针对肠球菌细菌的新抗微生物剂的制作方法

文档序号:18319184发布日期:2019-08-03 10:17阅读:271来源:国知局
细菌病原体对人类健康构成重大威胁。尽管本领域已知各种类型的具有杀菌或抑菌活性的药剂(例如抗生素),但对这些药物,特别是抗生素的微生物抗性正在稳步增加。代表健康问题的病原体之一是肠球菌属(enterococcus)的一些细菌。它们可对人类造成危及生命的感染,特别是在医源性(医院)环境中。在此种情况下特别相关的是粪肠球菌(enterococcusfaecalis)和肠球菌(enterococcusfaecium)细菌,其占感染的90%以上。粪肠球菌和屎肠球菌是革兰氏阳性菌,它们共同定殖于人的下肠道/口腔和阴道。在健康个体中,粪肠球菌和屎肠球菌定植通常对宿主没有不良影响;然而,通过肠球菌获得毒力因子和高水平的抗生素抗性会引起严重的问题,特别是在免疫受损的患者中。由肠球菌感染引起的常见疾病包括心内膜炎、腹部脓肿、菌血症和尿路感染。由于增加的抗性会降低常规抗生素的效用,因此一直需要新的抗微生物剂来控制肠球菌细菌的数量,例如在医源性(医院)环境中。本发明利用降解细菌细胞壁的酶,例如内溶素。内溶素是通常由噬菌体(或细菌病毒)编码的肽聚糖水解酶。它们在噬菌体增殖的裂解循环中的晚期基因表达期间合成,并通过细菌肽聚糖的降解介导从感染细胞释放后代病毒体。它们是n-乙酰基-β-d-胞壁质酶(溶菌酶)、裂解性转糖基酶、n-乙酰基-β-d-氨基葡糖苷酶、n-乙酰基胞壁酰-l-丙氨酸酰胺酶或内肽酶。内溶素的抗微生物应用在1991年由gasson(gb2243611)提出。尽管长时间以来已知内溶素的杀灭能力,但由于抗生素的成功和优势而忽略这些酶作为抗菌物的使用。只有在出现多抗生素抗性细菌后,此种与内溶素一起对抗人类病原体的简单构思才受到关注。迫切需要开发出出现的全新类别的抗菌药物,并且用作“酶抗生素(enzybiotics)”——一种“酶”和“抗生素”的混合术语——的内溶素完全满足此需求。2001年,fischetti及其同事首次证明了噬菌体cl内溶素对a组链球菌(streptococci)的治疗潜力(nelsonetal.,2001,proc.natl.acad.sci.u.s.a.98:4107–4112;通过引用并入本文)。从那以后,许多出版物已经建立内溶素作为控制革兰氏阳性细菌的细菌性感染的有吸引力和补充的备选。随后,针对其他革兰氏阳性病原体如肺炎链球菌(streptococcuspneumoniae)(loeffleretal.,2001,science294:2170–2172)、炭疽芽孢杆菌(bacillusanthracis)(schuchetal.,2002;nature418:884–889)、无乳链球菌(s.agalactiae)(chengetal.,2005;antimicrobagentschemother.2005jan;49(1):111-117)和金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)(rasheletal,2007;jinfectdis.2007oct15;196(8):1237-1247)的不同内溶素已证明其作为酶抗生素的功效(所有参考文献均通过引用并入本文)。在本领域中,已经描述了内溶素与其他氨基酸序列的组合,以创建新的抗微生物剂。wo2010/149795(通过引用并入本文)公开了肽与内溶素衍生物的融合物,其对各种细菌显示出活性。然而,对于肠球菌属细菌没有具体描述此类融合物。因此,仍然一直需要对革兰氏阳性细菌有活性的新抗菌剂。特别是,需要对肠球菌属细菌具有活性的抗菌剂。优选地,所述试剂对多种多样的一组肠球菌菌株具有活性,表现出增加的活性和/或具有足以允许广泛的实用医学技术和药物应用的ph耐受性。该目的通过权利要求书中定义的和下面阐述的主题来解决。如本文所用,术语“多肽”特别是指通过肽键以特定序列连接的氨基酸聚合物。多肽的氨基酸残基可以通过例如碳水化合物和磷酸酯等各种基团的共价附着来修饰。其他物质可以与多肽更松散地结合,例如血红素或脂质,产生缀合的多肽,其也包括在如本文所用的术语“多肽”中。如本文使用,该术语还旨在包括蛋白质。因此,术语“多肽”还包括例如两个或更多个氨基酸聚合物链的复合物。术语“多肽”确实包括多肽的实施方案,所述多肽任选表现出本领域通常使用的修饰,例如,生物素化、乙酰化、聚乙二醇化、氨基、sh-或羧基(例如保护基团)的化学变化等。从下面的描述中可以明显看出,根据本发明的多肽也可以是非天然存在的多肽。例如,本发明的多肽可以是融合蛋白,其中组合至少两个氨基酸序列,其在自然界中不在该组合中发生。如本文所用,术语“多肽”不限于氨基酸聚合物链的特定长度,但是通常多肽将表现出超过约50个氨基酸,超过约100个氨基酸或甚至超过约150个氨基酸的长度。通常但非必要地,本发明的典型多肽的长度不超过约750个氨基酸。如本文所用,术语“内溶素”是指适于水解细菌细胞壁的噬菌体衍生的酶。内溶素包含至少一个具有以下至少一种活性的“酶活性域”(ead):内肽酶、几丁质酶、t4样胞壁质酶(muraminidase)、λ样胞壁质酶、n-乙酰基-胞壁酰-l-丙氨酸-酰胺酶(酰胺酶)、胞壁酰基-l-丙氨酸-酰胺酶、胞壁质酶、裂解性转糖基酶(c)、裂解性转糖基酶(m)、n-乙酰基-胞壁质酶(溶菌酶)、n-乙酰基-氨基葡糖苷酶或转糖基酶。此外,内溶素还可以含有无酶促活性的区域,并且与宿主细菌的细胞壁结合,即所谓的cbd(细胞壁结合域)。术语“内溶素”还包括相对于天然存在的内溶素包含修饰和/或改变的酶。此类改变和/或修饰可包括氨基酸残基的突变,例如缺失、插入和添加、取代或其组合和/或化学变化。特别优选的化学变化是生物素化、乙酰化、聚乙二醇化、氨基、sh或羧基的化学变化。所述内溶素在一般水平上表现出各自野生型内溶素的裂解活性。然而,所述活性可以与相应的野生型内溶素的活性相同,更高或更低。所述活性可以是例如相应野生型内溶素活性的至少约50,60,70,80,90,100,110,120,130,140,150,160,170,180,190或至少约200%或甚至更多。活性可以通过本领域技术人员熟知的测定法测量,例如抗菌测定法,其记载于例如briersetal.(j.biochem.biophysmethods;2007;70:531-533)或donovanetal.(j.femsmicrobiollett.2006dec;265(1)和类似的出版物。如本文所用,术语“衍生物”是指与相应的参考序列相比表现出一个或多个添加、缺失、插入和/或取代及其组合的氨基酸序列。这包括例如缺失/插入、插入/缺失、缺失/添加、添加/缺失、插入/添加、添加/插入等的组合。然而,本领域技术人员将理解与参考序列中相应相同位置处存在的氨基酸残基不同的衍生序列的某些位置处氨基酸残基的存在不是例如在相同位置处的缺失和后续插入的组合,而是如本文所定义的取代。相反,若在本文中提及添加、缺失、插入和取代中的一个或多个的组合,则序列中不同位置处的变化的组合是意图的,例如,n端的添加和序列内(intrasequential)确实。此类衍生序列将与相应的参考序列,例如给定的seqidno表现出一定水平的序列同一性,其优选为至少60%,例如至少75%,至少80%,至少85%,至少90%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%或至少99%。优选的衍生物是母体分子,例如给定的seqidno的片段,保留了母体分子的活性,即在一般水平上表现出与相应母体分子相同的活性。然而,所述活性可以与相应的母体分子相同,更高或更低。还优选的衍生物是在亲本序列,例如给定的seqidno内由保守氨基酸取代产生的那些,在一般水平上再次保留母体分子的活性。