用于治疗和预防类风湿性关节炎的组合物的制作方法

a.相关申请的交叉引用

本申请要求2016年3月8日提交的美国临时申请第62/305072号和2016年11月1日提交的美国临时申请第62/415713号的权益，其内容通过引用并入本申请中。

b.技术领域

本发明涉及含有能够预防和治疗类风湿性关节炎和/或炎症的化合物的混合物的制剂。

c.相关技术说明

类风湿性关节炎(ra)是一种引起滑膜慢性炎症的自身免疫性疾病，滑膜即围绕关节的膜的衬里(mayoclinic,rheumatoidarthritis,2014)。ra的炎症引起肿胀，从而可以导致骨质糜烂、关节畸形和疼痛(引用同上)。ra还可能影响身体的其他部位，例如眼睛、肺、血管和皮肤并最终导致骨质疏松症、腕管综合征、动脉硬化闭塞、包裹心脏的囊的炎症、以及肺组织的炎症和瘢痕形成(引用同上)。ra的一些症状包括疲劳、发热、体重减轻、手臂皮肤下组织的肿块、早晨可能持续数小时的关节僵硬、以及关节的触痛、发热和肿胀(引用同上)。

目前尚无治愈ra的方法，但例如非甾体抗炎药(nsaid)和类固醇之类的抗炎药物可用于减轻炎症并缓解疼痛(mayoclinic,rheumatoidarthritis,2014)。此外，缓解疾病的抗风湿药(dmard)和一类新型生物制剂dmard(“生物制剂”)可用于减缓类风湿性关节炎的进展。

炎症是类风湿性关节炎以及其它疾病的潜在因素，这些疾病例如为多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎。炎症中涉及的多种蛋白质包括：环加氧酶cox1、环加氧酶cox2、环加氧酶5lox；细胞因子如il-6和tnf-α；和在辅助性t细胞1(th1)应答中产生的细胞因子，例如ifnγ。特别地，tnf-α和il-6是在类风湿性关节炎患者中大量存在的细胞因子(gottenberg等人,2012；hennigan等人,2008)。

抑制炎症是用于对抗ra和其它炎性疾病的病因和/或症状的方法。阿达木单抗(adalimumab，修美乐(humira),abbvie,usa)和托珠单抗(tocilizumab,roactemra,roche,usa)分别是针对tnf-α和il-6受体的抗体，其已经显示出在一些但不是所有的类风湿性关节炎患者中，对于症状的减轻是有效的(kremer等人,2011；nishimoto等人,2014；nishimoto等人,2006)。阿达木单抗也被证明对一些患者是有效的，这些患者患有多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎。然而，使用这些抗体具有与其使用相关的明显的副作用，包括注射部位的发红、瘙痒、疼痛、瘀伤或肿胀，头痛，鼻塞，窦痛或胃痛。此外，增加了结核病和脓毒症等严重感染的风险，这可以导致住院治疗和/或死亡。

一些前列腺素(pg)也参与炎症反应。前列腺素是具有生理激素样作用的脂质分子。在各种pg种类中，pgi-2和pge-2这两种前列腺素类激素由于其在炎症渗出物和组织中的丰度，而被认为是与炎症最相关的种类(huwiler等人,2009；park等人,2006；qin等人,2014；tsai等人,2014)。环加氧酶介导这些前列腺素类激素作为花生四烯酸代谢的最终产物而产生。pge-2是类风湿性关节炎等疾病的主要炎症介质(choi等人,2014；huwiler等人,2009；weizuo等人,2011)。pge-2信号传导通过与四种不同的g蛋白偶联受体、前列腺素e(ep)受体、ep1-4和潜在的拮抗信号级联反应相互作用来介导。pge-2的激活导致camp产生和/或磷酸肌醇转换和细胞内ca²⁺动员的变化(andreasson,2010)。

抑制pge-2的合成是100多年来一种重要的抗炎治疗策略。一个多世纪以来，药理学上用阿司匹林并随后使用nsaid进行pge-2阻断已成为一种有用的抗炎策略，但使用慢性nsaid时的胃毒性程度和严重程度最近变得更加明显(park等人,2006)。

技术实现要素：

本发明提供了一种解决目前面临的治疗和预防类风湿性关节炎和/或炎症的问题的方案。发明人惊奇地确定，在姜黄中发现的几种化合物的组合可以预防和治疗类风湿性关节炎和炎症。本发明人还确定，这些化合物的特定相对浓度增强了组合化合物预防和治疗类风湿性关节炎和炎症的能力。此外，本发明人已经确定，将本发明化合物和其它用于治疗或预防类风湿性关节炎和炎症的药剂一起使用增强了组合化合物预防和治疗类风湿性关节炎和炎症的能力。

发明人还惊奇地确定，本文公开的化合物和组合物可以预防和治疗以下疾病：多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎。不希望受理论束缚，认为本文公开的化合物和组合物的至少一些作用机制包括那些解决这些疾病的潜在病因或症状的作用机制。此外，预期将本发明的化合物和组合物与另外的药物一起使用将增强组合化合物预防和治疗这些疾病的能力。

一方面，公开了二十二种生物标志物中的任一种、任意组合或全部的组合物。在一个实例中，该组合物包含以下生物标志物中的任一种、任意组合或全部：生物标志物11，其具有232.146amu的精确质量并且具有至少2.53％的相对丰度；生物标志物1，其具有146.113amu的精确质量并且具有至少0.20％的相对丰度；生物标志物2，其具有160.116amu的精确质量并且具有至少0.51％的相对丰度；生物标志物3，其具有176.128amu的精确质量并且具有至少0.35％的相对丰度；生物标志物4，其具有178.129amu的精确质量并且具有至少0.30％的相对丰度；生物标志物5，其具有180.106amu的精确质量并且具有至少0.10％的相对丰度；生物标志物6，其具有194.131amu的精确质量并且具有至少0.21％的相对丰度；生物标志物7，其具有198.146amu的精确质量并且具有至少2.86％的相对丰度；生物标志物8，其具有204.188amu的精确质量并且具有至少4.51％的相对丰度；生物标志物9，其具有218.167amu的精确质量并且具有至少88.89％的相对丰度；生物标志物10，其具有220.178amu的精确质量为并且具有至少5.15％的相对丰度；生物标志物12，其具有234.166amu的精确质量并且具有至少8.04％的相对丰度；生物标志物13，其具有236.177amu的精确质量并且具有至少0.80％的相对丰度；生物标志物14，其具有238.191amu的精确质量并且具有至少0.13％的相对丰度；生物标志物15，其具有248.145amu的精确质量并且具有至少0.54％的相对丰度；生物标志物16，其具有268.189amu的精确质量并且具有至少0.18％的相对丰度；生物标志物17，其具有316.209amu的精确质量并且具有至少0.20％的相对丰度；生物标志物18，其具有326.234amu的精确质量并且具有至少0.28％的相对丰度；生物标志物19，其具有334.212amu的精确质量并且具有至少0.16％的相对丰度；生物标志物20，其具有350.230amu的精确质量并且具有至少0.21％的相对丰度；生物标志物21，其具有436.338amu的精确质量并且具有至少0.90％的相对丰度；其中生物标志物存在于姜黄(curcumalonga)中，并且其中相对丰度是相对于掺入500ng/ml组合物中的25mg/ml水杨酸而言的。在一些实例中，包含在上述公开的组合物中的生物标志物的相对丰度为以下：生物标志物11为至多4.70％；生物标志物1为至多0.37％；生物标志物2为至多0.94％；生物标志物3为至多0.65％；生物标志物4为至多0.55％；生物标志物5为至多0.19％；生物标志物6为至多0.39％；生物标志物7为至多5.32％；生物标志物8为至多8.38％；生物标志物9为至多165.08％；生物标志物10为至多9.56％；生物标志物12为至多14.94％；生物标志物13为至多1.49％；生物标志物14为至多0.25％；生物标志物15为至多1.01％；生物标志物16为至多0.33％；生物标志物17为至多0.38％；生物标志物18为至多0.52％；生物标志物19为至多0.30％；生物标志物20为至多0.39％；和生物标志物21为至多1.66％；其中相对丰度相是对于掺入500ng/ml组合物中的25mg/ml水杨酸而言的。在一些实例中，组合物还包含精确质量为216.151amu的生物标志物22。在一些实例中，生物标志物22以至少5.54μg/ml存在于组合物中。在一些实例中，本文公开的任一种组合物包含至多10.29μg/ml的生物标志物22。在一些实例中，本文公开的任一种组合物包含生物标志物1至生物标志物22的至少2种、3种、4种、5种、6种、7种、8种、9种、10种、11种、12种、13种、14种、15种、16种、17种、18种、19种、20种、21种、或22种。在一些实例中，每种生物标志物的质量是由实时直接分析tof(dart-tof)质谱仪测定的质量。

在一些方面，上述公开的任一种组合物包含至少一种通过合成获得的生物标志物。在一些方面，上述公开的任一种组合物包含至少一种从植物分离的生物标志物。在一些实例中，所述植物是姜黄。在一些方面，上述公开的任一种组合物具有至少90％、优选至少95％或至少98％的生物标志物相对丰度的批次间化学一致性。

在一些方面，本文公开的任一种组合物还包含防腐剂。在一些方面，本文公开的任一种组合物还包含至少一种药物。在一些实例中，本文公开的任一种组合物还包含至少一种抗炎药。在一些实例中，至少一种抗炎药是非甾体抗炎药。在一些实例中，非甾体抗炎药是乙酰水杨酸、布洛芬、酮洛芬、萘普生、一种或多于一种缓解疾病的抗风湿药、它们的盐、或其任意组合。在一些实例中，至少一种抗炎药是缓解疾病的抗风湿药(dmard)。在一些实例中，至少一种抗炎药是生物制剂缓解疾病的抗风湿药(生物药dmard)。在一些实例中，生物药dmard是阿达木单抗、其盐、或其任意组合。在一些实例中，dmard是氨甲蝶呤、其盐、或其任意组合。

在一些方面，本文公开的任一种组合物被配制用于经口施用。在一些实例中，该组合物是锭剂、散剂、片剂、明胶胶囊、凝胶剂、液体溶液、糖浆剂、油剂和/或可溶解膜剂。在一些方面，本文公开的任一种组合物被配制用于注射施用。在一些方面，本文公开的任一种组合物被配制用于局部施用和/或经鼻施用。

在一些方面，本文公开的任一种组合物被配制用于减少炎症。在一些方面，本文公开的任一种组合物被配制用于抑制至少一种促炎性细胞因子。在一些实例中，促炎性细胞因子是tnf-α和/或il-6。在一些方面，本文公开的任一种组合物被配制用于抑制前列腺素。在一些方面，本文公开的任一种组合物被配制用于抑制peg-2。在一些方面，本文公开的任一种组合物被配制用于治疗类风湿性关节炎。在一些方面，本文公开的任一种组合物被配制用于预防类风湿性关节炎。在一些方面，本文公开的任一种组合物被配制用于预防和/或治疗多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎。

