明】
[0093] 图1.由成人骨髓单个核细胞（BMMNC)共表达TNAP(STR0-3)和间充质前体细胞标 志物STR0-1*。双色免疫荧光和流式细胞术通过孵育STR0-1MACS-选择的BMMNC来进行， 用与FITC结合的山羊抗-鼠IgM抗体间接标记（X轴），以及STR0-3mAb(鼠IgGl)用与PE 结合的山羊抗-鼠IgG间接标记（y轴）。点状直方图代表以列表型（listmode)数据收集 的5X104个事件。将垂直线和水平线设定为反应水平〈利用在相同条件下处理的同f中型 匹配对照抗体_lB5(IgG)和1A6. 12(IgM)获得的1.0%平均荧光。结果证明，STR0-1*细胞 的较小群体共表达TNAP(右上象限），而剩余的STRO-Γ细胞不能与STR0-3mAb反应。
[0094] 图2.图示显示了代表性流式细胞直方图，其利用培养扩增的源自骨髓的猕猴 MPCs的单细胞悬液产生，相对于利用山羊抗-鼠IgM或偶联IgG的FITC二抗检测的同种 型（IgM、IgG2a和IgGl)阴性对照（虚线），所述细胞具有间充质干细胞标志物-STRO-1、STR0-4和⑶146的阳性细胞表面表达（实线）。代表性直方图还表明，猕猴MPCs缺少单核 细胞/巨噬细胞（CD14)、造血干/祖细胞（CD34)和成熟白细胞（CD45)标志物的细胞表面 表达。相比同种型对照，大于1%荧光的水平表示阳性。
[0095] 图3为评估MPC在治疗绵羊哮喘模型中的安全性和功效的研究时间轴图示。
[0096] 图4为显示生理盐水组和MPC处理组随着研究进程的早期哮喘反应（EAR)的一系 列图示。对照组及三个处理组（2500万，7500万和15000万oMPC)的总结EAR数据示于（A) 中。数据代表从对照生理盐水雾化激发后获取的基线阻力读数至过敏原激发后第一个小时 获取的最大阻力读数的阻力百分比变化。在整个试验的三个时机获取EAR读数：〇MPC/生 理盐水处理前2周（处理前）；〇MPC/生理盐水处理后1周（处理后1周）；以及oMPC/生 理盐水处理后4周（处理后4周）。（B)和（C)中的数据显示对照组与处理组之间从处理 前分别至处理后1周和处理后4周的EAR百分比变化。数据表示为平均值土SEM。对照组 和 7500 万oMPC组的N= 11 ;2500 万和 15000 万oMPC组的N= 10。#ρ〈0· 01*ρ〈0· 05。
[0097] 图5为显示生理盐水组和MPC处理组随着研究进程的晚期哮喘反应（LAR)的一 系列图示。对照组及三个处理组（2500万，7500万和15000万oMPC)的总结LAR数据示于 (A)中。数据代表从雾化过敏原激发前获取的基线阻力读数至过敏原激发后6小时获取的 阻力读数的阻力百分比变化。在整个实验的三个时机获取LAR读数：〇MPC/生理盐水处理前 2周（处理前）；oMPC/生理盐水处理后1周（处理后1周）；以及oMPC/生理盐水处理后4 周（处理后4周）。（B)和（C)中的数据显示对照组与处理组之间从处理前分别至处理后 1周和处理后4周的LAR百分比变化的比较。数据表示为平均值土SEM。对照组和7500万 oMPC组的N=11 ;2500万和15000万oMPC组的N=10。#ρ〈0· 01*ρ〈0· 05。
[0098] 图6为显示生理盐水组和MPC处理组随着研究进程的支气管高反应性（BHR)的一 系列图示。对照组及三个处理组（2500万，7500万和15000万oMPC)的总结BHR数据示于 ㈧中。y轴上的BHR数据代表诱导100%阻力变化所需的卡巴胆碱的呼吸单位平均数目。 在整个实验的三个时机获取BHR读数：〇MPC/生理盐水处理前2周（处理前）；〇MPC/生理 盐水处理后1周（处理后1周）；以及oMPC/生理盐水处理后4周（处理后4周）。（B)和 (C)中的数据显示对照组与处理组之间从处理前分别至处理后1周和处理后4周的BHR百 分比变化的比较。（D)中的数据显示对照组与合并的处理组之间的BHR数据比较。数据表 示为平均值土SEM。对照组和7500万oMPC组的N= 11 ;2500万和15000万oMPC组的N= 10。*ρ〈0·05**ρ〈0·01。
