本发明涉及降钙素的类似物或模拟物，及其在对象的肝中减少脂肪蓄积的用途.已经提出将来自多种物种的天然存在的降钙素和天然降钙素的类似物作为药物以治疗多种疾病和病症(包括但不限于糖尿病(i型和ii型)、体重过重、过度食物消耗和代谢综合征)、调节血糖水平、调节针对葡萄糖耐量测试的应答、调节摄食、治疗骨质疏松症和治疗骨关节炎.现在我们已经发现天然降钙素的某些类似物对于在肝中减少甘油三酯(脂肪)蓄积具有意料不到的作用.wo2013/067357公开了天然降钙素的合成变体，其具有旨在提供改善特性的经修饰的氨基酸序列.gb1320112.4还公开了有利的降钙素类似物.kusakabe等(2011)检测了胰淀素(amylin)和瘦素(leptin)的组合(l/a)对组织甘油三酯含量的作用.发现l/a共同施用显著降低了组织甘油三酯含量.胰淀素剂量为100μgkg-1.然而，当单独施用时，与生理盐水相比，l或a两者都不降低组织甘油三酯含量.nishizawa等(1988)公开了以单剂量1000mu/大鼠(1iu＝25μg)或经12周以剂量依赖性(0.5至50mu/大鼠)经皮下注射到大鼠中的合成鲑鱼降钙素降低了血清中的甘油三酯水平、脂蛋白水平和胆固醇水平.他们还表明，降钙素在培养的大鼠肝细胞中减少了乙酸酯向胆固醇和甘油三酯中的并入.开发更有效的治疗方法来降低组织甘油三酯(尤其是肝甘油三酯)的需要仍持续存在.现在，本发明提供了作为用于在对象的肝中引起肝甘油三酯降低或脂肪蓄积减少之药物的降钙素类似物，其中所述降钙素类似物与seqidno：1或seqidno：2一致，其中：seqidno：1是cx1slstcx2lgx3lx4qx5lhx6lqx7x8px9tdvgx10nax11其中，独立地，x1为a或s；x2为v或m；x3为k或r；x4为s或t；x5为d或e；x6为k或r；x7为t或s；x8为f或y；x9为k或r；x10为a或s；并且x11为p或y，p为优选的，以及seqidno：2是csnlstcx2lgx3lsqx5lhx6lqx7x8px9tdvgx10nx12x11其中，独立地，x2为v或m；x3为k或r；x5为d或e；x6为k或r；x7为t或s；x8为f或y；x9为k或r；x10为a或s；x12为t或a；并且x11为p或y，p为优选的，并且其中所述肽序列各自可在其n-末端羧基化或者以其他方式修饰以降低第一氨基酸的正电荷，并且独立地可在其c-末端酰胺化，并且在每个所述肽序列中，1和7位的半胱氨酸残基可一起被α-氨基辛二酸(asu)替换.用于本发明的优选肽序列包括：seqidno：3caslstcx2lgx3lx4qx5lhx6lqx7x8px9tdvgx10nax11其中，独立地，x2为v或m；x3为k或r；x4为s或t；x5为d或e；x6为k或r；x7为t或s；x8为f或y；x9为k或r；x10为a或s；并且x11为p或y，p为优选的；seqidno：4caslstcmlgrlsqx5lhrlqx7x8pktdvganax11其中，独立地，x5为d或e；x7为t或s；x8为f或y；并且x11为p或y，p为优选的；seqidno：5csnlstcvlgx3lsqelhx6lqtx8prtdvganx12x11其中，独立地，x3为k或r；x6为k或r；x8为f或y；x12为t或a；并且x11为p或y，p为优选的；其全部可如上所述被修饰.用于本发明的另一些优选肽包括：seqidno：6caslstcvlgrlsqxclhrlqtxeprtdvganapseqidno：7caslstcmlgkltqxclhklqtxeprtdvganapseqidno：8(kbp-056/057)caslstcvlgklsqxclhklqtxepktdvganapseqidno：9(kbp-088/089)csnlstcmlgrlsqxclhrlqtxepktdvganapseqidno：10caslstcmlgrlsqxclhrlqtxepktdvganapseqidno：11caslstcmlgkltqxclhklqtxepktdvganapseqidno：12caslstcvlgklsqxclhklqtxeprtdvganapseqidno：13csnlstcvlgrlsqxclhrlqtxepktdvganapseqidno：14(kbp-017)caslstcvlgklsqxclhklqsxepktdvganapseqidno：15(kbp-018)caslstcvlgklsqxclhklqtxepktdvganap其中xc为d或e且xe独立地为f或y，并且其序列各自可在其n-末端羧基化或者以其他方式修饰以降低第一氨基酸的正电荷，并且独立地可在其c-末端酰胺化，并且在每个序列中，1和7位的半胱氨酸残基可一起被α-氨基辛二酸(asu)替换.用于本发明的另一些优选肽包括：seqidno：16(kbp-011)caslstcvlgrlsqelhrlqtfprtdvganapseqidno：17caslstcmlgkltqelhklqtfprtdvganapseqidno：18(kbp-018)caslstcvlgklsqelhklqtfpktdvganapseqidno：19(kbp-088)csnlstcmlgrlsqelhrlqtfpktdvganapseqidno：20caslstcvlgrlsqelhrlqtyprtdvganapseqidno：21caslstcmlgkltqelhklqtyprtdvganapseqidno：22caslstcvlgklsqelhklqtypktdvganapseqidno：23(kbp-021)csnlstcmlgrlsqelhrlqtypktdvganapseqidno：24caslstcvlgrlsqdlhrlqtfprtdvganapseqidno：25caslstcmlgkltqdlhklqtfprtdvganapseqidno：26(kbp-056)caslstcvlgklsqdlhklqtfpktdvganapseqidno：27csnlstcmlgrlsqdlhrlqtfpktdvganapseqidno：28caslstcvlgrlsqdlhrlqtyprtdvganapseqidno：29caslstcmlgkltqdlhklqtyprtdvganapseqidno：30(kbp-057)caslstcvlgklsqdlhklqtypktdvganapseqidno：31(kbp-089)csnlstcmlgrlsqdlhrlqtypktdvganapseoidno：32caslstcvlgrlsqelhrlqsfprtdvganapseqidno：33caslstcmlgkltqelhklqsfprtdvganapseqidno：34caslstcvlgklsqelhklqsfpktdvganapseqidno：35csnlstcmlgrlsqelhrlqsfpktdvganapseqidno：36caslstcvlgrlsqelhrlqsyprtdvganapseqidno：37caslstcmlgkltqelhklqsyprtdvganapseqidno：38caslstcvlgklsqelhklqsypktdvganapseqidno：39csnlstcmlgrlsqelhrlqsypktdvganapseqidno：40caslstcvlgrlsqdlhrlqsfprtdvganapseqidno：41caslstcmlgkltqdlhklqsfprtdvganapseqidno：42caslstcvlgklsqdlhklqsfpktdvganapseqidno：43csnlstcmlgrlsqdlhrlqsfpktdvganapseqidno：44caslstcvlgrlsqdlhrlqsyprtdvganapseqidno：45caslstcmlgkltqdlhklqsyprtdvganapseqidno：46(kbp-017)caslstcvlgklsqdlhklqsypktdvganapseqidno：47csnlstcmlgrlsqdlhrlqsypktdvganapseqidno：48csnlstcvlgklsqelhklqtyprtdvganapseqidno：49(kbp-019)caslstcmlgrlsqdlhrlqtypktdvganap其可如上所述被修饰.seqidno：50(kbp-011)accaslstcvlgrlsqelhrlqtfprtdvganap-nh2seqidno：51(kbp-017)accaslstcvlgklsqdlhklqsypktdvganap-nh2seqidno：52(kbp-018)accaslstcvlgklsqelhklqtfpktdvganap-nh2seqidno：53(kbp-023)accaslstcmlgkltqelhklqtfprtdvganap-nh2seqidno：54(kbp-042)accsnlstcvlgklsqelhklqtyprtdvganap-nh2seqidno：55(kbp-056)accaslstcvlgklsqdlhklqtfpktdvganap-nh2seqidno：56(kbp-057)accaslstcvlgklsqdlhklqtypktdvganap-nh2seqidno：57(kbp-088)accsnlstcmlgrlsqelhrlqtfpktdvganap-nh2seqidno：58(kbp-089)accsnlstcmlgrlsqdlhrlqtypktdvganap-nh2用于本发明的另一些优选肽包括：seqidno：59caslstcvlgrlsqxclhrlqtxepktdvganayseqidno：60caslstcmlgkltqxclhklqtxepktdvganayseqidno：61caslstcvlgklsqxclhklqtxepktdvganayseqidno：62csnlstcmlgrlsqxclhrlqtxepktdvganayseqidno：63caslstcvlgrlsqxclhrlqtxeprtdvganayseqidno：64caslstcmlgkltqxclhklqtxeprtdvganayseqidno：65caslstcvlgrlsqxclhrlqtxepktdvganapseqidno：66caslstcmlgkltqxclhklqtxepktdvganap其中xc为d或e且xe独立地为f或y，其中任一个可如上所述被修饰.用于本发明的另一些优选肽包括：seqidno：67caslstcvlgrlsqelhrlqtfpktdvganayseqidno：68caslstcmlgkltqelhklqtfpktdvganayseqidno：69caslstcvlgklsqdlhklqtfpktdvganayseqidno：70csnlstcmlgrlsqelhrlqtfpktdvganayseqidno：71caslstcvlgrlsqelhrlqtfprtdvganayseqidno：72caslstcmlgkltqelhklqtfprtdvganayseqidno：73caslstcvlgrlsqelhrlqtfpktdvganapseqidno：74caslstcmlgkltqelhklqtfpktdvganap其中任一个可如上所述被修饰。所述肽可配制为药物用于施用，并且可配制成用于经肠(enteral)或者肠胃外(parenteral)施用.优选的制剂为可注射的，优选用于皮下注射，然而，所述肽可与载体配制成用于经口施用，并且任选地其中所述载体提高肽的经口生物利用度.合适的载体包括含有5-cnac、snad或snac的那些.任选地，将所述肽配制成含有经包衣的柠檬酸颗粒的用于经口施用的药物组合物，并且其中所述经包衣的柠檬酸颗粒提高所述肽的经口生物利用度.本发明包括用作药物的本发明的肽.所述肽可用于治疗糖尿病(i型和/或ii型)、体重过重、过度食物消耗、代谢综合征、类风湿关节炎、非酒精性脂肪肝病(non-alcoholicfattyliverdisease)、骨质疏松症或骨关节炎、血糖水平调节不良、对葡萄糖耐量测试的应答调节不良或食物摄入调节不良.特别地，所述肽可用于降低不期望的高的空腹血糖水平或降低不期望的高的hba1c或降低不期望的高的针对葡萄糖耐量测试的应答.优选地，本发明的肽可用于在对象的肝中引起肝甘油三酯降低和/或脂肪蓄积减少，同时减少对象的摄食和/或体重.在一些实施方案中，修饰上文中讨论的降钙素模拟物的n-末端侧，以降低第一氨基酸的正电荷.例如，可在半胱氨酸-1上进行乙酰基、丙酰基或琥珀酰基取代.本文中，“ac”指乙酰基修饰.每个“ac”可被替换成“pr”，这称为丙酰基修饰；或者替换成“succ”取代，这称为琥珀酰基修饰.“nh2”指酰胺化的c-末端羧酸基团.降低正电荷的替代方法包括但不限于：基于聚乙二醇的peg化(pegylation)或在n-末端添加另外的氨基酸(例如谷氨酸或天冬氨酸).或者，可向上文中讨论的肽的n-末端添加另一些氨基酸，包括但不限于：赖氨酸、甘氨酸、甲酰甘氨酸、亮氨酸、丙氨酸、乙酰丙氨酸和二丙氨酰.本领域中的技术人员将理解，具有多个半胱氨酸残基的肽常常在两个这样的半胱氨酸残基之间形成二硫键(disulfidebridge).本文中所示的所有这样的肽被限定为任选地包含一个或更多个这样的二硫键(特别在cys1至cys7位置上).模拟这一情况，1和7位上的半胱氨酸可共同被α-氨基辛二酸连接替换。本文中公开的具有kbp-0##号的所有肽均具有这样的二硫键.尽管本公开内容的降钙素模拟物可以以游离酸形式存在，但是优选地c-末端氨基酸被酰胺化.本申请人预期这样的酰胺化可有助于肽的效果和/或生物利用度。用于制备本公开内容的降钙素模拟物之酰胺化形式的优选技术是例如在us4708934和ep0308067及ep0382403中描述的，根据已知技术在肽基甘氨酸α-酰胺化单加氧酶存在下使前体反应(用甘氨酸替代所期望酰胺化产物的c-末端氨基)，其中在反应中前体被转化成酰胺化产物.对于前体以及催化前体转化为鲑鱼降钙素的酶二者，重组产生是优选的.