减少自身免疫性疾病的风险的制作方法
【技术领域】
[0001] 本公开内容涉及一种使用选自酪蛋白水解产物的肽，减轻自身免疫性疾病的方 法。
【背景技术】
[0002] 自身免疫性疾病起因于身体对抗正常存在于身体内的物质和组织的不适当的免 疫反应。这可限于某些器官（如在自身免疫性甲状腺炎中）或涉及不同部位的特定组织 (如可影响肺和肾二者的基底膜的Goodpasture's病）。治疗自身免疫性疾病通常使用降 低免疫反应的免疫抑制药物。
[0003] 糖尿病1型（1型糖尿病，T1DM，以前为胰岛素依赖性或青少年糖尿病）是由胰腺 的产生胰岛素的0细胞的自身免疫性破坏引起的糖尿病的一种形式。随后的胰岛素缺乏 导致血糖和尿糖增加。典型的症状是多尿症（尿频）、多饮（增加的口渴）、多食症（增加 的饥饿感）和体重损失。发病率在北欧和美国从8至17/100, 000变化，从斯堪的纳维亚的 高约35/100, 000到日本和中国的低至1/100, 000。最终，1型糖尿病是致命的，除非用胰岛 素治疗。注射是给予胰岛素的最普通的方法，虽然其它方法有胰岛素栗和吸入胰岛素。其 它备选方法有已经使用的胰腺移植，和还有胰岛细胞移植。移植仍在实验性发展中。
[0004] 腹腔疾病是小肠的自身免疫性病症，其发生在遗传上易感的从幼儿中期开始的所 有年龄的人群中。症状包括消化道疼痛和不适、慢性便秘和腹泻、未能茁壮成长（在儿童 中）和疲劳，但这些可以是不存在的，并且已描述了其它器官系统的症状。由于小肠从食 物适当吸收营养物的能力降低，维生素缺乏常常在患有腹腔疾病的人群中被注意到。由 于增加筛选的结果，越来越多的诊断在无症状者中进行；在美国，该病症被认为影响介于 1/1，750和1/105之间的人群。腹腔疾病是由麦醇溶蛋白（一种在小麦中发现的谷醇溶蛋 白（谷蛋白））和存在于小麦族农作物（其包括其它普通谷物例如大麦和黑麦）中的类似 蛋白质反应引起的。在暴露于麦醇溶蛋白，且特别是在谷醇溶蛋白中发现的3种肽时，酶组 织转谷氨酰胺酶修饰所述蛋白质，和免疫系统与小肠组织发生交叉反应，引起炎性反应。这 导致截短小肠绒毛衬里（称为绒毛萎缩）。这干扰了营养物的吸收，因为肠绒毛负责吸收。 唯一已知的有效治疗是终身无谷蛋白的饮食。虽然该疾病是由对小麦蛋白的反应引起的， 但它与小麦过敏不同。
[0005] HLA-DQ2 (DQ2)是HLA-DQ(DQ)血清分型系统中的一组血清型。该血清型通过DQ 链的02亚型的抗体识别来确定。DQ2代表腹腔疾病的第二高风险因子，最高的风险 是患有疾病的密切家族成员。由于它与腹腔疾病的联系，DQ2具有任何HLA血清型与自身 免疫性疾病的最高联系，接近于95%的所有腹腔具有DQ2,其30%具有2个拷贝的DQ2。吃 小麦的DQ2纯合子人群中，腹腔疾病的终身风险介于20和40%之间。青少年糖尿病（T1D) 与DQ2. 5具有高的相关性且在GSE和男性T1D的早期发病之间似乎有关联。在三分之一的 T1D患者中发现抗-tTG抗体升高，并且有指示，小麦可能参与，但谷蛋白是一种类型的球蛋 白（Glbl)。最近的研究表明，DQ2. 5和DQ8的组合（两种酸性肽的供应者）大大地增加成 人发病型1型糖尿病和不确定的I/II型糖尿病的风险。HLA-DR3在自身免疫性糖尿病中起 主要作用。然而，DQ2与DR3的存在降低发病的年龄和自身免疫性病症的严重性。
[0006] HLA-DQ8 (DQ8)是在HLA-DQ (DQ)血清型组中的一种人白细胞抗原血清型。DQ8是 DQ3广泛抗原的拆分抗原。DQ8通过8的抗体识别确定，这一般检测DQB1*0302的基因产 品。DQ8通常与人群的自身免疫性疾病关联。DQ8是与腹腔疾病关联的第二个最主要的同 工型和DQ大多与青少年糖尿病有关联。DQ8增加类风湿性关节炎的风险并与RA的主要风 险基因座HLA-DR4有关。DR4也在青少年糖尿病中起着主要的作用。虽然DQ8. 1单倍型与 疾病有关，但DQB1*0305、DQ8. 4或DQ8. 5单倍型与自身免疫性疾病没有已知的联系；然而， 这可能是携带这些和极低频率的人口研究的缺乏的结果。在欧洲，DQ8与青少年糖尿病和 腹腔疾病有关。对于1型糖尿病的最高风险因素是HLA DQ8/DQ2. 5表型。在东部斯堪的纳 维亚的部分中，DQ2. 5和DQ8二者的迟发性1型和不确定的I/II型糖尿病的频率有高的增 加。DQ8也发现于亚洲的许多本土人群中，其在DQ2. 5经常缺乏的阿拉伯的Bedoin人群中 被早期检测出来，且在这些情况下DQ8是腹腔疾病中唯一有关的HLA。
