专利名称：白三烯-1抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种白三烯-1抑制剂，更具体地说，涉及一种含有至少一种选自式(I)所示的1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸或其盐和式(II)所示6，7-二氢-1-氧代-1H，5H-苯并[i，j]喹啉烷(quinolidine)-2-羧酸或其盐的苯并杂环化合物作为活性成分的白三烯-1抑制剂， 式中R1和R2各为低级烷基，X1为卤原子，
式中R3是低级烷基，R4是羟基，X2是卤原子。
在第二次International limphokine workshop中已经决定，现在用各种名称称呼的生理活性物质，例如称为淋巴细胞激活因子(LAF)、促细胞分裂蛋白、Helper、peak-1、T-细胞置换因子III(TRF-III)、T-细胞置换因子巨噬细胞(TRFM)、B-细胞激活因子、B-细胞分化因子的物质，已经一致地称之为“白三烯-1”(IL-1)[参见Cellular Immunol.，48，433-436(1979)]。做此决定的理由是，具有不同命名的上述生理活性物质不能彼此区别开来，取名仅仅是以生理活性的不同角度为依据。
已经知道，上述IL-1是一种诱导和传导系统的生物反应以抗感染或抗炎症的重要的生物物质，并且，该物质本身具有强抗肿瘤活性[参见Hirai，Y.等人的“Gann Monograph on Cancer Research”，Japan Scientific Societies Press，Tokyo(1988)]，以及，已经发现，对于体内炎症，如发热、白细胞增多，淋巴细胞激活、肝脏中急性期蛋白生物合成的诱导作用，它可以诱导出可观察到的反应[参见Dinarello，C.A.；Inter leukin-1，Rev.Infect.Des.，6，51-95(1984)和Kluger，M.J.，Oppenheim，J.J.&Powanda，M.C.；ThePhysiologic，Metabolic and Immunologic Actions of Interleukin-1，Alan R.Liss，Inc.，New York(1985)]。
此外，IL-1具有各种生物活性，已经被认为是一种维持体内平衡的重要因素，但当产生IL-1的功能发生紊乱时，以及因而不正常地大量产生IL-1时，这可能引起各种疾病。例如，据报导，在类风湿性关节炎情况下，在关节滑膜发炎程度和骨破坏程度与在滑膜组织中HLA-DR抗原表达之间有强相关性[参见Miyasaka，N.，Sato，K.，Goto，M.，Sasano，M.，Natsuyama，M.，Inoue，K.，andNishioka，K.；Augmented Interleukin-1 Production andHLA-DR Expression in the Svnovium of Rheumatiod ArthritisPatientArthritis Rheum.，32，(4)，476-480(1988)]。
因此，认为通过抑制从细胞中过量释放IL-1可以阻断与IL-1有关的各种生理性质。
已经使用糖[肾上腺]皮质激素类治疗慢性炎症疾病，并且已知其活性部分地是由于IL-1生成受到抑制[参见Lew，W.，Oppenheim，J.J.，&Matsushima，K.；Analysis of the Suppression ofIL-1αand IL-1βProduction in Human Peripheral BloodMononuclear Adherent Cells by a Gluccorticoid HormoneJ.Immunol.，140，(6)，1895-1902(1988)]。然而，已经知道，由于糖[肾上腺]皮质激素的各种生理活性，它也有不利的一面，即诱导各种严重副作用。
这样，人们一直希望能找到一种新药，希望它没有在使用糖[肾上腺]皮质激素时观察到的那些副作用，在毒性方面又是十分安全的，而且用于治疗慢性炎症疾病如类风湿性关节炎、牛皮癣、自体免疫疾病时，也不产生其它副作用。
