本发明涉及一种缓解视疲劳的中药组合物及其制备方法，属于中药应用领域。
背景技术：
：视疲劳是眼科常见病，主要症状为视物不能持久、视物模糊、头痛等。随着电脑的普及运用，人们近距离用眼的时间延长，加以工作精确性、负责性的增加，使得视疲劳患者逐年增加。由于视疲劳给患者的工作、学习和生活带来诸多不便，直接影响了学习、工作效率和生活质量。以往治疗视疲劳，频繁点眼药水以及服用多种维生素，或者减少用药时间，患者常不易接受。如何预防、治疗和调养视疲劳，已成为眼科界关注的课题。中医认为眼能视万物，辨五色，必须依赖五脏六腑之精气上行灌注，心主血，肝藏血，心血充足，肝血畅旺，肝气条达时，肾脏所藏五脏六腑之精气，就能借助脾肺之气的转输和运化，循经络上注于眼，在心神的支使下，发挥正常的生理功能。视疲劳属中医眼科“肝劳”的范畴，目为肝窍，生于肾，用于心，究其病机，主要与肝心肾有关。视疲劳多由久视劳心伤神，损脾耗气，或劳瞻竭视，肝肾精血亏耗，不能濡养目窍所致，与脾、肝、肾、气、血关系密切，临床常用益气、健脾、舒肝、补肾、养血之药防治。例如，宋代《原机启微》方石斛夜光丸由天门冬、麦门冬、生地、熟地、五味子、石斛、菟丝子、枸杞子、牛膝、肉苁蓉、菊花、决明子等25味中药组成，平肝清心、疏风清热、健脾益肺、调补肝肾、滋阴明目，能够改善视疲劳等症状。又如，民间常用枸杞、桑葚、菊花、龙眼肉或者枸杞、龙眼肉、石斛等泡水代茶饮用以清肝明目，改善视疲劳。基于经方及民间常用药，也有用于缓解眼疲劳的自拟方，例如，中国专利申请CN201010163954公开了一种杞菊明目益智饮料的配方，组成为枸杞10-20％、菊花5-20％、决明子5-20％、桑葚5-20％、山楂5-10％、桂圆5-20％、大枣5-20％等，经常饮用能够达到消除眼疲劳的效果。又如，中国专利申请CN201310091224公开了一种补肾润发饮料产品，主要由枸杞子、黄精、桑葚、黑芝麻、山药、百合、菊花、沙棘等成分组成，虽然在该专利申请中提到所述饮料产品有改善视疲劳等症状，但是其疗效试验仅验证了对肝肾阴虚脱发患者的疗效，并没有对该产品是否改善视疲劳等症状予以验证。然而，目前已有的产品或者方药仅笼统地提到改善视疲劳，没有疗效试验数据，更没有采用现代药理学方法对改善视疲劳引起的症状的疗效进行深入研究。本发明在已有方药的基础上进行改进并深入研究，得到了疗效明确且显著的新的用于缓解视疲劳的中药组合物。技术实现要素：本发明的一个目的是提供一种缓解视疲劳的中药组合物，所述中药组合物针对视疲劳引起的视朦、眼胀、眼部干涩、灼痛、眼及眼眶酸痛等眼部症状具有明显缓解效果。为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是提供一种缓解视疲劳的中药组合物，所述中药组合物由以下质量配比的中药原料制成：龙眼肉5-12g，枸杞6-15g，桑葚5-15g，石斛6-15g，甘菊5-12g，黑芝麻5-15g，百合6-15g，黄精5-12g。在一个实施方案中，所述中药组合物由以下质量配比的中药原料制成：龙眼肉6-10g，枸杞8-12g，桑葚6-12g，石斛6-10g，甘菊6-12g，黑芝麻8-15g，百合6-12g，黄精6-10g。在一个实施方案中，所述中药组合物由以下质量配比的中药原料制成：龙眼肉8g，枸杞10g，桑葚8g，石斛8g，甘菊8g，黑芝麻10g，百合8g，黄精8g。