包括野山参培养根油作为活性成分的化妆品组合物，其制备方法及使用其的化妆方法
【专利摘要】本发明公开了一种包括野山参培养根油作为活性成分的化妆品组合物，一种用于制备所述化妆品组合物的方法，以及一种使用所述化妆品组合物的化妆方法。所述化妆品组合物由于使用了天然材料而可表现出保湿功效，并且含有野山参培养根油，因而表现出消炎功效，从而表现出了卓越的皮肤保湿、消炎和抗皱功效，而不会刺激皮肤。
【专利说明】
包括野山参培养根油作为活性成分的化妆品组合物，其制备 方法及使用其的化妆方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种包括野山参培养根油作为活性成分的化妆品组合物，一种用于制 备所述化妆品组合物的方法，以及一种使用所述化妆品组合物的化妆方法。
【背景技术】
[0002] 随着化妆品行业中的近年来进展，对皮肤有益的天然材料受到关注，并且由此发 展了对皮肤具有保湿或者消炎功效的各种材料。特定地，润肤材料包括天然聚合物如动物 和植物萃取物、胶原蛋白等等，皮肤细胞激活剂如氨基酸、维生素等等，或者保湿剂如甘油、 1，3_丁二醇，等等（韩国专利申请公开号2012-0058798)，并且以天然保湿因子(natural moisturizing factors，NMF)和构成角质层的细胞间脂质，以及有效并且因此常用的多元 醇来进一步举例说明。然而，此类有益于皮肤保湿的材料的使用已局限于化妆品组合物中， 这是由于所述材料无法确保长期使用后的皮肤安全的问题。皮肤衰老可由皮肤水分流失引 起。皮肤衰老的原因被大致分类为内源性衰老或者外源性衰老。内源性衰老是其中皮肤再 生和胶原蛋白合成的速率由于根据生物钟管理皮肤细胞的基因的作用而随着时间推移逐 渐降低的衰老过程，而外源性衰老是受外界因素影响的衰老过程，例如皮肤暴露于紫外光、 空气污染、活性氧以及应激。随着皮肤衰老进展，皮肤的真皮组织变薄弱，皮肤细胞的结合 程度显著减小，皮肤弹性所涉及的胶原蛋白和弹性蛋白的量极大地减少，脸形变化，并且皮 肤的干燥度显著地增大，由此皮肤变得粗糙和起皱。此外，化妆品可用于减轻皮肤炎症如特 应性皮炎。用于减轻此类炎症的材料可包括非留族材料如氟灭酸、布洛芬、苄达明、消炎痛 等等，并且同时留族材料如泼尼松龙、地塞米松等等，以及尿囊素，甘菊环，ε_氨基己酸，氢 化可的松，甘草酸及其衍生物(β_甘草酸、甘草酸衍生物)也已知具有消炎功效。如目前已证 明的，机体内的炎症反应已知与COX(环氧酶)酶的活性有关。COX酶是存在于活体内的前列 腺素的生物合成中所主要涉及的，并且其实例包括1型(C0X-1)和2型(COX-2) Χ0Χ-1通常存 在于组织如胃肠道或者血小板中并且负责维持正常的内环境稳定，而C0X-2在炎症或者其 它免疫应答中由促细胞分裂原或者细胞因子在细胞中瞬时并且快速地表达。此外，强炎症 介质，即氧化氮(NO)，是由NO合成酶(NOS)从L-精氨酸产生的，并且在各种类型的细胞中因 外部应激物(例如，紫外光，或者材料如内毒素或者细胞因子)而形成。此类炎症刺激物增加 了胞内诱导NOS(iNOS)的表达，从而诱导了胞内NO的产生，由此激活巨噬细胞，因而造成了 炎症应答。因此，为了有效地减轻炎，正在对能够抑制NO产生的材料进行研究。由此开发了 已知不仅抑制C0X-2还抑制C0X-1的消炎材料，从而表现出副作用如胃肠道功能紊乱。
[0003] 正在积极地开发含有天然来源的生理活性材料的化妆品产品，以实现皮肤保湿和 减轻皮肤炎症，但是所述化妆品产品的功效是轻微的，或者所述化妆品产品的使用可能伴 有某些风险。因此，需要开发具有高皮肤保湿和消炎功效的低风险材料。
[0004] [引文列表]
[0005] [专利文献]
[0006] (专利文献I):韩国专利申请公开号2012-0058798
【发明内容】
[0007] 因此，本发明已经对相关领域中遇到的上述问题取得了成果，并且本发明的目的 是提供一种包括天然来源的生理活性材料作为作为活性成分的化妆品组合物，以及一种用 于制备所述化妆品组合物的方法。
