一种抗过敏植物组合物及其应用的制作方法

本发明涉及一种抗过敏植物组合物及其应用，属于化妆品技术领域。

背景技术：

近年来，随着环境污染的加重，各类工业添加剂的滥用，以及人们饮食习惯的变化等原因，过敏患者急剧增加且症状更加严重化。据不完全统计，全球自我感觉敏感性肌肤的人群也越来越多，其中女性占61％，男性占38％，皮肤过敏已成为困扰人体健康的重要问题之一。皮肤过敏反应又称作变态反应或着是超敏反应，它是指机体在受到抗原刺激的时候所产生的一类特殊的免疫应答，这类应答能够引起组织损伤和免疫功能的紊乱。出现在人的身上又称为变应性接触性皮炎，其特点是瘙痒、产生红斑、水疱等，其发生取决于以下几个因素：抗原的刺激、机体的反应性及其他类型的因素(环境、饮食和药物)。

同时，随着人们生活水平的不断提高，以及人们对高质量生活的追求，化妆品已经成为了人们生活中的必需品，如果化妆品使用不妥，则会产生一些不良的症状，如皮肤过敏、瘙痒和红肿等，因而人们愈来愈注重化妆品的天然性和本身的安全性。现代化妆品存在很多问题，例如，使用违禁的添加剂，细菌总数超标，重金属或者有害物质超标，化妆品感官指标未达到规定要求等，且具有一定的毒副作用。

香鳞毛蕨(dryopterisfragrans)，系鳞毛蕨科鳞毛蕨属，是一种野生的多年生蕨类植物，药用价值很高，并且极具开发利用潜能。黑龙江省北部的居民把香鳞毛蕨视为“皮肤病的克星”，其水煎液能有效的治疗多种皮肤病，如：干癣、皮疹、痤疮、牛皮癣等。多年的人体试验证明，香鳞毛蕨不仅没有毒副作用，而且还有治病和美容的双重作用。但是有关香鳞毛蕨抗敏护肤品的研究还未见报道。

有研究发现植物提取物的抗过敏机制与自由基清除率之间具有一定的正相相关性，dpph法可做为一种评价天然抗氧化剂抗氧化活性的方法，其特点快速、简便、灵敏、可行。

透明质酸(hyaluronicacid,ha)具有较强的吸水能力和粘附性，能锁住皮肤内水分并能维持皮肤的弹性，还可促进伤口愈合等。透明质酸酶(hyaluronidase,haase)是透明质酸的专一性裂解酶，只有抑制透明质酸酶的活性，才能保证透明质酸能行驶正常的功能。据报道，透明质酸酶参加过敏反应的第三阶段，能够促使肥大细胞出现脱颗粒现象。透明质酸酶体外活性抑制试验是评价抗敏活性最典型的方法，透明质酸酶的活性抑制率越大则表示抗过敏作用越强。

技术实现要素：

为舒缓过敏症状，满足人们对化妆品“绿色、安全”的追求，本发明的目的在于提供一种用于抗过敏的护肤品用的植物组合物及其应用，该组合物包括香鳞毛蕨提取物、黄芩提取物、仙人掌提取物和甘草提取物。

本发明的第一个目的是提供一种抗过敏植物组合物，该抗过敏植物组合物中包括香鳞毛蕨提取物、黄芩提取物、仙人掌提取物和甘草提取物。

优选地，所述的抗过敏植物组合物包括如下质量份数的原料：香鳞毛蕨提取物0.025份-0.1份，黄芩提取物0.025份-0.05份，仙人掌提取物0.05份-0.1份，甘草提取物0.05份-0.1份。

更优选地，所述的抗过敏植物组合物，包括如下质量份数的原料：香鳞毛蕨提取物0.1份，黄芩提取物0.05份，仙人掌提取物0.1份，甘草提取物0.1份。

优选地，本发明所述香鳞毛蕨提取物的浓度是0.025mg/ml-0.1mg/ml；所述黄芩提取物的浓度是0.025mg/ml-0.05mg/ml；所述仙人掌提取物的浓度是0.05mg/ml-0.1mg/ml；所述甘草提取物的浓度为0.05mg/ml-0.1mg/ml。

更优选地，本发明所述香鳞毛蕨提取物的浓度是0.1mg/ml；所述黄芩提取物的浓度是0.05mg/ml；所述仙人掌提取物的浓度是0.1mg/ml；所述甘草提取物的浓度是0.1mg/ml。

本发明所述香鳞毛蕨提取物的制备方法为：称取干燥的香鳞毛蕨粉末20.0g，按料液比是1：(5-25)(g/ml)的比例加入体积分数为10％-90％的乙醇溶液，分别在20℃-60℃温度下超声提取10min-50min，浸提液经抽滤后浓缩成浸膏。

优选地，所述香鳞毛蕨提取物的制备方法为：称取干燥的香鳞毛蕨粉末20.0g，按料液比是1：(5-15)(g/ml)的比例加入体积分数为50％-90％的乙醇溶液，分别在30℃-50℃温度下超声提取30min-50min，浸提液经抽滤后浓缩成浸膏。

更优选地，所述香鳞毛蕨提取物的制备方法为：称取干燥的香鳞毛蕨粉末20.0g，按料液比是1:10(g/ml)的比例加入体积分数为90％的乙醇溶液，分别在50℃温度下超声提取30min，浸提液经抽滤后浓缩成浸膏。

