本申请属于药物制剂技术领域，具体涉及一种含有左乙拉西坦药物组合物的注射剂及其制备方法。
背景技术：
全球每年大约新发生200万例癫痫。其中发达国家中癫痫的发病率约为每年每十万人中有50人。同样，癫痫的发病率在发展中国家中也显著增高，为每十万人中有100人。我国约有900万癫痫患者，其中600万病人每年仍有发作，而且每年都会出现40万新发病例。癫痫患者的死亡危险性大约是普通人群的二至四倍（死亡可能和基础疾病，自杀，事故或者癫痫状态有关）。根据国际抗癫痫联盟（ilae）的调查，患有癫痫的年轻人的死亡率是正常年轻人的4倍。
左乙拉西坦（levetiracetam）的化学名为(-)-(s)-[α]-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺，是一种新型的结合sv2a（突触小泡蛋白2a）的同种型的胆碱能激动剂的抗癫痫药物，与其他抗癫痫药物的结构不同，其确切抗癫痫机制尚不明，但与传统抗癫痫药物作用于离子通道或兴奋性、抑制性神经递质系统不同。左乙拉西坦几乎具备了较好的抗癫痫药物的所有药动学特性：生物利用度高、线性曲线、低蛋白结合率、无肝酶诱导作用。多种动物模型显示左乙拉西坦具有抗癫痫特性。
左乙拉西坦由比利时ucb公司研发的一种新型抗癫痫药，商品名为keppra®，于1999年左乙拉西坦片获fda批准，上市剂型包括注射剂、片剂、口服溶液、缓释片。在美国，该产品被表示为辅助性口服治疗，用于治疗1月龄和更大年龄的成人和儿童的部分发作性癫痫，其中患有癫痫，成年人中的肌阵挛发作以及年龄为12岁及以上的青少年肌阵挛性癫痫（jme）和6岁及以上成人和儿童特发性全身性癫痫的原发性全身性强直阵挛性发作。
［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺是左乙拉西坦的光学异构体，对于抑制癫痫发作只有轻微或者不明显的药效作用。杂质控制是药品质量的重要组成部分，由此，在制备注射液时，最大限度的去除该杂质，有利于提高左乙拉西坦注射剂的产品质量及安全性，对提高患者临床用药安全有重大意义。
技术实现要素：
本申请的目的在于提供一种工艺简单、成本低、稳定性较好的左乙拉西坦注射剂及制备方法。［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺是左乙拉西坦的光学异构体，对于抑制癫痫发作只有轻微或者不明显的药效作用。故本申请采用特殊的制备工艺，即在制备过程中加入阴离子聚丙烯酰胺，由于［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺在溶液中呈阳电性，利用阴离子聚丙烯酰胺对阳离子的强吸附作用，可以有效的去除注射剂中的原料药带入的［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺；最终得到的左乙拉西坦注射剂中几不含有［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺。
本申请中提供的含有左乙拉西坦药物组合物的注射剂，包括由左乙拉西坦、酸性化合物、碱性化合物、渗透压调节剂组成的左乙拉西坦药物组合物和注射用水。左乙拉西坦注射液中左乙拉西坦的浓度为90~110mg/ml；酸性化合物为醋酸、柠檬酸、磷酸盐中的一种或几种；碱性化合物为醋酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、柠檬酸钠、磷酸盐中的一种或几种；其ph调节剂为酸性化合物溶液，或碱性化合物溶液，如醋酸溶液、柠檬酸溶液、磷酸盐溶液、醋酸钠溶液、氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、柠檬酸钠溶液；渗透压调节剂为氯化钠、葡萄糖、甘露醇中的一种或几种。
