本发明涉及中医药及生物科技领域。尤其是一种利用九香虫制备九香虫活性肽的制备方法。
背景技术：
九香虫是药用历史悠久的中药材，属半翅目蝽科昆虫，其性咸、温，气香走窜，理气止痛，温中壮阳。本草纲目记载主治：膈脘滞气，脾肾亏损。我国分布广泛也是比较古老的有翅药食两用昆虫。现代药理研究及临床使用证明，九香虫具有良好的抗肿瘤活性，常用于治疗肝癌、胃癌、食道癌以及妇科肿瘤等。并具有增强免疫、组织修复、抗菌、改善微循环等药理活性，特别是抗消化系统肿瘤方面作用比较突出。由此可见九香虫具有许多独特的药用价值，值得进行深入研究和开发利用。
活性肽是一千多种肽的总称。它在人体的生长发育，新陈代谢，疾病以及衰老、死亡的过程中起着关键的作用。活性肽是人体中最重要的活性物质，正是因为它在体内分泌量的增多或减少，才使人类有了幼年、童年、成年、老年直到死亡的周期。而服用活性肽便打破了生命的这一周期，从而达到延长生命、有效缓解衰老、恢复身体机能的神奇效果。肽在生物体内作为载体和运输工具，将人们平常所食的营养输送到人体各部位，充分发挥其功能；肽在生物体内作为神经递质传递信息；肽具有极强的活性和多样性，可全面调节人体生理功能，增强机体生理活性；肽不仅能提供人体生长发育所需的营养物质，而且具有特殊的生物学功能，可防治血栓、高血脂、高血压，延缓衰老，抗疲劳，提高机体免疫力，促进人体对蛋白质、维生素、氨基酸、钙、铁、锌、硒、镁、铜等多种对人体有益微量元素的吸收；有些小肽具有原食品蛋白质或其他组成氨基酸所没有的重要生理功能。生物活性肽中有些分子量较小的小肽，与氨基酸运输功能相比具有吸收迅速、低耗和不饱和的特点。因此如何将具有理气止痛，温中壮阳功效和具有抗肿瘤、增强免疫、组织修复、抗菌、改善微循环等药理活性作用的九香虫做成功能和吸收更好的活性肽，更好地达到中医药治未病的目的，真正实现中药现代化，已成为中医药及生物科技领域亟待解决的课题。
技术实现要素：
为了克服现有技术中九香虫活性物质提取过程中的原料浪费和人体吸收利用率低的不足，本发明提供了一种九香虫活性肽的制备方法，该九香虫活性肽中富含生物活性肽，具有理气止痛，温中壮阳功效并具有抗肿瘤、增强免疫、组织修复、抗菌、改善微循环等药理活性，并且易于消化吸收，营养丰富机体利用率高。该九香虫活性肽的制备方法工艺严谨合理、可操作性强，易于实现工业化生产。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：一种九香虫活性肽的制备方法，其特殊之处在于：
1、选取九香虫干品粉碎，放入蒸煮锅内加入其重量5-15倍的水煮20-60分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，然后将煮好的九香虫浆用组织破碎机破碎制得九香虫匀浆；如用九香虫鲜品作活性肽，可将九香虫鲜品置沸水中烫一下，加入其重量3-10倍的水直接过组织破碎机破碎制得九香虫匀浆，再放入蒸煮锅内烧开煮10-40分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，即得九香虫鲜品匀浆；
2、将上述制备的九香虫匀浆加入九香虫重量的1-5%的蛋白水解酶，在温度45-60摄氏度之间温度条件下酶解4-8小时后，加入九香虫重量0.5%-1%的酵母粉搅拌均匀，温度控制在摄氏30-50之间进行脱腥处理，1-2小时后将温度调至摄氏85度以上水浴5-15分钟进行灭酶，制得九香虫酶解液；
3、将上述制备的九香虫酶解液用高速离心机进行液渣分离，离心速度调至9500-14000转之间，制得九香虫离心酶解液；
4、将上述制备的九香虫离心酶解液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜在摄氏100-120度之间蒸汽高压灭菌15-40分钟；
5、将上述制备的九香虫酶解液经过超滤膜过滤器滤得分子量5000道尔顿以下的九香虫活性肽液；
6、将上述制备的九香虫活性肽液按冻干工艺规范灌装至西林瓶上冻干机真空冷冻干燥，即得本发明九香虫活性肽瓶装冻干粉成品；将上述制备的九香虫活性肽液加纯净水按口服液生产工艺规范灌装至口服液瓶，即得本发明九香虫活性肽口服液成品；将上述制备的九香虫活性肽液经冷冻干燥或喷雾干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范罐装成胶囊，即得本发明九香虫活性肽胶囊成品。
