本发明属于药物化学合成
技术领域：
，涉及一类新颖的糖肽类抗生素衍生物及其药学可接受的盐、制备方法和应用。
背景技术：
：糖肽类抗生素是临床治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantstaphylococcusaureus,mrsa)感染的首选药物。然而，以糖肽类抗生素作为mrsa的经验治疗导致了细菌耐药性的发展，例如mrsa对万古霉素的敏感性有所下降，这将对临床抗感染治疗产生严重威胁，因此，寻找能够对耐药菌株有效的新型糖肽类抗生素迫在眉睫。中国专利200910053906.9报道了一个新型糖肽类化合物，结构如本发明的化合物(ⅱ)所示，具有抗菌活性，其新颖性在于其肽骨架六位氨基酸糖基的四位羟基为直立键，对其进行结构修饰的研究未见文献报道。技术实现要素：本发明的一个目的是为了提供通式(ⅰ)所示的各种系列的糖肽类衍生物及其药学可接受的盐：其中，r1为c3～c9饱和脂肪烃基、癸胺基甲基、或芳香基团，该芳香基团为未取代或取代的苯环、联苯环、或萘环，苯环、联苯环、或萘环的取代基为带有一个或多个的卤素、羟基、氨基、c1～c9的烷氧基、硝基、或异丙基；r2是h或ch2-r3，r3是c3～c9饱和脂肪烃基团。优选地，r1是苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-异丙基苯基、4-甲氧基苯基、4-硝基苯基、联苯基、4’-氯-联苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、2-溴苯基、3-溴苯基、2,4-二氯苯基、3,4-二氯苯基、3,4-二甲氧基苯基、2,4,5-三氟苯基、4-正壬氧基苯基、4-正辛氧基苯基、4-正己氧基苯基、1-萘基、2-萘基、正壬基、正辛基、正庚基、正己基、正戊基、正丁基、正丙基、癸胺基甲基。优选地，r2是氢、正癸基、正壬基、正辛基、正庚基、正己基、正戊基、正丁基。本发明中，所述的在药学上可接受的盐较佳的为碱金属、碱土金属的盐或与酸形成的盐。其中，所述的碱金属较佳的为钠或钾；所述的碱土金属较佳的为钙或镁；所述的酸较佳的为盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸或磷酸等无机酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸或甲磺酸等有机酸，天冬氨酸或谷氨酸等酸性氨基酸。本发明还涉及一类药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的上述糖肽类衍生物或其在药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。本发明中，所述的药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，如稀释剂，赋形剂(如水等)，粘合剂(如纤维素衍生物、明胶、聚乙烯吡咯烷酮等)，填充剂(如淀粉等)，崩裂剂(如碳酸钙、碳酸氢钠)。另外，还可以在组合物中加入其他辅助剂，如香味剂和甜味剂等。本发明的药物组合物，可以通过静脉注射、皮下注射或口服的形式施加于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制备成常规的固体制剂如片剂、粉剂或胶囊等；用于注射时，可将其制备成注射液。本发明的药物组合物的各种剂型可以采用医学领域常规的方法进行制备，其中活性成分的含量为0.1％～99.5％(重量比)。制剂中，本发明的化合物的重量含量为0.1％～99.5％，优选的含量为0.5～90％。上述药物组合物施加于需要治疗的患者的一般剂量可以参照万古霉素和去甲万古霉素的现有剂量，例如成人可以为0.1～2.0g/d，具体可根据患者的年龄和病情等变化。本发明的化合物可以按常规方法成盐，例如制成盐酸盐。本发明的进一步目的是提供上述通式化合物的制备方法。本发明中通式(i)所示的化合物可由下列合成路线制得：其中，r1和r2的定义同上具体方法包括如下：方法a：当r2＝h，r1如权利要求1所定义时：1、缩合：通式(ii)所示的化合物与醛r1-cho在合适的溶剂和合适的温度中反应，生成中间体西佛碱。