的时间，从而改变β (1-6)连接基，来制备改变的完整葡聚糖颗粒的方法。优选醋酸，这是 由于它的轻微酸性、容易操作、低毒、价格低廉和易于获得，但可以使用其它酸。通常，这些 酸应该足够弱，以便限制β (1-3)连接基的水解。处理是在基本上只影响β (1-6)连接的 葡聚糖的条件下进行的。在某些实施方案中，酸处理是用主要由醋酸或其任何稀释物（典 型的稀释剂可以是有机溶剂或无机酸溶液）组成的液体进行的。处理是在大约20°C至大 约100°C的温度下进行的，以便除去大约3至大约20%重量的酸溶性物质（基于处理之前 的完整葡聚糖颗粒的总重量）。在其它实施方案中，除去的程度是大约3至大约4%重量。 处理后，形成的某些组合物显示了改变的流体动力学性能和粘度的提高。
[0138] 按照第二种化学处理方法，用酶或酸处理完整的葡聚糖颗粒，从而改变β (1-3) 连接基的数量。根据酵母菌株，酶处理会导致粘度降低或粘度提高，但通常改变所得到的葡 聚糖的化学和流体动力学性能。为了改变β (1-3)连接基和完整葡聚糖颗粒在水悬浮液中 的流体动力学性能，用β (1，3)葡聚糖酶（例如昆布糖酶）处理。酶处理可以在水溶液中 进行，该水溶液具有每升大约〇. 1至大约10. 〇克葡聚糖的浓度。可以使用任何水解性的葡 聚糖酶，例如昆布糖酶，其是有效和容易得到的。培养时间可以根据完整葡聚糖颗粒的浓度 和葡聚糖酶而改变。β (1-3)连接基是抗弱酸例如醋酸的。用强酸或浓酸例如盐酸（HCl)、 硫酸（HSO)或甲酸处理，可以使β (1-3)连接基水解。酸处理可以在水溶液中进行，该水溶 液具有每升大约〇. 1至大约10. 〇克葡聚糖的浓度。酸处理的时间可以根据完整葡聚糖颗 粒的浓度和酸而改变。酸水解可以在大约20°C至大约100°C的温度下进行。
[0139] 通过控制培养时间，可以控制得到的产品的化学和流体动力学性能。例如，对于具 体用途，例如，用于各种食品，可以精确控制产品粘度。
[0140] 具有改变的连接基的最终处理产品的流体动力学参数（K)取决于处理时间，按照 下式：
[0141] 1=-0.00210^11)+0.26
[0142] 其中时间是分钟；
[0143] 其中时间小于一小时。
[0144] 参数K1直接与相对粘度相关（按比例相关）。在水悬浮液的情况下，当真实粘度 按厘泊计量时，相对粘度等于真实粘度。
[0145] 还提供了制备具有预定期望粘度的葡聚糖浆液的方法。浆液包括葡聚糖，葡聚糖 浓度是按照下列近似公式的预定期望粘度的函数：
[0146] 1/浓度=KlX(l/log (相对粘度））+K2
[0147] 其中，K1=(形状因数）χ(流体动力学体积）；和
[0148] K2=(流体动力学体积V (最大紧束分数）。
[0149] 形状因子是经验测定值，其描述葡聚糖矩阵在其水相环境中的形状。形状因子是 颗粒的长度：宽度比例的函数，并且可以显微测定。流体动力学体积是测量颗粒悬浮时所占 据体积的尺度。这是葡聚糖悬浮液的重要参数，这在于，其表示葡聚糖矩阵的高含水量。可 以将最大紧束分数描述为：可以被填充到单位体积悬浮液中的葡聚糖的最高可得到的体积 分数。
[0150] 还可以使用微粒葡聚糖，并且可以利用本领域普通技术人员已知的常规方 法，从酵母细胞壁中分离起始原料。用酵母制备葡聚糖的一般方法包括：用碱提取，而后用 酸提取（Hassid 等人，Journal of the American Chemical Society，63:295-298,1941) 〇 分离净化的、水不能溶解的β -葡聚糖提取物的改进方法公开在美国专利5, 223, 491中。制 备完整葡聚糖颗粒的另一种方法公开在美国专利4, 992, 540中，将其全部结合到本文中作 为参考。制备微细颗粒β -葡聚糖的方法公开在专利5, 702, 719中，以其全部将其公开内 容结合到本文中作为参考。可以获得平均粒度大约为I. 〇微米或更小或大约〇. 20微米或 更小的微细颗粒葡聚糖产品。
[0151] 可以通过机械法（例如，利用搅拌器、微流控器或球磨机）来减小微细颗粒葡 聚糖颗粒的大小。例如，使用搅拌器（带有钝式叶片）可以减小粒径，在搅拌器中，将葡聚 糖混合物搅和足够的时间，优选几分钟，以便将颗粒完全研磨至期望的大小，同时不会使混 合物过热。另一种研磨法包括：在具有IOmm不锈钢研磨球的球磨机中碾磨葡聚糖混合物。 当期望大约0. 20微米或更小的粒径时，尤其优选后面的研磨法。