本发明还公开了使用本文公开的组合物的方法。在一些方面，公开了一种治疗存在患有类风湿性关节炎风险或患有类风湿性关节炎的对象的方法，该方法包括施用本文公开的任一种组合物，其中至少一种类风湿性关节炎的症状在对象中得以改善和/或与患者未接受治疗时类风湿性关节炎的预期发作相比，类风湿性关节炎的发作延迟。在一些实例中，对象被诊断为患有类风湿性关节炎。

在一些方面，公开了一种治疗存在患有以下疾病的任何一种或多于一种的风险或患有以下疾病的任何一种或多于一种的对象的方法：多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎，该方法包括施用本文公开的任一种组合物，其中所述疾病的至少一种症状在对象中得以改善和/或与患者未接受治疗时所述疾病的预期发作相比，所述疾病的发作延迟。在一些实例中，对象被诊断为患有多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎。

在一些实例中，本文公开的任一种方法包括在24小时期间向对象施用总量为1mg至10000mg、10mg至5000mg、50mg至2500mg、或100mg至1000mg的生物标志物。在一些实例中，本文公开的任一种方法包括其中生物标志物1至生物标志物22中的至少一种是通过合成获得的。在一些实例中，本文公开的任一种方法包括其中生物标志物1至生物标志物22中的至少一种是从植物分离的。在一些实例中，本文公开的任一种方法包括其中生物标志物中的至少一种是从姜黄分离的。在一些实例中，本文公开的任一种方法包括其中组合物具有至少95％的生物标志物相对丰度的批次间化学一致性。

在一些方面，本文公开的任一种方法包括其中组合物还包含至少一种抗炎药。在一些实例中，本文公开的任一种方法包括其中至少一种抗炎药是非甾体抗炎药。在一些实例中，非甾体抗炎药是乙酰水杨酸、布洛芬、酮洛芬、萘普生、一种或多于一种缓解疾病的抗风湿药、它们的盐、或其任意组合。在一些实例中，至少一种抗炎药是缓解疾病的抗风湿药(dmard)。在一些实例中，至少一种抗炎药是生物制剂。在一些实例中，至少一种抗炎药是生物制剂dmard(生物药dmard)。在一些实例中，至少一种抗炎药是阿达木单抗、其盐、或其任意组合。在一些实例中，至少一种抗炎药是氨甲蝶呤、其盐、或其任意组合。

在一些方面，本文公开的任一种方法包括其中组合物经口施用。在一些实例中，该组合物以锭剂、散剂、片剂、明胶胶囊、凝胶剂、液体溶液、糖浆剂、油剂和/或可溶解膜剂施用。在一些方面，本文公开的任一种方法包括其中组合物通过注射施用。在一些方面，本文公开的任一种方法包括其中组合物通过局部施用和/或经鼻施用。

在一些方面，本文公开的任一种方法包括其中促炎性细胞因子受到抑制。在一些方面，本文公开的任一种方法包括其中tnf-α和/或il-6受到抑制。在一些方面，本文公开的任一种方法包括前列腺素受到抑制。在一些方面，本文公开的任一种方法包括pge-2受到抑制。

在一些方面，公开了一种减少对象中的炎症的方法，该方法包括将本文公开的任一种组合物施用于对象，其中对象中的炎症减少。在一些方面，公开了一种预防对象中的炎症的方法，该方法包括将本文公开的任一种组合物施用于对象，其中对象中的炎症得到预防。在一些方面，公开了一种抑制对象中促炎性细胞因子产生和/或分泌的方法，该方法包括将本文公开的任一种组合物施用于对象，其中促炎性细胞因子的产生和/或分泌减少。在一些实例中，促炎性细胞因子是tnf-α。在一些实例中，促炎性细胞因子是il-6。在一些方面，公开了一种抑制对象中前列腺素产生和/或分泌的方法，该方法包括将本文公开的任一种组合物施用于对象，其中前列腺素的产生和/或分泌减少。在一些实例中，前列腺素是pge-2。

本发明还公开了制备本文公开的组合物的方法。在一些方面，公开了一种制备本文公开的任一种组合物的方法，其中该制备方法产生具有至少90％、优选至少95％或至少98％的生物标志物相对丰度的批次间化学一致性的组合物。

在本发明的一些方面，组合物还包含一种或多于一种营养学和/或药学上可接受的载体或稀释剂。这些载体/稀释剂可以是天然产物或非天然产物。这些载体/稀释剂可以是辅助剂、赋形剂、或载剂，例如防腐剂、填充剂、崩解剂、润湿剂、乳化剂、助悬剂、甜味剂、芳香剂、香料、抗菌剂、抗真菌剂、润滑剂、维生素、聚合物、含硅氧烷化合物、精油、结构剂和分配剂。在与制剂的其它成分相容并且对对象无害的意义上，每种载体都是可接受的。在本发明的一些方面，载体可以包括至少一种亲水性聚合化合物，该亲水性聚合化合物选自树胶、纤维素醚、丙烯酸树脂、碳水化合物载体、滑石、乳糖、甘露醇、葡萄糖、水、明胶、蛋白质衍生的化合物、聚乙烯吡咯烷酮、硬脂酸镁及其任意组合。稀释剂/载体的非限制性实例在整个说明书中进行了限定并通过引用并入本部分。这类成分的量以组合物的重量或体积计可以为0.0001％至99.9％，或者是如本说明书其它部分中所公开的任何整数或范围，这些数值或范围通过引用并入本段。

组合物可在室温下储存一个月、6个月、12个月、18个月或24个月。在本发明的一些方面，组合物被配制成散剂、片剂、明胶胶囊、珠(bead)、可食用片剂、可溶解膜剂、能够在空气中分散的液体、凝胶剂、洗剂、经皮贴剂或液体溶液，用于经口施用。在本发明的一些方面，配制的组合物可包含在固体纳米颗粒、含脂质的纳米颗粒、基于脂质的载体、密封导管、吸管、密封袋或其任意组合中。在本发明的其它方面，组合物可被配制用于通过注射施用。

还设想了包含本发明组合物的试剂盒。在某些实施方案中，组合物包含在容器中。容器可以是瓶子、分配器、包、或吸管。容器可以分配预定量的组合物。在某些方面，组合物被分配为丸剂、片剂、胶囊、经皮贴剂、可食用咀嚼物、乳膏、洗剂、凝胶、喷雾剂、雾剂、团块、散剂或液体。容器可以在其表面上包含标记。该标记可以是字词、缩写、图片或符号。

设想对于本发明的任何方法或组合物，可以实施本说明书中所讨论的任何实施方案，反之亦然。此外，本发明的组合物可以用于实现本发明的方法。

还设想了一种包含本发明的组合物的产品。在非限制性方面，该产品可以是营养产品。该营养产品可以是本说明书其它部分所述的那些，或是本领域技术人员已知的那些。在其它非限制性方面，该产品可以是药物产品。药物产品和/或营养产品可以是本说明书其它部分所述的那些，或是本领域技术人员已知的那些。产品的非限制性实例包括丸剂、片剂、可食用咀嚼物、胶囊、乳膏、洗剂、凝胶、喷雾剂、雾剂、溶解膜剂、经皮贴剂或液体等。