本发明所述的蛋白水解酶为角蛋白酶、胰蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一种或两种以上的组合。
本发明选用九香虫干、鲜成虫为原料，通过控制酶解生成活性肽溶液，经灭酶、脱腥、离心、灭菌、超滤后灌装成口服液剂型、喷雾干燥或冷冻干燥罐装成胶囊剂型和瓶装冻干粉剂型，其营养价值和吸收利用率以及食用安全性大大提高，并具有抗肿瘤、增强免疫、组织修复、抗菌、改善微循环等药理活性，该九香虫活性肽的制备方法工艺严谨合理、可操作性强，易于实现工业化生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明
实施例一、1、九香虫活性肽液的制备：选取当年干燥净九香虫15kg进行粉碎处理，放入蒸煮锅内加入其重量10倍的水煮40分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，然后将煮好的九香虫浆过组织破碎机破碎制得九香虫干品匀浆；选取干净鲜九香虫成虫30kg用沸水烫死，加入其重量5倍的水过组织破碎机破碎匀浆，然后放入蒸煮锅内煮30分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，制得九香虫鲜品匀浆；
2、将步骤1处理好的九香虫匀浆调PH7，加入胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶进行多酶酶解，酶组成比为1：1：1，酶用量为每克九香虫添加6000个酶活单位(u)，温度控制在摄氏55度酶解6小时后加入九香虫重量0.8%的酵母粉搅拌均匀，温度控制在摄氏35度进行脱腥处理，1.5小时后沸水热浴灭酶15分钟，即得九香虫酶解活性肽液；
3、将步骤2处理好的九香虫酶解活性肽液用高速离心机进行液渣分离，离心速度调至12000rpm左右，制得九香虫活性肽液；
4、将步骤3制备的九香虫活性肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜在摄氏105度蒸汽高压灭菌35分钟；
5、将步骤4制备的九香虫活性肽液经过超滤膜过滤器滤得分子量5000道尔顿以下的九香虫活性肽液；
6、将步骤5制备的九香虫活性肽液按冻干工艺规范灌装至西林瓶上冻干机真空冷冻干燥，即得本发明九香虫活性肽瓶装冻干粉成品；将步骤5制备的九香虫活性肽液加纯净水按口服液生产工艺规范灌装至口服液瓶，即得本发明九香虫活性肽口服液成品；将步骤5制备的九香虫活性肽液经冷冻干燥或喷雾干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范罐装成胶囊，即得本发明九香虫活性肽胶囊成品。
实施例二 、1、九香虫活性肽液的制备：选取当年干燥净九香虫20kg进行粉碎处理，放入蒸煮锅内加入其重量12倍的水煮50分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，然后将煮好的九香虫浆过组织破碎机破碎制得美洲大蠊干品匀浆；选取干净鲜九香虫成虫25kg用沸水烫死，加入其重量6倍的水过组织破碎机破碎匀浆，然后放入蒸煮锅内煮40分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，制得九香虫鲜品匀浆；
2、将步骤1处理好的九香虫匀浆调PH6.5，加入胰蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶进行多酶酶解，酶组成比为1：1：1，酶用量为每克九香虫添加10000个酶活单位(u)，温度控制在摄氏50度酶解5.5小时后加入九香虫重量1%的酵母粉搅拌均匀，温度控制在摄氏36度进行脱腥处理，2小时后沸水热浴灭酶13分钟，即得九香虫酶解活性肽液；
3、将步骤2处理好的九香虫酶解活性肽液用高速离心机进行液渣分离，离心速度调至11500rpm左右，制得九香虫活性肽液；
4、将步骤3制备的九香虫活性肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜在摄氏115度蒸汽高压灭菌30分钟；