在raymv，vanduynep，bertelsenah，jackson-matthewsde，sturmeram，merklerdj，consalvoap，youngsd，gilliganjp，shieldspp著的biotechnology，第11卷，(1993)，第64-70页中讨论了这样的重组产生，其还描述了前体向酰胺化产物的转化.其中报道的重组产物与天然鲑鱼降钙素一致，并且与使用溶液相和固相化学肽合成产生的鲑鱼降钙素一致.酰胺化产物的产生还可使用以下所述的方法和酰胺化酶来实现：consalvo等，us7445911；miller等，us2006/0292672；ray等，2002，proteinexpressionandpurification，26：249-259；和mehta，2004，biopharm.international，7月，第44-46页.优选酰胺化肽的产生可如下进行：例如，用谷胱甘肽-s-转移酶在大肠杆菌(e.coli)中产生作为可溶性融合蛋白的甘氨酸延伸的前体，或根据us6103495中描述的技术直接表达前体.这样的甘氨酸延伸前体除c-末端外具有与所期望的酰胺化产物相同的分子结构(其中所述产物以--x--nh2终止，而所述前体以--x-gly终止，x为产物的c-末端氨基酸残基).以上公开文献中描述的α-酰胺化酶催化前体转化为产物.该酶优选地是例如在中国仓鼠卵巢(chinesehamsterovary，cho)细胞中重组产生的，如上文引用的biotechnologyandbiopharm文章中所述.本公开内容的肽活性剂的游离酸形式可以类似的方式产生，不同之处在于在“前体”上不包含c-末端甘氨酸，作为替代，所述前体是最终肽产物并且无需酰胺化步骤.除非另有说明，否则本公开内容中的降钙素模拟物的优选剂量对于治疗和预防目的二者而言是一致的.在下文将更详细地讨论期望的剂量，并且其根据施用的方式而不同.除非另有注明或从上下文明显看出，否则在本文中剂量是指未受药物赋形剂、稀释剂、载体或其他成分的影响或将其扣除(discounting)的活性化合物的重量，尽管理想情况是包括这样的其他成分.在制药工业中常规用于递送肽活性剂的任何剂型(胶囊剂、片剂、注射剂等)均适用于本文，并且在工业中，术语“赋形剂”、“稀释剂”或“载体”在这样的剂型中包括通常所包括的非活性成分以及活性成分.在下文将更详细地讨论优选的经口剂型，但是不认为这是施用本公开内容的活性剂的唯一方式.可以向患者施用本公开内容中的降钙素模拟物以治疗多种疾病或病症.本文中使用的，术语“患者”意指属于动物界的任何生物.在一个实施方案中，术语“患者”是指脊椎动物，更优选哺乳动物(包括人).鉴于许多因素(例如性别、年龄和身高)，存在许多本领域公认的正常体重范围的量度.需要本文中所示的治疗或预防方案的患者包括其体重超过公认的标准，或者由于遗传、环境因素或其他公认的危险因素处于比一般群体更高的变得超重或肥胖的风险中的患者.根据本公开内容，构想降钙素模拟物可用于治疗糖尿病，其中重量控制是治疗的一个方面.在一个实施方案中，所述方法包括向有此需要的患者经肠施用药学上有效量的本文中所述的任一种肽以用于治疗所述病症.在一个实施方案中，所述方法包括向有此需要的患者经肠胃外施用药学上有效量的本文中所述的任一种肽以用于治疗所述病症.对于肠胃外施用(包括腹膜内、皮下、静脉内、皮内或肌内注射)，例如可以使用本公开内容中的肽在芝麻或花生油中或者在水性丙二醇中的溶液剂.如果需要的话，水溶液应该适当地缓冲(优选ph大于8)并且首先使液体稀释剂变成等渗的.这些水溶液适用于静脉内注射之目的.油性溶液适用于关节内、肌内和皮下注射之目的.所有这些溶液在无菌条件下的制备容易通过本领域技术人员熟知的标准制药技术完成.对于肠胃外应用，合适的制剂的实例包括溶液剂(优选油性溶液或水溶液剂)及混悬剂、乳剂或植入剂(包括栓剂).肽可以以多剂型或单剂型以无菌形式配制，例如分散在流体载体(例如注射剂常用的无菌生理盐水或5％盐水葡萄糖溶液)中.所述方法可包括确定患者是否患有所述病症的预备步骤，和/或确定在所述患者中何种程度的所述治疗能有效减轻所述病症的后续步骤，例如在每种情况中，进行经口葡萄糖耐量测试或静息血糖水平(restingbloodsugarlevel)测试.为了改善对患者体重的控制以引起体重减轻或避免体重增加，优选地每天一次或更多次施用所述活性化合物，例如每天至少两次，例如每天2至4次.活性化合物的制剂可包含适于这样的施用方案的单位剂量.可以以控制正接受糖尿病或代谢综合征治疗之患者的体重为目的来施用所述活性化合物.相对于将制剂含于口中以使其通过舌下或颊途径运输至血流，经口的肠内制剂通过吞咽摄取以在胃之下的肠中进行后续释放，并由此通过门静脉递送至肝.用于本公开内容的合适剂型包括片剂、微型片剂(mini-tablet)、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、泡腾固体(effervescentsolid)和可咀嚼固体制剂.这样的制剂可包含明胶，其优选水解明胶或低分子量明胶.这样的制剂可通过如下获得：冷冻干燥包含降钙素或者其片段或缀合物和水解明胶或低分子量明胶的均质水溶液，并将所得固体材料进一步加工成所述经口药物制剂，并且其中明胶的平均分子量可以是1000至15000道尔顿.这样的制剂可包含保护性载体化合物，例如，5-cnac或如本文中公开的另一些化合物.尽管优选经口制剂(例如片剂和胶囊剂)，但是用于本公开内容中的组合物也可采用糖浆剂、酏剂等以及栓剂等形式.由于经口递送方便、相对容易且通常无痛，从而相对于其他递送方式患者的顺从性更好，所以经口递送一般是首选的递送途径.然而，生物、化学和物理屏障(例如胃肠道中不同的ph、强消化酶以及活性剂不可渗透的胃肠道膜)使向哺乳动物经口递送降钙素样肽成为问题，例如，至少部分地由于降钙素在胃肠道中的稳定性不足以及降钙素不能容易地通过肠壁运输到血流中，降钙素(其为由哺乳动物甲状腺滤泡旁细胞和由鸟类和鱼类的后鳃腺分泌的长链多肽激素)的经口递送最初被证明是困难的.然而，以下将描述合适的经口制剂.患者的治疗在一个实施方案中，将本公开内容中的降钙素模拟物以足够剂量施用，使得患者中模拟物的血清水平维持在以下水平：每毫升5皮克至500纳克，优选50皮克至250纳克，例如每毫升1至100纳克.血清水平可通过本领域中已知的放射免疫分析技术来测量.主治医师可监测患者应答，并然后可根据个体患者的代谢和应答来在一定程度上改变剂量.通过将本公开内容的所有组分作为单个丸剂或胶囊剂施用，来最佳地实现近乎同时释放.然而，本公开内容还包括，例如，将所需量的降钙素模拟物分配在两个或更多个片剂或胶囊剂中(其可一起施用使得它们一起提供必需量的所有成分).本文中使用的“药物组合物”包括但不限于：适于向特定患者施用的完全剂量，无论在给定的施用下推荐的是一个或更多个片剂或胶囊剂(或其他剂型).可使用unigene产品中采用的方法将本公开内容中的降钙素模拟物配制成用于经口施用.