一种刺苋提取物的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域，具体涉及一种刺苋提取物的新用途。
【背景技术】
[0002] 刺苋（Amaranthus spinosus. L)，别名苋菜、勒苋菜等，是苋科的一种植物。在我 国大部分省份和日本、印度、中南半岛、马来西亚、菲律宾、美洲等地皆有分布。喜生长在干 燥荒地，生境在草丛、河边荒地、荒地、开阔地、山坡等。民间用刺苋的幼叶作野菜食用，也用 于解毒消肿、利尿止痛、清肝明目、散风止痒、杀虫疗伤。已有研究发现，该植物含有游离烷 烃类、留醇类、黄酮类、三萜皂苷类等等化合物。现代药理学研究表明该植物具有镇痛抗炎、 利尿、退热、免疫、保肝、降血糖、抗疟疾、抗菌、抗氧化等方面的药理作用。
[0003] 但是，迄今为止，从未报道过刺苋的抗癌作用相关研究。癌症是当今社会发病率 高，死亡率高的一种顽疾，目前尚未有能够治愈率较高的药物报道。本发明人在寻找中草药 抗癌活性成分的过程中，发现刺苋的石油醚提取物具有良好的抗肿瘤活性。这为后期这种 植物提取物的抗癌或辅助治疗作用研究奠定了一定的基础。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种刺苋提取物的用途，即其在制备抗癌药物中的应用，该 刺苋提取物制备工艺简单，为刺苋在抗癌药物研究中的应用奠定了 一定的基础。
[0005] 本发明中刺苋提取物按如下方法制得： (1) 按质量比1:2~1:5的比例将刺苋浸入乙醇溶液中超声提取0. 5~lh，过滤，滤渣中再 添加乙醇溶液超声提取，重复提取2~4次后，合并滤液得到提取液； (2) 提取液减压蒸馏浓缩至无醇味； (3) 按照质量比1:1~1:2的比例在浓缩后的提取物中添加蒸馏水，混和均匀，按混合溶 液与石油醚的体积比1:1~1:2的比例，在混合溶液中加入石油醚进行萃取，收集石油醚萃 取相，反复萃取3~4次，合并石油醚萃取相；减压蒸馏浓缩石油醚萃取相，干燥后得到刺苋 提取物。
[0006] 所述刺苋为新鲜采集或者经过干燥的根茎、枝叶、果实中的一种或多种的混合物。
[0007] 所述乙醇溶液为无水乙醇溶液或质量百分比浓度为80-95%的乙醇溶液。
[0008] 所述步骤（2)中减压蒸馏在43°C ~48°C、真空度0· 04~0· 06Mpa条件下进行。
[0009] 所述步骤（3)中减压蒸馏在40°C ~43°C、真空度0· 04~0· 06Mpa条件下进行。
[0010] 所述步骤（3)中干燥为先在40°C ~50°C下常压干燥8~12h后，再在40°C ~50°C下 真空干燥8~12h。
[0011] 本发明的优点和技术效果：本发明刺苋提取物的制备工艺简单实用，制得的提取 物抗癌活性好；实验结果显示：刺苋石油醚提取物对MCF-7和A549细胞具有一定的抑制作 用，且对A549细胞抑制的作用更明显，为后期这种植物提取物的抗癌或辅助治疗作用研究 奠定了 一定的基础。
【附图说明】
[0012] 图1为刺苋提取物抑制MCF-7细胞生长时间效应曲线； 图2为刺苋提取物抑制A549细胞生长时间效应曲线； 图3为刺苋提取物抑制MCF-7细胞IC50曲线； 图4为刺苋提取物抑制A549细胞IC50曲线。
【具体实施方式】
[0013] 下面通过附图和实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明的保护范围不局 限于所述内容。
[0014] 实施例1 :刺苋提取物的应用 1、刺苋提取物的制备 (1) 将100g新鲜刺苋根茎浸入200g质量百分比浓度95%的乙醇溶液中超声提取，过 滤，滤渣中再添加200g乙醇溶液超声提取30min，重复提取3次后，合并滤液得到提取液； (2) 提取液在45°C、真空度0. 05Mpa条件下减压蒸馏浓缩至无醇味； (3) 按照质量比1:1的比例在浓缩后的提取物中添加蒸馏水，混和均匀，按混合溶液与 石油醚的体积比1:2的比例，在混合溶液中加入石油醚进行萃取，收集石油醚萃取相，反复 萃取3次，合并石油醚萃取相；在40°C、真空度0. 06Mpa条件下减压蒸馏浓缩石油醚萃取 相，浓缩物先在40°C下常压干燥12h后，再在50°C下真空干燥8h，得到刺苋提取物。
[0015] 2、刺苋提取物的体外抗癌实验 2.1细胞株，试剂以及仪器 人非小细胞肺癌A549,人乳腺癌MCF-7。DMEM培养液（GIBC0)，胎牛血清（GIBC0)，胰蛋 白酶（GIBCO)，DMSO (分析纯，Amresco)，青霉素（Sigma)，链霉素（Sigma)，MTT (Amresco)， 96孔板，细胞培养箱（Thermo)，酶标仪（Tecan)，生物操作台(吴江市绿岛净化设备厂)。
[0016] 2. 2肿瘤细胞培养方法 基础培养基1640+10%FBS (胎牛血清）+1%双抗青链霉素，培养条件为37°C，5%C02浓度 及饱和湿度；当细胞生长至对数期时，用胰蛋白酶消化细胞，洗涤吹散细胞，以每孔3X103个细胞100 μ 1接种于96孔板，以备MTT实验。
[0017] 2. 3细胞增殖实验（ΜΤΤ法） 将刺苋提取物溶于DMSO溶液，分别配置浓度为100mg/ml、50mg/ml、25mg/ml、12. 5mg/ ml、6. 25mg/ml、3. 125mg/ml、I. 5625mg/ml、0. 78125mg/ml 的溶液，共 8 个浓度每个浓度 2 倍 稀释；每孔加入1 μ 1各浓度刺苋提取物，并补加100 μ 1培养基，混匀，使得刺苋提取物的每 孔终浓度为 500 μ g/ml、250 μ g/ml、125 μ g/ml、62. 5 μ g/ml、31. 25 μ g/ml、15. 625 μ g/ml、 7.8125以8/!111、3.90625 以8/1111;放入培养箱继续培养2411、4811、7211，每孔加入2(^1]\〇'1'溶 液，继续培养4h，培养4h后抽出每孔溶液后每孔加入100 μ I DMSO溶液，酶标仪下测定每 孔的吸光度。以加入DMSO溶液1 μ 1培养的细胞为对照组，每个浓度梯度设5个平行组， 分别计算细胞抑制率。按照以下公式计算抑制率：存活率=(实验组吸光度/对照组吸光 度）X 100% ;实验结果见表1、2,从表中可以看出：刺苋石油醚提取物确实能抑制MCF-7和 Α