[0007] 克罗恩氏病（Crohn's disease)，也称为克罗恩综合征和局限性肠炎，是一种可影 响从口腔至肛门的胃肠道任何部分的炎性肠病类型，引起广泛种类的症状。它主要地引起 腹部疼痛、腹泻（如果炎症处于最严重时，其可以是带血的）、呕吐（可以是持续的）或体重 损失，但也可引起胃肠道外的并发症，例如皮疹、关节炎、眼炎、疲劳和注意力缺乏。克罗恩 氏病由遗传上易感个体的环境、免疫学和细菌因素之间的相互作用引起。这导致慢性炎性 病症，其中身体的免疫系统攻击胃肠道（可能针对微生物抗原）。存在着与克罗恩氏病，主 要与N0D2基因及其蛋白质（其感觉细菌细胞壁）的变异的遗传相关性。受影响的个体的 兄弟姐妹都处于较高的风险中。男性和女性同样受影响。吸烟者发生克罗恩氏病的可能性 为不吸烟者的两倍。克罗恩氏病影响北美介于400, 000和600, 000之间的人口。北欧的流 行率估计范围在从27至48/100, 000。克罗恩氏病往往最初存在于十多岁和二十来岁的人 中，另一个峰发病率在五十来岁至七十来岁，尽管疾病可发生在任何年龄。对于克罗恩氏病 没有已知的药物或手术治疗。治疗选项限制为控制症状，维持缓解和预防复发。
[0008]溃疡性结肠炎（UC)是炎性肠病（IBD)的一种形式。溃疡性结肠炎是一种结肠炎 (一种结肠（大肠）疾病）的形式，其包括特征性溃疡，或疮口。活动性疾病的主要症状通 常是逐渐发病的混有血液的经常性腹泻。IBD常常与肠易激惹综合征（IBS)，一种麻烦的但 不很严重的病症混淆。溃疡性结肠炎与克罗恩氏病（另一种形式的IBD)具有相似性。溃 疡性结肠炎是一种间歇性疾病，有加重症状的时期，和相对无症状的时期。虽然溃疡性结肠 炎的症状有时可自我减轻，但该疾病通常需要治疗来缓解。溃疡性结肠炎具有1-20病例 /100, 000个体/年的发病率，和8-246/100, 000个体/年的流行率。疾病在世界的北方国 家，以及在个别国家的北方区域或其它地区更流行。较富裕国家的比率往往是较高的，这可 能表明流行率增加是由于诊断率增加所致。虽然溃疡性结肠炎未有已知的原因，但存在对 易感性的假定的遗传成分。疾病可以由环境因素在易感人中引起。虽然膳食改变可减少患 有该疾病的人的不适，但并不认为溃疡性结肠炎由膳食因素引起。溃疡性结肠炎作为自身 免疫性疾病得到治疗。用抗炎药、免疫抑制剂和靶向免疫反应的特定组分的生物疗法治疗。 如果疾病是严重的，对治疗没有反应，或者如果发生严重的并发症的话，结肠切除术（通过 手术部分或全部切除大肠）有时是必要的。全结肠直肠切除术（对大肠癌整体去除）可能 是有疗效的，但它可能与并发症有关。
[0009] 代谢综合征是一种医学疾病的组合，当一起存在时，其增加发生心血管疾病和糖 尿病的风险。一些研究已经表明，在USA中的流行率估计是人口的25%，且流行率随着年龄 而增加。代谢综合征也称为代谢综合征X、心脏代谢综合征、综合征X、胰岛素抵抗综合征、 Reaven's综合征（以GeraldReaven名字命名）和CHAOS(在澳大利亚）。代谢综合征的 复杂途径的准确机理尚未完全已知。病理生理学是极其复杂的且仅有部分被阐明。大多数 患者为老年人、肥胖者、久坐不动，并有一定程度的胰岛素抵抗。应激也可以是一个促进因 素。最重要的因素是体重、遗传、内分泌紊乱（例如生殖年龄妇女的多囊卵巢综合征）、衰 老和久坐不动的生活方式（即，低体力活动和过量的热量摄入）。有关于肥胖或胰岛素抵 抗是否是代谢综合征的原因或它们是否是更远达到的代谢紊乱的后果的争论。许多全身炎 症的标记物，包括C-反应性蛋白，常常是增加的，纤维蛋白原、白介素6、肿瘤坏死因子-a (TNFa)和其它也是如此。有些人指出了各种原因，包括由膳食果糖引起的尿酸水平增加。 中心性肥胖是该综合征的一个重要特征，反映了这样一个事实，即该综合征的流行率受腰 围和不断增加的肥胖之间的强烈关系驱动。然而，尽管肥胖的重要性，具有正常体重的患者 也可能是胰岛素-抵抗的并患有该综合征。估计75%的患有2型糖尿病或葡萄糖耐量受损 (IGT)的英国患者具有代谢综合征。与患有2型糖尿病或IGT而无综合征的患者中发现的 相比，这些人群中代谢综合征的存在与CVD的更高流行率有关。
[0010] 低脂连蛋白血症已表明增加胰岛素抵抗，并被认为是发生代谢综合征的风险因 素。冠心病（CHD)患者中代谢综合征的近似流行率为50%，早发冠状动脉疾病（45岁）患 者，特别是女性的流行率为37%。采用适宜的心脏康复和生活方式（例如，营养物、体力活 动、体重减少，和在一些情况下，药物）的改变，该综合征的流行率可降低。脂肪营养不良病 症一般与代谢综合征相关。脂肪营养不良的遗传的（例如，Berardinelli-Seip先天性脂 肪营养不良、Dunnigan家族性局部脂肪营养不良）和后天获得的（例如，在用高活性抗逆 转录病毒疗法治疗的患者中的HIV-相关的脂肪营养不良）两种形式可产生严重的胰岛素 抵抗和许多代谢综合征的组分。
[0011] 对于许多这些自身免疫性疾病，目前仍未治愈。如果自身免疫性疾病的风险减少， 或者治疗或减轻自身免疫性疾病的症状，这将是有益的。
[0012] 已经令人惊讶地发现，选自酪蛋白水解产物的肽减少自身免疫性疾病的风险。
[0013] 本发明的公开内容 在第一方面，本公开内容涉及通过给予包含选自酪蛋白水解产物的肽的组合物，减少 自身免疫性疾病的风险的方法。