附带说明一下，在欧洲专利公开0287951和美国专利4,399,134中式(I)的1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸和式(II)的6，7-二氢-1-氧代-1H，5H-苯并[i，j]喹啉烷-2-羧酸曾作为抗菌剂公开过。
为了研制出一种新的白三烯-1抑制剂，本发明人已经做了研究，并已发现式(I)和(II)所示的苯并杂环化合物，特别是7-(3-甲基-1-哌嗪基)-1-环丙基-6-氟-5-甲基-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸或其盐和9-氟-8-(4-羟基-1-哌啶基)-5-甲基-6，7-二氢-1-氧代-1H，5H-苯并[j，i]喹啉烷-2-羧酸或其盐可用作白三烯-1抑制剂。
本发明目的之一是提供一种新颖的白三烯-1抑制剂。另一目的是提供式(I)和(II)所示的已知的苯并杂环化合物及其盐作为白三烯-1抑制剂的新用途。还有一个目的是提供一种预防和治疗由于白三烯-1分泌加快而诱导的各种疾病的方法，即给患有此类疾病的人服用有效量的式(I)或(II)所示苯并杂环化合物或其盐。
式(I)和(II)中各个基团的定义如下“低级烷基”是指具有1-6个碳原子的直链或支链烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基等。
“卤原子”是指氟、氯、溴或碘原子。
式(I)和(II)所示的苯并杂环化合物中的碱性化合物能和常规的药物学上可接受的酸很容易形成盐。这些酸包括，例如，无机酸如硫酸、硝酸、盐酸、磷酸、氢溴酸等，和有机酸如乙酸、对-甲苯磺酸、乙磺酸、草酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸、苯甲酸等。此外，式(I)和(II)所示的苯并杂环化合物中的酸性化合物能和常规的药物学上可接受的碱性化合物很容易形成盐。这些碱性化合物，例如，氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、碳酸钠、碳酸氢钾等。
本发明的白三烯-1抑制剂可用于预防和治疗由于白三烯-1分泌加快所诱导产生的各种疾病，例如，自体免疫疾病，如肾炎、脉管炎、发炎性肠病(如溃疡性结肠炎或克罗恩氏病)；风湿性疾病，如类风湿关节炎、牛皮癣、关节炎、硬皮病、贝切特氏病(综合症)和痛风病；与局部和全身感染有关的炎症疾病，如脓毒性休克，和牙、眼和耳鼻喉科的炎症疾病，如慢性牙周病、眼部炎症和中耳炎；过敏性疾病，如气喘；骨质疏松症；子宫内膜异位[参见Fukih，H.，等人；Fertil.Sterl.，47，p213(1987)]；慢性肉芽肿病；何杰金氏病；急性或慢性骨髓性白血病；graft-vs.-host疾病；糖尿病[参见Dayer MetrozM.-D.；eur.J.Clin.Invest.，22(No.4)，p2，A50(1992)]；Kawasaki′s病[参见Leung，D.Y.M.等人；J.Exp.Med.，164，p1958(1986)]；等等。
对于人类和其他动物，本发明式(I)和(II)所示化合物及其盐以常规的药物制剂形式使用。用常规的稀释剂或载体制备上述制剂，如填充剂、增稠剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂、润滑剂，等等。根据预期使用目的，可选择各种形式的制剂，具代表性的剂型有片剂、丸剂、粉剂、溶液、悬浮液、乳液、颗粒剂、胶囊剂、栓剂、注射液(溶液、悬浮液等)等等。为了制成片剂，可使用常规的载体如载体(象乳糖、白糖、氯化钠、葡萄糖、脲、淀粉、碳酸钙、高岭土、结晶纤维素、硅酸等)，粘合剂(象水、乙醇、丙醇、单糖浆、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明胶溶液、羧甲基纤维素、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等等)，崩解剂(象干淀粉、藻酸钠、琼脂粉、昆布多糖粉、碳酸氢钠、碳酸钙、聚氧乙烯脱水山梨(糖)醇脂肪酸酯，月桂基硫酸钠、硬脂酸单甘油酯、淀粉、乳糖等等)，崩解抑制剂(象白糖、硬脂糖、可可脂、氢化油等等)，吸收促进剂(象季铵碱、月桂基硫酸钠等等)，润湿剂(象甘油、淀粉等等)，吸收剂(象淀粉、乳糖、高岭土，膨润土、胶体硅酸盐等等)，润滑剂(象纯化滑石、硬脂酸盐、硼酸粉、聚乙二醇等等)，及类似物。此外，片剂也可采用常规的包衣片形式，如糖包衣片、明胶包衣片、肠衣片、膜衣片，或双或三层衣片。
