专利名称：三氟甲基酮衍生物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的三氟甲基酮衍生物。
具体地讲，本发明涉及具有抑制人体白细胞弹性蛋白酶活性的新的三氟甲基酮衍生物及其可药用盐、它们的制备方法，以及含有这类化合物的药用组合物及其应用方法。
下式(Ⅰ)代表本发明的新的三氟甲基酮衍生物
式中R1是带有1或2个取代基的低级烷基，所述取代基选自羧基、酯化羧基和二低级烷基氨甲酰基苯基(低级)烷基，其苯基部分可带有卤素、硝基或氨基，而其烷基部分可带有羧基或酯化羧基;卤代苯基;吗啉代或吗啉代(低级)烷基，R2和R3各自为低级烷基，X是-或-NH-，Y是
按照本发明，采用下述反应式示出各种方法均可制得所述新的三氟甲基酮衍生物(Ⅰ)及其盐。
方法1
在上述各式中，R1a是一或二-酯化羧基(低级)烷基，R1b是一或二-羧基(低级)烷基，R1c是低级亚烷基，R1d是低级烷基，R1至R3、x和y各自的定义如前文所述。
新的式(Ⅰ)三氟甲基酮衍生物的可药用盐可以包括与无机或有机碱形成的盐，以及与有机或无机酸形成的酸加成盐，所述与碱形成的盐的例子有碱金属盐(如钠盐、钾盐、等)、碱土金属盐(如钙盐、等)、铵盐、乙醇胺盐、三乙胺盐、二环己基胺盐等等，所述酸加成盐的例子有甲磺酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐等。
下文详细解释属于本发明范围内的、前文所述的各种定义的优选实例及有关说明。
术语“低级”除另有指明外意指1-6个碳原子。
“卤素”的优选实例是氧、氯、溴和碘。
“低级烷基”的优选实例可以包括含有1-6个碳原子的直链和支链烷烃残基，例如，甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基等等，其中更加优选的是含1-4个碳原子的烷基。
“酯化羧基”的优选实例可以包括烷基酯，即，烷氧羰基，例如，低级烷氧羰基(如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、丁氧羰基、叔丁氧羰基等);苯基(低级)烷基酯，即，苯基(低级)烷氧羰基，例如，苄氧羰基;和苯甲酰基(低级)烷基酯，即，苯甲酰基(低级)烷氧羰基，例如，苯甲酰基甲氧羰基等等。
“低级亚烷基”的优选实例可以包括亚甲基、亚乙基、亚丙基、异亚丙基、等等。
“二-低级烷基氨甲酰基”的优选实例可以包括N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲酰基等等。
下文详细解释了制备本发明目标化合物(Ⅰ)或其盐的方法。
在下文对方法1-5的解释中，化合物(Ⅰ)，(Ⅰa)至(Ⅰf)，以及(Ⅱ)至(Ⅴ)的盐可以包括前文描述三氟甲基酮衍生物(Ⅰ)的可药用盐时所例举的那些盐。
(1)方法1化合物(Ⅱ)+化合物(Ⅲ)→化合物(Ⅰ)由化合物(Ⅱ)或其盐与化合物(Ⅲ)或其盐反应可以制得化合物(Ⅰ)或其盐。
该方法的反应可按如下方式进行。
即，第一种方式是，在第一步反应中，通常以常规方法活化化合物(Ⅱ)或其盐中的羧基，例如，制成其酰卤、叠氮化物、酸酐或混合酸酐、活化酯、等等。再使其与化合物(Ⅲ)反应，得到化合物(Ⅰ)。第二种方式是在下述常规缩合剂存在下使化合物(Ⅱ)或其盐与化合物(Ⅲ)或其盐直接反应，所述缩合剂的例子是N，N-二环己基碳化二亚胺、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺等等。
该反应优选在下述溶剂中，在冰冷却至环境温度的条件下进行，所述溶剂的例子有N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二噁烷、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、水等等，而在缩合剂存在下的反应通常在无水(但并不严格)条件下进行。
(2)方法2化合物(Ⅳ)→化合物(Ⅰ)将化合物(Ⅳ)或其盐氧化可以制得化合物(Ⅰ)及其盐。
通过常规方法，使用可以将羟甲基转化为羰基的氧化剂即可进行该氧化反应，所述氧化剂的例子有高锰酸钾、铬类化合物(如铬酸、铬酸钠、重铬酸、重铬酸钠、氯铬酸吡啶鎓、重铬酸吡啶鎓等等)、Swern试剂(二甲亚砜和草酰氯)、琼氏试剂等等。
该反应通常在常用溶剂中进行，所述溶剂的例子有水、丙酮、二噁烷、二甲基甲酰胺、吡啶或不会给该反应带来有害影响的任何其他有机溶剂，或者是这些溶剂的混合物。