如本文所用,术语“%序列同一性”必须如下理解:比对两个待比较的序列以给出序列之间的最大相关性。这可以包括在一个或两个序列中插入“缺口”,以增强比对程度。然后,可以在所比较的每个序列的整个长度(所谓的全局比对)(其特别适合于相同或相似长度的序列),或者更短的限定长度的序列(所谓的局部比对)(其更适合不相等长度的序列上)确定%同一性。在上述背景中,与查询氨基酸序列具有至少例如95%的“序列同一性”的氨基酸序列意指主题氨基酸序列的序列与查询序列相同,只是主题氨基酸序列可以包括查询氨基酸序列的每100个氨基酸最多五个氨基酸改变。换言之,为了获得与查询氨基酸序列具有至少95%同一性序列的氨基酸序列,可以插入或用另一种氨基酸取代或缺失主题序列中多达5%(100中的5个)氨基酸残基。用于比较两种或更多种序列的同一性和同源性的方法是本领域熟知的。两个序列相同的百分比可以例如通过使用数学算法来确定。可以使用的数学算法的优选但非限制性的例子是karlinetal.(1993),pnasusa,90:5873-5877的算法。此种算法集成在blast系列程序中,例如,blast或nblast程序(参见altschuletal.,1990,j.mol.biol.215,403-410或altschuletal.(1997),nucleicacidsres,25:3389-3402)(可通过ncbi主页在万维网站点ncbi.nlm.nih.gov)访问)和fasta(pearson(1990),methodsenzymol.83,63-98;pearsonandlipman(1988),proc.natl.acad.sci.u.s.a85,2444-2448)。通过这些程序可以鉴定在一定程度上与其他序列相同的序列。此外,wisconsin序列分析包9.1版(devereuxetal,1984,nucleicacidsres.,387-395)中可用的程序,例如bestfit和gap程序,可用于确定两个多肽序列之间的%同一性。bestfit使用(smithandwaterman(1981),j.mol.biol.147,195-197)的“局部同源性”算法,并找到两个序列之间最佳的单一相似性区域。若在本文中提及与参考序列共享特定序列同一性程度的氨基酸序列,则所述序列差异优选归因于保守氨基酸取代。优选地,此类序列保留参考序列的活性,例如,虽然可能速率较慢。另外,若在本文中提及在特定的序列同一性百分比下共享“至少”的序列,则优选不包括100%序列同一性。如本文所用,“保守氨基酸取代”可以在具有足够相似的物理化学性质的一组氨基酸内发生,使得该基团成员之间的取代将保持该分子的生物活性(参见例如grantham,r.(1974),science185,862-864)。特别地,保守氨基酸取代优选是下述取代,其中氨基酸源自相同类别的氨基酸(例如碱性氨基酸、酸性氨基酸、极性氨基酸、具有脂肪族侧链的氨基酸、带正电荷或带负电荷侧链的氨基酸、侧链中具有芳族基团的氨基酸、侧链可进入氢桥的氨基酸,例如具有羟基官能团的侧链等)。在本案中,保守取代例如用碱性氨基酸残基(lys,arg,his)取代另一个碱性氨基酸残基(lys,arg,his),用脂肪族氨基酸残基(gly,ala,val,leu,lie)取代另一个脂肪族氨基酸残基,用芳香族氨基酸残基(phe,tyr,trp)取代另一个芳香族氨基酸残基,用丝氨酸取代苏氨酸或用异亮氨酸取代亮氨酸。进一步的保守氨基酸交换对于本领域技术人员来说是已知的。如本文所用,术语“缺失”优选指与相应参考序列相比衍生序列中缺乏1、2、3、4、5(或甚至超过5个)个连续氨基酸残基,无论是在序列内还是在n或c末端。本发明的衍生物可以表现出一个、两个或更多个此类缺失。如本文所用,术语“插入”优选是指与相应的参考序列相比在衍生序列中1、2、3、4、5(或甚至超过5)个连续氨基酸残基的额外的序列内存在。本发明的衍生物可以表现出一个、两个或更多个此类插入。如本文所用,术语“添加”优选指与相应的参考序列相比在衍生序列的n和/或c末端的1、2、3、4、5(或甚至超过5)个连续氨基酸残基的额外存在。如本文所用,术语“取代”是指与在参考序列中相应位置处存在或不存在的氨基酸残基不同的衍生序列的某个位置处的氨基酸残基的存在。本发明的衍生物可以表现出1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20或更多个此类取代。如上文提及,优选地,此类取代是保守取代。如本文所用,术语“第二氨基酸序列”是指本发明多肽的氨基酸序列内的氨基酸子序列。所述序列可以是阳离子肽、聚阳离子肽、两亲性肽、疏水性肽、寿司肽和/或抗微生物肽的序列。该术语不指常规标签,如his标签,例如his5标签、his6标签、his7标签、his8标签、his9标签、his10标签、his11标签、his12标签、his16标签和his20标签、strep标签、avi标签、myc标签、gst标签、js标签、半胱氨酸标签、flag标签或本领域已知的其他标签、硫氧还蛋白或麦芽糖结合蛋白(mbp)。优选地,第二氨基酸序列的长度为至少约6至至多约50,优选至多约39个氨基酸残基。优选地,第二氨基酸序列与第一氨基酸序列是异源的,例如两个氨基酸序列在自然界中不一起出现在单个多肽中。此外,第二氨基酸序列本身不提供以下任何酶活性:内肽酶、几丁质酶、t4样胞壁质酶、λ样胞壁质酶、n-乙酰基-胞壁酰-l-丙氨酸-酰胺酶(酰胺酶)、胞壁酰基-l-丙氨酸-酰胺酶、胞壁质酶、裂解性转糖基酶(c)、裂解性转糖基酶(m)、n-乙酰基-胞壁质酶(溶菌酶)、n-乙酰基-氨基葡糖苷酶或转糖基酶。通常,第二氨基酸区段根本不提供任何酶活性。如本文所用,术语“第一氨基酸序列”和“第二氨基酸序列”并不暗示本发明多肽内序列的固有顺序,即第二氨基酸序列可以是第一氨基酸的n末端或第一氨基酸序列的c末端。例如,还可以存在有另外的居间序列元件。如本文所用,术语“阳离子肽”优选指具有带正电荷的氨基酸残基的肽。优选地,阳离子肽的pka值为9.0或更高。通常,阳离子肽的至少四个氨基酸残基可带正电荷,例如赖氨酸或精氨酸。“带正电荷”是指在约生理条件下具有净正电荷的氨基酸残基的侧链。如本文所用,术语“阳离子肽”还指聚阳离子肽,但也包括阳离子肽,其包含例如小于20%,优选小于10%的带正电荷的氨基酸残基。如本文所用,术语“聚阳离子肽”优选指由通常带正电荷的氨基酸残基,特别是赖氨酸和/或精氨酸残基构成的肽。若至少约20,30,40,50,60,70,75,80,85,90,95或约100%的氨基酸残基是带正电荷的氨基酸残基,特别是赖氨酸和/或精氨酸残基,则肽由通常带正电荷的氨基酸残基构成。不带正电荷的氨基酸残基的氨基酸残基可以是带中性电荷的氨基酸残基和/或带负电荷的氨基酸残基和/或疏水氨基酸残基。优选地,不带正电荷的氨基酸残基的氨基酸残基是带中性电荷的氨基酸残基,特别是丝氨酸和/或甘氨酸。如本文所用,术语“抗微生物肽”(amp)优选是指对例如细菌、病毒、真菌、酵母、支原体和原生动物具有杀微生物和/或微生物抑制活性的任何天然存在的肽。因此,如本文所用,术语“抗微生物肽”特别是指具有抗细菌、抗真菌、抗霉菌、抗寄生物、抗原生动物、抗病毒、抗感染、抗传染和/或杀菌、杀藻、杀阿米巴(amoebicidal)、杀微生物、杀细菌、杀真菌、杀寄生物、杀原生动物(protozoacidal,protozoicidal)特性的任何肽。优选的是抗细菌肽。抗微生物肽可以是rna酶a超家族的成员、防御素、抗菌肽(cathelicidin)、颗粒溶素(granulysin)、组氨素(histatin)、psoriasin、dermicidine或hepcidin。抗微生物肽可以天然存在于昆虫、鱼、植物、蛛形纲动物(arachnids)、脊椎动物或哺乳动物中。