含有蛋壳膜成分的胰岛素抵抗改善剂以及使用该改善剂的组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及含有蛋壳膜成分、例如可溶性蛋壳膜成分（蛋壳膜水解物等）或者含 蛋壳膜粉末或微粉末的胰岛素抵抗改善剂及其应用。
【背景技术】
[0002] 蛋壳膜（以下，有时称为"ESM"）是鸡蛋等禽类蛋的蛋壳内侧形成的膜，其具有抗 菌性和抗微生物活性，能够保护发育中的胚胎不受感染。蛋壳膜具有主要成分为I型、V型 以及X型胶原蛋白、氨基葡萄糖、锁链素以及透明质酸且由纤维性蛋白质等构成的牢固的 网状结构。这些蛋白质大多数含有半胱氨酸，相对于酸、碱、蛋白酶比较稳定且不溶于水。因 此，鸡蛋蛋壳膜作为食品产业中的副产品几乎未得到利用而被扔掉，但是，已知蛋壳膜具有 促进皮肤再生的作用，尤其是具有促进被称为胎儿型胶原蛋白的III型胶原蛋白的生成的 作用，因此，其对于生物体的有效性开始得到关注。
[0003] 已知皮肤中的胶原蛋白随着年龄的增加而减少。本发明人等曾发表报告称：在 与人造聚合物结合的碱水解蛋壳膜（以下，有时称为"ASESM"）上培养的人皮肤成纤维细 胞中，在接近于真皮的状态条件（细胞分散存在的条件）下，III型胶原蛋白（type III collagen)、核心蛋白聚糖（decorin)、基质金属蛋白酶 2(matrix metalloproteinase-2 ; 以下称为"MMP2"）明显比相同条件下的胶原包被（collagen coat)以及在细胞培养皿上培 养时高（非专利文献 I :〇hto_Fujita et al，2011)。
[0004] 糖尿病是伴随一生的慢性疾病，其包括因为胰脏几乎不产生胰岛素而在幼年就发 病的1型糖尿病、和因为肥胖、压力、吸烟、运动不足等原因而发病的后天性的2型糖尿病。 根据国际糖尿病联盟的统计(http ：//www. idf. orR/diabetesatlas/)，全球患有糖尿病人 口中的成年人（20岁~79岁）在2012年时为约3亿7100万人，糖尿病的患病率上升至约 8. 3%。今后还将继续上升，2030年将达到约5亿5200万人，患病率将达到约9. 9%。在全 球糖尿病人口的排名中，日本以710万人排在世界第9位，据推测其中有351万人未接受糖 尿病诊断（第1位为中国、第2位为印度、第3位为美国、第4位为巴西、第5位为俄罗斯、 第6位为墨西哥、第7位为印度尼西亚、第8位为埃及）。有报告称：亚洲人携带有稍微肥 胖或运动不足便会引起糖尿病的节俭基因 （thrifty gene)，因而发病风险高（非专利文献 2 ：Diabetes Care, February 2011 vol. 34 no. 2 353-357)〇
[0005] 糖尿病多数在毫无症状的情况下就恶化，大多数情况下还未察觉到病情已经恶 化。因此，希望能够开发出具有预防性作用的补充剂而不仅仅是依靠饮食和运动。当糖尿 病的病情恶化时，除了因为免疫功能降低而容易感染、白内障易恶化、作为皮肤症状而伤口 不易愈合等之外，作为并发症还伴有糖尿病神经病变、视网膜病、肾病，从而QOUQuality of Life、生活质量）降低。糖尿病也是引起心脏病或脑血管疾病的危险因素，成为导致死 亡的间接原因。从1971年~1980年的数据可知，与正常日本人的平均寿命相比，患有糖尿 病的男性的寿命缩短了约10年，女性的寿命缩短了约15年（非专利文献3 :Sakamoto N， et al·，Tohoku J Exp Med Hl(Suppl) :631,1983)。
[0006] 高血糖是因为生物体内的蛋白质被非酶糖化而使蛋白质本来的功能受损从而引 起的病变。该糖化对于例如作为血管的主要构成成分的胶原蛋白或水晶蛋白（crystallin) 等寿命长的蛋白质的影响更大（非专利文献4 :Ulrich P，Cerami A. Recent Prog Horm Res. 2001 ;56 :1-21. Review.)。例如，白内障是因为衰老而引起的，但在血糖高的情况下， 该衰老现象的恶化速度更快。基于同样的机理，动脉硬化或微血管病也会恶化。另外，在糖 化反应所产生的自由基等的影响下，氧化应激也会加剧。