其中醛与通式(ii)所示的化合物的摩尔比是2:1～0.9:1，优选摩尔比是1.1:1～1.5:1；所述的合适的溶剂可以选自二甲基亚砜(dmso)、n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、c1～c4的醇、乙腈、水中的一种或多种，优选溶剂是dmf、c1～c4的醇中的一种或多种，更优选的溶剂是dmf/甲醇(1:1)；所述的合适的温度可以是0℃～100℃，优选温度是60℃～70℃。2、还原：缩合反应的产物不经分离纯化，直接与还原剂反应得到通式(i)所示的化合物。其中还原剂可以是氰基硼氢化钠、硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、吡啶/硼烷等，优选的还原剂是氰基硼氢化钠。方法b：当r1和r2为ch2-r3且r3如权利要求1所定义时：1、缩合：通式(ii)所示的化合物与醛r3-cho在合适的溶剂和合适的温度中反应，生成中间体西佛碱。其中醛与通式(ii)所示的化合物的摩尔比是2:1至约3:1，优选2.5:1。所述的合适的溶剂可选自二甲基亚砜(dmso)、n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、c1～c4的醇、乙腈、水中的一种或多种，优选溶剂是dmf、c1～c4的醇中的一种或多种，更优选的溶剂是dmf/甲醇(1:1)；所述的合适的温度可以是0℃～100℃，优选温度是60℃～70℃。2、还原：缩合反应的产物不经分离纯化，直接与还原剂反应得到通式(i)所示的化合物。其中还原剂可以是氰基硼氢化钠、硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、吡啶/硼烷等，优选的还原剂是氰基硼氢化钠。本发明的又一个目的是提供上述化合物在制备抗细菌感染的药物中的用途。本发明的积极进步效果在于本发明的如通式(i)所示的化合物的衍生物及其药学可接受的盐具有良好的抗菌作用。具体实施方式为了进一步阐明本发明，下面给出一系列实施例。需要指出的是，这些实施例完全是例证性的。给出这些实施例的目的是为了充分明示本发明的意义和内容，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。在以下实施例中，下列缩写具有以下含义。未定义的缩写具有其普遍接受的含义，除非另外声明，所有室温均指温度20℃～30℃。dmfn,n-二甲基甲酰胺hplc高效液相色谱mic最低抑菌浓度通式(i)所示的某些实例化合物的相关数据见表1。实施例中，制备型hplc纯化条件：色谱柱sepaxbr-c1821.2×100mm(5μm)，梯度洗脱，流动相组成：时间(min)甲醇0.1％甲酸0595203070检测波长240nm。将所需流分减压除去有机溶剂，用饱和碳酸氢钠调ph至6～7，用正丁醇萃取，水洗，减压蒸去丁醇，干燥后得产物。本发明中所述的收率是指摩尔收率。表1注解：a:cl元素分析：理论值9.62％，实测值9.27％实施例1：化合物1的合成室温下，将通式(ii)所示的化合物(500mg，0.31mmol)溶解在10mldmf/甲醇(1:1)中，加入4-溴苯甲醛(63mg，0.34mmol)，反应液在60℃下加热搅拌2小时后冷至室温，加入氰基硼氢化钠(40mg，0.62mmol)，室温搅拌2小时，反应液减压蒸去甲醇，残余物倾入70ml丙酮中析出沉淀，抽滤，丙酮洗涤，用制备型hplc纯化，得终产品(化合物1)100mg，收率18.4％。实施例2：化合物1的合成通式(ii)所示的化合物(300mg，0.19mmol)溶解在6mldmf/甲醇(1:1)中，加入4-溴苯甲醛(70mg,0.38mmol)，反应液在0℃搅拌3小时，加入氰基硼氢化钠(24mg，0.38mmol)，室温搅拌2小时，反应液减压蒸去甲醇，残余物倾入50ml丙酮中析出沉淀，抽滤，丙酮洗涤，用制备型hplc纯化，得终产品(化合物1)50mg，收率14.7％。1h-nmr(400mhz,dmso-d6+d2o)δ(ppm):7.81(2h),7.59-7.23(8h),6.79(3h),6.50(1h),6.35(2h),5.86-5.13(7h),4.95-4.20(10h),3.55-2.50(6h),2.45-2.00(4h),1.90-0.95(15h),0.89-0.84(6h)。