专利名称：加速创伤愈合的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种加速创伤愈合的组合物。
创伤是对身体的一种伤害，包括切割、胃肠道创伤、胃溃疡、烫伤、剥离、破口、切口、称为褥疮的挤压溃疡、糜烂、及由于感染引起的表面组织的损伤。特别是，对于外科手术的创伤希望通过正面的直接的处理来加速其愈合，而不是依赖其自发的愈合。因为一个病人已经经受了一次外科手术通常已相当地降低了体力。而且，褥疮不仅引起病人的痛苦，而且需为治疗承受沉重的费用。而且，在近来老年人口增加的情况下，会引起大的社会问题。治愈这些创伤一般依靠通过细胞增殖合成结缔组织和上皮组织。一种能刺激式加速受损伤处的细胞的演变和增殖的药物被认为是对治愈损伤有价值的。
已知的加速创伤愈合的药物主要包括天然物质的提取物、例如芦荟、抗生素、消炎药、激肽释放酶、腺嘌呤、烟酸、尿囊素、维生素A、锌、环腺一磷衍生物(见JP-A-63-107935，JP-A-词此处是指一个“未经实质审查的公开的日本专利申请)等等，曾有人建议改进配方的改善活性成份的吸收率。随着近来多种关于皮肤组织学的阐述，也已有报导试图对手术后伤口的愈合使用一种表皮生长因素(EGF)(见JP-A-3-106823)但是，上述例举的已知的化合物未被认为对治愈创伤有足够的效力，因此，需要找出一种药物可以直接作用于改善创伤的治愈。
在上述条件下，本发明者作了许多研究，目的在于提供一种局都使用的药物以有效地治愈皮肤创伤。结果发现一种以下述分子式(Ⅰ)所代表的化合物有完美的效果，并完成了本发明。
本发明提供一种组合物以加速创伤的愈合，其中包含的活性成份是一个以分子式(Ⅰ)所代表的化合物 其中，R表示一个氢原子，一个苯基或卤代苯基，一个C1-C6烷基，一个羟基或C1-C6烷氧基;X代表一个1-咪唑基或一个1，2，4-三唑-1-基。
虽然已知分子式(I)所代表的许多化合物具有抗真菌性(见美国专利4，636，519，美国专利4，738，976及日本专利JP-B-4-68308)及抗菌性(见美国专利4，636，519及美国专利4，738，976)但是没有认识到分子式(Ⅰ)的化合物具有加速皮肤创伤愈合的功效。
每种(Ⅰ)式化合物包含两个几何异构体，如下面所述。在本发明中可以使用该化合物中的一个异构体，也可以用两个异构体混合物。
表1及表2所列可在本发明中使用的化合物的具体例子只是为了阐明，而不是为了限制。表中也列了这些化合物的理化性质。表中“mp”是熔点，“n0”是折射率，在核磁共振谱中的δ值(ppm)是在CDcl3中测得的，用四甲基硅烷作标准。
表1 化合物号R理化性质1Hmp:125.6℃2 mp:111-112℃(E式)3 mp:119.4℃(Z式)4 mp:141,5℃(E式)5 -Cl n24D:1.60836 稠粘油状物(Z式)核磁共振δ值,3.54-4.20(m,2H),5.69(dd,1H)7.00-7.75(m,7H)7 稠粘油状物(E式)核磁共振δ值3,45-4.10
(m,2H),5.76(dd,1H),7.00-7.859m,7H8 稠粘油状物(Z式)核磁共振δ值3.6-4.0(m,2H),5.22(dd,1H),6.9-7.
81(m,7H)9 mp:148.8℃(E式)10 稠粘油状物(Z式)11 mp:119℃(E式)12 稠粘油状物核磁共振δ值3.6-3.9(m,2H),5.1-5.5(m,1H),6.9-7.8(m,7H)13 n13D:1.6313(Z式)14 mp:123.3℃(E式)15 CH3n24D:1.636016 n16D:1.6196
17 稠粘油状物(Z-式)18 稠粘滑状物(E式)核磁共振δ值:3.71(d,2H),3.82(S.3H)5.68(t,1H),6.
87,7.00,6.72(唑环上每个1H,H),7.00-7.60(m,4H)19 OCH3稠粘油状物(Z式)核磁共振δ值:3.75(d,2H),3.77(s,3H),5.71(t,1H),6.74-7.60(m,7H)20 OCH3稠粘油状物(E式)核磁共振δ3.67(d,2H),3.
80(s,3H),5.24(t,1H),6.
