含NADH或NADPH的纳米微球及其制备方法与应用与流程

本发明涉及医学与保健品
技术领域：
，尤其涉及一种含nadh或nadph的纳米微球及其制备方法与应用。
背景技术：
：烟酰胺-腺嘌呤二核苷酸(nadh)和烟酰胺-腺嘌呤-磷酸-二核苷酸(nadph)是人体内的生理物质，存在于包括人类细胞在内的所有活细胞中。这些物质是很多酶的辅助因子，而这些酶大部分都可催化氧化-还原反应。nadh或nadph参与人体内上千种生理代谢反应，在基因修复、提高免疫力、抗氧化以及改善睡眠等方面起到重要作用，充足的nadh或nadph能让身体得到更好的保护，预防以及控制疾病，进而保证身体健康。所以体外补充nadh或nadph有利于促进身体各种生理机能保持最佳状态。然而nadh或nadph是生物形式的氢，光照、酸性环境或者空气中的氧气、水分都会破坏nadh或nadph的分子结构，导致其化学性质极不稳定(需即用即配)。此外，由于nadh或nadph不耐酸的特点，使得从外部摄入的nadh或nadph受到胃酸的影响会丧失活性，从而导致无法口服。技术实现要素：有鉴于此，本发明提供一种稳定性好、易保存以及可口服的含nadh或nadph的纳米微球。另，还有必要提供一种所述的含nadh或nadph的纳米微球的制备方法。另，还有必要提供一种所述的含nadh或nadph的纳米微球的药物制剂以及上述含nadh或nadph的纳米微球的应用。本发明提供一种含nadh或nadph的纳米微球，以重量份计，该纳米微球包括30～70份的药学上可用的高分子载体、20～50份的nadh或nadph以及0～15份的粘合剂，所述nadh或nadph至少部分分散于所述高分子载体的内部。本发明还提供一种所述含nadh或nadph的纳米微球的制备方法，包括如下步骤：以重量份计，将30～70份的药学上可用的高分子载体与溶剂混合得到溶胶或乳化液；加热所述溶胶或所述乳化液并过滤后得到高分子载体溶液；以重量份计，将20～50份的nadh或nadph加入到所述高分子载体溶液中，并加入0～15份的粘合剂混合后得到一混合液；以及降温、固化并干燥所述混合液，从而得到所述含nadh或nadph的纳米微球。本发明还提供一种药物制剂，包含所述含nadh或nadph的纳米微球和药学上可接受的辅料。本发明还提供一种所述的含nadh或nadph的纳米微球在治疗神经系统疾病、心脑血管系统疾病中的应用。本发明所具有的优点：本发明提供的所述含nadh或nadph的纳米微球使nadh或nadph得到了有效的保护，解决了其遇光或氧后易分解的问题，延长了nadh或nadph有效成分的保存时间、降低了保存难度。附图说明图1是本发明较佳实施例中的含nadh或nadph的纳米微球的制备流程图。具体实施方式下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的
技术领域：
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本发明较佳实施方式提供一种含nadh或nadph的纳米微球，以重量份计，包括30～70份的药学上可用的高分子载体、20～50份的nadh或nadph以及0～15份的粘合剂，所述nadh或nadph至少部分分散于所述高分子载体的内部。所述高分子载体呈三维网络结构，所述高分子载体包括明胶、阿拉伯胶、海藻酸盐、壳聚糖、淀粉、多糖、环糊精、丝心蛋白以及白蛋白中的至少一种。所述粘合剂包括瓜尔胶、黄原胶以及槐豆胶中的至少一种。在本实施方式中，以重量份计，所述含nadh或nadph的纳米微球还包括0～15份的稳定剂，所述稳定剂包括维生素e、叶绿素、还原性铁氧还蛋白以及维生素c中的至少一种。所述含nadh或nadph的纳米微球的粒径为10～200nm。