优选地,抗微生物肽可以天然存在于萝卜、蚕蛾、狼蛛、蛙中,优选在非洲爪蟾(xenopuslaevis),rana蛙中,更优选在牛蛙(ranacatesbeiana),蟾蜍,优选亚洲蟾蜍bufobufogargarizans,蝇,优选在果蝇(drosophila)中,更优选在黑腹果蝇(drosophilamelanogaster),埃及伊蚊(aedesaegypti),蜜蜂,大黄蜂,优选在bombuspascuorum,肉蝇(fleshfly)中,优选在sarcophagaperegrine,蝎子,鲎,鲶鱼中,优选在parasilurusasotus,牛,猪,绵羊,猪,牛,猴和人类中。如本文所用,“抗微生物肽”(amp)可以特别是不作为阳离子肽、聚阳离子肽、两亲性肽、寿司肽、防御素和疏水肽,但是仍然表现出抗微生物活性的肽。如本文所用,术语“寿司肽”是指具有短共有重复的补体控制蛋白(ccp)。寿司肽的寿司模块在许多不同的蛋白质中起蛋白质-蛋白质相互作用域的作用。已显示含有寿司域的肽具有抗微生物活性。优选地,寿司肽是天然存在的肽。如本文所用,术语“防御素”是指存在于动物,优选哺乳动物,更优选人类中的肽,其中防御素在先天宿主防御系统中起破坏外来物质如感染性细菌和/或感染性病毒和/或真菌的作用。防御素是非抗体杀微生物和/或杀肿瘤蛋白、肽或多肽。“防御素”的实例是“哺乳动物防御素”、α-防御素、β-防御素、吲哚菌肽和magainin。如本文所用,术语“防御素”是指从动物细胞的分离形式或合成产生的形式,并且还指基本上保留其亲本蛋白的细胞毒活性但其序列已通过插入或缺失一个或多个氨基酸残基而改变的变体。如本文所用,术语“两亲性肽”是指具有亲水和疏水官能团两者的肽。优选地,如本文所用,术语“两亲性肽”是指具有限定的亲水和疏水基团排列的肽,例如,两亲性肽可以是例如α螺旋,沿螺旋的一侧主要具有非极性侧链且沿其表面的其余部分具有极性残基。如本文所用,术语“疏水基团”优选指化学基团,例如氨基酸侧链,其基本上不溶于水,但可溶于油相,在油相中的溶解度高于在水中或在水相中的溶解度。在水中,具有疏水侧链的氨基酸残基彼此相互作用以产生非水环境。具有疏水侧链的氨基酸残基的实例是缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、半胱氨酸、丙氨酸、酪氨酸和脯氨酸残基。如本文所用,术语“疏水性肽”是指优选由通常具有疏水基团的氨基酸残基构成的疏水性肽。此类肽优选由通常疏水性氨基酸残基构成,即至少约20,30,40,50,60,70,75,80,85,90,95或至少约100%的氨基酸残基是疏水性的氨基酸残基。非疏水性的氨基酸残基优选是中性的,优选不是亲水性的。如本文所用,术语“标签”是指下述氨基酸序列,其通常在本领域中与另一个氨基酸序列融合或包含在另一氨基酸序列中,用于a)改善总体氨基酸序列或多肽的表达,b)促进整个氨基酸序列或多肽的纯化,c)促进整个氨基酸序列或多肽的固定,和/或d)促进总氨基酸序列或多肽的检测。标签的实例是his标签,例如his5标签、his6标签、his7标签、his8标签、his9标签、his10标签、his11标签、his12标签、his16标签和his20标签、strep标签、avi标签、myc标签、gst标签、js标签、半胱氨酸标签、flag标签、ha标签、硫氧还蛋白或麦芽糖结合蛋白(mbp)、cat、gfp、yfp等。本领域技术人员将知道适用于不同技术应用的大量标签。标签可以例如使此类带有标签的多肽适用于例如不同elisa测定形式或其他技术应用中的抗体结合。如本文所用,“约生理学ph”意指高于6.5的ph,特别是约6.75至约8.5,更优选7至7.75,甚至更优选7.2至7.6,甚至更优选7.3至7.5的ph范围。最优选地,生理学ph是约7.4的ph。如本文所用,术语“包含”不应解释为限于“由......组成”的含义(即排除存在另外的其他物质)。相反,“包含”意味着任选地可以存在另外的物质。术语“包含”涵盖落入其范围“由......组成”(即排除存在另外的其他物质)和“包括但不由......组成”(即,需要存在另外的其他物质)的特别设想的实施方案,前者是更优选的。令人惊讶地,本发明的发明人发现了根据seqidno:1的内溶素及其衍生物,例如其“酶活性域”(ead;seqidno:2)或细胞壁结合域(cbd,seqidno:3)与特定类型的肽,例如根据seqidno:4或seqidno:100的抗微生物肽(当设计针对肠球菌属细菌的抗微生物剂时非常有用的组分)组合。此类化合物显示出增加的效用和活性,例如针对粪肠球菌细菌,和/或比野生型内溶素(即seqidno:1)更耐受ph。特别地,特别优选的本发明的多肽在约生理学ph(例如,约ph7.4)时比野生型内溶素(即seqidno:1)更具活性,并且与更酸性的ph(例如ph5.25或6)相比,优选在约生理学ph下表现出基本相同或甚至增加的活性。因此,本发明在第一方面涉及包含第一和第二氨基酸序列的多肽,其中第一氨基酸序列是选自以下序列组的序列:i)根据seqidno:2的氨基酸序列;ii)根据seqidno:3的氨基酸序列;iii)根据seqidno:5的氨基酸序列;和iv)seqidno:2,seqidno:3或seqidno:5中任一个的衍生物,其与seqidno:2,seqidno:3或seqidno:5分别表现出至少80%的序列同一性,其中第二氨基酸序列是抗微生物肽、两亲性肽、阳离子肽、疏水性肽、寿司肽或防御素。最优选地,本发明多肽的第一个氨基酸序列是选自以下序列组的序列:i)根据seqidno:2的氨基酸序列;ii)根据seqidno:3的氨基酸序列;和iii)根据seqidno:5的氨基酸序列。在本发明多肽包含cbd(例如包含seqidno:3或其衍生物)的实施方案中,优选多肽另外包含能够降解细菌,特别是革兰氏阳性细菌的细胞壁的酶的氨基酸序列。所述酶可以是例如脊椎动物溶菌酶(例如人或鸡蛋清溶菌酶),但优选是内溶素,自溶素或细菌素(例如溶葡萄球菌素)。dongetal.(microbbiotechnol.2015mar;8(2):210-20)已经例示了seqidno:1的细胞壁结合域(cbd)可以与许多其他裂解酶序列,例如溶解素ply187的催化域(1-157aa)融合。该酶也可以是猪链球菌(streptococcussuis)穿孔素(holin)的酶活性亚基。溶解素ply187的催化域(1-157aa)或覆盖ncbi参考序列wp_029171101.1以及其变体,例如seqidno:104的氨基酸2-242的区域是与seqidno:3或其衍生物组合使用的本发明的可能实施方案。在一个实施方案中,根据本发明的多肽可以例如包含根据seqidno:104的氨基酸序列或seqidno:104的衍生物,其与seqidno:104表现出至少80%,至少85%,至少87.5%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少98%,或超过99%的序列同一性。然而,最优选地,本发明的多肽包含seqidno:2,以及seqidno:3,或其相应的衍生物。优选地,seqidno:2,seqidno:3或seqidno:5的衍生物与seqidno:2,seqidno:3或seqidno:5分别表现出至少85%,至少87.5%,至少90%,至少91%,至少92%。与seqidno:2的%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%或超过99%的序列同一性。对于本文讨论的所有实施方案,特别优选的是,本发明的多肽包含seqidno:1的衍生物。特别有用的seqidno:1的衍生物是seqidno:5(缺少seqidno:1的n-末端甲硫氨酸)及其衍生物,以及具有seqidno:1的截短序列的多肽,包含seqidno:2或seqidno:3,或其相应的衍生物。