[0099] 图7为显示生理盐水组和MPC处理组随着研究进程的支气管肺泡灌洗（BAL)液中 嗜酸性粒细胞的一系列图示。数据表示为嗜酸性粒细胞百分比的总结（A)，处理后1周（C) 和4周⑶时，以及对照组相比合并的处理组（E)的嗜酸性粒细胞从处理前的百分比变化。 嗜酸性粒细胞/mL示于（B)中。数据表示为平均值土SEM。对照组和7500万oMPC组的N =11 ;2500 万和 15000 万oMPC组的N= 10。*ρ〈0· 05, **ρ〈0· 01。
[0100] 图8为显示生理盐水组和MPC处理组随着研究进程的支气管肺泡灌洗（BAL)液中 嗜中性粒细胞的一系列图示。数据表示为嗜中性粒细胞百分比的汇总（A)和嗜中性粒细胞 /mL(B)。数据表示为平均值土SEM。对照组和7500万oMPC组的N= 11 ;2500万和15000 万oMPC组的N= 10。*ρ〈0· 05, **ρ〈0· 01，***ρ〈0· 005。
[0101] 图9为显示生理盐水组和MPC处理组随着研究进程的支气管肺泡灌洗（BAL)液中 巨噬细胞的一系列图示。数据表示为巨噬细胞百分比的汇总（A)和巨噬细胞/mL(B)。数据 表示为平均值土SEM。对照组和7500万oMPC组的N= 11 ;2500万和15000万oMPC组的N =10〇
[0102] 图10为显示生理盐水组和MPC处理组随着研究进程的支气管肺泡灌洗（BAL)液 中淋巴细胞的一系列图示。数据表示为淋巴细胞百分比的汇总（A)和淋巴细胞/mL(B)。数 据表示为平均值土SEM。对照组和7500万oMPC组的N= 11 ;2500万和15000万oMPC组 的N= 10〇
[0103] 图11为显示哮喘绵羊血清中IgE水平的一系列图示。ELISA数据显示试验绵羊血 清中HDM-特异性IgE的平均吸光度（Abs)水平。数据表示为平均值土SEM，并且显示oMPC 处理之前和之后的HDM-IgE水平比较（A)，在1周（B)和4周（C)时IgE水平从处理前的 百分比变化。分别在实验第51天、72天和93天从所有绵羊采集处理前、处理后1周和处 理后4周的血清。对照组和7500万oMPC组的N= 11 ;2500万和15000万oMPC组的N= 10。*ρ〈0·05，**ρ〈0·01。
[0104] 发明详述
[0105] 一般抟术和所诜宙义
[0106] 在本说明书中，除非另有明确说明或者上下文另有要求，提及单一步骤、物质组合 物、步骤组或物质组合物的组应当理解为包括一个和多个（即一个或多个）此类步骤、物质 组合物、步骤组或物质组合物的组。
[0107] 除非另有明确说明，本文描述的各个实例加以适当的修改可适用于本申请其他的 每一个实例。
[0108] 除了具体描述的那些外，本领域技术人员应当理解，可对本公开及其单个实例进 行变型和修改。应当理解本公开包括所有这类变型和修改。本公开还单独或整体地包括本 说明书提及的或说明的所有步骤、特征、组合物和化合物，以及所述步骤或特征的任何和所 有组合，或任何两个或更多个所述步骤或特征。
[0109] 本公开不限于本文包括的本公开的具体实例的范围，其仅试图用于例证目的。功 能等同的产品、组合物和方法明显在本文所述的本公开及其实例的范围内。
