四氢异喹啉并苯二氮*类的制作方法

无。相关申请的引用本申请是于2016年2月19日提交的第15/048,865号美国申请的继续申请，所述第15/048,865号美国申请要求了于2015年3月19日提交的第62/135,380号美国申请的优先权，上述各个申请通过引用以其整体并入本文。关于序列表的提交通过引用将文件0971543_st25.txt中所撰写的序列表并入本文，该序列表创建于2016年2月5日，1,868字节，机器格式为ibm-pc，ms-windows操作系统。发明背景苯二氮类已被用作治疗剂。苯二氮衍生物包括吡咯并苯二氮吡咯并苯二氮二聚体，例如，通过在dna分子的小沟中结合，起到dna交联剂的作用。这些衍生物中的一些已被提出作为癌症治疗中的抗增殖剂。us8,592,576(howard等人)涉及据称用于治疗增殖性疾病的不对称的吡咯并苯二氮二聚体。wo1993/18045涉及据称具有细胞毒活性的吡咯并苯二氮衍生物。wo2004/087716(kamal等人)涉及据称作为抗肿瘤剂有用的吡咯并(2,1-c)(1,4)苯二氮二聚体。us2008/0090812(pepper等人)涉及据称适用于治疗白血病的吡咯并苯二氮二聚体，us2013/0266596(li等人)涉及据称具有抗增殖活性的苯二氮衍生物。us2014/00888089(chari)涉及据称具有抗增殖活性的苯二氮衍生物。hartley,johna.；“thedevelopmentofpyrrolobenzodiazepinesasantitumouragents”,2011,expertopiniononinvestigationaldrugs,20(6),733-744，涉及吡咯并苯二氮brulikova,l.等人,“dnainterstrandcross-linkingagentsandtheirchemotherapeuticpotential”,currentmedicinalchemistry,2012,19(3),364-385涉及dna链间交联剂。kamal等人,“design,synthesis,andevaluationofnewnoncross-linkingpyrrolobenzodiazepinedimerswithefficientdnabindingabilityandpotentantitumoractivity”j.med.chem.,2002,45(21),pp4679-4688涉及吡咯并苯二氮化学。tercel等人,“unsymmetricaldnacross-linkingagents:combinationofthecbiandpbdpharmacophores”journalofmedicinalchemistry(2003),46(11),2132-2151涉及吡咯并苯二氮本背景中的陈述不必然意在认可所引用文献中的特征描述。发明概述一方面，提供了化合物，其具有式(i)或式(ii)的结构：其中-c(ra)-与-n(rb)-或-c(ra’)-与-n(rb’)-之间示出的虚线键独立地为单键或双键。当-c(ra)-与-n(rb)-之间存在双键时，-c(ra)-是烯属的并且具有取代基ra，并且-n(rb)-的rb不存在。当-c(ra)-与-n(rb)-之间存在单键时，-c(ra)-是饱和的并且除了ra取代基之外还具有氢取代基，并且-n(rb)-的rb存在。当-c(ra’)-与-n(rb’)-之间存在双键时，-c(ra’)-是烯属的并且具有取代基ra’，并且-n(rb’)-的rb’不存在。当-c(ra’)-与-n(rb’)-之间存在单键时，-c(ra’)-是饱和的并且除了ra’取代基之外还具有氢取代基，并且-n(rb’)-的rb’存在。各个ra和ra’独立地为h、oh或-o-p，其中p为保护基。如果存在，各个rb和rb’独立地为h、l-rx或l-sc；r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6各自独立地选自h、oh、c1-c10烷基、c2-c10烯基或c2-c10炔基；并且各个r5或r5’独立地为nh2、co2h、h、ohc1-c10烷基、c2-c10烯基、c2-c10炔基、-l-rx或-l-sc；各个r7和r7’为h。r8为h、nh2、co2h、-l-rx、或-l-sc，其中r8连接的碳还具有氢取代基；或者r8为具有结构的外型烯烃，其中r8连接的碳不具有其他取代基。x为c1-12亚烷基，任选地其中所述亚烷基链被一个或多个选自o、s和nh的杂原子间断；或者为-(ch2)m-q-(ch2)p-，其中m和p各自独立地为0、1或2。q具有以下式的结构：其中各个r9、r10和r11为h、nh2、co2h、-l-rx或-l-sc；并且j为ch或n。各个y和y’独立地为o、s或nh；并且各个z和z’独立地为h、r、oh、or、sh、sr、nh2或nhr，其中各个r独立地为未取代的c1-c12烷基、取代的c1-c12烷基、未取代的c3-c20杂环基、取代的c3-c20杂环基、未取代的c6-c20芳基、以及未取代的c6-c20芳基。-l-rx为连接至反应性部分rx的连接子l，并且-l-sc为连接至物质sc的连接子l；其中l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分；rx为反应性部分；sc为选自蛋白质、蛋白质的部分、肽或核酸的靶标结合剂；并且当-l-rx或-l-sc存在于式i或式ii的化合物时，仅rb、rb’、r5、r5’、r8、r9、r10和r11之一为l-rx或-l-sc。在一些实施方案中，y和y’可以各自为o。在其他实施方案中，z和z’可以各自独立地选自c1-c3烷氧基。在一些实施方案中，z和z’各自独立地为or，其中各个r独立地为未取代的c1-c3烷基。在各种实施方案中，x可以为-ch2-。在一些实施方案中，x可以为q。在一些实施方案中，当x为q时，则j可以为ch。在各种实施方案中，r9、r10或r11之一可以为-l-rx或-l-sc。在一些实施方案中，化合物可以具有式i的结构，并且r5或r5’之一可以为-l-rx或-l-sc。在其他实施方案中，化合物可以具有式ii的结构，并且r5或r8之一可以为-l-rx或-l-sc。或者，化合物可以具有式i的结构，并且rb或rb’之一可以为-l-rx或-l-sc。在其他实施方案中，化合物可以具有式ii的结构，并且rb或rb’之一可以为-l-rx或-l-sc。在一些实施方案中，化合物为式i或式ii的化合物，其中各个ra和ra’独立地为h或oh；如果存在，各个rb和rb’独立地为h或l-rx；r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r5、r5’、r6’、r6、r7和r7’各自为h；r8为h；或者为具有结构的外型烯烃，其中r8连接的碳不具有其他取代基；x为c1-12亚烷基；各个y和y’为o；各个z和z’独立地为or，其中各个r独立地为未取代的c1-c3烷基；-l-rx为连接至反应性部分rx的连接子l；其中l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分；rx为反应性部分；并且当-l-rx存在于式i或式ii的化合物时，仅rb和rb’之一为l-rx。在一些实施方案中，化合物为式i或式ii的化合物，其中各个ra和ra’独立地为h或oh；如果存在，各个rb和rb’独立地为h、l-rx；r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r5、r5’、r6’、r6、r7和r7’各自为h；x为c1-12亚烷基；各个y和y’为o；各个z和z’独立地为or，其中各个r独立地为未取代的c1-c3烷基；-l-rx为连接至反应性部分rx的连接子l；其中l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分；rx为反应性部分；并且当-l-rx存在于式i或式ii的化合物时，仅rb和rb’之一为l-rx。在一些实施方案中，化合物为式i或式ii的化合物，其中ra为h；ra’为oh；rb不存在；rb’为l-rx；r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r5、r5’、r6’、r6、r7和r7’各自为h；x为c1-12亚烷基；各个y和y’为o；各个z和z’独立地为or，其中各个r独立地为未取代的c1-c3烷基；-l-rx为连接至反应性部分rx的连接子l；其中l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分；rx为反应性部分。在一些实施方案中，化合物为式i或式ii的化合物，其中各个ra和ra’独立地为h或oh；如果存在，各个rb和rb’独立地为h、l-rx；r2、r2’、r3、r4、r5、r6、r7和r7’各自为h；r8为h；或者为具有结构的外型烯烃，其中r8连接的碳不具有其他取代基；x为c1-12亚烷基；各个y和y’为o；各个z和z’独立地为or，其中各个r独立地为未取代的c1-c3烷基；-l-rx为连接至反应性部分rx的连接子l；其中l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分；rx为反应性部分；并且当-l-rx存在于式i或式ii的化合物时，仅rb和rb’之一为l-rx。在一些实施方案中，化合物为式i或式ii的化合物，其中各个ra和ra’为h；各个rb和rb’不存在；r2、r2’、r3、r4、r5、r6、r7和r7’各自为h；r8为h；x为c1-12亚烷基；各个y和y’为o；并且各个z和z’独立地为or，其中各个r独立地为未取代的c1-c3烷基。在一些实施方案中，式i或式ii的化合物具有以下式之一的结构：clt-201；clt-202；clt-203；clt-204；clt-501；clt-502；clt-503；clt-601；clt-602；clt-603；或clt-604。在一些实施方案中，式i或式ii的化合物具有以下式之一的结构：clt-202；clt-201；clt-501；或clt-601。在一些实施方案中，式i的化合物具有以下式之一的结构：clt-202；或clt-201。在一些实施方案中，式ii的化合物具有以下式之一的结构：clt-501；或clt-601。在一些实施方案中，rb、r5、r5’、r8、r9、r10或r11之一可以为-l-rx，其中rx可以为经由二硫化物连接至靶标结合剂上的半胱氨酸残基的部分。在其他实施方案中，rb、r5、r5’、r8、r9、r10或r11之一为-l-rx，其中rx可以为经由马来酰亚胺连接至靶标结合剂上的半胱氨酸残基的部分。在其他实施方案中，rb、r5、r5’、r8、r9、r10或r11之一为-l-rx，其中rx可以为通过还原二硫键和半胱氨酸残基的桥连烷基化来连接靶标结合剂上的两个半胱氨酸残基的部分，例如，通过二砜试剂、二硫代吡啶基马来酰亚胺或二溴马来酰亚胺连接。在其他实施方案中，rb、r5、r5’、r8、r9、r10或r11之一为-l-rx，其中rx可以为通过还原二硫键和半胱氨酸残基的桥连烷基化来连接靶标结合剂上的两个半胱氨酸残基的部分。在一些其他实施方案中，rb、r5、r5’、r8、r9、r10或r11之一可以为-l-rx，其中rx可以为经由琥珀酰亚胺连接部分连接至靶标结合剂上的赖氨酸残基的部分。在其他实施方案中，rb、r5、r5’、r8、r9、r10或r11之一可以为-l-rx，其中rx可以为连接至靶标结合剂上的非天然氨基酸残基的部分。在一些实施方案中，当rx为连接至靶标结合剂上的非天然氨基酸残基的部分时，rx可以为经由铜点击化学连接至对叠氮基甲基苯基丙氨酸残基的环辛炔部分，或者rx可以为经由肟缩合连接至对乙酰基苯基丙氨酸残基的氨氧基部分。在一些实施方案中，rb、r5、r5’、r8、r9、r10或r11之一可以为-l-rx，其中rx可以为通过糖工程连接至靶标结合剂上的n-聚糖的部分。在一些实施方案中，当rx为通过糖工程连接至靶标结合剂上的n-聚糖的部分时，则rx可以是经由无铜点击化学连接至靶标结合剂的叠氮基部分的环辛炔部分，其中所述叠氮基部分通过将半乳糖和9-叠氮基唾液酸酶促转移至n-聚糖来被工程化(engineered)。在其他实施方案中，当rx为通过糖工程连接至靶标结合剂上的n-聚糖的部分时，则rx可以为经由肟缩合连接至靶标结合剂的醛部分的氨氧基部分，其中所述醛通过将半乳糖和唾液酸酶促转移至n-聚糖然后进行高碘酸盐氧化来被工程化。在一些实施方案中，rb、r5、r5’、r8、r9、r10或r11之一可以为-l-rx，其中rx可以为连接至靶标结合剂上的工程化谷氨酰胺-标签的部分。在一些实施方案中，当其中rx为连接至靶标结合剂上的工程化谷氨酰胺-标签的部分时，rx经由转谷氨酰胺酶介导的缀合连接至抗体的fc部分的q295位和/或n297q位(eukabat编号)。在其他实施方案中，rb、r5、r5’、r8、r9、r10或r11之一可以为-l-rx，其中rx可以为连接至通过甲酰甘氨酸酶介导的半胱氨酸至甲酰甘氨酸的转化然后进行肼基-皮克特-施彭格勒(hip)反应而生成的醛-标签的部分。在各种实施方案中，式i或式ii的化合物可以具有取代基-l-sc，其为共价连接至靶标结合剂的缀合物。在一些实施方案中，靶标结合剂可以是蛋白质。例如，具有式(i)或式(ii)的化合物可以包含在所指明位置的取代基-l-sc，其中sc为靶标结合剂。在一些实施方案中，当靶标结合剂为蛋白质时，则该蛋白质可以为抗体。在一些实施方案中，当靶标结合剂为蛋白质时，则该蛋白质可以为抗体片段。在其他实施方案中，当靶标结合剂为蛋白质时，则该蛋白质可以为抗体单链可变区片段(“scfv”)。在一些实施方案中，当式i或式ii的化合物为具有-l-sc的缀合物时，靶标结合剂可以连接至肿瘤相关抗原、癌症干细胞相关抗原或病毒抗原。在其他实施方案中，当式i或式ii的化合物为具有-l-sc的缀合物时，靶标结合剂可以结合选自以下的靶标：急性骨髓性白血病(amlm4)细胞、急性早幼粒细胞性白血病细胞、急性成淋巴细胞性白血病细胞、急性淋巴细胞性白血病细胞、慢性淋巴细胞性白血病细胞、慢性骨髓性白血病细胞、慢性t细胞淋巴细胞性白血病、骨髓增生异常综合征细胞、多发性骨髓瘤细胞、前列腺癌细胞、肾细胞腺癌细胞、胰腺癌细胞、肺癌细胞或胃腺癌细胞、胃腺癌细胞、乳腺癌细胞、结肠癌细胞、黑素瘤细胞、甲状腺癌细胞、卵巢癌细胞、膀胱癌细胞、肝癌细胞、头颈癌细胞、食道癌细胞、霍奇金淋巴瘤细胞、非霍奇金淋巴瘤细胞、间皮瘤细胞、成神经细胞瘤细胞、神经内分泌肿瘤细胞、1型神经纤维瘤(nf1)细胞、2型神经纤维瘤(nf2)或骨肉瘤细胞。在其他实施方案中，当式i或式ii的化合物为具有-l-sc的缀合物时，靶标结合剂可以连接选自以下的靶标：gpr114、cll-1、il1rap、tim-3、cd19、cd20、cd22、ror1、间皮素、cd33、cd123/il3ra、c-met、psma、前列腺酸磷酸酶(pap)、cea、ca-125、muc-1、afp、糖脂f77、egfrviii、gd-2、ny-eso-1tcr、酪氨酸酶、trpi/gp75、gp100/pmel-17、melan-a/mart-1、her2/neu、wt1、epha3、端粒酶、hpve6、hpve7、ebna1、bage、gage和magea3tcrslitrk6、enpp3、结合素-4、cd27、slc44a4、caix、cripto、cd30、muc16、gpnmb、bcma、trop-2、组织因子(tf)、canag、egfr、αv-整联蛋白、cd37、叶酸受体、cd138、ceacam5、cd56、cd70、cd74、gcc、5t4、cd79b、steap1、napi2b、lewisy抗原、livc-ret、dll3、efna4、内皮唾酸蛋白/cd248。在其他实施方案中，当式i或式ii的化合物为具有-l-sc的缀合物时，靶标结合剂可以为双特异性抗体/抗体片段。在一些实施方案中，当靶标结合剂为双特异性抗体/抗体片段时，双特异性抗体/抗体片段可以连接至一个或两个选自以下的靶标：gpr114、cll-1、il1rap、tim-3、cd19、cd20、cd22、ror1、间皮素、cd33、cd123/il3ra、c-met、psma、前列腺酸磷酸酶(pap)、cea、ca-125、muc-1、afp、糖脂f77、egfrviii、gd-2、ny-eso-1tcr、酪氨酸酶、trpi/gp75、gp100/pmel-17、melan-a/mart-1、her2/neu、wt1、epha3、端粒酶、hpve6、hpve7、ebna1、bage、gage和magea3tcrslitrk6、enpp3、结合素-4、cd27、slc44a4、caix、cripto、cd30、muc16、gpnmb、bcma、trop-2、组织因子(tf)、canag、egfr、αv-整联蛋白、cd37、叶酸受体、cd138、ceacam5、cd56、cd70、cd74、gcc、5t4、cd79b、steap1、napi2b、lewisy抗原、liv、c-ret、dll3、efna4、内皮唾酸蛋白/cd248。在另一个实施方案中，靶标结合剂为人源化的抗体/抗体片段。在另一个实施方案中，靶标结合抗体/抗体片段是被修饰的以含有非天然半胱氨酸残基。在另一个实施方案中，式i或式ii的化合物连接至靶标结合抗体/抗体片段的非天然半胱氨酸残基处。另一方面，本公开提供了抗体-药物缀合物，其包含特异性地结合癌性骨髓增生细胞和/或白血病癌症干细胞并且不结合正常造血干细胞的抗体/抗体片段。在一个实施方案中，抗体/抗体片段是人源化的。在另一个实施方案中，抗体/抗体片段是被修饰的以引入非天然半胱氨酸残基。在另一个实施方案中，将药物缀合至非天然半胱氨酸残基。在另一个实施方案中，药物为具有本文的式(i)或式(ii)的结构的化合物。在另一个实施方案中，每个抗体/抗体片段缀合的药物分子数为约1个至约10个。在另一个实施方案中，每个抗体/抗体片段缀合的药物分子数为约1个至约3个。具有式iii的结构的抗体-药物缀合物：其中：为抗体或抗体片段；w-rm为由w和rx形成的连接部分，其中w为连接抗体/抗体片段的天然或非天然氨基酸残基的部分，并且rx为将l-iqb连接至抗体的反应性部分；l为连接子，其中l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分；j为1至10的数；并且，iqb为具有式(i)或式(ii)的结构的化合物；(i)(ii)其中：-c(ra)-与-n(rb)-或-c(ra’)-与-n(rb’)-之间示出的虚线键独立地为单键或双键；当-c(ra)-与-n(rb)-之间存在双键时，-c(ra)-是烯属的并且具有取代基ra，并且-n(rb)-的rb不存在；当-c(ra)-与-n(rb)-之间存在单键时，-c(ra)-是饱和的并且除了ra取代基之外还具有氢取代基，并且-n(rb)-的rb存在；当-c(ra’)-与-n(rb’)-之间存在双键时，-c(ra’)-是烯属的并且具有取代基ra’，并且-n(rb’)-的rb’不存在；当-c(ra’)-与-n(rb’)-之间存在单键时，-c(ra’)-是饱和的并且除了ra’取代基之外还具有氢取代基，并且-n(rb’)-的rb’存在；各个ra和ra’独立地为h、oh或-o-p，其中p为保护基；如果存在，各个rb和rb’独立地为h或-l；r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6各自独立地选自h、oh、c1-c10烷基、c2-c10烯基或c2-c10炔基；各个r5或r5’独立地为nh2、co2h、h、ohc1-c10烷基、c2-c10烯基、c2-c10炔基、-l；各个r7和r7’为h；r8为：h、nh2、co2h或-l，其中r8连接的碳还具有氢取代基；或者为具有结构的外型烯烃，其中r8连接的碳不具有其他取代基；x为c1-12亚烷基，任选地其中所述亚烷基链被一个或多个选自o、s和nh的杂原子间断；或者为-(ch2)m-q-(ch2)p-，其中m和p各自独立地为0、1或2；q具有以下式的结构：其中各个r9、r10和r11为h、nh2、co2h、-l；并且j为ch或n；各个y和y’独立地为o、s或nh；各个z和z’独立地为h、r、oh、or、sh、sr、nh2或nhr，其中各个r独立地为未取代的c1-c12烷基、取代的c1-c12烷基、未取代的c3-c20杂环基、取代的c3-c20杂环基、未取代的c6-c20芳基、以及未取代的c6-c20芳基；并且其中仅rb、rb’、r5、r5’、r8、r9、r10和r11之一为-l。具有式iii的结构的抗体-药物缀合物：其中：为抗体或抗体片段；w-rm为由w和rx形成的连接部分，其中w为连接抗体/抗体片段的天然或非天然氨基酸残基的部分，并且rx为琥珀酰亚胺基、马来酰亚胺基、环辛炔基、氨氧基、二磺酰基(bisulfonyl)、磺酰基或异硫氰酸酯部分，以便w-rm为二硫化物、硫醇化的琥珀酰亚胺基、氨基取代的琥珀酰亚胺基、(环辛基)-1,4三唑基、肟取代的n-聚糖、肟、取代的二磺丙基、磺酰胺基、酰胺或硫代氨基甲酸乙酯部分；l为连接子，其中l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分；j为1至10的数；并且iqb为具有式(i)或式(ii)的结构的化合物：(i)(ii)其中：-c(ra)-与-n(rb)-或-c(ra’)-与-n(rb’)-之间示出的虚线键独立地为单键或双键；各个ra和ra’独立地为h、oh或-o-p，其中p为保护基；如果存在，各个rb和rb’独立地为h或者连接至连接子l的键；r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6各自独立地选自h、oh、c1-c10烷基、c2-c10烯基或c2-c10炔基；各个r5或r5’独立地为nh2、co2h、h、ohc1-c10烷基、c2-c10烯基、c2-c10炔基、连接至连接子l的键；各个r7和r7’为h；r8为h、nh2、co2h或连接至连接子l的键，其中r8连接的碳还具有氢取代基；或者为具有结构的外型烯烃，其中r8连接的碳不具有其他取代基；x为c1-12亚烷基，任选地其中所述亚烷基链被一个或多个选自o、s和nh的杂原子间断；或者为-(ch2)m-q-(ch2)p-，其中m和p各自独立地为0、1或2；q具有以下式的结构：其中各个r9、r10和r11为h、nh2、co2h、连接至连接子l的键；并且j为ch或n；各个y和y’独立地为o、s或nh；各个z和z’独立地为h、r、oh、or、sh、sr、nh2或nhr，其中各个r独立地为未取代的c1-c12烷基、取代的c1-c12烷基、未取代的c3-c20杂环基、取代的c3-c20杂环基、未取代的c6-c20芳基、以及未取代的c6-c20芳基；并且其中仅rb、rb’、r5、r5’、r8、r9、r10和r11之一为连接至连接子l的键。在抗体-药物缀合物的一个实施方案中，w直接或间接连接至抗体/抗体片段的氨基酸残基。在另一个实施方案中，rx为琥珀酰亚胺基、马来酰亚胺基、环辛炔基、氨氧基、二磺酰基、磺酰基或异硫氰酸酯部分。在另一个实施方案中，w-rm为二硫化物、硫醇化的琥珀酰亚胺基、氨基取代的琥珀酰亚胺基、(环辛基)-1,4三唑基、肟取代的n-聚糖、肟、取代的二磺丙基、磺酰胺基、酰胺或硫代氨基甲酸乙酯部分。在另一个实施方案中，-w-rm-l-iqb为具有式iv的结构的部分：在另一个实施方案中，抗体/抗体片段是人源化的。在另一个实施方案中，将抗体/抗体片段是被修饰的以引入非天然半胱氨酸残基。在另一个实施方案中，将药物缀合至非天然半胱氨酸残基。j为1至3。另一方面，提供了药物组合物，其包括式i或式ii的化合物：其中-c(ra)-与-n(rb)-或-c(ra’)-与-n(rb’)-之间示出的虚线键独立地为单键或双键。当-c(ra)-与-n(rb)-之间存在双键时，-c(ra)-是烯属的并且具有取代基ra，并且-n(rb)-的rb不存在。当-c(ra)-与-n(rb)-之间存在单键时，-c(ra)-是饱和的并且除了ra取代基之外还具有氢取代基，并且-n(rb)-的rb存在。当-c(ra’)-与-n(rb’)-之间存在双键时，-c(ra’)-是烯属的并且具有取代基ra’，并且-n(rb’)-的rb’不存在。当-c(ra’)-与-n(rb’)-之间存在单键时，-c(ra’)-是饱和的并且除了ra’取代基之外还具有氢取代基，并且-n(rb’)-的rb’存在。