实施例3：化合物10的合成通式(ii)所示的化合物(500mg，0.31mmol)溶于10mldmf/甲醇(1:1)中，加入4’-氯-联苯甲醛(100mg，0.46mmol)，反应液在65℃下加热搅拌2小时后冷至室温，加入氰基硼氢化钠(40mg，0.62mmol)，室温搅拌2小时，反应液减压蒸去甲醇，残余物倾入70ml丙酮中析出沉淀，抽滤，丙酮洗涤，用制备型hplc纯化，得终产品(化合物10)130mg，收率23.5％。实施例4：化合物10的合成通式(ii)所示的化合物(300mg，0.19mmol)溶于6mldmf/甲醇(1:1)中，加入4’-氯-联苯甲醛(37mg，0.17mmol)，反应液在65℃下加热搅拌2小时后冷至室温，加入氰基硼氢化钠(12mg，0.19mmol)，室温搅拌2小时，反应液减压蒸去甲醇，残余物倾入70ml丙酮中析出沉淀，抽滤，丙酮洗涤，用制备型hplc纯化，得终产品(化合物10)60mg，收率17.4％。1h-nmr(400mhz,dmso-d6+d2o)δ(ppm):7.90-7.82(2h),7.66-7.00(12h),6.79-6.34(6h),5.77-5.05(8h),4.95-4.25(9h),3.36-2.55(5h),2.35-2.28(7h),1.89-1.08(15h),0.89-0.84(6h)。实施例5：化合物16的合成将通式(ii)所示的化合物(300mg，0.19mmol)溶于3mldmso中，加入1-萘甲醛(39mg，0.25mmol)，反应液在70℃下加热搅拌1.5小时后冷至室温，加入氰基硼氢化钠(24mg，0.38mmol)，室温搅拌2小时，反应液倾入丙酮中析出沉淀，抽滤，丙酮洗涤，用制备型hplc纯化，得终产品(化合物16)90mg，收率27.4％。实施例6：化合物16的合成通式(ii)所示的化合物(300mg，0.19mmol)溶于5mldmso中，加入1-萘甲醛(39mg，0.25mmol)，反应液在100℃加热搅拌1小时后冷至室温，加入氰基硼氢化钠(36mg，0.57mmol)，室温搅拌3小时，反应液倾入丙酮中析出沉淀，抽滤，丙酮洗涤，用制备型hplc纯化，得终产品(化合物16)42mg，收率12.6％。1h-nmr(400mhz,dmso-d6+d2o)δ(ppm):8.20-8.00(2h),7.86-7.74(3h),7.60-7.23(8h),6.80-6.60(3h),6.59-6.55(1h),6.35(2h)，5.95-5.17(7h),5.00-4.60(3h),4.59-3.85(5h),3.20-2.95(3h),2.44-2.10(6h),2.05-1.11(16h),0.89-0.84(6h)。实施例7：化合物18的合成将通式(ii)所示的化合物(400mg，0.25mmol)用50ml甲醇溶解，加入3,4-二氯苯甲醛(53mg，0.30mmol)，反应液在65℃下加热搅拌2小时后冷至室温，加入氰基硼氢化钠(19mg，0.30mmol)，室温搅拌2小时，反应液减压浓缩，残余物倾入丙酮中析出沉淀，抽滤，丙酮洗涤，用制备型hplc纯化，得终产品(化合物18)130mg，收率29.6％。实施例8：化合物18的合成通式(ii)所示的化合物(500mg，0.31mmol)用50ml甲醇溶解，加入3,4-二氯苯甲醛(75mg，0.43mmol)，反应液在65℃下加热搅拌2小时后冷至室温，加入三乙酰氧基硼氢化钠(131mg，0.62mmol)，室温搅拌4小时，反应液减压浓缩，残余物倾入丙酮中析出沉淀，抽滤，丙酮洗涤，用制备型hplc纯化，得终产品(化合物18)100mg，收率18.4％。1h-nmr(400mhz,dmso-d6+d2o)δ(ppm):7.81-7.70(1h),7.60-7.22(7h),6.79-6.34(7h),5.65-5.07(7h),4.94-3.90(8h),3.50-2.90(9h),2.40-2.10(6h),2.00-1.05(15h),0.89-0.84(6h)。实施例9：化合物19的合成室温下，将通式(ii)所示的化合物(300mg，0.19mmol)用6mldmf/甲醇(1:1)溶解，加入正癸醛(33mg，0.21mmol)，反应液在60℃下加热搅拌1小时后冷至室温，加入氰基硼氢化钠(24mg，0.38mmol)，室温搅拌1小时，反应液减压蒸去甲醇，残余物倾入50ml丙酮中析出沉淀，抽滤，丙酮洗涤，用制备型hplc纯化，得终产品(化合物19)110mg，收率33.7％。