本发明的另一目的还在于提供一种缓解视疲劳的中药组合物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：按质量配比取各中药原料，混合均匀后加入无纺布袋内，置于煎药机内，加水，没过无纺布袋，浸泡，然后武火加热后文火加热，滤过，水浴浓缩，即得。在一个实施方案中，所述制备方法包括以下步骤：按质量配比取各中药原料，混合均匀后加入无纺布袋内，置于煎药机内，加入8-12倍量水，没过无纺纱布袋，浸泡20-40min，煎药过程为武火加热25-45min后文火加热15-25min，滤过，水浴浓缩至300-500mL。在一个实施方案中，所述制备方法包括以下步骤：按质量配比取各中药原料，混合均匀后加入无纺布袋内，置于煎药机内，加入10倍量水，没过无纺纱布袋，浸泡30min，煎药过程为武火加热30min后文火加热20min，滤过，水浴浓缩至400mL。本发明所述的中药组合物中，各药材的归经和功效如下：名称归经功效龙眼肉心、脾补心脾，安心神，益气血石斛胃、肾养胃生津、滋阴除热、明目强腰黄精脾、肺、肾滋阴润肺，补脾益气枸杞子肝、肾、肺滋补肝肾，益精明目百合心、肺滋阴润肺，清心安神桑葚心、肝、肾滋阴补血、生津润肠菊花肝、肺疏散风热，平肝明目，清热解毒黑芝麻肝、肾、大肠补肝肾、益精血，润肠通便其中，枸杞子，味甘性平，滋补肝肾，益精明目，善于治疗肝肾阴虚引起的视力减退，故为君药；配伍石斛，滋阴明目强腰；菊花，清热平肝明目，即能滋肾阴，又可抑肝阳，助君药滋阴补肾，平肝明目，共为臣药；配伍龙眼肉、百合清心安神；黄精、桑葚、黑芝麻补益气血，治疗气血亏虚引起的头痛、乏力等症状，共为佐药。纵观全方，滋肝肾阴，平肝明目，补益气血，共奏滋阴补肾，养肝明目之功。有益效果：(1)本发明的中药组合物针对视疲劳引起的视朦、眼胀、眼部干涩、灼痛、眼及眼眶酸痛等眼部症状具有明显缓解效果。(2)经研究发现，中药含药血浆在细胞层面抑制泪腺上皮细胞凋亡，分子水平发现抑制泪腺上皮细胞中bax，CASP9mRNA表达及促进Bcl-2，AKT，PI3K等表达，从而达到双向调控泪腺上皮细胞增殖与凋亡的作用。(3)本发明所述的中药组合物的作用机制主要为抑制泪腺上皮细胞凋亡，能促进基质生成，为细胞迁移提供构架，利于角膜上皮细胞的生长，从而促进角膜伤口的愈合；改善血液循环、加速新陈代谢，维持角膜细胞外环境的相对稳定性。具体实施方式在下文中更详细地描述了本发明以有助于对本发明的理解。应当理解的是，在说明书和权利要求书中使用的术语或词语不应当理解为具有在字典中限定的含义，而应理解为在以下原则的基础上具有与其在本发明上下文中的含义一致的含义：术语的概念可以适当地由发明人为了对本发明的最佳说明而限定。实施例1：一种缓解视疲劳的中药组合物，由以下质量配比的中药原料制成：龙眼肉8g，枸杞10g，桑葚8g，石斛8g，甘菊8g，黑芝麻10g，百合8g，黄精8g；所述中药组合物的制备方法包括以下步骤：按上述质量配比取药，一剂为68g，取七剂复方成分共计476g，混合均匀后加入无纺布袋内，置于煎药机内，加入10倍量水，没过无纺纱布袋，浸泡30min，武火加热30min后文火加热20min，滤过，水浴浓缩至400mL。实施例2：一种缓解视疲劳的中药组合物，由以下质量配比的中药原料制成：龙眼肉6g，枸杞8g，桑葚6g，石斛6g，甘菊6g，黑芝麻8g，百合6g，黄精6g；所述中药组合物的制备方法包括以下步骤：按上述质量配比取药，一剂为52g，取七剂复方成分共计364g，混合均匀后加入无纺布袋内，置于煎药机内，加入8倍量水，没过无纺纱布袋，浸泡30min，武火加热25min后文火加热20min，滤过，水浴浓缩至300mL。