/mL新霉素，以及加入作为赋形剂的卵磷脂和甘油；实验组 26为含35mg/mL胶原蛋白与5mg/mL透明质酸及4mg/mL新霉素，以及加入作为赋形剂的卵 憐脂和甘油。
[0092] 从伤口的中心切开，以获得伤口的横切片，该横切片包括相邻未受伤害的皮肤 和深层的肌肉组织，接着以福尔马林缓冲溶液固定并以石蜡包埋。接着以苏木精-伊红 (hematoxylinandeosin)将切片进行染色，并透过光学显微镜观察。进一步以Masson's andVerhoff's进行染色，用来分析新基质（neomtrix)的再生、组织结构和弹性纤维的形 成，以评估愈合的效果。
[0093] 请参考图11，其中含卵磷脂和甘油的细胞组织胶体为实验组23-26的代表示意 图。在植入细胞组织胶体后6个月，实验组23-26的新基质结构与正常组的皮肤没有显著的 差异，然而控制组（开放式伤口）有较细的胶原纤维，此与正常组的皮肤比较有明显差异。
[0094] 若伤口为浅层的皮肤伤口，所添加的赋形剂，能让细胞组织胶体像乳液一样，使肌 肤平滑。而在实验组22-26中，其伤口愈合结果在组织学上没有显著的差异。
[0095] 10.浅层皮肤伤口
[0096] 为了分析细胞组织胶体对于浅层皮肤伤口的愈合效果，将以下成分与赋形剂混 合，成分包括：30mg/mL胶原蛋白、1500kDa不同浓度（5、10、20、30mg/mL)的透明质酸、含有 或不含有维生素、含有或不含有生长因子的（5、10、20、30mg/mL)，以及抗生素（如4mg/mL新 霉素），或抗微生物胜肽（如pexiganan或其衍生物），以制备含不同成分的细胞组织胶体。 举例来说，将上述细胞组织胶体的成分与甘油及卵磷脂混合后，将pH值调整使其介于弱酸 性至中性，持续搅拌直到均匀的胶体形成为止。当细胞组织凝胶施于皮肤上时，该凝胶能附 着在皮肤表面。
[0097] 当该细胞组织胶体施用于全层伤口时，所添加的赋形剂不会促进愈合的速度，但 可使伤口维持在一湿润且含油的状态。此种配方的细胞组织胶体适合局部伤口或第1期的 伤口愈合，如表四。
[0098] 表四、含各种赋形剂的细胞组织胶体对伤口愈合的影响
[0099]
[0100] 11.干细胞的增生
[0101] 将源自胎盘的间叶干细胞（Placentaderivedmesenchymalstemcells)与含胶 原蛋白或含透明质酸的细胞组织胶体一起培养。如图12A、12B所示，随着处理天数的增加， 含胶原蛋白的细胞组织胶体及含透明质酸的细胞组织胶体皆有利于干细胞的增生，此外， 细胞组织胶体中透明质酸的含量增加亦显示能促进干细胞的增生。由此实验结果显示，细 胞组织胶体有助于细胞生长，并且可应用于再生医学领域中。
[0102] 12.其它实施例
[0103] 本发明所揭露的所有特征可以以任何结合方式实现。本发明所揭露的每一个特征 可以用相同、均等或具有相似目的的取代物所取代。因此，除非有明确的指定，否则所揭露 的每一个特征仅只是一个种类的均等物或具相似特征的一实施例而已。
[0104] 本领域所属技术人员，将可轻易由本发明所揭露的内容中了解到本发明的特征， 且在不偏离本发明的精神与范围下，当可在此进行各种改变、取代以及修正，使其能适应各 种条件及用途。因此，其他实施例亦落于本发明权利要求书所要求保护的范围之内。
【主权项】
1. 一种细胞组织胶体，其特征是，包含胶原蛋白及透明质酸，其中所述胶原蛋白与所述 透明质酸的重量份配比为0. 01 :1-100 :1。2. 如权利要求1所述的细胞组织胶体，其特征是，所述透明质酸的浓度为0. 001mg/ml 至 100mg/ml〇3. 如权利要求2所述的细胞组织胶体，其特征是，所述透明质酸的浓度为0. 01mg/ml至 40mg/ml〇4. 如权利要求1所述的细胞组织胶体，其特征是，所述胶原蛋白的浓度为0. 001mg/ml 至 100mg/ml〇5. 如权利要求1所述的细胞组织胶体，其特征是，所述胶原蛋白的浓度为0.lmg/ml至 100mg/ml，且所述透明质酸的浓度为0. 01mg/ml至35mg/ml。6. 如权利要求5所述的细胞组织胶体，其特征是，所述胶原蛋白的浓度为3mg/ml至 40mg/ml，且所述透明质酸的浓度为0. 2mg/ml至20mg/ml。7. 如权利要求1所述的细胞组织胶体，其特征是，还包括营养素及生物活性剂。8. 如权利要求7所述的细胞组织胶体，其特征是，所述生物活性剂是选自由上皮 生长因子（epidermalgrowthfactor)、纤维母细胞生长因子（fibroblastgrowth factor，FGF)、血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)、 结缔组织生长因子（connectivetissuegrowthfactor)、血小板衍生性生长因 子（platelet-derivedgrowthfactor，FlDGF)、类膜岛素生长因子（insulin-like growthfactor)、神经生长因子（nervegrowthfactor)、肝细胞生长因子（hepatocyte growthfactor)、细胞聚落刺激因子（colony-stimulatingfactor)、干细胞因子（stem callfactor)、角质细胞生长因子（keratinocytegrowthfactor)、颗粒球细胞聚落 刺激因子（granulocytecolony-stimulatingfactor)、颗粒球巨细胞聚落刺激因 