各个ra和ra’独立地为h、oh或-o-p，其中p为保护基。如果存在，各个rb和rb’独立地为h、l-rx或l-sc；r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6各自独立地选自h、oh、c1-c10烷基、c2-c10烯基或c2-c10炔基；并且各个r5或r5’独立地为nh2、co2h、h、ohc1-c10烷基、c2-c10烯基、c2-c10炔基、-l-rx或-l-sc；各个r7和r7’为h。r8为h、nh2、co2h、-l-rx或-l-sc，其中r8连接的碳还具有氢取代基；或者r8为具有结构的外型烯烃，其中r8连接的碳不具有其他取代基。x为c1-12亚烷基，任选地其中所述亚烷基链被一个或多个选自o、s和nh的杂原子间断；或者为-(ch2)m-q-(ch2)p-，其中m和p各自独立地为0、1或2。q具有以下式的结构：其中各个r9、r10和r11为h、nh2、co2h、-l-rx或-l-sc；并且j为ch或n。各个y和y’独立地为o、s或nh；并且各个z和z’独立地为h、r、oh、or、sh、sr、nh2或nhr，其中各个r独立地为未取代的c1-c12烷基、取代的c1-c12烷基、未取代的c3-c20杂环基、取代的c3-c20杂环基、未取代的c6-c20芳基、以及未取代的c6-c20芳基。-l-rx为连接至反应性部分rx的连接子l，并且-l-sc为连接至物质sc的连接子l；其中l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分；rx为反应性部分；sc为选自蛋白质、蛋白质的部分、肽或核酸的靶标结合剂；并且当-l-rx或-l-sc存在于式i或式ii的化合物时，仅rb、rb’、r5、r5’、r8、r9、r10和r11之一为l-rx或-l-sc。另一方面，提供了药物组合物，其包括本文描述的式i或式ii的化合物，其中所述化合物具有取代基-l-sc，其为共价连接至靶标结合剂的本公开的缀合物。另一方面，提供了本文描述的式i或式ii化合物，或者本公开的包括式i或式ii的化合物、具有本文描述的取代基-l-sc的缀合物在药物制备中的用途。另一方面，本文提供了治疗癌症的方法，包括使癌细胞接触，向患有癌症的对象施用治疗有效量的本文描述的式(i)或式(ii)的化合物，或者本文提供的其缀合物。在一个实施方案中，治疗的癌症是白血病、淋巴瘤或实体肿瘤。在另一个实施方案中，缀合物包含特异性地结合肿瘤相关抗原或癌症干细胞相关抗原的抗体。另一方面，本文提供了抑制细胞分裂的方法，包括使细胞接触本文提供的式(i)或式(ii)的化合物或本文提供的其缀合物。通过阅读以下说明书和权利要求，本公开的其他目的对于本领域技术人员而言可以是显而易见的。附图简述阐述了本公开的新颖的特征，尤其是在附随的权利要求中。参考阐述了示例性实施方案的下文的详细描述，将获得对本公开的特征和优点的更好的理解，在所述示例性实施方案中使用了本公开的原则，并且其附图为：图1示出了通式i和通式ii。图2示出了连接部分rb、rb’、r5、r5’和x。图3示出了化学合成clt-d201的实验方案。图4示出了化学合成clt-d501的实验方案。图5示出了化学合成clt-d601的实验方案。图6示出了化学合成clt-d501的合成中的中间体的实验方案。图7a、图7b和图7c示出了化学合成clt-d202的实验方案，包括连接子合成。图8示出了化学合成clt-d203的实验方案。图9a和图9b示出了化学合成clt-d204的实验方案。图10示出了各种iqb有效载荷中对白血病细胞系的细胞毒性。图11示出了iqb有效载荷对淋巴瘤细胞系ca46的细胞毒性。图12示出了各种iqb有效载荷中对白血病和淋巴瘤细胞系的gi50值(pg/ml)。图13示出了各种iqb有效载荷中对实体肿瘤细胞系的细胞毒性。图14示出了各种iqb有效载荷中对实体肿瘤细胞系的细胞毒性。图15示出了各种iqb有效载荷中对实体肿瘤细胞系的细胞毒性。图16示出了各种iqb有效载荷中对实体肿瘤细胞系的细胞毒性。图17示出了各种iqb有效载荷中对实体肿瘤细胞系的细胞毒性。图18示出了实体肿瘤细胞系的gi50值(pg/ml)的概述。图19示出了clt-d201与pbd1的有效载荷效力之间的比较。图20a、20b、20c和20d示出了clt-d202的合成方案。图21示出了抗cll1-d202缀合物的靶标依赖性细胞杀伤。图22a和22b示出了mdr+ve细胞系中cll1-adc表现的靶标依赖性细胞杀伤。图23示出了cll1-adc的杀伤与结合的比较。图24a和24b示出了cll1-adc杀伤静止细胞(quiescentcell)和增殖细胞。图25a-25b示出了cll1-adc的体内测试的结果。图26示出了cll1-adc抑制原代aml患者癌细胞的集落形成。发明详述本申请不限于所描述的具体方法或具体组合物，因为其可以变化。还应理解，本文使用的术语的目的仅在于描述具体的实施方案，并且并非意在限制，因为本申请的范围将仅由附随权利要求及其等同物限制。除非另外限定，本文使用的所有技术术语和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。虽然与本文描述的方法和材料类似或等同的任何方法和材料可以用于本申请的实践或测试，但现在描述优选的方法和材料。i.四氢异喹啉并苯二氮(isoquinolidinobenzodiazpines)四氢异喹啉并苯二氮(“iqb”)由本文公开的通式涵盖。该化合物可以通过其化学结构和/或化学名称鉴别。当化学结构与化学名称冲突时，化学结构决定该化合物的鉴别。化合物可以含有一个或多个手性中心和/或双键，并且因此可以作为立体异构体存在，例如双键异构体(即，几何异构体)、对映异构体或非对映异构体。因此，当未指定手性中心处的立体化学时，本文描述的化学结构涵盖在这些手性中心所有可能的构型，包括立体异构纯形式(例如，几何纯、对映异构体纯或非对映异构体纯)以及对映异构体和非对映异构体混合物。对映异构体和非对映异构体混合物可以使用技术人员熟知的分离技术或手性合成技术拆分成它们的组分对映异构体或非对映异构体。化合物还可以以多种互变异构形式存在，包括烯醇式、酮式和其混合物。因此，本文描述的化学结构涵盖所示化合物的所有可能的互变异构形式。四氢异喹啉并苯二氮可以以非溶剂化形式以及溶剂化形式(包括水合形式)存在，以及作为n-氧化物存在。通常，水合形式、溶剂化形式和n-氧化物形式在本公开的范围内。某些化合物可以以多晶形式或无定形形式存在。通常，所有的物理形式对于本文所涉及的用途而言是等同的，并且旨在包含于本公开的范围内。另外，应理解，当说明了化合物的部分结构时，括号表示部分结构与分子剩余部分的连接点。如本文提及的，“烷基”意指饱和的支链或直链或者环状的具有所示碳原子数(即，c1-c6意指1至6个碳原子)的单价烃基团，其通过从母体链烷的单个碳原子去除一个氢原子而得到。典型的烷基包括但不限于，甲基；乙基；丙基，例如丙-1-基、丙-2-基、环丙-1-基；丁基，例如丁-1-基、丁-2-基、2-甲基-丙-1-基、2-甲基-丙-2-基、环丁-1-基；等等。在一些实施方案中，“烷基”意指饱和的支链或直链的具有所示碳原子数(即，c1-c6意指1至6个碳原子)的单价烃基团，其通过从母体链烷的单个碳原子去除一个氢原子而得到。典型的烷基包括但不限于，甲基；乙基；丙基，例如丙-1-基、丙-2-基；丁基，例如丁-1-基、丁-2-基、2-甲基-丙-1-基、2-甲基-丙-2-基；等等。如本文提及的，“烯基”意指不饱和的支链的、直链的或环状的具有至少一个碳-碳双键的烃基，其通过从母体链烯的单个碳原子去除一个氢原子来得到。关于双键，基团可以为顺式构象或反式构象。典型的烯基包括但不限于，乙烯基；丙烯基，例如丙-1-烯-1-基、丙-1-烯-2-基、丙-2-烯-1-基、丙-2-烯-2-基、环丙-1-烯-1-基；环丙-2-烯-1-基；丁烯基，例如丁-1-烯-1-基、丁-1-烯-2-基、2-甲基-丙-1-烯-1-基、丁-2-烯-1-基、丁-2-烯-2-基、丁-1,3-二烯-1-基、丁-1,3-二烯-2-基、环丁-1-烯-1-基、环丁-1-烯-3-基、环丁-1,3-二烯-1-基等；等等。如本文使用的，“低级烯基”意指(c2-c8)烯基。在一些实施方案中，“烯基”意指不饱和的支链的、直链的具有至少一个碳-碳双键的烃基，其通过从母体链烯的单个碳原子去除一个氢原子而得到。关于双键，基团可以为顺式构象或反式构象。典型的烯基包括但不限于，乙烯基；丙烯基，例如丙-1-烯-1-基、丙-1-烯-2-基、丙-2-烯-1-基、丙-2-烯-2-基；丁烯基，例如丁-1-烯-1-基、丁-1-烯-2-基、2-甲基-丙-1-烯-1-基、丁-2-烯-1-基、丁-2-烯-2-基、丁-1,3-二烯-1-基、丁-1,3-二烯-2-基等；等等。如本文使用的，“低级烯基”意指(c2-c8)烯基。如本文提及的，“炔基”意指不饱和的支链的、直链的或环状的具有至少一个碳-碳叁键的烃基，其通过从母体链炔的单个碳原子去除一个氢原子而得到。典型的炔基包括但不限于，乙炔基；丙炔基，例如丙-1-炔-1-基、丙-2-炔-1-基等；丁炔基，例如丁-1-炔-1-基、丁-1-炔-3-基、丁-3-炔-1-基等；等等。如本文使用的，“低级炔基”意指(c2-c8)炔基。在一些实施方案中，“炔基”意指不饱和的支链的、直链的具有至少一个碳-碳叁键的烃基，其通过从母体链炔的单个碳原子去除一个氢原子来得到。典型的炔基包括但不限于，乙炔基；丙炔基，例如丙-1-炔-1-基、丙-2-炔-1-基等；丁炔基，例如丁-1-炔-1-基、丁-1-炔-3-基、丁-3-炔-1-基等；等等。如本文使用的，“低级炔基”意指(c2-c8)炔基。环状烷基、烯基和炔基也由术语“环烃基”定义，其意指饱和或部分不饱和的单环、稠合二环或桥连多环，其含有3至12个环原子或所示原子数。环烃基可以包含任何数量的碳，例如c3-6、c4-6、c5-6、c3-8、c4-8、c5-8、c6-8、c3-9、c3-10、c3-11和c3-12。饱和的单环的环烃基环包括，例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环辛基。饱和的二环和多环的环烃基环包括，例如，降莰烷、[2.2.2]二环辛烷、十氢化萘和金刚烷。环烃基也可以是部分不饱和的，在环中具有一个或多个双键或叁键。代表性的部分不饱和的环烃基包括但不限于，环丁烯、环戊烯、环己烯、环己二烯(1,3-异构体和1,4-异构体)、环庚烯、环庚二烯、环辛烯、环辛二烯(1,3-异构体、1,4-异构体和1,5-异构体)、降冰片烯和降冰片二烯。当环烃基为饱和的单环c3-8环烃基时，示例性的基团包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。当环烃基为饱和的单环c3-6环烃基时，示例性的基团包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基。环烃基可以是取代的或未取代的。如本文提及的，“亚烷基”意指二价烷基部分。如本文提及的，“烷氧基”意指具有将该烷基连接至连接点的氧原子的烷基：烷基-o-。对于烷基，烷氧基可以具有任何适合数目的碳原子，例如c1-6。烷氧基包括，例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、2-丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。烷氧基可以进一步被多种本文描述的取代基取代。烷氧基可以是取代的或未取代的。如本文提及的，“卤化物”意指氟代、氯代、溴代或碘代。如本文提及的，“酰胺(carboxamide)”意指具有式-c(＝o)nh2的单价部分。在一些实施方案中，酰胺氢中的一个或两个可以被不同于氢的取代基替代。如本文提及的，“酰胺基(carboxamidyl)”意指具有式-c(＝o)n(h)-的二价部分。在一些实施方案中，酰胺氢可以被其他取代基替代。如本文提及的，“氧代”意指具有连接至碳的式的部分。如本文提及的，“羧基”意指具有式-c(o)oh或-c(o)o-的部分。如本文提及的，“杂烷基”意指任何适合的长度并且具有1至3个诸如n、o和s的杂原子的烷基。另外的杂原子也可以是有用的，包括但不限于，b、al、si和p。杂原子也可以被氧化，例如，但不限于-s(o)-和-s(o)2-。例如，杂烷基可以包括醚、硫醚和烷基-胺。杂烷基的杂原子部分可以替代烷基的氢以形成羟基、硫代或氨基。或者，杂原子部分可以为连接原子，或者插入在两个碳原子之间。如本文提及的，“杂环”或“杂环基”意指这样的部分，即，具有替代环碳的杂原子取代的饱和或不饱和的单环或多环的烷基环状部分。多环杂环部分可以具有稠环。典型的杂环包括但不限于，四氢呋喃基(例如，四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基等)、哌啶基(例如，哌啶-1-基、哌啶-2-基等)、吗啉基(例如，吗啉-3-基、吗啉-4-基等)、哌嗪基(例如，哌嗪-1-基、哌嗪-2-基等)等。如本文提及的，“芳香”或“芳基”意指具有所示数量的碳原子(即，c6-c14意指6至14个碳原子)的单价芳香烃基，其通过从母体芳香环系统的单个碳原子去除一个氢原子而得到。典型的芳基包括但不限于，来源于醋蒽烯、苊烯、醋菲烯(acephenanthrylene)、蒽、薁、苯、晕苯、荧蒽、芴、并六苯、己芬、己烯、不对称引达省、对称引达省、茚满、茚、萘、八并苯(octacene)、八苯(octaphene)、辛搭烯(octalene)、卵苯、并五苯(pentacene)、戊搭烯、五苯(pentaphene)、苝、非那烯、菲、苉、七曜烯、芘、吡蒽、玉红省、苯并菲、三萘等的基团，以及其各种氢化异构体。具体的示例性芳基包括苯基和萘基。如本文提及的，“杂芳香”或“杂芳基”意指共含有5至16个环原子的单环或稠合的二环或三环的芳香环，其中环原子的1至5个为诸如n、o或s的杂原子。另外的杂原子也可以是有用的，包括但不限于b、al、si和p。杂原子也可以被氧化，例如，但不限于-s(o)-和-s(o)2-。杂芳基可以包括任何数量的环原子，例如，3至6个、4至6个、5至6个、3至8个、4至8个、5至8个、6至8个、3至9个、3至10个、3至11个或3至12个环成员。任何适合数量的杂原子可以包含于杂芳基内，例如1个、2个、3个、4个或5个，或者1至2个、1至3个、1至4个、1至5个、2至3个、2至4个、2至5个、3至4个或3至5个。杂芳基可以具有5至8个环成员和1至4个杂原子，或者5至8个环成员和1至3个杂原子，或者5至6个环成员和1至4个杂原子，或者5至6个环成员和1至3个杂原子。杂芳基可以包括诸如吡咯、吡啶、咪唑、吡唑、三唑、四唑、吡嗪、嘧啶、哒嗪、三嗪(1,2,3-异构体、1,2,4-异构体和1,3,5-异构体)、噻吩、呋喃、噻唑、异噻唑、噁唑和异噁唑的基团。杂芳基也可以稠合至诸如苯基环的芳香环系统以形成成员，所述成员包括但不限于，苯并吡咯，例如吲哚和异吲哚；苯并吡啶，例如喹啉和异喹啉；苯并吡嗪(喹喔啉)；苯并嘧啶(喹唑啉)；苯并哒嗪，例如酞嗪和噌啉；苯并噻吩和苯并呋喃。其他杂芳基包括通过键连接的杂芳基环，例如二吡啶。杂芳基可以是取代的或未取代的。如本文提及的，“c1-c12”意指所描述基团中包含的碳原子数量范围。例如c1-c12烷基具有1个碳至12个碳原子，并且可以是1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个或12个碳中的任一种。c1烷基为甲基，c2烷基为乙基，依此类推。提及c1-c10意指1个至10个碳，c1-c3意指1个至3个碳，等等。如本文提及的，“取代的”意指氢基团被去除并且另一非氢取代基将其代替的部分。可以将超过1个取代基结合任何部分，只要遵守化合价的规则。适合用于烷基、烯基、炔基、芳香基团或杂环基团的取代基包括-oh、-or、-nh2、-nhr、-nr2、-co2h、-co2r、-c(o)nh2、-c(o)nhr、-c(o)nr2、卤化物、氧代和r，其中r为c1-c6烷基。如本文提及的，术语“核酸”是指通过核苷间的键结合的核苷(包括脱氧核糖核苷、核糖核苷或其类似物)的直链聚合物。核酸可以涵盖术语“多核苷酸”以及“寡核苷酸”。直链聚合物可以由字母的序列表示，例如“atgcctg”，其中应理解，核苷酸是从左至右5'至3'的顺序，并且除非另外说明，“a”表示脱氧腺苷，“c”表示脱氧胞苷，“g”表示脱氧鸟苷，并且“t”表示脱氧胸苷。另一种天然核苷酸为“u”，表示尿苷。字母a、c、g、t和u可以用于指碱基自身，指核苷，或者指包含碱基的核苷酸，按照本领域的标准。在天然存在的核酸中，核苷间键通常为磷酸二酯键，并且亚基被称为“核苷酸”。核酸还可以包括其他核苷间的键，例如硫代磷酸酯键等。此类不包括磷酸基团的核苷酸的类似物被认为落入本文使用的术语“核苷酸”的范围内，并且包含一种或多种不为磷酸二酯键的核苷间键的核酸仍然被称为“多核苷酸”、“寡核苷酸”等。术语“氨基酸”是指二十种“经典的”或“天然的”氨基酸，以及“非经典的”氨基酸，也被称为“非天然的”氨基酸，例如修饰的或合成的氨基酸，以及功能类似于天然存在氨基酸的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然存在的氨基酸是那些由遗传密码编码的氨基酸。修饰的氨基酸包括，例如，羟基脯氨酸、γ-羧基谷氨酸和o-磷酸丝氨酸。氨基酸类似物是指具有与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构的化合物，所述化学结构例如，与氢、羧基、氨基连接的α碳和r基团，例如，高丝氨酸、正亮氨酸、蛋氨酸亚砜、甲硫氨酸甲基锍。这种类似物可以具有被修饰的r基团(例如，正亮氨酸)或者修饰的肽骨架，但保留与天然存在氨基酸相同的基础化学结构。氨基酸模拟物是指具有不同于氨基酸的常规化学结构的结构但功能类似于天然存在氨基酸的化合物。细胞毒素化合物的化学性质的具体描述本文提供了具有式(i)或式(ii)的结构的化合物：(i)(ii)其中-c(ra)-与-n(rb)-或-c(ra’)-与-n(rb’)-之间的虚线键独立地选自单键或双键；当-c(ra)-与-n(rb)-之间存在双键时，环碳-c(ra)-是烯属的并且具有取代基ra，并且-n(rb)-的环外rb不存在；当-c(ra)-与-n(rb)-之间存在单键时，环碳-c(ra)-是饱和的并且除了ra取代基之外还具有氢环外取代基，并且-n(rb)-的rb存在；和/或当-c(ra’)-与-n(rb’)-之间存在双键时，环碳-c(ra’)-是烯属的，并且具有取代基ra’，并且-n(rb’)-的rb’不存在；当-c(ra’)-与-n(rb’)-之间存在单键时，-环碳c(ra’)-是饱和的并且除了ra’取代基之外还具有氢取代基，并且-n(rb’)-的rb’存在；各个ra和ra’独立地为h、oh或-o-p，其中p为保护基；如果存在rb或rb’的一个或两个，各个rb和rb’独立地为h、l-rx或l-sc；r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6各自独立地选自h、oh、c1-c10烷基、c2-c10烯基或c2-c10炔基；各个r5或r5’独立地为nh2、co2h、h、oh、c1-c10烷基、c1-c10烯基或c1-c10炔基、-l-rx或-l-sc；各个r7和r7’为h；r8为h、nh2、co2h、-l-rx或-l-sc，其中r8连接的碳还具有氢取代基；或者r8为具有结构的外型烯烃，其中r8连接的环碳是烯属的并且不具有其他环外的取代基；x为c1-12亚烷基，任选地其中所述亚烷基链被一个或多个选自o、s和nh的杂原子间断；或者x为-(ch2)m-q-(ch2)p-，其中m和p各自独立地为0、1或2；q具有以下式的结构：其中各个r9、r10和r11为h、nh2、co2h、-l-rx或-l-sc；并且j为ch或n；各个y和y’独立地为o、s或nh；各个z和z’独立地为h、r、oh、or、sh、sr、nh2或nhr，其中各个r独立地为未取代的c1-c12烷基、取代的c1-c12烷基、未取代的c3-c20杂环基、取代的c3-c20杂环基、未取代的c5-c20芳基、以及未取代的c5-c20芳基；-l-rx为连接至反应性部分rx的连接子l；-l-sc为连接至物质sc的连接子l；l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分；rx为反应性部分；sc为选自蛋白质、蛋白质的部分或肽的靶标结合剂；以及当-l-rx或-l-sc存在于式i或式ii的化合物时，仅rb、rb’、r5、r5’、r8、r9、r10、r11之一为l-rx或-l-sc。本文还提供了式i或式ii的化合物：(i)(ii)其中：-c(ra)-与-n(rb)-或-c(ra’)-与-n(rb’)-之间示出的虚线键独立地为单键或双键；各个ra和ra’独立地为h、oh或-o-p，其中p为保护基；各个rb和rb’不存在或独立地为h或l-rx；r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6各自独立地选自h、oh、c1-c10烷基、c2-c10烯基或c2-c10炔基；各个r5或r5’独立地为nh2、co2h、h、oh、c1-c10烷基、c2-c10烯基、c2-c10炔基或-l-rx；各个r7和r7’为h；r8为h、nh2、co2h或-l-rx，其中r8连接的碳还具有氢取代基；或者为具有结构的外型烯烃，其中r8连接的碳不具有其他取代基；x为c1-12亚烷基，任选地其中所述亚烷基链被一个或多个选自o、s和nh的杂原子间断；或者为-(ch2)m-q-(ch2)p-，其中m和p各自独立地为0、1或2；q具有以下式的结构：其中各个r9、r10和r11为h、nh2、co2h或-l-rx；以及j为ch或n；各个y和y’独立地为o、s或nh；各个z和z’独立地为h、r、oh、or、sh、sr、nh2或nhr，其中各个r独立地为未取代的c1-c12烷基、取代的c1-c12烷基、未取代的c3-c20杂环基、取代的c3-c20杂环基、未取代的c6-c20芳基、以及未取代的c6-c20芳基；-l-rx为连接至反应性部分rx的连接子l；其中l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分；rx为反应性部分；以及当-l-rx存在于式i或式ii的化合物时，仅rb、rb’、r5、r5’、r8、r9、r10和r11之一为l-rx。四氢异喹啉并苯二氮部分的七元内酰胺环可以具有连接-c(ra)-和-n(rb)-(左手iqb)或者等效地连接-c(ra’)-和-n(rb’)-(右手iqb)的双键或单键。式i或式ii的化合物可以独立地选择以含有各个iqb环中具有单键或双键的iqb部分的任意组合。在一些实施方案中，当-c(ra)-与-n(rb)-之间存在双键时，环碳-c(ra)-是烯属的并且具有取代基ra，并且-n(rb)-的环外rb不存在。在实施方案中，当-c(ra)-与-n(rb)-之间存在单键时，环碳-c(ra)-是饱和的，并且除了ra取代基之外还具有氢环外取代基，并且-n(rb)-的rb存在。等同地，式i或式ii的化合物可以具有-c(ra’)-与-n(rb’)-之间存在的双键，则其中环碳-c(ra’)-是烯属的并且具有取代基ra’，并且-n(rb’)-的rb’不存在。或者，对于式i或式ii的化合物，当-c(ra’)-与-n(rb’)-之间存在单键时，环碳c(ra’)-是饱和的并且除了ra’取代基之外还具有氢取代基，并且-n(rb’)-的rb’存在。在一些实施方案中，式i或式ii的化合物具有连接-c(ra)-与-n(rb)的双键以及连接-c(ra’)-与-n(rb’)-的双键，并且rb和rb’均不存在。在其他实施方案中，式i或式ii的化合物具有连接-c(ra)-与-n(rb)的双键以及连接-c(ra’)-与-n(rb’)-的单键，得到具有氢取代基和存在于-c(ra’)-的ra’以及存在于-n(rb’)-的rb’的化合物。在其他实施方案中，式i或式ii的化合物具有连接-c(ra)-与-n(rb)的单键以及连接-c(ra’)-与-n(rb’)-的双键，得到具有氢取代基和存在于-c(ra)-的ra并且不存在rb’的化合物。最后，式i或式ii的化合物可以具有连接-c(ra)-与-n(rb)的单键以及连接-c(ra’)-与-n(rb’)的单键，所得到的化合物具有环碳-c(ra)-上的氢取代基以及ra、环碳-c(ra’)-上的氢取代基以及ra’，并且rb和rb’均存在。