一种抗真菌天然活性物质的制备方法_2

文档序号:8503880阅读:来源:国知局
的特殊刀具将药材破碎剪切至细微颗 粒,同时通过实现高速粉碎、剪切、搅拌、振动、混合、渗透、浸渍的结合作用,使药材的植物 内部有效成分快速转移至溶剂中并达到溶出平衡,通过过滤实现提取目的。该破碎提取方 法实现了粉碎和提取过程的合二为一,粉碎的同时也完成了提取;且整个系统处在一个高 速动态的环境之中,在数秒内快速完成提取过程,破碎提取一次仅需几分钟,同时提取过程 是室温操作,无需加热,避免了不耐热成分,特别是挥发性成分破坏的可能性,极大地保留 了原有的有效成分;通过实验表明,该组织破碎提取方法具有提取快速完全、高效节能,操 作简便、维护和清洗方便、有利环保、工作效率较高等优点。采用该方法提取,能将以上天然 植物中的大部分有效成分,尤其是挥发油成分提取完全,提高了抑菌成分的提取率。采用 该组织破碎提取方法提取能将小冠熏、勒党花椒、孪花蟛蜞菊中的大部分抑菌成分提取完 全; 2) 本发明中对小冠熏、勒党花椒、孪花蟛蜞菊采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩,其 基本原理是在减压真空状态下,使待浓缩的液体以细流依次连续进入薄膜蒸发管中,在薄 膜蒸发管中受热后形成薄膜,使部分溶剂气化,气化后的蒸汽和浓缩液进入气液分离器分 离,达到浓缩目的。使用该浓缩装置浓缩,待浓缩液受热温度较低,被浓缩液体在蒸发管中 瞬间受热,溶剂快速蒸发并与浓缩液分离,各自进入回收系统完成浓缩过程,因此受热时间 极短,回收的浓缩液温度不超过50°C,有效保护了浓缩液中的热敏性成分不被破坏,溶剂的 回收率高等优点。该闪蒸浓缩装置容量大,不受被浓缩液体积大小的限制,可连续循环浓 缩,直到浓缩至所需体积。该方法浓缩速度快、受热时间短、效率高,操作简单、使用方便、节 能环保,同时最大限度地保留了提取物中的有效成分不被破坏。
[0019] 3)本发明将小冠熏、勒党花椒、孪花蟛蜞菊植物作为植物源杀菌剂及抗真菌感染 的资源,资源丰富,来源广泛易得,从中提取抗真菌活性物质,获得了具有很好抗真菌活性 的乙醚萃取物和乙酸乙酯萃取物。所获得的两个部位的萃取物抗真菌(植物病原真菌和人 体表皮真菌感染)活性强,防治效果明显,可用作植物源杀菌剂,防治植物病原真菌感染及 人体皮肤真菌感染。
[0020] 4)经过抑菌试验表明,乙醚萃取物对8种植物病原真菌的最低抑菌浓度MIC值在 0.977-31.25 yg· ml/1之间,特别是对玉米大斑病菌和棉花枯萎病菌;乙酸乙酯萃取物对 8种植物病原真菌的最低抑菌浓度MIC值在7. 813 -125 yg · ml/1之间尤其是对番茄灰 霉病菌、小麦赤霉病菌和大麦赤霉病菌,说明两个萃取部位对8种植物病原真菌均具有较 强的抑制作用,表明乙醚萃取物和乙酸乙酯萃取物是其主要抑菌作用的活性部位,且具有 实用安全、无毒的作用,具有很好的开发应用价值,如果添加复配做成一定的剂型,可以开 发成新型的植物源杀菌剂,用于防治多种植物病原真菌感染和人体皮肤真菌感染。
[0021] 本专利申请中涉及的百分含量均为纯物质的重量百分含量。
【具体实施方式】
[0022] 以下通过具体实施例对本发明作进一步说明,并结合相应试验进一步说明本发明 的有益效果。
[0023] 实施例1 (1)粉碎混合:分别将小冠熏、勒党花椒、孪花蟛蜞菊的干燥物粉碎成粗粉,通过20目 筛,然后按照重量比2:2:1混合。(2)提取:将干燥的小冠熏、勒党花椒、孪花蟛蜞菊粗粉置 于破碎提取器的容器内,加入折合原料重量比8倍量的95%含水乙醇进行室温组织破碎提 取2次,提取时间为3分钟。(3)闪蒸浓缩:将提取液抽滤,弃去滤渣,得到的提取液在70°C 以下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩至原体积的1/6。(4)乙醚萃取部位的制备:将 浓缩液分散到水中,水的用量为浓缩液体积的三分之一。