在制丸剂时，所用载体包括载体(象葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、高岭土、滑石等)，粘合剂(象阿拉伯胶粉、黄蓍粉、明胶、乙醇等等)，崩解剂(象昆布多糖、琼脂等)，及类似物。制备栓剂时用的载体包括，例如，聚乙二醇，可可脂，高级醇，高级醇的酯类，明胶，半合成甘油酯，及类似物。
胶囊剂可通过通常方式将本发明化合物与上述载体的混合物充入硬明胶胶囊或软胶囊而制得。
在制备注射剂时，将溶液、乳液、或悬浮液灭菌处理并且最好调节到与血液等渗。在制备这些溶液、乳液和悬浮液时，可使用通常的稀释剂，例如水，macrogol，乙醇，丙二醇，乙氧基化异硬脂醇，聚烃氧基化(polyoxylated)异硬脂醇，聚氧乙烯脱水山梨(糖)醇脂肪酸酯，及类似物。在此情况下，药物制剂中也可以加入氯化钠、葡萄糖或甘油，其用量应足以使药物制剂等渗，也可以加入通常的增溶剂、缓冲剂、麻醉剂。
此外，如果需要药物制剂中还可以任选地加入着色剂、防腐剂、香料、香味剂、增甜剂，以及其它药物。
掺入本发明白三烯-1抑制剂中的活性化合物的量没有具体规定，而是可以选自一个宽度的范围，但通常的范围是1-70％(重量)，较好是约1-30％(重量)。
本发明的白三烯-1抑制制剂可通过任何方法给药，可根据各种制剂形式，病人的年龄、性别和其它情况、疾病的严重程度等等因素决定合适的给药方式。例如，片剂，丸剂、溶液、悬浮液、乳液、粒剂和胶囊剂可口服给药。注射液可单独地或与常规辅助液体(如葡萄糖、氨基酸溶液)一起进行静脉给药，如果需要，还可以任选地单独肌内、皮内、皮下或腹膜内给药。栓剂则通过直肠给药。
本发明的白三烯-1抑制剂可以按照用途、病人的年龄、性别和其它情况、疾病的严重程度等因素来选择剂量，但通常日剂量范围是每千克病人体重给予约0.1-1000毫克本发明活性化合物。该日剂量可以分成每天1-4次给药。每剂量单位含有约1-600毫克活性化合物为佳。
本发明以下述制剂和药理实验加以说明。
制剂1由下述组分制备膜衣片组 分 量7-(3-甲基-1-哌嗪基)-1-环丙基-6-氟-5-甲基-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸 150克Avicel(微晶纤维素商品名，日本40克Asahi Chemical Industry Co.，Ltd.制造)玉米淀粉 30克硬脂酸镁 2克羟丙基甲基纤维素 10克聚乙二醇-6000 3克篦麻油 40克乙醇 40克将本发明活性成分、Avicel、玉米淀粉和硬脂酸镁混合并揉压，将此混合物用常规的(R10mm)压片机压片以便进行糖包衣。制得的药片用由羟丙基甲基纤维素、聚乙二醇-6000、篦麻油和乙醇组成的膜包衣剂包衣，得到膜衣片剂。
制剂2用下述组分制备片剂组分 量9-氟-8-(4-羟基-1-哌啶基)-150克5-甲基-6，7-二氢-1-氧代-1H，5H-苯并[j，i]喹啉烷-2-羧酸柠檬酸 1.0克乳糖33.5克磷酸二钙70.0克Pluronic F-68 30.0克月桂基硫酸钠 15.0克聚乙烯吡咯烷酮 15.0克聚乙二醇(Carbowax1500)4.5克聚乙二醇(Carbowax6000) 45.0克玉米淀粉 30.0克干燥月桂基硫酸钠 3.0克干燥硬脂酸镁 3.0克乙醇适量将本发明活性成分、柠檬酸、乳糖、磷酸二钙、Pluronic F-68和月桂基硫酸钠混合。将混合物用60号筛过筛并与含有聚乙烯吡咯烷酮、Carbowax1500和6000的醇溶液一起湿法造粒。如果需要，加入醇，以便将粉状混合物制成糊状物质。加入玉米淀粉，将所得混合物连续混合以形成均匀的颗粒。将所得颗粒通过10号筛，置于盘中，在100℃的炉中干燥12-14小时。干燥过的颗粒用16号筛过筛，往其中加入干燥的月桂基硫酸钠和干燥的硬脂酸镁，将混合物压片，使之成为所需要的形状。
将所制得的片核埋在(vanished)滑石粉中涂粉以防止潮湿。将片核进行底涂。为了将片剂口服给药，要将片核如此处理几次。为了使片剂形圆面滑，用润滑剂进一步底涂和包衣。该片剂用着色涂料涂覆，直至得到所需颜色的片剂。干燥后，将包衣片剂抛光，得到具有均匀光泽的片剂。