还公开了本发明的以下实施方案1至实施方案66。实施方案1的组合物包括以下生物标志物的任一种、或任意组合、或全部：生物标志物11，其具有232.146amu的精确质量并且具有至少2.53％的相对丰度；生物标志物1，其具有146.113amu的精确质量并且具有至少0.20％的相对丰度；生物标志物2，其具有160.116amu的精确质量并且具有至少0.51％的相对丰度；生物标志物3，其具有176.128amu的精确质量并且具有至少0.35％的相对丰度；生物标志物4，其具有178.129amu的精确质量并且具有至少0.30％的相对丰度；生物标志物5，其具有180.106amu的精确质量并且具有至少0.10％的相对丰度；生物标志物6，其具有194.131amu的精确质量并且具有至少0.21％的相对丰度；生物标志物7，其具有198.146amu的精确质量并且具有至少2.86％的相对丰度；生物标志物8，其具有204.188amu的精确质量并且具有至少4.51％的相对丰度；生物标志物9，其具有218.167amu的精确质量并且具有至少88.89％的相对丰度；生物标志物10，其具有220.178amu的精确质量并且具有至少5.15％的相对丰度；生物标志物12，其具有234.166amu的精确质量并且具有至少8.04％的相对丰度；生物标志物13，其具有236.177amu的精确质量并且具有至少0.80％的相对丰度；生物标志物14，其具有238.191amu的精确质量并且具有至少0.13％的相对丰度；生物标志物15，其具有248.145amu的精确质量为并且具有至少0.54％的相对丰度；生物标志物16，其具有268.189amu的精确质量并且具有至少0.18％的相对丰度；生物标志物17，其具有316.209amu的精确质量并且具有至少0.20％的相对丰度；生物标志物18，其具有326.234amu的精确质量并且具有至少0.28％的相对丰度；生物标志物19，其具有334.212amu的精确质量并且具有至少0.16％的相对丰度；生物标志物20，其具有350.230amu的精确质量并且具有至少0.21％的相对丰度；生物标志物21，其具有436.338amu的精确质量并且具有至少0.90％的相对丰度；其中生物标志物存在于姜黄中，并且其中相对丰度是相对于掺入500ng/ml组合物中的25mg/ml水杨酸而言的。实施方案2是实施方案1所述的组合物，其中所含生物标志物的相对丰度为以下：生物标志物11为至多4.70％；生物标志物1为至多0.37％；生物标志物2为至多0.94％；生物标志物3为至多0.65％；生物标志物4为至多0.55％；生物标志物5为至多0.19％；生物标志物6为至多0.39％；生物标志物7为至多5.32％；生物标志物8为至多8.38％；生物标志物9为至多165.08％；生物标志物10为至多9.56％；生物标志物12为至多14.94％；生物标志物13为至多1.49％；生物标志物14为至多0.25％；生物标志物15为至多1.01％；生物标志物16为至多0.33％；生物标志物17为至多0.38％；生物标志物18为至多0.52％；生物标志物19为至多0.30％；生物标志物20为至多0.39％；生物标志物21为至多1.66％；其中相对丰度是相对于掺入500ng/ml组合物中的25mg/ml水杨酸而言的。实施方案3是实施方案1至实施方案2中任一项的组合物，其还包含精确质量为216.151amu的生物标志物22。实施方案4是实施方案3的组合物，其包含至少5.54μg/ml的生物标志物22。实施方案5是实施方案3至实施方案4中任一项的组合物，其中组合物包含至多10.29μg/ml的生物标志物22。实施方案6是实施方案1至实施方案5中任一项的组合物，其包含生物标志物1至生物标志物22的至少2种、3种、4种、5种、6种、7种、8种、9种、10种、11种、12种、13种、14种、15种、16种、17种、18种、19种、20种、21种、或22种。实施方案7是实施方案1至实施方案6中任一项的组合物，其中每种生物标志物的质量是由实时直接分析tof(dart-tof)质谱仪测定的质量。实施方案8是实施方案1至实施方案7中任一项的组合物，其中生物标志物的至少一种是合成获得的。实施方案9是实施方案1至实施方案8中任一项的组合物，其中生物标志物的至少一种是从植物分离的。实施方案10是实施方案9的组合物，其中生物标志物的至少一种是从姜黄分离的。实施方案11是实施方案1至实施方案10中任一项的组合物，其中组合物具有至少90％、优选至少95％或至少98％的生物标志物相对丰度的批次间化学一致性。实施方案12是实施方案1至实施方案11中任一项的组合物，其中组合物还包含防腐剂。实施方案13是实施方案1至实施方案12中任一项的组合物，其中组合物还包含至少一种药物。实施方案14是实施方案1至实施方案13中任一项的组合物，其中组合物还包含至少一种抗炎药。实施方案15是实施方案14的组合物，其中至少一种抗炎药是非甾体抗炎药。实施方案16是实施方案15的组合物，其中非甾体抗炎药是乙酰水杨酸、布洛芬、酮洛芬、萘普生、一种或多于一种缓解疾病的抗风湿药(dmard)、它们的盐、或其任意组合。实施方案17是实施方案14的组合物，其中至少一种抗炎药是氨甲蝶呤、其盐、或其任意组合。实施方案18是实施方案14的组合物，其中至少一种抗炎药是缓解疾病的抗风湿药(dmard)。实施方案19是实施方案18的组合物，其中dmard是生物制剂dmard(生物药dmard)。实施方案20是实施方案19的组合物，其中生物药dmard是阿达木单抗、其盐、或其任意组合。实施方案21是实施方案1至实施方案20中任一项的组合物，其中组合物被配制用于经口施用。实施方案22是实施方案21的组合物，其中组合物是锭剂、散剂、片剂、明胶胶囊、凝胶剂、液体溶液、糖浆剂、油剂和/或可溶解膜剂。实施方案23是实施方案1至实施方案20中任一项的组合物，其中组合物被配制用于通过注射施用。实施方案24是实施方案1至实施方案20中任一项的组合物，其中组合物被配制用于局部施用和/或经鼻施用。实施方案25是实施方案1至实施方案24中任一项的组合物，其中组合物被配制用于减少炎症。实施方案26是实施方案1至实施方案25中任一项的组合物，其中组合物被配制用于抑制至少一种促炎性细胞因子。实施方案27是实施方案26的组合物，其中组合物被配制用于抑制tnf-α和/或il-6。实施方案28是实施方案1至实施方案27中任一项的组合物，其中组合物被配制用于抑制前列腺素。实施方案29是实施方案1至实施方案28中任一项的组合物，其中组合物被配制用于抑制pge-2。实施方案30是实施方案1至实施方案29中任一项的组合物，其中组合物被配制用于治疗类风湿性关节炎。实施方案31是实施方案1至实施方案30中任一项的组合物，其中组合物被配制用于预防类风湿性关节炎。实施方案32是实施方案1至实施方案31中任一项的组合物，其中组合物被配制用于治疗多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎。实施方案33是实施方案1至实施方案32中任一项的组合物，其中组合物被配制用于预防多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎。实施方案34是用于治疗存在患有以下疾病的任何一种或多于一种的风险或患有以下疾病的任何一种或多于一种的对象的方法：多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎，该方法包括将实施方案1至实施方案33的任一种组合物施用于对象，其中所述疾病的至少一种症状在对象中得以改善和/或与患者未接受治疗时所述疾病的预期发作相比，所述疾病的发作延迟。在实施方案35是实施方案34的方法，其中对象接受类风湿性关节炎治疗或患有类风湿性关节炎，该方法包括将实施方案1至实施方案33的任一种组合物施用于对象，其中至少一种类风湿性关节炎的症状在对象中得以改善和/或与患者未接受治疗时类风湿性关节炎的预期发作相比，类风湿性关节炎的发作延迟。实施方案36是实施方案35的方法，其中对象被诊断为患有类风湿性关节炎。实施方案37是实施方案34的方法，其中对象接受针对以下疾病的任何一种或多于一种的治疗或患有以下疾病的任何一种或多于一种：多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎，该方法包括将实施方案1至实施方案33的任一种组合物施用于对象，其中所述疾病的至少一种症状在对象中得以改善和/或与患者未接受治疗时所述疾病的预期发作相比，所述疾病的发作延迟。实施方案38是实施方案35的方法，其中对象被诊断为患有多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎。实施方案39是实施方案34至实施方案38中任一项的方法，其中在24小时期间向对象施用总量为1mg至10000mg、10mg至5000mg、50mg至2500mg或100mg至1000mg的生物标志物。实施方案40是实施方案34至实施方案39中任一项的方法，其中生物标志物1至生物标志物22的至少一种是合成获得的。实施方案41是实施方案34至实施方案40中任一项的方法，其中生物标志物1至生物标志物22的至少一种是从植物分离的。实施方案42是实施方案41的方法，其中生物标志物的至少一种是从姜黄分离的。实施方案43是实施方案34至实施方案42中任一项的方法，其中组合物具有至少95％的生物标志物相对丰度的批次间化学一致性。实施方案44是实施方案34至实施方案43中任一项的方法，其中组合物还包含至少一种抗炎药。实施方案45是实施方案44的方法，其中至少一种抗炎药是非甾体抗炎药。实施方案46是实施方案45的方法，其中非甾体抗炎药是乙酰水杨酸、布洛芬、酮洛芬、萘普生、一种或多于一种缓解疾病的抗风湿药(dmard)、它们的盐、或其任意组合。实施方案47是实施方案44的方法，其中至少一种抗炎药是氨甲蝶呤、其盐、或其任意组合。实施方案48是实施方案44的方法，其中至少一种抗炎药是缓解疾病的抗风湿药(dmard)。实施方案49是实施方案48的方法，其中dmard是生物制剂dmard(生物药dmard)。实施方案50是实施方案49的方法，其中生物药dmard是阿达木单抗、其盐、或其任意组合。实施方案51是实施方案34至实施方案50中任一项的方法，其中组合物经口施用。实施方案52是实施方案51的方法，其中组合物以锭剂、散剂、片剂、明胶胶囊、凝胶剂、液体溶液、糖浆剂、油剂和/或可溶解膜剂施用。实施方案53是实施方案34至实施方案50中任一项的方法，其中组合物通过注射施用。实施方案54是实施方案34至实施方案50中任一项的方法，其中组合物通过局部施用和/或经鼻施用。实施方案55是实施方案34至实施方案54中任一项的方法，其中促炎性细胞因子受到抑制。实施方案56是实施方案55的方法，其中tnf-α和/或il-6受到抑制。实施方案57是实施方案34至实施方案56中任一项的方法，其中前列腺素受到抑制。实施方案58是实施方案34至实施方案57中任一项的方法，其中pge-2受到抑制。实施方案59是减少对象中的炎症的方法，该方法包括将实施方案1至实施方案33中任一项的组合物施用于对象，其中对象中的炎症减少。实施方案60是预防对象中的炎症的方法，该方法包括将实施方案1至实施方案33中任一项的组合物施用于对象，其中对象种的炎症得到预防。实施方案61是抑制对象中促炎性细胞因子产生和/或分泌的方法，该方法包括将实施方案1至实施方案33中任一项的组合物施用于对象，其中促炎性细胞因子的产生和/或分泌减少。实施方案62是实施方案61的方法，其中促炎性细胞因子是tnf-α。实施方案63是实施方案61至实施方案62中任一项的方法，其中促炎性细胞因子是il-6。实施方案64是抑制对象中前列腺素产生和/或分泌的方法，该方法包括将实施方案1至实施方案33中任一项的组合物施用于对象，其中前列腺素的产生和/或分泌减少。实施方案65是实施方案64的方法，其中前列腺素是pge-2。实施方案66是制备实施方案1至实施方案33中任一项的组合物的方法，其中该制备方法产生具有至少90％、优选至少95％或至少98％的生物标志物相对丰度的批次间化学一致性的组合物。

“治疗剂”包括本文特别要求保护的化合物。它还包括这些化合物及其营养学和/或药学上可接受的盐。可用的盐是本领域技术人员已知的，并且包括无机酸盐、有机酸盐、无机碱盐或有机碱盐。可用于本发明的治疗剂是那些在施用到人或动物后，无论是单独使用还是与其它营养学和/或药学赋形剂或惰性成分联合使用均产生预期的、有益的和通常有药理学作用的化合物。

术语“生物标志物”是指定义为生物标志物的化合物、其类似物、其衍生物、其盐形式、或其任何类似物或衍生物的盐形式。

术语“精确质量”是指通过实验确定的已知电荷离子的分子的测量质量。精确质量的单位包括原子质量单位(amu)和毫质量单位(mmu)。术语“分子量”是指化合物中所有不同的同位素组成按其天然丰度进行加权的分子的平均重量。

术语“相对丰度”是指相对于参比化合物的丰度而言的感兴趣化合物的丰度。在特定方面，相对丰度是相对于参比化合物质谱峰的原始强度而言的感兴趣化合物质谱峰的原始强度。在一个非限制性实例中，质谱峰可以通过使用dart-tof质谱法获得。在另一个特定方面，参比化合物是掺入或掺杂到含有感兴趣化合物的样品中的化合物。在另一个特定方面，参比化合物是在添加到样品之前在样品中不存在的用于确定相对丰度的化合物。在另一个热定方面，参比化合物可以是水杨酸。

术语“基本上”及其变型定义为如本领域普通技术人员所理解的指定事物的大部分而不必是全部，并且在一个非限定性实施方案中，“基本上”涉及10％以内、5％以内、1％以内或0.5％以内的范围。

“患者”、“对象”或“个体”是指哺乳动物(例如人类、灵长类动物、狗、猫、牛、绵羊、猪、马、小鼠、大鼠、仓鼠、兔或豚鼠)。在特定方面，患者、对象或个体是人。

“抑制”或“减少”或这些术语的任何变型包括为达到预期结果的任何可测量的减少或完全抑制。术语“促进”或“增加”或这些术语的任何变型包括为达到预期结果的蛋白质或分子的任何可测量的增加或产生。

“有效”或该术语的任何变型表示足以达到预期的、期望的或希望的结果。结果可包括但不限于活性、产生、疾病、病症或症状的任何可测量的变化。

“治疗”或该术语的任何变型包括正在接受治疗的疾病、病症或症状或与正在接受治疗的疾病、病症或症状相关的任何可测量的改善。

“预防”或该术语的任何变型意味着减缓、停止或逆转向某一结果的进展。预防可以是对结果的任何进展的减缓。

当提及化合物时，“类似物”是指改性化合物，其中一个或多于一个原子被其它原子取代，或其中一个或多于一个原子从该化合物中删除，或其中一个或多于一个原子被添加到该化合物中，或这些修饰的任意组合。原子的这种添加、删除或取代可以发生在沿着构成化合物的主要结构的任一点或多个点处。