[0008] 为了实现上述目的，本发明提供了包含野山参培养根油作为活性成分的化妆品组 合物。
[0009] 在本发明的一个实施例中，所述化妆品组合物可用于皮肤保湿、消炎或者抗皱。
[0010] 在本发明的另一实施例中，化妆品组合物可含有浓度为〇. lmg/ml至lOOmg/ml的野 山参培养根油。
[0011] 在本发明的又一实施例中，化妆品组合物可提供于以下物质的调配物中：柔肤剂、 皮肤营养液、营养霜、按摩霜、精华素、啫喱霜、面膜(pack)、乳液、蜜粉(face powder)、腮 红、眼影、睫毛膏、遮瑕霜(skin cover)、唇膏、唇彩或者粉底。
[0012] 此外，本发明提供了用于制备化妆品组合物的方法，所述方法包含:在溶剂中熟化 野山参培养根或者野山参培养根渣；以及去除溶剂，从而得到野山参培养根油。
[0013] 在本发明的一个实施例中，所述化妆品组合物可用于皮肤保湿、消炎或者抗皱。
[0014] 在本发明的另一实施例中，溶剂可包括水、C1-C4醇、1，3_丁二醇、丙酮、乙酸乙酯、 乙酸丁酯、己烷，或者氯仿。
[0015] 此外，本发明提供一种化妆方法，包含施用上述化妆品组合物至皮肤。
[0016] 根据本发明，化妆品组合物包括天然材料以由此确保保湿功效，并且由于野山参 培养根油的使用而赋予其消炎功效，并且由此可表现出卓越的保湿和消炎功效，而无皮肤 刺激。
[0017] 又，根据本发明，化妆品组合物可有效产生胶原蛋白，由此表现出抗皱功效。
【附图说明】
[0018] 无
【具体实施方式】
[0019] 本发明涉及一种包括野山参培养根油作为活性成分的化妆品组合物，以及涉及一 种用于制备所述化妆品组合物的方法。
[0020] 本发明人已经采用野山参培养根作为化妆品组合物材料，所述化妆品组合物材料 不会刺激皮肤并且含有有效的物理活性成分，即皂苷，并且由此被认为表现出皮肤保湿功 效、消炎功效和抗皱功效。通常，已知人参或红参含有丰富的皂苷，但是人参的缺点为需要 较长的栽培周期和重复栽培的困难性，这使得人参难以有效供应。然而，野山参培养根由于 其较短的培养周期和相对简单的生产过程而使得能够重复生产，并且其皂苷含量可在培养 期间通过诱导子处理来控制。因此，野山参培养根被视为很好的天然材料。随着天然野山参 的培养根经人工诱导和增殖，从野山参培养根中萃取的油已经被发现表现出高保湿、消炎 和抗皱功效，并且由此已经开发出来含有野山参培养根油的化妆品组合物。
[0021] 在下文中，将给出对本发明的详细描述。
[0022] 本发明提出了一种含有野山参培养根油作为活性成分的化妆品组合物。
[0023]化妆品组合物含有从已经通过人工诱导和增殖天然野山参的培养根而培养的野 山参培养根中萃取的油，并且因而用于皮肤保湿、消炎和抗皱。
[0024] 野山参培养根油可从野山参培养根或者野山参培养根渣获得，并且可具有0.1至 lOOmg/ml的浓度。野山参培养根油包括各种成分，并且包括油脂、植物留醇、磷脂和聚乙炔 作为主要成分。特定地，野山参培养根油包括以其总重量为基准，按重量计70至90份的油 月旨，按重量计0.1至15份植物留醇，按重量计0.1至10份磷脂，以及按重量计0.1至5份聚乙 块。
[0025] 所述化妆品组合物可提供于各种调配物中，并且优选地以例如以下调配物形式提 供:爽肤水(skin toner)、皮肤营养液(乳液）、营养霜、按摩霜、精华素、啫喱霜、面膜、乳液、 蜜粉、腮红、眼影、睫毛膏、遮瑕霜、唇膏、唇彩或者粉底。
[0026] 此外，本发明提出了用于制备化妆品组合物的方法，所述方法包含:在溶剂中熟化 野山参培养根或者野山参培养根渣，以及去除溶剂，从而得到野山参培养根油。
[0027] 所述方法还可包括在溶剂中熟化野山参培养根或者野山参培养根渣之后但是在 去除溶剂之前干燥和过滤野山参培养根或野山参培养根渣。此过滤可执行一次或多次以便 防止污染并且使得产品能够长期储存。
[0028] 在溶剂中熟化野山参培养根或者野山参培养根渣以及去除溶剂的步骤可以以下 方式执行:使野山参培养根或者野山参培养根渣在低温或者室温下浸入溶剂中并且储存预 定时段或者加热，由此可萃取野山参培养根油。萃取工艺不受特别限制，但优选地包括超声 波萃取、C〇2超临界萃取等等。