本发明所述组合物中黄芩提取物、仙人掌提取物和甘草提取物的制备方法如下：称取黄芩或仙人掌或甘草的粉末20.0g，按料液比1:20g/ml加入到体积分数为80％的乙醇溶液中，于800w功率下进行超声提取2次，每次超声提取时间30min，抽滤后合并滤液，并用旋转蒸发仪浓缩，制备成浸膏备用。

本发明的第二个目的是提供所述抗过敏植物组合物在制备护肤品中的应用。

一种含上述抗过敏植物组合物的护肤品，每100ml所述护肤品中添加0.7g-3.5g所述抗过敏植物组合物。

优选地，每100ml所述护肤品中添加2.1g所述抗过敏植物组合物。

优选地，本发明所述护肤品为洗面奶、保湿水或保湿乳。

优选地，所述护肤品为洗面奶时的制作工艺包括如下步骤：

1)将十二烷基醇醚硫酸铵、烷基多苷、椰油脂肪酸二乙醇酰胺、椰油酰胺丙基甜菜碱、椰油酸甘油酯、丙三醇、柠檬酸、去离子水置于烧杯中，缓慢搅拌加热，直到加热到75℃，搅拌至透明；

2)待步骤2)降温至45℃时，加入权利要求1所述抗过敏植物组合物，搅拌均匀，再加入香精和防腐剂，搅拌均匀，补水；

3)用氯化钠调节体系的粘度直到为止，冷却后罐装至无菌的包装瓶中；

所述护肤品为保湿水时的制作工艺包括如下步骤：

1)将甘油、丁二醇、山梨醇、尿囊素、水溶性霍霍巴油和去离子水置于烧杯中，升温至80℃-85℃，搅拌溶解；

2)待步骤1)降温至50℃，加入权利要求1所述抗过敏植物组合物，搅拌均匀；

3)将步骤2)的温度降至40℃以下，加入透明质酸和mti，搅拌均匀，补水，冷却后罐装至无菌的包装瓶中；

所述护肤品为保湿乳时的制作工艺包括如下步骤：

1)称取鲸蜡硬脂醇/鲸蜡硬脂基葡糖苷、甘油硬脂酸酯/peg-100硬脂酸酯、聚二甲基硅氧烷、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯和棕榈酸乙基己酯加入到100ml烧杯中，升温至80℃-85℃，搅拌溶解，获得溶液a；

2)选用200ml烧杯，先用丁二醇分散卡波姆和汉生胶，然后加入edta二钠、尿囊素、丙二醇和去离子水，升温至80℃-85℃，搅拌充分溶解，获得溶液b；

3)将步骤1)获得的溶液a缓慢倒入步骤2)获得的溶液b中，乳化均质，均质6min，转速为3000r/min；

4)步骤3)均质完成后，对乳液搅拌降温，降至60℃加入三乙醇胺，搅拌均匀；

5)步骤4)降温至40℃加入芦荟凝胶、透明质酸、权利要求1所述的抗过敏植物组合物、乙基己基甘油、刺激抑制因子、燕麦β-葡聚糖，搅拌均匀，用三乙醇胺调ph至5.5-6.5，冷却后罐装至无菌的包装瓶中。

本发明所述燕麦β-葡聚糖是一种商品化产品，包含水、甘油和β-葡聚糖。

本发明制备的洗面奶为细腻的乳白色膏体，含有中草药的特征气味。

本发明制备的保湿水为浅黄色透明液体，含有中草药的特征气味。

本发明制备的保湿乳为乳白色粘稠液体，含有中草药的特征气味。

有研究发现植物提取物的抗过敏机制与自由基清除率之间具有一定的正相相关性，dpph法可做为一种评价天然抗氧化剂抗氧化活性的方法，其特点快速、简便、灵敏、可行。因此，以清除dpph·这一种抗氧化体系研究香鳞毛蕨、甘草、仙人掌和黄芩提取物的抗氧化能力，采用正交设计法研究它们之间的交互作用，依据dpph法的实验结果确定水平，采用dpph法测定组合物的抗氧化能力，从而获得效果最佳的组合物比例。本发明的最优复方组合物的用量为2.1％，香鳞毛蕨、黄芩、仙人掌及甘草提取物的用量比为2:1:2:2，将复方组合物添加到护肤品基质中，制作抗过敏护肤品，如洗面奶、保湿水或保湿乳，进而通过抗敏实验验证了配方组合物有一定的抗敏功效，并且确定了配方组合物最佳的添加量为2.1％(g/ml)，其抗敏效果优于阳性对照品symsitive1609。

本发明有益效果：

本发明选用的原料均为舒缓天然成分，作用温和。复方组合物的抗过敏效果显著，将其添加到特定基质中，研制出天然抗敏护肤品，符合了现代人追求“绿色”、“天然”的需求。本研究不仅为研究天然植物的抗敏功效提供了依据，而且还满足了人们对护肤品质量和性能的要求，对开发相关抗敏护肤品具有指导意义。此外，本发明通过合理的配比，使得生产出的护肤品产品，不仅是外观还是其质量均保持稳定，并且安全可靠，令人易于接受。