烯属的环碳是这样的环碳，其与一个诸如碳或氮的环原子形成双键，与另一个诸如碳或氮的环原子形成单键，并且与诸如ra或ra’的环外基团形成单键。ra和ra’独立地为h、oh或-o-p，其中p为保护基。可以选择任何适合的保护基。在一些实施方案中，保护可以为甲硅烷基保护基，例如但不限于，三甲基硅烷基(tms)、三丁基二甲基硅烷基(tbdms，也被称为tbs)或三丁基二苯基硅烷基(tbdps)；苄基保护基、甲氧基甲基(mem)等。多种保护基是本领域已知的，并且可以在例如greene’sprotectivegroupsinorganicsynthesis,第4版,wutsandgreene,johnwileyandsons,inc.2006中找到。当rb或rb’存在时，各个rb和rb’独立地为h、l-rx或l-sc，条件是式i或式ii的化合物中仅可存在一个l-rx或l-sc。部分-l-rx部分和l-sc部分如下文限定。r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6各自独立地选自h、oh、c1-c10烷基、c1-c10烯基或c1-c10炔基。在一些实施方案中，r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6可以各自为氢。在一些实施方案中，r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6可以各自独立地选自h、oh、c1-c6烷基、c1-c6烯基和c1-c6炔基。在其他实施方案中，r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6可以各自独立地选自h、oh和c1-c6烷基。或者，r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6可以各自独立地选自h、oh和c1-c3烷基。在一些实施方案中，对于r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6的c1-c3烷基取代基可以为甲基或乙基。r5或r5’独立地选自nh2、co2h、h、oh、c1-c10烷基、c1-c10烯基、c1-c10炔基、-l-rx或-l-sc。在一些实施方案中，r5或r5’可以独立地选自h、oh、c1-c10烷基、c1-c10烯基、c1-c10炔基、-l-rx或-l-sc。在其他实施方案中，r5或r5’可以独立地选自h、oh、c1-c6烷基、c1-c6烯基、c1-c6炔基、-l-rx或-l-sc。在一些其他实施方案中，r5或r5’可以独立地选自h、oh、c1-c6烷基、-l-rx或-l-sc。在一些实施方案中，对于r5或r5’的c1-c6烷基取代基可以为甲基或乙基。在其他实施方案中，r5或r5’可以为-l-rx或-l-sc，条件是式i或式ii的化合物中仅存在一个-l-rx或-l-sc。部分-l-rx部分和l-sc部分如下文限定。r8为h、nh2、co2h、-l-rx或-l-sc，其中r8连接的碳还具有氢取代基；或者r8为具有结构的外型烯烃，其中r8连接的环碳是烯属的，并且不具有其他环外取代基。在一些实施方案中，r8可以为h、nh2、co2h、-l-rx或-l-sc，其中r8连接的碳还具有氢取代基。在其他实施方案中，r8可以为h、-l-rx或-l-sc，其中r8连接的碳还具有氢取代基。在一些实施方案中，r8可以为-l-rx或-l-sc，条件是式i或式ii的化合物在整个分子中仅存在一个-l-rx或-l-sc。-l-rx部分和l-sc部分如下文限定。在其他实施方案中，r8可以为具有结构的外型烯烃，其中r8连接的环碳是烯属的，并且不具有其他环外取代基。x为c1-12亚烷基，任选地其中所述亚烷基链被一个或多个选自o、s和nh的杂原子间断。在一些实施方案中，x可以为亚甲基。在其他实施方案中，x可以为c1-c6亚烷基，并且可以任选地被一个选自o或nh的杂原子间断。或者，x为-(ch2)m-q-(ch2)p-，其中m和p各自独立地为0、1或2。在一些实施方案中，m和p可以均选为0。q具有以下式的结构：其中各个r9、r10和r11为h、nh2、co2h、-l-rx或-l-sc；并且j为ch或n。在一些实施方案中，r9、r10和r11中仅有一个可以为nh2或co2h，并且其他的r9、r10和r11可以为h。在其他实施方案中，r9、r10和r11之一可以为-l-rx或-l-sc，并且其他的r9、r10和r11可以为h，条件是式i或式ii的化合物中仅可以存在一个-l-rx或-l-sc。在一些实施方案中，r10可以为nh2或co2h。或者，r10可以为-l-rx或-l-sc，并且r9和r11可以为h。-l-rx部分和l-sc部分如下文限定。y和y’独立地为o、s或nh。在一些实施方案中，y和y’可以为o。在其他实施方案中，y和y’可以为nh。或者，y和y’可以为s。z和z’独立地为h、r、oh、or、sh、sr、nh2或nhr，其中各个r独立地为未取代的c1-c12烷基、取代的c1-c12烷基、未取代的c3-c20杂环基、取代的c3-c20杂环基、未取代的c6-c20芳基、以及未取代的c6-c20芳基。在一些实施方案中，z和z’可以独立地为h、r、oh、or，其中各个r可以独立地为未取代的c1-c12烷基或取代的c1-c12烷基。在一些实施方案中，z和z’可以独立地为h、r、oh、or，其中各个r可以独立地为未取代的c1-c6烷基或取代的c1-c6烷基。在其他实施方案中，z和z可以独立地为h、ch3、ch2ch3、oh、och3或och2ch3。连接子l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、羧基、酰胺、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、氨基酸部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分。连接子l可以是无支链的或支链的、柔性的或刚性的、短的或长的，并且可以结合被认为有用的部分的任何组合。在一些实施方案中，至少连接子l的一部分可以具有聚亚烷基氧化物聚合区域，其可以提高式i或式ii的化合物的溶解性。在一些实施方案中，连接子l可以具有乙二醇的重复单元，并且可以具有约1至约25个或其间任何数量的多个重复乙二醇单元。在一些实施方案中，l可以包括约3至约20个、约4至约15个、约5至约12个或者约6至约10个乙二醇单元。在一些实施方案中，至少连接子l的一部分可以包括一个或多个氨基酸部分，其可以提供提高的式i或式ii的化合物的溶解性，或者可以提供氨基酸序列以增强靶标结合，提高与靶标结合剂的相容性，或者提高靶标结合识别。在其他实施方案中，连接子l可以包括一个或多个提供适合的蛋白酶的底物基序的氨基酸部分。当一组氨基酸部分结合提供了对所选蛋白酶具有特异性的底物基序的连接子l时，式i或式ii的细胞毒性药物化合物可以从靶标结合的缀合物释放以提供局部的细胞毒作用。此类底物基序是本领域已知的，并且可以按照需要结合连接子l以提供选择性的从靶标结合的缀合物的释放。这种选择性可以基于已知在缀合药物的局部递送区域内存在期望的蛋白酶。其他聚合类型的部分可以结合连接子l，例如多元酸、多糖或聚胺。其他部分，例如取代的芳香或杂芳香部分，可以用于提高刚性，或者在其中的取代基上提供合成可得的位点，以便连接至反应性部分或者连接至式i或式ii的化合物。例如，连接子l可以包括乙二醇重复单元，以及氨基酸序列。在一些实施方案中，连接子l包括以下式：-(ch2ch2o)1-50-xaa-其中xaa为氨基酸序列。本发明的连接子l中可以使用任何适合数量的乙二醇单元。例如，连接子l可以包括1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、15个、16个、19个、20个、23个、24个、35个、36个、37个、48个、49个或更多个乙二醇单元。在一些实施方案中，连接子l可以包括8个乙二醇单元。多种可商购的乙二醇群组(聚乙二醇，peg)在连接子l中是适合的，例如h2n--c(o)oh，其具有含8个乙二醇重复单元的不连续的(discrete)(“d”)聚乙二醇。其他的不连续的peg单元是可商购的，并且是本领域技术人员已知的，例如从advancedchemtech购得，在一些实施方案中，连接子l包括以下式：-hn-peg-c(o)-xaa-其中peg具有1-50个乙二醇单元，并且xaa为氨基酸序列。如上文所述，连接子l的氨基酸部分可以包括任何适合数量的氨基酸部分。例如，氨基酸序列xaa可以包括1至100个氨基酸部分，或者1至10个氨基酸部分，或者1至5个氨基酸部分。连接子l可以包括1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个或更多个氨基酸部分。在一些实施方案中，连接子l包括2个氨基酸部分。在一些实施方案中，连接子l包括氨基酸序列val-ala。在一些实施方案中，连接子l包括以下式：-hn-peg8-c(o)-val-ala-其中peg8具有8个乙二醇单元。连接子l还可以包括各种其他的将乙二醇部分连接至氨基酸序列，或者将乙二醇或氨基酸序列连接至反应性部分rx、物质sc或式i或式ii的化合物的连接基团。例如，氨基酸序列可以经由4-氨基苄基羧酸酯基团连接至式i或式ii的化合物。在一些实施方案中，乙二醇部分可以直接连接至反应性部分rx或物质sc。在一些实施方案中，连接子l具有以下式：rx为反应性部分。rx可以为任何适合的反应性部分，只要其能够与物质sc上存在的相应的反应性部分反应，所述物质sc可以为本文描述的靶标结合剂。在各种实施方案中，sc为蛋白质或蛋白质的部分，并且具有得的可缀合的部分，例如：硫醇/二硫化物。可以与硫醇或二硫化物反应的反应性部分rx包括马来酰亚胺、碘乙酰胺、叠氮化物、噻唑和吡啶并哒嗪(pyrridopyridazine)。二硫化物也可以通过使用二砜反应性部分来标记。另外，马来酰亚胺反应性部分可以与工程化的硒代半胱氨酸部分反应。胺。可以用于将iqb化合物偶联至靶标结合剂sc的反应性部分rx包括异硫氰酸酯、琥珀酰亚胺基酯、磺酰基卤化物、羧酸(存在碳二亚胺偶联试剂的情况下)、磺基琥珀酰亚胺基酯、4-磺基四氟苯基酯、四氟苯基酯和磺基二氯苯酚酯。该列表绝不是限制，并且可以使用其他的能够与靶标结合剂sc的胺反应的反应性部分rx。醛/酮。可以将这些部分引入靶标结合剂sc，然后与具有-l-rx的式i或式ii的化合物反应，其中反应性部分rx为肼、半酰肼、碳酰肼或羟胺。该列举绝不是限制，并且可以使用其他的能够与靶标结合剂sc的醛反应的反应性部分rx。在式i和式ii的化合物中有用的其他的反应性部分rx包括可以用于施陶丁格反应、皮克特-施彭格勒反应和/或点击型化学(含有铜或不含铜)的叠氮化物、膦类化合物或炔烃，上述所有物质目前均处于蛋白质(包括抗体及其片段)的选择性标记的积极研究中。这是适用于与靶标结合剂sc上的工程化位点反应的反应性部分rx的非限制性列举。在一些实施方案中，rx可以为马来酰亚胺、二砜、碘乙酰胺、叠氮化物、异硫氰酸酯、琥珀酰亚胺基酯、磺酰基卤化物、羧酸、半酰肼、碳酰肼、羟胺、膦类化合物或炔烃。-l-rx为连接至反应性部分rx的连接子l。-l-rx可以用于式i或式ii的化合物，以形成含有可以连接至物质sc的iqb化合物的试剂，所述物质sc可以为本文描述的靶标结合剂。式i或式ii的化合物中可以使用本文描述的连接子l和反应性部分rx的任意组合。一些示例性的-l-rx参见图2。已知许多的其他化学物质用于化合物与抗体的连接。us7,595,292(brocchini等人)涉及与抗体的二硫键中的硫形成硫酯的连接部分。us7,985,783(carico等人)涉及将醛残基引入抗体，用于将化合物偶联至抗体。sc为选自蛋白质、蛋白质的部分、肽或核酸的靶标结合剂。在一些实施方案中，为蛋白质的靶标结合剂可以包括抗体、抗体片段、或抗体单链可变区片段(“scfv”)。靶标结合剂可以连接至肿瘤相关抗原、癌症干细胞相关抗原或病毒抗原。在各种实施方案中，靶标结合剂sc可以结合选自以下的靶标：急性骨髓性白血病(amlm4)细胞、急性早幼粒细胞性白血病细胞、急性成淋巴细胞性白血病细胞、急性淋巴细胞性白血病细胞、慢性淋巴细胞性白血病细胞、慢性骨髓性白血病细胞、慢性t-细胞淋巴细胞性白血病、骨髓增生异常综合征细胞、多发性骨髓瘤细胞、前列腺癌细胞、肾细胞腺癌细胞、胰腺癌细胞、肺癌细胞或胃腺癌细胞、胃腺癌细胞、乳腺癌细胞、结肠癌细胞、黑素瘤细胞、甲状腺癌细胞、卵巢癌细胞、膀胱癌细胞、肝癌细胞、头颈癌细胞、食道癌细胞、霍奇金淋巴瘤细胞、非霍奇金淋巴瘤细胞、间皮瘤细胞、成神经细胞瘤细胞、神经内分泌肿瘤细胞、1型神经纤维瘤(nf1)细胞、2型神经纤维瘤(nf2)或骨肉瘤细胞。在一些其他实施方案中，靶标结合剂sc可以结合选自以下的靶标：cll-1、il1rap、tim-3、cd19、cd20、cd22、ror1、间皮素、cd33、cd123/il3ra、gpr114、c-met、psma、前列腺酸磷酸酶(pap)、cea、ca-125、muc-1、afp、糖脂f77、egfrviii、gd-2、ny-eso-1tcr、酪氨酸酶、trpi/gp75、gp100/pmel-17、melan-a/mart-1、her2/neu、wt1、epha3、端粒酶、hpve6、hpve7、ebna1、bage、gage和magea3tcrslitrk6、enpp3、结合素-4、cd27、slc44a4、caix、cripto、cd30、muc16、gpnmb、bcma、trop-2、组织因子(tf)、canag、egfr、αv-整联蛋白、cd37、叶酸受体-α、cd138、ceacam5、cd56、cd70、cd74、gcc、5t4、cd79b、steap1、napi2b、lewisy抗原、liv、c-ret、dll3、efna4、内皮唾酸蛋白/cd248。在其他实施方案中，靶标结合剂sc可以为双特异性抗体/抗体片段。在一些实施方案中，双特异性抗体/抗体片段结合一种或两种选自以下的靶标：cll-1、il1rap、tim-3、cd19、cd20、cd22、ror1、间皮素、cd33、cd123/il3ra、gpr114、c-met、psma、前列腺酸磷酸酶(pap)、cea、ca-125、muc-1、afp、糖脂f77、egfrviii、gd-2、ny-eso-1tcr、酪氨酸酶、trpi/gp75、gp100/pmel-17、melan-a/mart-1、her2/neu、wt1、epha3、端粒酶、hpve6、hpve7、ebna1、bage、gage和magea3tcrslitrk6、enpp3、结合素-4、cd27、slc44a4、caix、cripto、cd30、muc16、gpnmb、bcma、trop-2、组织因子(tf)、canag、egfr、αv-整联蛋白、cd37、叶酸受体、cd138、ceacam5、cd56、cd70、cd74、gcc、5t4、cd79b、steap1、napi2b、lewisy抗原、liv、c-ret、dll3、efna4、内皮唾酸蛋白/cd248。-l-sc连接至物质sc的连接子l。-l-sc可以用于式i或式ii的化合物，以形成含有连接至物质sc的iqb化合物的缀合物质，所述物质sc可以为上文以及本公开全文中描述的靶标结合剂。式i或式ii的化合物中可以使用本文描述的连接子l与物质sc的任意组合。当-l-rx或-l-sc存在于式i或式ii的化合物时，仅rb、rb’、r5、r5’、r8、r9、r10、r11之一为-l-rx或-l-sc。仅有一个含有反应性部分的连接部分或连接至物质sc的连接部分可以存在于式i或式ii的化合物。在一些实施方案中，-l-rx和-l-sc均不存在于式i或式ii的化合物。在一些实施方案中，式i或式ii的化合物具有其中y和y’各自为o并且rb、rb’、r5、r5’、r8、r9、r10、r11均不为-l-rx或-l-s的式。在一些实施方案中，式i或式ii的化合物具有其中y和y’各自为o并且z和z’各自独立地选自h和c1-c3烷氧基的式。在其他实施方案中，式i或式ii的化合物具有其中y和y’各自为o；z和z’各自独立地选自h和c1-c3烷氧基，并且x为-ch2-的式。在一些实施方案中，式i或式ii的化合物具有其中y和y’各自为o；z和z’各自独立地选自h和c1-c3烷氧基；x为q并且j为ch的式。在一些实施方案中，式i或式ii的化合物具有其中y和y’各自为o；z和z’各自独立地选自h和c1-c3烷氧基；并且r9、r10或r11之一为-l-rx或-l-sc的式。在一些实施方案中，式i或式ii的化合物具有其中y和y’各自为o；z和z’各自独立地选自c1-c3烷氧基；并且r5或r5’之一为-l-rx或-l-sc的式。在一些实施方案中，式i或式ii的化合物具有其中y和y’各自为o；z和z’各自独立地选自h和c1-c3烷氧基；并且当rb或rb’存在时，则rb或rb’之一为-l-rx或-l-sc的式。在一些实施方案中，式i或式ii的化合物具有其中y和y’各自为o；z和z’各自独立地选自c1-c3烷氧基；r8为-l-rx或-l-sc的式。在一些实施方案中，式i和式ii的化合物包括：在其他实施方案中，式i和式ii的化合物包括：在其他实施方案中，式i和式ii的化合物包括：在一些其他实施方案中，式i的化合物具有以下结构：其中rb’为-l-rx。在其他实施方案中，具有取代基-l-rx的式i或式ii的化合物为以下化合物：在其他实施方案中，具有取代基-l-rx的式i或式ii的化合物为以下化合物：在其他实施方案中，具有取代基-l-rx的式i或式ii的化合物为以下化合物：在其他实施方案中，具有取代基-l-rx的式i或式ii的化合物为以下化合物：在其他实施方案中，具有取代基-l-rx的式i或式ii的化合物为以下化合物：在其他实施方案中，具有取代基-l-rx的式i或式ii的化合物为以下化合物：在其他实施方案中，具有取代基-l-rx的式i或式ii的化合物为以下化合物：在其他实施方案中，具有取代基-l-rx的式i或式ii的化合物为以下化合物：在其他实施方案中，具有取代基-l-rx的式i或式ii的化合物为以下化合物：如何获得化合物的描述iqb化合物可以经由多种途径合成。得到被称为clt-d201的iqb化合物的一种示例性的途径于图3中，在将四氢异喹啉基化合物7与邻硝基苯甲酸8缩合然后进行进一步的化学转化以形成四氢异喹啉并苯二氮3的步骤中示出。通过使用叠氮二羧酸二乙酯和三苯基膦进行三信反应(mitsonobureaction)，脱保护的四氢异喹啉并苯二氮3可以与另一苯二氮衍生物(其与化合物3相同或不同)偶联，以形成二芳基醚连接的苯二氮2，其可以转化为还原形式的化合物1。图4示出了类似的过程，其中两个苯二氮类化合物不相同(前体4为四氢异喹啉并苯二氮而前体3在具有苯二氮部分的同时不具有四氢异喹啉基部分。再次使用三信化学(mitsonobuchemistry)以逐步引入将两个苯二氮群组连接的芳基醚桥，与图4所示过程类似地将两个不同的苯二氮群组偶联。图5示出了提供另一类iqb的合成顺序。由这两组合成顺序可见，各种不同的苯二氮基部分可以结合式i和式ii的iqb化合物。另外，连接芳基二醚桥的前体可以结合多种取代物和添加物。例如，如下文示出的化合物a所述，结合了氨基取代的苄基部分的二醇用于形成芳基二醚桥。预计多种二醇中间体在式i或式ii的化合物中是有用的。如化合物a所示，氨基部分可以用于连接至连接子l，并且进一步加工以形成具有-l-rx的式i或式ii的化合物，然后其可以与靶标结合剂sc反应以形成具有-l-sc的式i或式ii的缀合化合物。使用这种合成方法可以提供许多不同的连接子-l-和rx。一个实例如下所示：通过图7a-7c、8、9a和9b中描述的合成方案，包括反应性部分、rx的连接部分可以在r5、r5’、rb、rb’或x位置处连接。在图7a-7c的合成方案的图7c中，示出了连接子3的合成。使用碳二亚胺偶联试剂、edc和琥珀酰亚胺，在4-二甲基氨基吡啶(dmap)的存在下，将n-叔丁氧基碳酸酯(boc)-保护的氨基-聚乙二醇(peg)取代的乙酸转化为琥珀酰亚胺酯。然后在二甲基甲酰胺(dmf)中，在存在二异丙基乙胺(diea)时，将这种活化的琥珀酰亚胺酯偶联至二肽缬氨酰基丙氨酸的n-末端氨基。然后使用n-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氢喹啉(eedq)，经由碳二亚胺催化的偶联，将得到的boc-氨基-peg-二肽的羧酸偶联至对氨基苄醇的氨基，以产生具有合成可得的苄醇官能团的连接子3前体。通过在dmf中，在diea存在时与双(4-硝基苯基)碳酸酯反应，将所述苄醇部分转化为活化的对硝基苯基碳酸酯，以提供具有活化的硝基苯基碳酸酯的连接子3，所述活化的硝基苯基碳酸酯能够被式i或式ii的iqb化合物的氨基官能团替代。在图7a中，示出了示例性的式i或式ii的化合物的合成，遵循了上文描述的一般合成途径，但特别示出了在引入四氢异喹啉基环之前将硝基引入二芳基醚。将四氢异喹啉基部分的羟基乙酰化之后，以两步转化将硝基取代基还原为氨基。选择性地仅产生两个氨基取代基中的一个允许：在羟基上引入甲硅烷基保护基之后，连接子3仅引入至一个取代基位置，即在未保护的氨基取代基位置，如图7b的第一个结构所示。然后通过氧化后的环化，将iqb环核心的剩余部分完成。在最后的三个步骤的系列中，将反应性部分马来酰亚胺引入，包括去除boc-保护基，并且引入偶联至游离胺的3-马来酰亚胺基丙酰基部分，由此提供clt-d202，其为在rb’具有-l-rx取代基的式i的化合物的实例，所述-l-rx取代基配置为与靶标结合剂sc反应。在图8中，与对连接子3的讨论类似地合成的连接部分1，通过活化的硝基苯基碳酸酯形式的部分x，偶联至1-甲基氨基-2,4-二-(羟基甲基)苯(化合物2)。其进而双偶联至四氢异喹啉并化合物3以提供产物化合物4，其为当式i的x为q时在部分q的r10具有-l-rx的式i的化合物的另一种范例。化合物4具有为马来酰亚胺的反应性部分rx。在图9a和9b中，含有活性的硝基苯基碳酸酯部分的连接部分2通过在式i的位置5的氨基连接至二聚体3。在图9a中示出了二聚体3的合成，并且与上文描述的一般方法类似，但特别示出了将硝基取代基引入四氢异喹啉基前体，将所述硝基取代基还原为氨基取代基，并且作为经保护的氨基经历iqb环系统合成的剩余部分而进行。使用一当量的含氨基的iqb部分和一当量的未取代的iqb部分来形成二聚体3。图9b示出了连接部分2与二聚体3的偶联以形成clt-d204，其为在r5具有-l-rx(马来酰亚胺为反应性部分rx)的式i的化合物的范例。ii.缀合物可以使用各种已知的交联剂将靶标结合部分连接至本公开的iqb。将部分与多肽共价连接或非共价连接的方法是本领域熟知的。此类方法可以包括但不限于，使用化学交联剂、光催化交联剂和/或双官能团交联剂。第5,603,872号美国专利和第5,401,511号美国专利中公开了用于将分子交联的示例性的方法。交联试剂的非限制性实例包括戊二醛、双官能环氧乙烷、乙二醇二缩水甘油醚、诸如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺或二环己基碳二亚胺的碳二亚胺、二亚胺酯、二硝基苯、辛二酸的n-羟基琥珀酰亚胺酯、二琥珀酰亚胺基酒石酸酯、二甲基-3,3'-二硫代-双丙酰亚胺酯、叠氮基乙二醛、n-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶基二硫代)丙酸酯和4-(溴氨基乙基)-2-硝基苯基叠氮化物。在一些实施方案中，靶标结合部分包含抗体。术语“抗体”是指包含来自免疫球蛋白基因的框架区的多肽，或其片段(“抗体片段”)，其特异性地结合并识别抗原。通常，“可变区”含有抗体的抗原结合区(或其功能等同物)，并且对于结合的特异性和亲和力最为重要。示例性的免疫球蛋白(抗体)结构单元包含四聚体。各个四聚体由两组相同的多肽链对组成，每一对具有一条“轻”链(约25kd)和一条“重”链(约50-70kd)。“同种型”是一类由重链恒定区限定的抗体。轻链分类为κ或λ。重链分类为γ、μ、α、δ或ε，其进而分别将同种型类别限定为，igg、igm、iga、igd和ige。抗体可以作为完整的免疫球蛋白存在，或者可以作为任何数量的表征良好的包含特异性抗原结合活性的片段存在，例如，f(ab)′2或fab′单体。