石 中。蒙脱石载硝苯地平复合物在体外溶出过程中表现出较好的缓释效果，有机蒙脱石成为 硝苯地平的缓释载体。
[0084] 4、蒙脱石用聚乙二醇2000有机化处理分析
[0085] 蒙脱石是膨润土的主要矿物成分，其性质与层间可交换性阳离子种类有很大关 系。根据层间可交换性阳离子的种类，其中蒙脱石具有吸水率和膨胀倍数高、阳离子交换容 量大、胶质价高等特性，本发明主要任务是开发蒙脱石作为盐酸二甲双胍药物的缓释载体， 要求蒙脱石与药物分子间具有良好的接触界面。蒙脱石较强的亲水性表面和较高的层间库 仑力都不利于其对药物分子的载入，为了改善蒙脱石与原料药的界面结合情况，需要对蒙 脱石进行有机化修饰改性。
[0086] 常规实验中对蒙脱石的表面改性处理是利用蒙脱石的离子交换反应进行的，一般 采用阳离子型烷基季胺盐插层制备的纳米蒙脱石性能较好，但阳离子表面处理剂对人体有 溶血现象等不利影响，不能作为药用辅料开发。在本实验中选用的聚乙二醇4000是一种中 性高分子化合物，具有无毒、水溶、稳定等性能，作为药物辅料已经被中国药典所收载，在药 剂学领域中有着广泛的应用。当聚乙二醇分子链插层到蒙脱石层间时，可以通过转换部分 层间水而进入蒙脱石层间通道，这样在蒙脱石层内将形成有机层，蒙脱石层间距将会增大， 而且比表面积也将进一步提尚，见表5。
[0087] 表5蒙脱石和蒙脱石复合物的理化性能
[0088]
[0089] 蒙脱石、与经过聚乙二醇2000对蒙脱石修饰后蒙脱石复合物的XRD衍射图见图4、 图5。由图可以看出，经过聚乙二醇2000处理后的蒙脱石的衍射角由蒙脱石的5. 9°移向 4. 0°。由布格拉方程可知，蒙脱石和蒙脱石复合物的层间距分别为1. 556nm和1. 875nm，证 实聚乙二醇2000分子链已插入蒙脱石的片层间进而改善其片层的表面环境，为载入硝苯 地平提供有利条件。
[0090] 对蒙脱石复合物而言，由聚乙二醇2000分子链插入蒙脱石的纳米层间增大层间 距，与药物接触的表面积相应增多；同时其界面性质也由于聚乙二醇2000分子链的作用得 到改善，为有机药物分子的载入提供了友好界面。实验结果表明蒙脱石复合物对载入硝苯 地平的体外溶出具有一定的缓释作用，这主要是由于进入蒙脱石层间的药物分子受到了蒙 脱石片层的限制以及聚乙二醇2000分子链的影响。
[0091] 结论分析：蒙脱石经聚乙二醇2000表面有机化处理后，层间距由1. 556nm增大到 1. 875nm，比表面积变大的同时界面的性质也得到改善，使原料药硝苯地平顺利通过溶液插 层法进入表面修饰后的蒙脱石复合物中。蒙脱石复合物载硝苯地平在体外溶出过程中表现 出较好的缓释效果，蒙脱石复合物成为硝苯地平的缓释载体。
[0092] 实验例4 :与上市的产品释放度比较实验
[0093] 硝苯地平为钙通道阻滞剂，临床上广泛用于治疗高血压、心绞痛。现对本发明实施 例1与国内上市的硝苯地平缓释片的溶出度进行考察，为评定和控制药品质量提供依据。
[0094] 1、实验部分
[0095] (1)试剂与仪器
[0096] 硝苯地平缓释片（实施例1制备）；硝苯地平缓释片上市产品。硝苯地平标准品， 纯度100% ;无水乙醇、盐酸均为分析纯；智能溶出实验仪、紫外可见分光光度计；
[0097] 2、方法和结果
[0098] (1)标准曲线的制备精取硝苯地平标准品0. lg，无水乙醇溶解，并稀释至50ml。精 密吸取1至l〇〇ml量瓶中，加入0. lmol/L盐酸稀释至刻度，得到20 y g/ml标准品贮备液。 取标准品贮备液逐级稀释成15、10、5、2. 5、1. 0、0. 5 y g/ml标准溶液，236nm处测定吸光度 以吸光度Y对浓度进行回归，得线性方程：
[0099] Y = 0. 05518X+0. 0077 r = 0. 9999
[0100] 含量测定取待测样品20片，研细混勾，精密称定（相当于硝苯地平30mg)，加无水 乙醇研细，分别定量转移到l〇〇mL量瓶中，无水乙醇稀释至刻度，摇匀，过滤精密量取续滤 液lml至100ml量瓶中，加0. lmol/L盐酸稀释至刻度，摇勾，237nm的波长下测定吸光度。