中草药化妆品是指由中草药制成，或在特定的基质体系中加入中草药的活性成分的化妆品。然而，在组方中简简单单地加入植物原料而制作成的化妆品，不能叫做中草药化妆品。配制过程应该遵循中医药“君臣佐使”的组方原则，然后制成有特定功能的化妆品，这类化妆品产品的安全性更高，并具有单味中草药所不能比拟的效果。护肤品是化妆品的一种。因而研发护肤品用的抗过敏植物组合物，应切合中医药理论的要求，体现“君臣佐使、和谐配伍”的思想。并且如今的消费者也越来越重视护肤品的内涵和理念，因此将“君臣佐使”思想融汇入抗敏护肤品中，不仅可以从机理上解释，而且也容易被消费者接受。配方组合物的功效，主要是由组成药味的功效和配伍关系所决定。君臣佐使中，君药作为主要的成分，具有抗敏的作用；臣药起辅助的作用，则具有抑菌的效果；佐药则是促进君药和臣药的功效发挥，具有抗敏和舒敏的作用；使药作为基础成分，起到调和诸药和保湿的作用。所以，初步确定香鳞毛蕨为君药，黄芩为臣药，仙人掌为佐药，甘草为使药。

本发明护肤品组合物中，所采用的香鳞毛蕨、黄芩、仙人掌及甘草这4种中草药的提取物分别起着抗敏、抑菌、舒敏、保湿等作用，促使各种中草药成分互相调节，互相协同作用，从而达到抗过敏的综合效果。

本发明提供的抗过敏植物组合物可以添加到特定基质中制备成中草药化妆品，中草药添加剂的安全性高，基质无毒无害，并具有特定的功能，将其添加到化妆品当中，其刺激性小、安全性高、疗效愈加明显。

透明质酸酶体外抑制试验是评价抗敏活性最典型的方法，对透明质酸酶的抑制率越大则表示抗过敏作用越强。以透明质酸酶抑制率作为抗过敏的标准，将抗过敏作用分为4个等级：抑制率＜30％为无抗过敏作用；30％≤抑制率＜50％为弱抗过敏作用；抑制率≥50％为中等抗过敏作用；抑制率≥70％为强抗过敏作用。实验表明，香鳞毛蕨提取物、黄芩提取物、仙人掌提取物和甘草提取物对透明质酸酶均具有抑制效果，抑制率均高于70％，具有强抗过敏作用。这四种中草药提取物的抗过敏大小依次为：香鳞毛蕨(抑制率90.4％)＞甘草(抑制率88.3％)＞仙人掌＞(抑制率83.3％)＞黄芩(78.24％)。本发明香鳞毛蕨提取物、黄芩提取物、仙人掌提取物及甘草提取物的复配组合物物对透明质酸酶的活性抑制率达90％以上，其抗过敏效果优于阳性对照品symsitive1609(70.8％)，抗过敏优势较为明显。

机体产生过敏反应时，如果与皮肤表面的菌合并感染，会增加皮肤过敏反应中出现的皮肤病理损伤，所以组合物中的原料在抗过敏的基础上，还需要能够抑制皮肤表面常见的几种菌，如金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌和糠秕马拉色菌等。实验表明，在这四种中草药提取物中，香鳞毛蕨提取物和黄芩提取物的抑菌效果较好。

附图说明

图1为料液比对透明质酸酶活性抑制率的影响。

图2为超声温度对透明质酸酶活性抑制率的影响。

图3为超声时间对透明质酸酶活性抑制率的影响。

图4为乙醇体积分数对透明质酸酶活性抑制率的影响。

图5为4种中草药提取物的抗敏功效。

图6为4种中草药提取物对dpph·的清除作用。

图7为配方组合物的抗敏结果。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案作具体说明，但是以下实施例不构成对本发明的限定。

以下实施例中“％”均表示“重量％”。

以下实施例中的材料方法如下：

试验材料：

香鳞毛蕨采自黑龙江省五大连池地区的熔岩台地；甘草、黄芩和仙人掌均购自黑龙江省哈尔滨市三棵树中药材市场。

实施例1：香鳞毛蕨有效成分提取工艺的优化

1、料液比对透明质酸酶活性抑制率的影响

称取干燥的香鳞毛蕨粉末20.0g5份，分别按料液比是1:5g/ml、1:10g/ml、1:15g/ml、1:20g/ml、1:25g/ml的比例加入体积分数70％(v/v)的乙醇溶液，分别在30℃温度下超声提取30min，浸提液经抽滤后浓缩成浸膏。分别将浸膏溶解成1％的醇溶液，然后进行透明质酸酶抑制试验，考察料液比对透明质酸酶活性抑制率的影响，结果见图1。由图1可知，随着料液比的增加，香鳞毛蕨提取物对透明质酸酶活性抑制率先增加后下降，当料液比为1:10时，香鳞毛蕨提取物对透明质酸酶的活性抑制率达最大值(85.19％)。因此，最佳提取料液比为1:10g/ml，确定正交试验中料液比影响因素的水平为1:5g/ml-1:15g/ml。

2、超声温度对透明质酸酶活性抑制率的影响

称取干燥的香鳞毛蕨粉末20.0g5份，分别加入体积分数70％(v/v)的乙醇溶液300ml，分别在20℃、30℃、40℃、50℃、60℃温度下超声提取30min，浸提液经抽滤后浓缩成浸膏。分别将浸膏溶解成1％的醇溶液，然后进行透明质酸酶抑制试验，考察超声温度对透明质酸酶活性抑制率的影响，结果见图2。由图2可知，当超声温度为30℃时，香鳞毛蕨提取物对透明质酸酶的活性抑制率达最大值(85.59％)，抗过敏效果最好。但随着温度的升高，提取物的抗过敏效果反而降低，可能是由于温度过高，在超声波的作用下溶出的杂志增多，导致抗过敏效果下降，也可能是温度过高，一些热敏性成分遭到破坏而损失。因此，最佳超声温度为30℃，考虑到抗过敏的标准，确定正交试验中超声温度影响因素的水平为30℃-50℃。