这些可包括如美国专利no.5,912,014、美国专利no.6,086,918、美国专利no.6,673,574、美国专利no.7,316,819、美国专利no.8,093,207和美国公开no.2009/0317462中描述的方法.特别地，其可包括如下用法：将化合物与膜转位蛋白(membranetranslocator)(例如hivtat蛋白的蛋白转导结构域)缀合，与一种或更多种蛋白酶抑制剂和/或可包衣的ph降低剂和/或抗酸保护性载剂和/或可为表面活性剂的吸收促进剂共配制.在一个实施方案中，本公开内容中的降钙素模拟物以美国专利公开no.2009/0317462中已知的方式优选地配制成用于经口递送.根据本公开内容的一种优选经口剂型列于下表中：固体制剂的组分在一个实施方案中，本公开内容中的降钙素模拟物可通过与合适的载体化合物混合配制成用于经肠(尤其是经口)施用.合适的载体化合物包括美国专利no.5,773,647和美国专利no.5866536中描述的那些，并且在这些中，5-cnac(n-(5-氯水杨酰基)-8-氨基辛酸，常见为其二钠盐)特别有效.另一些优选载体或递送剂为snad(10-(2-羟基苯甲酰氨基)癸酸的钠盐)和snac(n-(8-[2-羟基苯甲酰基]氨基)辛酸的钠盐)。在一个实施方案中，本公开内容中的药物组合物包含递送有效量的载体(例如5-cnac)，即足以递送化合物以产生期望效果的量.一般来说，载体(例如5-cnac)以总组合物的按重量计2.5％至99.4％，更优选地按重量计25％至50％的量存在.此外，wo00/059863公开了如下式i的二钠盐及其水合物和溶剂合物，其特别有效地用于活性剂(例如降钙素，如鲑鱼降钙素)的经口递送，并且这些可用于本公开内容中：其中：r1、r2、r3和r4独立地为氢、-oh、-nr6r7、卤素、c1-c4烷基，或c1-c4烷氧基；r5为经取代或未经取代的c2-c16亚烷基、经取代或未经取代的c2-c16亚烯基、经取代或未经取代的c1-c12烷基(亚芳基)、或者经取代或未经取代的芳基(c1-c12的亚烷基)；并且r6和r7独立地为氢、氧或c1-c4烷基.任选地使用微粉化5-cnac的优选肠制剂可以是通常如wo2005/014031中所描述的.可使用bonemedicallimited的capsitonin产品中采用的方法将化合物配制成用于经口施用.这些可包括axcess制剂中所并入的方法。更特别地，所述活性成分可被包封在能承受通过胃的运送的肠胶囊剂中。这可包含所述活性化合物以及亲水性芳香醇吸收促进剂，例如wo02/028436中所述.在已知的方式中，肠溶衣可以以ph敏感的方式(例如在3至7的ph下)变为可渗透.wo2004/091584还描述了使用芳香醇吸收促进剂的合适的配制方法.可使用见于oramed产品中的方法配制所述化合物，其可包括用ω-3脂肪酸进行配制，如见于wo2007/029238中或us5,102,666中所述的.一般来说，可使用这些载体或递送剂的可药用盐(尤其是单钠盐或二钠盐)、溶剂合物(例如，醇溶剂合物)和水合物.根据本公开内容的药物组合物的经口施用可有规律地进行，例如基于每天或每周一次或更多次；间歇地进行，例如在一天或一周期间不规律地进行；或周期性地进行，例如几天或几周的时间内有规律地进行施用，随后一段时间不施用.本公开的一些实施方案中的药物组合物的剂型可以为任何已知的形式，例如液体或固体剂型.液体剂型包括溶液乳剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂.除活性化合物和载体(例如5-cnac)外，液体制剂还可包含本领域中常用的惰性赋形剂，例如，增溶剂(例如乙醇)；油类(例如棉籽油、蓖麻油和芝麻油)；润湿剂；乳化剂；助悬剂；甜味剂；调味剂；和溶剂(例如水).固体剂型包括胶囊剂、软凝胶胶囊剂、片剂、囊片剂(caplet)、散剂、颗粒剂或另一些固体经口剂型，其全部可通过本领域中已知的方法来制备.所述药物组合物可另外包含习惯用量的添加剂，包括但不限于：ph调节剂、防腐剂、香料(flavorant)、掩味剂(taste-maskingagent)、芳香剂(fragrance)、湿润剂、滋补剂(tonicifier)、着色剂、表面活性剂、增塑剂、润滑剂(例如硬脂酸镁)、助流剂、压制助剂(compressionaid)、增溶剂、赋形剂、稀释剂(例如微晶纤维素(例如fmc公司提供的avicelph102))，或其任意组合.另一些添加剂可包括磷酸盐缓冲盐、柠檬酸、二醇类和其他分散剂.所述组合物还可包括一种或更多种酶抑制剂，例如放线宁(actinonin)或表放线宁(epiactinonin)及其衍生物；抑蛋白酶多肽(aprotinin)、trasylol和bowman-birk抑制剂.此外，本公开内容的组合物中可存在转运抑制剂(即，[ρ]-糖蛋白，例如酮洛芬(ketoprofin)).本公开内容中的固体药物组合物可以通过常规方法制备，例如通过如下制备：将活性化合物、载体(例如5-cnac)和任何其他成分的混合物共混，捏合(kneading)并填充到胶囊中，或者不填充到胶囊中，作为替代模制，然后进一步压片或压制模制以得到片剂.此外，可通过已知的方法形成固体分散剂，然后进一步加工以形成片剂或胶囊剂.优选地，将本公开内容中的药物组合物的成分在整个固体剂型中均质或均匀地混合.或者，所述活性化合物可配制为与所述载体的缀合物，其可以是如us2003/0069170中所述的寡聚体，例如：化合物如其中所述，这样的缀合物可与脂肪酸或胆汁盐组合施用.可使用与聚乙二醇(peg)的缀合物，如在mansoor等中所述.或者，活性化合物可与亚硝基-n-乙酰基-d，l-青霉胺(snap)和卡巴普(carbopol)溶液混合，或与牛磺胆酸盐和卡巴普溶液混合以形成黏膜黏附性乳剂.所述活性化合物可通过加载到如prego等公开的壳聚糖纳米胶囊中(任选地经peg修饰，如pregopregoc，torresd，fernandez-megiae，novoa-carballalr，quinoae，alonsomj.中)或者如garcia-fuentes等中公开的壳聚糖或peg包衣的脂质纳米颗粒中来配制.用于该目的的壳聚糖纳米颗粒可如guggi等所述经亚氨基硫烷(iminothiolane)修饰.它们可如dogru等所述配制在水/油/水乳剂中.可如sinko等或song等所述通过使用牛磺脱氧胆酸盐或月桂酰肉碱来提高活性化合物的生物利用度.一般来说，作为载体的合适纳米颗粒在delafuente等中进行了讨论，并且可用于本公开内容中.对于经口制剂，其他合适的策略包括如chiasmaltd.的wo2005/094785中所述使用瞬时渗透促进剂(transientpermeabilityenhancer，tpe)系统.tpe利用固体亲水性颗粒在疏水性介质中的油性混悬液来保护药物分子不被不利的胃肠(gi)环境所失活，并且同时作用于gi壁以诱导其载药分子(cargodrugmolecule)的渗透.还包括如us2008/0200563中所述使用谷胱甘肽或包含大量硫醇基团的化合物以抑制黏膜上的外排泵(effluxpump)的作用.此类技术的应用实例还描述在以下文献中：calicetip.