[0101] (2)溶出度测定按中国药典2010年版第二部附录第一方法对硝苯地乎缓释片进 行溶出度测定。溶出介质〇. lmol/L盐酸900ml，温度（37±0. 5)°C，转篮的转速为50r/min， 避光操作取侍测样品6片分别称重后投入6个溶出杯内，以药片接触介质时开始计时，分别 在l、2、3、4、5、6、7h用含微孔滤膜的取样器取样，每次5ml (同时补充0. lmol/L的盐酸介质 溶液5ml)，237nm处测定吸光度，结果见表6,图6 ;
[0102] 表6与上市的产品释放度比较
[0104] 因本品在水中几乎不溶，实验中需用无水乙醇溶解样品。硝苯地平遇光不稳定，所 以实验全过程必须避光操作。从表5的结果来看，两组的缓释片的体外溶出度无显著性差 异。硝苯地平缓释片（实施例1制备）、硝苯地平缓释片上市产品的溶出度均符合标准。
[0105] 实验例5 :单剂量口服硝苯地平缓释片的药动学及生物等效性实验
[0106] 1、材料高效液相色谱仪、DAD二极管阵列检测器；参比制剂硝苯地平缓释片 (20mg/片，青岛国风集团黄海制药有限责任公司）；受试制剂硝苯地平缓释片（实施例1); 硝苯地平对照品（山东司邦得制药有限公司，含量99.8% );甲醇、乙腈为色谱纯；其他试 剂均为分析纯。
[0107] 2、受试对象22名健康男性志愿者，年龄（23±2)岁，体重（62±5)kg，身高 (1.71±0.05)m，体重指数=(体重/身高）均在20~24范围内；试验前经病史询问和体格 检查等均为正常，且试验前2周及试验期间未服用任何药物并禁用烟酒及其它含咖啡因、 柯柯碱、茶碱的饮料，避免剧烈运动。
[0108] 3、试验方案
[0109] 采用两制剂双周期交叉试验设计
[0110] 将22名受试者随机分为两组，分别服用受试（T)制剂和参比（R)制剂。受试者 于试验前12h吃清淡晚餐后禁食，试验当日清晨空腹口服T制剂或R制剂20mg，用250mL 温开水送服，服药后4h和10h统一进餐。受试者于服药前及服药后0. 5、1、2、3、4、5、6、8、 10、12、15、24、36h分别从上肢肘静脉取血3mL，置肝素抗凝管中放置30min，离心（8000r/ min)10min分离血浆，置-20°C下冻存、备用。一周后交叉服药，重复试验。试验在避光条件 下进行。
[0111] 受试者血压心率测定分别测定
[0112] 22名受试者在服药前、后各时间点血压、心率值，22名受试者服用两制剂后的平 均血压/心率测定值与0时比较的血压/心率差值-时间曲线，见图2。结果显示，收缩压 下降不明显，舒张压下降达1. 19kPa，心率提高明显，最高达20次/min。经统计学分析，心 率的变化与血药浓度呈直线相关性（r = 0. 7401)，按a = 0. 05水平，P < 0. 01。见图7 ;
[0113] 数据处理将22名受试者的经时血药浓度录入DAS(verl. 0)程序，分别得到两制剂 硝苯地平的 AUCQ_36h、AUQ^、tl/2, Tmax、Cmax，Tmax 进行非参数秩和检验，Cmax、AUCQ_36h、 AUQ^经对数转换后做方差分析，并经双向单侧t检验，两制剂的Tmax、Cmax、AUCVmh、 AUC^差异均无显著性，双向单侧t检验表明，受试制剂的Cmax、AUQ^、AUCV"的90 %可信 限落在参比制剂的80~125%范围内，受试制剂的相对生物利用度$ = 4此(|_361^/^〇|_3611. KX 100%)为（104. 4±40.1%)。结果表明，两制剂具有生物等效性。22名受试者口服单 剂量两制剂后的平均血药浓度-时间曲线及主要药动学参数见图8、表7、表8。
[0114] 表7健康受试者单剂量口服硝苯地平片后的主要药动学参数(，±s|
[0116] 表8健康受试者口服单剂量T药和R药20mg后主要药动学参数双向单侧t检验 结果（a = 0? 05)
[0118] 硝苯地平的最低有效血药浓度为10~15 yg/L，受试者口服20mg两种制剂后， 2~15h体内维持在有效血药浓度范围，体现了较好的缓释能力。硝苯地平在人体内经氧 化机制代谢为脱氢硝苯地平，并被进一步代谢。本研宄所测药动学参数与文献报道[1]接 近，且在体内的吸收和代