1h-nmr(400mhz,dmso-d6+d2o)δ(ppm):7.82-7.10(7h),6.95-6.36(5h),5.70-5.16(9h),4.95-3.90(11h),3.20-2.85(2h),2.44-1.97(7h),1.95-1.06(32h),0.90-0.82(9h)。化合物2～9、11～15、17、20～28的合成与方法实施例1相同，只是分别用4-氯苯甲醛、联苯甲醛、苯甲醛、2,4-二氯苯甲醛、4-甲氧基苯甲醛、3,4-二甲氧基苯甲醛、2-溴苯甲醛、3-溴苯甲醛、4-异丙基苯甲醛、2,4,5-三氟苯甲醛、2-氯苯甲醛、3-氯苯甲醛、4-硝基苯甲醛、2-萘甲醛、正癸醛、正壬醛、正辛醛、正庚醛、正己醛、正戊醛、正丁醛、4-正壬氧基苯甲醛、4-正辛氧基苯甲醛、4-正己氧基苯甲醛代替4-溴苯甲醛。实施例10：化合物29的合成将通式(ii)所示的化合物(500mg，0.31mmol)溶解在10mldmf/甲醇(1:1)中，加入n-fmoc-2-(正癸胺基)-乙醛(168mg，0.40mmol)，反应液在65℃下加热搅拌1.5小时后冷至室温，加入氰基硼氢化钠(40mg，0.62mmol)，室温搅拌2小时，反应液减压蒸去甲醇，残余物倾入丙酮中析出沉淀，抽滤，丙酮洗涤后真空干燥，粗品用10mldmf分散均匀，室温搅拌下加入1ml二乙胺，反应液在室温下搅拌1小时后倾入100ml丙酮中析出沉淀，抽滤，丙酮洗涤，用反相hplc纯化，得终产品(化合物29)80mg，收率14.5％。1h-nmr(400mhz,cd3od)δ(ppm):7.75-7.65(3h),7.36-7.16(3h),7.02-6.80(3h),6.64-6.41(3h),5.68-5.29(6h),5.10-4.83(3h),4.60-4.55(1h),4.21-4.14(3h),3.98-3.31(6h),3.29-3.18(2h),3.00-2.20(14h),2.10-1.10(33h),0.97-0.87(9h)。实施例11：化合物30的合成通式(ii)所示的化合物(300mg，0.18mmol)溶解在6mldmf/甲醇(1:1)中，加入正癸醛(70mg，0.45mmol)，反应液在65℃下加热搅拌2小时后冷至室温，加入氰基硼氢化钠(28mg，0.45mmol)，室温搅拌1小时，反应液冷却后减压蒸去甲醇，残余物倾入50ml丙酮中析出沉淀。沉淀物抽滤，用少量丙酮洗涤，真空干燥。用反相hplc纯化，得终产品(化合物30)180mg，收率53.3％。实施例12：化合物30的合成通式(ii)所示的化合物(300mg，0.18mmol)溶解在4mldmf/甲醇(1:1)中，加入正癸醛(56mg，0.36mmol)，反应液在65℃下加热搅拌1.5小时后冷至室温，加入氰基硼氢化钠(34mg，0.54mmol)，室温搅拌2小时，反应液冷却后减压蒸去甲醇，残余物倾入50ml丙酮中析出沉淀。沉淀物抽滤，用少量丙酮洗涤，真空干燥。用反相hplc纯化，得终产品(化合物30)150mg，收率44.4％。实施例13：化合物30的合成通式(ii)所示的化合物(500mg，0.31mmol)溶解在10mldmf/甲醇(1:1)中，加入正癸醛(145mg，0.93mmol)，反应液在65℃下加热搅拌1小时后冷至室温，加入氰基硼氢化钠(59mg，0.93mmol)，室温搅拌1小时，反应液冷却后减压蒸去甲醇，残余物倾入60ml丙酮中析出沉淀。沉淀物抽滤，用少量丙酮洗涤，真空干燥。用反相hplc纯化，得终产品(化合物30)160mg，收率27.4％。1h-nmr(400mhz,dmso-d6+d2o)δ(ppm):7.78-6.95(7h),6.93-6.32(5h),5.80-5.18(8h),4.95-4.10(9h),3.64-2.80(12h),2.34-2.03(6h),1.96-1.06(44h),0.95-0.80(12h)。化合物31～36的合成与方法实施例7相同，只是分别用正壬醛、正辛醛、正庚醛、正己醛、正戊醛、正丁醛代替正癸醛。实施例14：化合物37的合成通式(ii)所示的化合物(400mg，0.25mmol)溶解在8ml的dmf/甲醇(1:1)中，加入正癸醛(50mg，0.32mmol)，反应液在65℃下加热搅拌1小时后冷至室温，加入氰基硼氢化钠(32mg，0.50mmol)，室温搅拌1小时，反应液减压蒸去甲醇，残余物倾入50ml丙酮中析出沉淀。抽滤，丙酮洗涤，用制备型hplc纯化，收集所需流分浓缩后，用饱和碳酸氢钠溶液将ph值调至6～7，正丁醇萃取，有机层水洗，加入饱和hcl甲醇溶液1ml，室温搅拌，减压除去溶剂后，加入丙酮搅拌、过滤、洗涤、烘干，得终产品(化合物37)42mg,收率9.1％。