，salmasos.，walkerg.和bernkop-schniircha.(2004)“developmentandinvivoevaluationofanoralinsulin-pegdeliverysystem.”eur.j.pharm.sci.，22，315-323；guggid.，kraulanda.h.，和bernkop-schniirch，a.(2003)“systemicpeptidedeliveryviathestomach：invivoevaluationofanoraldosageformforsalmoncalcitonin”.j.control.rel.92，125-135；以及bernkop-schniircha.，pintery.，guggid.，kahlbacherh.，schoffmanng.，schuhm.，schmeroldi.，delcurtom.d.，d′antonio，m.，espositop.和huckch.(2005)“theuseofthiolatedpolymersascarriermatrixinoralpeptidedelivery”-proofofconcept.j.control.release，106，26-33。可如wo2004/084870中所述将活性化合物配制成无缝微球，其中所述活性药物成分增溶为乳剂、微乳剂或混悬剂，配制成小球；并通过常规或新的包衣技术可变地进行包衣.所得物是“预先增溶”形式的经包封药物，当经口施用时其沿着胃肠道以特定速率向特定位置提供活性药物的预定的立即或持续释放.实质上，所述药物的预先增溶提高了其动力学特性(kineticprofile)的可预测性，同时增强了可渗透性和药物稳定性.可如us2009/0074824中所述使用壳聚糖包衣的纳米胶囊.用该技术施用的活性分子被保护在纳米胶囊内，因为其对于胃液作用来说是稳定的.此外，该系统的黏膜黏附特性强化了黏附到肠壁的时间(已证实这些系统在胃肠道运送中有延迟)，这有助于更有效地吸收活性分子.可使用由tsrlinc.开发的方法.这些包括亲水增溶技术(hydrophilicsolubilizationtechnology，hst)，其中明胶(带有正和负电荷二者的天然来源的胶原提取物)将包含在卵磷脂胶束中的活性成分颗粒包被，并防止其聚集或结块.这通过极性相互作用导致疏水性药物颗粒润湿性提高.此外，两亲性卵磷脂降低溶解流体和颗粒表面之间的表面张力.可使用葫芦脲(cucurbituril)作为赋形剂来配制活性成分.或者，可以使用merrionpharmaceuticals的gipet技术来生产包含活性成分和吸收促进剂的肠溶衣片剂，所述吸收促进剂可为us2007/0238707中所述的中链脂肪酸或中链脂肪酸衍生物，或者us7268214中所述的膜转位肽(membranetranslocatingpeptide).可使用girestm技术，其由可充气袋中的控制性释放剂型组成，所述可膨胀袋放置在用于经口施用的药物胶囊中.当胶囊溶解时，产气系统在胃中使所述袋充气.在临床试验中，证明该袋在胃中存留16至24小时.或者，活性物可与使其抵抗胃中酶促降解以及促进其吸收的保护性调节剂缀合.所述活性物可与单分散性短链甲氧基聚乙二醇糖脂衍生物共价缀合，其在纯化后结晶并冷冻干燥成为干燥的活性药物成分.us5438040和www.biocon.com描述了这样的方法.还可采用肝指向性囊泡(hepatic-directedvesicle，hdv)来进行活性物递送.hdv可由包封活性物的脂质体(直径≤150nm)组成，在其脂质双层中还包含肝细胞靶向性分子.所述靶向性分子指导被包封的活性物向肝细胞的递送，因此起效仅需要相对小量的活性物.这样的技术在us2009/0087479中并还在www.diasome.com中描述.如涉及胰岛素的us2002/0115592中所述，可将活性物与中链偏甘油酯(任选地与长链peg物质的混合)并入到另外包含基本无水的亲水性介质(包含醇和共溶剂)的组合物中.或者，可如shenz，mitragotris，pharmres.2002apr；19(4)：391-5“intestinalpatchesfororaldrugdelivery”中所述使用肠贴剂(intestinalpatch).如美国专利no.7189414所述，可将活性物并入可侵蚀基质中，所述基质由混合有疏水性聚合物的水凝胶形成.用于待治疗的成人的合适剂量水平可以是0.001μg/kg/天至50mg/kg/天.更优选地，剂量可以是0.01μg/kg/天至5mg/kg/天，更优选0.1μg/kg/天至500μg/kg/天.这样的剂量范围可以用于经口制剂或肠胃外制剂(例如可注射制剂)的活性组分.对于经口或其他肠内制剂，剂量可为0.01至100mg/kg/天，并且对于可注射或其他肠胃外制剂，剂量可为0.01至1000mg/kg/天.患者的给药治疗频率可以是每天1至6次，例如每天2至4次.理想治疗为维持至少6周，优选至少6个月，优选至少1年，并任选地终生维持.对于相关病症的联合治疗可使用本公开内容的组合物并独立地施用一种或更多种其他治疗剂来进行.或者，可以将本公开内容的组合物并入一种或更多种其他治疗剂来进行联合施用.本公开内容的联合治疗包括将所述活性化合物与胰岛素、glp-2、glp-1、gip或胰淀素组合，或者一般地与另一些抗糖尿病剂组合.因此包括共制剂(co-formulation)的联合治疗可以采用以下进行：胰岛素增敏剂，包括双胍类(例如，二甲双胍、丁双胍和苯乙双胍)、tzd类(ppar)(例如，巴格列酮、吡格列酮、来格列酮、罗格列酮和曲格列酮)、双重ppar激动剂(例如，阿格列扎、莫格他唑和替格列扎(tesaglitazar))或促分泌素(包括磺酰脲类，例如氨磺丁脲、氯磺丙脲、格列齐特、甲苯磺丁脲、妥拉磺脲、格列吡嗪、格列本脲、优降糖、格列喹酮、格列吡脲和格列美脲)、美格列奈类(meglitinides)/格列奈类(k+)(例如，那格列奈、瑞格列奈和米格列奈)、glp-1类似物(例如，艾塞那肽、利拉鲁肽和阿必鲁肽)、dpp-4抑制剂(例如，阿格列汀、利拉利汀、沙格列汀、西他列汀和维格列汀)、胰岛素类似物或特殊制剂(例如，(快速起效的)赖脯胰岛素、门冬胰岛素、赖谷胰岛素，(长效的)甘精胰岛素、地特胰岛素，吸入性胰岛素-exubra和nph胰岛素)，以及其他，包括α-葡萄糖苷酶抑制剂(例如，阿卡波糖、米格列醇和伏格列波糖)、胰淀素类似物(例如，普兰林肽)、sglt2抑制剂(达格列嗪、达达格列嗪或色格列嗪)和其他药物(包括苯氟雷司和托瑞司他).另一些组合包括与瘦素的共施用或共制剂.瘦素抵抗是2型糖尿病的已确认组成，然而，迄今为止，瘦素的注射无法改善该病症.相比之下，有证据支持胰淀素和由此具有胰淀素样能力的分子(如鲑鱼降钙素模拟物)能够提高瘦素敏感性.胰淀素/瘦素组合显示出对体重和摄食以及胰岛素抵抗的协同作用[kusakabet等].在以下一些实施例中描述了目前公开的一些实施方案，列出所述实施例是为了帮助理解本公开内容，并且不应解释为以任何方式限制所附权利要求中限定的本公开内容的范围.