一种治疗h1n1型流感病毒感染的药物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及含有机有效成分的医药制品，具体涉及含齐墩果烷型五环三萜类化合 物和酚酸类化合物的药物。
【背景技术】
[0002] 流行性感冒简称流感，是由流感病毒引起的呼吸道疾病，具有流行面广、传染性 强、发病率高等特点，在儿童、老人和高危人群中的死亡率较高。流感病毒是人类健康的一 大威胁。应对流感病毒的主要方式是疫苗和药物治疗。对可能大规模爆发的流感疫情来 讲，药物治疗是最好的控制流感病毒传播的手段。目前，抗流感病毒药物包括已在俄罗斯 上市的盐酸阿比朵尔和美国FDA批准的4个抗流感病毒药物，后者根据作用机制的不同分 为M2离子通道蛋白抑制剂和神经氨酸酶（NA)抑制剂。近年来，对抗流感病毒药物的研宄 取得了较大进展。M2离子通道蛋白抑制剂是最早上市的流感临床治疗药物，但存在神经毒 性，长期服用易产生耐药毒株和对B型流感无效等缺陷。目前抗病毒西药虽然品种较多，但 多数选择性低和不良反应较大，中药在抗病毒方面有其独特优点，不良反应相对较低，不易 形成耐药性。根据抗流感病毒途径可将中药分为两大类：一类具有直接抑制病毒作用，其中 大多数为清热解毒类中药，如金银花，鱼腥草，板蓝根，大青叶，黄芩，黄连等；而另一类通过 增强免疫细胞能力发挥间接抗流感病毒作用，如黄芪、丹参等都能诱生干扰素和免疫球蛋 白。研宄比较清楚的抗流感成分主要有两类：一是多酚类物质，不仅可抑制流感病毒蛋白质 和RNA合成，同时也可抑制流感病毒的吸附作用；另一类是黄酮类物质，能抑制流感病毒唾 液酸酶的活性和抑制膜融合作用。中药具有很好的抗病毒作用，既可直接杀死病毒而不伤 及机体组织，又可调动免疫防御系统的积极性，激发机体的主动免疫机制，增强免疫力，通 过主动防御间接发挥抗病毒作用。因而，中药在西药产生耐药性、病毒发生变异的情况下， 仍具有潜在治疗作用，具有更广泛的适应性和优越性；并且中草药在我国资源丰富，价格低 廉，展现了广阔的研宄与开发前景。因此，研制疗效确切、安全高效的治疗流感病毒感染的 药物十分必要。
[0003] 岗梅为冬青科植物梅叶冬青IlexAsprella(Hook,etArn. )Champ,exBenth?的 干燥根，主产于广东、广西等地，其性味苦、微甘，凉，有清热解毒，生津止渴，利咽消肿，散 瘀止痛之功效，用于治疗感冒发热，肺热咳嗽，热病津伤口渴，咽喉肿痛，跌打瘀痛等，也是 广东凉茶的常用原料之一。现代药理学研宄表明其有抗炎、抗病毒、强心等作用。王宁生 [ZHANGAL,QIY,LIBG,etal.PhenolicandIriterpeneglycosidesfromthestems ofIlexlitseaefolia[J].JNatProd, 2005, 68:1531-1535.]等报道，岗梅中有酚酸、皂 苷、甾体和生物碱等成分。公开还为CN101879200A的发明专利申请公开了一种岗梅抗流 感有效部位的制备方法，该方法所得到的一种岗梅抗流感有效部位为岗梅总皂苷，其中特 征性皂苷为赪酮留醇3-O-0-D-葡萄甙。但是，上述专利申请所述岗梅总皂苷治疗HlNl型 流感病毒感染的效果尚不够理想。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的技术问题是提供一种治疗HlNl型流感病毒感染的药物，该药物 可显著提高治疗HlNl型流感病毒感染的效果。
[0005] 本发明解决上述问题的技术方案为：
[0006] 一种治疗HlNl型流感病毒感染的药物，该药物由有效成分和医学可接受的辅料 组成，其特征在于，所述的有效成分由3, 4, 5-三甲氧基苯酚-0 -D-5-0-咖啡酰氧基-芹 糖-(1 - 6)-0 -D-葡萄糖苷和3-0-0 -L-硫酸化阿拉伯糖-19-0-硫酸化羟基-齐墩果 酸-28-0-0 -D-葡萄糖酯组成，二者的质量配比为3, 4, 5-三甲氧基苯酚-0 -D-5-0-咖啡 酰氧基-芹糖-(1 - 6)-0 -D-葡萄糖苷：3-0-0 -L-硫酸化阿拉伯糖-19-0-硫酸化羟 基-齐墩果酸-28-0- 0 -D-葡萄糖酯=1:0. 5~1。