5、将步骤4制备的九香虫活性肽液经过超滤膜过滤器滤得分子量5000道尔顿以下的九香虫活性肽液；
6、将步骤5制备的九香虫活性肽液按冻干工艺规范灌装至西林瓶上冻干机真空冷冻干燥，即得本发明九香虫活性肽瓶装冻干粉成品；将步骤5制备的九香虫活性肽液加纯净水按口服液生产工艺规范灌装至口服液瓶，即得本发明九香虫活性肽口服液成品；将步骤5制备的九香虫活性肽液经冷冻干燥或喷雾干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范罐装成胶囊，即得本发明九香虫活性肽胶囊成品。
实施例三、1、九香虫活性肽液的制备：选取当年干燥净九香虫25kg进行粉碎处理，放入蒸煮锅内加入其重量8倍的水煮55分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，然后将煮好的九香虫浆过组织破碎机破碎制得九香虫干品匀浆；选取干净鲜九香虫成虫30kg用沸水烫死，加入其重量5倍的水过组织破碎机破碎匀浆，然后放入蒸煮锅内煮45分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，制得九香虫鲜品匀浆；
2、将步骤1处理好的九香虫匀浆调PH6.5，加入角蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶进行多酶酶解，酶组成比为1：1：1，酶用量为每克九香虫添加8000个酶活单位(u)，温度控制在摄氏52度酶解5小时后加入九香虫重量0.6%的酵母粉搅拌均匀，温度控制在摄氏38度进行脱腥处理，2小时后沸水热浴灭酶10分钟，即得九香虫酶解活性肽液；
3、将步骤2处理好的九香虫酶解活性肽液用高速离心机进行液渣分离，离心速度调至13000rpm左右，制得九香虫活性肽液；
4、将步骤3制备的美洲大蠊九香虫活性肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜在摄氏110度蒸汽高压灭菌30分钟；
5、将步骤4制备的九香虫活性肽液经过超滤膜过滤器滤得分子量5000道尔顿以下的九香虫活性肽液；
6、将步骤5制备的九香虫活性肽液按冻干工艺规范灌装至西林瓶上冻干机真空冷冻干燥，即得本发明九香虫活性肽瓶装冻干粉成品；将步骤5制备的九香虫活性肽液加纯净水按口服液生产工艺规范灌装至口服液瓶，即得本发明九香虫活性肽口服液成品；将步骤5制备的九香虫活性肽液经冷冻干燥或喷雾干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范罐装成胶囊，即得本发明九香虫活性肽胶囊成品。
实施例四、1、九香虫活性肽液的制备：选取当年干燥净九香虫30kg进行粉碎处理，放入蒸煮锅内加入其重量9倍的水煮45分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，然后将煮好的九香虫浆过组织破碎机破碎制得九香虫干品匀浆；选取干净鲜九香虫成虫35kg用沸水烫死，加入其重量7倍的水过组织破碎机破碎匀浆，然后放入蒸煮锅内煮45分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，制得九香虫鲜品匀浆；
2、将步骤1处理好的九香虫匀浆调PH6.5，加入胰蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶进行多酶酶解，酶组成比为1：1：1，酶用量为每克九香虫添加8500个酶活单位(u)，温度控制在摄氏54度酶解6.5小时后加入九香虫重量0.7%的酵母粉搅拌均匀，温度控制在摄氏38度进行脱腥处理，2小时后沸水热浴灭酶13分钟，即得九香虫酶解活性肽液；
3、将步骤2处理好的九香虫酶解活性肽液用高速离心机进行液渣分离，离心速度调至13500rpm左右，制得九香虫活性肽液；
4、将步骤3制备的九香虫活性肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜在摄氏110度蒸汽高压灭菌35分钟；
5、将步骤4制备的九香虫活性肽液经过超滤膜过滤器滤得分子量5000道尔顿以下的九香虫活性肽液；
