分为三组：正常建模组、空白 组和雨生红球藻组（每组18只）。合笼后第六天（怀孕第五天），雨生红球藻组动物灌 胃I. 0g/d. kg. bw、l. 6g/d. kg. bw、2. 2g/d. kg. bw雨生红球藻粉（宁波红龙生物科技有限公 司），正常建模组、空白组每天灌胃等量的生理盐水，直至结束（合笼后第21天）。自合笼 后第10天起至结束（合笼后第21天），空白组和雨生红球藻组每天皮下注射L-亚硝酸左 旋精氨酸甲酯（L-NAME) 125mg/d ? kg ? bw，正常建模组注射等量的生理盐水。
[0015] 实施例2 :组织病理学检查
[0016] 合笼后第21天时，测各组动物的血压、尿蛋白，随后将各组动物股动脉放血处死， 收集各组大鼠腹主动脉血液，分离血清，检测血清中的过氧化物（MDA)、内皮素含量，超氧化 物歧化酶（S0D)、一氧化氮合酶（NOS)酶活性。同时取胎盘组织，进行组织病理学检查，分析 纤维蛋白的沉积面积，免疫组化检测胎盘组织中NF-kB、HO-I蛋白表达。
[0017] 如表1所示，与正常建模组相比，空白组中孕鼠经L-NAME处理后尿蛋白升高 20. 12% (P〈0. 05)，而收缩压升高28. 8% (P〈0. 05)，舒张压升高23. 15%，说明建模成功。灌 胃雨生红球藻后，尿蛋白和血压都出现下降，其中在灌胃了 1.6g/d. kg. bw雨生红球藻后， 尿蛋白比空白组下降11. 82%，收缩压下降25. 5% (P〈0. 05)，舒张压降至低于正常建模组 (表1)。并且，这一降压现象呈现浓度依赖，说明雨生红球藻能改善子痫前期孕鼠的高血压 和蛋白尿两个典型特征。
[0018] 表1 :雨生红球藻对SD大鼠血压和尿蛋白含量的影响
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[0021] 注：雨生红球藻组与空白组比，乍〈0.05 ;，〈0.01 ;空白组与正常建模组比， #P〈0. 05。
[0022] 如表2所述，血清中的各指标结果中，空白组中，孕鼠经L-NAME处理后，其中 MDA和内皮素出现显著增高，如MDA增高至6.45U/mL，显著高于正常建模组的3. 87U/ mL(P〈0. 01);而内皮素升高至19. 5pg/mL，约为正常建模组的3倍（P〈0. 05)。而SOD和NOS 酶活性都出现相应的下降，其中NOS酶显著下降，这些都是子痫前期的典型变化。雨生红球 藻组中，经雨生红球藻处理后，各指标都有所改善，MDA和内皮素较空白组均出现降低，NOS 和SOD酶活也出现回升，说明雨生红球藻通过调节NO的合成体系和内皮素变化，使血压得 到恢复，同时氧化应激得到缓解，抗氧化酶活增加。
[0023] 表2 :雨生红球藻对大鼠血清中N0、N0S、MDA、SOD活性和内皮素含量的影响
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[0025] 注：雨生红球藻组与空白组比，乍〈0.05广P〈0.01 ;空白组与正常建模组比， #P〈0. 05。
[0026] 如图1所示，胎盘病理学检测显示，在空白组中胎盘组织的底蜕膜中可见数个螺 旋动脉（见图1中B2)，胎组盘绒毛中滋养细胞明显增生，滋养细胞基膜不规则增厚，绒毛间 质纤维蛋白沉淀面积明显增加，发生纤维蛋白样坏死（见图1中B3)，绒毛血管增多，部分绒 毛血管灌注少，血管未扩张，血管少的绒毛合体细胞节增多。雨生红球藻组中偶见螺旋动脉 和部分合体结节（见图1中C2)。与空白组进行比较，纤维蛋白样坏死症状明显改善，可见 服用雨生红球藻粉后病理改变出现明显改变。
[0027] 如图2所示，免疫组化结果显示，正常建模组HO-I在胎盘组织细胞胞浆中的表达 明显，但空白组明显减少，而雨生红球藻组的表达量高于正常建模组。核因子-KB(nuclear factor kappa B，NF-kB)主要存在于胎盘组织的细胞滋养细胞，本实施例中，NF-K B在空白 组细胞滋养细胞中可见大量棕黄色颗粒的阳性表达，而雨生红球藻组内仅可见少量阳性表 达。
【主权项】
1. 一种雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用。2. 如权利要求1所述的雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用，其特征 在于：所述产品为降低子痫前期病患个体血压的产品。3. 如权利要求1或2所述的雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用，其 特征在于：所述产品为调节子痫前期病患个体内部氧化应激指标的产品。4. 如权利要求3所述的雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用，其特征 在于：所述氧化应激指标包括MDA和内皮素含量、SOD和NOS酶活性。5. 如权利要求3所述的雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用，其特征 在于：所述产品为药物、食品或保健品。6. 如权利要求5所述的雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用，其特征 在于：所述雨生红球藻在所述产品中的实际给药量为I.〇g-2. 2g/千克体重/天。
【专利摘要】本发明涉及雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用，主要用来降低子痫前期病患个体血压和调节子痫前期病患个体内部氧化应激指标，本发明中雨生红球藻能使子痫前期模型中的孕鼠在产仔前血压明显降低，尿蛋白减少，血液中的MDA和内皮素下降而SOD升高，同时雨生红球藻明显下调胎盘组织中的NF-κB，增加了HO-1的表达，使得胎盘组织中的滋养细胞数减少、纤维蛋白沉积减少、基底膜增厚现象改善，具有明显的治疗子痫前期疾病的作用。与现有技术相比，本发明提供了雨生红球藻在制备预防或治疗子痫前期产品中的应用，拓宽了雨生红球藻的应用范围，也为子痫前期的预防和治疗提供了新的途径。
【IPC分类】A61P15/00, A23L1/29, A61K36/04, A61P9/12
【公开号】CN105079041
【申请号】CN201410183427
【发明人】陈海敏, 宣荣荣, 高鑫, 严小军
【申请人】宁波大学
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2014年5月4日