[0029] 溶剂可包括水、C1-C4醇、1，3_ 丁二醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、己烷，或者氯仿。 优选地使用己烷或者乙酸乙酯。
[0030] 在本发明的一个优选实施例中，野山参培养根油可通过以下步骤获得:将1至20L 溶剂添加至约Ikg的野山参培养根或者野山参培养根渣中，以及在ItC至35°C下，优选地在 24至35°C下，从所述野山参培养根或者野山参培养根渣萃取油达10分钟至24小时，优选地 达2小时至24小时。由此获得的萃取物经干燥、过滤并且另外减压浓缩，以去除溶剂。必要 时，经熟化的萃取物可在干燥和过滤后在室温下储存。
[0031] 此外，本发明提出了一种化妆方法，包含施用上述化妆品组合物至皮肤。
[0032] 本发明通过以下实例详细说明，以下实例仅阐述用于说明本发明。本发明不限于 此类实例并且可经不同地修改和改变。
[0033] 制备实例1
[0034]将20L己烷添加到Ikg干燥的野山参组织培养根中，在室温下充分熟化24小时，并 且使用滤纸(5C，185mm，由日本东洋滤纸株式会社(Toyo Roshi Kaisha, Ltd. ,Japan)制造） 过滤以获得滤液，所述滤液随后经减压浓缩以去除己烷，接着在室温下充分熟化24小时并 且用滤纸(5C，185mm，由日本东洋滤纸株式会社制造)过滤，从而得到野山参培养根油。 [0035] 制备实例2
[0036] 将20L己烷添加到Ikg干燥的野山参组织培养根渣(野山参培养根残渣主要由用水 或者溶剂萃取野山参培养根产生）中，在室温下充分熟化24小时，并且使用滤纸(5C，185mm， 由日本东洋滤纸株式会社制造)过滤以获得滤液，所述滤液随后经减压浓缩以去除己烷，接 着在室温下充分熟化24小时并且用滤纸(5C，185mm，由日本东洋滤纸株式会社制造)过滤， 从而得到野山参培养根渣油。
[0037] 制备实例3
[0038]将20L乙酸乙酯添加到Ikg干燥的野山参组织培养根中，在室温下充分熟化24小 时，并且使用滤纸(5C，185mm，由日本东洋滤纸株式会社制造)过滤以获得滤液，所述滤液随 后经减压浓缩以去除乙酸乙酯，接着在室温下充分熟化24小时并且用滤纸(5C，185mm，由日 本东洋滤纸株式会社制造)过滤，从而得到野山参培养根油。
[0039] 制备实例4
[0040]将20L乙酸乙酯添加到Ikg干燥的野山参组织培养根渣中，在室温下充分熟化24小 时，并且使用滤纸(5C，185mm，由日本东洋滤纸株式会社制造)过滤以获得滤液，所述滤液随 后经减压浓缩以去除乙酸乙酯，接着在室温下充分熟化24小时并且用滤纸(5C，185mm，由日 本东洋滤纸株式会社制造)过滤，从而得到野山参培养根渣油。
[0041] 测试实例1:测量野山参培养根油的保湿功效
[0042] 为了评估根据本发明的化妆品组合物的保湿功效，测量皮肤的含水量。制备如下 表1所示的制备实例1至4中的含有或不含有油的调配物，制备后通过以下方法测量二十位 20岁至50岁女性在施用所述调配物之前和之后的皮肤含水量。具体地，使用皮肤含水量测 量计（角质仪（Corneometer) CM 825，德国库拉热和卡扎喀公司（Courage&Khazaka， Germany))通过皮肤电容来测定皮肤表面的含水量。将各个样品以2. Omg/cm2的浓度均匀地 施用于在测试前于室内等待1小时的受试者的一个上臂的一部分上，并且所述受试者的另 一上臂的相应部分上未施用样品，以用作对照。在施用之前和之后立即测量皮肤含水量，并 且在施用后1小时、3小时和5小时时测量皮肤含水量。结果显示在下表2中。如表2所示，在实 例1至4中的施用部分上测定值较高，由此表现了卓越的保湿功效。
[0043] [表1]
[0048] 测试实例2:测量野山参培养根油的消炎功效