“单克隆抗体”是指对于给定的抗原上的抗原表位具有单一的结合特异性和亲和力的抗体的克隆制备。“多克隆抗体”是指针对单一的抗原产生但具有不同的结合特异性和亲和力的抗体的制备。“嵌合抗体”是具有以下特征的抗体分子：(a)恒定区或其部分被改变、替代或交换，以便抗原结合位点(可变区、cdr或其部分)连接至不同或改变的类别、效应子功能和/或物种的恒定区，或者连接至赋予嵌合抗体新的性质的完全不同的分子(例如，酶、毒素、激素、生长因子、药物等)；或者(b)可变区或其部分被改变、替代或交换成为具有不同或改变的抗原特异性的可变区(例如，来自不同物种的cdr和框架区)。“人源化的抗体”是指得自非人抗体的vh区和vl区的抗原结合循环，即，cdr，接枝到人框架序列的免疫球蛋白分子抗体。人源化，即,非人cdr序列取代为人抗体的相应序列，可以按照以下文献中描述的方法来进行，例如，美国专利第5,545,806号；第5,569,825号；第5,633,425号；第5,661,016号；riechmann等人,nature332:323-327(1988)；marks等人,bio/technology10:779-783(1992)；morrison,nature368:812-13(1994)；fishwild等人,naturebiotechnology14:845-51(1996)。转基因小鼠或者诸如其他哺乳动物的其他有机体，也可以用于表达人源化抗体或人抗体，如第6,673,986号美国专利所公开的。如本文使用的术语“半胱氨酸取代的抗体”是指包含至少一个已经被半胱氨酸取代的非天然存在的恒定区免疫球蛋白氨基酸残基的抗体。非天然存在的取代是非同种型的。在一个实施方案中，取代的残基是重链恒定区。术语“抗原”、“抗体靶标”以及类似的术语是指通过抗体识别(即，可以由抗体特异性地结合)的分子、化合物或复合物。抗体结合抗原上的“抗原表位”。术语“对...具有特异性”、“特异性地结合”以及类似的术语是指，以比非靶标化合物大至少2倍的亲和力结合靶标的分子(例如，抗体或抗体片段)，例如，大至少4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、20倍、25倍、50倍或100倍的亲和力中的任一种。例如，特异性结合一级抗体的抗体通常将以比非一级抗体靶标(例如，来自不同物种的抗体，或不同同种型的抗体，或非抗体靶标)大至少2倍的亲和力结合一级抗体。针对于抗体靶标(例如，抗原、分析物、免疫复合物)的术语“捕获”，通常表明抗体结合纯种群中大部分的抗体靶标(假设适当的摩尔比)。例如，结合给定抗体靶标的抗体通常结合至少2/3的溶液中的抗体靶标(例如，至少75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％中的任一种)。技术人员将认识到，根据确定结合的方法和/或阈值将出现一些变化性。抗体或其片段可以具有官能团，所述官能团可以是对于具有上文所述的-l-rx的式i或式ii的化合物的缀合具有吸引力的靶标。其中马来酰亚胺为反应性部分的结合了-l-rx的化合物可以与半胱氨酸残基或由两个半胱氨酸侧链形成的二硫化物的硫醇反应，其在抗体或其片段上可实现。或者，连接至式i或式ii的化合物的连接部分的叠氮基或碘乙酰胺基反应性部分也可以与半胱氨酸残基或分子内形成的二硫化物的硫醇反应从而形成缀合物。通过使用具有-l-rx、其中反应性部分为二砜的式i或式ii的化合物(其可以立即连接至两个侧链)，可以特异性地靶向二硫化物。抗体或其片段的赖氨酸侧链可以与具有-l-rx的式i或式ii的化合物缀合，其中所述反应性部分选自但不限于异硫氰酸酯、琥珀酰亚胺基酯、磺酰基卤化物、羧酸、磺基琥珀酰亚胺基酯、4-磺基四氟苯基酯、四氟苯基酯和磺基二氯苯酚酯。当羧酸为反应性部分时，与赖氨酸侧链氨基部分的连接反应在诸如碳二亚胺的偶联试剂的存在下进行，所述偶联试剂在原位活化羧酸。谷氨酰胺侧链可以被具有-l-rx、其中反应性部分为氨基烷基部分的iqb靶向。氨基部分可以是修饰的转谷氨酰胺酶的底物，以提供谷氨酰胺酰基缀合的iqb。通过氧化处理，通常是抗体的聚糖部分的氧化处理，醛或酮可以在诸如抗体或其片段的靶标结合剂上产生。高碘酸盐或其他的氧化剂可以用于产生这些含羰基的位点，所述含羰基的位点可以由具有-l-rx、其中反应性部分为肼、半酰肼、碳酰肼或羟胺的式i或式ii的化合物靶向。诸如抗体或其片段的靶标结合剂上的工程化的官能部分也可以被具有-l-rx的式i或式ii的化合物缀合。硒代半胱氨酸可以核糖体的形式结合工程化的抗体片段，其可以提供与具有马来酰亚胺反应性部分的iqb的高度识别的缀合反应。使用无铜点击化学，叠氮基或环辛炔部分可以工程化至靶标结合剂中，其由此可以得到对立的反应性部分，即，具有-l-rx的iqb的环辛炔基或叠氮基反应性基团。通过核糖体结合引入非天然氨基酸可以将对乙酰基苯基丙氨酸引入靶标结合剂。乙酰基可以与具有-l-rx、其中反应性部分为氨氧基反应性基团的iqb缀合，提供靶标结合剂的肟缀合产物。通过这种方法引入的另一种非天然氨基酸可以提供赖氨酸的叠氮基衍生物，其可以与具有-l-rx、其中反应性部分为环辛炔的iqb反应，并且使用了铜点击化学。这些实例绝不是限制性的；通过使用具有-l-rx的式i和式ii的化合物以形成具有-l-sc的式i和式ii的缀合物，设想了将诸如抗体或其片段的靶标结合剂的限定缀合的多种其他方法。在一些实施方案中，抗体-药物缀合物可以具有式iii的结构：其中：为抗体或抗体片段；w-rm为由w和rx形成的连接部分，其中w为连接至抗体/抗体片段的天然或非天然氨基酸残基的部分，并且rx为将l-iqb连接至抗体的反应性部分；l为连接子，其中l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分；j为1至10；以及，iqb为具有式(i)或式(ii)的结构的化合物。在一些实施方案中，抗体-药物缀合物可以具有式iii的结构：其中：为抗体或抗体片段；w-rm为由w和rx形成的连接部分，其中w为连接至抗体/抗体片段的氨基酸残基的部分，并且rx为琥珀酰亚胺基、马来酰亚胺基、环辛炔基、氨氧基、二磺酰基、磺酰基或异硫氰酸酯部分，以便w-rm为二硫化物、硫醇化的琥珀酰亚胺基、氨基取代的琥珀酰亚胺基、(环辛基)-1,4三唑基、肟取代的n-聚糖、肟、取代的二磺丙基、磺酰胺基、酰胺或硫代氨基甲酸乙酯部分；l为连接子，其中l为键，或者为具有1-200个选自c、n、o、s或卤素的非氢原子的部分，并且任选地结合醚、氧代、酰胺基、氨基甲酸乙酯基、支链部分、环状部分、不饱和部分、杂环部分、芳香部分或杂芳香部分；j为1至10的数；以及，iqb为具有式(i)或式(ii)的结构的化合物：(i)(ii)其中：-c(ra)-与-n(rb)-或-c(ra’)-与-n(rb’)-之间示出的虚线键独立地为单键或双键；各个ra和ra’独立地为h、oh或-o-p，其中p为保护基；如果存在，各个rb和rb’独立地为h，或者为连接至连接子l的键；r2、r2’、r3、r3’、r4、r4’、r6’和r6各自独立地选自h、oh、c1-c10烷基、c2-c10烯基或c2-c10炔基；各个r5或r5’独立地为nh2、co2h、h、ohc1-c10烷基、c2-c10烯基、c2-c10炔基、连接至连接子l的键；各个r7和r7’为h；r8为h、nh2、co2h或连接至连接子l的键，其中r8连接的碳还具有氢取代基；或者为具有结构的外型烯烃，其中r8连接的碳不具有其他取代基；x为c1-12亚烷基，任选地其中所述亚烷基链被一个或多个选自o、s和nh的杂原子间断；或者为-(ch2)m-q-(ch2)p-，其中m和p各自独立地为0、1或2；q具有以下式的结构：其中各个r9、r10和r11为h、nh2、co2h、连接至连接子l的键；并且j为ch或n；各个y和y’独立地为o、s或nh；各个z和z’独立地为h、r、oh、or、sh、sr、nh2或nhr，其中各个r独立地为未取代的c1-c12烷基、取代的c1-c12烷基、未取代的c3-c20杂环基、取代的c3-c20杂环基、未取代的c6-c20芳基、以及未取代的c6-c20芳基；并且其中仅rb、rb’、r5、r5’、r8、r9、r10和r11之一为连接至连接子l的键。w可以直接或间接地连接至抗体的氨基酸残基。在一些非限制性实例中，w可以为半胱氨酸残基的硫醇、赖氨酸残基的氨基、氨基酸(例如，对叠氮基甲基苯基丙氨酸)上取代的叠氮基团、或者氨基酸上取代的醛或酮。上文所述的任何部分或本领域已知的任何其他适合的部分可以用于与反应性部分rx反应，以便引入iqb化合物。在一些其他实施方案中，w可以间接地连接至抗体的氨基酸残基，例如但不限于本文描述的工程化至抗体中的n-聚糖。rm为在w部分与rx的反应完成时保持结合在抗体-药物缀合物中的反应性部分rx的一部分。rx的一些非限制性实例包括琥珀酰亚胺基、马来酰亚胺基、环辛炔基、氨氧基、二磺酰基、磺酰基、或异硫氰酸酯部分，也可以为本领域已知的任何适合的rx。在一个非限制性实例中，rm可以为被硫醚取代的琥珀酰亚胺基部分，其为马来酰亚胺基rx部分与半胱氨酸残基的硫醇w部分反应的产物。rm可以为作为任何rx与本文描述的适合的抗体取代基w的产物的任何rm，或者为本领域已知的任何其他适合的rm。在一些实施方案中，w-rm可以为二硫化物、硫醇化的琥珀酰亚胺基、氨基取代的琥珀酰亚胺基、(环辛基)-1,4三唑基、肟取代的n-聚糖、肟、取代的二磺丙基、磺酰胺基、酰胺、或硫代氨基甲酸乙酯部分。连接子l可以为本文描述的元件的任何组合。抗体-药物缀合物的iqb可以为本文描述的任何式i或式ii的化合物。在一个实施方案中，iqb化合物为以下式的化合物：连接至抗体的-w-rm-l-iqb部分可以具有以下的任意组合：直接或间接连接至抗体的w部分；任何适合的交叉反应性rx与w的反应得到的任何rm；连接rm与iqb化合物的任何连接子l以及本文描述的任何iqb。在其他实施方案中，iqb为具有以下结构的部分：在一些实施方案中，-w-rm-l-iqb可以具有式iv的结构：-w-rm-l-iqb部分可以连接至非天然半胱氨酸的硫醇w基团。可以存在一个或多个连接至抗体或抗体片段的-w-rm-l-iqb部分。在一些实施方案中，可以存在1个至约3个连接至抗体的-w-rm-l-iqb部分。在其他实施方案中，可以存在多于1个但少于约2个-w-rm-l-iqb部分。-w-rm-l-iqb部分的数量可以是分数，因为与-w-rm-l-iqb部分缀合的抗体的群组可能不完全反应，或者可以在除非天然半胱氨酸残基之外的其他位点反应。在一些实施方案中，抗体或抗体片段为抗cll1。在一些实施方案中，抗体或抗体片段为抗cll1，并且iqb为具有以下结构的部分：在一些实施方案中，抗体-药物缀合物为式iii的化合物，其中抗体或抗体片段为抗cll1；w-rm为硫醇化的琥珀酰亚胺基；并且iqb为具有以下结构的部分：缀合物的抗体可以为本文描述的任何抗体或抗体片段。抗体/抗体片段可以特异性地结合癌性骨髓增生细胞和/或白血病癌症干细胞，并且可以不结合正常造血干细胞。iii.药物组合物含有四氢异喹啉并苯二氮作为活性成分的剂型可以有利地用于治疗或预防增殖性疾病。剂型可以单独地或结合其他试剂施用或应用。制剂也可以结合另一种药物活性试剂向对象递送四氢异喹啉并苯二氮所述另一种药物活性试剂包括另一种四氢异喹啉并苯二氮本公开的用于人医疗用途的制剂包含活性成分，结合有其药物可接受的载体以及任选的其他治疗成分。载体必须是“可接受的”，其意义在于与制剂的其他成分相容并且对于其接受者无害。术语“有效量”、“有效剂量”、“治疗有效量”等是指足以改善上文描述的病症的治疗剂的量。例如，对于给定的参数，治疗有效量将显示出至少5％、10％、15％、20％、25％、40％、50％、60％、75％、80％、90％或至少100％的治疗效果的提高或降低。治疗功效也可以表达为“成倍”的提高或降低。例如，治疗有效量可以具有相比对照至少1.2倍、1.5倍、2倍、5倍或更大的效果。剂型可以制备为用于粘膜(例如，鼻、舌下、阴道、口含或直肠)施用、胃肠外(例如，皮下、静脉内、肌内或动脉内注射，推注或输注)施用、口服施用、或经皮施用至对象。剂型的实例包括但不限于：分散剂；栓剂；软膏剂；泥敷剂(药膏)；糊剂；粉末；敷料剂；乳膏；硬膏剂；溶液；贴片；气溶胶(例如，鼻喷雾或吸入剂)；胶；适于口服或粘膜施用于对象的液体剂型，包括悬浮液(例如，水性或非水性液体悬浮液、水包油乳液、或油包水液体乳液)、溶液和酏剂；适于胃肠外施用于对象的液体剂型；以及可以再组合以提供适于胃肠外施用于对象的液体剂型的无菌固体(例如，晶体或无定形固体)。可注射(例如，静脉内可注射)组合物可以包含悬浮于可接受载体(例如水性载体)的抗体或抗体靶向组合物的溶液。可以使用各种水性载体中的任一种，例如，水、缓冲的水、0.4％盐水、0.9％等渗盐水、0.3％甘氨酸、5％右旋糖等，并且可以包括用于增强稳定性的糖蛋白，例如白蛋白、脂蛋白、球蛋白等。通常，将使用常规的缓冲盐水(135-150mmnacl)。组合物可以含有药物可接受的辅助物质以便接近生理条件，例如ph调节剂和缓冲剂、张力调节剂、润湿剂，例如，乙酸钠、乳酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、脱水山梨糖醇单月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯等。在一些实施方案中，可以在试剂盒中配制组合物以用于静脉内施用。适于胃肠外施用，例如，通过关节内(关节内部)、静脉内、肌内、瘤内、真皮内、腹膜内和皮下途径施用的制剂包括水性和非水性的等渗无菌注射溶液，其可以含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、以及使制剂与预计接受者的血液等渗的溶质；以及水性和非水性的无菌悬浮液，其可以包含悬浮剂、增溶剂、增稠剂、稳定剂和防腐剂。注射溶液和悬浮液还可以由无菌的粉末、颗粒和片剂制备。在本发明的实践中，组合物可以通过例如，静脉输注、局部、腹腔内、膀胱内或鞘内施用。胃肠外施用和静脉内施用是优选的施用方法。靶向组合物的制剂可以以单位剂量或多剂量密封的容器存在，例如安瓶和小瓶。本公开的药物活性的化合物在制备包含有效量的药物活性的化合物并结合或混合有适于肠内应用或胃肠外应用的赋形剂或载体的药物组合物中是有用的。优选包含活性成分连同以下物质中的一种或多种的片剂和明胶胶囊：(a)稀释剂，例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纤维素、甘氨酸等；(b)润滑剂，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸、其镁盐或钙盐、聚乙二醇等；对于片剂同样如此；(c)粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊剂、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或聚乙烯基吡咯烷酮等；以及，如果需要，(d)崩解剂，例如泡腾混合物等；以及(e)吸附剂、着色剂、调味剂和甜味剂等。制剂可以便利地以单位剂型存在，并且可以通过制药领域中任何熟知的方法来制备。所有的方法包括将活性成分与构成一种或多种助剂的载体结合的步骤。通常，通过均匀且紧密地将活性成分与液体载体或细碎的固体载体或这两者结合来制备制剂，然后，如果有必要，将产物成形为期望的制剂。所述药物组合物可以是无菌的和/或含有助剂，例如防腐剂、稳定剂、润湿剂或乳化剂、溶液促进剂、用于调节渗透压的盐、和/或缓冲剂。另外，所述药物组合物还可以含有其他的治疗上有价值的物质。所述组合物分别根据常规的混合、粒化或包衣方法来制备，并且含有约0.1％至75％、优选约1％至50％的活性成分。制剂中活性试剂的浓度可以大幅变化，并且将取决于各种因素，包括待治疗的疾病或病况、活性试剂的性质和活性、期望的效果、可能的不良反应、活性试剂到达其预期靶标的能力和速度、以及对象和医师的特定知识范围内的其他因素。制剂将通常含有约0.5wt％至50wt％的量级的活性试剂，优选约0.5wt％至5wt％的活性试剂，最优约5wt％至20wt％的活性试剂。iqb缀合物还可以配制为提供多于一种的活性化合物，例如，另外的化疗试剂或细胞毒性试剂、细胞因子或生长抑制剂。活性成分还可以制备为缓释制剂(例如，固体疏水聚合物(例如，聚酯、水凝胶(例如，聚(2-羟基乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))或聚丙交酯)的半渗透基质)。抗体和免疫缀合物可以包埋在例如通过凝聚技术或通过界面聚合制备的纳米颗粒中，例如，分别为羟基甲基纤维素或明胶微囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微囊，在胶体药物递送系统(例如，脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米颗粒和纳米囊)中或在粗乳液中。本公开的iqb可以具有药物可接受的盐的形式，例如，药物可接受的化合物盐以及具有期望的母体化合物的药理活性的化合物盐。此类盐包括：(1)酸加成盐，其与无机酸形成，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或者与有机酸形成，所述有机酸例如乙酸、丁酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、戊酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基二环[2.2.2]-辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等，通过常规的化学手段制备；或者(2)母体化合物中存在的酸性质子被金属离子(例如，碱金属离子、碱土离子或铝离子)取代，或者与有机碱配位时形成的盐，所述有机碱例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、n-甲基葡糖胺等，通过常规的化学手段制备。iv.使用方法a.增殖性疾病的治疗本公开的四氢异喹啉并苯二氮抑制了细胞生长(增殖)，并因此适用于治疗对象的药物组合物，所述对象例如，脊椎动物，例如，哺乳动物，例如，人。iqb可以单独施用或者作为缀合物施用，所述缀合物中它们与诸如抗体的细胞靶向剂缀合。“对象”、“患者”、“个体”以及类似的术语交换使用，并且除非指明，其是指哺乳动物，例如人和非人灵长类动物，以及兔、大鼠、小鼠、山羊、猪和其他哺乳类物种。所述术语不一定表明对象已诊断患有具体的疾病，但“患者”通常是指在医疗监督下的个体。患者可以是寻求现有治疗方案的治疗、监控、调节或改变的个体等。“癌症患者”可以指已诊断患有癌症、目前正在进行治疗方案、或者具有复发风险(例如，在去除肿瘤的手术后)的个体。在一些实施方案中，癌症患者已经诊断患有癌症，并且是疗法的候选者。癌症患者可以包括尚未接受治疗、目前正在接受治疗、已经进行过手术、以及那些已中断治疗的个体。术语“疗法”、“治疗”和“改善”是指症状严重程度的任何降低。在治疗癌症的情况下，治疗可以指，例如，减小肿瘤尺寸、减少癌细胞数量、减慢生长速度、降低转移活性、减少非癌细胞的细胞死亡、减少恶心和其他化疗或放疗副作用等。在治疗炎性病况的情况下，治疗可以指，例如，降低炎性细胞因子的血液水平、减少疼痛、减少肿胀、减少免疫细胞招募等。如本文使用的，术语“治疗”和“预防”并非意指绝对的术语。治疗和预防可以指任何发作的延迟、症状的改善、患者生存的改善、存活时间或存活率的增加等。治疗和预防可以是完全的(不可测的瘤细胞水平)或部分的，以便患者体内存在的瘤细胞比不存在本发明时更少。治疗效果可以与未接受治疗的个体或个体群比较，或者与在治疗前或在治疗中不同时间的同一患者比较。在一些方面，例如，与施用前的个体相比或者与为经历治疗的对照个体相比，疾病的严重程度降低了至少10％。在一些方面，疾病的严重程度降低了至少25％、50％、75％、80％或90％，或者在一些情况下，使用标准的诊断技术不再可测。本公开的组合物在诸如癌症的增殖性疾病的治疗中是有用的。“癌症”、“肿瘤”、“转变(transformed)”以及类似的术语包括癌症前期细胞、瘤细胞、转变的细胞和癌细胞，并且可以指实体肿瘤或非实体癌症(参见，例如，edge等人ajcccancerstagingmanual(第7版2009)；cibasandducatmancytology:diagnosticprinciplesandclinicalcorrelates(第3版2009))。癌症包括良性肿瘤和恶性肿瘤(异常的生长)。“转变”是指自发的或诱导的表型改变，例如，细胞的无限增殖化、形态学改变、异常的细胞生长、减少的接触抑制和锚定、和/或恶性肿瘤(参见,freshney,cultureofanimalcellsamanualofbasictechnique(第3版1994))。虽然转变可以来源于转变病毒的感染和新基因组dna的结合，或者来源于外源dna的摄取，但其也可以自发地发生，或者在接触致癌物质后发生。术语“癌症”可以指癌(carcinomas)、肉瘤、腺癌、淋巴瘤、白血病、实体肿瘤和淋巴肿瘤等。不同类型的癌症的实例包括但不限于，肺癌(例如，非小细胞肺癌或nsclc)、卵巢癌、前列腺癌、结肠直肠癌、肝癌(即，肝癌(hepatocarcinoma))、肾癌(即，肾细胞癌)、膀胱癌、乳腺癌、甲状腺癌、胸膜癌、胰腺癌、子宫癌、子宫颈癌、睾丸癌、肛门癌、胰腺癌、胆管癌、胃肠道良性肿瘤、食道癌、胆囊癌、阑尾癌、小肠癌、胃癌(stomach/gastriccancer)、中枢神经系统癌症、皮肤癌、绒毛膜癌；头颈癌、血癌、骨原性肉瘤、纤维肉瘤、成神经细胞瘤、胶质瘤、黑素瘤、b细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤、小细胞淋巴瘤、大细胞淋巴瘤、骨髓发育不良综合症(mds)、单核细胞性白血病、骨髓性白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性髓细胞性白血病(aml)、慢性骨髓性白血病(cml)、以及多发性骨髓瘤。在一些实施方案中，本发明的组合物和方法适用于治疗癌症。可以被靶向的癌症包括，例如，白血病(例如，急性成淋巴细胞性白血病(all)、急性骨髓性白血病(aml)、慢性淋巴细胞性白血病(cll)和慢性骨髓性白血病(cml))、乳腺癌、前列腺癌、结肠直肠癌、脑癌、食道癌、头颈癌、膀胱癌、妇科癌症、脂肪肉瘤和多发性骨髓瘤。在一些实施方案中，本公开的car中的靶标结合区域能够结合广泛的靶标中的任何靶标，包括但不限于，gpr114、cll-1、il1rap、tim-3、cd19、cd20、cd22、ror1、间皮素、cd33、cd123/il3ra、c-met、psma、前列腺酸磷酸酶(pap)、cea、ca-125、muc-1、afp、糖脂f77、egfrviii、gd-2、ny-eso-1tcr、酪氨酸酶、trpi/gp75、gp100/pmel-17、melan-a/mart-1、her2/neu、wt1、epha3、端粒酶、hpve6、hpve7、ebna1、bage、gage和magea3tcrslitrk6、enpp3、结合素-4、cd27、slc44a4、caix、cripto、cd30、muc16、gpnmb、bcma、trop-2、组织因子(tf)、canag、egfr、αv-整联蛋白、cd37、叶酸受体、cd138、ceacam5、cd56、cd70、cd74、gcc、5t4、cd79b、steap1、napi2b、lewisy抗原、liv、c-ret、dll3、efna4、内皮唾酸蛋白/cd248以及本领域技术人员已知的其他靶标。“癌症靶标”或“癌症标记物”是在癌症中差异性地表达或加工的分子，例如，在癌细胞上或在癌症环境中表达或加工。示例性的癌症靶标是细胞表面蛋白，例如il1rap(还例如，细胞粘附分子和受体)；细胞内受体；激素；以及通过细胞分泌进入癌症环境的分子，例如蛋白酶。对癌症有特异性的标记物是本领域已知的，例如，结肠癌和结肠直肠癌的muc1表达，肺癌的蛙皮素受体，以及前列腺癌的前列腺特异性膜抗原(psma)。术语“过表达”或“上调”可交换地使用，指以可检测的高于对照的水平转录或翻译的蛋白质或核酸，通常是生物标记物。所述术语包括由于转录、转录后加工、翻译、翻译后加工、细胞定位(例如，细胞器、细胞质、细胞核、细胞表面)、以及rna和蛋白质稳定的过表达。