请参阅图1，本发明较佳实施方式还提供一种制备所述含nadh或nadph的纳米微球的方法，包括如下步骤：s11、以重量份计，将30～70份的高分子载体与溶剂混合得到溶胶或乳化液。在本实施方式中，向所述高分子载体中加入5～100份的溶剂使其溶胀10～20h，制成溶胶或乳化液。所述溶剂包括水、植物油(大豆油)以及浓度为2％～10％的醋酸溶液中的至少一种。优选地，所述溶剂为水。其中，所述高分子载体与水的重量比为1:5～10。s12、加热所述溶胶或所述乳化液并过滤后得到高分子载体溶液。在本实施方式中，所述溶胶或所述乳化液在40～60℃下加热15～35min。如果所述加热的温度过低，所述高分子载体会凝固；如果所述加热的温度过高，所述高分子载体会降解。s13、以重量份计，将20～50份的nadh或nadph加入到所述高分子载体溶液中，并加入0～15份的粘合剂混合后得到一混合液。在本实施方式中，加入所述nadh或nadph后，以1000-1500r/min的转速搅拌20min后得到混合均匀的混合液。其中，nadh或nadph与所述高分子载体的重量比为1:1～4。优选地，以重量份计，在所述搅拌过程中还可加入0～5份的稳定剂。所述粘合剂包括瓜尔胶、黄原胶以及槐豆胶中的其中一种。所述稳定剂包括维生素e、叶绿素、还原性铁氧还蛋白以及维生素c中的其中一种。s14、降温、固化并干燥所述混合液，从而得到所述含nadh或nadph的纳米微球。在本实施方式中，将所述混合液放置于冰水浴中降温至0～10℃。所述干燥的温度不高于50度，避免所述高分子载体发生降解以及所述含nadh或nadph的纳米微球成球效果不好，且避免nadh或nadph的分子结构发生破坏。优选地，在所述固化过程中还可以加入氢氧化钠调节所述混合液的ph至6～8，以加速所述混合液的固化。此外，调节所述混合液的ph至6～8也可使得nadh或nadph比较稳定，容易粘附在所述高分子载体的纤维上。优选地，所述混合液中还可以加入浓度为1％～10％的食品添加固化剂以进行固化，然后用水或生理盐水洗涤，最后真空干燥后得到所述含nadh或nadph的纳米微球。所述食品添加固化剂可为氯化钙、葡萄糖酸钙、磷酸氢钙或磷酸二氢钙。优选地，所述含nadh或nadph的纳米微球可经过20目或者25目筛整粒。本发明还提供一种药物制剂，包含所述含nadh或nadph的纳米微球和药学上可接受的辅料。所述药物制剂为片剂、粉剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、混悬剂、溶液剂、糖浆剂、合剂、散剂、药粉以及滴丸中的其中一种。优选地，所述片剂包括普通片剂、包衣片剂、薄膜包衣片剂以及肠溶片剂中的其中一种。在本实施方式中，所述普通片剂是指通过直接压缩或颗粒化之后压缩获得的未包衣片剂。在本实施方式中，所述包衣片剂是指包裹有酸性稳定包衣的片剂。其中，所述酸性稳定包衣包括纤维素醋酸酯、邻苯二甲酸酯、聚乙酸乙烯酯邻苯二甲酸酯、羟基-丙基-甲基纤维素、邻苯二甲酸酯、甲基丙烯酸共聚物、脂-蜡、虫胶以及玉米蛋白中的其中一种。在本实施方式中，所述薄膜包衣片剂是覆盖水性涂剂(water-basedvarnishes)的包衣片剂。其中，所述水性涂剂可具有肠溶功能。优选地，所述水性涂剂选自紫胶(紫胶tm)或其盐，异丁烯酸、乙酰酞酸纤维素(acetylphthalatecellulose)、二氧化钛、滑石、枸橼酸三乙酯、pvpk30、姜黄素、叶黄素、羟丙纤维素、羟丙基甲基纤维素或它们的混合物。在本实施方式中，所述肠溶片剂是指能够不改变地通过胃壁屏障(gastricbarrier)的片剂。所述药学上可接受的辅料包括甘露醇、微晶纤维素、硬脂酸镁、羧甲基纤维素以及磷酸氢钙中的其中一种。