[0049] 根据所释放的β-己糖胺酶的量来评估实例1至4和比较实例1的皮肤调配物的胞内 消炎功效。使用从ATCC(美国典型培养物保藏所(America Type Culture Collect)，美国） 购买并且在37°C和5^^02的条件下于细胞培养箱(ELITE II，瑞克股份有限公司（Revco)， 美国）中培养的人成纤维细胞系CCD-1064SK(CRL-2076)、小鼠巨噬细胞系RAW 264.7(TIB-71)以及大鼠肥大细胞系 RBL-2H3(CRL-2256)<XCD-1064SK、RAW264.7 和 RBL-2H3 的相应培养 基是从吉比克公司（Gibco)(美国）购买的IMDM(经伊思考夫（Iscove)改良的杜尔贝可 (Dulbecco)培养基）、DMEM(经杜尔贝可改良的伊格尔(eagle)培养基)和MEM(极限必需培养 基）。将FBS(胎牛血清，吉比克公司，美国）添加到各个培养基中（对于CCD-1064SK和RAW 264.7，将10%?83添加至培养基中，并且对于1^1^-2!13，将15%?83添加至培养基中），以及添 加1%的抗生素-抗真菌剂溶液(吉比克公司，美国），然后进行培养，用DNP-HSA(10μg/ml)处 理，反应1小时，并且在冰浴中静置10分钟，在此之后反应终止。将20yL上清液转移到96孔平 板中，添加80yL底物缓冲液（ImM 4-对硝基苯基-N-乙酰-b-D-氨基葡糖苷、0.05M柠檬酸钠， pH 4.5)，并且在37°C下培养30分钟，此后添加200yL停止液至各个孔中以终止反应，此后测 量在405nm下的吸光度。根据所释放的β-己糖胺酶的量的测量结果，如下表3所示，实例1至4 中所释放的己糖胺酶的量减少。因此，实例1至4可有效抑制炎症。
[0050][表3]
[0052] 测试实例3:细胞毒性试验 [0053] 3.1用于细胞毒性试验的细胞培养
[0054]使用从ATCC(美国典型培养物保藏所，美国）购买的人成纤维细胞系CCD-1064SK (〇^-2076)、小鼠巨噬细胞系1^￥ 264.7(1'18-71)以及大鼠肥大细胞系1^1^-2!13(〇^-2256)<XCD-1064SK、RAW 264.7和1^1^-2!13的相应培养基是从吉比克公司（美国）购买的頂01 (经伊思考夫改良的杜尔贝可培养基）、DMEM(经杜尔贝可改良的伊格尔培养基)和MEM(极限 必需培养基），并且各个培养基中添加 FBS(胎牛血清，吉比克公司，美国）（对于CCD-1064SK 和RAW 264.7,将10%FBS添加至培养基中，并且对于RBL-2H3,将15%FBS添加至培养基中）， 并且添加1%的抗生素-抗真菌剂溶液(吉比克公司，美国），从而培养细胞。所使用的所有细 胞是在37°C和5%的CO 2的条件下于细胞培养箱(ELITE II，瑞克公司，美国）中培养的。
[0055] 3.2野山参培养根油的细胞毒性试验
[0056] 如下使用MTT(噻唑蓝溴化四唑，西格玛公司（Sigma)，美国）方法（《免疫法杂志》 (J. Immunol.Methods)，141(1)，15(1991))来测量细胞毒性。MTT方法根据以下原理而用于 测量毒性或者细胞增殖:在活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶的作用下，黄色水溶盐MTT被还 原成蓝紫色水不溶性MTT甲臜。将用上述方法培养的CCK-1064SK成纤维细胞以I X IO5个细 胞/孔的密度接种到24孔平板(能肯公司（Nunc)，美国）中，培养1天，转移至无血清頂DMM 不同浓度添加各个制备实例1至4的油，并且培养24小时。将所制备的浓度为2.5mg/ml的MTT 溶液按〇. Iml/孔添加，并且使其在37°C下反应4小时，此后去除MTT溶液，并且按0.5ml/孔添 加 DMSO(二甲基亚砜）。在室温下溶解MTT甲臜，并且测量570nm处的吸光度，并且与阴性对照 的吸光度进行比较。结果显示在下表4中。如表4所示，各个制备实例1至4的野山参培养根油 在皮肤细胞CCK-1064SK中表现出了高细胞活力(viability)并且因此几乎没有细胞毒性。 [0057][表 4]
[0059] 测试实例4:测量野山参培养根油的胶原蛋白生物合成