本申请中提供的含有左乙拉西坦药物组合物的注射剂，其中包含：左乙拉西坦90~110mg/ml、酸性化合物0.5~6mg/ml、碱性化合物0.5~6mg/ml、渗透压调节剂5~150mg/ml和注射用水；该注射液的ph值为4.5~6.5。
本申请中提供的含有左乙拉西坦药物组合物的注射剂，其中包含：左乙拉西坦95~105mg/ml、酸性化合物1~3mg/ml、碱性化合物1~3mg/ml、渗透压调节剂9~50mg/ml和注射用水；该注射液的ph值为5.0~6.0。
本申请中提供的左乙拉西坦注射液的制备方法如下：
（1）称取处方量酸性化合物、碱性化合物及渗透压调节剂加入大约处方量的60%的注射用水中，搅拌使其溶解，和/或，用ph调节剂控制溶液体系的ph范围为4.5~6.5，得溶液ⅰ；
（2）称取处方量的左乙拉西坦加入溶液ⅰ中，得溶液ⅱ；
（3）向溶液ⅱ中加入0.5~3.0mg/ml活性炭，搅拌10~30min，静置10-30min，进行脱碳处理，得溶液ⅲ；
（4a）将溶液ⅲ采用聚丙烯酰胺树脂吸附，得溶液ⅳ；
（5）将溶液ⅳ补加注射用水至全量，和/或，用ph调节剂调节溶液的ph值至4.5~6.5；然后用超滤设备对溶液进行除菌过滤，滤液灌装入玻璃瓶中，密封，热压灭菌，即得。
本申请中提供的左乙拉西坦注射液的制备方法，还包括：
（4b）将聚丙烯酰胺树脂加入溶液ⅲ中，搅拌和/或摇床振荡10~30min；和/或将聚丙烯酰胺树脂装填成柱，加入溶液ⅲ进行吸附处理，得溶液ⅳ；
根据权利要求8-9所述的制备方法，其聚丙烯酰胺树脂为阴离子聚丙烯酰胺树脂、阳离子聚丙烯酰胺树脂、两性聚丙烯酰胺树脂，优选阴离子聚丙烯酰胺树脂。
本申请所述的左乙拉西坦注射液制备方法，其预过滤处理的过滤设备孔径为0.22~0.45μm；超滤设备孔径为0.001~0.02μm。
本申请所述的左乙拉西坦注射液制备方法中，通过加入阴离子聚丙烯酰胺，利用其对在水中呈现阳电性的［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺的吸附作用，去除左乙拉西坦注射剂中的［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺。
本申请提供的左乙拉西坦注射液，几不含有［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺。
具体实施方式
以下实施例进一步描述本发明的有益效果，实施例仅用于例证的目的，不限制本发明的范围，同时本领域普通技术人员根据本发明所做的显而易见的改变和修饰也包含在本发明范围之内。
（一）左乙拉西坦注射剂的制备
实施例1
注：ph调节剂为本实施例中已用到的酸性化合物和/或碱性化合物溶液，具体用量根据ph调节，故用量为适量，下面的实施例同上。
制备工艺
（1）称取处方量磷酸二氢钾、磷酸氢二钾及氯化钠加入大约处方量的60%的注射用水中，搅拌使其溶解，用1mol/l的磷酸氢二钾溶液调节溶液ph值至6.5得溶液ⅰ；
（2）称取处方量的左乙拉西坦加入溶液ⅰ中，得溶液ⅱ；
（3）向溶液ⅱ中加入2.5mg/ml活性炭，搅拌30min，静置30min，进行脱碳处理，得溶液ⅲ；
（4）加入0.05%阴离子聚丙烯酰胺，搅拌10min，进行预过滤处理，得溶液ⅳ；