[0007] 本发明所述的3, 4, 5-三甲氧基苯酚-e-D-5-0-咖啡酰氧基-芹 糖-(1 - 6)-0 -D-葡萄糖苷和3-0-0 -L-硫酸化阿拉伯糖-19-0-硫酸化羟基-齐墩果 酸-28-0-0-D-葡萄糖酯可以采用常规的方法从中药岗梅或其它植物中提取得到，也可以 由合成或其他方法制得。
[0008] 上述3-0-0 -L-硫酸化阿拉伯糖-19-0-硫酸化羟基-齐墩果酸-28-0-0 -D-葡萄 糖酯的化学结构如下式（I)所示，上述3, 4, 5-三甲氧基苯酚-0-D-5-O-咖啡酰氧基-芹 糖-(1- 6)-0-D-葡萄糖苷的化学结构如下式（II)所示，
[0011] 本发明所述药物的有效成分由从岗梅中分离出来的3,4, 5-三甲氧基苯 酚-0 -D-5-0-咖啡酰氧基-芹糖-(1 - 6)-0 -D-葡萄糖苷和3-0-0 -L-硫酸化阿拉伯 糖-19-0-硫酸化羟基-齐墩果酸-28-0- -D-葡萄糖酯两个化合物单体组成，其抗HlNl 型流感病毒的效果显著。
【附图说明】
[0012] 图1本发明所述化合物I的IR图
[0013] 图2本发明所述化合物I的1H-NMR图
[0014] 图3本发明所述化合物I的13C-NMR图
[0015] 图4本发明所述化合物I的DEPT图
[0016] 图5本发明所述化合物I的HSQC图
[0017] 图6本发明所述化合物I的HMBC图
[0018] 图7本发明所述化合物II的1H-NMR图（500MHz)
[0019] 图8本发明所述化合物的II13C-NMR图（150MHz)
【具体实施方式】
[0020] 为了便于描述以下将化合物3, 4, 5-三甲氧基苯酚-0 -D-5-0-咖啡酰氧基-芹 糖-(1 - 6) - 0 -D-葡萄糖苷简称为岗梅639酚酸，化合物3-0- 0 -L-硫酸化阿拉伯 糖-19-0-硫酸化羟基-齐墩果酸-28-0-0 -D-葡萄糖酯简称为岗梅925皂苷。
[0021] 例1 (岗梅925皂苷的制备）
[0022] -、化合物的制备
[0023] (1)岗梅根药材20kg，粉碎成粗粉，加入8倍量体积浓度为70 %的乙醇，分4次冷 浸法提取，每次12h，合并4次提取液，减压回收乙醇，得到干燥的浸膏638g，浸膏加4L水使 悬浮，用12L的乙酸乙酯分3次萃取，每次静置lh，得乙酸乙酯萃取部位（185g)。
[0024] (2)乙酸乙酯萃取部位溶解，过AB-8大孔树脂，用蒸馏水洗脱至没有颜色，再依次 用4倍柱体积（? 15X61cm)体积浓度为20 %、50 %、70 %、95 %的乙醇梯度洗脱，收集50 % 乙醇洗脱部位减压回收溶剂，得岗梅总皂苷提取物86g，总皂苷含量89. 73%。
[0025](3)取400g0DS-C18反相硅胶，甲醇适量充分溶胀，装柱，用适量甲醇溶解，过硅胶 柱，依次用3倍柱体积的体积浓度分别为20%，30%，40%，50%，60%，70 %的甲醇梯度 洗脱，洗脱液浓缩，体积浓度为10%的硫酸乙醇TLC显色，取50%洗脱部位，反复过硅胶柱， 纯化得化合物岗梅925-皂苷（47. 2mg)，结晶反复溶解，重结晶得纯品化合物。
[0026] 二、化合物的鉴定
[0027] 本例得到的化合物，为无色针状结晶（甲醇）。UVXmax(MeoH)nm:202, 10%硫酸 乙醇溶液显紫红色（TLC)，Liebermann-Burehard及Molish反应均为阳性，推测该化合物为 三萜皂苷类化合物。IR(KBr) :Vmax3438, 2942, 2886, 1728, 1637, 1460, 1388, 1229, 1072, 1 017,913,825,589〇11'HR-ESI-MS:准分子离子峰为m/z925[M-H]-，子离子m/z845 为[M-H- 80]-结合和红外1229, 1072, 1017cm-l强吸收峰，推断含SO3，子离子m/z763为[M-H- 162]-推断出结构中含糖，元素分析测定结果显示，该化合物含硫为6. 610%，推测该 化合物的结构式为C41H66019S2。IR图见图1。
[0028] 本例得到的化合物的IH-NMR(图2)谱中显示出苷元上的七个甲基质子信号为SH I. 21，0. 96, 0? 85, 1. 13, 1. 62, 1. 15, 0? 98(各 3H，s, 7XCH3)。13CNMR(图 3)中给出 41 个C 信号，8个季碳信号，SC177. 2为酯羰基C-28,SC123.6, 144. 2为烯碳信号，