专利名称：紫花前胡甙及其相关化合物在治疗心率失常疾病中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及从紫花前胡[Peucedanum decursivum(Miq.)Maxin的干燥根及根茎]以及羌活(Natopterygium incisumTing和N.Forbesii Boss的干燥根及根茎)中提取分离的抗心率失常活性成分--紫花前胡甙及其相关化合物的各种制剂在治疗心率失常疾病中的应用以及紫花前胡甙在抗心率失常药物制剂质控分析中的应用。
紫花前胡甙(nodakenin)在我国最初从紫花前胡[Peucedanum decursivum(Miq.)Maxim的干燥根及根茎]中分离鉴定，药理实验表明其具有抑制血小板凝聚活性。后来人们相继从中药羌活(Natopterygium incisum Ting et.H.T.Chang和N.Forbesii Boss的干燥根及根茎)及许多其他植物中分离。
本发明人从N.incisum Ting中分离鉴定了紫花前胡甙及十多个香豆素。
紫花前胡甙(nodakenin)为无色细晶(从乙醇/水中重结晶)。其结构式及光谱数据在文献中已有报道。其化学名为R-2-[1-(β-D-葡糖基)-1-甲基乙基]-2，3-二氢-7-氢-呋喃[3.2g][1]-苯并吡喃-7-酮。
紫花前胡甙富含于紫花前胡(1.6％)、羌活(0.1-3.3％)等中药及多种植物中，而且较易提取分离。同时也可以采取人工半合成或全合成制得。
药理实验表明，羌活水溶部分对乌头碱引起的小鼠、大鼠实验性心率失常及氯仿--肾上腺素所致家兔实验性心率失常均有明显对抗作用。紫花前胡甙为其水溶部分之主要成分。因此，我们进行了紫花前胡甙抗实验性心率失常活性研究。结果表明，紫花前胡甙静脉注射能明显对抗大鼠恒速静注乌头碱诱发的各类心率失常作用。与空白对照比较，3.8mg/kg剂量的紫花前胡甙能明显提高室性心动过速(VT，P＜0.05)，室性早搏(VP，P＜0.05)，心室颤动(VF，P＜0.01)及短阵发性室性过速(SVT，P＜0.01)所需乌头碱的用量。与奎尼丁10mg/kg作用相似。紫花前胡甙静脉注射能明显对抗哇巴因(Ouabain)所致豚鼠心率失常作用，与空白对照比较，2.4mg/kg剂量的紫花前胡甙能明显提高VP(P＜0.01)，VT(P＜0.01)及心脏停搏(SS，P＜0.001)所需哇巴因的用量。与8mg/kg剂量的利多卡因(Lidocaine)作用相似。静脉注射紫花前胡甙6.5mg/kg能明显降低一定剂量氯化钙所致大鼠室颤(VF，P＜0.01)发生时间和死亡率(P＜0.01)。与10mg/kg奎尼丁作用相似。静脉注射紫花前胡甙2.0mg/ml能明显对抗大鼠复灌VT(P＜0.01)，VF(P＜0.01)发生率和死亡率(P＜0.05)。与5mg/kg奎尼丁作用相似。
本发明人目前进行的药理实验表明，羌活水溶部分具有抗心率失常作用，其口服液制剂已用于临床验证。但是，由于水溶部分成分复杂，加之生药来源不同，其所含成分的比例各异，干扰因素多，制剂不够稳定，较难稳定羌活口服液制剂的质控标准。紫花前胡甙为羌活水溶部分的主要成分，因此，紫花前胡甙在羌活口服液中的含量可以作为口服液之质控标准。同时紫花前胡甙可直接开发成为服量小、疗效稳定、无毒副作用的新药。
为了提高疗效，还可以对其结构进行改造。例如制备成紫花前胡甙的各种可药用衍生物等。此化合物性质稳定，加之其水溶性较大，可制成任何制剂用于临床。由于其为化学结构确切的单体成分，将其制成各种制剂容易进行质量控制。鉴于其确切的实验药理活性，此化合物具有较广泛的开发利用前景。这也是本发明的实用性和可行性之所在。
本发明还涉及S构型的上述化合物及其可药用衍生物的同样应用。
下面将通过具体的实验对本发明进行描述实验1.紫花前胡甙对乌头碱诱发大鼠心率失常的影响雄性大鼠30只，体重258.6±24.5g，随机分为三组。腹膜内注射1.2g/kg乌拉坦麻醉。一组静脉注射生理盐水，一组静脉注射紫花前胡甙，另一组静脉注射奎尼丁。用心电示波器连续观察并记录II导心电图。给药5分钟后，静脉恒速注射乌头碱0.8μg/min，观察室性早搏(VP)，短阵发性室性过速(SVT)，室速(VT)和室颤(VF)出现时乌头碱的用量。实验结果参见表1。