（5）将溶液ⅳ补加注射用水至全量，用1mol/l的磷酸氢二钾调节溶液的ph值至6.5，然后用超滤设备对溶液进行除菌过滤，滤液灌装入玻璃瓶中，密封，热压灭菌，即得。
实施例2
制备工艺
（1）称取处方量冰醋酸、氢氧化钾及氯化钠加入大约处方量的60%的注射用水中，搅拌使其溶解，用1mol/l的冰醋酸调节溶液ph值至4.5得溶液ⅰ；
（2）称取处方量的左乙拉西坦加入溶液ⅰ中，得溶液ⅱ；
（3）向溶液ⅱ中加入0.5mg/ml活性炭，搅拌10min，静置20min，进行脱碳处理，得溶液ⅲ；
（4）加入0.3%阴离子聚丙烯酰胺，搅拌10min，进行预过滤处理，得溶液ⅳ；
（5）将溶液ⅳ补加注射用水至全量，用1mol/l的冰醋酸调节溶液的ph值至4.5，然后用超滤设备对溶液进行除菌过滤，滤液灌装入玻璃瓶中，密封，热压灭菌，即得。
实施例3
制备工艺
（1）称取处方量柠檬酸、柠檬酸钠及葡萄糖加入大约处方量的60%的注射用水中，搅拌使其溶解，用1mol/l的柠檬酸溶液调节溶液ph值至5.6得溶液ⅰ；
（2）称取处方量的左乙拉西坦加入溶液ⅰ中，得溶液ⅱ；
（3）向溶液ⅱ中加入3.0mg/ml活性炭，搅拌20min，静置30min，进行脱碳处理，得溶液ⅲ；
（4）加入0.25%阴离子聚丙烯酰胺，摇床振荡20min，进行预过滤处理，得溶液ⅳ；
（5）将溶液ⅳ补加注射用水至全量，用1mol/l的柠檬酸溶液调节溶液的ph值至5.0，然后用超滤设备对溶液进行除菌过滤，滤液灌装入玻璃瓶中，密封，热压灭菌，即得。
实施例4
制备工艺
（1）称取处方量磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、氯化钠加入大约处方量的60%的注射用水中，搅拌使其溶解，用1mol/l的磷酸氢二钾溶液调节溶液ph值至5.8得溶液ⅰ；
（2）称取处方量的左乙拉西坦加入溶液ⅰ中，得溶液ⅱ；
（3）向溶液ⅱ中加入2.0mg/ml活性炭，搅拌15min，静置20min，进行脱碳，得溶液ⅲ；
（4）加入0.1%阴离子聚丙烯酰胺，摇床振荡15min，进行预过滤处理，得溶液ⅳ；
（5）将溶液ⅳ补加注射用水至全量，用1mol/l的磷酸二氢钾溶液调节溶液的ph值至5.5，然后用超滤设备对溶液进行除菌过滤，滤液灌装入玻璃瓶中，密封，热压灭菌，即得。
实施例5
制备工艺
（1）称取处方量冰醋酸、醋酸钠及甘露醇加入大约处方量的60%的注射用水中，搅拌使其溶解，用1mol/l的醋酸钠调节溶液ph值至5.6得溶液ⅰ；
（2）称取处方量的左乙拉西坦加入溶液ⅰ中，得溶液ⅱ；
（3）向溶液ⅱ中加入1.0mg/ml活性炭，搅拌30min，静置10min，进行脱碳处理，得溶液ⅲ；
（4）加入0.2%阴离子聚丙烯酰胺，搅拌1min，然后将聚丙烯酰胺树脂装填成柱，加入溶液ⅲ进行吸附处理，进行预过滤处理，得溶液ⅳ；
（5）将溶液ⅳ补加注射用水至全量，用1mol/l的醋酸钠溶液调节溶液的ph值至5.8，然后用超滤设备对溶液进行除菌过滤，滤液灌装入玻璃瓶中，密封，热压灭菌，即得。
实施例6
制备工艺
（1）称取处方量冰醋酸、氢氧化钠及氯化钠加入大约处方量的60%的注射用水中，搅拌使其溶解，用1mol/l的冰醋酸溶液调节溶液ph值至5.7得溶液ⅰ；
（2）称取处方量的左乙拉西坦加入溶液ⅰ中，得溶液ⅱ；
（3）向溶液ⅱ中加入1.5mg/ml活性炭，搅拌15min，静置30min，进行脱碳处理，得溶液ⅲ；
（4）加入0.15%阴离子聚丙烯酰胺，搅拌20min，进行预过滤处理，得溶液ⅳ；