所有这些实施方案的共同之处在于本发明的多肽不包含seqidno:1的氨基酸序列。本发明多肽的第二氨基酸序列选自抗微生物肽、两亲性肽、阳离子肽、聚阳离子肽、疏水肽、寿司肽或防御素。阳离子/聚阳离子氨基酸序列的实例列于下表中。表1:可以在实施本发明中使用的抗微生物氨基酸序列的实例列于下表中。表2:第二氨基酸序列段可以是寿司肽,其由dingjl,lip,hobcellmollifesci.2008apr;65(7-8):1202-19.thesushipeptides:structuralcharacterizationandmodeofactionagainstgram-negativebacteria描述。特别优选的是根据seqidno:84的寿司1肽。其他优选的寿司肽是寿司肽s1和s3及其倍数(tanetal,fasebj.2000sep;14(12):1801-13)。优选的疏水性肽是具有根据seqidno:85的氨基酸序列的walmagh1和具有氨基酸序列phe-phe-val-ala-pro(seqidno:86)的疏水性肽。优选的两亲性肽是根据seqidno:87的t4溶菌酶的α4-螺旋和具有根据seqidno:88的氨基酸序列的wlbu2变体和根据seqidno:89的walmagh2。最优选地,第二氨基酸序列是根据seqidno:4或seqidno:100的氨基酸序列。例如,根据本发明的多肽可以包含作为第一氨基酸序列的seqidno:5或其衍生物和作为第二氨基酸序列的seqidno:4。同样地,根据本发明的多肽可包含作为第一氨基酸序列的seqidno:5或其衍生物,和作为第二氨基酸序列seqidno:4的衍生物。或者,根据本发明的多肽还可以包含作为第一氨基酸序列的seqidno:3或其衍生物,以及作为第二氨基酸序列seqidno:100。关于本发明多肽内第一和第二氨基酸序列的排列,优选第二氨基酸序列位于第一氨基酸序列的n端。优选地,第一和第二氨基酸序列彼此直接连接或通过1至10个氨基酸残基,优选1至5个氨基酸残基,甚至更优选1至2个氨基酸的短接头连接。接头序列优选是柔性序列,其包含一个或多个甘氨酸残基。此类接头的实例是甘氨酸-丝氨酸接头或序列ggggs(seqidno:90)。特别是在本发明多肽由宿主细胞重组表达的情况下,优选本发明多肽在n-末端包含甲硫氨酸残基。本发明的多肽可另外包含一种或多种标签序列。此类标签序列可以例如位于本发明多肽的n或c端。在一个优选的实施方案中,一个或多个标签序列位于多肽的c端侧,例如直接在c端。一个或多个标签序列可以例如直接或通过短接头与本发明多肽的其余部分连接(参见上文)。标签的许多实例在本领域中是已知的,其中一些已经在上面提到过。在本发明的上下文中,特别优选的标签序列是his标签,优选根据seqidno:91的his标签。根据本发明的多肽的长度原则上不受限制,但优选长度不会过大。优选地,根据本发明的多肽的总长度不超过约400个氨基酸,优选不超过约350个氨基酸。根据本发明的优选多肽包含seqidno:92,例如包含seqidno:93或包含seqidno:94的多肽。还考虑了seqidno:92,seqidno:93和seqidno:94的衍生物,例如每个都表现出与相应参考序列至少80%的序列同一性。根据本发明的进一步优选的多肽是包含seqidno:101的氨基酸序列的多肽或其与seqidno:101表现出至少80%序列同一性的衍生物,包含seqidno:102的氨基酸序列的多肽或其与seqidno:102表现出至少80%的序列同一性的衍生物,包含seqidno:103的氨基酸序列的多肽或其与seqidno:103表现出至少80%的序列同一性的衍生物,包含seqidno:104的氨基酸序列的多肽或其与seqidno:104表现出至少80%的序列同一性的衍生物,或包含seqidno:105的氨基酸序列的多肽或其与seqidno:105表现出至少80%的序列同一性的衍生物。优选地,根据本发明的多肽的特征在于降解肠球菌细菌的肽聚糖的能力。若酶是活性的,则肽聚糖层的降解将导致浊度下降,这可以通过光度法测量(参见例如briersetal.,j.biochem.biophysmethods70:531-533,(2007)。本发明确实还涉及编码一种或多种本发明的发明性多肽的核酸。本发明的核酸可以采用核酸可想到的所有形式。特别地,根据本发明的核酸可以是rna、dna或其杂合体。它们可以是单链或双链的。它们可以具有小转录物或整个基因组的大小,例如噬菌体基因组。如本文所用,编码本发明的一种或多种发明性多肽的核酸可以是反映有义链的核酸。同样,也涵盖反义链。核酸可以涵盖用于表达本发明多肽的异源启动子。根据本发明的核酸包含编码选自以下序列组的氨基酸序列的第一核酸序列:i)根据seqidno:2的氨基酸序列;ii)根据seqidno:3的氨基酸序列;iii)根据seqidno:5的氨基酸序列;和iv)i),ii)和iii)中任一个的衍生物,其分别与i)、ii)或iii)表现出至少80%的序列同一性,并且包含第二核酸序列,其中第二核酸序列编码抗微生物肽、两亲性肽、阳离子肽、疏水性肽、寿司肽或防御素。优选地,本发明的核酸不包含编码根据seqidno:1的氨基酸序列的核酸序列。本发明的核酸可以包含至少一种选自以下序列组的序列:i)根据seqidno:95的核酸序列;ii)根据seqidno:96的核酸序列;iii)根据seqidno:97的核酸序列;和iv)seqidno:95,seqidno:96或seqidno:97中任一个的衍生物,其分别编码与seqidno:95,seqidno:96或seqidno:97相同的氨基酸序列。本发明的核酸还可以包含根据seqidno:98的核酸序列。根据本发明的优选核酸包含作为第一核酸序列的根据seqidno:97的核酸序列和作为第二核酸序列的根据seqidno:98的核酸序列。特别优选的是包含seqidno:99的核酸序列。另一方面,本发明涉及载体,其包含根据本发明的核酸。此类载体可以是例如允许表达本发明多肽的表达载体。所述表达可以是组成型或诱导型的。载体也可以是克隆载体,其包含用于克隆目的的本发明多肽的核酸序列。另一方面,本发明涉及宿主细胞,其包含根据本发明的多肽、根据本发明的核酸和/或根据本发明的载体。特别地,宿主细胞可以选自:细菌细胞和酵母细胞。特别优选的宿主细胞是大肠杆菌细胞。在另一方面,本发明涉及包含根据本发明的多肽、根据本发明的核酸、根据本发明的载体和/或根据本发明的宿主细胞的组合物。优选的组合物包含根据本发明的多肽。优选地,根据本发明的组合物包含药学上可接受的稀释剂、赋形剂或载体。此类组合物可以是药物组合物。此外,根据本发明的组合物可以是骨水泥,其包含根据本发明的多肽、根据本发明的核酸、根据本发明的载体,和/或根据本发明的宿主细胞。包含根据本发明的多肽(例如包含seqidno:93的多肽)的骨水泥是特别优选的。根据本发明的组合物还可以另外包括生物材料,例如,如用于整形外科应用的生物材料。在这方面,本领域技术人员将容易地意识到大量可能的材料。在另一方面,本发明涉及根据本发明的多肽、根据本发明的核酸、根据本发明的载体、根据本发明的宿主细胞,和/或根据本发明的组合物,其在通过手术或疗法来治疗人或动物身体的方法或对人或动物身体实施的诊断方法中的用途。本发明还涉及根据本发明的多肽(并且同样是根据本发明的核酸、根据本发明的载体、根据本发明的宿主细胞、和/或根据本发明的组合物),用于治疗或预防由肠球菌属细菌引起的感染的方法。