过表达可以使用检测生物标记物的常规技术来检测，无论所述生物标记物是mrna(即，rt-pcr，杂化)还是蛋白质(即，流式细胞术，成像，elisa，免疫组织化学技术)。相比正常细胞，过表达可以是至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％中的任一种，或者更多。在一些实施方案中，癌症靶标可以与某一类型的癌症细胞相关，例如，白血病、骨髓瘤、淋巴瘤、aml、cml、非小细胞肺癌细胞、前列腺癌、结肠直肠癌、乳腺癌或卵巢癌。细胞类型特异性的靶标在该细胞类型中的表达水平通常比在参照细胞群中高至少2倍。在一些实施方案中，细胞类型特异性标记物以比其在参照细胞群中的平均表达高至少3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、20倍、50倍、100倍或1000倍的水平存在。因此，可以检测或测量靶标来将相关的细胞类型与其他细胞区分开。癌症干细胞(csc)是存在于肿瘤或血癌中的细胞，其可以产生构成大部分癌症细胞的细胞。csc也可以自我更新，与正常(非癌症)干细胞类似。因此csc可以通过迁移至个体的非肿瘤组织并引发“新的”肿瘤来介导转移。csc构成了任何给定癌症的非常小的百分比，取决于检测的该癌症的阶段。例如，在aml细胞的样品中，csc的平均频率被认为是约1:10,000。造血csc被识别为cd34+，与正常造血干细胞(hsc)类似。其他csc相关的标记物包括cd44(乳腺癌)、cd133(神经胶质癌)和notch(例如，骨髓瘤和成神经细胞瘤)。本文描述的iqb可以结合抗体-药物缀合物所针对的癌症靶标的一个非限制性实例为c型类凝集素分子1(“cll-1”)。cll-1在aml胚细胞和lsc上表达，但在正常造血干细胞上不表达。cll-1在骨髓和血液腔内的白血病细胞上表达。靶标抗原存在于所有aml法-美-英(fab)分类和细胞遗传学风险类型中，并且独立于flt-3状态表达。靶标从头表达，并且使疾病状态复发。结合多药抗性(mdr)的cll-1抗原的表达与差的疾病预后和较高的复发可能性有关。除了在aml中表达之外，cll-1在mds和其他癌性骨髓增生病症(例如，真性红细胞增多症、原发性血小板增多症和多发性骨髓纤维化)中表达。c型类凝集素分子1(cll-1)，也被称为clec12a、dcal-2和micl，是ii型膜蛋白质(itim结构域—tm结构域-茎系结构域-类凝集素结构域)。cll-1的胞外结构域是高度糖基化的，并且在髓系的细胞中专一地表达。对于许多物种，cll-1的核苷酸和蛋白质序列是已知的。例如，可以在genbank登记号af247788.1和uniprot登记号q5qgz9找到人序列。对于人cll-1蛋白，胞外结构域大约包含氨基酸65-265，跨膜结构域大约包含氨基酸44-64，并且胞浆结构域大约包含氨基酸1-43。人cll-1的茎系结构域跨越了氨基酸65-139，并且c凝集素结构域跨越了氨基酸140-249。技术人员将理解，cll-1变体(例如，物种同源物，等位基因变体等)可以优化排列，例如，用于保守残基和结构域的识别。术语“cll-1特异性抗体”、“抗cll-1抗体”、“cll-1抗体”、“cll-1adc”和“抗cll-1”在本文中意义相同地使用，指特异性地结合cll-1(包括cll-1的各种糖基化形式)的抗体(或抗体缀合物，根据上下文)。本文描述的cll-1抗体特异性地结合在例如某些癌症细胞表面表达的cll-1多肽，但不结合hsc。如下文更详细讨论的，本文的抗cll-1抗体可以结合cll-1表达的细胞，相比其他aml靶向抗体结合更大百分比的aml细胞，抑制aml细胞增殖，并且介导它们的破坏。“与cll-1相关的病症”(或者cll-1相关病症、cll-1病症、cll-1相关病况或疾病等)是指与相比标准对照(例如，正常细胞、非疾病细胞、非癌症细胞)的cll-1表达增多或减少的cll-1的细胞表面表达有关的病况和疾病。提高的cll-1水平与癌症细胞有关，尤其是诸如aml(急性骨髓性白血病)、mds(骨髓发育不良综合症)和cml(慢性骨髓性白血病)的白血病，并且在造血csc(例如，lsc)中有提高的cll-1水平。可以适用于靶向aml和相关系的癌症干细胞的抗体的一个非限制性实例是抗cll-1抗体，更具体地，是人源化的抗cll1抗体。此类抗体在例如us2013/0295118和临时申请62/359,100(两者通过引用并入本文)中描述。在一些实施方案中，抗cll-1抗体任选地为嵌合(例如，人源化)抗体，并且分别包含seqidno:1和seqidno:2的轻链和重链可变区。在某些实施方案中，抗体可以包括将半胱氨酸残基取代为另一残基。本公开的组合物可以通过半胱氨酸残基连接至抗体。在一个实例中，239位的丝氨酸残基被半胱氨酸(s239c)取代。多于一个的iqb化合物可以结合这样修饰的抗体。在一些实施方案中，连接至抗体的iqb化合物的数量可以为1至约10的任何数，或其间的任何数，包括分数。在一些实施方案中，连接至抗体的iqb化合物的数量为1至约3。已经发现，此类结合了本文描述的iqb的抗体在如下文描述的体外和体内应用中是有效的。b.剂量在对象的增殖性病症的治疗或预防中有效的四氢异喹啉并苯二氮的量将取决于病况的具体性质，并且可以通过本领域已知的标准临床技术来确定。另外，体外或体内测定可以任选地用于帮助鉴定最优的剂量范围。对于任何具体个体的具体剂量水平将取决于各种因素，包括四氢异喹啉并苯二氮的相对活性、年龄、体重、一般身体和精神健康状况、遗传因素、环境影响、性别、饮食、施用的时间、施用的途径、排泄速率、以及被治疗的具体问题的严重程度。术语“剂量(dose)”和“剂量(dosage)”在本文可交换使用。剂量是指在每次施用时给予个体的活性成分的量。对于本发明，剂量可以指抗体或相关组分的浓度，例如，治疗剂的量或放射性标记的剂量。剂量将根据多种因素而变化，包括施用的频率；个体的体型和耐受；病况的严重程度；副作用的风险；施用的途径；以及可检测部分(如果存在)的成像模式。本领域技术人员将认识到，剂量可以根据上述因素或基于治疗进程而变化。术语“剂型”是指药物的具体形式，并且取决于施用的途径。例如，剂型可以在液体中，所述液体例如用于注射的盐水溶液。“对照”样品或“对照”值是指用作参照(通常是已知的参照)以便与测试样品比较的样品。例如，测试样品从测试条件提取，所述测试条件例如，存在测试条件的情况，并且与来自已知条件的样品进行比较，所述已知条件例如，不存在测试化合物的情况(阴性对照)，或者存在已知化合物的情况(阳性对照)。对照也可以表示来自大量测试或结果的平均值。本领域技术人员将认识到，对照可以设计为用于多种参数的评估。例如，对照可以设计为基于药理数据(例如，半衰期)或治疗测量(例如，益处和/或副作用的比较)来比较治疗益处。对照可以设计为用于体外应用。本领域技术人员将知晓何种对照在给定的情况下有价值并且能够根据与对照值的比较来分析数据。对照对于数据显著性的确定也是有价值的。例如，如果给定参数的值在对照中大范围地变化，测试样品中的变化将不会被认为显著。在某些实施方案中，本公开的四氢异喹啉并苯二氮将与靶标结合部分(例如抗体)缀合。靶标结合部分可以特异性地针对靶向消除的细胞上的靶标，以便治疗患有由此类细胞的存在引起的病况的对象。靶标可以是靶标细胞上的任何生物分子。靶标细胞可以包括癌症细胞。因此，靶标可以包含，例如，癌症细胞上表达的多肽，例如，肿瘤相关抗原。在另一个实施方案中，靶标结合部分可以是可以结合抗原决定簇的嵌合抗原受体(“car”)，所述抗原决定簇包含肿瘤相关抗原、病毒抗原或病毒相关抗原的胞外结构域中的氨基酸或者此类多肽的片段。适合的用于口服施用的适合的剂量范围取决于具体的四氢异喹啉并苯二氮或四氢异喹啉并苯二氮抗体缀合物的效力，但通常为每天每千克体重约0.001mg至约500mg药物，优选为每千克体重约0.1mg至约200mg药物，更优选为约1mg/kg至约100mg/kg体重。通过技术人员已知的方法可以容易地确定剂量范围。可以例如与载体材料结合以产生单一剂型的活性成分的量将会根据治疗的对象和具体的施用方式而变化。剂量单位形式通常含有约1mg至约500mg的活性成分。施用可以是定期的。根据施用的途径，剂量可以，例如，每1天、3天、5天、7天、10天、14天、21天或28天或更久(例如，每2个月、3个月、4个月或6个月一次)施用一次。在一些情况下，施用是更加频繁的，例如，每天2次或每天3次。可以监控对象以便根据治疗进程和本领域技术人员认知的任何不良副作用来调节剂量和施用频率。因此，在一些实施方案中，根据对象的进展来进行另外的施用，例如，在施用之间对对象进行监控。例如，在第一次施用或施用循环后，可以监控对象的肿瘤生长速度、复发(例如，术后对象的情况)或者一般的疾病相关症状，例如虚弱、疼痛、恶性等。c.施用方法抗体缀合组合物可以通过任何其他方便的途径来施用，例如，通过输注或推注注射，或者通过上皮或粘膜皮肤内层(例如，口腔粘膜、直肠粘膜和肠粘膜等)吸收。施用可以是全身的或局部的。可以用于施用抗体缀合组合物的各种递送系统是已知的(例如，脂质体、微粒、微囊、胶囊等的包封)。施用方法包括但不限于，真皮内、肌内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内、硬膜外、鼻内和脑内的施用。在对象的增殖性病症的治疗或预防中有效的四氢异喹啉并苯二氮抗体缀合物的量将取决于病况的具体性质，并且可以通过本领域已知的标准临床技术来确定。另外，体外或体内测定可以任选地用于帮助鉴定最优的剂量范围。对于任何具体个体的具体剂量水平将取决于各种因素，包括四氢异喹啉并苯二氮抗体缀合物的相对活性、年龄、体重、一般身体和精神健康状况、遗传因素、环境影响、性别、饮食、施用的时间、施用的途径、排泄速率、以及被治疗的具体问题的严重程度。iqb或iqb缀合物可以通过任何适合的途径通过注射或输注来施用，所述途径包括但不限于静脉内、皮下、肌内或腹膜内的途径。药物组合物施用的实例包括在4℃下以10mg/ml将组合物储存至注射用无菌等渗盐水溶液中，并且在100ml或200ml的用于注射的0.9％氯化钠中稀释，然后施用至对象。经历1小时的过程，以0.2mg/kg至10mg/kg剂量通过静脉输注来施用组合物。在其他实施方案中，经过15分钟至2小时的时间，通过静脉输注来施用组合物。在其他实施方案中，经由皮下推注注射进行施用程序。通过示例的方式而非通过限制的方式来提供以下实施例。实施例实施例1-3中使用的一般方法：在brukeravanceiii500mhznmr仪器和/或varianinova300mhz光谱仪上记录1hnmr谱。在agilent1100serieslc/ms系统上使用chromolithrp-18e分析hplc柱(单体,50×2mm)并且使用以下分析hplc方法来决定色谱纯度：注射体积5-15μl；流速1.0ml/min；含5-95％乙腈的水(0.05％acoh作为改性剂)经历5分钟；agilent二极管阵列检测器，λ＝280nm、254nm和220nm；室温。对于所有的分析，使用的质谱系统是agilent1100和/或1200lc/msd(sl)。所有正相纯化使用rfgold柱(teledyneisco；lincoln,nebraska)结合teledyneiscocombiflashrf200来进行，并且使用包括a→b的溶剂梯度。具体a和b的确定，以及使用的梯度，将会针对下文每个单独的实施例进行说明。所有反相纯化使用rf反相c18柱(teledyneisco)结合teledyneiscocombiflashrf200来进行，并且使用由a:h2o(0.05％acoh)和b:乙腈(0.05％acoh)组成的溶剂梯度。具体使用的柱尺寸和具体的溶剂梯度将针对下文每个单独的实施例进行说明。以下实验中使用的水是超纯的(18mω)，通过veoliaelgapurelabflex纯化系统(elgallc；woodridge,illinois)来纯化。实施例1-clt-d201的合成2-(4-苄氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯甲酰基)-1,2,3,4-四氢-异喹啉-3-羧酸甲酯(6)参考图3，在22℃下向氩气净化的4-苄氧基-5-甲氧基-2-硝基苯甲酸(8)(4.00g,13.2mmol)在四氢呋喃(thf)(16ml)中的溶液，添加草酰氯(1.68ml,19.8mmol)，然后添加二甲基甲酰胺(dmf)(0.2ml)。将反应在22℃下在ar气氛下搅拌过夜。然后将混合物在真空中浓缩，再溶解于thf，并且再次浓缩以提供粗制的酰氯。在不同的烧瓶中，将1,2,3,4-四氢-异喹啉-3-羧酸甲酯(7)(3.78g,19.8mmol)和三乙胺(4.60ml,33.0mmol)用ar净化，溶解于二氯甲烷(dcm)(20ml)，并且冷却至-30℃。在ar下向该混合物中逐滴添加在dcm(15ml)中的粗制酰氯，同时保持混合物的内部温度≤-20℃。然后将冷浴移除，并且使反应搅拌3hr，同时升温至环境温度，届时反应完成。然后将混合物浓缩并在乙酸乙酯(etoac)和h2o之间分层。将反应(reaction)用etoac(3×50ml)萃取，然后将合并的有机相用h2o(50ml)洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并浓缩。得到的残余物通过柱色谱(含0→10％甲醇(meoh)的dcm)部分纯化以提供不纯的(3)，为黄色泡沫(4.34g,69％产率,9.11mmol)，通过lc/ms为>85％纯度。lc/ms：保留时间3.39min。lc/ms(es+)针对c26h25n2o7的计算值：[m+h]+477；实测值477。2-苄氧基-3-甲氧基-11,11a-二氢-6h,13h-5a,13-二氮杂-苯并[4,5]环庚[1,2-b]萘-5,12-二酮(5)向不纯的2-(4-苄氧基-5-甲氧基-2-硝基-苯甲酰基)-1,2,3,4-四氢-异喹啉-3-羧酸甲酯(6)(3.3g,6.9mmol)在meoh(230ml)中的溶液添加几铲尖(spatulatip)的ni。然后将混合物加热至回流，并逐滴添加在meoh(40ml)中的水合肼(4.3ml,139mmol)。在添加肼时观察到快速的冒泡。肼添加完成后，再添加raneyni时未观察到再次的冒泡。将反应再回流30min，并且通过lc/ms判断反应完成。(注意：较长的反应时间导致不期望的脱苄基作用)。将反应从加热移除，通过硅藻土过滤，并用meoh洗涤。将滤液在真空中浓缩，并且用dcm共沸。将得到的固体用dcm研磨以提供白色沉淀物。剩余的滤液残余物通过柱色谱(含0→10％meoh的dcm)纯化。洗涤的滤饼仍含有产物，并将其悬浮于100ml的1:1乙腈(acn)/h2o中，将固体通过新鲜硅藻土过滤，并将滤液冻干。将全部三批干净的材料(研磨的沉淀物、冻干的材料、以及来自柱色谱的干净的级分)合并以提供(4)，为白色晶体固体(2.26g,79％产率,5.44mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3)：δ7.43-7.36(m,9h),7.34-7.22(m,2h),6.37(bs,1h),5.18(bs,2h),5.12(d,j＝15.1hz,1h),4.48(d,j＝15.1hz,1h),4.19(t,j＝6.8hz,1h),3.92(s,3h),3.49(dd,j＝15.4,7.1hz,1h),3.00(dd,j＝15.4,6.1hz,1h)。lc/ms：保留时间2.92min。(es+)针对c25h23n2o4的计算值：[m+h]+415；实测值415。2-苄氧基-3-甲氧基-13-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-11,11a-二氢-6h,13h-5a,13-二氮杂-苯并[4,5]环庚[1,2-b]萘-5,12-二酮(4)向干冰/acn浴中冷却至-40℃的氩气净化的2-苄氧基-3-甲氧基-11,11a-二氢-6h,13h-5a,13-二氮杂-苯并[4,5]环庚[1,2-b]萘-5,12-二酮(5)(2.26g,5.44mmol)在thf(60ml)中的溶液逐滴添加正丁基锂(nbuli)(4.25ml，1.6m己烷溶液，6.80mmol)。使混合物在-40℃下搅拌1hr，然后逐滴添加2-(三甲基硅烷基)乙氧基甲基氯(1.20ml,6.80mmol)在20mlthf中的溶液。将得到的混合物缓慢升温至环境温度过夜。然后将反应在真空中浓缩，并且将残余物在etoac和h2o之间分层。将反应用etoac(3×50ml)萃取，然后将合并的有机物用卤水(50ml)洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将得到的残余物通过柱色谱(含0→50％etoac的hex)纯化以提供(4)，为黄色泡沫(1.99g,67％产率,3.66mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3)：δ7.45-7.42(m,2h),7.38-7.34(m,2h),7.34-7.28(m,4h),7.28-7.24(m,3h),5.42(d,j＝9.8hz,1h),5.20(s,2h),5.13(d,j＝15.6hz,1h),4.58(d,j＝9.8hz,1h),4.40(d,j＝15.6hz,1h),4.26(dd,j＝7.3,6.4hz,1h),3.91(s,3h),3.69(dt,j＝10.3,9.8hz,1h),3.62-3.56(m,1h),3.53(dd,j＝15.4,7.6hz,1h),2.98(dd,j＝15.6,6.4hz,1h),0.98-0.94(m,2h),0.04(s,9h)。lc/ms：保留时间3.97min。(es+)针对c31h37n2o5si的计算值：[m+h]+545；实测值545。2-羟基-3-甲氧基-13-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-11,11a-二氢-6h,13h-5a,13-二氮杂-苯并[4,5]环庚[1,2-b]萘-5,12-二酮(3)将2-苄氧基-3-甲氧基-13-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-11,11a-二氢-6h,13h-5a,13-二氮杂-苯并[4,5]环庚[1,2-b]萘-5,12-二酮(4)(1.99g,3.66mmol)在etoh(40ml)中的溶液用ar(3×)净化，然后添加pd(oh)2(400mg)。将混合物用ar(3×)净化，然后用h2(3×)净化。将得到的混合物在h2(1atm)和环境温度下搅拌30min，届时通过tlc和lc/ms判断反应完成。使用ar(3×)净化后，将反应通过硅藻土过滤，用meoh洗涤，将滤液在真空中浓缩，并且将得到的残余物通过柱色谱(含0→75％etoac的hex)纯化以提供(6)，为黄色固体(1.63g,98％产率,3.58mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3)：δ7.33-7.28(m,3h),7.28-7.24(m,3h),5.93(s,1h),5.44(d,j＝9.8hz,1h),5.15(d,j＝15.1hz,1h),4.69(d,j＝9.8hz,1h),4.40(d,j＝15.6hz,1h),4.28(dd,j＝7.6,6.6hz,1h),3.93(s,3h),3.74-3.68(m,1h),3.66-3.60(m,1h),3.56(dd,j＝15.4,7.6hz,1h),2.99(dd,j＝15.4,6.6hz,1h),0.99(t,j＝8.3hz,2h),0.02(s,9h)。lc/ms：保留时间3.30min。(es+)针对c24h29n2o5si的计算值：[m-h]-453；实测值453。二sem-clt-d201(2)向氩气净化的2-羟基-3-甲氧基-13-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-11,11a-二氢-6h,13h-5a,13-二氮杂-苯并[4,5]环庚[1,2-b]萘-5,12-二酮(3)(300mg,0.660mmol)在thf(2.4ml)中的溶液添加三苯基膦(260mg,0.990mmol)。然后将混合物冷却至0℃，并且逐滴添加偶氮二甲酸二乙酯(114μl,0.726mmol)。将得到的混合物在0℃下搅拌45min，然后将1,3-丙二醇(23μl,0.317mmol)添加至冷的反应中，并且使混合物缓慢升温至环境温度过夜。将混合物在真空中浓缩，并且将得到的残余物通过柱色谱(含0→75％etoac的hex)纯化以提供(2)，为黄色固体(103mg,34％产率,0.109mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3)：δ7.33-7.28(m,8h),7.28-7.24(m,2h),7.22(s,2h),5.47(d,j＝9.8hz,2h),5.14(d,j＝15.1hz,2h),4.71(dd,j＝10.3,1.0hz,2h),4.41(d,j＝15.6hz,2h),4.29-4.20(m,6h),3.86(s,6h),3.76(dt,j＝9.8,6.8hz,2h),3.67(dt,j＝9.8,7.1hz,2h),3.57(dd,j＝15.4,7.6hz,2h),2.99(ddd,j＝15.6,6.4,4.4hz,2h),2.41(p,j＝5.9hz,2h),0.95(ddd,j＝9.8,6.8,2.9hz,4h),0.01(s,18h)。lc/ms：保留时间4.39min。(es+)针对c51h65n4o10si2的计算值：[m+h]+949；实测值949。clt-d201向具有搅拌子的烘干的4ml小瓶添加二sem-clt-d201(2)(50.0mg,0.526mmol)。将固体置于氩气下，然后溶解于无水thf(1.5ml)，并且将得到的溶液在干冰/丙酮冷浴中冷却至-78℃。经5分钟，向冷却的溶液中逐滴添加三乙基硼氢化锂(110μl,0.111mmol,1.0mthf溶液)。将反应在-78℃下搅拌90分钟，届时通过注射器添加1.0mlh2o，并且将溶液从冷浴移除，并且使其达到环境温度。在减压下去除thf，并向得到水性悬浮液中添加1.0mldmso。将该溶液直接装载至预平衡的30grf反相c18柱上。使用含5-95％乙腈的h2o(0.05％acoh)的梯度洗脱产物。将纯的级分合并，并且冻干以得到8.7mg(25％产率)的期望产物(1)，为蓬松的白色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3)：δ7.51(d,j＝5.5hz,2h),7.47(d,j＝5.5,1h),7.44(d,j＝5.5hz,2h),7.38-7.28(m,8h),6.83(d,j＝11.5hz,2h),5.00(d,j＝15.5hz,2h),4.54(dd,j＝13.5,3.0hz,2h),4.33-4.20(m,4h),3.93(s,3h),3.92(s,3h),3.94-3.88(m,1h),3.30-3.21(m,2h),3.18-3.11(m,2h),2.41(六重峰,j＝5.5hz,2h)。lc/ms：保留时间2.77min。(es+)针对c39h37n4o6的计算值：[m+h]+657；实测值657。clt-d201细胞毒性使用celltiter-glo发光细胞活度测定(promegacat#g7573)来评估化合物的细胞毒性，如制造商的说明所描述(arduengo,m.,cellnotes,2003,5:15-17)。该测定含有溶解细胞并且产生与存在的三磷酸腺苷(atp)的量(其为细胞生长的量度)成正比的“发光型”发光信号的试剂。将细胞以每孔在50μl培养基中的1000个细胞接种至组织培养96孔平底板上。不使用板周围的孔，并且将200μl的培养基加入周围的孔以防止孵育期间的蒸发。然后将以最终浓度的两倍测试的50μl化合物分三份加入孔内。将板在37℃、5％co2下孵育72小时，然后将100μlcelltiter-glo试剂添加至每个孔(不包括周围的孔)。然后将板在室温下在震摇器上孵育10分钟。孵育后，将100μl的上层清液转移至固体白色96孔板，并使用分光光度计测量发光。基于未处理的对照来计算百分比活度：％活度＝(处理/未处理)*100。