提出以下这些实施例以向本领域普通技术人员提供如何制备和使用所述一些实施方案的全部公开内容和描述，并且不意在限制本公开内容的范围，它们也不意在表示以下实验是所进行的全部或唯一的实验.已努力确保使用的数字(例如，量、温度等)的准确性，但是一些实验误差和偏差应予以考虑.除非另有说明，否则份数为重量份数，分子量为重均分子量，温度为摄氏度，压力为大气压或接近大气压.通过以下参考附图的非限制性实施例将进一步说明并解释本发明，其中：图1示出了在16天研究终点时的摄食、体重和附睾脂肪组织储存(depot)的重量.图2示出了在16天处理之后肥胖大鼠中的肝甘油三酯和花生四烯酸.图3示出了在16天处理之后肥胖大鼠中的肝游离脂肪酸.图4示出了五个剂量组和载剂组(vehiclearm)中作为经60天治疗之函数的体重，其表示为作为时间之函数的基线标准体重。图5示出了在研究终点时的绝对体重.“瘦”代表非肥胖对照组，而“载剂”为肥胖对照组.右侧的成对饲喂组(pair-fedgroup)表示这样的组：其中对照组的食物被限制以匹配对应的活性处理组的水平，并且从而示出了通过减少摄食而特异性引起的重量减轻.图6示出了在终点时肾周围脂肪储存之重量的测量.图7示出了在实验终点时从收集的肝中提取三酰甘油的结果.图8示出了使用kbp-042之体重降低的结果.图9总结了在实施例2中进行之测试的全部结果.图10示出了使用kbp-042之脂肪组织减少的结果.图11示出了冷冻肝切片的油红o染色(放大倍数×40)：(a)瘦；(b)载剂；(c)2.5μg/kgkbp-042；(d)2.5μg/kgkbp-089；(e)成对饲喂kbp-089；(f)定量.图12示出了在用kbp-042或载剂处理的动物中进行经口葡萄糖耐量测试(ogtt)期间的血糖和胰岛素水平.图13示出了kbp-042对胰岛素敏感性的作用.实施例1进行两项研究，在两项研究中使用的肥胖大鼠均如下产生：为了获得肥胖大鼠，向12周龄的雄性sprague-dawley大鼠饲喂由常规啮齿动物食物和60千卡％(kcal％)高脂饮食组成的食物(no.d12495，researchdiets)共12周.在12周高脂饮食之后，根据重量将大鼠随机分配到处理组中.初始研究为16天处理研究，其中研究如下3组：瘦(同龄，但没有高脂饮食)、载剂(肥胖对照组)以及以7.5μg/kg/天的kbp-042.在整个实验中，监测体重和摄食，并在终点收集肝和脂肪储存以进行称重并对甘油三酯、游离脂肪酸和花生四烯酸含量进行电位分析(potentialanalysis).第二研究由以下组组成：载剂、kbp-0420.625μg/kg/天、kbp-0421.25μg/kg/天、kbp-0422.5μg/kg/天、kbp-0425μg/kg/天、kbp-04210μg/kg/天、匹配5μg/kg/天的成对饲喂(卡路里限制)和匹配10μg/kg/天的成对饲喂(卡路里限制)，以允许独立于kbp-042对摄食之作用地评估其对体重的作用.在整个实验中，监测体重和摄食，并在终点收集肝和脂肪储存以称重并对甘油三酯含量进行电位分析.组织脂质分析内标的制备因为定量程序包括多个步骤，所以向各样品提取物中添加内标，这能够使结果归一化并校正任何损失.将内标制备成如下的溶液：在氯仿∶甲醇2∶1(v/v)中含有3.66mg/mlc19：0tag(sigma-aldrich，产品号：t4632)、2.73mg/mlc17：0磷脂(pl)、0.4mg/mlc19：0ffa(sigma-aldrich，产品号：n-8263)、0.096mg/mlc15：0甘油二酯(dag)、0.06mg/mld31-标记的神经酰胺、0.03mg/mld7-标记的鞘氨醇、1.036mg/ml谷甾烷醇、0.04mg/mld31-标记的鞘磷脂和1.596mg/mlc15：0胆固醇酯.组织脂质提取该方法是基于folch等[89][90，91].在提取时，将样品以500mg单独地分配并转移到玻璃管，然后添加10ml在氯仿∶甲醇2∶1(v∶v)中的100μg/ml丁羟甲苯(butylatedhydroxytoluene，bht)并放置在冰上.向各个样品添加150μl的内标溶液.在样品管浸没在冰水中的情况下使用定子-转子浸入式混合器(ikaultra-turraxt25)进行匀浆.将样品各匀浆3×10秒(间隔50秒)，其后将匀浆物转移到35ml带螺口盖的离心管中.在原始玻璃管中在5ml氯仿∶甲醇2∶1中清洗聚集物，然后将其定量地转移到匀浆物中.向匀浆物中添加3ml(总匀浆物体积的0.24倍)在miliqh2o中的0.73％(w/v)nacl并混合，然后在4℃下在2800g下离心5分钟以产生2相体系.将下层相转移至干净的12.5ml离心管中.然后向匀浆物(上层相)添加3ml氯仿∶甲醇85∶15并混合，然后进行另一离心步骤.然后分离新的下层相并添加到第一提取物中，并且在氮气条件下在40℃水浴中干燥，然后在300μl氯仿∶甲醇2∶1中再增溶.至此可将脂质提取物在-20℃下储存。脂质分级将脂质提取物在氨基-丙基柱上分级(phenomenexstratanh2，产品号：8b-s009-hbj).用2×2ml氯仿∶甲醇23∶1(v∶v)预洗涤该柱并干燥.在分级期间不允许柱干燥.用2×1ml己烷装填该柱，然后施加脂质提取物.用3ml己烷将包含胆固醇酯的级分1洗脱到干净管中.用3ml己烷∶氯仿∶乙酸乙酯100∶5∶5(v∶v∶v)将包含tag的级分2洗脱到干净管中.用3×2ml氯仿∶甲醇23∶1(v∶v)将包含dag、胆固醇和神经酰胺的级分3洗脱到新管中.用5ml在二乙醚中的2％乙酸将包含ffa的级分4洗脱到新管中.用4ml甲醇将包含pl的级分5洗脱到新管中.将级分1和2在氮气条件下于40℃下干燥并再溶解于300μl氯仿∶甲醇95∶5中，并在-20℃下储存.将级分4和一半的级分5(级分5a)在氮气条件下于40℃下干燥并再溶解于300μl氯仿∶甲醇2∶1，并在-20℃下储存.将级分3同样地干燥并再溶解于135μl氯仿和67.5μl异丙醇中，转移到hplc小瓶并在-20℃下储存.将另一半级分(级分5b)在氮气条件下干燥并再溶解于200μl氯仿∶异丙醇1∶1(v∶v)中，转移到hplc小瓶并在-20℃下储存.脂肪酸甲基化为了允许进行脂肪酸的气相色谱分析，必须将脂肪酸转化成更易挥发的脂肪酸甲酯(fattyacidmethylester，fame)形式.这使用三氟化硼催化的甲基化在甲醇中进行.对于甲基化步骤，甘油三酯必须水解，这在程序的第一步骤中在碱性条件下进行.这之后进行甲基化并提取fame产物.将级分在氮气条件下于40℃下干燥，然后添加1ml在甲醇中的0.5mnaoh.将用螺纹盖紧紧封闭的样品管在加热块(heatingblock)中于80℃下回流5分钟以介导水解.在水解步骤之后使样品冷却到室温，然后添加1ml在甲醇中的20％bf和0.5ml在甲醇中的0.1％氢醌.然后使样品在80℃下回流2分钟以介导甲基化，然后冷却.向样品中添加2ml在milli-q中的0.73％nacl，然后混合10秒.这通过增加含水量提高了甲醇相的极性.