3、超声时间对透明质酸酶活性抑制率的影响

称取干燥的香鳞毛蕨粉末20.0g5份，分别加入体积分数70％(v/v)的乙醇溶液300ml，分别在30℃温度下超声提取10min、20min、30min、40min、50min，浸提液经抽滤后浓缩成浸膏。分别将浸膏溶解成1％的醇溶液，然后进行透明质酸酶抑制试验，考察超声时间对透明质酸酶活性抑制率的影响，结果见图3。由图3可知，超声浸提的时间在10min-40min内，随着超声时间的延长，透明质酸酶的活性抑制率逐渐增大，40min时，香鳞毛蕨提取物对透明质酸酶的活性抑制率达最大值(84.75％)。继续延长超声浸提时间，对透明质酸酶的抑制效果反而呈下降趋势，这可能是超声时间过长破坏了有效成分的结构。因此，最佳超声时间为40min，确定正交试验中超声时间影响因素的水平为30min-50min。

4、乙醇体积分数对透明质酸酶活性抑制率的影响

称取干燥的香鳞毛蕨粉末20.0g5份，分别加入10％(v/v)、30％(v/v)、50％(v/v)、70％(v/v)、90％(v/v)的乙醇溶液300ml，分别在30℃温度下超声提取30min，浸提液经抽滤后浓缩成浸膏。分别将浸膏溶解成1％的醇溶液，然后进行透明质酸酶抑制试验，考察乙醇体积分数对透明质酸酶活性抑制率的影响，结果见图4。由图4可知，随乙醇体积分数的增加，香鳞毛蕨提取物对透明质酸酶活性抑制率先增加后下降，乙醇体积分数为70％时，对透明质酸酶的活性抑制率达最大值(85.52％)。因此，提取的最佳乙醇体积分数为70％。大于70％后，抑制率略微下降，由此可以看出，乙醇体积分数过高和过低均会降低香鳞毛蕨的抗过敏效果，由此确定正交试验中乙醇体积分数影响因素的水平为50％-90％。

5、正交试验：

表1因素和水平

根据上述单因素实验的结果，选取影响香鳞毛蕨抗过敏效果的各因素中有意义的水平进行正交试验，并对结果进行极差分析，以确定超声提取的最佳工艺条件。因素水平表见表1。称取香鳞毛蕨粉20.0g，根据l9(3⁴)正交设计表设定的条件进行超声提取，以透明质酸酶的活性抑制率为指标，结果见表2。由表2的极差分析结果可以得出，各个因素对透明质酸酶活性抑制率的影响大小顺序依次为：料液比(a)＞乙醇体积分数(d)＞超声时间(c)＞超声温度(b)。在试验设计

表2正交试验结果

对正交结果的验证：

上述条件下获得的工艺组合与表2正交试验中的最优组合a2b3c1d3不一致，因此根据最优组合a2b3c1d3的条件进行了3次验证试验，结果见表3。由表3可知，在正交试验优化组合a2b3c1d3条件下，提取物对透明质酸酶活性的平均抑制率为91.25％，高于表2抑制率最高组合a2b1c2d3，同时，其rsd＝1.53％(n＝3)，表明此工艺条件稳定、可行，故a2b3c1d3为超声辅助提取香鳞毛蕨有效成分的最佳工艺条件。

表3验证试验结果(n＝3)

实施例2：4种中草药提取物抗敏功效的研究

取0.1ml0.25mmol/lcacl2溶液和0.5ml透明质酸酶液，37℃水浴保温20min；加入样品液(分别为香鳞毛蕨提取液、黄芩提取液、仙人掌提取液和甘草提取液，浓度均为1.0％的醇溶液，乙醇的体积分数是5％)0.5ml，37℃水浴保温20min；加入透明质酸钠液0.5ml，37℃水浴保温30min，常温放置5min；加入0.4mol/lnaoh溶液0.1ml，加入乙酰丙酮溶液0.5ml，沸水浴加热15min，其后立即用冰水冷却5min；加入1.0ml埃尔利希试剂，3.0ml无水乙醇，显色20min，以去离子水作为对照，测定其在539mn处的吸光度值。

透明质酸酶抑制率(％)＝[(a-b)-(c-d)]/(a-b)×100％

式中：a——对照溶液abs值(用5％的乙醇溶液代替样品溶液)

b——对照空白溶液abs值(用5％的乙醇溶液和醋酸缓冲溶液分别代替样品溶液及酶液)

c——试样溶液abs值

d——试样空白溶液abs值(用醋酸缓冲溶液代替酶液)

本实验所采用的4种中草药提取物对透明质酸酶体外抑制率的评价结果如图5所示，提取物的浓度为1.0％，数据为三次平均值。结果表明，4种中草药提取物对透明质酸酶的活性均具有抑制效果，对透明质酸酶的体外抑制率均高于70％，显示出较强的抗过敏效果，甘草酸二钾作为阳性对照，其透明质酸酶的抑制率高达97.5％。这四种中草药提取物的抗过敏大小依次为：香鳞毛蕨(抑制率90.4％)＞甘草(抑制率88.3％)＞仙人掌＞(抑制率83.3％)＞黄芩(78.24％)。