关于母体化合物的“衍生物”是指经化学修饰的母体化合物或其类似物，其中至少一个取代基不存在于母体化合物或其类似物中。一个这样的非限制性实例是经共价修饰的母体化合物。典型的修饰是酰胺、碳水化合物、烷基、酰基、酯、聚乙二醇修饰等。

“治疗上等效的”化合物是一种在治疗疾病或病症方面与一种或多于一种其它化合物具有基本上相同效果的化合物。治疗上等效的化合物可以是或可以不是化学等效的、生物等效的或属类等效的。

“肠胃外注射”是指在动物如人的一层或多于一层皮肤或黏膜下或者穿过动物如人的一层或多于一层皮肤或黏膜，通过注射施用小分子药物。

“生物利用度”是指治疗剂从制剂中被吸收的程度。

“药学上可接受的载体”是指用于将本发明的组合物或药物化合物递送到动物如哺乳动物或人的药学上可接受的溶剂、助悬剂或载剂。

“营养上可接受的载体”是指用于将本发明的化合物递送到动物如哺乳动物或人的营养上可接受的溶剂、助悬剂或载剂。

“药学上可接受的”成分、赋形剂或组分是适合用于人类和/或动物而没有与合理的获益/风险比相对应的过度的不良副作用(例如毒性、刺激和过敏反应)的成分、赋形剂或组分。

“营养上可接受的”成分、赋形剂或组分是适合用于人类和/或动物而没有与合理的获益/风险比相对应的过度的不良副作用(例如毒性、刺激和过敏反应)的成分、赋形剂或组分。

术语“大约”或“约”或“基本上不变”定义为如本领域普通技术人员所理解的接近于，并且在一个非限制性实施方式中，该术语定义为在10％以内，优选在5％以内，更优选在1％以内，最优选在0.5％以内。另外，“基本上无水”是指水的重量或体积小于5％、4％、3％、2％、1％或更小。

当在权利要求和/或说明书中与术语“包含”一起使用时，要素前面不使用数量词可以表示“一个”，但是其也符合“一个或更多个”、“至少一个”和“一个或多于一个”的意思。

如本说明书和权利要求所使用的，词语“包含”、“具有”、“包括”或“含有”是包括性的或开放式的，并且不排除附加的、未列举的要素或方法步骤。

组合物及其使用方法可以“包括”本说明书全文篇所公开的成分或步骤的任一个、“基本上由所述成分或步骤的任一个组成”或“由所述成分或步骤的任一个组成”。关于“基本上由......组成”的过渡阶段，在一个非限制性方面，本说明书中公开的组合物和方法的基本和新颖特征包括组合物能够减少或预防炎症、类风湿性关节炎、类风湿性关节炎类症状和/或相关症状和/或病因，例如但不限于炎症。

本发明的其它目的、特征和优点通过下面的详细描述会变得明显。然而，应理解，详细的描述和实施例在表明本发明的具体实施方案时仅以举例说明的方式给出。另外，期望通过该详细描述，本发明的精神和范围内的变化和修改对于本领域技术人员会变得明显。

附图说明

以下附图形成本说明书的一部分，并被包含以进一步说明本发明的特定方面。通过参照这些附图的一个或多于一个，结合本文所提供的具体实施方案的详细说明可以更好地理解本发明。

图1、hsrx458抑制tnf-α从经lps激发的细胞中释放的百分比。

图2、hsrx458抑制il-6从经lps激发的细胞中释放的百分比。

图3、hsrx458抑制pge-2从经lps激发的细胞中释放的百分比。

具体实施方式

发明人惊奇地发现，可在姜黄中发现的几种化合物的组合可以预防和治疗类风湿性关节炎和炎症。本发明人还发现化合物的特定相对浓度能够增强组合化合物预防和治疗类风湿性关节炎和炎症的能力。此外，本发明人已经发现，将本发明化合物和其它药物一起使用可增强组合化合物预防和治疗类风湿性关节炎和炎症的能力。

本文公开的化合物和组合物能够治疗、缓解并预防与类风湿性关节炎和炎症相关的症状以及与服用治疗类风湿性关节炎和炎症的药物相关的副作用。类风湿性关节炎的症状和/或病因的非限制性实例包括滑膜炎症、骨质糜烂、关节畸形、疼痛、骨质疏松症、腕管综合症、动脉硬化闭塞、包围心脏的囊的炎症、肺组织的炎症和瘢痕形成、疲劳、发热、体重减轻、手臂皮肤下组织的肿块、关节僵硬、以及关节的触痛、发热和肿胀。

发明人还惊奇地发现，本文公开的化合物和组合物可以预防和治疗以下疾病：多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎。不希望受理论束缚，认为本文公开的化合物和组合物的至少一些作用机制包括那些解决这些疾病的潜在病因或症状的作用机制。此外，预期本发明的化合物和组合物与另外的药物一起使用将会增强组合化合物预防和治疗疾病的能力。

a.组合物的化合物

在一些方面，本发明的组合物可以包含一种或多于一种存在于姜黄中的生物标志物及其组合，其精确质量被确定为146.113amu、160.116amu、176.128amu、178.129amu、180.106amu、194.131amu、198.146amu、204.188amu、216.151amu、218.167amu、220.178amu、232.146amu、234.166amu、236.177amu、238.191amu、248.145amu、268.189amu、316.209amu、326.234amu、334.212amu、350.230amu、436.338amu。不希望受到理论束缚，认为这些生物标志物减少炎症。

在特定的实施方案中，生物标志物或生物标志物的组合具有90％的生物标志物相对丰度的批次间化学一致性。在另一个特定的实施方案中，化合物或化合物的组合具有95％和/或98％的生物标志物相对丰度的批次间化学一致性。

在本发明的一些方面，组合物的化合物及其衍生物和类似物可以通过已知的合成方法制备。在本发明的一些方面，可以通过根据化学合成领域技术人员已知的方法产生化合物和/或组合物来合成获得组合物的化合物和/或组合物。在一些方面，化合物和/或组合物可以通过有机化学方法来合成。

在本发明的一些方面，组合物的化合物和/或组合物可以从生物体的提取物中分离，生物体例如为果实、植物、动物、真菌、细菌和/或古细菌。植物的非限制性实例包括姜黄。组合物的化合物或组合物可以使用已知的提取方法从生物体中提取。能够产生本文公开的组合物的提取物的非限制性实例包括使提取物与co2在35℃至70℃和50巴至350巴下接触，或使提取物与h2o或etoh:h2o的任何组合接触，并将提取物与方法中使用的任何聚合物分离。用于聚合物分离的聚合物的非限制性实例是ads5聚合物(南开大学，中国)。提取物可以包括化合物的任一种或化合物的组合，存在于姜黄中的化合物的精确质量被确定为146.113amu、160.116amu、176.128amu、178.129amu、180.106amu、194.131amu、198.146amu、204.188amu、216.151amu、218.167amu、220.178amu、232.146amu、234.166amu、236.177amu、238.191amu、248.145amu、268.189amu、316.209amu、326.234amu、334.212amu、350.230amu、和436.338amu。

在本发明的一些方面，组合物的化合物的一种或多于一种及其衍生物和类似物可以通过本领域技术人员已知的合成方法来制备，并且组合物的化合物的一种或多于一种及其衍生物和类似物可以从其它来源分离，例如但不限于果实和植物的提取物。

b.由darttof/ms确定的活性物质

本文所述的精确质量和相对丰度是基于使用特定仪器和特定设置的实验，并且可以在不同的仪器之间发生变化。每次测量存在可变性。因此，精确质量和相对丰度被定义为接近于如本领域普通技术人员所理解的。在一个非限制性实施方案中，该术语被定义为在20％以内，优选在10％以内，优选在5％以内，更优选在1％以内，最优选在0.5％以内。在一个非限制性实施方案中，精确质量的误差在+/-20mmu以内，优选10mmu以内，更优选在5mmu以内，最优选在1mmu以内。在一个非限制性实施方案中，相对丰度的误差为+/-20％，优选为l0％，优选在5％以内，更优选在1％以内，最优选在0.5％以内。

在一个非限制性实例中，可以使用实时直接分析(dart)飞行时间质谱法(tof/ms)来鉴定本发明的化合物。具体地，可以使用来自美国马萨诸塞州皮博迪jeolusa的jeoldart^tmaccutof-质谱仪(jms-t100lc)。可以通过借助dip-it取样器和dip-it取样器支架(ionsense^tm)将样品直接引入离子流，从而在样品中测定化合物的质量。虽然使用dart进行简单分析不需要进行样品制备，但化学掺杂/掺入的溶液可用于相对于已知量进行定量。作为非限制性实例，参比化合物在添加以用作参比之前不存在于样品中，并且因此可用于产生生物活性分子的定量化学谱。dart离子源的设置可以如下：

气体：he

流速：2.52lpm@50psi

温度：250℃

针电压：3000v

栅极电压：250v

放电电极电压：400v

jeolaccutofms的设置可以如下：

峰电压：1000v

孔1温度：120℃

检测器电压：2600v

反射器电压：990.0v

样品可以通过dart-tofms在六次重复中分析。可以分析这六个重复以产生样品的单个、平均、过滤和统计学上显著的dart指纹图谱。然后，通过比较质量，可以使用该处理过的指纹图谱来确定生物活性标志物的存在。由于初步发现并鉴定了这些生物活性标志物，因此简单的质量比较足以确定它们是否存在于任何提取物或化学品混合物中。

所有质谱仪都具有质量公差，即围绕预测的[m+h]值或[m-h]值的可接受报告质量范围。对于accutof，质量公差小于20毫质量单位(mmu)(预测质量+/-10mmu)。给定相同的样品和离子源，其它tof-ms可具有更高或更低的质量公差。

在另一个非限制性实例中，本发明化合物可通过使用jeoldart^tmaccutof-质谱仪进行darttof/ms测定，所述质谱仪来自美国马萨诸塞州皮博迪jeolusa(jms-t100lc)，并以正离子模式([m+h]⁺)使用以下dart离子源设置：