该反应优选在稍温和的条件下进行，例如，在冷却、室温或温热下进行。
(3)方法3化合物(Ⅰa)→化合物(Ⅰb)使化合物(Ⅰa)或其盐经去酯化反应，即可制得式(Ⅰb)化合物。
通过诸如水解、还原等常规方法进行该去酯化反应，下文详细解释这些方法
1)水解优选在酸或碱存在下进行水解。
适宜的酸包括无机酸(如盐酸、氢溴酸、硫酸、等)，有机酸(如甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等)等等。
适宜的碱包括无机碱，例如，碱或碱土金属氢氧化物或相应的碳酸盐或碳酸氢盐(例如，氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、氢氧化钙等)、氢氧化铵等等;有机碱，例如，上述金属的醇盐或酚盐(如乙醇钠、甲醇钠、等)，胺，例如，一，二或三烷基胺(如甲胺、乙胺、N，N-二甲基-1，3-丙二胺、三甲胺、三乙胺等)等等。
该水解优选在比较温和的条件(如冷却或温热)下，在不会对该反应产生有害影响的溶剂中进行，所述溶剂的例子有水、亲水性溶剂例如醇(如甲醇、乙醇、丙酮等)、丙酮、N，N-二甲基甲酰胺等等。呈液体状态的上述酸和碱也可用作溶剂。
2)还原按惯用方法进行还原，其中包括化学还原和催化还原。
用于化学还原的适宜还原剂是金属(如锡、锌、铁等)、或者是这类金属和/或金属化合物(如氯化铬、乙酸铬等)与下述有机或无机酸的组合，所述酸的例子有甲酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、对甲苯磺酸、盐酸等等。
用于催化还原的适宜催化剂是惯用的催化剂，例如，铂催化剂(如铂片、海绵状铂、铂黑、胶体铂、氧化铂等)、钯催化剂(如海绵状钯、钯黑、氧化钯、钯-炭、胶体钯等)等等。
通常在诸如水、醇(如甲醇、乙醇等)等之类的溶剂中进行还原。
最好在稍温和的条件(如冷却、室温或温热)下进行还原。
4).方法4化合物(Ⅰc)→化合物(Ⅰd)将化合物(Ⅰc)或其盐还原可以制得化合物(Ⅰd)或其盐。
按常规方法进行还原，其中包括化学还原和催化还原。
适宜的还原剂可以包括在方法3中所例举的那些还原剂。
通常在溶剂，例如，水、醇(如甲醇、乙醇等)等中进行还原。
最好在比较温和的条件(如冷却，室温或温热)下进行还原。
5)方法5化合物(Ⅰe)+化合物(Ⅴ)→化合物(Ⅰf)将化合物(Ⅰe)或其盐与化合物(Ⅴ)或其盐反应，可以制得化合物(Ⅰf)及其盐。
按照基本上与方法1相同的方法进行该反应。
按照常规的方法，即，用酸或碱处理化合物(Ⅰ)可以制得三氟甲基酮衍生物(Ⅰ)的可药用盐。酸或碱的适宜实例可以包括在解释方法3的“水解”时所例举的那些酸或碱。
起始化合物(Ⅱ)至(Ⅴ)各自包括新化合物，它们可采用下文所述制备例中的方法以及与其类似方法制得。
目标化合物(Ⅰ)(包括化合物(Ⅰa至(Ⅰf))及起始化合物(Ⅱ)、和(Ⅳ)包括由于不对称碳原子而形成的一个或多个异构体，并且，所有这些异构体均属于本发明的范畴。
按照本发明，由于在所述化合物的手性中心(在下文式子中标有△)有R和S构型，所以可得到非对映异构体的混合物，并且，也可以得到光学纯的化合物。
应该注意到，在含水和/或有机溶液中，所说光学纯化合物变为所述非对映异构体的混合物。
此外，还应注意到，本发明的目标化合物(Ⅰ)在含水溶液中形成成水合物，后者也属于本发明的范畴。
三氟甲基酮衍生物(Ⅰ)及其可药用盐具有抑制人类白细胞弹性蛋白酶的活性，并可作为人类白细胞弹性蛋白酶抑制剂用于治疗或预防退化性疾病，例如，肺气肿、粥样动脉硬化、风湿性关节炎、关节硬化、骨关节病、牛皮癣、胰腺炎、牙周病、肺纤维化、囊纤维化、慢性支气管炎、支气管扩张、弥散性全毛细支气管炎(diffuse panbronchioli-tis)、呼吸道损伤、老年性呼吸窘迫综合症等等，并且，还可用于治疗或防止气喘、移植排斥、肾炎、水疱病、弥散性血管内凝血、休克、系统性红斑狼疮、克隆病、局部缺血-复注损伤(ischemia-reperfusioninjury)、慢性梗阻性肺病(COPD)、早熟性膜破裂(premature rupture of the membrane(PROM)、角膜凝血(corneal sarring)或纤维细胞增生(眼内凝血、烧伤、机械和化学操作、角膜-结膜炎等)，和脓毒病。
为了说明三氟甲基酮衍生物(Ⅰ)及其可药用盐的有用性，下文示出了它们的药理实验数据。
实验1.蛋白酶抑制测试(体外)
(1)方法.