(cl元素分析：理论值9.62％，实测值9.27％)。实施例15：效果实施例本发明目标化合物的体外抗菌活性试验结果见表2。方法如下：1、试验菌株金黄色葡萄球菌26003(staphylococcusaureus)2、试验方法试样：固态待试物先用少量dmso溶解，再用无菌水稀释至0.5mg/ml。测定方法：琼脂平板纸片法。琼脂平板载菌量为105cfu/ml。纸片直径6.0mm，每个纸片上样20μl。37℃培养箱内培养18小时观察，测定抑菌圈直径。3、活性描述(参见表2)+++代表抑菌圈直径＞13mm++代表抑菌圈直径9-13mm+代表抑菌圈直径7-9mm(含9mm)表2化合物1-37的抗菌活性结果由表2可见，本发明的化合物均显示抗菌活性。琼脂纸片法对样品的扩散性能要求比较高的。有些化合物由于溶解度等问题，导致扩散不好，从而影响化合物对相关菌株的抑菌圈，因此琼脂纸片法不能完全衡量化合物的抗菌活性。为准确反映化合物的抗菌活性，需要利用琼脂平板稀释法测定化合物对特定菌株的最低抑菌浓度mic。实施例16：效果实施例本发明部分目标化合物的体外mic结果见表3。方法如下：1、试验菌株共4种：金黄色葡萄球菌26003(staphylococcusaureus)，肺炎双球菌31002(streptococcuspneuminiae)，白色葡萄球菌260101(staphylococcusalbus)，肠球菌32220(enterococcusfaecium)、丙型链球菌32206、表皮葡萄球菌26069、屎肠球菌(e.faecium)atcc35667、屎肠球菌(e.faecium)meea0039、粪肠球菌(e.faecalis)atcc51299、肺炎链球菌(s.pneumoniae)atcc49619和肺炎链球菌(s.pneumoniae)mspn0003。2、试验方法试样：先用dmso溶解，再用无菌水稀释成合适浓度，然后依次对倍稀释。测定：琼脂平板稀释法。用多点接种仪定量，接种每点105cfu。37℃培养箱内培养18-24小时观察结果，读取最低抑菌浓度值(mic)。3、阳性对照药为盐酸万古霉素部分化合物的mic值见表3。表3部分化合物的mic(μg/ml)由表3可见，本发明的部分化合物与盐酸万古霉素相比，具有更好的抗革兰阳性菌活性。表8部分化合物对e.faeciumatcc35667的mic(μg/ml)表8中可以看出，针对屎肠球菌(e.faecium)atcc35667，本发明化合物的抗菌活性要优于阳性对照盐酸万古霉素，某些化合物的mic要远低于万古霉素的mic。例如化合物1、9和11针对atcc35667的抗菌活性远优于盐酸万古霉素表9部分化合物对e.faeciummeea0039的mic(μg/ml)表9中可以看出，针对屎肠球菌(e.faecium)meea0039，本发明化合物的抗菌活性要优于阳性对照盐酸万古霉素，某些化合物的mic要远低于万古霉素的mic。例如化合物2和11针对meea0039的抗菌活性远优于盐酸万古霉素表10部分化合物对e.faecalisatcc51299的mic(μg/ml)表10中可以看出，针对粪肠球菌e.faecalisatcc51299，本发明部分化合物的抗菌活性要优于阳性对照盐酸万古霉素，某些化合物的mic要远低于万古霉素的mic。表11部分化合物对s.pneumoniaeatcc49619的mic(μg/ml)表11中可以看出，针对肺炎链球菌(s.pneumoniae)atcc49619，本发明部分化合物的抗菌活性要优于阳性对照盐酸万古霉素，某些化合物的mic要远低于万古霉素的mic。表12部分化合物对s.pneumoniaemspn0003的mic(μg/ml)表12中可以看出，针对肺炎链球菌(s.pneumoniae)mspn0003，本发明部分化合物的抗菌活性要优于阳性对照盐酸万古霉素，某些化合物的mic要远低于万古霉素的mic。综合上述列表，我们可以得出结论，本发明的化合物在针对不同革兰氏阳性菌时，表现出优于盐酸万古霉素的抗菌活性。需要说明的是，上述
发明内容及具体实施方式意在证明本发明所提供技术方案的实际应用，不应解释为对本发明保护范围的限定。本领域技术人员在本发明的精神和原理内，当可作各种修改、等同替换、或改进。本发明的保护范围以所附权利要求书为准。当前第1页12