70-7.65(m,7H)21 OH mp:219-221℃(E-式)表2 化合物号R理化性质22Hmp:102.6℃23 稠粘油状物
24 mp:71-73℃(E式)25 mp:75-77℃(Z式)26 n19D:1.655827稠粘油状物Cl 核磁共振δ值3.82(d,2H),5.31(t,1H),7.18-7.51(m,4H),8.11(s,1H),8.39(s,1H)28 稠粘油状物29 F n20.5D:1.623230 mp:115.0℃31 CH3 n24D:1.616232 稠粘油状物33 CH2O 稠粘油状物34 HO mp:214-216℃(E式)
R以邻-氯代苯基，对羟基苯基或邻-甲苯基较好。
在(Ⅰ)式所代表的化合物中，那些可用(Ⅰ＇)式代表的化合物是新化合物。
式中X已如上述。
本发明的化合物可以用已知技术转化为盐，此类盐的例子包括盐酸盐、硫酸盐及硝酸盐。
本发明加速创伤愈合的组合物可以用多种配方制备，例如，通过与在药剂学上允许的载体相结合，可以制成溶液、乳浊液、油膏、霜剂、洗剂、敷剂、片剂、丸剂、胶囊、安瓿等等。在药剂学上允许的载体的具体例子有聚乙二醇、1，2-丙二醇、硬脂酸甘油酯、鲸蜡、肉豆蔻酸异丙酯，磺基蓖麻油酸盐，硬脂醇十六醇、山黎醇单硬脂酸酯，对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、二丁基羟基甲苯、磷酸氢钙、乳糖、淀粉、重氧化镁、水、葡萄糖溶液及聚乙烯醇。
(Ⅰ)式化合物通常与一个基质混合，其量按重量百分比为占基质重量的0.01为至50%，以0.05%至10%较好，更好的是0.1%至3%。
本发明的制剂可以口服或非经肠道给药，当此制剂给成年人口服时，可按病人体重每公斤体重服1-100毫克的剂量。
现将本发明更详细地以配方举例及测试举例来说明，但是，必须理解，本发明不能被认为仅限于这些例子。除另行注明者外，下述所有的份数和百分数都是按重量计算的。
下面叙述了(Ⅰ)式所代表的化合物的合成例子。其它化合物可以用类似美国专利4，636，519所述的方法制备。
合成例子2(1-咪唑)-2-{4(羟基苯基)-1，3一二硫环戊-2-亚基}乙腈(21号化合物)的合成在40毫升二甲基亚砜中溶解4.6克(0.004克分子)1-氰甲基咪唑，3.1克(0.005克分子)二硫化碳和5.2克氢氧化钾粉末，在室温下搅拌一小时以使溶解，以制备一个二硫醇盐溶液。将此溶液在30℃滴加入一个14.8克(0.04克分子)1，2一二溴-1-(4叔丁氧基苯基)乙烷在40毫升的二甲基亚砜中的溶液中，接着搅拌2小时。向此反应混合物中加入200毫升冰水，用乙酸乙酯提取，将有机层用水洗、放在硫酸镁上干燥，浓缩以取得一个稠粘的油太的几何异构体温合物。用硅胶层析法纯化得2.4克(产率为16.8%)Z-式异构体及4.5克(产率为31.5%)E式异构体，两者都是稠粘的油状物。
将所得到的E式异构体溶于10毫升三氟乙酸中，溶液于室温下搅拌一小时。将反应混合物在减压下浓缩，将残留物溶于乙酸乙酯中，用碳酸氢钠的水溶液洗涤，将有机层在硫酸镁上干燥，在减压下蒸去溶剂。用乙醇将残渣重结晶，和2.4克(66.5%)上述化合物(熔点219-221℃)配方例一本发明的化合物1份聚乙二醇4009份将上述组份混合以溶解活性成份，制备一种作局部使用的溶液。
配方例二本发明的化合物2份聚乙二醇40049份聚乙二醇400049份将上述组份混合，加热以溶解活性成份，冷却，制备一油膏。
配方例三本发明的化合物3份1，2一二丙醇5份硬脂酸甘油酯5份鲸蜡5份肉豆蔻酸异丙酯10份磺基蓖麻油酸盐4份将上述各组份的混合物加热，冷却，边搅拌边加入68份水以制备一霜剂。
配方例四本发明的化合物1.0份硬脂醇5.0份十六醇5.0份中链脂肪酸三甘油酯10.0份肉豆蔻酸异丙酯5.0份磺基蓖麻油酸盐604.0份山黎醇单硬脂酸酯1.0份对羟基苯甲酸甲酯0.14份对羟基苯甲酸丙酯0.06份二丁基羟基甲苯0.02份纯水余额上述组份用常法混合以制备一霜剂配方例五本发明的化合物50份淀粉10份乳糖15份结晶纤维素20份聚乙烯醇5份水30份将上述各组份均匀地揉捏，造粒，干燥、过筛、以制得丸药。