在整个测试过程中使用的缓冲液是含有1.5M NaCl，pH7.5的0.1M HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸)。将25微升2mM甲氧基琥珀酰基-(丙)2-脯-缬-对硝基N-酰苯胺(用缓冲液稀释100mM二甲亚砜溶液)和50μl样品(将10μl在有机溶剂中的样品用缓冲液稀释5-倍)在96孔微量滴定板中混合。通过微量滴定板读数器(Corona Electric Co.，Ibaraki，Japan)测定该混合物在波长为415nm处的吸收。测定后，加入25μl浓度为6μg/ml人类唾液弹性蛋白酶(HSE)，将该混合物在室温下放置30分钟。然后测定在415nm处的吸收。按照100×(1-“r”抑制剂/“r”无抑制剂)计算药物的百分抑制率，其中，“r”是保温30分钟后的吸收减去在加入酶之前的吸收。按类似的方法，采用N-琥珀酰基-(丙)3-对硝基苯胺测定抑制剂对猪胰弹性蛋白酶(Ⅳ型、最终浓度5μg/ml)的抑制作用。HSE是从Elastin Products company Inc.，MO，U.S.A.得到的。所有的其他底物和蛋白酶购自Sigma Chemical Co.。
对几种血液蛋白酶活性的抑制作用IC50(M)受试化合物 人类唾液弹 猪胰弹性(实施例号) 性蛋白酶 蛋白酶1 4.5×10-74.4×10-63 9.8×10-78.7×10-64 1.4×10-62.9×10-65 3.0×10-75.1×10-66 4.3×10-76.9×10-67 3.2×10-73.8×10-68 8.7×10-71.6×10-59 8.7×10-79.5×10-610 8.0×10-63.1×10-413 7.2×10-73.3×10-615 6.1×10-72.0×10-616 7.1×10-63.0×10-517 1.1×10-63.4×10-618 6.1×10-73.8×10-619 6.8×10-73.0×10-620 8.9×10-72.4×10-621 1.2×10-63.7×10-622 6.8×10-74.9×10-623 8.1×10-72.4×10-624 1.4×10-63.8×10-627 2.4×10-61.6×10-529 2.4×10-61.9×10-5
实验2.对弹性蛋白酶诱发的肺损伤测定生活性(1)方法采用经戊巴比妥麻醉的仓鼠。在仓鼠的腹面颈部切开一个小口，用带27号针头的1-ml注射器经该切口由气管滴注盐水或含人类唾液弹性蛋白酶的盐水。3小时后，用CO2窒息法将动物处死，再次暴露每只动物的气管。用2.5ml等份盐水灌洗肺脏，然后排出盐水，由每只动物得到最后体积约为1.5ml的支气管肺泡洗出液(BAL)。
离心收集BAL液中的细胞，然后用蒸馏水稀释使之破裂，用分光光度法在541nm处测定血红蛋白含量。
将受试药物溶解在盐水或甲基纤维素中，在滴注弹性蛋白酶前5分钟，按照与滴注弹性蛋白酶相同的方法给气管内滴注受试药物。
(2)结果对弹性蛋白酶诱发的肺出血的抑制作用受试化合物 5分钟(实施例号) 预剂量出血 %抑制 ED50(μg/位点) (OD541nm) (μg/位点)正常 0.6449±0.173＊＊＊-对照 14.66±1.68 -13 1 11.63±1.99 21.6 3.010 4.217±1.02＊＊74.5100 0.6384±0.222＊＊＊100.0
正常 0.8352±0.423＊＊＊-对照 12.89±1.4419 1 11.59±1.40 10.810 1.663±0.690＊＊＊93.1 2.4100 0.2141±0.020＊＊＊105.2正常 0.8352±0.423＊＊＊-对照 12.89±1.44 -20 1 10.94±1.35 16.110 2.522±0.803＊＊＊86.0 2.5100 0.2680±0.050＊＊＊104.7正常 0.6449±0.173＊＊＊-对照 14.66±1.6821 1 12.76±1.11 13.610 5.372±2.06＊＊66.3 4.5100 0.6476±0.129＊＊＊100.0正常 0.9424±0.403＊＊＊-对照 11.05±1.40 -23 1 9.435±0.941 16.010 3.412±1.31＊＊75.6 3.2100 0.7258±0.303＊＊＊102.1正常 0.3203±0.159＊＊-对照 14.11±1.80 -27 1 10.68±1.25 24.810 4.878±0.917＊＊66.9 3.7100 0.3451±0.084＊＊＊99.8正常 0.3199±0.159＊＊＊-对照 14.11±1.80 -29 1 12.05±1.95 14.910 8.155±1.76＊43.2 17.9100 4.545±1.49＊＊69.4＊P<0.05，＊＊P<0.01，＊＊＊P<0.001(“学生”t检验)
实验3对由人类唾液弹性蛋白酶诱发的小鼠爪水肿的作用(1)材料和方法由Japan Clear Inc，得到7-8周龄的雄性C57BL小鼠。
人类唾液弹性蛋白酶(HSE)购自Elastin Products Company，Inc，。经皮下给予受试药物，15分钟后，按照20μg/位点的剂量将HSE注入右后爪足底，并且在左后爪足底注入盐水作为对照。注入HSE两小时后，用带刻度的厚度测量仪(dial thickness gage)测量爪的水肿程度，计算左右后爪足底之间的厚度差别。
(2)结果对由弹性蛋白酶诱发的小鼠爪水肿的作用用实施例19的 n 足底厚度 对爪水肿化合物处理 (×10-2mm) 的%抑制(mg/Kg)对照 5 46.8±5.761 5 43.8±5.67 6.410 5 37.0±13.41 20.9100 5 27.0±4.66＊42.3＊相对于对照组，P<0.05(“学生”t检验)实验4对由实验诱发的仓鼠肺气肿的作用(1)材料与方法从Japan SLC Inc.得到体重约为120g的雄性Golden Syrian仓鼠。
猪胰弹性蛋白酶(PPE)购自Elastin Products Company，Inc.。Dialferin购自Japan ROche INc.。