然后向样品中添加0.5ml庚烷，然后混合10秒，以提取fame，并在2800g下离心1分钟.将上层相(庚烷)转移到干净3ml离心管中.向甲基化样品中添加另外0.5ml庚烷，混合，离心并转移到第一提取物中.弃去剩余溶液.向上层相(庚烷提取物)添加1ml饱和碱性nacl溶液，混合10秒并在2800g下离心1分钟.然后将上层相转移到新的3ml管中.在甲基化之后tag级分随时可用并被转移到具有小体积插件(insert)的gc小瓶中.使用gc-fid的脂质分析使用具有熔融二氧化硅毛细管柱的agilent6890n气相色谱仪(sigma-aldrich；supelcosp-2380，产品号：24111)和火焰离子化检测器(flameionizationdetector，fid)分析甲基化的脂质级分.数据处理如下计算总甘油三酯和花生四烯酸：总峰面积(面积tot)(减去内标的面积)与内标的面积(面积in-std)之比，乘以内标的质量(min-std).这在等式(1)中详述.为了得到最终浓度，将总含量通样品重量归一化.等式(1)：如下鉴定并计算单一脂肪酸含量：单一脂肪酸峰面积(面积fa)与减去内标峰面积(面积in-std)的总鉴定脂肪酸(面积id)之比，并以百分比表示.这在等式(2)中详述.等式(2)：结果16天初始研究的结果示于图1至3中.如图1中所见，与盐水相比，在16天处理内，肽accsnlstcvlgklsqelhklqtyprtdvganap-nh2(kbp-042)(seqidno：54)降低了摄食(a)、体重增加(b)和内脏脂肪(附睾)(c).如图2中所见，kbp-肽引起在提取的肝组织中三酰甘油和花生四烯酸(促炎介质)含量的升高.如图3中所见，kbp-肽引起在提取的肝组织中游离脂肪酸含量的升高.因此，16天研究证明kbp-042如预期地在初期引起摄食显著减少，这导致明显的体重降低.此外，脂肪储存减少.重要的是，肝脂肪酸成分的分析显示kbp-042减少三酰甘油和游离脂肪酸蓄积，这表明对脂肪肝的益处.最后，kbp-042减少肝中脂肪酸花生四烯酸的水平，并且因此在肝中预防脂肪肝和脂肪变性方面，该分子水平的减少应当是有益的.8周研究的结果示于图4至7中，证实了所有这些初始研究的结果。如图4中所见，甚至当与卡路里限制组(成对饲喂)相比，kbp-肽引起显著的重量降低，这表明大量的重量降低不依赖于对摄食的调节.8-周研究还包括成对饲喂对照(卡路里限制)，并且因此还证实了kbp-042对体重和脂肪肝的有益作用不依赖于摄食的减少.如图5中所见，与载剂相比，甚至在成对饲喂实验中，kbp肽降低肾周脂肪储存的测量值.如图6中所见，与载剂相比，甚至在成对饲喂实验中，kbp肽降低肝的甘油三酯含量.如图7中所见，在8周处理之后kbp肽引起三酰甘油的升高.实施例2-体重减轻(kbp-042)将正常饮食组(normaldiet，nd)包括在内，以作为高脂饮食(highfatdiet，hfd)大鼠的所有研究参数的参考.nd组的终点数据呈现在图8中，所进行的测试的全部结果总结在图9中并与hfd-载剂进行比较.图8示出：a)在研究期间从处理的第0天至最后一天(第56天)随机取样的绝对体重进展；b)载剂校正的体重；c)终点体重；d)在整个研究期间所有处理组的摄食.对于前6天每天监测摄食，然后每周监测.成对饲喂组的饲喂与其对应的处理组的平均量(5μg/kg或10μg/kg)相同.除载剂(n＝12)外，对于所有组n＝10.用如下进行c)、e)和f)组之间的统计学分析：单因素anova，然后是具有以下注释的tukey事后检验：###p＜0.001相对于nd-对照；＊p＜0.05，＊＊p＜0.01，＊＊＊p＜0.001相对于hfd-载剂；p＜0.01，p＜0.001相对于成对饲喂5μg/kg；p＜0.01，p＜0.001相对于成对饲喂10μg/kg.数据表示为平均±sem.一般来说，hfd-载剂在经口和静脉内葡萄糖耐量测试中具有受损的葡萄糖耐量(曲线下方较高的总面积)，其在两个测试中均具有较高的胰岛素水平.所有数据表明，如预期的那样，hfd大鼠在处理初始时是肥胖的并且处于糖尿病前期(pre-diabetic).在用kbp-042处理8周之后，存在剂量依赖且持续的体重降低.在研究的初始阶段，在三个最高处理组(2.5μg/kg，5μg/kg和10μg/kg)及两个对应的成对饲喂组(成对饲喂5μg/kg和成对饲喂10μg/kg)中观察到了大幅重量减轻(图8a和8b).这很好地对应于在处理的前6天中摄食方面的大幅降低(图8d).然而，在研究过程期间，在这样的进食方面短暂的大幅降低之后，摄食正常化.在摄食增加之后，成对饲喂组体重再次增加，而kbp-042处理在整个56天的处理中维持初始的重量降低.在第56天，对动物称重并对kbp-042处理进行评价.与hfd载剂相比，对于2.5μg/kg、5μg/kg和10μg/kg组，体重显著降低.减少的摄食很好地对应于三个最高处理组(2.5μg/kg、5μg/kg和10μg/kg)的体重改变(图8e)，尽管成对饲喂组(其接受与它们对应的处理组相同量的食物)与hfd载剂动物没有显著不同的重量.在摄食和体重改变的基础上，计算食物效率(图8f)，并且如同预期，用2.5μg/kg、5μg/kg和10μg/kg的kbp-042处理导致食物效率急剧降低，这与成对饲喂对照显著不同，可能是表示增加的能量消耗.总之，kbp-042介导体重大幅降低并维持体重减轻持续8周.实施例3-脂肪组织的减少(kbp-042)在实施例2的研究结束时，分离三种不同的脂肪组织.结果示于图10中：a)至c)在56天处理后的分离的附睾、腹股沟和肾周白色脂肪组织的各自重量；d)在用kbp-042或盐水处理56天后从肝组织中提取的总三酰甘油含量；e)、f)在56天处理后的各血浆脂联素(adiponectin)和瘦素的水平.除载剂(n＝12)外，对于所有组n＝10.用如下进行组之间的统计学分析：单因素anova，然后具有以下注释的tukey事后检验：##p＜0.01，###p＜0.001相对于nd-对照；＊p＜0.05，＊＊p＜0.01，＊＊＊p＜0.001相对于hfd-载剂；p＜0.05，p＜0.01相对于成对饲喂5μg/kg；p＜0.05相对于成对饲喂10μg/kg.数据表示为平均±sem.如图10a至c中所见，在用10μg/kgkbp-042处理之后，分离的附睾和肾周白色脂肪组织的重量显著减少.对于肾周脂肪组织，甚至2.5、5、10μg/kg组显示出了显著的尺寸减少.在成对饲喂对照中未看到相同减少.腹股沟白色脂肪组织存在减少的趋势.为了评估肝中的脂质蓄积，从肝中提取三酰甘油(tag)并进行分析(图10d).如预期的，与nd组相比，hfd载剂组具有显著更高的tag水平。在用10μg/kgkbp-042处理之后该蓄积显著减少，而对应的成对饲喂对照组未显示出肝tag的显著减少.tag水平的巨大差异使得难以获得统计显著性，然而，该趋势表明了剂量依赖性的作用.为了评估处理是否以选择性方式改变脂肪酸代谢(例如饱和的相对于单不饱和的相对于多不饱和的代谢)，我们还分析了肝tag的脂肪酸组成.