气体：he

流速：3.98l/分钟

针电压：3500v

温度：300℃

电极1电压：150v

电极2电压：250v，

jeolaccutofms的设置可以如下：

峰电压：1000v

孔1电压：20v

环形透镜电压：5v

孔2电压：5v

检测器电压：2550v

可以使用来自罗德岛州北金斯敦ultrachemical的10％(重量/体积)peg600溶液对每个样品进行内部校准，其提供的质量标志物在100amu至1000amu的要求质量范围内。校准公差可以保持为5mmu。可以使用硼硅酸盐玻璃熔点毛细管的封闭端将样品引入darthe等离子体，直到在总离子色谱图(tic)中获得信号。然后，当tic返回基线水平时，可以引入下一个样品。

c.抗炎剂

预期本发明的组合物可以包含抗炎剂。抗炎剂是用于减少对象中炎症反应或减少炎症反应的影响的化合物或组合物。抗炎剂的非限制性实例包括皮质类固醇和非甾体抗炎药。非甾体抗炎药的非限制性实例包括乙酰水杨酸、布洛芬、酮洛芬、萘普生和dmard(例如生物制剂dmard)、阿达木单抗、氨甲蝶呤、来氟米特、羟化氯喹、柳氮磺胺吡啶、阿巴西普、阿那白滞素、赛妥珠单抗、依那西普、戈利木单抗、英夫利昔单抗、利妥昔单抗、托珠单抗和托法替尼。一些抗炎药抑制cox1或cox2或其途径。一些抗炎药抑制5lox或5lox途径。一些抗炎剂减少促炎性细胞因子，例如tnf-α和/或il-6。在一些实施方案中，本文公开的组合物还包含至少一种另外的抗炎剂，其可以是但不限于乙酰水杨酸、布洛芬、酮洛芬、萘普生、氨甲蝶呤、和生物制剂dmard如阿达木单抗、或其任意组合。

d.成分的量

预期本发明的组合物可以包含本说明书所讨论的成分的任意量。组合物还可以包含本说明书全文描述的任何数量的其它成分的组合(例如，稳定剂、填充剂、药学上和/或营养学上可接受的盐、和/或另外的药学和/或营养学成分)。该组合物中任何成分的浓度可以改变。例如在非限制性实施方案中，组合物在其最终形式中可以包含整个说明书和权利要求中提到的至少一种成分、基本上由该至少一种成分组成、或由该至少一种成分组成，该至少一种成分的含量为例如至少约0.0001％、0.0002％、0.0003％、0.0004％、0.0005％、0.0006％、0.0007％、0.0008％、0.0009％、0.0010％、0.0011％、0.0012％、0.0013％、0.0014％、0.0015％、0.0016％、0.0017％、0.0018％、0.0019％、0.0020％、0.0021％、0.0022％、0.0023％、0.0024％、0.0025％、0.0026％、0.0027％、0.0028％、0.0029％、0.0030％、0.0031％、0.0032％、0.0033％、0.0034％、0.0035％、0.0036％、0.0037％、0.0038％、0.0039％、0.0040％、0.0041％、0.0042％、0.0043％、0.0044％、0.0045％、0.0046％、0.0047％、0.0048％、0.0049％、0.0050％、0.0051％、0.0052％、0.0053％、0.0054％、0.0055％、0.0056％、0.0057％、0.0058％、0.0059％、0.0060％、0.0061％、0.0062％、0.0063％、0.0064％、0.0065％、0.0066％、0.0067％、0.0068％、0.0069％、0.0070％、0.0071％、0.0072％、0.0073％、0.0074％、0.0075％、0.0076％、0.0077％、0.0078％、0.0079％、0.0080％、0.0081％、0.0082％、0.0083％、0.0084％、0.0085％、0.0086％、0.0087％、0.0088％、0.0089％、0.0090％、0.0091％、0.0092％、0.0093％、0.0094％、0.0095％、0.0096％、0.0097％、0.0098％、0.0099％、0.0100％、0.0200％、0.0250％、0.0275％、0.0300％、0.0325％、0.0350％、0.0375％、0.0400％、0.0425％、0.0450％、0.0475％、0.0500％、0.0525％、0.0550％、0.0575％、0.0600％、0.0625％、0.0650％、0.0675％、0.0700％、0.0725％、0.0750％、0.0775％、0.0800％、0.0825％、0.0850％、0.0875％、0.0900％、0.0925％、0.0950％、0.0975％、0.1000％、0.1250％、0.1500％、0.1750％、0.2000％、0.2250％、0.2500％、0.2750％、0.3000％、0.3250％、0.3500％、0.3750％、0.4000％、0.4250％、0.4500％、0.4750％、0.5000％、0.5250％、0.0550％、0.5750％、0.6000％、0.6250％、0.6500％、0.6750％、0.7000％、0.7250％、0.7500％、0.7750％、0.8000％、0.8250％、0.8500％、0.8750％、0.9000％、0.9250％、0.9500％、0.9750％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3.0％、3.1％、3.2％、3.3％、3.4％、3.5％、3.6％、3.7％、3.8％、3.9％、4.0％、4.1％、4.2％、4.3％、4.4％、4.5％、4.6％、4.7％、4.8％、4.9％、5.0％、5.1％、5.2％、5.3％、5.4％、5.5％、5.6％、5.7％、5.8％、5.9％、6.0％、6.1％、6.2％、6.3％、6.4％、6.5％、6.6％、6.7％、6.8％、6.9％、7.0％、7.1％、7.2％、7.3％、7.4％、7.5％、7.6％、7.7％、7.8％、7.9％、8.0％、8.1％、8.2％、8.3％、8.4％、8.5％、8.6％、8.7％、8.8％、8.9％、9.0％、9.1％、9.2％、9.3％、9.4％、9.5％、9.6％、9.7％、9.8％、9.9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、35％、40％、45％、50％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、或99％、或其中可衍出的任何范围。在非限制性方面，该百分比可以按整个组合物的重量或体积或相对丰度进行计算。本领域普通技术人员应当理解，给定组合物中的浓度可以根据成分的添加、替换和/或减少而改变。

e.附加组分

本发明化合物可以配制成任何合适的组合物形式用来施用给人类患者或非人患病动物。

根据给药方式和剂型的性质，组合物可以单独由要求保护的化合物组成，或者可以包含化合物和任何合适的其它组分，例如一种或多于一种药学上和/或营养学上可接受的载体、稀释剂、辅助剂、赋形剂、或载剂，例如防腐剂、填充剂、崩解剂、润湿剂、乳化剂、助悬剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、抗菌剂、抗真菌剂、润滑剂和分配剂。在与制剂的其它成分相容并且对患者无害的意义上，每种载体都是可接受的。

2、赋形剂

用于本发明组合物中的赋形剂可以是固体、半固体、液体或其组合。优选地，赋形剂是固体。含有赋形剂的本发明组合物可通过任何已知技术制备，所述技术包括例如将赋形剂与要求保护的化合物混合。本发明的药物组合物每剂量单位含有所需量的要求保护的化合物，并且如果用于经口给药，可以是例如片剂、囊片、丸剂、硬胶囊或软胶囊、锭剂、扁囊剂、可分配的散剂、颗粒剂、混悬剂、酏剂、油剂、分散剂的形式或合理地适合于这种给药方式的任何其它形式。如果用于经鼻给药，它可以是例如干粉、喷雾剂的形式或合理地适合于这种给药方式的任何其它形式。如果用于肠胃外给药，它可以是例如混悬剂、经皮贴剂的形式或合理地适合于这种给药方式的任何其它形式。如果用于直肠给药，它可以是例如栓剂的形式或合理地适合于这种给药方式的任何其它形式。目前特有的是经口剂型，它们是离散剂量单位，每个剂量单位含有预定量的要求保护的化合物，例如片剂或胶囊。

3、载体/稀释剂

合适的载体或稀释剂说明性地包括但不限于单独的以下物质或以下物质的组合：乳糖(包括无水乳糖和乳糖一水合物)、淀粉(包括可直接压缩的淀粉和水解淀粉(例如，celutab^tm和emdex^tm))、甘露醇、山梨糖醇、木糖醇、葡萄糖(例如cerelose^tm2000)和葡萄糖一水合物、磷酸氢钙二水合物、基于蔗糖的稀释剂、糖粉、硫酸钙一水合物、硫酸钙二水合物、颗粒状乳酸钙三水合物、葡萄糖结合剂(dextrates)、肌醇、水解谷物固体、直链淀粉、纤维素(包括微晶纤维素、食品级α-纤维素和无定形纤维素来源(如rexcelj)、粉状纤维素、羟丙基纤维素(hpc)和羟丙基甲基纤维素(hpmc))、碳酸钙、甘氨酸、粘土、膨润土、嵌段共聚物、聚乙烯吡咯烷酮等。这些载体或稀释剂如果存在，则总计占组合物总重量的约5％至约99.999％、约10％至约85％、和20％至约80％。所选择的载体或稀释剂优选表现出合适的流动性和在需要制成片剂时的可压缩性。

4、崩解剂

本发明的组合物任选地可包含一种或多于一种药学上和/或营养学上可接受的崩解剂作为赋形剂，特别是用于片剂制剂。合适的崩解剂包括但不限于单独的以下物质或以下物质的组合：淀粉(包括羟基乙酸淀粉钠和预胶化玉米淀粉)、黏土、纤维素(如经纯化的纤维素、微晶纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素和羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素钠)、海藻酸盐、交聚维酮、和树胶(如琼胶、瓜尔胶、槐豆胶、刺梧桐胶、果胶和黄芪胶)。崩解剂可以在组合物制备期间的任何合适步骤加入，特别是在制粒之前或在压片之前的润滑步骤期间。这些崩解剂如果存在，则总计占组合物总重量的优选约0.2％至约30％、优选约0.2％至约10％、更优选约0.2％至约5％。

5、黏合剂

本发明的组合物可包含特别用于片剂制剂的黏合剂或胶黏剂。这种黏合剂和胶黏剂优选赋予被压片的粉末以足够的内聚力以进行正常的加工操作，例如上浆、润滑、压片和包装，但仍允许片剂崩解并在摄入后使组合物被吸收。一旦盐溶解在溶液中，这种黏合剂还可以防止或抑制本发明的共晶的结晶或重结晶。合适的黏合剂和胶黏剂包括但不限于单独的以下物质或以下物质的组合：阿拉伯胶、黄芪胶、蔗糖、明胶、葡萄糖、淀粉(例如但不限于预胶化淀粉)、纤维素(例如但不限于甲基纤维素和羧甲基纤维素钠(carmellosesodium))、海藻酸和海藻酸盐、硅酸铝镁、peg、瓜尔胶、多糖酸、膨润土、聚维酮、聚甲基丙烯酸酯、hpmc、羟丙基纤维素和乙基纤维素。这些黏合剂和/或胶黏剂如果存在，则总计占药物组合物总重量的优选约0.5％至约25％、优选约0.75％至约15％、更优选约1％至约10％。许多黏合剂是包含酰胺、酯、醚、醇或酮基团的聚合物，并且因此可以包含在本发明的药物组合物中。聚乙烯吡咯烷酮是用于缓释片剂的黏合剂的非限制性实例。聚合物黏合剂可具有不同的分子量、交联度和聚合度。聚合物黏合剂也可以是共聚物，例如含有环氧乙烷和环氧丙烷单元的混合物的嵌段共聚物。给定聚合物中这些单元的比例的变化可能影响性质和性能。