（5）将溶液ⅳ补加注射用水至全量，用1mol/l的醋酸溶液调节溶液的ph值至5.5，然后用超滤设备对溶液进行除菌过滤，滤液灌装入玻璃瓶中，密封，热压灭菌，即得。
对比实施例1
制备工艺
（1）称取处方量冰醋酸、氢氧化钠及氯化钠加入大约处方量的60%的注射用水中，搅拌使其溶解，用1mol/l的柠檬酸溶液调节溶液ph值至5.7得溶液ⅰ；
（2）称取处方量的左乙拉西坦加入溶液ⅰ中，得溶液ⅱ；
（3）向溶液ⅱ中加入2.0mg/ml活性炭，搅拌30min，静置30min，进行脱碳处理，得溶液ⅲ；
（4）将溶液ⅲ补加注射用水至全量，用1mol/l氢氧化钠溶液调节溶液的ph值至6.5，然后用0.22μm聚四氟乙烯膜滤膜过滤，滤液灌装入玻璃瓶中，密封，热压灭菌，即得。
对比实施例2
制备工艺
（1）称取处方量柠檬酸、柠檬酸钠及氯化钠加入大约处方量的60%的注射用水中，搅拌使其溶解，用1mol/l的柠檬酸溶液调节溶液ph值至5.7得溶液ⅰ；
（2）称取处方量的左乙拉西坦加入溶液ⅰ中，得溶液ⅱ；
（3）向溶液ⅱ中加入2.0mg/ml活性炭，搅拌30min，静置30min，进行脱碳处理；加入0.01%阴离子聚丙烯酰胺，搅拌10min，进行预过滤处理，得溶液ⅲ；
（4）将溶液ⅲ补加注射用水至全量，用1mol/l冰醋酸调节溶液的ph值至7.0，然后用0.22μm聚四氟乙烯膜滤膜过滤，滤液灌装入玻璃瓶中，密封，热压灭菌，即得。
对比实施例3
制备工艺
（1）称取处方量柠檬酸、柠檬酸钠及氯化钠加入大约处方量的60%的注射用水中，搅拌使其溶解，用1mol/l的柠檬酸溶液调节溶液ph值至5.7得溶液ⅰ；
（2）称取处方量的左乙拉西坦加入溶液ⅰ中，得溶液ⅱ；
（3）向溶液ⅱ中加入2.0mg/ml活性炭，搅拌30min，静置30min，进行脱碳处理；加入0.4%阴离子聚丙烯酰胺，搅拌20min，进行预过滤处理，得溶液ⅲ；
（4）将溶液ⅲ补加注射用水至全量，用1mol/l冰醋酸调节溶液的ph值至7.0，然后用0.22μm聚四氟乙烯膜滤膜过滤，滤液灌装入玻璃瓶中，密封，热压灭菌，即得。
（二）质量评价标准
采用usp标准测定以上各实施例制备得到的注射液中主药含量及［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺的含量。
通过对比实施例1-3和实施例1~6的左乙拉西坦含量和［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺含量结果可知，在制备过程中加入0.05~0.3%用量的阴离子聚丙烯酰胺，可以有效的去除注射剂中的［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺，同时不影响左乙拉西坦的含量；若阴离子聚丙烯酰胺的加入量低于0.05%，则不能达到完全去除注射剂中的［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺；若阴离子聚丙烯酰胺的加入量高于0.3%，虽然可以去除注射剂中的［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺，但对左乙拉西坦的含量产生了显著的影响。综上，采用本申请中所述的制备方法得到的左乙拉西坦注射液中几不含有［（r）－2－（2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺。
以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。