[0152] 在研磨之前，优选，使葡聚糖混合物通过一系列筛子，每个顺序的筛子具有比前 一个筛子更小的网目大小，最后的网目大小大约为80。筛分混合物的目的是从较小颗粒 中分离出更大和更流动（course)的葡聚糖颗粒（80网目筛的孔径大约为0.007英寸或 0.178mm)。然后按照上述方法将分离的较大颗粒碾碎，并重新筛分为最终80目大小的粒 度。重复筛分和碾磨过程，直到获得最终80目大小的粒度为止。将筛分的颗粒合并，并进 一步碾碎，优选进行至少一小时，直到获得期望的粒径为止，优选大约1. 〇微米或更小，更 优选大约0. 20微米或更小。在碾磨过程期间，进行细磨过的葡聚糖的周期性取样，并在显 微镜上使用测微计进行测定。
[0153] 可以用于本发明的葡聚糖的另一种进一步处理形式是可溶性葡聚糖。 可溶性β-葡聚糖是通过一系列酸、碱和中性处理步骤、由颗粒β-葡聚糖制备的，得到 三螺旋可溶性葡聚糖制品。制备PGG的方法在本领域是已知的，并且公开在美国专利 5, 322, 841、5, 811，542、5, 663, 324、5, 633, 369 和 5, 817, 643 和美国专利申请 12/151，666 和 11/818, 741中。通过这种方法制备的可溶性葡聚糖是葡萄糖的支化聚合物，以可变比例包 含β (1-3)和β (1-6)连接基，这取决于使用的原始有机体和确切的工艺条件。PGG-葡聚 糖分子的平均重量通常大约为5, OOO至500, OOO道尔顿。
[0154] 适合用于本发明实践的口服制剂包括：胶囊，凝胶剂，扁囊剂，片剂，泡腾或非泡腾 粉剂或片剂，粉剂或颗粒剂；在水中或非水液体中的溶液剂或混悬剂；或水包油型液体乳 剂或油包水型乳剂。另外的制剂用于鼻内递送。本发明的化合物也可以以丸剂、药糖剂或 糊剂方式提供。
[0155] 通常，制剂是如下制备的：使活性组分与液体载体或细分散的固体载体或两者均 匀地混合，而后，如果需要的话，使产品成型。基于所选择的给药途径和标准药物实践来选 择药物载体。每种载体必须是"可接受的"，意思是其与制剂的其它组分相容，并且对受试 者无害。这种载体可以是固体或液体载体，并且通常基于所使用的给药类型来选择载体类 型。合适固体载体的例子包括乳糖、蔗糖、凝胶、琼脂和松散粉末。合适液体载体的例子包 括水，可药用脂肪和油，醇或其它有机溶剂，包括酯，乳剂，糖浆剂或酏剂，混悬剂，溶液剂和 /或混悬剂，和由非泡腾的颗粒剂重组的溶液剂和/或混悬剂，和由泡腾的颗粒剂重组的泡 腾制剂。这种液体载体可以包含，例如，合适的溶剂，防腐剂，乳化剂，悬浮剂，稀释剂，甜味 剂，增稠剂和熔化剂。
[0156] 优选的载体是食用油，例如玉米或菜籽油。聚乙二醇类，例如PEG，也是优选的载 体。用于□服的制剂可以包含无毒的可药用惰性载体，例如乳糖，淀粉，蔗糖，葡萄糖，甲基 纤维素，硬脂酸镁，磷酸二钙，硫酸钙，甘露糖醇，山梨糖醇，环糊精，环糊精衍生物，等等。
[0157] 如果需要的话，组合物还可以包含微量的湿润或乳化剂，或pH值缓冲剂。组合物 可以是液体溶液，混悬剂，乳剂，片剂，丸剂，胶囊，持续释放制剂或粉剂。
[0158] 可以与传统粘合剂和载体例如甘油三酯一起将组合物配制为栓剂。口服制 剂可以包含标准载体，例如，药物等级的甘露糖醇，乳糖，淀粉，硬脂酸镁，聚乙烯吡 咯烷酮，糖精钠，纤维素，碳酸镁，等等。用于吸入的雾化制剂可以包含氯化钠、糖精 钠或去水山梨糖醇三油酸酯（sorbitani trioleas)，而在胀罐中通过压缩充碳酸气 制剂的吸入剂可以包含I，I，1，2-四氟乙烧（tetraf Iuoroethanum)，单氟三氯甲烧 (monofluorotrichloromethanum)，四氣二氯乙烧（tetrafluorodichloroaethanum)或二 氣二氯甲烧（diflurodichloromethanum) 〇
[0159] 胶囊或片剂可以容易地配制，并且可以使之便于吞入或咀嚼。片剂可以包含合适 载体、粘合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、着色剂、调味剂、引起流动剂或熔化剂。片剂可以通 过任选与一或多种额外的组份进行压缩或模制来制备。压制的片剂可以通过压缩自由流动 形式的活性组分（例如，粉末，颗粒）来制备，任选与下列混合：粘合剂（例如，凝胶，羟丙基 甲基纤维素），润滑剂，惰性稀释剂，防腐剂，崩解剂（例如，羟基乙酸淀粉钠，交联羧甲基纤 维素），表面活性剂或分散剂。合适的粘合剂包括：淀粉，凝胶，天然糖例如葡萄糖或乳 糖，玉米甜味剂，天然和合成胶例如阿拉伯胶、黄芪胶或海藻酸钠，羧甲纤维素，聚乙二醇， 石蜡，等等.