6、将步骤5制备的九香虫活性肽液按冻干工艺规范灌装至西林瓶上冻干机真空冷冻干燥，即得本发明九香虫活性肽瓶装冻干粉成品；将步骤5制备的九香虫活性肽液加纯净水按口服液生产工艺规范灌装至口服液瓶，即得本发明九香虫活性肽口服液成品；将步骤5制备的九香虫活性肽液经冷冻干燥或喷雾干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范罐装成胶囊，即得本发明九香虫活性肽胶囊成品。
实施例五、1、九香虫活性肽液的制备：选取当年干燥净九香虫15kg进行粉碎处理，放入蒸煮锅内加入其重量15倍的水煮45分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，然后将煮好的九香虫浆过组织破碎机破碎制得九香虫干品匀浆；选取干净鲜九香虫成虫15kg用沸水烫死，加入其重量10倍的水过组织破碎机破碎匀浆，然后放入蒸煮锅内煮45分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，制得九香虫鲜品匀浆；
2、将步骤1处理好的九香虫匀浆调PH7，加入胰蛋白酶、木瓜蛋白酶进行双酶酶解，酶组成比为1：1，酶用量为每克美洲大蠊添加10000个酶活单位(u)，温度控制在摄氏54度酶解7小时后加入九香虫重量0.9%的酵母粉搅拌均匀，温度控制在摄氏38度进行脱腥处理，2小时后沸水热浴灭酶14分钟，即得九香虫酶解活性肽液；
3、将步骤2处理好的九香虫酶解活性肽液用高速离心机进行液渣分离，离心速度调至11500rpm左右，制得九香虫活性肽液；
4、将步骤3制备的九香虫活性肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜在摄氏120度蒸汽高压灭菌20分钟；
5、将步骤4制备的九香虫活性肽液经过超滤膜过滤器滤得分子量5000道尔顿以下的九香虫活性肽液；
6、将步骤5制备的九香虫活性肽液按冻干工艺规范灌装至西林瓶上冻干机真空冷冻干燥，即得本发明九香虫活性肽瓶装冻干粉成品；将步骤5制备的九香虫活性肽液加纯净水按口服液生产工艺规范灌装至口服液瓶，即得本发明九香虫活性肽口服液成品；将步骤5制备的九香虫活性肽液经冷冻干燥或喷雾干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范罐装成胶囊，即得本发明九香虫活性肽胶囊成品。
实施例六、1、九香虫活性肽液的制备：选取当年干燥净九香虫35kg进行粉碎处理，放入蒸煮锅内加入其重量11倍的水煮45分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，然后将煮好的九香虫浆过组织破碎机破碎制得九香虫干品匀浆；选取干净鲜九香虫成虫40kg用沸水烫死，加入其重量8倍的水过组织破碎机破碎匀浆，然后放入蒸煮锅内煮45分钟，静置放凉将上层脂肪收取弃用，制得九香虫鲜品匀浆；
2、将步骤1处理好的九香虫匀浆调PH7，加入风味蛋白酶、木瓜蛋白酶进行双酶酶解，酶组成比为1：1，酶用量为每克九香虫添加9500个酶活单位(u)，温度控制在摄氏54度酶解7小时后加入九香虫重量0.9%的酵母粉搅拌均匀，温度控制在摄氏38度进行脱腥处理，2小时后沸水热浴灭酶14分钟，即得九香虫酶解活性肽液；
3、将步骤2处理好的九香虫酶解活性肽液用高速离心机进行液渣分离，离心速度调至13500rpm左右，制得九香虫活性肽液；
4、将步骤3制备的九香虫活性肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜在摄氏120度蒸汽高压灭菌30分钟；
5、将步骤4制备的九香虫活性肽液经过超滤膜过滤器滤得分子量5000道尔顿以下的九香虫活性肽液；
6、将步骤5制备的九香虫活性肽液按冻干工艺规范灌装至西林瓶上冻干机真空冷冻干燥，即得本发明九香虫活性肽瓶装冻干粉成品；将步骤5制备的九香虫活性肽液加纯净水按口服液生产工艺规范灌装至口服液瓶，即得本发明九香虫活性肽口服液成品；将步骤5制备的九香虫活性肽液经冷冻干燥或喷雾干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范罐装成胶囊，即得本发明九香虫活性肽胶囊成品。