gi50：50％细胞生长抑制所需要的化合物的浓度。实施例2-clt-d501的合成2-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-丙氧基]-3-甲氧基-13-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-11,11a-二氢-6h,13h-5a,13-二氮杂-苯并[4,5]环庚[1,2-b]萘-5,12-二酮(5)参考图4，在22℃下向ar净化的2-羟基-3-甲氧基-13-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-11,11a-二氢-6h,13h-5a,13-二氮杂-苯并[4,5]环庚[1,2-b]萘-5,12-二酮(6)(400mg,0.880mmol)在thf(8.8ml)中的溶液添加三苯基膦(462mg,1.76mmol)和氮杂二甲酸二叔丁酯(405mg,1.76mmol)。将混合物搅拌1h，然后将3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-丙-1-醇(282μl,1.32mmol)添加至反应混合物。在ar下，将反应在22℃下搅拌过夜。然后将混合物在真空中浓缩并通过柱色谱(含0→50％etoac的己烷)纯化以提供(5)，为灰白色泡沫，>95％产率。1hnmr(500mhz,cdcl3)：δ7.33-7.28(m,3h),7.28-7.24(m,3h),5.49(d,j＝9.8hz,1h),5.15(d,j＝15.1hz,1h),4.65(d,j＝9.8hz,1h),4.41(d,j＝15.1hz,1h),4.28(dd,j＝7.3,6.4hz,1h),4.18-3.99(m,2h),3.88(s,3h),3.82(t,j＝5.9hz,2h),3.77(td,j＝9.8,6.8hz,1h),3.66(td,j＝9.8,6.8hz,1h),3.56(dd,j＝15.1,7.3hz,1h),3.00(dd,j＝15.6,6.4hz,1h),2.06(p,j＝6.4hz,2h),1.54(s,6h),0.98(sep,j＝3.4hz,2h),0.87(s,9h),0.03(s,9h)。lc/ms：保留时间4.71min。(es+)calc针对c33h51n2o6si2的计算值：[m+h]+627；实测值627。2-(3-羟基-丙氧基)-3-甲氧基-13-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-11,11a-二氢-6h,13h-5a,13-二氮杂-苯并[4,5]环庚[1,2-b]萘-5,12-二酮(4)在ar下，向2-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-丙氧基]-3-甲氧基-13-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-11,11a-二氢-6h,13h-5a,13-二氮杂-苯并[4,5]环庚[1,2-b]萘-5,12-二酮(5)(615mg,0.98mmol)在thf(9.8ml)中的溶液添加氟化四丁基铵(1.23ml的1.0mthf溶液，1.23mmol)。使混合物在22℃下搅拌2h，届时通过tlc和lc/ms判断反应完成。通过将混合物倒入饱和nh4cl(水溶液)(20ml)来淬灭，并且用etoac(3×20ml)萃取。将合并的有机物用卤水(50ml)洗涤、经mgso4干燥，过滤，浓缩并通过使用含0-100％etoac的己烷的柱色谱来纯化，以提供(4)，为白色晶体固体(411mg,82％产率,0.802mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.33-7.29(m,3h),7.29-7.24(m,3h),5.50(d,j＝10.3hz,1h),5.15(d,j＝15.6hz,1h),4.67(d,j＝9.8hz,1h),4.42(d,j＝15.6hz,1h),4.30-4.18(m,3h),3.90-3.86(m,2h),3.88(s,3h),3.79(td,j＝9.8,6.4hz,1h),3.66(td,j＝9.3,6.8hz,1h),3.57(dd,j＝15.1,6.8hz,1h),3.00(dd,j＝9.3,6.4hz,1h),2.22(t,j＝5.9hz,1h),2.10(p,j＝5.9hz,1h),1.02-0.92(m,2h),0.03(s,9h)。lc/ms：保留时间3.26min。(es+)针对c27h37n2o6si的计算值：[m+h]+513；实测值513。8-羟基-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(3)向用ar(3×)净化的三氟甲磺酸8-苄氧基-7-甲氧基-5,11-二氧代-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-5,10,11,11a-四氢-1h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-2-基酯(18，来自图6)(650mg,1.03mmol)在etoh(20ml)中的溶液添加pd(oh)2/c(300mg)。然后将反应混合物用ar(3×)净化，然后用h2(3×)净化，并且在22℃下于h2(1atm)下搅拌3h，届时通过tlc和lc/ms判断反应完成。将混合物通过硅藻土过滤，将其用meoh洗涤。将合并的有机物浓缩，并且将得到的残余物通过使用含0-100％etoac的己烷的柱色谱纯化以提供(3)，为白色固体(345mg,85％产率)。1hnmr(500mhz,cdcl3)：δ7.37(s,1h),7.26(s,1h),5.45(d,j＝9.8hz,1h),4.69(d,j＝10.3hz,1h),4.19(d,j＝6.8hz,1h),3.96(s,3h),3.79-3.69(m,2h),3.67-3.60(m,1h),3.59-3.52(m,1h),2.76-2.69(m,1h),2.14-2.05(m,1h),2.05-1.94(m,2h),1.71(bs,1h),0.99(t,j＝8.3hz,2h),0.03(s,9h)。lc/ms：保留时间2.85min。(es+)针对c19h29n2o5si的计算值：[m+h]+393；实测值393。二-sem-clt-d501(2)在22℃下向ar净化的三苯基膦(171mg,0.650mmol)在thf(2ml)中的溶液添加氮杂二甲酸二叔丁酯(150mg,0.650mmol)。将混合物搅拌30min，然后将在thf(2ml)中的8-羟基-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(3)(107mg,0.325mmol)添加至形成的浆液。将得到的混合物再搅拌30min，然后将在thf(3ml)中的2-(3-羟基-丙氧基)-3-甲氧基-13-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-11,11a-二氢-6h,13h-5a,13-二氮杂-苯并[4,5]环庚[1,2-b]萘-5,12-二酮(4)(200mg,0.390mmol)引入混合物。将反应在ar下在22℃下搅拌过夜。然后将混合物在真空中浓缩，并且通过柱色谱(含0→100％etoac的hex)纯化以提供不纯的(2)。然后将不纯的材料通过反相c18纯化以提供(2)，为白色蓬松粉末(58mg,20％,0.0652mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.35(d,j＝2.4hz,1h),7.33-7.28(m,3h),7.28-7.24(m,2h),7.24-7.21(m,2h),5.48(dd,j＝10.3,3.9hz,2h),5.15(dd,j＝15.1,3.4hz,1h),4.71(td,j＝10.3,2.9hz,2h),4.39(dd,j＝15.1,2.0hz,1h),4.30-4.18(m,5h),4.10(td,j＝7.8,2.0hz,1h),3.89(d,j＝1.5hz,3h),3.86(d,j＝1.0hz,3h),3.79-3.72(m,3h),3.69(q,j＝7.8hz,2h),2.99(dq,j＝15.1,2.9hz,1h),2.72-2.70(m,1h),2.41(q,j＝5.9hz,2h),2.16-2.04(m,1h),2.04-1.95(m,2h),1.02-0.92(m,4h),0.00(s,18h)。lc/ms：保留时间4.16min。(es+)针对c46h63n4o10si2的计算值：[m+h]+888；实测值888。向具有搅拌子的烘干的4ml小瓶中添加二sem-clt-d501(2)(47.0mg,0.529mmol)。将固体置于氩气下，然后溶解于无水thf(1.5ml)，并且将得到的溶液在干冰/丙酮冷浴中冷却至-78℃。经5分钟，向冷却的溶液中逐滴添加超氢化物(110μl,0.110mmol,1.0mthf溶液)。将反应在-78℃下搅拌75分钟，届时通过注射器添加1.0mlh2o，并且将溶液从冷浴移除，并使其达到环境温度。将thf在减压下去除，并且向得到的水性悬浮液中添加1.0mldmso。将该溶液直接装载至预平衡的30grf反相c18柱上。使用含5-95％乙腈的h2o(0.05％acoh)的梯度洗脱产物。将纯的级分合并，并且冻干以得到17.7mg(57％产率)的期望产物(1)，为蓬松白色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.64(dd,j＝11.0,4.5hz,1h),7.52(d,j＝5.0hz,1h),7.50(d,j＝10.0hz,1h),7.46(dd,j＝12.5,4.5hz,1h),7.38-7.29(m,4h),6.84(d,j＝10.5hz,2h),5.00(d,j＝15hz,1h),4.55(dd,j＝16.0,8.0hz,1h),4.34-4.22(m,4h),3.94-3.92(m,6h),3.86-3.78(m,2h),3.71-3.66(m,1h),3.60-3.54(m,1h),3.26(dt,j＝15.5,6.0hz,1h),3.15(dq,j＝16.0,4.5hz,1h),2.41(六重峰,j＝6.0hz,2h),2.34-2.27(m,2h),2.09-2.00(m,2h)。lc/ms：保留时间2.43min。(es+)针对c35h34n4o6的计算值：[m+h]+595；实测值595。实施例3-clt-d601的合成8-苄氧基-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-7-甲氧基-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(16)参考图5，在ar下，向8-苄氧基-2-羟基-7-甲氧基-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(来自图5的17)(4.00g,10.86mmol)添加dmf(100ml)，然后添加咪唑(8.87g,130mmol)。将混合物在22℃下搅拌1h，然后添加tbscl(8.18g,54.3mol)，并且将得到的混合物在22℃下搅拌18h。然后将反应混合物倒入h2o中，并且用etoac(3×100ml)萃取。将合并的有机物用h2o(100ml)洗涤，然后用卤水(100ml)洗涤，经mgso4干燥，过滤并浓缩。将得到的残余物通过使用含0-75％etoac的己烷的柱色谱纯化以提供(16)，为白色固体(630mg,12％,1.30mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.46(s,1h),7.43-7.38(m,4h),7.36-7.31(m,2h),6.38(s,1h),5.19(s,2h),4.52(p,j＝5.4hz,1h),4.18(dd,j＝4.4,3.9hz,1h),3.95(s,3h),3.69(qd,j＝11.7,5.9hz,2h),2.82(td,j＝12.7,5.4hz,1h),2.05(m,1h),0.88(s,9h),0.10(s,6h)。lc/ms：保留时间3.65min。(es+)针对c26h35n2o5si的计算值：[m+h]+483；实测值483。8-苄氧基-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(15)将净化的8-苄氧基-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-7-甲氧基-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(16)在thf(15ml)中的溶液在干冰/乙腈浴中冷却至-40℃。然后逐滴添加n-buli(1.02ml的1.6m己烷溶液，1.63mmol)，并且将得到的混合物搅拌1h，届时逐滴添加在thf(5ml)中的semcl(288l,1.63mmol)。使得到的反应混合物搅拌，同时经18h缓慢升温至22℃。然后将混合物在etoac和h2o之间分层。将混合物用etoac(3×20ml)萃取。将合并的有机物用卤水(20ml)洗涤，经mgso4干燥，过滤并浓缩。将分离的残余物通过使用含0-50％etoac的己烷的柱色谱来纯化以提供(15)，为淡黄色泡沫(774mg,97％,1.26mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.45-7.41(m,2h),7.38-7.34(m,3h),7.34-7.29(m,1h),7.24(s,1h),5.42(d,j＝9.8hz,1h),5.20(s,2h),4.56(p,j＝5.9hz,1h),4.48(d,j＝9.8hz,1h),4.20(q,j＝3.9hz,1h),3.95(s,3h),3.73(dd,j＝12.2,5.9hz,1h),3.69(td,j＝9.3,7.3hz,1h),3.59(td,j＝9.3,7.3hz,1h),3.54(dd,j＝5.4hz,1h),2.83(qd,j＝12.7,3.9hz,1h),2.01(ddd,j＝14.7,12.7,7.8hz,1h),0.96(ddd,j＝9.8,6.8,2.4hz,2h),0.87(s,9h),0.09(s,6h),0.04(s,9h)。lc/ms：保留时间4.63min。(es+)针对c32h49n2o6si2的计算值：[m+h]+613；实测值613。8-苄氧基-2-羟基-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(14)在ar下，向8-苄氧基-2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(15)(1.61g,2.37mmol)在thf(40ml)中的溶液添加氟化四丁基铵(3.28ml的1.0mthf溶液，3.28mmol)。将混合物在环境温度下搅拌18h，届时通过tlc和lc/ms判断反应完成。将混合物倒入饱和nh4cl(水溶液)(50ml)中来淬灭，并且用etoac(3×50ml)萃取。将合并的有机物用卤水(100ml)洗涤，经mgso4干燥，过滤，浓缩，并且通过使用含0-100％etoac的己烷的柱色谱纯化以提供(14)，为白色晶体固体(1.18g,91％产率,2.37mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.45-7.42(m,2h),7.39-7.35(m,3h),7.34-7.30(m,1h),7.25(s,1h),5.43(d,j＝9.8hz,1h),5.21(s,2h),4.65(q,j＝4.4hz,1h),4.50(d,j＝9.8hz,1h),4.28(dd,j＝7.8,5.4hz,1h),3.95(s,3h),3.84(ddd,j＝12.7,3.9,1.5hz,1h),3.72-3.63(m,2h),3.60(td,j＝9.8,6.4hz,1h),2.96(dt,j＝13.7,5.4hz,1h),2.10(dddd,j＝13.7,7.8,4.4,1.5hz,1h),1.71(d,j＝3.4hz,1h),0.96(ddd,j＝9.8,6.8,2.9hz,2h),0.04(s,9h)。lc/ms：保留时间3.32min。(es+)针对c26h35n2o6si的计算值：[m+h]+499；实测值499。8-苄氧基-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,11a-二氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-2,5,11-三酮(13)向冷却至-78℃的ar净化的草酰氯(301μl,3.56mmol)在dcm(1.8ml)中的溶液逐滴添加在dcm(20ml)中的干燥的dmso(505μl,7.11mmol)。使混合物在-78℃下搅拌2h，然后经45min逐滴添加在dcm(50ml)中的8-苄氧基-2-羟基-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(14)(1.18g,2.37mmol)。将得到的混合物搅拌45min，然后将et3n(2.31ml,16.59mmol)逐滴添加至反应混合物。再搅拌30min后，将冷浴移除，并且经约1.5h使反应缓慢升温至22℃，届时通过tlc和lc/ms判断反应完成。使用dcm(50ml)稀释，并且使用1nhcl(75ml)、饱和nahco3(水溶液)(75ml)、h2o(75ml)和卤水(75ml)洗涤有机物。然后将有机物经mgso4干燥，过滤，浓缩，并且将得到的残余物通过使用含0-100％etoac的己烷的柱色谱纯化以提供(13)，为灰白色泡沫(873mg，74％产率，1.76mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.46-7.42(m,2h),7.40-7.36(m,2h),7.34(s,1h),7.34-7.29(m,1h),7.28(s,1h),5.46(d,j＝9.8hz,1h),5.22(d,j＝2.5hz,2h),4.62(dd,j＝9.8,2.9hz,1h),4.55(d,j＝9.8hz,1h),4.23(d,j＝20.0hz,1h),3.96(s,3h),3.89(d,j＝20.0hz,1h),3.70(dt,j＝10.3,6.4hz,1h),3.60(dt,j＝16.6,6.4hz,1h),3.58-3.52(m,1h),2.77(qd,j＝19.1,1.0hz,1h),1.02-0.92(m,2h),0.04(s,9h)。lc/ms：保留时间3.57min。(es+)针对c26h32n2nao6si的计算值：[m+na]+519；实测值519。8-羟基-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,11a-二氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-2,5,11-三酮(12)向用ar(3×)净化的8-苄氧基-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,11a-二氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-2,5,11-三酮(13)(866mg,1.75mmol)在etoh(20ml)中的溶液添加pd(oh)2/c(180mg,0.2％w/w)。然后将反应混合物用ar(3×)净化，然后用h2(3×)净化，并且使其在22℃在h2(1atm)下搅拌30min，届时通过tlc和lc/ms判断反应完成。将混合物通过硅藻土过滤，使用meoh洗涤硅藻土。将合并的有机物浓缩，并且将得到的残余物通过使用含0-100％etoac的己烷的柱色谱纯化以提供(12)，为白色固体(642mg,90％产率,1.58mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.35(s,1h),7.30(s,1h),6.00(s,1h),5.48(d,j＝9.8hz,1h),4.75(d,j＝9.8hz,1h),4.63(dd,j＝9.8,2.9hz,1h),4.23(d,j＝20.0hz,1h),3.98(s,3h),3.90(d,j＝20.0hz,1h),3.72(td,j＝16.6,7.3hz,1h),3.64(td,j＝16.6,7.8hz,1h),3.62-3.55(m,1h),2.78(qd,j＝9.3,1.0hz,1h),0.99(ddd,j＝8.3,6.8,6.8hz,2h),0.02(s,9h)。lc/ms：保留时间2.80min。(es+)针对c19h25n2o6sin的计算值：[m-h]-405；实测值405。8-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-丙氧基]-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,11a-二氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-2,5,11-三酮(11)向冷却至0℃的ar净化的8-羟基-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,11a-二氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-2,5,11-三酮(12)(642mg,1.58mmol)在thf(16ml)中的溶液添加三苯基膦(621mg,2.37mmol)，并且逐滴添加氮杂二甲酸二乙酯(298μl,1.89mmol)。将混合物搅拌1h，然后将3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-丙-1-醇(370μl,1.73mmol)添加至反应混合物。在ar下，将反应搅拌并且使其升温至22℃过夜。然后将混合物在真空下浓缩，并且通过柱色谱(含0→100％etoac的hex)纯化以提供(11)，为白色泡沫(127mg,14％,0.221mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3)：δ7.33(s,1h),7.26(s,1h),5.53(d,j＝9.8hz,1h),4.71(d,j＝10.3hz,1h),4.64(dd,j＝9.8,2.9hz,1h),4.24(d,j＝20.0hz,1h),4.19-4.11(m,2h),3.92(s,3h),3.90(d,j＝21.5hz,1h),3.83(t,j＝5.9hz,2h),3.77(td,j＝9.8,6.4hz,1h),3.67(td,j＝9.8,6.8hz,1h),3.61-3.55(m,1h),2.79(qd,j＝9.8,1.0hz,1h),2.11-2.04(m,2h),0.94(m,2h),0.88(s,9h),0.04(d,j＝2.0hz,6h),0.03(s,9h)。lc/ms：保留时间4.33min。(es+)针对c28h46n2nao7si2的计算值：[m+na]+601；实测值601。8-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-丙氧基]-2-亚乙基-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(10)在ar下，向(乙基)-三苯基膦溴化物(237mg,0.639mmol)在thf(1ml)中的溶液添加叔丁醇钾(0.64ml的1.0mthf溶液，0.64mmol)。