可以是其中的多种。大孔树脂(macroporous resin) 又称全多孔树脂,聚合物吸附剂,它是一类以吸附为特点,对有机物具有浓缩、分离作用的高分子聚合物。
进一步,乙醇洗脱的时候,乙醇的溶液浓度是60%以上的乙醇溶液,优选为70%-85%的乙醇溶液。
与现有技术相比,本发明的有益效果:
1. 本发明的附子总生物碱提取方法,采用打浆处理的方式进行初步提取,具有快速破除附子药材中植物细胞的作用,附子中的生物碱等成分释放速度快,具有高效的特点。
2. 本发明方法中打浆处理的附子提取液,可以回收淀粉作为其他应用,具有较高的副产物价值。
3. 本发明方法提取过程中对于附子中的生物碱的提取选择性的应用了多种成分的理化性质特点,通过调节pH、大孔吸附树脂等工艺方法,使得提取得到的附子生物碱的品质更加优秀。
具体实施方式
下面结合试验例及具体实施方式对本发明作进一步的详细描述。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例,凡基于本发明内容所实现的技术均属于本发明的范围。本发明中未特别说明的百分比一般是重量百分比。
实施例1
附子生物碱提取
S1、取新鲜附子50kg,洗净,磨浆,第一次过滤,浆渣分离;将滤渣再打浆一次,第二次过滤分离,二次渣弃去,合并两次的滤液。
S2、将S1所得到的滤液离心分离,得到淀粉和清液。
S3、将S2所得到的清液调节pH=3,振摇,离心分离蛋白质沉淀,收集离心后的溶液。
S4、将S3所得到的溶液,调节pH=6.5,上大孔吸附树脂柱,去离子水洗3次,然后用乙醇洗脱,洗脱液减压蒸馏回收溶剂,然后浓缩至干既得附子生物碱。总生物碱提取率75.3%,纯度36.1%。
实施例2
附子生物碱提取
S1、取新鲜附子50kg,洗净,磨浆,第一次40目筛网过滤,浆渣分离;将滤渣再打浆一次,第二次100目筛网过滤分离,二次渣弃去,合并两次的滤液。
S2、将S1所得到的滤液2000r/min离心分离,得到淀粉和清液。
S3、将S2所得到的清液调节pH=4,振摇,2000r/min离心分离蛋白质沉淀,收集离心后的溶液。
S4、将S3所得到的溶液,调节pH=7,上D101大孔吸附树脂柱,去离子水洗2次,然后用60v%乙醇洗脱,洗脱液减压蒸馏回收溶剂,然后浓缩至干既得附子生物碱。总生物碱提取率69.3%,纯度42.3%。
实施例3
附子生物碱提取
S1、取新鲜附子50kg,洗净,磨浆,第一次80目筛网过滤,浆渣分离;将滤渣再打浆一次,第二次140目筛网过滤分离,二次渣弃去,合并两次的滤液。
S2、将S1所得到的滤液2000r/min离心分离,得到淀粉和清液。
S3、将S2所得到的清液调节pH=2,振摇,4000r/min离心分离蛋白质沉淀,收集离心后的溶液。
S4、将S3所得到的溶液,调节pH=6,上D101大孔吸附树脂柱,去离子水洗1次,然后用40v%乙醇洗脱,洗脱液减压蒸馏回收溶剂,然后浓缩至干既得附子生物碱。总生物碱提取率76.8%,纯度56.7%。
实施例3
附子生物碱提取
S1、取新鲜附子50kg,洗净,用苏打水冲洗,然后再次清水冲洗,磨浆,第一次80目筛网过滤,浆渣分离;将滤渣再打浆一次,第二次140目筛网过滤分离,二次渣弃去,合并两次的滤液。
S2、将S1所得到的滤液3000r/min离心分离,得到淀粉和清液。
S3、将S2所得到的清液加入稀盐酸调节pH=3,振摇,3000r/min离心分离蛋白质沉淀,收集离心后的溶液。
S4、将S3所得到的溶液,调节pH=6,上D101大孔吸附树脂柱,去离子水洗1次,然后用40v%乙醇洗脱,洗脱液减压蒸馏回收溶剂,然后浓缩至干既得附子生物碱。总生物碱提取率77.4%,纯度39.7%。