实施例3：一种缓解视疲劳的中药组合物，由以下质量配比的中药原料制成：龙眼肉10g，枸杞15g，桑葚10g，石斛10g，甘菊10g，黑芝麻15g，百合10g，黄精10g；所述中药组合物的制备方法包括以下步骤：按上述质量配比取药，一剂为90g，取七剂复方成分共计630g，混合均匀后加入无纺布袋内，置于煎药机内，加入12倍量水，没过无纺纱布袋，浸泡30min，煎药过程为武火加热40min后文火加热25min，滤过，水浴浓缩至500mL。试验例1：本发明的中药组合物对视疲劳引起的干眼症的疗效研究1.材料与方法1.1实验动物和分组健康雄性成年新西兰大白兔，体质量1.5-2.0kg，共90只，购自于黑龙江中医药大学安全评价中心，实验动物质量合格证号：syxK(黑)20100324，无菌环境中饲养，温度为18℃～22℃，湿度70％。常规饲养1周后，随机分为空白组、模型对照组、低剂量试验组(3.5g/kg)，中剂量试验组(7g/kg)，高剂量试验组(14g/kg)和对照药物组。低、中、高剂量试验组的治疗药物为实施例1制备得到的中药组合物。对照药物是由龙眼肉8g、枸杞10g、桑葚8g、石斛8g、甘菊8g、黑芝麻10g经水煎煮法制备得到，每组15只。1.2干眼症模型建立将雄兔置于兔架上，先用氯胺酮肌肉注射全身麻醉，备皮消毒铺巾，然后于手术区局部注射利多卡因局部麻醉，切开阴囊，不切除睾丸作为空白组，其余五组雄兔行双侧睾丸切除术，切除睾丸及附睾，结扎输精管及精索静脉，连续缝合阴囊皮肤，局部涂碘伏预防感染，去势8周后建立去势雄兔干眼症模型。空白组灌胃给予同体积的蒸馏水，其余各组给予相应体积的药物，连续治疗4周。1.3检测指标1.3.1泪液分泌量和泪膜破裂时间测定每次检查时间、地点、照明亮度、湿度及温度相同。于实验前和实验后两周进行泪液分泌量和泪膜破裂时间，检测方法为取泪流量检测滤纸条，沿缺口标记处折叠，将钝端置入兔下睑中外1/3部位的结膜囊中，使其双眼自然完全闭合，5min后读取其染色部分长度，若长度＜5mm则提示干眼；泪膜破裂时间检测：玻璃棒蘸荧光素滴于兔下睑结膜囊内，眼睑闭合使荧光素均匀分布于角膜表面，后固定其上下睑使角膜充分暴露，于裂隙灯下用钻蓝光照射观察，检查从最后一次瞬目开始，记录结膜上出现第一个破裂点的时间。1.3.2泪液中IL-6、TNF-α、LP含量测定各组药物治疗完成后，同一环境中分别在雄兔结膜囊内滴注60μl0.9％生理盐水后，轻拉下睑结膜并微压，用毛细玻璃管吸取泪液，转移至离心管，-80℃保存，采用酶联免疫吸附法测定泪液中IL-6、TNF-α、LF的浓度，严格按试剂盒说明书进行操作。用酶标仪测OD450值，计算其相应浓度。1.3.3泪腺组织中caspase3、bax、bcl2、PI3K和AKTmRNA表达所有去势雄兔在给药4周后，采用空气栓塞法处死，迅速摘取双眼泪腺，置于液氮中保存，具体步骤按照RT-PCR试剂盒说明书进行。引物序列如表1所示：表1引物序列表1.4统计分析采用SPSS20.0统计学软件进行统计分析，统计学描述以平均值±标准偏差表示，不同组间比较采用单因素方差分析，以P<0.05作为差异有统计学意义。2.结果2.1SIT和BUT结果如表所示为雄兔去势前和去势后泪液分泌量和泪膜破裂时间，去势前空白组和模型组中SIT和BUT差异没有统计学差异，去势后模型组中泪液分泌量明显降低和泪膜破裂时间明显缩短，两组比较差异具有统计学意义(p<0.01)。