实施例3：4种中草药提取物抑制皮肤菌的研究

1)菌种的活化：用接菌环挑菌并在平板上进行划线，放入培养箱中倒置培养(细菌37℃培养24h；真菌28℃培养48h。长出菌落后，挑取单菌落再次平板划线活化，原则上，平板划线活化三次即可达到菌种的活化。取活化好的菌种，在无菌条件下，用接菌环挑取一个菌落，加到液体培养基中，放入摇床内，细菌培养12h-14h，培养温度为37℃，真菌培养3d-5d，培养温度为28℃。

2)菌悬液的制备：将培养后的菌液，采用10倍稀释法用液体培养基稀释，制成一系列菌悬液，利用血球计数板来计数，将菌悬液的浓度调整到10⁶cfu/ml。

3)抑菌效力的测定(牛津杯法)：将菌液打到平板上，用涂布棒在平板表面涂抹均匀，然后盖好平皿，干燥5min。每个样品一个平板，一个平板上放4个牛津杯，一个对照组，三个实验组，以无样品的溶液作为空白对照组，有样品的作为实验组，每个杯中加200μl样品(分别为香鳞毛蕨提取液、黄芩提取液、仙人掌提取液和甘草提取液，提取液的浓度均为100mg/ml)。在适宜的温度下培养一定时间后，测定抑菌圈的直径，单位为mm。

当抑菌圈的直径小于或是等于8mm时，无抑菌作用；抑菌圈直径大于8mm时，有抑菌作用，抑菌圈越大表示抑菌作用越强；满足3次重复试验均有抑菌圈出现，才算合格；阴性对照组不可产生抑菌圈，不然代表实验失败。实验结果见表4。由表可知，香鳞毛蕨、甘草、黄芩和仙人掌提取物对3种常见皮肤菌均有一定抑制作用，抑菌效果较好的植物原料是香鳞毛蕨和黄芩。

表44种中草药提取物对3种皮肤病的抑制效果(抑菌圈的直径mm)

注：三次重复实验的平均；“-”表示无抑菌效果。

实施例4：配方组合物的设计

样品的制备：称取香鳞毛蕨、甘草、黄芩和仙人掌的提取物(浸膏)各1.0g，用5％乙醇分别充分溶解后定容至100ml容量瓶中，即为1％的母液，实验时再稀释成所需要的浓度。

清除dpph自由基：

取3ml的样品溶液与3ml2×10^-4mol/l的dpph溶液置于一试管中，摇匀(a1管)；取3ml5％乙醇与3ml2×10^-4mol/l的dpph溶液，摇匀(a2管)；取3ml无水乙醇与3ml样品溶液，摇匀(a3管)。室温避光反应30min，取3ml5％乙醇与3ml无水乙醇，混合摇匀，然后空白调零，用紫外分光光度计在517nm下测a1管、a2管和a3管的吸光度值，每个样品平行做3次。dpph·清除率(％)＝[(a2+a3)-a1]/a2，以清除率对样品浓度作非线性拟合，由拟合曲线求得ic50值。ic50值越小，表示样品清除自由基能力越强，其抗氧化能力越强。实验结果见图6，dpph·清除率对浓度的关系见表5。由图6和表5可以看出，四种提取物均能清除dpph·，在高浓度时与vc的作用相当。实验中，它们清除dpph·能力大小的顺序为：vc＞香鳞毛蕨＞黄芩＞甘草＞仙人掌，实验结果表明，香鳞毛蕨、黄芩、仙人掌及甘草提取物是良好的抗氧化剂。

表54种中草药提取物对dpph·的清除作用

正交试验设计：

初步确定香鳞毛蕨为君药，黄芩为臣药，仙人掌为佐药，甘草为使药。在正交试验中，采用dpph法对配方(抗过敏植物组合物)进行抗氧化能力测定，因此根据上述dpph法的实验结果来确定水平。因素水平表和正交试验结果分别见表6和表7。

表6因素和水平

表7正交试验结果

由表7的极差分析的结果可以得出，各个因素对dpph·清除率的影响顺序依次为：香鳞毛蕨(a)﹥黄芩(b)﹥甘草(d)﹥仙人掌(c)。在试验设计范围内，得到的配方组合为a3b3c3d3，即各提取物在抗过敏植物组合物配方中的浓度为：香鳞毛蕨提取物的浓度为0.1mg/ml、黄芩提取物的浓度为0.05mg/ml、仙人掌提取物的浓度为0.1mg/ml及甘草的提取物的浓度为0.1mg/ml，由于样品液(香鳞毛蕨提取物、黄芩提取物、仙人掌提取物和甘草的提取物组成的组合物)的总体积为3ml，即香鳞毛蕨提取物、黄芩提取物、仙人掌提取物和甘草的提取物的质量比为0.3:0.15:0.3:0.3，即2:1:2:2。

对正交结果的验证：

将上述优选出的配方组合进行3次平行试验，得到dpph·的平均清除率为92.56％，其rsd＝0.116％(n＝3)，说明该配方组合不但清除率高，且试验的重现性好。

实施例5：配方组合物功效验证及配方的确定

本实施例提供了一种抗过敏植物组合物，该组合物中含有香鳞毛蕨提取物3g、黄芩提取物1.5g、仙人掌提取物3g和甘草的提取物3g(香鳞毛蕨提取物、黄芩提取物、仙人掌提取物和甘草的提取物质量为比2:1:2:2)，将香鳞毛蕨提取物、黄芩提取物、仙人掌提取物和甘草的提取物混合均匀获得抗过敏植物组合物。