特别地,本发明涉及根据本发明的多肽(并且同样是根据本发明的核酸、根据本发明的载体、根据本发明的宿主细胞和/或根据本发明的组合物),用于治疗或预防由肠球菌属细菌引起的感染的方法,其中所述多肽包含第一和第二氨基酸序列,其中第一氨基酸序列是选自以下序列组的序列:i)根据seqidno:2的氨基酸序列;ii)根据seqidno:3的氨基酸序列;iii)根据seqidno:5的氨基酸序列;和iv)seqidno:2,seqidno:3或seqidno:5中任一个的衍生物,其分别与seqidno:2,seqidno:3或seqidno:5表现出至少80%的序列同一性,其中第二氨基酸序列是抗微生物肽、两亲性肽、阳离子肽、疏水性肽、寿司肽或防御素。上述本发明多肽的公开内容考虑了多肽(和编码此类多肽的核酸、包含此类核酸的载体、包含此类核酸或载体的宿主细胞,和/或包含此类多肽、核酸、载体和/或宿主细胞的组合物),用于治疗或预防由肠球菌属细菌引起的感染的方法中。特别地,详述seqidno:5及其衍生物的公开内容认为是用于治疗或预防由肠球菌属细菌引起的感染的方法中的多肽的实施方案。关于在通过手术或疗法来治疗人或动物身体的方法或对人或动物身体实施的诊断方法(例如用于治疗和预防细菌性感染)中使用根据本发明的多肽、根据本发明的核酸、根据本发明的载体、根据本发明的宿主细胞和/或根据本发明的组合物的方面,发明人特别考虑在约生理学ph,例如在约7.2至7.6的ph,更优选在约7.4的ph条件下使用所述多肽、核酸、载体、宿主细胞和组合物。本发明还涉及治疗或预防受试者中由肠球菌属的细菌引起的感染的方法,该方法包括使所述受试者与根据本发明的多肽(或同样地,根据本发明的核酸、根据本发明的载体、根据本发明的宿主细胞和/或根据本发明的组合物)接触。特别地,本发明涉及治疗或预防受试者中由肠球菌属的细菌引起的感染的方法,该方法包括使所述受试者与包含第一和第二氨基酸序列的多肽接触,其中所述第一氨基酸酸序列是选自以下序列组的序列:i)根据seqidno:2的氨基酸序列;ii)根据seqidno:3的氨基酸序列;iii)根据seqidno:5的氨基酸序列;和iv)seqidno:2,seqidno:3或seqidno:5中任一个的衍生物,其分别与seqidno:2,seqidno:3或seqidno:5表现出至少80%的序列同一性,其中第二氨基酸序列是抗微生物肽、两亲性肽、阳离子肽、疏水性肽、寿司肽或防御素。同样,对于本发明多肽的上述公开内容也考虑用于所述治疗方法中要使用的多肽(和核酸、载体、宿主细胞和/或组合物)。特别地,详述seqidno:5及其衍生物的公开内容认为是要用于治疗或预防由肠球菌属细菌引起的感染的方法中的多肽的实施方案。关于根据本发明的治疗方法,发明人还特别考虑在约生理学ph,在约7.2至7.6的ph,更优选在约7.4的ph条件下使用所述多肽、核酸、载体、宿主细胞和组合物。在另一方面,本发明涉及根据本发明的多肽(或根据本发明的核酸、根据本发明的载体、根据本发明的宿主细胞和/或根据本发明的组合物)用于消毒无生命表面、组合物和/或物体,特别是在医源性环境或医生诊室中的用途。优选地,这在约生理学ph条件下完成,例如,在约7.2至7.6的ph,更优选在约7.4的ph。另一方面,本发明涉及根据本发明的多肽(或根据本发明的核酸、根据本发明的载体、根据本发明的宿主细胞和/或根据本发明的组合物)用于防止细菌污染无生命表面、组合物和/或物体的用途,特别是用于防止粪肠球菌和/或屎肠球菌细菌的污染。同样,这优选在约生理学ph条件下完成,例如,在约7.2至7.6的ph,更优选在约7.4的ph。以上针对本发明多肽的公开内容也考虑用于根据本发明的用途。特别地,详述seqidno:5及其衍生物的公开内容认为是待使用的多肽的实施方案。在另一方面,本发明涉及消毒无生命表面、组合物和/或物体的方法,特别是在医院环境或医生诊室中,其中该方法包括使无生命的表面、组合物和/或物体与根据本发明的多肽(或根据本发明的核酸、根据本发明的载体、根据本发明的宿主细胞,和/或根据本发明的组合物)接触。该方法优选在约生理学ph条件下完成,例如,在约7.2至7.6的ph,更优选在约7.4的ph。另一方面,本发明涉及防止细菌污染无生命表面、组合物和/或物体,特别是用于防止粪肠球菌和/或屎肠球菌细菌的污染的方法,其中该方法包括使无生命表面接触、组合物和/或物体与根据本发明的多肽(或根据本发明的核酸、根据本发明的载体、根据本发明的宿主细胞、和/或根据本发明的组合物)接触。该方法也优选在反映约生理学ph的ph条件下进行,例如,在约7.2至7.6的ph,更优选在约7.4的ph。上述本发明多肽的公开内容可考虑用于本发明的消毒方法和本发明的用于防止污染的方法。特别地,详述seqidno:5及其衍生物的公开内容认为是要在所述方法中使用的多肽的实施方案。实施例在下文中,呈现了说明本发明的各种实施方案和方面的具体实施例。然而,本发明不应限于本文所述的具体实施方案的范围。实际上,除了本文所述的那些之外,本发明的各种修改对于本领域技术人员而言将从前面的描述和以下实施例将变得显而易见。所有这些修改都落入所附权利要求书的范围内。实施例1:与野生型内溶素相比对粪肠球菌细菌的抗细菌活性增加在lb(luria-bertani)培养基中将粪肠球菌培养过夜,并在相同的培养基中以1:10稀释。在光学密度od600约0.6,将细菌沉淀,在缓冲液(10mmhepes,ph7.4)中清洗,并在相同缓冲液中以1:10稀释。将50μl细菌溶液与50μl蛋白质溶液(10μg在20mmhepes,300mmnacl,ph7.4中)或对照(20mmhepes,300mmnacl,ph7.4)混合。使用的蛋白质是根据seqidno:1的野生型内溶素(wt)和包含seqidno:93的根据本发明的多肽。样品在37℃温和搅拌下温育60分钟。将25μl未稀释的样品和在1xpbs缓冲液中的1:10稀释系列在lb琼脂平板上铺板,将所述lb琼脂平板在37℃温育过夜。计数菌落并测定生长减少。下表3显示了与野生型内溶素和根据本发明的多肽一起温育后粪肠球菌hc-1909-5的生长减少。与内溶素温育导致细菌消除99.99%(4个对数)。与融合蛋白一起温育后达到超过99,999%(≥5个对数)。进行四次1:10稀释,导致5个对数减少的测试计数限度。表3:实施例2:在宽ph范围内与野生型内溶素相比对粪肠球菌细菌的抗细菌活性增加在lb(luria-bertani)培养基中将粪肠球菌细菌培养过夜,并在相同的培养基中以1:10稀释。在光学密度od600为约0.6,将细菌沉淀,在不同的缓冲液中清洗。使用的缓冲液如下:100mm苹果酸二钠盐,ph5和ph6以及1mna2hpo4和1mnah2po4的混合物,ph7.4和ph8。然后将细菌在不同缓冲液中以1:10稀释(见上文)。将50μl细菌溶液与50μl蛋白质溶液(10μg在20mmhepes,300mmnacl,ph7.4中)或对照(20mmhepes,300mmnacl,ph7.4)混合。使用的蛋白质是根据seqidno:1的野生型内溶素(wt)和包含seqidno:93的根据本发明的多肽。混合细菌和蛋白质后的最终ph值如下:ph5.25,ph6.5,ph7.4和ph7.75。将样品在37℃在温和搅拌的情况下温育60分钟。将25μl未稀释的样品和在1xpbs缓冲液中的1:10稀释系列在lb琼脂平板上铺板,将所述lb琼脂平板在37℃温育过夜。计数菌落并测定生长减少。进行4个1:10稀释,导致5个对数减少的测试计数限度。下表4显示了与野生型内溶素和根据本发明的多肽一起温育后,在不同ph条件下粪肠球菌菌株hc-1909-5的生长减少。对于野生型内溶素,从ph5.25-ph7.75可见99-99.9%(2-3个对数)细菌消除,在碱性ph下活性降低。用融合蛋白达到99.99-99.997%(4-4.5个对数)的细菌消除,在碱性ph下活性仅略微降低。