[0110] 除非另有说明，利用分子生物学、微生物学、病毒学、重组DNA技术、溶液中的肽合 成、固相肽合成和免疫学的常规技术实施本公开，不需要过多的实验过程。此类操作描述 于，例如，Sambrook,Fritsch&Maniatis,MolecularCloning:ALaboratoryManual,Cold SpringHarborLaboratories,NewYork,SecondEdition(1989)，整个I、II和III 卷；DNACloning:APracticalApproach,Vols.IandII(D.N.Glover,ed. , 1985),IRL Press,Oxford,全文；01igonucleotideSynthesis:APracticalApproach(M. J.Gait,ed, 1984)IRLPress,Oxford,全文，尤其是其中Gait的文章，ppl-22;Atkinson etal，pp35_81;Sproatetal，pp83-115;和Wuetal，pp135-151 ;4·Nucleic AcidHybridization:APracticalApproach(B.D.Hames&S.J.Higgins编,1985)IRL Press,Oxford,全文；ImmobilizedCellsandEnzymes:APracticalApproach(1986) IRLPress,Oxford,全文；Perbal,B.，APracticalGuidetoMolecularCloning(1984)； MethodsInEnzymology(S.ColowickandN.Kaplan编,AcademicPress,Inc.),整 个系列；J·F.RamalhoOrtigao,TheChemistryofPeptideSynthesis^Knowledge databaseofAccesstoVirtualLaboratorywebsite(Interactiva,Germany)；Sa kakibara,D. ,Teichman,J. ,Lien,E.LandFenichel,R.L. (1976).Biochem.Biophys. Res.Commun. 73336-342 ;Merrifield，R.B. (1963) ·J.Am.Chem.Soc. 85, 2149-2154 ; Barany,G.andMerrifield,R.B. (1979),ThePeptides(Gross,E.andMeienhofer,J. 编），￥〇1.2，卩卩.1-284，厶。&(161]1；[。？代88，如￥￥04.12.彻118。113.编（1974)35011:11686￥011 PeptideninHouben-ffeylsMetodenderOrganischenChemie(Miller,E.编），vol.l5, 第 4 版，第 1 和 2 部分，Thieme,Stuttgart;Bodanszky,M. (1984)PrinciplesofPeptide Synthesis,Springer-Verlag,Heidelberg；Bodanszky,M. &Bodanszky,A. (1984)The PracticeofPeptideSynthesis,Springer-Verlag,Heidelberg；Bodanszky,M. (1985) Int.J.PeptideProteinRes.25, 449-474；HandbookofExperimentalImmunology,Vols. I_IV(D.M.WeirandC.C.Blackwell编，1986,BlackwellScientificPublications);以 及AnimalCellCulture:PracticalApproach,第3版（JohnR.W.Masters编，2000)，ISBN 0199637970,全文。