香鳞毛蕨提取物的制备方法为：称取干燥的香鳞毛蕨粉末20.0g，按料液比是1：10(g/ml)的比例加入体积分数为90％的乙醇溶液，分别在50℃温度下超声提取30min，浸提液经抽滤后浓缩成浸膏。

黄芩提取物、仙人掌提取物和甘草提取物的制备方法如下：称取仙人掌或黄芩或甘草的粉末20.0g，按料液比1:20g/ml加入到体积分数为80％的乙醇溶液中，于800w功率下进行超声提取2次，每次超声提取时间30min，抽滤后合并滤液，并用旋转蒸发仪浓缩，制备成浸膏备用。

分别取上述制备的抗过敏植物组合物0.7g、1.4g、2.1g、2.8g、3.5g添加到100ml的保湿水中，利用透明质酸酶抑制试验来验证一下配方组合物的抗过敏的能力，实验结果见图7和表8。

复方抗敏保湿水的配方及制备方法如下：

配方：每100ml保湿水中含有：0.7％、1.4％、2.1％、2.8％、3.5％抗过敏植物组合物、甘油5.0％、丁二醇2.0％、山梨醇3.0％、尿囊素0.2％、水溶性霍霍巴油0.2％、透明质酸2.0％、mti0.15％、去离子水适量；

制作工艺如下：

1)将甘油、丁二醇、山梨醇、尿囊素、水溶性霍霍巴油和去离子水加入到100ml烧杯中，升温至80～85℃，搅拌溶解；

2)待步骤3)降温至50℃，加入抗过敏植物组合物，搅拌均匀；

3)将步骤4)的温度降至40℃以下，加入透明质酸和mti，搅拌均匀，补水，冷却后罐装至无菌的包装瓶中。

表8配方组合物的抗敏结果

从图7和表8中可以看出，随着浓度的不断增加，配方组合物对透明质酸酶的活性抑制率也在逐渐的增大，在相同浓度下，其抗敏效果优于阳性对照品symsitive1609，抗过敏优势更加明显。组合物在配方中的添加量为0.7％时，对透明质酸酶的抑制率为50.88％，具有中抗敏效果，组合物在配方中的添加量为3.5％时，对透明质酸酶的抑制率为92.98％，具有强抗敏效果。根据实验结果，并且结合经济效益，确定了配方组合物的添加量为2.1％(对透明质酸酶的抑制率为90.79％)，即每100g配方中各提取物含量：香鳞毛蕨0.6g，黄芩0.3g，仙人掌0.6g，甘草0.6g。

实施例6

本实施例提供了一种添加抗过敏植物组合物的洗面奶，配方和制备方法如下：

其配方中的原料及重量比分别是：抗过敏植物组合物2.1％(香鳞毛蕨、黄芩、仙人掌及甘草提取物的用量为2:1:2:2)、十二烷基醇醚硫酸铵15.0％、烷基多苷5.0％、椰油脂肪酸二乙醇酰胺3.5％、椰油酰胺丙基甜菜碱4.0％、椰油酸甘油酯0.4％、丙三醇3.0％、柠檬酸0.13％、氯化钠0.8％、香精0.2％、防腐剂0.08％、去离子水适量。制作工艺如下：

1)香鳞毛蕨提取物的制备：称取香鳞毛蕨粉末20.0g，1:10的料液比加入90％的乙醇，避光冷浸24h后，于50℃、800w条件下超声辅助浸提30min，抽滤后合并滤液，将滤液旋转蒸发，制备成浸膏备用；

2)黄芩、仙人掌、甘草提取物的制备：称取植物材料粉末20.0g，按料液比1:20加入到体积分数为80％的乙醇溶液中，于800w功率下进行超声提取2次，每次超声提取时间30min，抽滤后合并滤液，并用旋转蒸发仪浓缩，制备成浸膏备用；

3)称量200ml烧杯重量，并记录；

4)在烧杯中加入十二烷基醇醚硫酸铵、烷基多苷、椰油脂肪酸二乙醇酰胺、椰油酰胺丙基甜菜碱、椰油酸甘油酯、丙三醇、柠檬酸、去离子水，缓慢搅拌加热，直到加热到75℃，搅拌至透明；

5)待步骤4)降温至45℃时，加入所述抗过敏植物组合物，搅拌均匀，再加入香精和防腐剂，搅拌均匀，补水；

6)用氯化钠调节体系的粘度直到为止，冷却后罐装至无菌的包装瓶中。

洗面奶产品稳定性考察：

1)ph稳定性考察：将洗面奶调至不同的ph值，存放24h，于1h、6h、12h、24h依次观察洗面奶的状态，考察结果见表9。结果发现，在不同的ph值范围下，洗面奶的状态稳定，色泽和粘稠度基本无变化，表明洗面奶质量稳定。

2)室温稳定性考察：将洗面奶在室温下存放4周，于第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第1周、第2周、第3周和第4周依次观察其稳定性(颜色、气味、沉淀、ph值、粘度变化)，考察结果见表10。结果发现，经过室温实验考察，洗面奶在室温下，产品状态基本稳定，无异常现象。

3)低温稳定性考察：将洗面奶在低温-5℃条件下存放4周，于第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第1周、第2周、第3周和第4周依次观察其稳定性(颜色、气味、沉淀、ph值、粘度变化)，考察结果见表11。结果发现，经过低温实验考察，洗面奶在低温下，产品状态基本稳定，无异常现象。