6、润湿剂

润湿剂可用于本发明的组合物中。可以选择润湿剂以保持晶体与水的紧密关联，这种条件可以改善组合物的生物利用度。这种润湿剂也可用于增溶或增加晶体的溶解度。表面活性剂可用作润湿剂。本发明组合物中可用作润湿剂的表面活性剂的非限制性实例包括季铵化合物(例如苯扎氯铵、苄索氯铵和十六烷基氯化吡啶)、二辛基磺基琥珀酸钠、聚氧乙烯烷基苯基醚、泊洛沙姆(聚氧乙烯和聚氧丙烯嵌段共聚物)、聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和油(例如聚氧乙烯(8)辛酸/癸酸单甘油酯和二甘油酯、聚氧乙烯(35)蓖麻油和聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油)、聚氧乙烯烷基醚(例如聚氧乙烯(20)十六烷基十八烷基醚(cetostearylether))、聚氧乙烯脂肪酸酯(例如聚氧乙烯(40)硬脂酸酯)、聚氧乙烯山梨糖醇酯(例如聚山梨酯20和聚山梨酯80)、丙二醇脂肪酸酯(例如丙二醇月桂酸酯)、十二烷基硫酸钠、脂肪酸及其盐(例如油酸、油酸钠和油酸三乙醇胺)、甘油脂肪酸酯(例如甘油单硬脂酸酯)、山梨糖醇酯(例如山梨糖醇单月桂酸酯、山梨糖醇单油酸酯、山梨糖醇单棕榈酸酯和山梨糖醇单硬脂酸酯)、泰洛沙泊、及其混合物。这些润湿剂如果存在，则总计占组合物总重量的优选约0.25％至约15％、优选约0.4％至约10％、更优选约0.5％至约5％。

7、润滑剂

润滑剂可用于本发明的组合物中。合适的润滑剂包括但不限于单独的以下物质或以下物质的组合：山嵛酸甘油酯(glycerylbehapate)、硬脂酸及其盐(包括硬脂酸镁、硬脂酸钙和硬脂酸钠)、氢化植物油、胶态二氧化硅、滑石、蜡、硼酸、苯甲酸钠、乙酸钠、富马酸钠、氯化钠、dl-亮氨酸、peg(例如，dowchemicalcompany的carbowax^tm4000和carbowax^tm6000)、油酸钠、十二烷基硫酸钠和十二烷基硫酸镁。这些润滑剂如果存在，则总计占组合物总重量的优选约0.1％至约10％、优选约0.2％至约8％、更优选约0.25％至约5％。

8、其它试剂

表面活性剂、乳化剂或泡腾剂可用于组合物中。乳化剂可用于帮助溶解软明胶胶囊内的成分。表面活性剂、乳化剂或泡腾剂的非限制性实例包括d-山梨醇、乙醇、卡拉胶、羧乙烯基聚合物、羧甲基纤维素钠、瓜尔胶、甘油、甘油脂肪酸酯、胆固醇、白蜂蜡、二辛基磺基琥珀酸钠、蔗糖脂肪酸酯、硬脂醇、硬脂酸、聚氧乙烯40硬脂酸酯、山梨糖醇倍半油酸酯、十六烷醇、明胶、山梨糖醇脂肪酸酯、滑石、山梨糖醇三油酸酯、石蜡、马铃薯淀粉、羟丙基纤维素、丙二醇、丙二醇脂肪酸酯、果胶、聚氧乙烯(105)聚氧丙烯(5)二醇、聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)二醇、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油40、聚氧乙烯氢化蓖麻油60、聚氧乙烯35蓖麻油、聚山梨酯20、聚山梨酯60、聚山梨酯80、聚乙二醇(macrogol)400、辛基十二醇肉豆蔻酸酯、甲基纤维素、山梨糖醇单油酸酯、甘油单硬脂酸酯、山梨糖醇单棕榈酸酯、山梨糖醇单月桂酸酯、月桂基二甲基氧化胺溶液、十二烷基硫酸钠、聚桂醇、无水碳酸钠、酒石酸、氢氧化钠、经纯化的大豆卵磷脂、大豆卵磷脂、碳酸钾、碳酸氢钠、中链甘油三酯、柠檬酸酐、棉籽油-大豆油混合物和液体石蜡。

f.载剂

各种递送系统是本领域已知的，并且可用于施用本发明的治疗剂或组合物，例如包封在脂质体中、微粒、微囊、受体介导的内吞作用等。给药方法包括但不限于肠胃外、动脉内、肌内、静脉内、经鼻和经口途径。组合物可以以片剂、锭剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、安瓿、栓剂或气雾剂的形式提供。组合物还可以以活性成分的混悬液、溶液和乳液在水性或非水性稀释剂、糖浆剂、油剂、颗粒剂或散剂中的形式提供。

g.剂型和给药

组合物可以是例如，药物组合物(药物)、非处方组合物(otc)、营养品等。本发明的组合物包括适用于鼻、口、或肠胃外途径的制剂。特定途径的非限制性实例包括皮内注射、皮下注射、肌内注射、静脉注射、局部注射、直肠给药、经鼻吸入、吹入、外用(包括经皮、含服和舌下)、阴道给药、肠胃外(包括皮下、肌内、静脉和皮内)给药和肺部给药。制剂可以方便地呈单位剂量形式，并且可以通过本领域熟知的任何方法制备。这些方法包括使活性成分与载体结合的步骤，该载体构成一种或多于一种辅助成分。通常，制剂通过以下方法制备：将活性成分与合适的载体均匀且紧密地结合，然后如果需要使产品成型，载体例如为液体载体或精细粉碎的固体载体或两者。适用于经口给药的本发明的制剂可以呈离散单元，例如胶囊剂、扁囊剂或片剂，各离散单元含有预定量的活性成分，或呈水包油液体乳剂、油包水液体乳剂，或呈水溶液中的补充剂形式，例如茶。活性成分也可以呈大丸剂、药糖剂或糊剂形式。有用的可注射制剂包括化合物组合物在水性或油性载剂中的无菌混悬剂、溶液或乳剂。组合物还可含有配制剂，例如助悬剂、稳定剂和/或分散剂。注射用制剂可以呈单位剂型，例如安瓿或以多剂量容器，并可含有添加的防腐剂。或者，可注射制剂可以以粉末形式提供，用于在使用前与适当的载剂重新调配，适当的载剂包括但不限于无菌无热原的水、缓冲液、葡萄糖溶液等。为此，化合物组合物可通过本领域已知的任何技术如冻干法进行干燥，并在使用前重新调配。

适合口腔内局部给药的制剂包括含有处于调味基质(通常是蔗糖和阿拉伯胶或黄芪胶)中的活性成分的锭剂、含有处于惰性基质(例如明胶和甘油、或蔗糖和阿拉伯胶)中的活性成分的软锭剂(pastille)、含有处于合适的液体载体中的活性成分的漱口药和含有活性成分的巧克力。

本发明的适合局部给药的制剂可以配制成软膏剂、乳膏、混悬剂、洗剂、油剂、散剂、溶液、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油剂。或者，剂型可包括贴剂或敷料，例如浸有活性成分的绷带或黏合膏，和任选的一种或多于一种赋形剂或稀释剂。局部给药制剂优选包含促进活性成分通过皮肤吸收进入血流中的化合物。

其中载体是固体、适合经鼻给药的制剂包含粒度为例如约20微米至约500微米的粗粉末，其以鼻吸的方式给药，即通过鼻腔通道从靠近鼻子的容器中快速吸入粉末。其中载体是液体、适合经鼻给药的制剂的非限制性实例例如为喷雾剂，包括药剂的水性或油性溶液。制剂优选可以包含促进活性成分通过皮肤吸收进入血流中的化合物。

适合肠胃外给药的制剂包括：水性和非水性等渗无菌注射溶液，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质；水性和非水性无菌混悬剂，其可包含助悬剂和增稠剂；以及脂质体或其它微粒系统，其被设计用于使化合物靶向血液组分或一种或多于一种器官。制剂可以以单位剂量或多剂量或多剂量密封容器，例如安瓿和小瓶的形式提供，并且可以在仅需要在使用前立即添加无菌液体载体如注射用水的条件下储存。临时注射溶液和混悬剂可由前述类型的液体、无菌粉末、颗粒剂和片剂制备。

用于经口给药的液体制剂可以为以下形式：例如酏剂、溶液、糖浆剂或混悬剂，或者它们可以呈干燥产品，用于在使用之前与水或其它适当的载剂调配。这种液体制剂可以通过使用药学上和/或营养学上可接受的添加剂的常规方法来制备，药学上和/或营养学上可接受的添加剂例如为混悬剂(例如山梨醇糖浆、纤维素衍生物或氢化可食用脂肪)；乳化剂(例如卵磷脂或阿拉伯胶)；非水性载剂(例如杏仁油、油酯、乙醇或分馏植物油)；和防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸)。该制剂还可以视情况包含缓冲盐、防腐剂、调味剂、着色剂和甜味剂。

对于含服给药，组合物形式的非限制性实例可以是以常规方法配制的片剂或锭剂。

对于直肠和阴道给药途径，化合物组合物可被配制为含有常规栓剂基质例如可可油或其它甘油酯的溶液(用于灌肠剂)栓剂或软膏剂。

对于经鼻给药或通过吸入或吹入给药，可以从使用适当的推进剂的压力包或喷雾器中以气雾剂喷雾的形式方便地递送化合物组合物，推进剂例如为二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、碳氟化合物、二氧化碳或其它合适的气体。在压力气雾剂的情况下，可以通过提供用于定量递送的阀来确定剂量单位。用于吸入或吹入的胶囊和药盒(例如由明胶构成的胶囊和药盒)可被配制为含有该化合物和适当的粉末基质如乳糖或淀粉的粉末混合物。

为了延长递送，化合物组合物可被配制为长效制剂，用于通过植入或肌内注射给药。化合物组合物可使用适当的聚合物材料或疏水性材料(例如，在可接受的油中作为乳液)或离子交换树脂来配制，或配制为微溶的衍生物，例如配制为微溶盐。或者，可以使用经皮递送系统，其被配制为缓慢释放化合物组合物用于经皮吸收的吸盘或贴剂。为此，可以使用渗透促进剂以促进化合物组合物的经皮渗透。在例如美国专利第5407713号；美国专利第5352456号；美国专利第5332213号；美国专利第5336168号；美国专利第5290561号；美国专利第5254346号；美国专利第5164189号；美国专利第5163899号；美国专利第5088977号；美国专利第5087240号；美国专利第5008110号；和美国专利第4921475号中描述了合适的经皮贴剂。

或者，可以采用其它药物递送系统。脂质体和乳剂是可用于递送化合物组合物的递送载剂的公知实例。也可以使用某些有机溶剂，例如二甲基亚砜(dmso)，但通常以更大的毒性为代价。