用戊巴比妥通过腹膜内给药将仓鼠麻醉。将实施例19化合物溶解在盐水中。将先有技术化合物A和B悬浮于0.5%甲基纤维素中。通过口腔经气管滴入药物，5分钟后，以0.2ml盐水滴注液形式给予PPE，剂量为100μg/位点。在滴入PPE三周后，用戊巴比妥将仓鼠麻醉。采用整体、恒容、可变压力的体积描记器测量体积，研究仰卧仓鼠的呼吸力学。采用注水食管测量胸膜压。经腹膜内给予Dialferin，抑制肺叶自发性呼吸膨胀，使肺压差(PL)达到30cmH2O，然后缓慢减压使PL达0cmH2O，再轻轻地抽气，使PL达-20cmH2O，由此得到准静态减压压力-体积(P-V)曲线。准静态肺柔量(Cst)的定义是在中间体积的范围内减压P-V曲线陡斜部分的斜率。肺活量的定义为肺体积在TLC25(PL＝25cmH2O时的体积)和RV-20(PL-20cmH2O时的体积)之间的差值。
(2)结果以与剂量相关的方法，用实施例19化合物预处理防止了PPE诱发的肺力学增加，如下表所示。根据Cst和VC值，实施例19化合物的效力优于先有技术化合物A和B。
对由实验诱发的仓鼠肺气肿的影响处理 Cst VC(μg/位点) n (ml/cm H2O) (ml)实施例1正常 8 0.53±0.02＊＊＊4.9±0.1＊＊＊对照 8 1.54±0.10 7.3±0.2实施例19化合物1 8 1.39±0.05(15%) 7.0±0.1(12%)10 8 0.70±0.04(84%)＊＊＊5.8±0.1(65%)＊＊＊100 7 0.53±0.02(100%)＊＊＊5.0±0.1(97%)＊＊＊实施例2正常 8 0.51±0.02＊＊＊4.6±0.1＊＊＊对照 8 1.62±0.12 6.8±0.1先有技术化合物A100 8 1.55±0.11(7%) 6.9±0.2(-1%)1000 8 1.22±0.15(37%) 6.6±0.2(9%)实施例3正常 8 0.49±0.02＊＊4.6±0.2＊＊＊对照 6 1.18±0.21 7.0±0.2先有技术化合物B32 8 1.95±0.08(32%) 6.1±0.3(39%)＊320 8 0.74±0.05(63%)＊5.8±0.2(49%)＊＊Cst＝准静态肺柔量，VC＝肺活量(%)＝抑制＊P<0.05，＊＊P<0.01，＊＊＊P<0.001相对于对照组(“学生”t检验)
先有技术化合物A(日本公开特评公告No，61-218518)
先有技术化合物B(日本公开特评公告No，2.256657)
可以以惯用药物剂型使用本发明的药物组合物，例如，粉剂、细颗粒剂、颗粒剂、片剂、糖锭剂、注射剂、吸入剂、微囊剂、胶囊剂、栓剂、溶液、悬浮液、乳剂、糖浆等等。如有必要，可在所说组合物中加入稀释剂或崩解剂(如蔗糖、乳糖、淀粉、结晶纤维素、低-取代的羟丙基纤维素、合成硅酸铝等)、粘合剂(如纤维素、甲基纤维素、羟丙基纤维、羟丙基甲基纤维素、聚丙吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮、明胶、阿拉伯胶、聚乙二醇等)、着色剂、甜味剂、润滑剂(如硬脂酸镁，等)等等。
所说本发明组合物的剂量取决于患者的年龄、体重、状况等等，并且，通常通过口服或吸入给药，其日剂量按目标化合物或其可药用盐计算为1mg至1g，优选10mg至500mg，每天分1至3次服用。典型的单位剂量可以是5mg、10mg、20mg、50mg、100mg等，但这些仅为举例说明并且是非限定性的。
给出下述制备和实施例的目的在于说明本发明。
在制备和实施例中，采用了下述缩写WSCD1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺HOBTN-羟基苯并三唑DMFN，N-二甲基甲酰胺DMSO二甲亚砜制备1.
在冰浴冷却下，将HOBT(6.76g)和WSCD(7.76g)加到N-(叔丁氧羰基)-L-缬氨酸(10.86g)和L-脯氨酸苄酯盐酸盐(12.09g)在DMF(50ml)中的溶液中。于室温下搅拌18小时后，将该反应混合物在减压下浓缩。将残余物溶解在乙酸乙酯(400ml)中，用5%柠檬酸水溶液(200ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(200ml)洗涤。将该溶液用硫酸镁干燥，减压蒸发，得到20.06g油状的N-(叔丁氧羰基)-L-缬氨酰基-L-脯氨酸苄基酯。
TLC(Kiesel gel 60 F254硅胶板，Merck)(除特别指明外，在下文制备及实施例中含意相同)Rf0.62(己烷∶AcOEt＝2∶1)按类似于制备1的方法制得了下述化合物。
制备24-(甲氧羰基)苯基羰基-L-缬氨酰基-L-脯氨酸苄酯，油状物。TLC Rf0.89(CHCl3∶MeOH＝10∶1)
制备33(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羟基-4-甲基戊烷，m.p64-67℃，TLC Rf0.63和0.60(CHCl3∶MeOH＝10∶1)。
制备43(R或S)-[[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羟基-4-甲基戊烷，m.p.65-75℃，TLC Rf0.65(CHCl3∶MeOH＝10∶1)，[α]22D-56.23°(C＝0.14，MeOH)。
制备53(R或S)-[[4-(苄氧羰基甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羟基-4-甲基戊烷。
mp70-80℃TLC Rf0.65(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D-46.59°(C＝0.165，MeOH)制备63(R或S)-[[4-(苄氧羰基甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羟基-4-甲基戊烷mp80-90℃TLC Rf0.60(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D-27.59°(C＝0.165，MeOH)
制备7.