[0160] 用于这些剂型中的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯 化钠等等。崩解剂包括，例如，淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等等。模制片可以如 下制备：在合适的机械中，将用惰性液体稀释剂湿润的粉末活性组分的混合物进行模压。
[0161] 可以任选将片剂包衣或刻痕，并且可以进行配制，以便提供活性组分的缓慢或控 制释放。片剂也可以任选具有肠溶衣，以便在不同于胃的肠管部分中释放。
[0162] 可以用于配制本发明口服剂型的示范性的可药用载体和赋形剂描述在美国专利 3, 903, 297 (Robert，1975年9月2日颁布）中，以其全部结合到本文中作为参考。用于制备 本发明中所使用剂型的技术和组合物描述在下面的参考文献中：7 Modem Pharmaceutics， Chapters 9 andlO(Banker&Rhodes， Editors，1979) ;Lieberman 等人，Pharmaceutical Dosage Forms :Tablets (1981)；和 Ansel，Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms 2nd Edition(1976)〇
[0163] 适于肠胃外给药的制剂包括与预定接受者的血液等渗的水和非水制剂；和水与非 水的无菌混悬剂，其可以包括设计的悬浮系统，以便使化合物靶向血液组分或一个或多个 器官。制剂可以提供在单位剂量或多剂量密封容器中，例如，安瓿瓶或管瓶。临时的注射溶 液和混悬剂可以用先前描述种类的无菌粉末、颗粒和片剂制备。肠胃外和静脉内形式也可 以包含矿物质及其它物质，使它们与所选择的注射或递送系统的类型相容。
[0164] 尽管参考具体实施方案说明和描述了本发明，但本领域技术人员应该理解，在不 背离由附加权利要求所涵盖的本发明的精神和范围的条件下，可以对其进行形式和细节上 的各种改变。
【主权项】
1. β-葡聚糖在制备药物中的用途，该药物用于提高患者的下列中的一或多种的强度： 紧张、忧郁、愤怒、疲劳、活力和紊乱，其中所述患者经历了运动压力或中度至高度水平的生 活方式压力。2. 权利要求1的用途，其中β-葡聚糖衍生自于酵母。3. 权利要求1的用途，其中每天给予β-葡聚糖。4. 权利要求1的用途，其中β-葡聚糖是颗粒β-葡聚糖。5. 权利要求1的用途，其中每天给予患者250mg或500mg的β-葡聚糖。
【专利摘要】本申请涉及β-葡聚糖用于上呼吸道感染症状和心理健康。本发明进行了涉及安慰剂对照的双盲设计的研究，以便评价β-葡聚糖组合物对上呼吸道感染和心理健康的效果。在这些研究的报道周期期间，基于POMS调查，治疗组中的受试者具有更少的URTI症状、更好的整体健康状况和更积极的心理评价。
【IPC分类】A61P25/00, A61K31/716, A61P25/22
【公开号】CN105326852
【申请号】CN201510514507
【发明人】D.科克斯, S.塔尔波特
【申请人】生物高聚物工程公司Dba生物治疗公司
【公开日】2016年2月17日
【申请日】2008年9月29日
【公告号】CA2700922A1, CA2700922C, CN101873860A, CN102309503A, CN102309503B, EP2205250A1, EP2205250A4, EP2205250B1, US20110112048, WO2009042230A1