以上结果表明去势干眼症建立成功。与空白组比较，**P<0.01。2.2泪液中IL-6、TNF-α和LF含量变化与空白组比较，aP<0.05；与模型组比较，bP<0.05；与对照药物组比较，cP<0.05。与空白组比较，模型组中泪液炎性因子IL-6和TNF-α含量明显升高；与模型组比较，低、中、高剂量试验组中泪液炎性因子IL-6和TNF-α含量明显降低(p<0.05)，差异具有统计学意义，且随着剂量的增加抑制炎性因子作用增强，对照药物组中泪液炎性因子IL-6和TNF-α含量明显降低(p<0.05)，差异具有统计学意义；与对照药物组比较，中、高剂量试验组中泪液炎性因子IL-6和TNF-α含量明显降低(p<0.05)，差异具有统计学意义；与空白组比较，模型组中泪液中LF含量明显降低；与模型组比较，低、中、高剂量试验组中泪液中LF含量明显升高(p<0.05)，差异具有统计学意义，且随着剂量的增加作用逐渐增强，对照药物组中泪液中LF含量明显升高(p<0.05)，差异具有统计学意义；与对照药物组比较，中、高剂量试验组中泪液中LF含量明显升高(p<0.05)，差异具有统计学意义；以上结果表明本发明的实施例1的组合物能够抑制去势雌性兔干眼症IL-6和TNF-α炎性因子活性，增加LF水平促进抑菌作用。2.3泪腺组织中凋亡相关基因BAX、BCL2、CASPASE3mRNA基因变化与空白组比较，模型组中BAX和Caspase3mRNA表达明显升高，BCL2mRNA表达明显降低；与模型组比较，低、中、高剂量试验组中BAX和Caspase3mRNA表达明显降低，BCL2mRNA表达明显升高；对照药物组中BAX和Caspase3mRNA表达明显降低，BCL2mRNA表达明显升高；与对照药物组比较，高剂量试验组中BAX和Caspase3mRNA表达明显降低，BCL2mRNA表达明显升高，差异具有统计学意义。与空白组比较，aP<0.05；与模型组比较，bP<0.05；与对照药物组比较，cP<0.05。2.4泪腺组织中PI3K、AKTmRNA基因变化与空白组比较，模型组中PI3K和AKTmRNA表达降低升高；与模型组比较，低、中、高剂量试验组中PI3K和AKTmRNA表达明显升高；对照药物组中PI3K和AKTmRNA表达明显升高；与对照药物组比较，高剂量试验组中PI3K和AKTmRNA表达明显升高，差异具有统计学意义。组别PI3K/GAPDHAKT/GAPDH空白组1±01±0模型组0.20±0.04a0.31±0.04a低剂量组0.28±0.05b0.37±0.03b中剂量组0.45±0.08b0.51±0.05b高剂量组0.66±0.04bc0.73±0.03bc对照药物组0.50±0.03b0.55±0.05b与空白组比较，aP<0.05；与模型组比较，bP<0.05；与对照药物组比较，cP<0.05。从上述实验结果中可以看出，本发明的中药组合物中添加了黄精、百合后，与对照药物相比，本发明的组合物能够显著抑制去势雌性兔干眼症IL-6和TNF-α炎性因子活性，增加LF水平促进抑菌作用，使得BAX和Caspase3mRNA表达明显降低，BCL2mRNA、PI3K和AKTmRNA表达明显升高，对视疲劳引起的干眼症有显著疗效。以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。当前第1页1 2 3