3(R或S)-[[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羟基-4-甲基戊烷mp68-85℃TLC Rf0.60(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D-42.63°(C＝0.175，MeOH)制备8将N-(叔丁氧羰基)-L-缬氨酰基-L-脯氨酸苄酯(20.0g)溶解在冰浴冷却下的4N氯化氢-二噁烷(30ml)溶液中。于室温下搅拌1小时后，将该反应混合物在减压下蒸发。用乙醚将残余物研碎，得到L-缬氨酰基-L-脯氨酸苄酯盐酸盐(14.56g)。
mp66-69℃TLC Rf0.55(CHCl3∶MeOH＝10∶1)制备9在10%钯-炭(1.0g)存在下，于3个大气压的氢压下，将N-4-(甲氧羰基)苯基羰基-L-缬氨酰基-L-脯氨酸苄酯(18.53g)在甲醇(150ml)中的溶液在室温下氢化1.5小时。滤除催化剂，减压下蒸发滤液，得到4-(甲氧基羰基)苯基羰基-L-缬氨酰基-L-脯氨酸(14.20g)。
mp68-71℃TLC Rf0.27(CHCl3∶MeOH＝10∶1)
制备10在-70℃下，在草酰氯(0.82ml)的二氯甲烷(5ml)溶液中依次加入二甲亚砜(1.34ml)和3(RS)-[[4-(4-甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羟基-4-甲基戊烷(2.5g)的二氯甲烷(10ml)溶液。将该混合物在-40℃搅拌1小时后，加入三乙胺(2.63ml)。将该混合物在同一温度下再搅拌30分钟，依次用0.5N盐酸(15ml)和5%碳酸氢钠水溶液(15ml)洗涤。用硫酸镁干燥有机层，减压蒸发。残余物经硅胶(50g)柱层析(氯仿∶甲醇＝50∶1)纯化，得到3(RS)-[[4-(4-甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(2.18g)。
mp67-70℃TLC Rf0.51(CHCl3∶MeOH＝10∶1)制备11在冰浴冷却下，向3(RS)-[[4-(4-甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(2.1g)的甲醇(40ml)溶液中加入1N氢氧化钠水溶液(15ml)。将该混合物在室温下搅拌2小时后，蒸掉甲醇。用乙醚(30ml)洗涤浓缩液，然后用1N盐酸将其酸化至pH2。用乙酸乙酯(20ml)提取该水溶液。用盐水(10ml)洗涤提取液，用硫酸镁干燥，减压浓缩，得到3(RS)-[(4-羧基苯基羰基)-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(1.94g)。
mp215-220℃TLC Rf0.63(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶2∶1)按照类似于制备11的方法，制得了下述化合物。
制备12.
3(R或S)-[[4-(羧基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羟基-4-甲基戊烷(0.61g)mp266-269℃TLC Rf0.42(苯∶EtOAc∶AcOH＝20∶20∶1)[α]22D-49.71°(C＝0.1，MeOH)制备133(R或S)-[[4-(羧基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羟基-4-甲基戊烷mp265-268℃TLC Rf0.40(苯∶EtOAc∶AcOH＝20∶20∶1)[α]22D-64.25°(C＝0.16，MeOH)制备14于室温下，将28%的甲醇钠甲醇溶液(3.0ml)加到3(RS)-氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羟基-4-甲基戊烷盐酸盐(3.2g)的乙醇(30ml)溶液中。过滤除去沉淀出的氯化钠，然后在滤液中加入(2R，3R)-L-酒石酸(2.3g)。将该混合物温热，直到酒石酸溶解为止，过滤。将滤液在室温下放置5小时，过滤收集沉淀出的结晶(1.94g)，并将其溶解在1N氢氧化钠水溶液中。用乙酸乙酯(10ml)提取该溶液，将提取液与4N-氯化氢的乙酸乙酯溶液混合，除去乙酸乙酯，用异丙醚(10ml)将残余物粉化，得到3(R或S)-氨基-1，1，1-三氟-2-(R或S)-4-甲基戊烷盐酸盐(1.03g)。
mp165-170℃TLC Rf0.50(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D+11.39°(C＝0.13，MeOH)按照类似于制备14的方法，制得了下述化合物。
制备153(R或S)-氨基-1，1，1-三氟-2-(R或S)-4-甲基戊烷盐酸盐mp165-170℃TLC Rf0.55(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D-10.56°(C＝1.05，MeOH)制备16.
在对氨基苯甲酸甲酯(0.4g)的四氢呋喃(10ml)溶液中加入氯甲酸三氯甲酯(0.31g)，并将该混合物在室温下放置过夜。在该溶液中加入L-缬氨酸苄酯(0.54g)，并用三乙胺将该混合物的pH调至中性。在室温下搅拌30分钟后，在减压下浓缩该混合物，用乙酸乙酯(10ml)提取残余物。用1N盐酸(10ml)和碳酸氢钠水溶液(10ml)洗涤提取液，浓缩至干。得到4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基-L-缬氨酸苄酯(1.17g)。
TLCRF0.55(CHCl3∶MeOH＝10∶1，v/v)。
制备17.
按照类似于制备9的方法，由4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基-L-缬氨酸苄酯(1g)制得了4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基-L-缬氨酸(0.83g)。
TLC Rf0.3(CHCl3∶MeOH∶H2O＝65∶25∶4)油制备18按照类似于制备1的方法，由4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基-L-缬氨酸(0.83g)和L-脯氨酸苄酯盐酸盐(0.65g)制得了[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酸苄酯(1.0g)。
TLC Rf0.60(CHCl3∶MeOH＝10∶1)油制备19.
按照类似于制备9的方法，由[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酸苄酯(1.0g)制得了[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酸(0.69g)。
TLC Rf0.35(CHCl3∶MeOH∶H2O＝65∶25∶4)油制备20按照类似于制备1的方法，由[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酸(0.69g)和3(RS)-氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羟基-4-甲基戊烷盐酸盐(0.37g)制得了3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-(RS)-羟基-4-甲基戊烷(1.03g)。
TLC Rf0.45(CHCl3∶MeOH＝10∶1)油制备21.
按照类似于制备10的方法，由3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羟基-4-甲基戊烷(1.0g)制得了3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.98g)。
mp90-100℃TLC Rf0.50(CHCl3∶MeOH＝10∶1)制备22.
按照类似于制备11的方法，由3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.3g)制得了3(RS)-[[4-(羧基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.2g)。
mp125-130℃TLC Rf0.50(CHCl3∶MeOH∶H2O＝65∶25∶4)制备23.