测试例1将试验动物背部的毛剃去，对每只动物用剪刀将皮肤的整个厚度割去的以节出两个环形的伤口(直径1厘米)，从致伤的第二天起每天在伤口局部涂上按配方例四所制含0.5%或1%第4号化合物的霜剂，用量为每处份口每天60毫克。对照组涂用同量的市售Solcoseryl油膏(Tobishi药厂出品)。创伤区在第4、第6和第8天进行治疗，并用影象分析仪，(SPLCCA-Ⅱ型，Olympus公司制造)计算其面积。以受伤后第二天的伤口面积作为初始面积，数据以占初始面积的百分比来表示。在第5、第7或第9天，每组中处死2只老鼠，剪下有关的皮作光学显微镜观察。
伤口面积的测量结果见表3。每个面积比数是以初始面积为基础。由于每次在第5、第7或第9天每组处死两只动物作病理组织学的观察，每处死一次所观察的部位数目要减少2。
表3伤口面积比(%)试验组第4天第6天第8天未治疗组877441控制组(只用基质治疗)9970405.0%Solcoseryl组8735110.5%4号化合物组754091.0%4号化合物组773911如表3所示，本发明的化合物与Solcoseryl比较，显示较高或相等的愈合伤口的作用。病理组织学的检测也揭示该化合物在加速血管生成，表皮的延伸和分化及真皮的肉芽组成形成方面的作用，这些对于伤口的愈合过程是重要的。
测试例2如测试例1的方法使老鼠背部受伤，自第2日起，每日施以试验化合物的1为聚乙二醇400(PEG400)溶液，用量为每日第处伤口0.1毫升，在第5日和第7日测量伤口面积，以原始伤口面积为基础计算右分比，其结果见表4及表5。
如表4及表5所示，本发明的化合物，像第4号化合物一样，具有加速伤口愈合的作用。
表4损害的面积比(%)测试组第5天第7天未治疗组6947
控制组(仅用PEG400治疗)62341号化合物67252号化合物63253号化合物52204号化合物512122号化合物622524号化合物6529表5损害的面积比(%)测试组第5天第7天未治疗组6136PEG400组57314号化合物372215号化合物432120号化合物472821号化合物331524号化合物3925测试例3棉花小球39-41毫克用高压锅灭菌，浸入4号化合物的乙醇溶液中(0.2毫升/每球)，在减压下干燥。在乙醚的麻醉下，通过背部皮肤的切口，将两个小棉球嵌入老鼠两边肩胛骨下的皮下。每只动物(每组10只老鼠)肌肉注射0.2毫升11的青霉素G(1×104单位/毫升)与链霉素(8毫升)的混合物以防止细菌感染。植入棉球的7天后将动物处死，连同棉球割下每个肉芽组织，以称其干重，结果见表6。
表6测试组肉芽组织的干重量(包括棉球)(毫克)未治疗组102.1±5.2控制组(只用基质治疗)93.0±4.70.5毫克/棉球4号化合物108.7±10.41.0毫克/棉球4号化合物123.7±7.12.0毫克/棉球4号化合物136.4±14.14.0毫克/棉球4号化合物130.6±6.0如表6所示，由于相干入棉球，4号化合物增加了肉芽组织的干重，显示加速了肉芽组织的形成。增加用药量至超过每棉球1毫克，明显地比控制组增加活力。
如上所述，用本发明的化合物作为治愈伤口的组合物可以使皮等的伤口很快愈合。
以有关的具体例子详细地描述了本发明后，很显然，一个本领域的普通技术人员可以做各种的变化和改进而不会改变其实质和范围。
权利要求
1.一种加速伤口愈合的组合物，由其活性成份为以(Ⅰ)式为代表的化合物和在药剂学上允许的载体组成 其中R代表一个氢原子，一个苯基或卤代苯基、一个C1-C6烷基、一个羟基或一个C1-C6烷氧基；X代表一个1-咪唑基或一个三唑基。
2.按照权利要求1所述的加速创伤愈合的组合物中，其特征在于R是邻氯代苯基、对羟基苯基或对甲苯基。
3.按照权利要求1或2所述的组合物，其特征在于用作局部施用。
4.一种加速伤口愈合的方法，其特征在于给一个需要加速伤口愈合的病人施用在权利要求1或权利要求2中所提出的加速伤口愈合的组合物。
5.按照权利要求4所述的方法，其特征在于将此组合物局部施用于伤口。
6.一种以(Ⅰ′)式为代表的化合物，其特征在于X代表一个1-咪唑基或一个1，2，4一三唑-1-基。
全文摘要
公开了一个加速愈合伤口的组合物，它含以(I)式所代表的作为活性成份的化合物其中E代表一个氢原子，一个苯基或一个卤代苯基，一个C
文档编号A61P17/02GK1099265SQ93118318
公开日1995年3月1日 申请日期1993年8月25日 优先权日1992年1月28日
发明者濑尾明, 平贺国和, 古贺裕康, 庭野吉巳 申请人:日本农药株工会社