微镜或计算机辅助测量来定量评价。在一个实施方案中，本发明 的组合物将以大约0. 001到大约l〇〇mg/cm2,典型地大约0. 01到大约20mg/cm2,且更典型地 大约0. 1到大约l〇mg/cm2的量应用于皮肤。
[0057] 还考虑本发明的组合物将用于处理薄皮肤，通过将组合物局部应用于有此需要的 个体的薄皮肤。"薄皮肤"预期包括由于岁月老化、绝经或光损害而变薄的皮肤和过早变薄 的皮肤。在一些实施方案中，处理是针对男性的薄皮肤，而其它实施方案处理绝经前或绝经 后的女性的薄皮肤，因为认为皮肤变薄在男性和女性中随着年龄而不同，并且特别是在处 于不同生命阶段的女性中。
[0058] 本发明的方法可以预防性地用于阻止老化，包括在尚未显示皮肤老化征象的个体 中，最通常在25岁以下的个体中。一旦出现，该方法还可以逆转或处理老化征象，如在超过 25岁的个体中常见的，或者减慢此类个体中皮肤老化的进展。
[0059] 在一个实施方案中，本发明的组合物应用于人类皮肤以减少皮脂产生或改善受到 蜂窝组织影响的皮肤外观，和/或减少不想要的脂肪生成或增加脂肪分解。在该实施方案 中，所述化合物或活性剂（PL0D-2刺激剂）可配制在化妆品可接受载体（如本文所述）中 且可包括一种或多种另外的活性剂如抗粉刺剂（例如水杨酸、过氧化苯甲酰和其它过氧化 物、硫磺、类视黄醇等等）_在面部组合物的情况中，或者在蜂窝组织处理的情况中，制剂可 包含任何适于处理蜂窝组织的成分，包括但不限于紫苏子油和其它不饱和脂肪油及《-3 脂肪酸如a-亚麻酸；咖啡因；茶碱；黄嘌呤类；类视黄醇（例如视黄醇）等等。根据本发 明的蜂窝组织处理将典型地局部应用于存在蜂窝组织的皮肤，包括臀部和大腿的皮肤，持 续时间足以改善其外观，包括例如每天处理至少四周、至少八周、至少十二周或更长。
[0060] 在另一个实施方案中，本发明的组合物应用于人类皮肤用于脱色，包括减少不想 要的色素沉积如色素沉着过度（包括老年斑和雀斑）的面积。在该实施方案中，组合物可 配制在化妆品可接受载体（如本文所述）中且可包含对抗色素沉积或色素沉着过度的一种 或多种另外的活性剂，包括酪氨酸酶抑制剂和/或黑素体转移抑制剂。可特别提及硫代二 丙酸及其酯（特别是二月桂基酯）；氢醌及其单苄基醚；氢醌-e-D-吡喃葡萄糖苷；类视 黄醇（例如视黄酸）；维甲酸；壬二酸；曲酸（5-羟基-4-吡喃-4-酮-2-甲基）；对甲氧酚 (4-羟基茴香醚）；烟酰胺；大豆蛋白和其它丝氨酸蛋白酶抑制剂；构树提取物；光甘草定 (甘草提取物）；Arctostaphylospatula和白叶熊果（Arctostaphylosviscida)提取物； 镁-L-抗坏血酸基-2-磷酸（MAP) ;4_异丙基儿茶酚；芦荟素；N-乙酰基-4-S-半胱胺基苯 酚和N-丙酰基-4-S-半胱胺基苯酚；N-乙酰基葡萄糖胺；和氨甲环酸（反式-4-氨基甲基 环己烷甲酸），仅举几例。 具体实施方案
[0061] 下述实施例描述了本发明的特定方面以例示本发明，但不应解释为限制本发明， 因为实施例仅提供可用于理解和实施本发明及其多个方面的特定方法学。
[0062] 实施例1
[0063] PLOD-2表汰随年龄下降
[0064] 细胞处理：将正常人真皮成纤维细胞（来自平均年龄20岁的三名年轻供体和 来自平均年龄60岁的三名年长供体的供体细胞）生长在包含10%胎牛血清（Perbio; cat. #:SH30070. 03)、青霉素 / 链霉素（Mediatech,Cat#30-001-Cl)、L-谷氨酰胺 (Mediatech;cat. #:25-005-CI)的DMEM(Mediatech;cat. #:15-013-CV)中，并在 37°C及 10%CO2条件下。细胞于P4/P5生长至大约80%汇合。使用来自Qiagen的RNeasyRNA提 取试剂盒（74106)分离RNA。使用NanoDrop分光光度计ND1000(AgilentTechnologies) 测定RNA浓度。
[0065] 反转录（RT):将来自三名年轻供体（平均年龄20岁）和来自三名年长供体（平 均年龄60岁）的等浓度RNA合并用于分析。RT反应在20y1总体积中进行，使用来自AB 的HighCapacitycDNA试剂盒（PN4368814)。制备RT混合物以含有 2ylIOXTaqManRT 缓冲液，I. 2yIdNTP混合物（IOOnm)，I. 0yIIOX随机六聚体，IyIRNA酶抑制剂，Iy1 MultiScribe反转录酶（50U/ml)，100ngRNA,和无RNA酶水以补足20yl终体积。反应 在BIORADMYCYCLER中于25°C温育10分钟，45°C45分钟，然后95°C5分钟。
[0066]聚合酶链式反应（PCR):QPCR使用AppliedBiosystemsUniversalPCRMaster Mix(PN4369016)进行。该混合物含有IOyITaqmanUniversalPCRmix,Iy1 引物 和探针混合物，2yIRT产物，和7y1去离子水。所有探针、Taqman测定购自Applied Biosystems,Hs01118190_ml用于PL0D-2,和人GAPDH(PN4352934)。qPCR的温度谱为： 50°C2min和 95°CIOmin-个循环，然后 95°C15sec和 60°CImin40 个循环，在Stratagene Mx3005PqPCR机器中进行。
[0067]结果:
[0068] 检查了在年轻相对于年长皮肤成纤维细胞中PL0D-2的年龄相关表达。表1中的 数据展示，与年轻皮肤成纤维细胞相比年长皮肤成纤维细胞中显著较低水平的PL0D-2。所 有值为P〈〇. 05统计学显著的。
[0069]表1.