将N-(叔丁氧羰基)-L-缬氨酸(4.35g)和三乙胺(2.13g)溶解在无水CH2Cl2(40ml)中，于-20℃下加入氯甲酸异丁酯(2.87g)。在同一温度下搅拌30分钟后，在-20℃加入N-(2-二氢化茚基)甘氨酸苄酯(5.37g)在无水CH2Cl2(20ml)中的溶液。将该反应混合物在-10℃搅拌1小时，然后在室温下搅拌4小时，减压下蒸发反应混合物，然后将残余物溶解在乙酸乙酯(100ml)中，用饱和碳酸氢钠水溶液(100ml×2)洗涤。用硫酸镁干燥有机层，减压蒸发。残余物经硅胶(50g)柱层析(CHCl3∶AcOEt＝10∶1)纯化，得到2.20g油状的N-(叔丁氧羰基)-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酸苄酯。
TLC Rf0.78(己烷∶AcOEt＝2∶1)制备24.
按照类似于制备8的方法，由N-(叔丁氧羰基)-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酸苄酯(2.14g)制得了L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酸苄酯盐酸盐(1.83g)。
mp162-163℃TLC Rf0.58(CHCl3∶MeOH＝10∶1)
制备25.
按照类似于制备1的方法，由L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酸苄酯盐酸盐(1.80g)和对苯二酸单甲酯(0.86g)制得了N-[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酸苄酯(1.24g)。
mp72-76℃TLC Rf0.29(CHCl3)制备26.
按照类似于制备9的方法，由N-[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酸苄酯(1.20g)制得了N-[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酸(0.83g)。
mp163-164℃TLC Rf0.48(CHCl3∶MeOH＝10∶1)制备27.
按照类似于制备1的方法，由N-[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酸(0.80g)和3(RS)-氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羟基-4-甲基戊烷盐酸盐(385mg)制得了3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羟基-4-甲基戊烷(1.06g)。
mp76-78℃TLC Rf0.71(CHCl3∶MeOH＝10∶1)制备28.
按照类似于制备10的方法，由3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羟基-4-甲基戊烷(1.03g)制得了3(RS)-[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(0.84g)。
mp62-64℃TLC Rf0.74(CHCl3∶MeOH＝10∶1)制备29.
按照类似于制备11的方法，由3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(0.83g)制得了3(RS)-[[4-(羧基苯基羰基)-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(0.76g)。
mp84-86℃TLC Rf0.15(CHCl3∶MeOH＝10∶1)
实施例1.
在冰浴冷却下，将HOBT(26mg)和WSCD(30mg)加到甘氨酸苄酯对甲苯磺酸盐(66mg)和3(RS)-[(4-羧基苯基羰基)-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(100mg)在DMF(6ml)中的混合物中。于室温下搅拌4小时后，将该混合物减压浓缩。将残余物溶解在乙酸乙酯(30ml)中，依次用5%柠檬酸水溶液(20ml)、水(20ml)、5%碳酸氢钠水溶液(20ml)和盐水(20ml)洗涤。将该溶液用硫酸镁干燥，减压蒸发，得到3(RS)-[[4-[(苄氧羰基)甲基氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(125mg)。
mp77-78℃TLC Rf0.56(CHCl3∶MeOH＝10∶1)按照类似于实施例1的方法，制得了下述化合物。
实施例2.
3(RS)-[[4-[[2-(4-吗啉代)乙基]氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰-L-脯氨酰]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp98-102℃TLC Rf0.24(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例3.
3(RS)-[[4-[(3-苯甲酰基甲氧羰基)丙基氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp70-73℃TLC Rf0.71(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例4.
3(RS)-[[4-[(4-吗啉代)氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp191-193℃TLC Rf0.59(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例5.
3(RS)-[[4-[(4-氯苄基)氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp87-89℃TLC Rf0.43(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例6.
3(RS)-[[4-[(4-硝基苄基)氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷
mp94-96℃TLC Rf0.57(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例7.
3(RS)-[[4-[(4-氯苯基)氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp71-72℃TLC Rf0.79(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例8.
3(RS)-[[4-[[(1(R)-苄氧羰基)-2-苯基]乙基氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp65-67℃TLC Rf0.82(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例9.
3(RS)-[[4-[[(1(S)-苄氧羰基)-2-苯基]乙基氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp108-110℃TLC Rf0.82(CHCl3∶MeOH＝10∶1)
实施例10.
3(RS)-[[4-[[1(S)，3-二(苄氧羰基)丙基]氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp58-60℃TLC Rf0.83(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例11.
在-70℃下，在草酰氯(0.09ml)的二氯甲烷(2ml)溶液中依次加入二甲亚砜(0.15ml)和3(R或S)-[[4-(苄氧羰基甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羟基-4-甲基戊烷(0.35g)的二氯甲烷(4ml)溶液。将该混合物在-40℃下搅拌1小时后，加入三乙胺(0.29ml)。在同一温度下将该混合物再搅拌30分钟，然后依次用0.5N盐酸(15ml)和5%碳酸氢钠水溶液(15ml)洗涤。用硫酸镁干燥有机层，减压下蒸发。残余物经硅胶(20g)柱层析(氯仿∶甲醇＝50∶1)纯化，得到3(R或S)-[[4-(苄氧羰基甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.22g)。
mp159-161℃TLC Rf0.63(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D-39.66°(C＝0.105，MeOH)按照类似于实施例11的方法，制备了下述化合物。
实施例12.
(3(R或S)-[[4-(苄氧羰基甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷mp141-143℃TLC Rf0.68(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D-41.90°(C＝0.15，MeOH)实施例13.
在10%钯-炭(1.0g)存在下，于室温、3个大气压的氢压下，将3(RS)-[[4-[(苄氧羰基)甲基氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(70mg)在甲醇(10ml)和水(1ml)的混合物中的溶液氢化3小时。过滤除去催化剂后，将滤液减压蒸发，得到3(RS)-[[4-(羧基甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(61mg)。
mp99-103℃TLC Rf0.17(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1)实施例14在冰浴冷下，将锌粉(120mg)加到3(RS)-[[4-[(3-苯甲酰基甲氧羰基)丙氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(120mg)在乙酸(5ml)中的溶液中。将该混合物在室温下搅拌2小时后，过滤除去锌粉。将滤液减压蒸发，得到3(RS)-[[4-[(3-羧基丙基)氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(95mg)。
mp84-86℃TLC Rf0.32(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1)按照类似于实施例13的方法，制得了下述化合物。
实施例15.
