吡咯喹啉醌在化疗后的辅助治疗中的应用
【专利摘要】吡咯喹啉醌在化疗后的辅助治疗中的应用，本发明由于将吡咯喹啉醌应用在化疗后的辅助治疗中，吡咯喹啉醌对化疗后的贫血症有治疗作用，而且能增强化疗后巨噬细胞的吞噬功能，具有有效减轻化疗毒副作用、见效十分明显和提高人体免疫力等优点。
【专利说明】
吡咯喹啉醌在化疗后的辅助治疗中的应用
技术领域
[0001] 本发明涉及提高人体免疫力方面医学技术领域，尤其是涉及吡咯喹啉醌在化疗后 的辅助治疗中的应用。
【背景技术】
[0002] 恶性肿瘤是威胁人类健康的头号杀手，目前癌症治疗主要是以手术、化疗、放疗三 种治疗措施为主，手术是治疗癌症的首选治疗办法，在做过手术之后须放化疗治疗，但是放 化疗的毒副作用很大，如使人体免疫力下降，出现贫血症和巨噬细胞的吞噬功能降低等，如 何减轻化疗带来的毒副作用，已经是很多患者的困扰。
[0003] 吡略喹啉醌(Pyrroloquinoline quinone，PQQ)，是继吡啶核苷酸和核黄素核苷酸 之后，于上世纪70年代末发现的第三种氧化还原型的辅酶，是多种氧化还原酶（例如，葡 萄糖脱氢酶和乙醇脱氢酶）的辅基，是迄今为止发现的体内抗氧化能力最强的物质，在体 内发挥重要作用。PQQ呈红棕色粉末状，具有很好的水溶性。研究证实，PQQ在提高人体免 疫力方面有很好的效果，然而，在本发明之前，本领域从未对PQQ在化疗后提高人体免疫力 方面做出研究。
【发明内容】
[0004] 为了克服上述问题，本发明向社会提供吡咯喹啉醌在化疗后的辅助治疗中的应 用，对化疗后的贫血症有治疗作用，并且能增强化疗后巨噬细胞的吞噬功能，并减轻化疗带 来的毒副作用。
[0005] 本发明的技术方案是:提供吡咯喹啉醌在化疗后的辅助治疗中的应用。
[0006] 作为对本发明的改进，所述吡咯喹啉醌在化疗后的辅助治疗方面的应用。
[0007] 作为对本发明的改进，所述吡咯喹啉醌在化疗后的治疗贫血症方面的应用。
[0008] 作为对本发明的改进，所述吡咯喹啉醌在化疗后增强巨噬细胞的吞噬功能方面的 应用。
[0009] 作为对本发明的改进，所述组合物的剂型包括:片剂、粉末剂、丸剂、糖浆、胶囊、溶 液剂或栓剂。
[0010] 作为对本发明的改进，所述吡咯喹啉醌是通过微生物发酵制成的。
[0011] 本发明由于将吡咯喹啉醌应用在化疗后的辅助治疗中，吡咯喹啉醌对化疗后的贫 血症有治疗作用，而且能增强化疗后巨噬细胞的吞噬功能，具有有效减轻化疗毒副作用、见 效十分明显和提高人体免疫力等优点。
【附图说明】
[0012 ]图1是PQQ对化疗后红细胞的影响的直方图。
[0013] 图2是PQQ对化疗后红细胞减少症的治疗效率的直方图。
[0014] 图3是PQQ对化疗后红细胞的影响的图片。
[0015]图4是PQQ对化疗后巨噬细胞吞噬功能的影响的直方图。
[0016]图5是PQQ对化疗后巨噬细胞吞噬功能降低症的治疗效率的直方图。
[0017]图6是PQQ对化疗后巨噬细胞吞噬功能的影响的图片。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明，应理解，这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。
[0019] 一、实验设计 (11)、实验目的 考察PQQ对化疗后的辅助治疗作用，包括对化疗后中性粒细胞减少症、贫血症、巨噬细 胞形成减少症及巨噬细胞吞噬功能降低症的影响。
[0020] (12)、实验动物 中性粒细胞转基因荧光斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行，共180尾，用于化疗后 的中性粒细胞减少症实验;Albino系斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行，共540尾，用于 贫血症、巨噬细胞形成减少症及巨噬细胞吞噬功能降低症实验，每组30尾斑马鱼。中性粒细 胞减少症实验斑马鱼年龄为受精后2天（2 dpf)，贫血症实验斑马鱼年龄为受精后3天（3 dpf)、巨噬细胞形成减少症实验斑马鱼年龄为受精后2天（2 dpf)、巨噬细胞吞噬功能降低 症实验斑马鱼年龄为受精后4天(4 dpf)。斑马鱼饲养于28 °C的养鱼用水中（水质：每IL反 渗透水中加入200 mg速溶海盐，电导率为480~510 yS/cm;pH为6.9~7.2;硬度为53.7~ 71.6 mg/L CaC03)，实验动物使用许可证号为：SYXK (浙）2012-0171。饲养管理符合国际 AAALAC认证的要求。