将混合物搅拌1h，然后将在thf(2ml)中的8-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-丙氧基]-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,11a-二氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-2,5,11-三酮(11)(185mg,0.320mmol)添加至反应混合物，并且使混合物在22℃下搅拌1h，届时通过tlc和lc/ms判断反应完成。将反应用h2o(2ml)淬灭，并且用etoac(3×5ml)萃取。将合并的有机物用h2o(5ml)洗涤，经mgso4干燥，过滤并浓缩。分离的残余物通过使用含0-50％etoac的己烷的柱色谱纯化以提供(10)，为灰白色泡沫(146mg，89％产率，0.285mmol)，约10:1z/e区域选择性。1hnmr(500mhz,cdcl3)(z异构体):δ7.34(s,1h),7.24(s,1h),5.59-5.53(m,1h),5.50(d,j＝10.3hz,1h),4.63(d,j＝9.8hz,1h),4.24(dd,j＝8.8,2.0hz,3h),4.18-4.09(m,3h),3.92(s,3h),3.91(d,j＝3.9hz,1h),3.82(t,j＝5.9hz,2h),3.78(td,j＝9.8,6.4hz,1h),3.67(td,j＝9.8,7.3hz,1h),3.36(bd,j＝15.6hz,1h),2.80-2.72(m,1h),2.10-2.03(m,3h),1.68-1.63(m,3h),0.98(ddd,j＝9.8,6.8,3.4hz,2h),0.87(s,9h),0.03(d,j＝2.0hz,6h),0.02(s,6h)。lc/ms：保留时间4.64min。(es+)针对c30h51n2o6si2的计算值：[m+h]+591；实测值591。2-亚乙基-8-(3-羟基-丙氧基)-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(9)在ar下，向8-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-丙氧基]-2-亚乙基-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(10)(220mg,0.372mmol)在thf(3.7ml)中的溶液添加氟化四丁基铵(0.47ml的1.0mthf溶液，0.47mmol)。使混合物在22℃下搅拌75min，届时通过tlc和lc/ms判断反应完成。将混合物倒入饱和nh4cl(水溶液)(5ml)来淬灭，并且用etoac(3×5ml)萃取。将合并的有机物用卤水(10ml)洗涤，经mgso4干燥，过滤，浓缩，并且将得到的残余物通过使用含0-100％etoac的己烷的柱色谱纯化以提供(9)，为白色晶体固体(115mg,65％产率,0.240mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.35(s,1h),7.25(s,1h),5.60-5.53(m,1h),5.51(d,j＝10.3hz,1h),4.65(d,j＝10.3hz,1h),4.30-4.18(m,5h),3.93-3.86(m,5h),3.79(td,j＝10.3,6.8hz,1h),3.68(td,j＝9.8,7.3hz,1h),3.37(bd,j＝16.1hz,1h),2.81-2.73(m,1h),2.24(t,j＝5.9hz,1h),2.11(p,j＝5.9hz,2h),1.67-1.63(m,2h),0.98(ddd,j＝9.8,6.4,4.4hz,2h),0.03(s,9h)。lc/ms：保留时间3.09min。(es+)针对c24h37n2o6si的计算值：[m+h]+477；实测值477。二-semclt-d601(8)在22℃下，向ar净化的三苯基膦(105mg,0.400mmol)在thf(1ml)中的溶液添加氮杂二羧酸二叔丁酯(92mg,0.400mmol)。使混合物搅拌30min，然后将在thf(1.5ml)中的2-羟基-3-甲氧基-13-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-11,11a-二氢-6h,13h-5a,13-二氮杂-苯并[4,5]环庚[1,2-b]萘-5,12-二酮(6)(65mg,0.200mmol)添加至形成的浆液。将得到的混合物再搅拌30min，然后将在thf(2ml)中的2-亚乙基-8-(3-羟基-丙氧基)-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,2,3,11a-四氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-5,11-二酮(9)(115mg,0.240mmol)引入混合物。在ar下，将反应在22℃下搅拌过夜。然后将混合物在真空中浓缩，并且通过柱色谱(含0→75％etoac的hex)纯化以提供(8)，为白色晶体固体(111mg,61％产率,0.122mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.34(d,j＝2.5hz,1h),7.32-7.28(m,3h),7.28-7.24(m,2h),7.24-7.22(m,2h),5.59-5.52(m,1h),5.48(dd,j＝10.3,2.9hz,2h),5.15(dd,j＝15.1,2.9hz,1h),4.73-4.67(m,2h),4.41(dd,j＝16.6,1.5hz,1h),4.30-4.18(m,8h),3.89(d,j＝2.4hz,3h),3.86(d,j＝1.0hz,3h),3.76(td,j＝9.8,6.4hz,2h),3.69-3.62(m,2h),3.55(dd,j＝15.6,7.8hz,1h),3.36(dd,j＝15.6,1.5hz,1h),2.99(qd,j＝15.6,2.9hz,1h),2.80-2.71(m,1h),2.41(p,j＝5.9hz,2h),1.65(dd,j＝6.8,1.0hz,3h),0.96(ddd,j＝9.3,5.9,2.9hz,4h),0.01(s,9h),0.00(s,9h)。lc/ms：保留时间4.35min。(es+)针对c48h64n4o10si2的计算值：[m+h]+913；实测值913。clt-d601向具有搅拌子的烘干的4ml小瓶添加二sem-clt-d601(8)(65.0mg,0.711mmol)。将固体置于氩气下，然后溶解于无水thf(1.5ml)，并且将得到的溶液在干冰/丙酮冷浴中冷却至-78℃。经5分钟，向冷却的溶液中逐滴添加超氢化物(146μl,0.146mmol,1.0mthf溶液)。使反应在-78℃下搅拌75分钟，届时通过注射器添加1.0mlh2o，并且将溶液从冷浴移除，并使其达到环境温度。将thf在减压下去除，并且向得到的水性悬浮液中添加1.0mldmso。将该溶液直接装载至预平衡的30grf反相c18柱上。使用含5-95％乙腈的h2o(0.05％acoh)的梯度洗脱产物。将纯的级分合并，并且冻干以得到10.2mg(23％产率)的期望产物(7)，为蓬松白色固体。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.64(dd,j＝12.0,4.5hz,1h),7.52(d,j＝5.0hz,1h),7.49(d,j＝6.0hz,1h),7.47-7.44(m,1h),7.39-7.28(m,4h),6.83(d,j＝11.0hz,2h),5.60-5.54(m,1h),5.00(d,j＝15.5hz,1h),4.55(dd,j＝16.0,6.0hz,1h),4.36-4.14(m,6h),3.94-3.92(m,6h),3.89-3.72(m,2h),3.26(dt,j＝15.5,6.0hz,1h),3.15(dt,j＝15.0,4.0hz,1h),3.10-3.00(m,1h),2.95-2.84(m,1h),2.41(六重峰,j＝6.5hz,2h),1.69(d,j＝7.0hz,3h)。lc/ms：保留时间2.64min。(es+)针对c36h37n4o6的计算值：[m+h]+621；实测值621。三氟甲磺酸8-苄氧基-7-甲氧基-5,11-二氧代-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-5,10,11,11a-四氢-1h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-2-基酯(18)向在干冰/乙腈浴中冷却至-45℃的ar净化的8-苄氧基-7-甲氧基-10-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1,11a-二氢-10h-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮杂环庚三烯-2,5,11-三酮(13)(8.3g,16.7mmol)在dcm(200ml)中的溶液添加2,6-二甲基吡啶(6.0ml,51.8mmol)，然后逐滴添加三氟甲磺酸酐(8.4ml,50.1mmol)，同时保持内部温度<-40℃。将反应在-45℃下搅拌1h，届时通过tlc和lc/ms判断反应完成。将冷的反应混合物用dcm(200ml)稀释，然后用h2o(100ml)、5％柠檬酸(水溶液)(200ml)、饱和nahco3(水溶液)(200ml)和卤水(100ml)洗涤。然后将有机物经mgso4干燥，过滤，浓缩，并且将得到的残余物通过使用含0-30％etoac的己烷的柱色谱纯化以提供(18)，为灰白色泡沫(9.8g，93％产率，15.6mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.45-7.42(m,2h),7.39-7.35(m,2h),7.35-7.30(m,2h),7.27(s,1h),7.13(t,j＝2.0hz,1h),5.46(dj＝9.8hz,1h),5.21(d,j＝2.9hz,2h),4.61(dd,j＝11.0,3.7hz,1h),4.54(d,j＝10.3hz,1h),3.95(s,3h),3.90(dq,j＝16.1,2.0hz,1h),3.71(td,j＝9.8,7.3hz,1h),3.61(td,j＝9.8,7.3hz,1h),3.14(ddd,j＝16.1,10.7,2.4hz,1h),2.57(d,j＝6.4hz,1h),0.97(sep,j＝3.4hz,2h),0.04(s,9h)。lc/ms：保留时间4.20min。(es+)针对c27h31f3n2nao8ssi的计算值：[m+na]+651；实测值651。实施例4-clt-d201、clt-d501和clt-d601的细胞毒性对各种细胞系测试化合物clt-d201、clt-d501、clt-d601的细胞毒活性。这些测试的结果在图10-18中示出。实施例5-clt-d201、clt-d501和clt-d601相比吡咯并苯二氮二聚体(pbd1)的细胞毒性对各种细胞系测试了化合物clt-d201、clt-d501、clt-d601相比吡咯并苯二氮二聚体的细胞毒活性，所述吡咯并苯二氮二聚体标记为pbd1(结构上与sgd-1882,spirogenltd.相同)，具有以下式：图19示出了对hl-60和pci-aml-5细胞系的细胞毒活性的曲线。表1分别示出了对于较大细胞系组的pbd1和clt-d201的ic50值。结果表明clt-d201的有效载荷效力与aml细胞系中的pbd1的有效载荷效力类似。表1：生长抑制的概述ic50pg/mlpbd1d201mdroci-aml52.0848.235nahl-602.82.0-shi5.46821.09-thp-112.6129.08-hnt-341.49414.02+/-hel92.1.73.86640.41+kg16602454+tf-14471286+实施例6-clt-d202的合成clt-d202的合成方案如下进行，并且在图20a-d中描述。编号如图20a-d。一般方法：在varianinova300或500mhznmr仪器上记录1hnmr谱。在使用merckchromolithrp-18e分析hplc柱(单体,50×2mm)和以下分析hplc方法的agilent1200series或1100serieslc/ms系统上确定色谱纯度：注射体积5μl；流速1ml/min；含5→95％乙腈的水，经历5min；agilent二极管阵列检测器，λ＝254nm、220nm或195nm；室温。6.1：(4-{3-[4-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-2-甲氧基-5-硝基-苯氧基]-丙氧基}-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-基)-甲酮(3，图20a)的制备在0℃下，向氩气净化的1’-3’-二(4-羧基-2-甲氧基-5-硝基苯氧基)丙烷(1)(11.63g,24.94mmol)和dmf(1.3ml)在dcm(134ml)中的溶液逐滴添加草酰氯(6.33ml,74.83mmol)。在观察到最初的冒泡后，移除冷浴并且将反应在22℃下搅拌16h。通过用meoh处理小份的反应混合物来证明转化为酰氯，并且通过lc/ms观察得到的二甲酯。将反应浓缩，然后添加少量的干燥dcm(10ml)，并且使用冷的et2o研磨沉淀物。将分离的固体在真空烘箱中于40℃干燥1h。在-40℃(干冰/乙腈)下，经25分钟将固体酰氯分批添加至(±)-(1,2,3,4-四氢-异喹啉-3-基)-甲醇(2，图20a)(9.20g,56.4mmol)和et3n(8.69ml,62.4mmol)在dcm(100ml)中的溶液。立即通过lc/ms判断反应完成。将混合物用dcm(500ml)稀释，并且用1nhcl(300ml)、饱和nahco3(水溶液)(300ml)和卤水(300ml)洗涤。然后将混合物经mgso4干燥，过滤并浓缩以提供(3)，为黄色固体(16.4g,87％产率,22.2mmol)。1hnmr(500mhz,dmso-d6)δ＝7.77(br.s.,2h),7.28-7.25(m,1h),7.24-7.16(m,8h),7.13(br.s.,1h),6.98(d,j＝7.8hz,2h),5.33(d,j＝16.1hz,1h),5.01-4.88(m,2h),4.34-4.25(m,8h),3.91(s,6h),3.43(br.s.,2h),3.27-3.21(m,2h),3.00(d,j＝1.5hz,1h),3.03-2.97(m,1h),2.76(d,j＝2.9hz,1h),2.29(t,j＝6.1hz,2h)。lc/ms：保留时间3.07min。(es+)针对c39h41n4o12的计算值：[m+h]+757；实测值757。6.2：乙酸2-(4-{3-[4-(3-乙酰氧基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-2-甲氧基-5-硝基-苯氧基]-丙氧基}-5-甲氧基-2-硝基-苯甲酰基)-1,2,3,4-四氢-异喹啉-3-基甲酯(4，图20a)的制备向氩气净化的4-{3-[4-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-2-甲氧基-5-硝基-苯氧基]-丙氧基}-5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-基)-甲酮(3，图20a)(8.60g,11.4mmol)在dcm(150ml)中的溶液添加dmap(194mg,1.59mmol)和et3n(31.7ml,227mmol)。然后将混合物冷却至0℃，并且添加ac2o(21.5ml,227mmol)。然后将冷浴移除，并且将反应在22℃下搅拌64h。通过lc/ms和tlc判断反应完成，使用dcm(200ml)稀释，并且使用饱和nh4cl(水溶液)(200ml)淬灭。分层后，将水层用dcm(3×200ml)进一步萃取。将合并的有机物用卤水(300ml)洗涤，经mgso4干燥，过滤，浓缩，并且通过使用含0→100％etoac的己烷的柱色谱纯化以提供(4)，为黄色泡沫(8.12g,86％产率,9.75mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ＝7.87-7.77(m,2h),7.25-7.08(m,7h),6.91-6.80(m,2h),6.73-6.65(m,1h),5.61(d,j＝17.6hz,0.5h),5.46(d,j＝17.6hz,0.5h),5.39-5.30(m,1h),4.46-4.22(m,10h),4.06-3.85(m,8h),3.79(d,j＝9.3hz,0.5h),3.35-3.19(m,1h),3.16-2.98(m,0.5h),2.92(dd,j＝2.7,16.4hz,1h),2.71(t,j＝14.2hz,1h),2.49(t,j＝5.9hz,2h),2.04-1.94(m,6h)。lc/ms：保留时间3.54min。(es+)针对c43h45n4o14的计算值：[m+h]+841；实测值841。6.3：(2-氨基-4-{3-[5-氨基-4-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-2-甲氧基-苯氧基]-丙氧基}-5-甲氧基-苯基)-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-基)-甲酮(5，图20a)的制备向乙酸2-(4-{3-[4-(3-乙酰氧基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-2-甲氧基-5-硝基-苯氧基]-丙氧基}-5-甲氧基-2-硝基-苯甲酰基)-1,2,3,4-四氢-异喹啉-3-基甲酯(4，图20a)(500mg,0.595mmol)在meoh(20ml)中的溶液添加小勺的ni。然后将混合物加热至回流，并逐滴添加含水合肼(370μl,11.9mmol)的meoh(3.5ml)。添加肼时观察到快速冒泡。一旦肼的添加完成，再添加ni时未观察到进一步的冒泡。然后将反应再回流9h，并且通过lc/ms判断反应完成。(注意：二硝基还原容易发生；有必要有另外的反应时间来完全将产物脱酰基)。将反应从加热移除，通过硅藻土过滤，并且用meoh洗涤。将滤液在真空下浓缩，并且与dcm共沸。通过柱色谱(含0→10％meoh的dcm)纯化粗残余物以提供(5)，为白色晶体固体(368mg,89％产率,0.528mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ＝7.23-7.18(m,4h),7.17-7.08(m,4h),6.71(s,2h),6.36(d,j＝4.9hz,2h),5.02(br.s.,2h),4.58(br.s.,2h),4.02(br.s.,2h),4.44(d,j＝16.6hz,2h),4.25(t,j＝5.9hz,4h),3.78(s,6h),3.68-3.57(m,4h),3.17(dd,j＝6.3,16.6hz,2h),2.71(d,j＝17.1hz,2h),2.39-2.32(m,2h)。lc/ms：保留时间2.75min。(es+)针对c39h45n4o8的计算值：[m+h]+697；实测值697。6.4：[5-{3-[5-氨基-4-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-2-甲氧基-苯氧基]-丙氧基}-2-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-4-甲氧基-苯基]-氨基甲酸烯丙基酯(6，图20a)的制备向ar净化的(2-氨基-4-{3-[5-氨基-4-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-2-甲氧基-苯氧基]-丙氧基}-5-甲氧基-苯基)-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-基)-甲酮(5)(1.92g,2.75mmol)在dcm(33ml)中的溶液添加吡啶(245μl,3.03mmol)，并且将得到的溶液在冰/卤水浴中冷却至0℃，然后添加alloccl(292μl,2.75mmol)。然后将混合物在0℃下搅拌30min。然后将dcm在真空下去除，将残余物用dmso稀释，并且通过反相柱色谱(含5→95％acn的h2o，各含有0.05％acoh)纯化，并且将期望的级分冻干以提供(6)，为白色晶体固体(417mg,19％产率,0.534mmol)。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ＝8.10(s,1h),7.66(d,j＝10.5hz,1h),7.24-7.09(m,9h),6.80(br.s.,1h),6.68(s,1h),6.38(s,1h),5.99-5.85(m,1h),5.33(dd,j＝2.3,17.0hz,1h),5.22(dd,j＝2.3,8.8hz,1h),5.04(br.s,2h),4.61(d,j＝5.9hz,2h),4.48-4.36(m,2h),4.34-4.22(m,4h),3.82(s,3h),3.79(br.s.,1h),3.77(s,3h),3.74-3.59(m,4h),3.18(dd,j＝6.1,16.1hz,2h),2.82-2.65(m,2h),2.41-2.35(m,2h)。lc/ms：保留时间3.01min。(es+)针对c43h49n4o10的计算值：[m+h]+781；实测值781。6.5：[5-{3-[5-氨基-4-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-2-甲氧基-苯氧基]-丙氧基}-2-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-4-甲氧基-苯基]-氨基甲酸烯丙基酯的二-(叔丁基-甲氧基-二甲基-硅烷基氧基)-醚(7，图20a)的制备向ar净化的([5-{3-[5-氨基-4-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-2-甲氧基-苯氧基]-丙氧基}-2-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-4-甲氧基-苯基]-氨基甲酸烯丙基酯(6，图20a)(417mg,0.534mmol)在dmf(5.3ml)中的溶液添加咪唑(182mg,2.67mmol)。将反应混合物搅拌5min，然后添加叔丁基二甲基氯硅烷(tbscl)(292μl,2.75mmol)。然后将得到的混合物在22℃下搅拌70min。然后将反应混合物倒入冰/h2o，并且用etoac(3×20ml)萃取。将合并的有机物用h2o(2×20ml)洗涤，经mgso4干燥，过滤并浓缩。将得到的残余物通过使用含0→100％etoac的己烷的柱色谱纯化以提供(7)，为白色固体(425mg,79％,0.421mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ＝8.36(br.s.,1h),7.90(br.s.,1h),7.22-7.12(m,8h),7.08(br.s.,1h),6.84(br.s.,1h),6.76(s,1h),6.37(s,1h),5.97-5.88(oct,j＝5.4hz,1h),5.35(d,j＝3.4hz,1h),5.22(dd,j＝1.5,10.3hz,1h),4.66-4.55(m,4h),4.42(br.s.,2h),4.31(t,j＝6.1hz,2h),4.24(t,j＝6.6hz,2h),4.18(br.s.,2h),3.82(s,3h),3.77(s,3h),3.68(br.s.,4h),3.20-3.12(m,2h),2.83(d,j＝16.1hz,2h),2.40(五重峰,j＝6.2hz,2h),0.85(s,18h),0.00(br.s.,12h)lc/ms：保留时间5.07min，(es+)针对c55h77n4o10si2的计算值：[m+h]+1009；实测值1009。