3(R或S)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷mp75-120℃TLC(RP-18WF254S(由E.Morck公司制造)Rf0.55(MeOH∶H2O＝6∶5)[α]22D-35.10°(C＝0.105，MeOH)实施例163(R或S)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷mp90-110℃TLC(RP-18WF254S(由E.Morck公司制造)Rf0.50(MeOH∶H2O＝6∶5)[α]22D-50.04°(C＝0.115，MeOH)
实施例173(RS)-[[4-(1(S)，3-二羧基丙基)氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷mp74-76℃TLC Rf0.13(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1)实施例18在10%钯-炭(10mg)存在下，在4个大气压的氢压下，将3(RS)-[[4-[(4-硝基苄基)氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(50mg)在甲醇(10ml)中的溶液氢化2小时。过滤除去催化剂，将滤液减压蒸发，得到3(RS)-[[4-[(4-氨基苄基)氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(46mg)。
mp90-92℃TLC Rf0.44(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1)实施例19.
在室温下，将1N氢氧化钠水溶液(0.88ml)加到3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(0.50g)的水(10ml)溶液中。将该溶液冷冻干燥，得到原料的钠盐(0.52g)。
mp>230℃TLC Rf0.17(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1)按照类似于实施例19的方法，制得了下述化合物。
实施例20.
3(RS)-[[4-[(3-羧基丙基)氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp66-69℃TLC Rf0.32(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1)实施例21.
在3(RS)-[[4-[[2-(4-吗啉代)乙基]氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(80mg)的1，4-二噁烷(1ml)溶液中加入4N氯乙氢-二噁烷溶液(0.1ml)。将该混合物在室温下搅拌10分钟，蒸发，得到3(RS)-[[4-[[2-(4-吗啉代)乙基]氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷盐酸盐(83mg)。
mp64-65℃TLC Rf0.24(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例22.
按照类似于实施例1的方法，由3(RS)-[[4-(羧基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.20g)和甘氨酸苄酯对甲苯磺酸盐(0.13g)制得了3(RS)-[[4-(苄氧羰基甲基氨基羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.25g)。
mp65-70℃TLC Rf0.15(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例23.
按照类似于实施例13的方法，由3(RS)-[[4-(苄氧羰基甲基氨基羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.2g)制得了3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.14g)。
mp98-128℃TLC Rf0.25(CHCl3∶MeOH∶H2O＝65∶25∶4)实施例24.
按照类似于实施例1的方法，由3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.08g)和二甲胺盐酸盐(0.012g)制得了3(RS)-[[4-(二甲氨基羰基甲基氨基羰基)苯基氨基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.03g)。
mp115-125℃TLC Rf0.20(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例25.
按照类似于实施例1的方法，由甘氨酸苄酯对甲苯磺酸盐(118mg)和3(RS)-[[4-(羧基苯基羰基)-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(206mg)制得了3(RS)-[[4-[(苄氧羰基)甲基氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(250mg)。
mp64-66℃TLC Rf0.81(CHCl3∶MeOH＝10∶1)白色粉末实施例26.
按照类似于实施例3的方法，由3(RS)-[(4-[(苄氧羰基)甲基氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(220mg)制得了3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(195mg)。
mp88-91℃TLC Rf0.25(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1)
实施例27.
按照类似于实施例19的方法，制得了3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷钠盐(160mg)。
mp203-205℃TLC Rf0.25(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1)实施例28按照类似于实施例1的方法，由4-(2-氨基乙基)吗啉(46mg)和3(RS)-[(4-羧基苯基羰基)-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基[氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(206mg)制得了3(RS)-[[4-[[2-(4-吗啉代)乙基]氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(180mg)。
mp76-80℃TLC Rf0.38(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例29.
按照类似于实施例21的方法，制得了3(RS)-[[4-[[2-(4-吗啉代)乙基]氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-N-(2-二氢化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷的盐酸盐(170mg)。
mp96-99℃TLC Rf0.38(CHCl3∶MeOH＝10∶1)实施例30按照类似于实施例1的方法，制得了3(RS)-[[4-(乙氧羰基)甲基氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷。m.p.96-99℃。
实施例31.
