0度的食用酒精，80°C加热回流提取70min，滤去残 渣。将滤液浓缩成浸膏，滤液与浸膏的比值为5:1，而后将浸膏和10倍体积的水混合，制备成 悬浮液，用0.9倍悬浮液体积的石油醚萃取3次。取萃余相，用0.7倍体积的乙酸乙酯萃取3 次。取萃余相，用〇. 5倍体积的正丁醇萃取3次。取萃余相，浓缩成浸膏，即为水相浸膏。
[0090] 实施例13
[0091]试验动物:昆明种小鼠，由海南医学院实验动物中心提供，雌雄各半，体重18_22g。
[0092] 1、本发明不同宿主薜荔提取物对高血糖小鼠降血糖功能的影响
[0093] 高血糖小鼠80只，随机分为11组，正常对照组：生理盐水灌胃；低、中、高剂量阳性 对照阿卡波糖组:分别以l〇〇mg/kg/天、200mg/kg/天和400mg/kg/天的剂量连续灌胃10天； 低、中、高剂量实施例1~实施例12制备的浸膏：分别以100mg/kg/天、200mg/kg/天和400mg/ kg/天的剂量连续灌胃10天。末次给药空腹6h后自小鼠眼眶静脉丛取血，分离血清，用葡萄 糖氧化酶法测定血清中葡萄糖的含量。
[0094]表1本发明薜荔提取物对高血糖小鼠血糖的影响
[0098] 注:数据表示为每组10只动物平均值土标准差。与空白对照组比较:*p〈0.05，**p〈 O-Ol0
[0099] 本次实验检测了用100、200、400mg/kg/d剂量的实施例1~实施例12制备的薜荔提 取物组方灌胃对正常小鼠的血糖变化的影响，实验结果见表1。与空白对照组相比，随着薜 荔提取物剂量的增加，小鼠血清中葡萄糖含量逐渐降低。
[0100] 实施例14薜荔提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性检测
[0101] α-葡萄糖苷酶属于低聚糖水解酶类，它包括麦芽糖酶，异麦芽糖酶，蔗糖酶等，可 催化底物非还原端而释放α-葡萄糖，抑制其活性可阻止体内葡萄糖吸收，进而降低餐后血 糖水平。
[0102] 1、试验材料
[0103] 实施例1~实施例12制备的提取物
[0104] 试验方法
[0105] 本测试在紫外分光光度计上进行，反应体系为:0.1mmol/L的磷酸钾缓冲液(PH值 6.8)0.5ml，再加入0.2U/mL α-葡萄糖苷酶IOOul，0.5ml样品溶液(实施例1~实施例12)，混 匀，37°C恒温15min后，加入2.5mmol/L对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)0.5ml，混匀后 37°C恒温15min。最后加入1ml 0.2mol/L的Na2CO3溶液终止反应，于405nm波长下测OD值，重 复3次，取平均值。以阿卡波糖为阳性对照。按公式计算抑制率和IC 5q值。以样品浓度为横坐 标，抑制率为纵坐标，利用origin软件拟合出抑制率的曲线图。α-葡萄糖苷酶抑制活性结果 以IC 5Q(半数抑制浓度)表示，当抑制率为50%时的样品浓度也就是α-葡萄糖苷酶抑制活性 的IC5Q值。
[0107] A空白：不加待测样品反应后的吸光值
[0108] A样品：加入待测样品反应后的吸光值
[0109] A背景：只加待测样品反应后的吸光值
[0110] 检测结果如表2所示：
[0111] 表2本发明薜荔提取物组方对α-葡萄糖苷酶活性的影响
[0112]
[0115] 注:数据表示为重复3次平均值土标准差，与阳性对照组比较:*p〈0.05，#p〈0.01。
[0116] 结果表明，本发明提供的不同宿主薜荔提取物对α-葡萄糖苷酶均具有明显的抑制 作用，其抑制作用明显优于(Ρ<〇.05)阳性对照阿卡波糖。
[0117] 实施例15薜荔提取物组方对小鼠的毒性研究
[0118] 1、实验材料
[0119] 根据本发明实施例1至12制备的提取物。
[0120] 试验动物:昆明种小鼠，由海南医学院实验动物中心提供，雌雄各半，体重18_22g。
[0121] 2、取正常昆明种小鼠120只，随机分成12组，每组10只，雌雄各半。灌胃前，禁食过 夜(不限制饮水）。分别以实施例1至12制备的薜荔提取物组方100、200、400mg/kg/天的剂量 连续灌胃10天。并持续观察15天，记录小鼠的中毒表现和死亡数。根据小鼠死亡数，按概率 单位-对数图解法求出半数致死量(LD50)，并确定毒性分级。
[0122] 实验结果表明，小鼠毒性试验过程中，病理学检查心、肝、肾、脾、肺、胃、十二指肠、 大肠、小肠、肾上腺和生殖器等脏器，动物均无不良反应，也无动物死亡。LD50均大于 5000mg/kg(体重），属于无毒类物质。