表1
X±S与对照组相比*P＜0.05，**P＜0.01结果表明，静脉注射3.8mg/kg紫花前胡甙能显著增加乌头碱诱发大鼠VP，SVT，VT和VF的用量。与10mg/kg奎尼丁作用相似。实验2.紫花前胡甙对哇巴因引起豚鼠心率失常的影响豚鼠24只，雌雄各半，体重298-312g。用乌拉坦1.2g/kg麻醉。随机分为三组，记录II导心电图，示波器连续监视其变化。一组静脉注射生理盐水，一组静脉注射2.4mg/kg紫花前胡甙，另一组静脉注射利多卡因。观察5分钟后，将0.03％哇巴因按50μg/kg的剂量颈外静脉注射，继续以6μg/min恒速输注直至心脏停搏。记录室性早搏(VP)，室速(VT)和心脏停搏(SS)出现时所需哇巴因的用量。实验结果参见表2。
表2
X±S与对照组相比*P＜0.05，**P＜0.01***P＜0.001结果表明，静脉注射2.4mg/kg紫花前胡甙能显著增加哇巴因引起豚鼠VP，VT和SS的用量。与8mg/kg利多卡因作用相似。实验3.紫花前胡甙对氯化钙诱发大鼠心率失常的影响大鼠30只，雌雄不拘，体重198±8g，腹膜内注射1.2g/kg乌拉坦麻醉。随机分为三组。分别静脉注射生理盐水，紫花前胡甙和奎尼丁后5分钟，静脉注射8％氯化钙2.2mg/kg。用II导心电图仪记录室颤开始出现时间和死亡率。实验结果参见表3。
表3
X±S与对照组相比**P＜0.01结果表明，静脉注射6.5mg/kg紫花前胡甙能显著延长氯化钙引起大鼠室颤出现时间和显著降低死亡率。实验4.紫花前胡甙对大鼠复灌所致心率失常的影响雄性大鼠30只，体重301±28g(SD)。腹膜内注射1.2g/kg乌拉坦麻醉，仰位固定于34-36℃的保温台上。颈外静脉插管作给药用，气管插管接动物人工呼吸器(DH-140型)。采用II导联观察和记录心电图，并用SRB-1型二线示波器监视心电图的改变。
开胸手术在人工呼吸的情况下进行，呼吸频率50次/分钟，呼吸比率3∶1，通气量约250ml/分钟。从左侧第4，5肋之间打开胸腔，剪破心包膜，轻压胸廓，使心脏自然跳出胸膛。用型号为圆3/8 Cr3×6的不锈钢缝针将5/0丝线置于左冠状动脉发出后的2mm处。将心脏放回胸腔，恢复15分钟后，随机给予紫花前胡甙2.0mg/kg，奎尼丁5mg/kg或等量的生理盐水，并将一小段直径为3mm的硅胶管套在预先留置的丝线上。10分钟后，通过外力使该管压迫左冠状动脉，阻断其血流。5分钟后，取掉该管，开始复灌，连续记录复灌第一分钟内的心电图。
对复灌1分钟内室速(VT)，室颤(VF)发生率及死亡率的影响参见表4。
表4
X±S与对照组相比*P＜0.05，**P＜0.01结果表明紫花前胡甙能显著抑制VT和VF的发生及由此所致死亡。
权利要求
1.紫花前胡甙和甙元及它们的可药用衍生物用于制备治疗心率失常药物的方法及其用于抗心律失常药物质控的方法。
2.权利要求1所述的方法，其中所述紫花前胡甙是从天然产物中分离提取的。
3.权利要求1所述的方法，其中所述紫花前胡甙是人工半合成或全合成的。
4.权利要求1所述的方法，从天然物中提取和人工半合成或全合成的紫花前胡甙及其甙元的S构型异构体及其可药用衍生物。
全文摘要
本发明涉及从紫花前胡(Peucedanumdecursivum(Miq.)Maxin的干燥根及根茎)以及羌活(Natopterygium incisum Ting和N.Forbesii Boss的干燥根及根茎)中提取分离的抗心率失常活性成分——紫花前胡甙及其相关化合物的各种制剂在治疗心率失常疾病中的应用以及紫花前胡甙在抗心率失常药物制剂质控分析中的应用。
文档编号A61K31/34GK1120434SQ9510214
公开日1996年4月17日 申请日期1995年3月11日 优先权日1995年3月11日
发明者肖永庆, 杨俊清, 刘晓宏 申请人:海南博大医药发展有限公司, 杨俊清