用乙醚萃取3次,每次用量为浓缩 液体积的1.5倍量,静止分层后,分去乙醚层,合并乙醚萃取液,在旋转蒸发仪中,常压浓缩 蒸馏,蒸出乙醚,得到乙醚浓缩液。继续将浓缩液进行真空干燥成干粉,用研钵研细后得到 乙醚提取物干粉,乙醚提取物收率达到10. 8% (5)乙酸乙酯萃取部位的制备:将乙醚萃取 后,分出的水层浓缩液,改用乙酸乙酯萃取。用乙酸乙酯萃取3次,每次用量为浓缩液体积 的1.5倍量,静止分层后,分去乙酸乙酯层,合并乙酸乙酯萃取液,在闪蒸浓缩装置中,60°C 以下真空减压浓缩,蒸出乙酸乙酯,得到乙酸乙酯浓缩液。继续将浓缩液进行真空干燥成干 粉,用研钵研细后得到乙酸乙酯提取物干粉,乙酸乙酯提取物收率达到13.8%。(6)将步骤 4)的乙醚提取物干粉和步骤5)中的乙酸乙酯提取物干粉按照重量比1:1混合,得到抗真菌 天然活性物质。
[0024] 实施例2 (1)粉碎混合:分别将小冠熏、勒党花椒、孪花蟛蜞菊的干燥物粉碎成粗粉,通过20目 筛,然后按照重量比2:2:1混合。(2)提取:将干燥的小冠熏、勒党花椒、孪花蟛蜞菊粗粉 置于破碎提取器的容器内,加入折合原料重量比6倍量的95%含水乙醇进行室温组织破 碎提取3次,提取时间为2分钟。(3)闪蒸浓缩:将提取液抽滤,弃去滤渣,得到的提取液 在70°C以下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩至原体积的1/6。(4)乙醚萃取部位的 制备:将浓缩液分散到水中,水的用量为浓缩液体积的三分之一。用乙醚萃取4次,每次用 量为浓缩液体积的1倍量,静止分层后,分去乙醚层,合并乙醚萃取液,在旋转蒸发仪中,常 压浓缩蒸馏,蒸出乙醚,得到乙醚浓缩液。继续将浓缩液进行真空干燥成干粉,用研钵研细 后得到乙醚提取物干粉,乙醚提取物收率达到11. 5% (5)乙酸乙酯萃取部位的制备:将乙 醚萃取后,分出的水层浓缩液,改用乙酸乙酯萃取。用乙酸乙酯萃取4次,每次用量为浓缩 液体积的1倍量,静止分层后,分去乙酸乙酯层,合并乙酸乙酯萃取液,在闪蒸浓缩装置中, 60°C以下真空减压浓缩,蒸出乙酸乙酯,得到乙酸乙酯浓缩液。继续将浓缩液进行真空干燥 成干粉,用研钵研细后得到乙酸乙酯提取物干粉,乙酸乙酯提取物收率达到14.2%。(6)将 步骤4)的乙醚提取物干粉和步骤5)中的乙酸乙酯提取物干粉按照重量比1:2混合,得到 抗真菌天然活性物质。
[0025] 实施例3 (1)粉碎混合:分别将小冠熏、勒党花椒、孪花蟛蜞菊的干燥物粉碎成粗粉,通过20目 筛,然后按照重量比2:2:1混合。(2)提取:将干燥的小冠熏、勒党花椒、孪花蟛蜞菊粗粉置 于破碎提取器的容器内,加入折合原料重量比10倍量的95%含水乙醇进行室温组织破碎 提取2次,提取时间为3分钟。(3)闪蒸浓缩:将提取液抽滤,弃去滤渣,得到的提取液在 70°C以下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩至原体积的1/7。(4)乙醚萃取部位的制备: 将浓缩液分散到水中,水的用量为浓缩液体积的三分之一。用乙醚萃取5次,每次用量为浓 缩液体积的1倍量,静止分层后,分去乙醚层,合并乙醚萃取液,在旋转蒸发仪中,常压浓缩 蒸馏,蒸出乙醚,得到乙醚浓缩液。继续将浓缩液进行真空干燥成干粉,用研钵研细后得到 乙醚提取物干粉,乙醚提取物收率达到13. 2% (5)乙酸乙酯萃取部位的制备:将乙醚萃取 后,分出的水层浓缩液,改用乙酸乙酯萃取。用乙酸乙酯萃取3次,每次用量为浓缩液体积 的1倍量,静止分层后,分去乙酸乙酯层,合并乙酸乙酯萃取液,在闪蒸浓缩装置中,60°C以 下真空减压浓缩,蒸出乙酸乙酯,得到乙酸乙酯浓缩液。继续将浓缩液进行真空干燥成干 粉,用研钵研细后得到乙酸乙酯提取物干粉,乙酸乙酯提取物收率达到14.2%。(6)将步骤 4)的乙醚提取物干粉和步骤5)中的乙酸乙酯提取物干粉按照重量比1:3混合,得到抗真菌 天然活性物质。
[0026] 实施例4 (1)粉
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