[0123] 取本发明实施例1至实施例12制备的提取物进行上述试验，试验结果与实施例制 备的提取物相近，无显著差异(P>〇.05)，表明本发明提供的组合物在小鼠毒性试验过程 中，病理学检查心、肝、肾、脾、肺、胃、十二指肠、大肠、小肠、肾上腺和生殖器等脏器，动物均 无不良反应，也无动物死亡。LD50均大于5000mg/kg(体重），属于无毒类物质。
[0124] 实施例16
[0125] 取本发明实施例1制备得到的提取物、玉米淀粉、硬脂酸镁，经粉碎、过筛(80~100 目）后混合，与7%淀粉浆制成软材，然后将软材上螺旋挤压制粒机制粒，得到片剂。
[0126] 实施例17
[0127] 取本发明实施例2提供的提取物、玉米淀粉加入三维运动混合机中混合均匀，时间 不得少于20min，使用干法制粒机制粒，最后加入硬脂酸镁后总混lOmin，至物料混合均一后 出料。用〇号或1#明胶空心胶囊进行充填，每粒装量350mg，制得胶囊剂。
[0128] 实施例18
[0129] 取本发明实施例3提供的提取物、将PEG6000、S-40混合后加热至60°C使熔融，调节 滴头大小，以_25°C~5°C的二甲基硅油或液体石蜡为冷却相，进行滴制，过滤，洗涤，选丸， 即得丸剂。
[0130] 实施例19
[0131 ]取本发明实施例4提供的提取物粉碎后过80~100目筛，与3 %质量的蒸馏水混合， 再以挤压方式通过14~22目筛网(板），制成均匀的颗粒、干燥制得颗粒剂。
[0132] 实施例20
[0133] 取本发明实施例7提供的提取物、柠檬酸、三氯蔗糖与水混合，煮沸、过滤后加入山 梨酸钾，制得口服液剂。
[0134] 实施例21
[0135] 取本发明实施例8提供的提取物、蔗糖、水混合，煮沸、过滤后加入山梨酸钾，制得 糖浆剂。
[0136] 实施例22
[0137] 取本发明实施例9提供的提取物、单糖浆、水混合，煮沸、过滤后加入山梨酸钾，制 得饮料液。
[0138] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种薜荔提取物，其特征在于，由薜荔经过乙醇提取得到，所述薜荔为薜荔的枝叶和 果实中的一种或两种。2. -种薜荔提取物的制备方法，包括： 将薜荔用乙醇提取，得到薜荔提取物;所述薜荔为薜荔的枝叶和果实中的一种或两种。3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述乙醇为体积百分含量为70%~ 80%的乙醇水溶液。4. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述乙醇与薜荔的质量比为(4~10): 1〇5. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述提取为加热回流提取。6. 根据权利要求5述的制备方法，其特征在于，所述加热温度为60~90°C，时间为60~ 120min〇7. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述提取后还包括浓缩后依次用石油 醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取。8. -种防治高血糖的食品，其特征在于，包括如权利要求1所述的薜荔提取物或权利要 求2~7任一项所述的制备方法制备得到的薜荔提取物。9. 一种降血糖的药物，其特征在于，包括如权利要求1所述的薜荔提取物或权利要求2 ~7任一项所述的制备方法制备得到的薜荔提取物和药学上可接受的辅料。10. -种薜荔提取物在制备降血糖的药物和/或食品中的应用。
【专利摘要】本发明提供了一种薜荔提取物，由薜荔经过乙醇提取得到，所述薜荔为薜荔的枝叶和果实中的一种或两种。本发明薜荔提取物是由薜荔为薜荔的枝叶和果实中的一种或两种提取得到，来源天然，相对于现有的西药无副作用，并且本发明提供的通过薜荔的枝叶和果实中的一种或两种经过乙醇提取得到的薜荔提取物具有良好的降糖效果。
【IPC分类】A61K36/60, A61P3/10, A23L33/105
【公开号】CN105434535
【申请号】CN201610009003
【发明人】王佩, 宋希强, 梅文莉, 戴好富, 王辉, 谭彩银
【申请人】中国热带农业科学院热带生物技术研究所
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2016年1月6日