将3(RS)-[[4-(乙氧羰基)甲基氨基羰基]苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(5.0g)溶解在二氯甲烷(60ml)、甲醇(10ml)和水(25ml)的混合物中，然后在冰浴冷却下加入氢氧化钠水溶液(NaOH 0.6g的水15ml溶液)。将该反应混合物在0-10℃搅拌10分钟后，用6N盐酸将其调至pH9，然后用二氯甲烷(60ml)洗涤该水溶液。在该水溶液中加入氯化钠(5g)和乙酸乙酯(60ml)然后用6N盐酸将该混合物酸化至pH2。用盐水(30ml)洗涤该乙酸乙酯溶液，用硫酸镁干燥，减压浓缩至20ml体积。在室温下，将该浓缩液滴加到异丙醚(225ml)中，滤出沉淀，干燥，得到3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(3.24g)。
m.p.99-103℃
权利要求
1.新的下式所示三氟甲基酮衍生物及其可药用盐
式中R1是带有1或2个取代基的低级烷基，所述取代基选自羧基，酯化羧基和二低级烷基氨甲酰基；苯基(低级)烷基，其中苯基部分可以带有卤素或硝基或氨基，而烷基部分可以带有羧基或酯化羧基；卤代苯基；吗啉代；或吗啉代(低级)烷基，R2和R3各自为低级烷基，X为-或-NH-，而Y为
2.按照权利要求1的新的三氟甲基酮衍生物及其可药用盐，其结构如下式所示
式中R1是带有1或2个取代基的低级烷基，所述取代基选自羧基，酯化羧基和二低级烷基氨甲酰基;苯基(低级)烷基，其中苯基部分可以带有卤素或硝基或氨基，而烷基部分可以带有羧基或酯化羧基;卤代苯基;吗啉代;或吗啉代(低级)烷基;R2和R3各自为低级烷基。
3.按照权利要求2的新的三氟甲基酮衍生物，其中R1是带有羧基或酯化羧基的低级烷基，R2和R3各自为低级烷基。
4.按照权利要求3的新的三氟甲基酮衍生物，其中，R1是羧甲基，R2和R3各自为异丙基。
5.按照权利要求4的新的三氟甲基酮衍生物，它是3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷。
6.按照权利要求4的新的三氟甲基酮衍生物，它是3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷钠盐。
7.制备下式所示三氟甲基酮衍生物或其盐的方法
其中，R1是带有1或2个取代基的低级烷基，所述取代基选自羧基，酯化羧基和二低级烷基氨甲酰基;苯基(低级)烷基，其中苯基部分可以带有卤素或硝基或氨基，而烷基部分可以带有羧基或酯化羧基;卤代苯基;吗啉代;或吗啉代(低级)烷基;R2和R3各自为低级烷基;X是-或-NH-;Y是
该方法包括，使下式化合物或其盐与式R1-NH2化合物或其盐反应
或者将下式化合物或其盐氧化
或者使下式化合物或其盐经历脱酯化反应
或者还原下式化合物或其盐
或者使下式化合物或其盐与式(R1d)2NH化合物或其盐反应
在上述化学式中，R1a是一或二-酯化羧基(低级)烷基，R1c是低级亚烷基，R1d是低级烷基，R1至R3、x和y各自的定义如前文所限定。
8.按照权利要求7的方法，其中，R1是带有羧基或酯化羧基的低级烷基，R2和R3各自为低级烷基，x是一，y是
9.按照权利要求7的方法，其中，R1是羧甲基，R2和R3各自为异丙基，x是一，y是
10.按照权利要求7的方法，其中，目标化合物是3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷。
11.按照权利要求7的方法，其中，目标化合物是3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷的钠盐。
12.一种药物组合物，包括作为有效成份的权利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其可药用盐以及可药用载体或赋形剂。
13.一种人体白细胞弹性蛋白酶抑制，包括作为有效成份的权利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其可药用盐以及可药用载体或赋形剂。
14.一种用于治疗或预防退化性疾病的药物组合物，所述疾病的例子有肺气肿、粥样动脉硬化。风湿性关节炎、关节硬化、骨关节病、牛皮癣、胰腺炎、牙周病、肺纤维化、囊纤维化、慢性支气管炎、支气管扩张、弥散性全毛细支气管炎(diffuse panbronchiolitis)、呼吸道损伤、老年性呼吸道窘迫综合症，该组合物包括作为有效成份的权利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其盐以及可药用载体或赋形剂。
15.一种用于治疗或预防移植排斥的药物组合物，它包括作为有效成份的权利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其盐以及可药用载体或赋形剂。
16.一种用于治疗或预防下述疾病的药物组合物，所述疾病包括肾炎、脓毒病、水疱病、弥散性血管内凝血、休克、系统性红斑狼疮、克隆病、局部缺血-复注性损伤(ischemia-reperfusion injury)，慢性梗阻性肺病(COPD)、早熟性膜破裂(premature rupture of the membrane)(PROM)、角膜凝血(corneal sarring)或纤维细胞增生(眼内凝血、烧伤、机械和化学损伤、角膜-结膜炎等等)、或哮喘，该组合
17.一种在有此必要的治疗对象体内治疗或预防退化性疾病的方法，所述疾病包括肺气肿、粥样动脉硬化、风湿性关节炎、关节硬化、骨关节病、牛皮癣、胰腺炎、牙周病、肺纤维化、囊纤维化、慢性支气管炎、支气管扩张、弥散性全毛细支气管炎、呼吸道损伤、老年性呼吸道窘迫综合症，该方法包括给治疗对象服用有效量的权利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其可药用盐。
18.一种在有此必要的治疗对象体内治疗或预防移植排斥的方法，该方法包括给治疗对象服用有效量的权利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其可药用盐。
19.一种在有必要的治疗对象体内治疗或预防下述疾病的方法，所述疾病包括肾炎、脓毒病、水疱病、弥散性血管内凝血、休克、系统性红斑狼疮、克隆病、局部缺血-复注性损伤(ischemia-reperfu-sion injury)、慢性梗阻性肺病(COPD)、早熟性膜破裂(premature rupture of the membrane)(PROM)、角膜凝血(corneal sarring)或纤维细胞增生(眼内凝血、烧伤、机械和化学操作、角膜-结膜炎等)，或哮喘，该方法包括给治疗对象服用有效量的权利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其可药用盐。
20.权利要求1至6中任一项所述化合物及其可药用盐在制药中的应用，所述药物用于治疗或预防退化性疾病和肾炎、脓毒病、哮喘或移植排斥，其中所述退化性疾病的例子有肺气肿、慢性支气管炎、粥样动脉硬化、风湿性关节炎、骨关节病、牛皮癣、胰腺炎及老年性呼吸道窘迫综合症。
全文摘要
本发明涉及对人类白细胞弹性蛋白酶具有抑制作用的新的三氟甲基酮衍生物及其可药用盐、制备这些化合物的方法，含有这些化合物的药物组合物，以及它们的用途。
文档编号A61K38/00GK1063108SQ9111261
公开日1992年7月29日 申请日期1991年12月30日 优先权日1990年12月31日
发明者逸见惠次, 一郎, 今井启佑, 田中洋和 申请人:藤泽药品工业株式会社