[0007] 在噻唑啉类（TZD)糖尿病改善药改善2型糖尿病患者的胰岛素抵抗时，细胞核受 体、即过氧化物酶体增殖剂响应性受体Y (PPARy)作为中介物（mediator)发挥作用（非 专利文献5 :Saltiel AR，01efsky JM，1996)。因此，PPAR γ的表达能够改善胰岛素敏感性， 从而带来糖尿病治疗效果。在利用有助于预防和改善生活习惯病的PPAR Y -维甲酸X受体 (RXR)细胞核受体来促进脂肪细胞中的线粒体内膜的解偶联蛋白UCP-I基因的转录时，需 要共激活因子（coactivator)PGC-Ια (非专利文献6 :Puigserver P，et al. ,1998 ;非专利 文献 7 :Puigserver P，Spiegelman BM，2003)。
[0008] 脂肪细胞中的UCP的表达有助于预防和改善生活习惯病。PGCla的表达能够促 进线粒体的生物合成，从而带来抗肥胖效果和寿命延长效果，认为作为上游信号而与Sirtl 有关（非专利文献 8 :Qiu X.，et al.，2010b)。
[0009] 已知随着2型糖尿病的恶化，血液中的炎性细胞因子逐渐增加（非专利文献 9 ：ffellen KE, Hotamisligil GS. J Clin Invest. 2005 May；115(5) :1111-9. Review.), 另外，有报告称=IL-Ibeta与IL-6的组合与2型糖尿病的发病有关（非专利文献10 : Spranger J,Kroke A,Mohlig M,Hoffmann K,Bergmann MM,Ristow M,Boeing H,Pfeiffer AF. Diabetes. 2003 Mar ;52 (3) :812_7·)，另外，在最近的整合分析（meta-analysis)中也 发现IL-6和CRP与2型糖尿病的发病有很大关系（非专利文献11 :Wang X，Bao W，Liu J， Ouyang YY,Wang D, Rong S,Xiao X,Shan ZL,Zhang Y,Yao P,Liu LG. Diabetes Care. 2013 Jan ;36 (I) :166-75. doi :10.2337/dcl2-0702. Review.)。
[0010] 有报告称蛋壳膜将下述细胞活素类作为靶（target)发挥作用，从而发挥抗炎症 作用，BP :IL-Il、IL-lalpha、IL-2、IL-6、NFk B、IL-7、MCP-I、MCP-3、MCP-5、MIP-lbeta、 MIP-2、MIP-3beta、RANTES、TNF alpha 以及 VEGF (专利文献 1)。 toon] 但是，对于蛋壳膜成分的作用机理或者有效增强生活习惯病关联蛋白质的作用的 方法尚未充分了解。另外，在皮肤和全身同时对于多个生活习惯病关联基因的表达进行控 制从而有助于身心健康的物质，迄今为止尚属未知。
[0012] 【现有技术文献】
[0013] 【专利文献】
[0014] 专利文献1 :美国专利公开公报US20070178170 Al
[0015] 【非专利文献】
[0016] 非专利文献 I :0hto_Fujita et al，Cell Tissue Res. 2011 July ;345 (1): 177-190
[0017] 非专利文献 2 :DiabetesCare，February 2011 vol. 34 no. 2 353-357
[0018] 非专利文献 3 :SakamotoN，et al :The features of causes of death in Japanese diabetics during theperiod 1971-1980. Tohoku J Exp Med 141 (Suppl) :631， 1983
[0019] 非专利文献 4 :UlrichP，Cerami A. Protein glycation，diabetes，and aging. Recent Prog HormRes. 2001 ；56 :1-21. Review.
[0020] 非专利文献 5 :Saltiel AR，OlefskyJM. Thiazolidinediones in the treatment of insulin resistance and type II diabetes. Diabetes. 1996 ；45 :1661-1669. PMid ： 20150512.
[0021] 非专利文献 6 :Puigserver P，Wu Z，Park CW，GravesR，Wright M， Spiegelman BM. A cold-inducible coactivator of nuclear receptors linked to adaptivethermogenesis. Cell. 1998 ;92 :829-839.
[0022] 非专