结果表明相对分布方面没有差异，即处理引起tag普遍减少，而不影响特定脂肪酸类型的代谢(图9).最后，在56天处理之后，测量两种脂肪因子：脂联素和瘦素(图10e和10f).响应与用1.25μg/kg、2.5μg/kg、5μg/kg和10μg/kgkbp-042剂量的处理，脂联素水平显著增加.对于瘦素，当比较10μg/kgkbp-042与对应的成对饲喂对照时，血浆瘦素水平存在减少的趋势，其达到统计显著性.总之，脂肪储存、脂质和脂肪因子数据支持明显改善的代谢状态作为kbp-042治疗的功能.通过kbp-042减少了脂肪组织和异常脂质蓄积.实施例4-肝脂肪的降低水平(kbp-042和kbp-089)在实施例2研究结束时，采用快速冷冻将大鼠肝包埋在oct中，然后使用低温切片机切片.从以下四组制备切片：hfd大鼠的kbp-042、hfd大鼠的kbp-089、对照hfd大鼠和瘦大鼠比较组(comparison).采用油红o染色对切片进行染色.与瘦大鼠(图11a)相比，来自hfd饲喂大鼠的肝切片的染色(图11b)示出了脂质蓄积显著增加57.1％(p＜0.01).与载剂相比，来自每天用2.5μg/kgkbp-042处理的大鼠的肝中的脂质蓄积(图11c)显著减少了hfd-引发的脂质蓄积的78.3％(p＜0.05)，并且与瘦大鼠相似(p＝0.8173).与载剂相比，来自用2.5μg/kgkbp-089处理的大鼠的肝中的脂质蓄积(图11c)显著减少脂质蓄积的155.3％(p＜0.001)，并且还与瘦大鼠相似(p＝0.9976)。在成对饲喂kbp-089中肝的脂质蓄积超过用kbp-089处理的大鼠66.5％(p＜0.001)，并且与载剂组没有明显不同(0.6711).进行的统计学检验是单因素anova和用于多重比较的dunnet事后检验.＊＊p＜0.01，＊＊＊p＜0.001.因此，如图11c和11d中所见，kbp-042和kbp-089处理导致存在于肝切片中的脂质大量减少直至在瘦大鼠中所观察到的水平.当对染色强度定量时(图11f)，这些数据证实了kbp-042和kbp-089引起肝脂质蓄积的显著减少.结果表明，可以通过kbp处理而非通过卡路里限制来减少肝组织中hfd引发的脂质蓄积.实施例5-提高的葡萄糖耐量(kbp-042)为了评估重量和肝脂肪减少是否表明提高的葡萄糖耐量，在未经处理的动物(treatmentnaiveanimal)(在单次注射之后)中、在处理3周后以及在处理7周后进行经口葡萄糖耐量测试.在时间＝0时采用经口葡萄糖推注(2g/kg)攻击动物，并在t＝-30时用kbp-042或盐水给药.图12a、12b和12c分别示出了在急性ogtt、3周后ogtt和7周后ogtt期间的血糖水平.图12d、12e和12f示出了分别在急性ogtt、3周后的ogtt和7周后的ogtt的曲线下的面积.图12g、12h和12i分别示出了在急性ogtt、3周后ogtt和7周后ogtt期间的胰岛素水平.图12j、12k和12l分别示出了表示为曲线下的面积的急性ogtt、3周后ogtt和7周后ogtt期间的胰岛素水平.除载剂(n＝12)外，对于所有组n＝10.用如下进行组之间的统计学分析：单因素anova，然后是具有以下注释的tukey事后检验：＊p＜0.05，＊＊p＜0.01，＊＊＊p＜0.001相对于hfd载剂；p＜0.01，p＜0.001相对于成对饲喂5μg/kg；p＜0.01，p＜0.001相对于成对饲喂10μg/kg.数据表示为平均±sem.在急性给药之后进行的ogtt示出了与hfd-载剂相比，10μg/kg组的轻微受损的葡萄糖耐量(图12a).在皮下施用kbp-042(在t＝0时)后30分钟观察到了高血糖效应.在注射10μg/kgkbp-042时曲线下的总面积(totalareaunderthecurve，tauc)显著提高(图12d).然而，在用kbp-042给药的动物中，在葡萄糖施用后的前60分钟期间胰岛素水平降低(图12g和12j)。在用kbp-042或盐水处理3周之后，三个最高剂量的kbp-042(2.5μg/kg、5μg/kg和10μg/kg)导致显著降低的tauc(图12b和12e).有趣的是，对于除0.625μg/kgkbp-042组之外的所有处理组，胰岛素水平降低(图12h和12k).成对饲喂10μg/kg组也具有降低的胰岛素应答(图12k).当在处理第7周时进行ogtt(图12c)时，如果考虑tauc(图12f)，则仅两个最高剂量组(5μg/kg和10μg/kg)显示出了提高的葡萄糖耐量.有趣的是，三个最高剂量组均具有提高的葡萄糖耐量(或对于2.5μg/kg组，其葡萄糖耐量维持)，同时在葡萄糖施用后的前60分钟内观察到胰岛素水平急剧降低(图12i和12l).与hfd-载剂相比，在成对饲喂组中没有观察到葡萄糖耐量或胰岛素水平的变化.总之，在慢性处理后用kbp-042处理提高了葡萄糖耐量并降低了胰岛素水平.实施例6-kbp-042对胰岛素敏感性的作用因为肝脂肪降低胰岛素敏感性是已知的，在高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术(hyperinsulinemic-euglycemicclamp)中采用葡萄糖输注率(glucoseinfusionrate，gir)考虑kbp-042对胰岛素敏感性的作用.对于此研究，比较了nd大鼠与胰岛素抵抗hfd大鼠以及经5μg/kgkbp-042处理的hfd大鼠.结果示于图13中：a)在21天处理后在高胰岛素-正葡萄糖钳夹期间(当血糖固定在基础水平时)在稳定状态下的葡萄糖输注率(gir)；b)在21天处理后在高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验时的体重.如下进行组之间的统计学分析：单因素anova，然后是具有以下注释的tukey事后检验：＊p＜0.05，＊＊p＜0.01，＊＊＊p＜0.001.数据表示为平均±sem.图13a示出了与nd相比，在hfd组中gir降低约30％(p＝0.057).与hfd-载剂相比，用kbp-042处理导致gir显著增加(82％，p＜0.001).与nd相比，当kbp-042处理时，gir增加了27％(p＜0.05).如预期的，与nd相比，在hfd处理10周之后体重增加(图13b).图13b示出了用kbp-042处理21天降低体重约18％，并且在研究结束时体重与nd大鼠没有明显不同.因此，在高胰岛素-正葡萄糖钳夹中，kbp-042提高了全身胰岛素敏感性.总之，在此我们提供了用于减少脂肪肝(该疾病由于肥胖的发生率增加在过去十几年间已经变得日益突显)的新可能性.在本说明书中，除非另外明确地指出，词语“或/或者”用作在满足所述条件中的一个或都满足时返回真值的操作(operator)，而不是要求只满足一个条件的“排他性或”的操作.使用的词语“包含”的意义是“包括”而不是“由......组成”.上文承认的所有现有技术教导均通过引用并入本文.本文中不承认任何在先发表的文献应被理解为承认或表示其教导在澳大利亚或其他地区在本公布日期为公知常识。当前第1页12当前第1页12