4)高温稳定性考察：将洗面奶在高温40℃条件下存放4周，于第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第1周、第2周、第3周和第4周依次观察其稳定性(颜色、气味、沉淀、ph值、粘度变化)，考察结果见表12。结果发现，经过高温实验考察，洗面奶在高温下，产品状态基本稳定，无异常现象。

5)冷热交替稳定性考察：将洗面奶分别在高温40℃和低温-5℃之间循环放置各24h，循环2周，于第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第1周、第2周依次观察其稳定性(颜色、气味、沉淀、ph值、粘度变化)，考察结果见表13。结果发现，经过破坏性实验考察，洗面奶在冷热交替的条件下，产品状态基本稳定，无异常现象。

表9洗面奶ph稳定性考察结果

表10洗面奶室温状态稳定性考察结果

表11洗面奶低温(-5℃)状态稳定性考察结果

表12洗面奶高温状态(40℃)稳定性考察结果

表13洗面奶冷热交替(-5℃-40℃)状态稳定性考察结果

实施例7

本实施例提供了一种添加抗过敏植物组合物的保湿水，配方和制备方法如下：

其配方中的原料及重量比分别是：抗过敏植物组合物2.1％(香鳞毛蕨、黄芩、仙人掌及甘草提取物的用量为2:1:2:2)、甘油5.0％、丁二醇2.0％、山梨醇3.0％、尿囊素0.2％、水溶性霍霍巴油0.2％、透明质酸2.0％、mti0.15％、去离子水适量。制作工艺如下：

1)香鳞毛蕨提取物的制备：称取香鳞毛蕨粉末20.0g，1:10的料液比加入90％的乙醇，避光冷浸24h后，于50℃、800w条件下超声辅助浸提30min，抽滤后合并滤液，将滤液旋转蒸发，制备成浸膏备用；

2)黄芩、仙人掌、甘草提取物的准备：称取植物材料粉末20.0g，按料液比1:20加入到体积分数为80％的乙醇溶液中，于800w功率下进行超声提取2次，每次超声提取时间30min，抽滤后合并滤液，并用旋转蒸发仪浓缩，制备成浸膏备用；

3)将甘油、丁二醇、山梨醇、尿囊素、水溶性霍霍巴油和去离子水加入到100ml烧杯中，升温至80℃-85℃，搅拌溶解；

4)待步骤3)降温至50℃，加入所述抗过敏植物组合物，搅拌均匀；

5)将步骤4)的温度降至40℃以下，加入透明质酸和mti，搅拌均匀，补水，冷却后罐装至无菌的包装瓶中。

保湿水产品稳定性考察：

1)ph稳定性考察：将保湿水调至不同的ph值，存放24h，于1h、6h、12h、24h依次观察保湿水的状态，考察结果见表14。结果发现，经过ph稳定性考察，保湿水的状态稳定，色泽和澄清度基本无变化，表明保湿水质量稳定。

2)室温稳定性考察：将保湿水在室温下存放4周，于第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第1周、第2周、第3周和第4周依次观察其稳定性(颜色、气味、沉淀、ph值、电导率、可溶性固形物)，考察结果见表15。结果发现，经过室温实验考察，保湿水在室温下，产品状态基本稳定，不存在分层和浮油现象，无异常现象。

3)低温稳定性考察：将保湿水在低温-5℃条件下存放4周，于第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第1周、第2周、第3周和第4周依次观察其稳定性(颜色、气味、沉淀、ph值、电导率、可溶性固形物)，考察结果见表16。结果发现，经过低温实验考察，保湿水在低温下，产品状态基本稳定，不存在分层和浮油现象，无异常现象。

4)高温稳定性考察：将保湿水在高温40℃条件下存放4周，于第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第1周、第2周、第3周和第4周依次观察其稳定性(颜色、气味、沉淀、ph值、电导率、可溶性固形物)，考察结果见表17。结果发现，经过高温实验考察，保湿水在高温下，产品状态基本稳定，不存在分层和浮油现象，无异常现象。

5)冷热交替稳定性考察：将保湿水分别在高温40℃和低温-5℃之间循环放置各24h，循环2周，于第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第1周、第2周依次观察其稳定性(颜色、气味、沉淀、ph值、电导率、可溶性固形物)，考察结果见表18。结果发现，经过破坏性实验考察，保湿水在冷热交替的条件下，产品状态基本稳定，不存在分层和浮油现象，无异常现象。

表14保湿水ph稳定性考察结果

表15保湿水室温状态稳定性考察结果

表16保湿水低温(-5℃)状态稳定性考察结果

表17保湿水高温状态(40℃)稳定性考察结果

表18保湿水冷热交替(-5℃-40℃)状态稳定性考察结果

实施例8

本实施例提供了一种添加抗过敏植物组合物的保湿乳，配方和制备方法如下：

其配方中的原料及重量比分别是：抗过敏植物组合物2.1％(香鳞毛蕨、黄芩、仙人掌及甘草提取物的用量为2:1:2:2)、鲸蜡硬脂醇/鲸蜡硬脂基葡萄苷1.2％、甘油硬脂酸酯/peg-100硬脂酸酯1.2％、聚二甲基硅氧烷5％、尼泊金甲酯0.2％、尼泊金丙酯0.1％、棕榈酸乙基己酯5％、卡波姆0.1％、汉生胶0.05％、丁二醇4％、edta二钠0.05％、尿囊素0.2％、丙二醇3％、三乙醇胺0.1％、芦荟凝胶3％、透明质酸2％、乙基己基甘油0.3％、刺激抑制因子0.5％、燕麦β-葡聚糖1％、去离子水适量。制作工艺如下：