nadh或nadph的合适口服单一剂量是5～500mg。优选地，nadh或nadph的合适口服单一剂量是5～200mg。nadh或nadph的合适日口服用剂量为5～1500mg。优选地，nadh或nadph的合适日口服用剂量为5～200mg。本发明还提供一种所述含nadh或nadph的纳米微球在治疗疾病中的应用。在本实施方式中，所述含nadh或nadph的纳米微球可用于治疗神经系统疾病、心脑血管系统疾病。所述含nadh或nadph的纳米微球还可用于治疗帕金森症、阿尔茨海默症、苯丙酮尿症、抑郁症、肥胖、糖尿病以及癌症等疾病。下面通过实施例来对本发明进行具体说明。实施例1含nadh的纳米微球的制备：(1)、以重量份计，称取30份的明胶，向明胶中加入50份的蒸馏水使其溶胀10h制成溶胶，将所述溶胶于40℃下加热35min，过滤得到明胶溶液。(2)、以重量份计，将20份的nadh加入到所述明胶溶液中，以1000r/min的转速搅拌20min，并在搅拌中加入15份的粘合剂和15份的稳定剂，所述粘合剂为黄原胶，所述稳定剂为维生素e，得到一混合液。(3)、将所述混合液放置于冰水浴中降温至0～10℃，加入氢氧化钠调节所述混合液的ph为6～8，固化，真空干燥后得到含nadh的纳米微球。实施例2含nadph的纳米微球的制备：(1)、以重量份计，称取40份的阿拉伯胶，向阿拉伯胶中加入50份的蒸馏水使其溶胀10～20h制成溶胶，将所述溶胶于50℃下加热25min，过滤得到阿拉伯胶溶液。(2)、以重量份计，将20份的nadph加入到所述阿拉伯胶溶液中，以1500r/min的转速搅拌20min，并在搅拌中加入10份的粘合剂和15份的稳定剂，所述粘合剂为瓜尔胶，所述稳定剂为叶绿素，得到一混合液。(3)、将所述混合液放置于冰水浴中降温至0～10℃，向所述混合液中滴入浓度为1％～10％的氯化钙溶液进行固化，用氯化钠溶液洗涤，并真空干燥后得到含nadph的纳米微球，将所述含nadph的纳米微球过20目或25目筛整粒。实施例3含nadh的纳米微球的制备：(1)、以重量份计，称取50份的壳聚糖，向壳聚糖中加入100份的蒸馏水使其溶胀10～20h制成溶胶，将所述溶胶于60℃下加热15min，过滤得到壳聚糖溶液。(2)、以重量份计，将20份的nadh加入到所述壳聚糖溶液中，以1200r/min的转速搅拌20min，并在搅拌中加入5份的粘合剂以及15份的稳定剂，所述粘合剂为瓜尔胶，所述稳定剂为叶绿素，得到一混合液。(3)、将所述混合液放置于冰水浴中降温至0～10℃，固化，真空干燥后得到含nadh的纳米微球，向所述含nadh的纳米微球中加入浓度为70％的乙醇，将称量好重量的所述含nadh的纳米微球置于筛孔尺寸由内而外递减的一套筛网上，所述含nadh的纳米微球按照颗粒大小分别留在各层筛面，得到颗粒湿料，将所述颗粒湿料在10～50℃下真空干燥0.5～24h后得到粒径均匀的含nadh的纳米微球。实施例4使用实施例1制得的含nadh的纳米微球分别进行片剂和胶囊剂的制备：片剂的制备：(1)、称取：称取10g的含nadh的纳米微球、40g的d-甘露醇以及20g的微晶纤维素。(2)、混匀压片：向步骤(1)中再加入0.5g的硬脂酸镁，混匀，压片，得到一中间产物。(3)、包衣：用2.5g的隔离包衣和8g的肠溶包衣液包覆步骤(2)中的中间产物。(4)、制成片剂。胶囊剂的制备：(1)、称取：称取10g的含nadh的纳米微球、40g的d-甘露醇以及30g的微晶纤维素。(2)、混匀：向步骤(1)中再加入10g的聚乙烯吡咯烷酮，6g的硬酯酸镁及4g的预胶化淀粉，混匀，得到一混合物。(3)、通过定量灌装的方法将步骤(2)中的混合物装入市售可食性硬或软胶囊外壳中，即得到胶囊制剂。