[0014] 在第二方面，本公开内容涉及通过给予包含选自酪蛋白水解产物的肽的组合物， 治疗自身免疫性疾病的方法。
[0015] 在又一方面，本公开内容涉及通过给予包含选自酪蛋白水解产物的肽的组合物， 减轻自身免疫性疾病的症状的方法。
[0016] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，自身免疫性疾病选自1型 糖尿病、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、代谢综合征、HLA-DQ8相关疾病、HLA-DQ2相关疾病和 腹腔疾病。
[0017] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，包含选自酪蛋白水解产物 的肽的组合物是营养组合物。
[0018] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，酪蛋白水解产物是牛乳水 解产物。
[0019] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，水解产物是含有广泛水解 的牛乳肽的水解产物。
[0020] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，水解产物由分子量超过 500 Da的肽组成。
[0021] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，水解产物包含至少一种选 自SEQ ID N0: 1-68的肽，优选地至少2种肽，优选地至少3种肽，优选地至少4种肽，优选 地至少5种肽。
[0022] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，水解产物包含至少一种选 自SEQ ID N0: 1-24的肽，优选地至少2种肽，优选地至少3种肽，优选地至少4种肽，优选 地至少5种肽。
[0023] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，水解产物包含至少一种选 自SEQ ID N0: 1-15的肽，优选地至少2种肽，优选地至少3种肽，优选地至少4种肽，优选 地至少5种肽。
[0024] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，水解产物包含至少一种选 自SEQ ID N0: 1-12的肽，优选地至少2种肽，优选地至少3种肽，优选地至少4种肽，优选 地至少5种肽。
[0025] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，水解产物以包含脂质或脂 肪相和蛋白质源的营养组合物给予。
[0026] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，营养组合物包含约0. 1-约 1 g/100 kcal的益生元组合物，其中益生元组合物包含至少20%的寡糖。
[0027] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，营养组合物还包含约5-约 100 mg/100 kcal的长链多不饱和脂肪酸源，所述长链多不饱和脂肪酸包含二十二碳六烯 酸。
[0028] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，营养组合物还包含花生四 烯酸。
[0029] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，水解产物给予人，优选儿 童或青少年。
[0030] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，水解产物给予成人。
[0031] 在本公开内容和/或其实施方案的优选的实施方案中，人具有牛乳过敏。
[0032] 附图简沐 图模型的示意图：A.胃室；B.幽门括约肌；C.十二指肠室；D.蠕动阀；E. 空肠室；F.蠕动阀；G.回肠室；H.回盲括约肌；1.胃分泌；J.十二指肠分泌；K.空肠/ 回肠分泌；L.预过滤器；M.半渗透膜；N.水吸收；p. pH电极；e.水平传感器；R.温度 传感器；S.压力传感器。
[0033] 图2.通过LC-MS (mlz 230-2000)，对本公开内容的酪蛋白水解产物观察到的在 模拟婴儿胃消化后的肽分布的比较。在消化前、消化后（T1M)、和在消化和进一步透析后描 述肽分布。
[0034] 图3.在T=18下，在暴露于本公开内容的含有消化的酪蛋白水解产物的营养组合 物（因此>500Da)(以低（9. 5 mg/ml)或高浓度（19 mg/ml)加入并用454焦磷酸测序测 定）后，本公开内容的含有酪蛋白水解产物的营养组合物对粪便发酵实验的微生物群落的 拟杆菌属水