联免疫分析(ELISA)检测血清中PTX3、IL-1 β的含量，采用生化试剂盒检测血清中LDH的含量；心脏切片，采用TTC染色法计算心脏梗死面积百分比；取心肌组织固定于多聚甲醛，用苏木素-伊红(hematoxylin eosin，HE)染色法观察心肌组织的病理学变化，透射电镜观察心肌组织超微结构。
[0036]体内实验结果
[0037]1、PMai染毒对心肌I/R大鼠造模死亡率、梗死率的影响及SM的干预作用
[0038](I)对造模死亡率的影响:ΡΜαι染毒大鼠心肌I/R造模死亡率远高于I/R对照组，生脉饮、合心爽可增加大鼠存活率。其中生脉饮组对大鼠的存活率具有较明显的改善作用(图1)。
[0039](2)梗死率:与I/R组相比，PM+I/R组梗死率有增高趋势，但尚无统计学差异。生脉饮、合心爽的心脏梗死率均小于PM+I/R组，且具有显著性差异(P〈0.001, P〈0.001)(图2)
[0040]2、PMai对心肌I/R大鼠血清中LDH含量的影响及生脉饮的干预作用(图3)
[0041]LDH:与I/R组相比，PM+I/R组LDH含量高于I/R组，但无统计学差异。PM+1/R组LDH含量显著高于正常组(P〈0.001)。与PM+I/R组相比，生脉饮及合心爽LDH含量均显著降低(Ρ〈0.01，Ρ〈0.05)。
[0042]3、PMai对心肌I/R大鼠血清中炎症因子的影响及生脉饮的干预作用(图4)
[0043](I) ΡΤΧ3:PM+I/R组PTX3含量显著高于正常组，且具有统计学差异(P〈0.05)。与PM+I/R组相比，生脉饮、合心爽组对PTX3含量均显著降低且均具有显著性差异(P〈0.01，Ρ〈0.05)。
[0044](2) IL-1 β:与 I/R 组相比，PM+I/R 组 IL-1 β 含量显著高于 I/R 组(Ρ〈0.05)。与PM+I/R组相比，生脉饮及合心爽组IL-Ιβ含量均明显降低，有显著性差异(Ρ〈0.01，Ρ〈0.05)。
[0045]4、PMai对心肌I/R大鼠病理学变化的影响及SM的干预作用
[0046](I)PMai对大鼠心肌组织的病理学变化影响及生脉饮的干预作用(图5)
[0047]HE染色镜下观察大鼠心肌组织病理变化。结果可见正常组心肌细胞结构连续完整，排列规则有序。与正常组相比，I/R组可见心肌细胞、水肿、伴炎细胞浸润；PM+I/R组有明显心肌细胞水肿、排列紊乱、变性、伴炎细胞浸润。与PM+I/R组相比，生脉饮、合心爽组损伤明显减轻，炎性细胞浸润程度减轻。
[0048](2)ΡΜαι对大鼠心肌组织的超微结构的影响及生脉饮的干预作用(图6)
[0049]正常细胞核椭圆型，核内物质分布均一，细胞质内充满线粒体，嵴排列致密规则。细胞的肌原纤维排列规则，肌小节清晰，Z线特别明显，闰盘结构清晰。I/R组心肌细胞可见线粒体变形，嵴排列疏松，或嵴结构模糊不清，可见线粒体呈空泡状，肌原纤维、肌小节、Z线、闰盘排列未见异常。PM+IR损伤组心肌细胞超微结构产生一系列形态学改变，线粒体高度肿胀、变形、嵴消失，空泡状线粒体多见，心肌细胞肌原纤维排列紊乱，肌丝松散且发生错位，可见肌丝断裂溶解现象。生脉饮、合心爽心肌细胞超微结构损伤明显减轻，肌丝排列整齐，线粒体结构完整，嵴结构清楚、完整，偶见空泡，其中生脉饮组形态改变最轻，肌丝排列较整齐，明暗带分明，线粒体嵴可分辨。
[0050]通过上述研宄，本发明发现生脉饮在药物领域中的新用途，特别是对于雾霾状态下心肌缺血性疾病有很好的保护和治疗作用。
【附图说明】
[0051]图1:ΡΜ0.1染毒对心肌缺血-再灌注大鼠死亡率的影响及生脉饮的干预作用
[0052]图2a:ΡΜ0.1染毒对心肌缺血-再灌注大鼠心脏梗死率的影响及生脉饮的干预作用
[0053]图2b:ΡΜ0.1染毒对心肌缺血-再灌注大鼠心脏梗死面积百分比的影响及生脉饮的干预作用
[0054]图3:ΡΜ0.1染毒对心肌缺血再灌注大鼠血清中LDH水平的影响及生脉饮的干预作用
[0055]图4a:ΡΜ0.1染毒对心肌缺血再灌注大鼠血清中IL-1 β的影响及生脉饮的干预作用
[0056]图4b:ΡΜ0.1染毒对心肌缺血再灌注大鼠血清中PTX3的影响及生脉饮的干预作用
[0057]图5:ΡΜ0.1染毒对I/R大鼠心肌组织的病理学变化影响及生脉饮的干预作用(HE, 40X)
[0058]A.正常组B.1/R对照组C.PM+I/R组D.生脉饮组E.合心爽组
[0059]图6:ΡΜ0.1染毒对I/R大鼠心肌组织的超微结构的影响及生脉饮的干预作用(Bar = I μ m)
[0060]A-正常组B.1/R对照组C.PM+I/R组D.生脉饮组E合心爽组
【具体实施方式】
[0061]通过以下具体实施例对本发明作进一步的说明，但不作为限制作用。
[0062]实施例1、生脉饮的制备
[0063]生脉饮的配方组成:红参100g、麦冬200g、五味子100g。
[0064]生脉饮的制备方法:以上三味，粉碎成粗粉，用65%乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，收集渗漉液约4500ml，减压浓缩至约250ml，放冷，加水400ml稀释，滤过，另加60%糖浆300ml及适量防腐剂，并调节pH值至规定范围，加水至1000ml，搅匀，静置，滤过，灌封，灭菌，即得。
【主权项】
1.生脉饮在制备治疗和/或预防心肌缺血性疾病的药物中的应用。2.生脉饮在制备预防、治疗雾霾促发心肌缺血性疾病的药物中的应用。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，生脉饮在对雾霾状态下心肌缺血性疾病的保护作用方面的应用。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，生脉饮能够降低PMο.^足发缺血-再灌注(I/R)大鼠模型的死亡率。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，生脉饮能够降低大鼠I/R模型心脏梗死面积百分比。6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，生脉饮能够降低大鼠I/R模型血清中LDH含量。7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，生脉饮能够降低大鼠I/R模型血清中炎症因子PTX3、IL-10的含量。8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，生脉饮能够减轻大鼠I/R模型心肌细胞的损伤，减轻炎性细胞浸润程度。9.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，生脉饮能够减轻大鼠I/R模型心肌细胞超微结构损伤，肌丝排列较整齐，明暗带分明，线粒体嵴可分辨。10.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，生脉饮由红参、麦冬、五味子组成。
【专利摘要】本发明属于医药技术领域，涉及一种药物组合物的新用途，特别涉及生脉饮在预防、治疗雾霾促发心肌缺血性疾病中的应用。
【IPC分类】A61K36/8968, A61P9/10
【公开号】CN104940595
【申请号】CN201510422625
【发明人】朱晓新, 李玉洁, 陈颖, 杨庆, 翁小刚, 王娅杰, 蔡维艳, 李琦
【申请人】中国中医科学院中药研究所
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年7月17日