[0111] 在本说明书中，除非上下文另有要求，单词"包括（comprise)"或变型如"包括 (comprises) "或"包括（comprising) "，应当理解为意指包括所述的步骤或元素或整体 (integer)，或者步骤或元素或整体的组，而不排除任何其他步骤或元素或整体，或者元素 或整体的组。
[0112] 如本文所用，术语"源自"应当理解为表示指明的整体（integer)可以获自特定来 源，虽然不一定直接来自该来源。在源自STR0+细胞和/或其后代细胞的可溶性因子的情 形下，该术语应当理解为指STR0+细胞和/或其后代细胞的体外培养期间产生的一种或多 种因子，例如蛋白、肽、糖类等。
[0113] 术语"呼吸病症"应当理解为包括降低个体肺功能的任何疾病或病症，包括，例如 哮喘、慢性支气管炎、肺气肿、囊性纤维化、呼吸衰竭、肺水肿、肺栓塞、肺高压（高血压）、肺 炎和结核病（TB)、肺癌、肺硬化和疤痕（例如，由药物、毒物、感染或辐射引起）、来自非正常 大气压（例如，由机械通气装置导致）的肺部疾病。在一实例中，呼吸病症是一种慢性肺部 病症和/或与肺部炎症有关的肺部病症，例如，肺部病症是哮喘、C0PD或囊性纤维化或肺纤 维化或细支气管炎或肺泡炎或血管炎或结节病。在另一实例中，病症与个体的肺重塑或纤 维化有关，例如所述病症是肺纤维化（例如，特发性肺纤维化）或哮喘。
[0114] 如本文所用，术语"哮喘"应被理解为意指特征为阵发性或持续性呼吸困难、胸闷、 喘息、咳痰和咳嗽的疾病，与可变气流受限和对内源性或外源性刺激的气道高反应性有关 (加拿大哮喘指南），和/或特征为导致喘息、呼吸急促、胸闷和咳嗽反复发作（特别是在夜 间或清晨）的气道高反应性、伴随有可变气流阻塞的病症，，其经常自发地或通过治疗是可 逆的（全球哮喘防治倡议（TheGlobalInitiativeforAsthma))。
[0115] 如本文所用，术语"重度哮喘"将被理解为意指吸入高至极高剂量的皮质类固醇且 使用或不使用口服皮质类固醇而良好控制的哮喘症状；"极重度哮喘"将被理解为意指尽管 吸入和摄入极高剂量的皮质类固醇且需要或不需要其他治疗而良好控制或未良好控制的 哮喘症状。对于这些限定，每日吸入高和极高剂量的皮质类固醇（近似等效剂量）如下定 义：高剂量为二丙酸倍氯米松，1000至2000μg;氟替卡松，500至1000μg;以及布地奈德， 800至1600μg，而极高剂量为氟替卡松，1000至2000μg;以及布地奈德，1600至3200μg。
[0116] 如本文所用，术语"难治性哮喘"包括具有"致命"或"接近致命"性哮喘的患者， 以及之前被描述为"重度哮喘"和"类固醇-依赖性和/或抗性哮喘"、"难控制性哮喘"、"控 制不佳的哮喘"、"脆性（brittle)哮喘"或"不可逆的哮喘"的哮喘亚组。根据美国胸科协 会指南，满足以下描述的一种或两种主要标准和两种次要标准时可定义为难治性哮喘。主 要标准是：为了实现控制轻中度持续性哮喘的水平：（1)用连续或接近连续（每年多50% ) 口服皮质类固醇治疗；（2)需要用高剂量吸入皮质类固醇治疗。次要条件是：（1)除了吸入 皮质类固醇外，需要每天用控制药物治疗，如LABA，茶碱或白三烯拮抗剂；（2)需要每天或 接近每天使用短效β激动剂的哮喘症状；（3)持续气道阻塞（FEV1〈80%预计；日呼气峰流 量（PEF)变异率>20% ); (4)每年一次或多次因哮喘急诊就诊；（5)每年三次或更多次口 服类固醇"爆发"；（6) 口服或吸入皮质类固醇剂量减少< 25%，迅速恶化；（7)过去接近致 命的哮喘事件。为了定义难治性哮喘的目的，药物（μg/d)和剂量（puffs/d)的定义如下： (a)二丙酸倍氯米松>1，260>40puffs(42μg/吸入）>puffs(84μg/吸入）；（b)布地奈德 >1，200>6puffs; (c)氟尼缩松 2, 000>8puffs; (d)丙酸氟替卡松 >880>8puffs(110μg)，>4 puffs(220yg) ;(e)醋酸曲安奈德 >2,000>20puffs。