应当理解，除了上面特别提到的成分之外，可用于本发明的制剂可以包含本领域常见的关于所述制剂类型的其它试剂。例如，适合经口给药的制剂可以包含其它试剂，如甜味剂、增稠剂和调味剂。还意图将本发明的试剂、组合物和方法与其它合适的组合物和疗法组合。

在一个实施方案中，本发明的药物和/或营养组合物可局部施用到需要治疗的区域；这种局部给药可以例如通过局部输注、通过注射、或通过导管来实现。在另一个实施方案中，以特定的方式施用本发明的化合物或组合物，以便在疾病部位达到活性化合物的峰值浓度。疾病部位的峰值浓度可以通过例如静脉注射药剂(任选地在盐水)，或经口施用例如含有活性成分的片剂、胶囊剂或糖浆剂来实现。

h.其它药物和/或营养剂

本发明的药物制剂、otc制剂和/或营养制剂可以与其它药物或生物活性剂同时施用或相继施用。实例包括但不限于抗氧化剂、自由基清除剂、镇痛药、麻醉剂、肛门直肠药、抗组胺剂、抗炎剂(包括非甾体抗炎药)、抗生素、抗真菌剂、抗病毒剂、抗微生物剂、抗癌活性剂、抗肿瘤药、生物活性蛋白和多肽、酶、止血药、类固醇(包括激素和皮质类固醇)等。

i.治疗方法和剂量

特定单位剂量制剂是含有药剂的每日剂量或单位、每日亚剂量、或其适当比例的制剂。治疗量可以凭经验确定，并且将随着所治疗的病理、接受治疗的对象以及药剂的有效性和毒性而变化。类似地，本领域普通技术人员可以容易地确定合适的药剂的剂量和给药方法。

在一些实施方案中，本发明的治疗方法可以包括通过以有效治疗疾病、病况或病症的量向患有此类疾病或病况的对象施用如本文所述的稳定制剂来治疗疾病、病诳或病症。在一些实施方案中，向对象施用包含本文要求保护的化合物的稳定制剂。疾病、病况或病症可以是类风湿性关节炎、和/或具有类似症状的疾病以及相关疾病、病况和病症。对于预防性给药而言，可以将组合物施用于存在发展出前述病症之一的风险的患者。

施用的化合物的量取决于多种因素，包括例如所治疗的具体适应症、给药方式、所期望的获益是预防性的还是治疗性的、所治疗适应症的严重程度以及患者的年龄和体重等。有效剂量的确定熟练掌握在本领域技术人员的能力范围内。在本发明的一些方面，化合物组合物的总剂量通常为患者每天约0.0001mg/kg或0.001mg/kg或0.01mg/kg至患者每天约100mg/kg，但可以更高或更低，这取决于组分的活性、其生物利用度、给药方式和上面讨论的各种因素等其它因素。剂量和间隔可以单独调整以使该化合物的血浆水平足以维持治疗效果或预防效果。例如，化合物可以每周施用一次，每周施用数次(例如，每隔一天一次)，每天施用一次或每天施用多次，这取决于给药方式、所治疗的具体适应症以及处方医师的判断等其它方面。无需过度试验，技术人员将能够优化有效的局部剂量。

j.试剂盒

在本发明的另一个方面，本文描述了用于治疗的疾病、病况或病症的试剂盒。例如，本发明的组合物可以包括在试剂盒内。试剂盒可以包括容器。容器可以包括瓶、金属管、层压管、塑料管、分散器、吸管、压力容器、阻隔容器、包、区室或其它类型的容器，例如其中保留有分散体或组合物或所需的瓶、分散器或包的注射或吹塑塑料容器。试剂盒和/或容器在其表面可以包括标记。例如，标记可以是字词、短语、缩写、图片或符号。

容器可以分配预定量的组合物。在其他实施方案中，可以挤压容器(例如金属管、层压管或塑料管)以分配所需量的组合物。组合物可以被分配为喷雾、气雾剂、液体、流体、半固体、或固体。在特定的实施方案中，组合物被分配为片剂或锭剂。容器可以具有喷雾器、泵或挤压机构。试剂盒还可以包含使用试剂盒组分以及使用包含于容器内的任何其它组合物的说明书。说明书可以包含如何施用、使用和保存组合物的说明。如果需要，组合物可以存在于包或分散器装置中，该包或分散器装置可以包括含有化合物组合物的一种或多于一种单位剂型。例如，包装可以包括金属箔或塑料箔，例如罩板包装。包装或分配器装置可以附带给药说明。

实施例

将通过具体的实施例更详细的描述本发明。以下实施例出于说明的目的而提供，并非以任何方式限制本发明。本领域技术人员将会容易地识别出可以变化或改变从而产生基本相同结果的各种非关键性参数。

实施例1

(通过精确质量和相对丰度表征化合物)

发明人惊奇地发现，几种化合物的组合可以预防和治疗类风湿性关节炎和炎症。本发明人还发现，化合物的特定相对浓度能够增强组合化合物预防和治疗这类疾病的能力。本发明所述组合物包括被确定为存在于姜黄中的化合物的生物标志物化合物，其精确质量为146.113amu、160.116amu、176.128amu、178.129amu、180.106amu、194.131amu、198.146amu、204.188amu、216.151amu、218.167amu、220.178amu、232.146amu、234.166amu、236.177amu、238.191amu、248.145amu、268.189amu、316.209amu、326.234amu、334.212amu、350.230amu、和436.338amu。这些化合物可以通过合成产生或从生物体中分离，生物体例如但不限于姜黄。化合物可以通过本领域技术人员已知的方法表征。

本文所述的精确质量和相对丰度是基于使用特定仪器和特定设置的实验测定，并且可以选择不同的仪器。每次测量存在可变性。因此，精确质量和相对丰度被定义为“接近于”如本领域普通技术人员所理解的。

测量精确质量的方法：对化合物进行表征，并使用实时直接分析(dart)离子源结合飞行时间/质谱法(tof-ms)测定相对丰度。具体地，darttof-ms是来自美国马萨诸塞州皮博迪jeolusa的jeoldart^tmaccutof-质谱仪(jms-t100lc)。通过dip-it取样器和dip-it取样器支架(ionsense^tm)将样品直接引入离子流，从而在姜黄提取物样品中测定化合物的质量。通过从测量的由样品产生的离子的质量中减去质子的质量(1.007825amu)来确定精确质量。

dart离子源的设置如下：

气体：he

流速：2.52lpm@50psi

温度：250℃

针电压：3000v

栅极电压：250v

放电电极电压：400v

jeolaccutofms的设置如下：

峰电压：1000v

孔1温度：120℃

检测器电压：2600v

反射器电压：990.0v

可以通过dart-tofms在六次重复中分析提取物样品。分析这六次重复以产生样品的单个、平均、过滤和统计学上显著的dart指纹图谱。然后，使用该处理过的指纹图谱通过比较质量来确定生物活性标志物的存在。由于初步发现和鉴定了这些生物活性标志物，因此简单的质量比较足以确定它们是否存在于任何提取物或化学品混合物中。对于accutof，质量公差小于20毫质量单位(mmu)(预测质量+/-10mmu)。给定相同的提取物和离子源，其它tof质谱可以具有更高或更低的质量公差。

测量相对丰度的方法：虽然使用dart进行简单分析不需要进行制备样品，但使用水杨酸掺杂/掺入的溶液通过相对于已知量进行定量来确定测试组合物的相对丰度。众所周知的天然存在于姜黄中的标准物，如姜黄素，会在生长条件、收获时间、植物健康等多种因素的影响下而变化。为了对生物标志物进行定量，姜黄素(或其它天然存在的标准物)的天然变异使得将其作为生物标志物绝对定量的基础是不可接受的。为了消除这种不一致性，使用不产生于姜黄的化合物(在这种情况下为水杨酸)作为生物活性分子定量化学分析的基础。

为了测定具有未知浓度的本文所公开生物标志物的样品的相对丰度，将550nl(500ng)无水油剂形式的生物标志物组合物稀释到1ml作为溶剂的乙醇(550nl/ml或500ng/ml)中并掺杂/掺入25mg/ml水杨酸。然后通过上面使用的dart-tof方法分析样品。

表1公开了在包含所有22种生物标志物的组合物的非限制性特定实施方案中发现的本文所公开生物标志物的相对丰度。

表1使用500ng/ml组合物并掺入25mg/ml水杨酸所测定的生物标志物在特定活性组合物中的相对丰度

实施例2

(hsrx458制剂)

将所公开组合物的特定实施方案hsrx458制备为油剂，其包含剂量可靠的姜黄提取物，姜黄提取物包含的生物标志物1至生物标志物22与掺入500ng/ml组合物中的25mg/ml水杨酸相比的相对丰度或浓度为：生物标志物1为0.28％；生物标志物2为0.73％；生物标志物3为0.50％；生物标志物4为0.43％；生物标志物5为0.14％；生物标志物6为0.30％；生物标志物7为4.09％；生物标志物8为6.44％；生物标志物9为126.98％；生物标志物10为7.35％；生物标志物11为3.62％；生物标志物12为11.49％；生物标志物13为1.15％；生物标志物14为0.19％；生物标志物15为0.78％；生物标志物16为0.26％；生物标志物17为0.29％；生物标志物18为0.40％；生物标志物19为0.23％；生物标志物20为0.30％；生物标志物21为1.28％；生物标志物22为7.92μg/ml。该实施方案对类风湿性关节炎和炎症的病因和症状具有体外活性和体内活性。该实施方案以dmso溶解的液体进行测试，用于体外细胞研究，或者将在人类试验中以胶囊形式进行测试。

产生hsrx458的方法的非限制性实例包括以下一般方法。将姜黄(curcumalonga)研磨，通过使提取物与co2在35℃至70℃和50巴至350巴下接触，或使提取物与h2o或etoh:h2o的任何组合接触，并将提取物与方法中使用的任何聚合物分离，从而进行提取。用于聚合物分离的聚合物的非限制性实例是ads5聚合物(南开大学，中国)。

本文公开的组合物抑制经脂多糖激发的细胞中tnf-α、il-6和pge-2的产生，结果如下所述并总结于表2中。基于图1、图2和图3中所示的曲线进行曲线拟合。

表2在经脂多糖激发的细胞中产生tnf-α、il-6和pge-2的hsrx458ic50

如下所示，这些结果表明，本文公开的组合物和方法可有效治疗和/或预防炎症和由炎症引起或症状为炎症的疾病，该疾病例如但不限于类风湿性关节炎、多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎。不希望受理论束缚，本文公开的化合物和组合物已显示出对tnf-α、il-6和pge-2的抑制(参见表2)。类似地，已知治疗类风湿性关节炎的阿达木单抗也抑制tnf-α。因此，预期本文公开的化合物和组合物也将会有效治疗阿达木单抗有效的相同疾病和病症，包括类风湿性关节炎、多关节型幼年特发性关节炎(jia)、银屑病关节炎(psa)、强直性脊柱炎(as)、克罗恩病(cd)、化脓性汗腺炎(hs)、溃疡性结肠炎(uc)、慢性斑块状银屑病(ps)、非感染性中间葡萄膜炎、非感染性后葡萄膜炎和/或非感染性全葡萄膜炎。