【主权项】
1. 用于改善人类皮肤美学外观的化妆品组合物，其包含化妆品可接受的载体、有效量 的N-乙酰基-酪氨酰胺和有效量的类视黄醇。
2. 权利要求1的化妆品组合物，其中所述载体为油包水、水包油、水包硅酮、硅酮包水、 娃酮包多元醇或多元醇包娃酮乳剂的形式。
3. 权利要求1的化妆品组合物，其中所述类视黄醇为视黄醇。
4. 权利要求1的化妆品组合物，其中N-乙酰基-酪氨酰胺的有效量为按重量计大约 0.0 Ol %到大约2. 5%，而类视黄醇的有效量为按重量计大约0.0 Ol %到大约2. 5%。
5. 权利要求1的化妆品组合物，还包含水杨酸。
6. 权利要求1的化妆品组合物，还包含乙醇酸。
7. 用于改善人类皮肤美学外观的方法，其包括向有此需要的皮肤区域局部应用在化妆 品可接受的载体中包含有效量的N-乙酰基-酪氨酰胺和有效量的类视黄醇的组合物，应用 的持续时间足以改善所述皮肤的外观。
8. 权利要求7的方法，其中所述人类皮肤的所述美学改善选自下组： (a) 细纹或皱纹的处理、减少和/或预防； (b) 皮肤毛孔大小的减小； (c) 皮肤厚度、丰满度和/或紧固度的改善； (d) 皮肤光滑度、柔韧性和/或柔软性的改善； (e) 皮肤色调、光亮度和/或透明度的改善； (f) 前胶原和/或胶原产生的改善； (g) 弹性蛋白的维持和重塑的改善； (h) 皮肤肌理的改善和/或重新恢复原有质地的促进； (i) 皮肤屏障修复和/或功能的改善； (j) 皮肤轮廓外观的改善； (k) 皮肤光泽和/或亮度的恢复； (l) 皮肤中的必需营养素和/或组分的补充； (m) 由老化和/或绝经减弱的皮肤外观的改善； (n) 皮肤保湿的改善； (〇)皮肤弹力和/或弹性的增加； (P)皮肤松垂的处理、减轻和/或预防； (q) 皮肤紧实度的改善；和 (r) 色素斑点和/或斑点皮肤的减少；和 (S)皮肤由光折射或反射的光学特性的改善。
9. 权利要求8的方法，其中所述方法包括所述皮肤的美学改善和对细纹和/或皱纹、皮 肤松垂和弹性丧失的处理、减轻和/或预防。
10. 权利要求9的方法，其中所述皮肤的所述美学改善是对皮肤上皱纹和/或细纹的处 理，并且其中所述方法包括将所述组合物局部应用于有此需要的个体的受累及皮肤，持续 时间足以减轻所述皱纹和/或细纹的严重程度。
11. 权利要求10的方法，其中所述活性剂应用于所述皮肤，至少每天一次，持续至少四 周。
12. 权利要求8的方法，还包括向有此需要的皮肤区域局部应用有效量的乙醇酸。
13. 权利要求8的方法，还包括向有此需要的皮肤区域局部应用有效量的水杨酸。
【专利摘要】提供了预防、改善或减少皮肤老化征象的方法，其采用在化妆品可接受载体中包含有效量的N-乙酰基-酪氨酰胺和有效量的类视黄醇的组合物，以局部应用于皮肤，持续时间足以改善所述皮肤的外观。
【IPC分类】A61Q19-00
【公开号】CN104755140
【申请号】CN201380055399
【发明人】U·桑塔纳姆, P·R·库塞尔
【申请人】雅芳产品公司
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2013年10月9日
【公告号】CA2803591A1, US20140179643, WO2014099111A1