1)香鳞毛蕨提取物的制备：称取香鳞毛蕨粉末20.0g，1:10的料液比加入90％的乙醇，避光冷浸24h后，于50℃、800w条件下超声辅助浸提30min，抽滤后合并滤液，将滤液旋转蒸发，制备成浸膏备用；

2)黄芩、仙人掌、甘草提取物的准备：称取植物材料粉末20.0g，按料液比1:20加入到体积分数为80％的乙醇溶液中，于800w功率下进行超声提取2次，每次超声提取时间30min，抽滤后合并滤液，并用旋转蒸发仪浓缩，制备成浸膏备用；

3)称取鲸蜡硬脂醇/鲸蜡硬脂基葡萄苷、甘油硬脂酸酯/peg-100硬脂酸酯、聚二甲基硅氧烷、尼泊金甲酯和尼泊金丙酯加入到100ml烧杯中，升温至80℃-85℃，搅拌溶解，获得溶液a；

4)选用200ml烧杯，先用丁二醇分散卡波姆和汉生胶，然后加入棕榈酸乙基己酯、edta二钠、尿囊素、丙二醇和去离子水，升温至80℃-85℃，搅拌充分溶解，获得溶液b；

5)将步骤3)获得的溶液a缓慢倒入步骤4)获得的溶液b中，乳化均质，均质6min，转速为3000r/min；

6)步骤5)均质完成后，对乳液搅拌降温，降至60℃加入三乙醇胺，搅拌均匀；

7)步骤6)降温至40℃加入芦荟凝胶、透明质酸、所述抗过敏植物组合物、乙基己基甘油、刺激抑制因子、燕麦β-葡聚糖，搅拌均匀，用三乙醇胺调ph至5.5-6.5，冷却后罐装至无菌的包装瓶中。

保湿乳产品稳定性考察：

1)ph稳定性考察：将保湿乳调至不同的ph值，存放24h，于1h、6h、12h、24h依次观察保湿乳的状态，考察结果见表19。结果发现，在不同的ph值范围下，保湿乳的状态稳定，色泽和粘稠度基本无变化，表明保湿乳质量稳定。

2)室温稳定性考察：将保湿乳在室温下存放4周，于第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第1周、第2周、第3周和第4周依次观察其稳定性(颜色、气味、沉淀、ph值、粘度、电导率)，考察结果见表20。结果发现，经过室温实验考察，保湿乳在室温下，产品状态稳定，无异常现象。

3)低温稳定性考察：将保湿乳在低温-5℃条件下存放4周，于第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第1周、第2周、第3周和第4周依次观察其稳定性(颜色、气味、沉淀、ph值、粘度、电导率)，考察结果见表21。结果发现，经过低温实验考察，保湿乳在低温下，产品状态稳定，无异常现象。

4)高温稳定性考察：将保湿乳在高温40℃条件下存放4周，于第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第1周、第2周、第3周和第4周依次观察其稳定性(颜色、气味、沉淀、ph值、粘度、电导率)，考察结果见表22。结果发现，经过高温实验考察，保湿乳在高温下，产品状态稳定，无异常现象。

5)冷热交替稳定性考察：将保湿乳分别在高温40℃和低温-5℃之间循环放置各24h，循环2周，于第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第1周、第2周依次观察其稳定性(颜色、气味、沉淀、ph值、粘度、电导率)，考察结果见表23。结果发现，经过破坏性实验考察，保湿乳在冷热交替的条件下，产品状态稳定，无异常现象。

表19保湿乳ph稳定性考察结果

表20保湿乳室温状态稳定性考察结果

表21保湿乳低温状态(-5℃)稳定性考察结果

表22保湿乳高温状态(40℃)稳定性考察结果

表23保湿乳冷热交替(-5℃-40℃)状态稳定性考察结果

实施例9：安全性评价

1)技术指标检测：检测实施例6制备的洗面奶、实施例7制备的保湿水、实施例8制备的保湿乳产品的感官、理化、卫生等指标，其检测结果见表24-26。由结果可知，这三款护肤品产品的指标均符合2015《化妆品安全技术规范》中的要求标准，表明这三款护肤品产品均合格。

表24洗面奶技术指标

表25保湿水技术指标

表26保湿乳技术指标

2)人体皮肤斑贴试验：该试验是检测化妆品产品对人体皮肤是否存在潜在不良反应的一个较为简单、安全、可靠的方法。选取受试者32名，年龄构成和性别随机确定，符合2015《化妆品安全技术规范》中要求标准；选用面积不超过50mm²、深度约1mm的斑试器；受试者前臂内侧皮肤作为试验的部位，皮肤分为两部分，一部分为空白对照，每个斑贴器中加入25μl不添加抗敏成分的护肤品，一部分为测试区，每个斑贴器中加入25μl添加抗敏成分的护肤品，用低致敏的胶带将斑试器固定住，斑贴试验时间为48h；贴敷后48h后，去除斑试器，30min后观察皮肤变化并记录结果。实验结果见表27-29。从表中可以看出，32例受试者涂抹含有组合提取物的洗面奶、保湿水和保湿乳后，人体肌肤并无明显红斑及损伤，表明这三款护肤品产品对皮肤几乎无刺激，安全性高。

表27洗面奶斑贴试验结果

表28保湿水斑贴试验结果

表29保湿乳斑贴试验结果

虽然本发明已以较佳的实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可以做各种改动和修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。