表4:[ph]野生型内溶素seqidno:93seqidno:1025,253个对数4.5个对数3.5log个对数63个对数4.5个对数4个对数7,42个对数4.5个对数3.5个对数7,752.5个对数4个对数2.5个对数类似的结果(例如在宽ph范围内基本上恒定的抗菌活性,特别是在7.4的生理学ph下没有显著的活性损失)也可以用本发明的其他多肽,例如包含额外his标签的多肽(例如seqidno:94或seqidno:103)实现,或用包含seqidno:1的细胞壁结合域(cbd)和另外的催化域,例如根据seqidno:104的序列的多肽实现。此类多肽的实例是包含seqidno:105的多肽。实施例3:针对多种多样的一组肠球菌菌株的宽抗菌活性在lb(luria-bertani)培养基中将细菌培养过夜,并在相同培养基中以1:10稀释。在光学密度od600约0.6,将细菌沉淀,在缓冲液(10mmhepes,ph7.4)中清洗,并在相同缓冲液中以1:10稀释。将50μl细菌溶液与50μl蛋白质溶液(10μg在20mmhepes,300mmnacl,ph7.4中)或对照(20mmhepes,300mmnacl,ph7.4)混合。使用的蛋白质是根据seqidno:1的野生型内溶素(wt)和包含seqidno:93的根据本发明的多肽。在37℃温和搅拌下温育样品60分钟。将25μl未稀释的样品和在1xpbs缓冲液中的1:10稀释系列在lb琼脂平板上铺板,将所述lb琼脂平板在37℃温育过夜。计数菌落并测定生长减少。进行四次1:10稀释,导致5个对数减少的测试计数限度。下表5显示了不同粪肠球菌、屎肠球菌和其他肠球菌菌株的生长减少。平均而言,测定到99.9987%(4.9个对数)的细菌消除。表5:菌株生长减少粪肠球菌hc-1909-5≥5个对数屎肠球菌ncimb11181≥5个对数粪肠球菌dsm20478≥5个对数粪肠球菌va96529≥5个对数屎肠球菌va80443≥5个对数粪肠球菌12470≥5个对数屎肠球菌13368≥5个对数粪肠球菌nwv16205≥5个对数粪肠球菌nmv10462≥5个对数屎肠球菌90-2≥5个对数粪肠球菌nwv21315≥5个对数粪肠球菌nwv16205≥5个对数屎肠球菌nwv6818≥5个对数屎肠球菌nwv8780≥5个对数粪肠球菌dsm20478≥5个对数屎肠球菌13372≥5个对数屎肠球菌133715个对数屎肠球菌13370≥5个对数屎肠球菌13369≥5个对数粪肠球菌13350≥5个对数粪肠球菌13293≥5个对数粪肠球菌12643≥5个对数粪肠球菌12583≥5个对数粪肠球菌ur10856≥5个对数粪肠球菌va32880_35个对数e.spec.colja94个对数粪肠球菌dsm12956≥5个对数粪肠球菌dsm2981≥5个对数粪肠球菌dsm2570≥5个对数粪肠球菌dsm61344个对数粪肠球菌bobby2≥5个对数e.spec.02.15-1.544个对数屎肠球菌≥5个对数序列表<110>莱桑多公司<120>针对肠球菌细菌的新抗微生物剂<130>lys-044pct<150>ep16194788<151>2016-10-20<160>105<170>patentinversion3.5<210>1<211>314<212>prt<213>肠球菌噬菌体phi1<400>1metserasnileasnmetgluthralailealaasnmettyralaleu151015lysalaargglyilethrtyrsermetasntyrserargthrglyala202530aspglythrglyaspcysserglythrvaltyraspserleuarglys354045alaglyalaseraspalaglytrpvalleuasnthraspsermethis505560sertrpleuglulysasnglyphelysleuilealaglnasnlysglu65707580trpseralalysargglyaspvalvalilepheglylyslysglyala859095serglyglyseralaglyhisvalvalilepheileserserthrgln100105110ileilehiscysthrtrplysseralathralaasnglyvaltyrval115120125aspasnglualathrthrcysprotyrsermetglytrptyrvaltyr130135140argleuasnglyglyserthrproprolysproasnthrlyslysval145150155160lysvalleulyshisalathrasntrpserproserserlysglyala165170175lysmetalaserphevallysglyglythrphegluvallysglngln180185190argproilesertyrsertyrserasnglnglutyrleuilevalasn195200205lysglythrvalleuglytrpvalleuserglnaspilegluglygly210215220tyrglyseraspargvalglyglyserlysprolysleuproalagly225230235240phethrlysgluglualathrpheileasnglyasnalaproilethr245250255thrarglysasnlysproserleuserserglnthralathrproleu260265270tyrproglyglnservalargtyrleuglytrplysseralaglugly275280285tyriletrpiletyralathraspglyargtyrileprovalargpro290295300valglylysglualatrpglythrphelys305310<210>2<211>150<212>prt<213>肠球菌噬菌体phi1<400>2ileasnmetgluthralailealaasnmettyralaleulysalaarg151015glyilethrtyrsermetasntyrserargthrglyalaaspglythr202530glyaspcysserglythrvaltyraspserleuarglysalaglyala354045seraspalaglytrpvalleuasnthraspsermethissertrpleu505560glulysasnglyphelysleuilealaglnasnlysglutrpserala65707580lysargglyaspvalvalilepheglylyslysglyalaserglygly859095seralaglyhisvalvalilepheileserserthrglnileilehis100105110cysthrtrplysseralathralaasnglyvaltyrvalaspasnglu115120125alathrthrcysprotyrsermetglytrptyrvaltyrargleuasn130135140glyglyserthrpropro145150<210>3<211>65<212>prt<213>肠球菌噬菌体phi1<400>3glualathrpheileasnglyasnalaproilethrthrarglysasn151015lysproserleuserserglnthralathrproleutyrproglygln202530servalargtyrleuglytrplysseralagluglytyriletrpile354045tyralathraspglyargtyrileprovalargprovalglylysglu505560ala65<210>4<211>21<212>prt<213>未知<220><223>buforinii脊椎动物<400>4thrargserserargalaglyleuglnpheprovalglyargvalhis151015argleuleuarglys20<210>5<211>313<212>prt<213>肠球菌噬菌体phi1<400>5serasnileasnmetgluthralailealaasnmettyralaleulys151015alaargglyilethrtyrsermetasntyrserargthrglyalaasp202530glythrglyaspcysserglythrvaltyraspserleuarglysala354045glyalaseraspalaglytrpvalleuasnthraspsermethisser505560trpleuglulysasnglyphelysleuilealaglnasnlysglutrp65707580seralalysargglyaspvalvalilepheglylyslysglyalaser859095glyglyseralaglyhisvalvalilepheileserserthrglnile100105110ilehiscysthrtrplysseralathralaasnglyvaltyrvalasp115120125asnglualathrthrcysprotyrsermetglytrptyrvaltyrarg130135140leuasnglyglyserthrproprolysproasnthrlyslysvallys145150155160valleulyshisalathrasntrpserproserserlysglyalalys165170175metalaserphevallysglyglythrphegluvallysglnglnarg180185190proilesertyrsertyrserasnglnglutyrleuilevalasnlys195200205glythrvalleuglytrpvalleuserglnaspilegluglyglytyr210215220glyseraspargvalglyglyserlysprolysleuproalaglyphe225230235240thrlysgluglualathrpheileasnglyasnalaproilethrthr245250255arglysasnlysproserleuserserglnthralathrproleutyr260265270proglyglnservalargtyrleuglytrplysseralagluglytyr275280285iletrpiletyralathraspglyargtyrileprovalargproval290295300glylysglualatrpglythrphelys305310<210>6<211>6<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>6lysarglyslysarglys15<210>7<211>5<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<220><221>misc_feature<222>(3)..(3)<223>xaa可以是任何天然存在的氨基酸<400>7lysargxaalysarg15<210>8<211>5<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>8lysargserlysarg15<210>9<211>5<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>9lysargglysergly15<210>10<211>9<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>10lysarglyslysarglyslysarglys15<210>11<211>9<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>11argargargargargargargargarg15<210>12<211>8<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>12lyslyslyslyslyslyslyslys15<210>13<211>10<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>13lysarglyslysarglyslysarglyslys1510<210>14<211>12<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>14lysarglyslysarglyslysarglyslysarglys1510<210>15<211>14<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>15lysarglyslysarglyslysarglyslysarglyslysarg1510<210>16<211>16<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>16lyslyslyslyslyslyslyslyslyslyslyslyslyslyslyslys151015<210>17<211>18<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>17lysarglyslysarglyslysarglyslysarglyslysarglyslys151015arglys<210>18<211>19<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>18lysarglyslysarglyslysarglyslysarglyslysarglyslys151015arglyslys<210>19<211>19<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>19argargargargargargargargargargargargargargargarg151015argargarg<210>20<211>19<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>20lyslyslyslyslyslyslyslyslyslyslyslyslyslyslyslys151015lyslyslys<210>21<211>20<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>21lysarglyslysarglyslysarglysargserlysarglyslysarg151015lyslysarglys20<210>22<211>21<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>22lysarglyslysarglyslysarglysargserlysarglyslysarg151015lyslysarglyslys20<210>23<211>21<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>23lysarglyslysarglyslysarglyslysarglyslysarglyslys151015arglyslysarglys20<210>24<