[0117] 如本文所用，术语"急性哮喘"或"过敏性哮喘"涉及由过敏原（如尘螨粪便或花 粉）激活位于呼吸道的下游气道粘膜下方的肥大细胞引起的哮喘。肥大细胞的活化引起刺 激鼻腔上皮以产生粘液的颗粒释放，并随后收缩气道内的平滑肌。这种平滑肌收缩使气道 收缩，导致哮喘特征的喘息。
[0118] "慢性哮喘"并非由过敏原引起，而是由急性哮喘获得的炎症导致。急性哮喘的整 体效应引起慢性炎症，其导致粘膜上皮对环境反应变得过敏感。因而简单的环境因子，如烟 雾，可刺激过敏感的上皮产生大量的粘液和收缩。
[0119] 如本文所用，术语"特发性肺纤维化"应被理解为意指以肺部的支撑框架（间质） 纤维化为特征的未知起源的慢性进行性肺病。常见症状是进行性呼吸困难（难呼吸），还包 括干咳、杵状指（手指损毁）以及啰音（吸入期间用听诊器听到肺部的爆裂音）。关于特发 性间质性肺炎的2002ATS/ERS多学科共识声明提出以下无需肺活检确诊IPF的标准：
[0120] ?主要标准（满足全部4种）：
[0121] 〇排除其他已知原因的间质性肺疾病（药物，暴露，结缔组织病）；
[0122] 〇具有限制（降低的肺活量）和气体交换受损（p02，p(A_a)02，DLC0)证据的异常 肺功能检查；
[0123] 〇高分辨率CT扫描具有极小磨玻璃样的双侧基底（Bibasilar)网状结构异常；以 及
[0124] 〇经支气管肺活检或支气管肺泡灌洗（BAL)显示没有特征来支持另一诊断。
[0125] ?次要标准（4种中满足3种）：
[0126] 〇年龄 >50;
[0127] 〇另外无法解释的活动性呼吸困难起病隐匿；
[0128] 〇患病持续>3个月；以及
[0129] 〇双侧基底吸气性爆裂音。
[0130]术语"恶化"应被理解为意指呼吸病症的呼吸症状扩大，如哮喘发作。
[0131] "早期过敏反应"（或哮喘反应）通常在接触过敏原后2小时或1小时或30分钟 或10分钟或1分钟内发生，并且通常又被称作速发型过敏反应或I型过敏反应。反应由以 下引起：结合至肥大细胞FcεRI受体的过敏原特异性IgE分子交联之后，由肥大细胞通过 称为脱颗粒的过程释放组胺和肥大细胞颗粒蛋白以及产生白细胞三烯、前列腺素和细胞因 子。这些介质影响导致发痒的神经细胞，导致收缩的平滑肌细胞（引起过敏性哮喘中观察 到的气道狭窄），导致粘液产生的杯状细胞，以及导致血管舒张和水肿的内皮细胞。
[0132] "晚期过敏反应"（或哮喘反应）通常在接触过敏原之后6-12小时或8-12小时出 现，并且由例如肥大细胞介导。早期反应的产物包括趋化因子和作用于内皮细胞的分子，并 引起它们表达细胞间粘附分子（如血管细胞粘附分子和选择素），这一起导致白细胞从血 液招募至过敏反应的位置并被激活。通常，在过敏反应中所观测到的浸润细胞包含高比例 的淋巴细胞，特别是嗜酸性粒细胞。所招募的嗜酸性粒细胞脱颗粒，释放大量细胞毒性分子 (包括主要碱性蛋白和嗜酸性粒细胞过氧物酶），以及产生大量细胞因子如IL-5。所招募的 T-细胞通常为Th2种类，它们产生的细胞因子导致进一步招募肥大细胞和嗜酸性粒细胞， 并且在浆细胞同种型转换为IgE，其将结合至肥大细胞FcεRI受体并引发个体进一步的过 敏反应。
[0133] 如本文所用，术语"有效量"应当被理解为指足够量的STRO-Γ细胞和/或其后代 细胞和/或源自它们的可溶性因子，其足以减缓本文所述的呼吸病症的一种或多种症状。
[0134] 如本文所用，术语"治疗有效量"应当被理解为足够量的STRO-Γ细胞和/或其后 代细胞和/或源自它们的可溶性因子，其足以治疗呼吸病症，即，使得个体不再满足呼吸病 症或其恶化的临床标准。
[0135] 如本文所用，术语"预防有效