药理学实验方法将10％的肝素化的、取自健康自愿者的prepheral血、试验化合物和脂多糖(LPS，3.3微克/毫升)悬浮于RPMI-1640介质中，补充以盘尼西林100单位/毫升和链霉素0.1微克/毫升，将此混合物于5％CO2气氛中和37℃培养18-24小时。将培养物的上清液通过离心法收集起来。
通过用LPS刺激从细胞中分离出的IL-1α和IL-1β，并用酶标记免没测定法(ELISA)测定。就是说，用对人类IL-1α或人类IL-1β的小鼠单克隆抗体涂覆96-孔ELISA平皿，然后进行封阻处理，加入试验样品，令其反应。反应后，洗涤该平皿，然后往平皿上加入对IL-1α或IL-1β的兔多克隆抗体，并令其反应。洗涤该平皿，然后加入辣根过氧化酶(POD)结合的抗兔免疫球蛋白，令其反应。通过洗涤除去未结合的POD-结合的抗体以后，加入基质溶液(含有邻苯二胺和过氧化氢)，令其反应，然后测定在492纳米波长的吸光度，根据各自的标准曲线，可测量出IL-1α和IL-1β的量。用下述方式计算出抑制IL-1释放的比率(％)IL-1释放抑制比率(％)＝100×(1－T/C)其中T表示加入试验化合物的培养物上清液中IL-1的量，C表示只加入溶剂的培养物上清液中IL-1的量。
试验化合物1.7-(3-甲基-1-哌嗪基)-1-环丙基-6-氟-5-甲基-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸2.9-氟-8-(4-羟基-1-哌啶基)-5-甲基-6，7-二氢-1-氧代-1H，5H-苯并[j，i]喹啉烷-2-羧酸结果结果示于表1中表1试验化合物 剂量(3×10-5克/毫升)IL-1α释放抑制率IL-1β释放抑制率193％ 96％282％ 78％工业应用本发明的白三烯-1抑制剂可用于预防和治疗由于白三烯-1分泌加快而诱导发生的各种疾病，例如人类及其他动物的自体免疫疾病，风湿性疾病，各种炎症，过敏性疾病等等。
权利要求
1.一种白三烯-1抑制剂，其中含有式(I)或(II)所示的苯并杂环化合物或其药物学上可接受的盐作为活性成分， 式中R1和R2各为低级烷基，X1是卤原子， 式中R3是低级烷基，R4是羟基，X2是卤原子。
2.根据权利要求1的抑制剂，其中活性化合物是7-(3-甲基-1-哌嗪基)-1-环丙基-6-氟-5-甲基-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸或9-氟-8-(4-羟基-1-哌啶基)-5-甲基-6，7-二氢-1-氧代-1H，5H-苯并[j，i]喹啉烷-2-羧酸，或者它们的药物学上可接受的盐。
3.一种预防和治疗由于白三烯-1分泌加速所诱导的疾病的方法，包括将治疗有效量的式(I)或(II)所示苯并杂环化合物或其药物学上可接受的盐给药予患有上述疾病的病人， 式中R1和R2各为低级烷基，X1是卤原子， 式中R3是低级烷基，R4是羟基，X2是卤原子。
4.根据权利要求3的方法，其中由白三烯-1分泌加速所诱导的疾病是自体免疫疾病，风湿性疾病，与局部和全身感染相关的炎症，过敏性疾病，气喘，骨质疏松症，慢性肉芽肿瘤，何杰金氏病，急性或慢性骨髓性白血病，graft-vs.-host疾病，糖尿病，以及kawasaki′s疾病。
5.根据权利要求4的方法，其中由白三烯-1分泌加速所诱导的疾病是自体免疫疾病和风湿性疾病。
6.根据权利要求3，4或5的方法，其中活性化合物是7-(3-甲基-1-哌嗪基)-1-环丙基-6-氟-5-甲基-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸或9-氟-8-(4-羟基-1-哌啶基)-5-甲基-6，7-二氢-1-氧代-1H，5H-苯并[i，j]喹啉烷-2-羧酸或他们的药物学上可接受的盐。
全文摘要
一种白三烯-1抑制剂，其中含有下式所示苯并杂环化合物或其药物学上可接受的盐作为活性成分，以及通过使用上述白三烯抑制剂预防和治疗由白三烯-1分泌加速诱导的各种疾病的方法，式中R
文档编号A61K31/47GK1118991SQ9419140
公开日1996年3月20日 申请日期1994年2月22日 优先权日1993年3月10日
发明者足立正一, 玉冈寿, 小野幸久 申请人:大制药株式会社