6.6：t-boc-n-酰氨基--nhs酯(9，图20b)的制备向ar净化的t-boc-n-酰氨基--酸(8，图20b)(1.00g,1.85mmol)在dcm(20ml)中的溶液添加n-羟基琥珀酰亚胺(255mg,2.22mmol)、n-(3-二甲基氨基丙基)-n′-乙基碳二亚胺盐酸盐(edc·hcl)(531mg,2.77mmol)和二甲基氨基吡啶(dmap)(10mg,0.0819mmol)。将合并的混合物在22℃下搅拌16h。然后将反应用h2o(20ml)淬灭，并且用dcm(3×30ml)萃取。将合并的有机物经mgso4干燥，过滤并浓缩。将得到的残余物通过使用含0→15％meoh的dcm的柱色谱纯化以提供(9)，为澄清油状物(856mg,73％,1.34mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ＝5.03(br.s,1h),3.86(t,j＝6.6hz,2h),3.72-3.59(m,28h),3.55(t,j＝5.1hz,2h),3.32(q,j＝5.4hz,2h),2.91(t,j＝6.6hz,2h),2.85(br.s.,4h),1.45(s,9h)。lc/ms：保留时间2.56min。(es+)针对c28h50n2o14na的计算值：[m+na]+661；实测值661。6.7：t-boc-n-酰氨基--val-ala-酸(10，图20b)的制备向ar净化的t-boc-n-酰氨基--nhs酯(9，图20b)(856mg,1.34mmol)在dmf(6.7ml)中的溶液添加diea(584μl,3.35mmol)，然后添加h2n-val-ala-oh(278mg,1.48mmol)。然后将反应在密封瓶中于40℃下搅拌16h。然后将得到的反应混合物直接装载并且通过反相柱色谱(含5→95％acn的h2o，各含有0.05％acoh)纯化，并且将期望的级分冻干以提供(10)，为澄清油状物(717mg,75％产率,1.01mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ＝7.13(br.s,1h),5.16(br.s,1h),4.48(br.s,1h),4.32(dd,j＝5.9,8.8hz,1h),3.84-3.77(m,1h),3.77-3.71(m,1h),3.69-3.60(m,30h),3.55(t,j＝4.9hz,2h),3.32(br.d,j＝4.9hz,2h),2.55(t,j＝5.6hz,2h),2.22(qd,j＝6.7,13.2hz,1h),1.55-1.38(m,12h),0.96(dd,j＝6.6,17.3hz,6h)。lc/ms：保留时间2.41min。(es+)针对c32h62n3o14的计算值：[m+h]+712；实测值712。6.7：t-boc-n-酰氨基--val-ala-4-氨基苄基-醇(11，图20b)的制备向ar净化的t-boc-n-酰氨基--val-ala-酸(10，图20b)(349mg,0.490mmol)在2:1dcm/meoh(7.45ml)中的溶液添加4-氨基苄醇(69.4mg,0.564mmol)，然后添加2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉(eedq)(228mg,0.920mmol)。将反应在22℃下搅拌20h。然后将反应混合物在真空中浓缩，并且通过柱色谱(含0→15％meoh的dcm)纯化以提供(11)，为白色固体(325mg,81％产率,0.397mmol)。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ＝8.58(br.s.,1h),7.71(d,j＝8.8hz,2h),7.31(d,j＝8.8hz,2h),6.99(br.s.,1h),6.87(br.s.,1h),5.11-5.06(m,1h),4.68(t,j＝7.8hz,1h),4.64(d,j＝6.3hz,2h),4.22(dd,j＝5.6,6.6hz,1h),3.86(dt,j＝3.4,9.8hz,1h),3.71-3.58(m,29h),3.53(t,j＝5.1hz,2h),3.33-3.29(m,j＝5.4hz,2h),2.71-2.63(m,1h),2.49(ddd,j＝3.2,5.6,14.7hz,1h),2.34-2.26(m,1h),1.81(t,j＝5.9hz,1h),1.48-1.44(m,12h),1.01(dd,j＝6.8,15.6hz,6h)。lc/ms：保留时间2.52min。(es+)针对c39h68n4o14na的计算值：[m+na]+839；实测值839。6.7：连接子结合的完全保护的细胞毒性二聚体药物(13，图20c)的制备向ar净化的t-boc-n-酰氨基--val-ala-4-氨基苄基-醇(11，图20b)(285mg,0.348mmol)在dmf(1.7ml)中的溶液添加在dmf中的二异丙基二乙胺(diea)(91μl(285mg,0.348mmol)(1-(五氟苯基)-碳酸酯(204mg,0.523mmol))。然后将反应在22℃下搅拌2h，届时，得到的反应通过lc/ms判断完成，得到活化的中间体化合物12(图20b)lc/ms：保留时间3.41min，(es+)针对c46h67f5n4o16na的计算值：[m+na]+1049；实测值1049。如图20c所示，将12(来自图20b的产物)的粗溶液添加至固体[5-{3-[5-氨基-4-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-2-甲氧基-苯氧基]-丙氧基}-2-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-4-甲氧基-苯基]-氨基甲酸烯丙基酯的二-(叔丁基-甲氧基-二甲基-硅烷基氧基)-醚(7，来自图20a的产物)(176mg,0.174mmol)。然后将烧瓶用另外的300mldmf冲洗以确保(12)完全转移至反应混合物。diea(91μl至反应混合物。diea(91另外300ml的dmf以确保完全转移(羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-2-甲氧基-苯氧基]-丙氧基}-2-(3-羟基甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-羰基)-4-甲氧基-苯基]-caacn的h2o，各含有0.05％acoh)，并且将期望的级分冻干以提供(13)，为白色固体(153mg,47％产率,0.0825mmol)。lc/ms：保留时间4.99min。(es+)针对c95h142n8o25si2的计算值：1851；实测值[{(m+h)/2}+na]+949。6.9：连接子结合的二醇化合物14的制备(图20c)向在冰/卤水浴中冷却至0℃的ar净化的(13)(153mg,0.0825mmol)在thf(8.3ml)中的溶液添加tbaf(173μl的1.0mthf溶液，0.173mmol)。然后将反应在0℃下搅拌16h。然后将thf在真空下去除，将残余物用二甲基亚砜(dmso)稀释，并且通过反相柱色谱(含5→95％acn的h2o，各含有0.05％acoh)纯化，并且将期望的级分冻干以提供(14)，为白色晶体固体(116mg,87％产率,0.0717mmol)。lc/ms：保留时间3.38min。(es+)针对c83h114n8o25na的计算值：[m+na]+1645；实测值1645。6.10：连接子结合的半缩醛胺化合物15的制备(图20c)向ar净化的(14，图20c)(108mg,0.0665mmol)在3:1dcm/acn(1.2ml)中的溶液添加分子筛(5.0mg)，然后添加在100μldcm中的n-甲基吗啉-n-氧化物(nmo)(31.2mg,0.266mmol)。将反应混合物搅拌15min，然后添加在100μldcm中的tpap(5.8mg,0.0166mmol)。将得到的混合物在22℃下搅拌1h，并且通过lc/ms判断反应未完成。将分别在100μldcm中的nmo(10.4mg,0.0888mmol)和tpap(1.90mg,0.00541mmol)继续添加至反应，并且在添加1h后通过lc/ms监控反应，直至经过判断反应完成的时间，监控起始材料的量、期望产物、单氧化和酰胺形成；总共进行了5次后续的添加。将溶剂在真空下去除，将残余物用dmso稀释，并且通过反相柱色谱(含5→95％acn的h2o，各含有0.05％acoh)纯化，并且将期望的级分冻干以提供(15)，为白色晶体固体(50.7mg,47％产率,0.0313mmol)。lc/ms：保留时间3.33min。(es+)针对c83h110n8o25na的计算值：[m+na]+1641；实测值1641。6.11：连接子结合的单亚胺化合物16的制备(图20d)向ar净化的(15)(15.7mg,0.00969mmol)在dcm(1.0ml)中的溶液添加在50μldcm中的吡咯烷(1.2μl,0.0145mmol)，然后添加在50μldcm中的pd(pph3)4(0.56mg,0.485μmol)。然后将反应在22℃下搅拌1h。然后将dcm在真空下去除，将残余物用dmso稀释，并且通过反相柱色谱(含5→95％acn的h2o，各含有0.05％acoh)纯化，并且将期望的级分冻干以提供(16)，为白色晶体固体(8.2mg,56％产率,0.00540mmol。lc/ms：保留时间3.23min。(es+)针对c79h104n8o22na的计算值：[m+na]+1539；实测值1539。6.12：clt-d202的制备(18，图20d)在冰箱中放置30min冷却至0℃的ar净化的(16，图20c)(3.5mg,0.00231mmol)在dcm(0.50ml)中的溶液添加预冷却的47:47:6的tfa/dcm/h2o溶液(200μl)。将反应在0℃下静置2h。然后将dcm在真空下去除，将残余物用1:1acn/h2o稀释并且冻干以提供(17图20d)，为白色晶体固体，其不经过进一步纯化来使用。lc/ms：保留时间2.56min。(es+)针对c74h97n8o20的计算值：[m+h]+1417；实测值1417。向ar净化的粗制(17)在dcm(0.5ml)中的溶液添加在200μldcm中的diea(2.4μl,0.0143mmol)，检测反应混合物的ph值；ph>8。然后将3-马来酰亚胺基丙酸nhs酯(1.0mg,3.57μmol)在100μldcm中的溶液添加至反应。将反应在22℃下搅拌75min。然后将dcm在真空中去除，将残余物用dmso稀释，并且通过反相柱色谱(含5→95％acn的h2o，各含有0.05％acoh)纯化，并且将期望的级分冻干以提供(18)，为白色晶体固体(1.3mg,经2步36％产率,0.829μmol)。lc/ms：保留时间2.94min。(es+)针对c81h102n9o23的计算值：[m+h]+1568；实测值1568。实施例7-c6-clt-d202(抗体-药物缀合物)的制备通过2个循环的使用millipore,15ml,30kda装置的分子量截留过滤(mwco)，将人源化的在239cys位取代的抗cll1抗体(“c6-s239c-cysm26”)(5.0mg,1.68mg/ml,pbs)交换至硼酸盐缓冲液(50mm，ph8.5，1mm二亚乙基三胺五乙酸(dtpa))。向新的c6-s239c-cysmab抗体的溶液(5.0mg/ml，硼酸盐缓冲液(50mm，ph8.5，1mmdtpa))添加二硫苏糖醇(dtt)的溶液(33μl，50.0当量，50mm)，并且将得到的溶液缓慢震摇过夜。抗体c6具有轻链可变区序列：lqqkpgkaikrliyaastldsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqpedfatyyclqyaiypytfgqgtkleik(seqisno:1)。抗体c6具有重链可变区序列：evqlvqsgaevkkpgasvkmsckasgytftsyfihwvrqapgqglewigfinpyndgskyaqkfqgratltsdkststvymelsslrsedtavyyc(seqidno:2)。链间二流化物桥的完全还原和s239c半胱氨酸/谷胱甘肽加合物的去除通过先前描述的rp-lcms来证实(junutula等人,2008,naturebiotech,26,925-932)。然后通过3个循环的使用millipore,15ml,30kda装置使用pbs作为交换缓冲液的分子量截留过滤(mwco)从溶液中去除dtt。向5mg/ml的完全还原的c6-s239c-cysmab抗体的溶液添加脱氢抗坏血酸(dhaa)的溶液(33μl,50.0当量,50mm)。将得到的溶液缓慢震摇3hr。通过rp-lcms来监控再氧化。一旦再氧化被视为完成，将反应混合物用丙二醇稀释至50％v/v，并且添加clt-d202(18，图20d)的dmso溶液(10.0当量，10mm于dmso中)。将反应在环境温度下搅拌1hr。然后在环境温度下将混合物用活性炭处理1hr。然后通过过滤去除活性炭。然后通过多个循环的使用millipore,15ml,30kda装置的分子量截留过滤(mwco)将缀合物交换至pbs。然后使溶液经受无菌过滤以得到期望的缀合物(0.974ml,2.16mg/ml)。体积：0.974ml。浓度：2.16mg/ml(a280＝0.145，20倍稀释)。药物与抗体的比例(dar)：1.7(通过rp-lcms确定)。通过尺寸排阻色谱(sec)来证实adc的单体形式：96％。实施例8-c0-clt-d202抗体-药物缀合物(adc)的制备帕里珠单抗(palivizumab)用作对照抗体，c0。c0抗体是未结合的对照igg1。具有c0和clt-d202的adc为。使用硼酸盐缓冲液(50mm,ph8.5,1mmdtpa)将c0抗体(12.0mg,100mg/ml,pbs)稀释至5mg/ml。为了缀合clt-d202，将铰链二硫化物还原，如下所述。向新的c0抗体的溶液(@5.0mg/ml，硼酸盐缓冲液(50mm,ph8.5,1mmdtpa))添加三(2-羧乙基)膦(tcep)(136μl，1.7当量，1mm)的溶液，并且将得到的溶液在37℃下缓慢震摇1hr。然后将反应冷却至环境温度，并且用丙二醇稀释至50％v/v，届时添加clt-d202(18，图20d)的dmso溶液(12.0当量，10mm于dmso中)。使反应在环境温度下搅拌1hr。然后在环境温度下将混合物用活性炭处理1hr。然后通过过滤去除活性炭。然后通过pd-10胶过滤(gehealthcare)将缀合物交换至pbs。通过使用millipore,15ml,30kda装置的分子量截留过滤(mwco)来浓缩合并的级分。然后使溶液经受无菌过滤以得到期望的缀合物(3.144ml,3.2mg/ml)。体积：3.144ml。浓度：3.2mg/ml(a280＝0.237,20倍稀释)。药物与抗体的比例(dar)：2.6(通过rp-lcms确定)。通过sec来证实adc的单体形式：87％。实施例9-c6-clt-d202adc选择性细胞毒性图21a-21b示出了c6-clt-d202adc的选择性。在37℃下，使用不同浓度的cll-1选择性细胞毒性抗体-药物缀合物c6-clt-d202adc和对照抗体-药物缀合物c0-d202adc，将在每个细胞约30,000-50,000拷贝数的范围内表达cll-1的hl-60细胞(人早幼粒细胞性白血病细胞)处理5天。图21a示出了c6-clt-d202adc的靶标依赖性细胞杀伤是对照c0-clt-d202adc的超过500倍。图21b示出，对于非cll-1表达的细胞系，例如tf1(人红白血病细胞系)，c6-clt-d202adc和c-clt-d202adc具有类似的非细胞毒作用，因此证明了cll-1靶向的c6-clt-d202adc的体外选择性。实施例10-c6-clt-d202adc靶标依赖性细胞毒性tf1是多重抗药(mdr)阳性的急性骨髓性白血病(aml)细胞系。cll-1在tf1中过表达以证明包含抗cll1抗体的抗体-药物缀合物(“cll1-adc”或者更具体地为“c6-clt-d202adc”)的效力。如图22a和22b所示，在37℃下，过表达tfi细胞系(tf1-cll1)和标准tf1细胞系分别以不同浓度的c6-clt-d202adc和c0-clt-d202adc处理。在图22a中，cll-1靶向的c6-clt-d202adc显示出对tf1cll-1mdr(+)系强力的细胞毒性，而对照c0-clt-d202adc具有弱得多的效果。图22b示出了各adc对于标准tf1细胞系的活性，其中可见c6-clt-d202adc和c0-clt-d202adc具有更加类似的效果。表3所示的ic50结果证明了cll-1在肿瘤细胞靶标中表达时细胞杀伤效果的显著差异，使ic50降低约103的数量级。表2.所选adc对tf1cll-1和tf1细胞系的ic50ic50ug/mlc0-d202c6-d202tf1-cll123.270.008tf112.939.47实施例11-c6-clt-d202adc的结合与细胞毒性之间的相关性检测了细胞结合与杀伤靶向细胞的能力之间的相关性。在表4中，第一列数字是c6-clt-d202adc结合各具体细胞系的平均荧光强度相对于c0-clt-d202adc(其为对照adc)的结合的平均荧光强度的比。较大的mfi比反映了相比对照adc的结合，靶向的adc的结合增加。第二列示出了c6-clt-d202adc对于指定的细胞系的ic50(ng/ml)。在图23中，针对各细胞系，将两组数字作图，相对平均荧光指数(mfi)的对数沿x轴，并且ic50值的对数沿y轴。图23示出了相对结合与细胞杀伤的良好的相关性，其中示出线性拟合的r2为0.701。这说明在多种与aml疾病相关的细胞系中，c6-clt-d202具有良好的靶标依赖性细胞毒活性。表3.细胞系，相对结合强度，以及ic50实施例12-c6-clt-d202adc靶向增殖和静止的细胞将表达cll-1的aml-5细胞在增殖条件或静止条件下培养五(5)天的时间。在这段时间内，将一组增殖的cll-1表达的细胞用不同浓度的c6-clt-202adc处理。第二组增殖的cll-1表达的细胞用同种型对照来处理。单独组的静止的cll-1表达的细胞相应地用c6-clt-d202或同种型对照来处理。图24a示出，c6-clt-d202对于杀伤cll-1表达的细胞是有效的，ic50为0.03ug/ml(增殖的细胞)和0.02ug/ml(静止的细胞)，而同种型对照具有浓度至少高100倍的ic50。随着孵育时间增加，静止细胞杀伤增大。相比之下，如图24b所示，当cll-1敲除的细胞经受相同的条件时，c6-clt-d202adc的靶标依赖性细胞毒作用消失。增殖的和静止的aml-5细胞的ic50近似于同种型对照的ic50，在2.34ug/ml(静止)至5.54ug/ml(增殖)的范围内。实施例13-c6-clt-d202adc的体内功效c6-clt-d202-adc在aml异种移植模型中表现出强力的功效。将具有原位移植的hl60肿瘤的小鼠用未缀合的c0(1mg/kg)抗体和对照adc(3mg/kg)处理，与用c6-clt-d202-adc(3mg/kg)处理的小鼠进行比较。示出了骨髓中人hl60肿瘤细胞的百分比(左图)，以及外周血中人hl60肿瘤细胞的百分比(右图)，中值条和四分位误差条针对n＝4-6只小鼠来表示。表格(底部)表明了所处理的小鼠的骨髓和外周血中的人hl60细胞的中值、最小、最大和四分位百分比。使用2.5gy对雌性6-8周龄的nod/scid小鼠进行非致死的辐射，并且在辐射后1天将500万个hl60肿瘤静脉注射至小鼠体内。肿瘤细胞接种6天后(骨髓中约0.1-1％的移植)，使用3mg/kg的c6-clt-d202adc或者使用相同量的对照c0-adc，每周1次地向小鼠给药3次(q7dx3)。肿瘤细胞接种23天后，从处理的小鼠收集骨、脾脏和外周血，并且分离总的造血细胞。这些组织中人细胞的百分比通过使用抗人cd33和cd45抗体的流式细胞术来确定。数据通过flowjo软件来分析，并且使用prism软件来绘图。如图25a-25b和表5中所示，使用c6-clt-d202adc的处理显示出了强力的功效。相比单独的对照抗体(c0ab，1mg/kg)或c0-clt-d202adc(相同的3mg/kg剂量)处理，用3mg/kg水平的adc处理的c6-clt-d202adc动物表现出在骨髓(图25a)和血液(图25b)中分别存在的人细胞百分比的显著减小。相对于使用c0-clt-d202adc进行施用后的观察，在骨髓中，在c6-clt-d202adc处理的动物中存在的人异种移植细胞数减少了9.4倍，并且在血液中，可观察到人异种移植细胞数减少了18.3倍。使用c6-clt-d202adc进行施用后观察到了大于90％肿瘤生长抑制(tgi)。表5.处理后存在的hu细胞浓度实施例14-c6-clt-d202adc对原代aml患者细胞培养物的作用如图26所示，浓度从0.8ug/ml至2ug/ml增大的c6-clt-d202adc在抑制原代aml患者细胞培养物14-aml-17的集落形成中具有提高的效果。对照c0-clt-d202adc在抑制相同的原代细胞培养物的集落形成中具有小得多的能力。集落数由y轴表示。本说明书提及的所有出版物和专利申请通过引用并入本文，其程度如同具体且单独地表明各个单独的出版物或专利申请通过引用并入。如前所述，应认识到，虽然为了说明的目的，本文描述了本发明的具体实施方案，但在不偏离本发明主旨和范围的情况下可以进行各种修改。因此，除了由附随权利要求限制外，本发明不被限制。序列表seqidno:1:lqqkpgkaikrliyaastldsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqpedfatyyclqyaiypytfgqgtkleikseqidno:2:evqlvqsgaevkkpgasvkmsckasgytftsyfihwvrqapgqglewigfinpyndgskyaqkfqgratltsdkststvymelsslrsedtavyyc序列表<110>塞勒兰特治疗公司(celleranttherapeutics,inc.)杰格塔·r·祖奴图拉(junutula,jagathr.)瓦苏·r·伽马拉马达卡(jammalamadaka,vasur.)<120>四氢异喹啉并苯二氮卓类<130>092950-0971543<150>us62/135,380<151>2015-03-19<160>2<170>siposequencelisting1.0<210>1<211>72<212>prt<213>智人(homosapiens)<400>1leuglnglnlysproglylysalailelysargleuiletyralaala151015serthrleuaspserglyvalproserargpheserglyserglyser202530glythrasptyrthrleuthrileserserleuglnprogluaspphe354045alathrtyrtyrcysleuglntyralailetyrprotyrthrphegly505560glnglythrlysleugluilelys6570<210>2<211>96<212>prt<213>智人(homosapiens)<400>2gluvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyala151015servallysmetsercyslysalaserglytyrthrphethrsertyr202530pheilehistrpvalargglnalaproglyglnglyleuglutrpile354045glypheileasnprotyrasnaspglyserlystyralaglnlysphe505560glnglyargalathrleuthrserasplysserthrserthrvaltyr65707580metgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyrtyrcys859095当前第1页12