[0060] 皮肤起皱是因为缺乏胶原蛋白造成的，并且胶原蛋白是构成皮肤真皮的主要蛋白 质并且作用于维持皮肤的结构和弹性。随着年龄增长，胶原蛋白的产生变少并且其分解增 强，由此引起了皮肤真皮层的凹陷，从而在皮肤中产生了皱纹。针对抗皱功效，评估胶原蛋 白的生物合成。
[0061] 4.1测量生物合成的胶原蛋白的量
[0062] 为了评估根据本发明的化妆品组合物的抗皱功效，执行使用成纤维细胞的胶原蛋 白生物合成促进测试(Sircol?可溶性胶原蛋白分析试剂盒(SircolTM Soluble Collagen Assay Kit))〇
[0063] 将所培养的人成纤维细胞等分到含有5%FBS的培养基中，以便在12孔细胞培养皿 中实现IX IO5个细胞/孔，并且随后培养24小时。此外，以含有2%FBS的培养基将野山参培 养根油稀释成不同浓度，添加至细胞，培养48小时，并且随后用于以下测试。为了确定成纤 维细胞中所合成的胶原蛋白量的实际增长，从拜尔科乐公司(Biocolor)购买了可溶性胶原 蛋白分析试剂盒，并且通过在产品手册中提到的测试方法来测量胶原蛋白量。胶原蛋白分 析试剂盒是根据染色试剂与胶原蛋白偶联的定量方法，其在细胞培养期间引入培养基中。 具体地，将Iml染色试剂(包括苦味酸和天狼猩红试剂的溶液)添加到IOOyL的培养上清液中 并且反应30分钟（取决于所产生的胶原蛋白量，可浓缩培养发酵液，或者可用Iml的染色试 剂与200yL的培养上清液反应）。天狼猩红作为阴离子染料而特异地与胶原蛋白偶联。在反 应30分钟后，以12,000 Xg或更大的离心力离心分离反应溶液10分钟，以使胶原蛋白-染料 复合物沉淀。向沉淀物中添加1.0ml的碱性试剂，并且由此使其在室温下溶解5分钟。使用吸 收式分光光度计(UVmax，分子仪器公司(Molecular Device)，美国）在540nm处测量上述溶 液的吸光度。结果显示于下表5中，并且与非测试组的吸光度进行比较以评估胶原蛋白生物 合成促进功效。
[0064] 「表5]
[0066] 下文是对用于皮肤保湿和炎症减轻的化妆品组合物的调配物的描述。
[0067] 示出了根据本发明含有野山参培养根油的化妆品组合物的调配物，但是本发明不 限于此。
[0068] 调配物实例1
[0069] 将含有野山参培养根油的化妆品组合物调配成柔肤剂，如下表6所示。
[0070] [表6]
[0080] 调配物实例4
[0081] 将含有野山参培养根油的化妆品组合物调配成按摩霜，如下表9所示。
[0082] 「表 9] _y」 调配物买例?
[0090] 将含有野山参培养根油的化妆品组合物调配成啫喱霜，如下表11所示。
[0091] [表 11]
【主权项】
1. 一种化妆品组合物，包含野山参培养根油作为活性成分。2. 根据权利要求1所述的化妆品组合物，其中所述化妆品组合物用于皮肤保湿、消炎， 或者抗皱。3. 根据权利要求1所述的化妆品组合物，其中所述化妆品组合物含有浓度为0.1至 100mg/ml的所述野山参培养根油。4. 根据权利要求1所述的化妆品组合物，其中所述化妆品组合物是提供于以下物质的 调配物中：柔肤剂、皮肤营养液、营养霜、按摩霜、精华素、啫喱霜、面膜、乳液、蜜粉、腮红、目艮 影、睫毛膏、遮瑕霜、唇膏、唇彩，或者粉底。5. -种用于制备化妆品组合物的方法，所述方法包含： 在溶剂中熟化野山参培养根或者野山参培养根渣；以及 去除所述溶剂，从而得到野山参培养根油。6. 根据权利要求5所述的方法，其中所述化妆品组合物用于皮肤保湿、消炎，或者抗皱。7. 根据权利要求5所述的方法，其中所述溶剂包含水、C1-C4醇、1，3_ 丁二醇、丙酮、乙酸 乙酯、乙酸丁酯、己烷，或者氯仿。8. -种化妆方法，包含施用根据权利要求1至4中任一项所述的化妆品组合物至皮肤。
【文档编号】A61Q19/00GK105943414SQ201610129722
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年3月8日
【发明人】崔钟玩, 郑珉硕, 朴昌珉, 尹海远
【申请人】韩国化妆品制造株式会社