将实施例4制得的片剂在模拟胃酸溶液sgfph＝2的条件下浸泡2h，然后在模拟结肠溶液scfph＝6.8的条件下浸泡6h，分别测试第2h、4h、6h以及8hnadh的释放率，测试结果如表1所示。表1实施例4中的含nadh的纳米微球制成片剂后在模拟胃酸溶液和模拟结肠溶液浸泡后有效成分的释放率时间h释放率％0021.35422.78663.54895.46剩余量0.10总量95.68将实施例4制得的片剂在模拟结肠溶液scfph＝6.8的条件下浸泡8h，分别测试第2h、4h、6h以及8hnadh的释放率，测试结果如表2所示。表2实施例4中的含nadh的纳米微球制成片剂后在模拟结肠溶液浸泡后有效成分的释放率上述测试结果表明，在模拟胃酸溶液和模拟结肠溶液浸泡下，实施例4制得的片剂中有效成分nadh可缓释至溶液中，是一种长效的药剂。将实施例4制得的片剂置于100℃烘箱中分别加热1h、2h、3h、4h以及5h，然后称量样品的减少质量，测试结果如表3所示。表3实施例4中的含nadh的纳米微球制成片剂后在烘箱中加热后样品质量的减少量时间h质量减少％0010.05320.03130.01840.01550.06从表3中可以看出，前3h样品质量减少较多，主要原因是水分的挥发，继续加热5h后，样品的质量减少几乎为零，说明样品的稳定性较好。本发明的上述技术方案相比现有技术具有以下优点：(1)药学可用的所述高分子载体一般为多种氨基酸组成的线性高分子，其作为基体材料，以交联互穿网络结构的形式对nadh或nadph进行包埋，微球化，从而使nadh或nadph得到了保护，解决了其遇光或氧后易分解的问题，延长了nadh或nadph有效成分的保存时间、降低了保存难度。(2)本发明的所述含nadh或nadph的纳米微球中，大部分nadh或nadph分散于所述高分子载体的交联互穿网络的内部，少部分负载于所述高分子载体外表面。这种三维互穿网络结构的所述高分子载体，兼具生物活性和负载nadh或nadph有效成分的作用，使负载于网络结构间的nadh或nadph得到保护，解决了nadh或nadph遇胃酸快速分解、无法充分发挥效用的问题，是一种具有肠道缓释效果的高分子载体，为nadh或nadph治疗帕金森症、阿尔茨海默症、抑郁症以及癌症等疾病提供了一种理想的药物载体。其通过缓释nadh或nadph有效成分，激活dna修复酶对dna进行修复，进一步还可以预防癌症的发生。(3)所述高分子载体是一种天然的高分子可溶性膳食纤维，其粘度高、吸水多、膨胀快，具有良好的生物官能性和相容性、安全性和微生物降解性。例如，明胶既含羧基又含氨基，是一种两性电解质，而nadh或nadph既含氨基又含有羟基的两性电解质，使得所述高分子载体与所述nadh或nadph之间能够很好的通过电解平衡达到稳定状态。(4)本发明中所述粘合剂具有良好的粘合作用，能有效的将所述高分子载体的纤维粘合在一起，使其更易成团，同时还能在nadh表面形成一层保护膜，保护其不被胃酸分解，并使其缓释出来。此外，本发明的所述稳定剂可以增强nadh的稳定性，维生素e具有较强的抗氧化性，叶绿素也能有效的防止nadh的氧化分解。(5)本发明的制备工艺操作简单，制备方便，具有较高的工业实用性。通过冷凝或真空干燥的方式成型，操作简单，做成纳米微球形态良好，且粒径小，易吸收。(6)本发明所述的含nadh或nadph的纳米微球还可进一步制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、混悬剂、溶液剂、糖浆剂、合剂、散剂、药粉、滴丸等口服剂型，为nadh或nadph应用于制备治疗疾病的药物，提供了更多的剂型选择。以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和实质。当前第1页12