实施例3

(抑制tnf-α和il-6的释放)

在溶于dmso的hsrx458存在或不存在的情况下评估响应于脂多糖(lps)激发的tnf-α和il-6释放活性。活性计算为相对于阴性对照的释放百分比。计算ic50值，发现对于tnf-α抑制为25.6μg/ml，对于il-6抑制为14.9μg/ml。

简而言之，用新泽西州布里奇沃特sanofi进行tnf-α和il-6抑制测定。制备balb/c小鼠的脾细胞悬浮液。将脾细胞(7×10⁵/孔)加入含有rpmi1640培养基中的10％fbs的96孔板中。在采用或不用hsrx458的情况下预处理脾细胞1小时，然后加入lps(1μg/ml)，接着在37℃、5％co2下孵育18小时。使用promega试剂盒(产品号g3582)测定细胞毒性，收集上清液以便通过elisa(r&d试剂盒，dy410和dy406)测定tnf-α和il-6。在测试的每种hsrx458浓度下计算相对于对照孔tnf-α和il-6释放的抑制百分比。

用测试的每种浓度的hsrx458的抑制百分比作图，以确定抑制tnf-α和il-6的ic50(分别参照图1和图2)。使用sanofi针对每个终点产生的数据来确定hsrx458的50％抑制值。在所有情况下，当线性拟合的r²值≥0.85时，使用对数“最佳拟合”分析。在线性拟合的r²值<0.85并且提取物达到ic50值的情况下，通过确定最佳拟合线(线性数据)和50％抑制线(y轴)的交点来估计ic50值。经确定，tnf-α抑制的ic50值为25.6μg/ml，il-6抑制的ic50值为14.9μg/ml。

实施例4

(抑制pge-2的释放)

在溶于dmso的hsrx458存在或不存在的情况下评估响应于脂多糖(lps)激发的pge-2释放活性。活性计算为相对于阴性对照的释放百分比。计算ic50值，发现对于pge-2抑制为8.4μg/ml。

简而言之，用新泽西州布里奇沃特sanofi-aventis进行pge-2抑制测定。在两个不同的日期独立地进行测定，以对经lps(sigma-aldrich，st.louis，mo)刺激的raw264.7细胞的pge-2分泌进行定量。在含有10％胎牛血清(invitrogen，irvine，ca)的dmem培养基(invitrogen，irvine，ca)中培养raw264.7细胞(atcc#tib-71)并进行维持培养。在实验前一天，将细胞分开并添加新鲜培养基。在研究当天，将raw264.7细胞以2.5×10⁴个细胞/孔接种在96孔平底板中，并在37℃下、5％co2培养箱中孵育1小时。将10μlhsrx458或50x稀释的celebrex(torontoresearchchemicalsinc，加拿大)加入指定的孔中，并在培养箱中再孵育30分钟。在除标记为“无”的孔外的所有孔中用100μl含有2μgml^-1lps的培养基刺激raw264.7细胞。这些对照孔仅接受100μl培养基。将细胞培养21小时。从每个孔收获180μl上清液，并按照制造商的说明使用eiapge-2试剂盒(assaydesigns，annarbor，密歇根)对上清液中的pge-2水平进行定量。按照制造商的说明(20μlcelltiter96aqueousonesolution与80μl培养基混合)，通过添加100μl的培养基:mtt混合物(80:20)(promega，madison，wi)来测量细胞活力。读取490nm处的板吸光度。在测试的每种hsrx458浓度下计算相对于对照孔的pge-2释放的抑制百分比。

用测试的每种浓度的hsrx458的抑制百分比作图，以确定抑制pge-2的ic50(图3)。使用sanofi针对每个终点产生的数据来确定hsrx458的50％抑制值。在所有情况下，当线性拟合的r²值≥0.85时，使用对数“最佳拟合”分析。在线性拟合的r²值<0.85并且提取物达到ic50值的情况下，通过确定最佳拟合线(线性数据)和50％抑制线(y轴)的交点来估计ic50值。经测定，pge-2抑制的ic50为8.4μg/ml。

实施例5

(抗炎能力)

该实施例涉及计划的双盲临床试验，其使用hsrx458来确定hsrx458的安全性和耐受性及其对降低人体内炎性细胞因子的作用。

脂多糖(lps)激发是研究系统性炎症而没有潜在疾病的模型系统。用低剂量lps(亦称内毒素)注射健康志愿者增加炎症标志物，例如tnf-α和il-6，这些标志物已知与包括类风湿性关节炎在内的许多疾病状况有关。

该研究的主要目的是鉴定健康个体并证明hsrx458产品相对于安慰剂成功地减少与类风湿性关节炎相关的炎症介质(tnf-α、il-6)。具体而言，该研究旨在：1)比较使用hsrx458与安慰剂的志愿者，测定在1小时、1.5小时、2小时、2.5小时、3小时、4小时和6小时测量的tnf-α和il-6的减少；2)测定所报告的临床症状的变化，例如头痛、发冷等，按0至3的等级评定；3)测定临床体征的变化，包括温度、心率和血压；和4)确定整个研究过程中的不良副作用。

方法：本研究将挑选年龄在18至35岁之间的十六(16)名健康人类志愿者。志愿者在过去12个月内未服用过任何免疫抑制药物，在过去12周内未服用过任何胰岛素或华法林(warfarin)，在过去4周内未服用过任何糖尿病药物或抗生素或抗病毒药物，并且在本研究招募前至少1周未服用过任何nsaid、抗组胺药或ω-3-脂肪酸膳食补充剂。志愿者将同意在研究过程中不服用任何nsaid/抗组胺药或其它止痛药/消炎药，不开始任何新的锻炼或饮食计划，并且在研究过程中不改变他们当前的饮食和锻炼计划。

总研究持续时间为6小时，并且包括以下组成部分。

第1次访视，基线：

1)志愿者被1:1随机分入两个研究组，在静脉内(i.v.)施用2ng/kg大肠杆菌lps前15分钟接受经口剂量为175mg的hsrx458或含有麦芽糖糊精的经口安慰剂，大肠杆菌lps是已知的炎症和炎性细胞因子的介质。

2)生命体征：当志愿者以坐姿休息至少5分钟后，测量生命体征，包括血压、脉搏率、呼吸率和口腔温度。在第1次访视时收集身高和体重测量值。

3)有限的体检：工作人员将进行至少包括以下内容的后续体检：一般外观、heent(头、眼、耳、鼻和喉)、心脏、肺部、肌肉骨骼系统和淋巴结的评估。

4)临床症状：志愿者将按0至3的等级评估以下每种临床症状：头痛、发冷、肌痛、恶心、呕吐、腹痛和背痛。

5)临床实验室检测：在摄入研究药物或安慰剂之前立即收集血液样品，然后在施用lps之前再次立即收集血液样品并送至经认证和注册的实验室处理以检测和测量tnf-α和il-6炎症标志物。

第1次访视(第1小时)到最后一次访视(第6小时)：

1)临床体征和症状：志愿者将按0至3的等级评估以下每种临床症状：头痛、发冷、肌痛、恶心、呕吐、腹痛和背痛。工作人员将记录生命体征，包括血压、脉搏率、呼吸率和口腔温度。

2)临床实验室检测：在注射lps后1小时、1.5小时、2小时、2.5小时、3小时、4小时和6小时收集血液样品，并送到经过认证和注册的实验室处理以检测和测量tnf-α和il-6炎症标志物。

3)不良事件的评估：将询问志愿者是否有任何不良事件。

测量结果：在该临床试验中将测量以下结果。工作人员将测量不同时间段的tnf-α浓度、il-6浓度、温度、心率和血压。工作人员将在不同时间段按0至3的等级(0＝无、1＝轻度、2＝中度、3＝严重)记录研究志愿者报告的头痛、发冷、肌痛、恶心、呕吐、腹痛和背痛。工作人员将记录任何不良事件的证据。

统计分析：将进行结果的统计分析。

实施例6

(协同作用)

认为本文公开的生物标志物的预测作用方法使得生物标志物能够与通过单独机制起作用的其它化合物协同作用，从而治疗或预防类风湿性关节炎和/或炎症。为了进一步证实这种协同作用并确定与其它化合物/组合物的协同作用，本文公开的一种或多于一种生物标志物可以与本文公开的一种或多于一种其它生物标志物和/或一种或多于一种药物和/或治疗方法组合进行测试。在细胞培养、动物研究、人类研究等方面，组合研究可以显示出治疗和/或预防类风湿性关节炎和/或炎症和/或其症状的竞争性、累加的或协同的相互作用。研究的非限制性实例可包括上述那些和本文中描述的那些以及本领域技术人员已知的那些。作为非限制性实例，可以测试hsrx458和nsaid的组合。

可以进行组合测定以确定组合的竞争性、累加的或协同的相互作用的非限制性实例可以利用通常用于研究药物相互作用和协同作用的相互作用基质。在一个实例中，相互作用基质用于细胞培养的炎症的预防或治疗研究中。简而言之，该实验可以具有25个样品：4个单独使用第一种测试化合物/组合物(例如hsrx458)，4个使用第二种测试化合物/组合物(例如阿达木单抗)，1个不含化学物质，其余16个可以是第一种和第二种测试化合物/组合物的组合。可以测试从起始浓度(例如hsrx458为1mg/ml)1:4稀释的第一测试化合物/组合物和从起始浓度(例如阿达木单抗为1.0μg/ml)1:4稀释的第二测试化合物/组合物。减少炎症标志物等的能力可以在抑制性化合物的持续存在下发生。以这种方式，实验在预防性治疗的同时模拟患者并且通过单独的第一测试化合物/组合物、单独的第二测试化合物/组合物以及两者在一系列浓度下的组合来测试疾病发作的预防。可以使用berenbaum的方法分析数据，以确定竞争性、累加的或协同的相互作用。(berenbaum1977)。

**************

根据本公开内容，本文所公开和要求保护的所有组合物和/或方法可以在不需要过度实验的情况下进行和实现。尽管本发明的组合物和方法以具体的实施方案进行了描述，但是对于本领域技术人员明显的是，可以在不脱离本发明的构思、精神和范围的情况下对组合物和/或方法以及在本文所描述方法的步骤或步骤的顺序中进行修改。更具体地，显然，涉及化学和生理两方面的特定试剂可以替代本文所描述的试剂，同时会实现相同或相似的结果。所有对本领域技术人员明显的这类相似的替代和改变都被视为在由所附权利要求限定的本发明的精神、范围和构思内。

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