211>22<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>24lysarglyslysarglyslysarglysargglyserglylysarglys151015lysarglyslysarglys20<210>25<211>24<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>25lysarglyslysarglyslysarglysargglyserglyserglylys151015arglyslysarglyslysarglys20<210>26<211>25<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>26lysarglyslysarglyslysarglyslysarglyslysarglyslys151015arglyslysarglyslysarglyslys2025<210>27<211>31<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>27lysarglyslysarglyslysarglysargserlysarglyslysarg151015lyslysarglysargserlysarglyslysarglyslysarglys202530<210>28<211>38<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>28lysarglyslysarglyslysarglysargglyserglyserglylys151015arglyslysarglyslysarglysglyserglyserglylysarglys202530lysarglyslysarglys35<210>29<211>39<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>29lysarglyslysarglyslysarglyslysarglyslysarglyslys151015arglyslysarglyslysarglyslysarglyslysarglyslysarg202530lyslysarglyslysarglys35<210>30<211>42<212>prt<213>人工<220><223>合成序列<400>30lysarglyslysarglyslysarglysargserlysarglyslysarg151015lyslysarglysargserlysarglyslysarglyslysarglysarg202530serlysarglyslysarglyslysarglys3540<210>31<211>37<212>prt<213>智人<400>31leuleuglyaspphephearglysserlysglulysileglylysglu151015phelysargilevalglnargilelysasppheleuargasnleuval202530proargthrgluser35<210>32<211>29<212>prt<213>未知<220><223>smap-29绵羊<400>32argglyleuargargleuglyarglysilealahisglyvallyslys151015tyrglyprothrvalleuargileileargilealagly2025<210>33<211>13<212>prt<213>未知<220><223>indolicidine牛<400>33ileleuprotrplystrpprotrptrpprotrpargarg1510<210>34<211>18<212>prt<213>未知<220><223>protegrin猪<400>34argglyglyargleucystyrcysargargargphecysvalcysval151015glyarg<210>35<211>31<212>prt<213>未知<220><223>杀菌肽p1哺乳动物(猪)<400>35sertrpleuserlysthralalyslysleugluasnseralalyslys151015argilesergluglyilealailealaileglnglyglyproarg202530<210>36<211>23<212>prt<213>未知<220><223>爪蟾抗菌肽(magainin)蛙<400>36glyileglylyspheleuhisseralalyslyspheglylysalaphe151015valglygluilemetasnser20<210>37<211>25<212>prt<213>未知<220><223>pleurocidin鱼<400>37glytrpglyserphephelyslysalaalahisvalglylyshisval151015glylysalaalaleuthrhistyrleu2025<210>38<211>36<212>prt<213>埃及伊蚊<400>38glyglyleulyslysleuglylyslysleugluglyalaglylysarg151015valpheasnalaalaglulysalaleuprovalvalal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095glyglyhisthrglyilepheileaspproaspasnileilehiscys100105110asntyralaargasnserilethrvalaspasntyrasnglnthrala115120125alaalaserglytrpmettyrsertyrvaltyrargleualaasngln130135140thrserthralaglylysserleugluthrleuvalglngluthrleu145150155160alaglylystyrglyasnglyaspglnarglysalaalaleuglyasn165170175glntyrglualavalmetalavalileasnglylysalathralapro180185190lyslysthrvalaspglnleualaglngluvalilealaglylyshis195200205glyasnglyglualaarglysglnserleuglyalaasptyrproala210215220valglnlysargvalthrgluleuleulyslysglnproserglupro225230235240serlysglyseraspargvalglyglyserlysprolysleuproala245250255glyphethrlysgluglualathrpheileasnglyasnalaproile260265270thrthrarglysasnlysproserleuserserglnthralathrpro275280285leutyrproglyglnservalargtyrleuglytrplysseralaglu290295300glytyriletrpiletyralathraspglyargtyrileprovalarg305310315320provalglylysglualatrpglythrphelysglyserhishishis325330335hishishishisproglntyrasnglnarg340345当前第1页12
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