子（granulocytemacrophagecolony-stimulatingfactor)、胶质衍生神经营养因子 (glial-derivedneurotropicfactor)、睫状神经营养因子（ciliaryneurotrophic factor)、内皮单核细胞活化多胜肽（endothelial-monocyteactivatingpolypeptide)、 上皮中性粒细胞活化胜肽（epithelialneutrophilactivatingpeptide)、红血球生成素 (erythropoietin)、骨形成蛋白（bonemorphogeneticprotein)、大脑衍生神经营养因子 (brain-derivedneurotrophicfactor)、BRAK、车专化生长因子-β(transforminggrowth factorbeta)或肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor)的一种或多种。9. 如权利要求1所述的细胞组织胶体，其特征是，还包含干细胞。10. 如权利要求1所述的细胞组织胶体，其特征是，还包含一个或多个基质要素，所述 基质要素选自由明胶、纤维连接蛋白、弹性蛋白、细胞黏合素（tenacin)、层黏蛋白、玻璃连 接蛋白、多胜肽、硫酸肝素、软骨素、硫酸软骨素、角质素、硫酸角质素、硫酸皮肤素、鹿角菜 胶、肝素、几丁质、几丁聚糖、褐藻胶、琼脂糖、琼脂、纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素及肝 醣的一种或多种。11. 如权利要求6所述的细胞组织胶体，其特征是还进一步包含一营养素及一生物活 性剂。12. -种治疗患者伤口的方法，其特征是，包括给予患者伤口如权利要求1所述的细胞 组织胶体。13. 如权利要求12所述的方法，其特征是，所述细胞组织胶体中含有的胶原蛋白与透 明质酸的重量比为1 :1至50 :1。14. 如权利要求13所述的方法，其特征是，所述胶原蛋白的浓度为lmg/ml至100mg/ ml，且所述透明质酸的浓度为0. 5mg/ml至lOOmg/mL。15. 如权利要求13所述的方法，其特征是，所述细胞胶体进一步包含营养素及生物活 性剂。16. 如权利要求15所述的方法，其特征是，所述生物活性剂是选自由上皮生长因子 (epidermalgrowthfactor)、纤维母细胞生长因子（fibroblastgrowthfactor，FGF)、 血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)、结缔组织生长因 子（connectivetissuegrowthfactor)、血小板衍生性生长因子（platelet-derived growthfactor，F1DGF)、类膜岛素生长因子（insulin-likegrowthfactor)、神经生长 因子（nervegrowthfactor)、肝细胞生长因子（hepatocytegrowthfactor，HGF)、细胞 聚落刺激因子（colony-stimulatingfactor)、干细胞因子（stemcallfactor)、角质 细胞生长因子（keratinocytegrowthfactor)、颗粒球细胞聚落刺激因子（granulocyte colony-stimulatingfactor)、颗粒球巨细胞聚落刺激因子（granulocytemacrophage colony-stimulatingfactor)、胶质衍生神经营养因子（glial-derivedneurotropic factor)、睫状神经营养因子（ciliaryneurotrophicfactor)、内皮单核细胞活化多 胜肽（endothelial-monocyteactivatingpolypeptide)、上皮中性粒细胞活化胜肽 (epithelialneutrophilactivatingpeptide)、红血球生成素（erythropoietin)、 骨形成蛋白（bonemorphogeneticprotein)、大脑衍生神经营养因子（brain-derived neurotrophicfactor)、BRAK、车专化生长因子-β(transforminggrowthfactorbeta)及 肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor)中的一种或多种D17. 如权利要求16所述的方法，其特征是，所述营养素为维生素、矿物质、碳源或脂肪 酸。18. 如权利要求13所述的方法，其特征是，所述细胞组织胶体进一步包含药学上可接 受的赋形剂。19. 如权利要求18所述的方法，其特征是，所述赋形剂选自由卵磷脂或甘油的一种或 两种。20. 如权利要求12所述的方法，其特征是，所述患者为糖尿病患者。
【专利摘要】本发明是关于一种含胶原蛋白与透明质酸的细胞组织胶体，其中所述胶原蛋白与所述透明质酸的重量比介于0.01:1至100：1之间。
【IPC分类】A61K35/50, A61P17/02, A61K47/36, A61K47/42
【公开号】CN105311057
【申请号】CN201510454326
【发明人】黄玲惠
【申请人】黄玲惠
【公开日】2016年2月10日
【申请日】2015年7月29日
【公告号】EP2979710A1