[0021] (13)、实验药物 PQQ，无色液体，浓度21 mg/mL，由深圳某公司委托方提供，收到样品后置于4°C冰箱避 光保存。
[0022] 长春瑞滨，无色液体，浓度10 mg/mL，批号为140501，由江苏豪森制药公司生产，临 用时用生理盐水配制成0.125 mg/mL。
[0023] 去水卫矛醇，白色粉末，批号为141201，临用时用生理盐水配制成浓度为0.2 mg/mL。
[0024] (14)、仪器与试剂 解剖显微镜（SZX7，OLYMPUS，Japan);电动聚焦连续变倍荧光显微镜(AZ100，Nikon公 司）；6孔板(Nest Biotech);甲基纤维素(Aladdin, China);邻联茴香胺(红色粉末，批号 119-90-4，Sigma0);中性红(红色粉末，批号553-24-2，Sigma)。
[0025] 二、PQQ对化疗后红细胞的影响 (21)、浓度组别 实验1组正常对照组 实验2组生理盐水对照组 实验3组模型组 实验4组I/10PQQ组 实验5组1/3PQQ组 实验6组PQQ组 浓度确定依据 由于委托方未提供具体的样品浓度，故按常规方法进行，PQQ浓度设置为PQQ(浓度21 mg/mL)、1/3PQQ(浓度7mg/mL)及 1/10PQQ(浓度2 · lmg/mL)。
[0026] (22)、模型制作 血液循环注射0.125 mg/mL的长春瑞滨10 nL，处理3 dpf斑马鱼Id(至4 dpf)，建立斑 马鱼贫血症模型。
[0027] (23)、实验方法 _斑马鱼品系:Albino品系； -用长春瑞滨处理斑马鱼，建立斑马鱼化疗后贫血模型； -正常对照组:不作任何处理，暴露于3mL养鱼用水中； -生理盐水对照组:血液循环注射生理盐水，暴露于3mL养鱼用水中； -除正常对照组及生理盐水对照组外，其余各组均血液循环注射长春瑞滨，诱导化疗后 贫血症模型，模型组暴露于3mL养鱼用水中，样品组分别暴露于同体积I/1OPQQ、I/3PQQ及 PQQ 中； -每个实验组均处理30尾斑马鱼； -PQQ暴露处理结束后，邻联茴香胺染色红细胞，每组随机选取15尾斑马鱼，在显微镜下 观察、拍照并保存； -用图像处理软件进行图像分析，定量斑马鱼心脏处红细胞（S)。统计学处理结果以 Mean 土 SE表不； -PQQ对贫血症的治疗效率计算公式如下： Efficacy(%) = X100% -统计学分析采用方差分析和Dunnett's T-检验，p〈 0.05为差异性显著； -提供具有代表性的实验图谱。
[0028] (24)、实验结果 1/10PQQ、1/3PQQ及PQQ对长春瑞滨诱导的贫血症的治疗效率分别为31.6%、80.9%及 75 · 4%;与模型组比较，1/10PQQ组/7 >0 · 05; 1/3PQQ及PQQ组红细胞显著增多/7〈0 · 01，详见 表1、图1、图2和图3。在图1中，A:正常对照组，B:生理盐水对照组，C:模型组，D: 1/10PQQ组， E:1/3PQQ组，F:PQQ组。在图2中，A:1/10PQQ组，B:1/3PQQ组，C:PQQ组。在图3中，虚线框内部 分为邻联茴香胺染色的红细胞，A:正常对照组，B:生理盐水对照组，C:模型组，D: 1/10PQQ 组，E:1/3PQQ组，F:PQQ组。 Γ 00291 =iR.Mpnn + ?ρ'ι 注:与模型组比较〈0.01。
[0030] (25)、实验结论 1/10PQQ、1/3PQQ及PQQ对贫血症的治疗效率分别为31.6%、80.9%及75.4%;与模型组比 较，1/10PQQ组p>0.05; 1/3PQQ及PQQ组p〈0.01，说明PQQ对化疗后的贫血症有治疗作用。 [0031] 三、PQQ对化疗后巨噬细胞吞噬功能的影响 (31)、浓度组别 实验1组正常对照组 实验2组墨汁对照组 实验3组模型组 实验4组I/10PQQ组 实验5组1/3PQQ组 实验6组PQQ组 浓度确定依据 由于委托方未提供具体的样品浓度，故按常规方法进行，PQQ浓度设置为PQQ(浓度21 mg/mL)、1/3PQQ(浓度7mg/mL)及 1/10PQQ(浓度2 · lmg/mL)。
[0032] (32)、模型制作 血液循环注射0.2 mg/mL的去水卫矛醇及墨汁混合物10 nL，处理4 dpf斑马鱼2d(至6 dpf)，建立斑马鱼巨噬细胞吞噬功能降低症模型。
[0033] (33)、实验方法 _斑马鱼品系:Albino品系； -用去水卫矛醇及墨汁混合物血液循环注射斑马鱼，建立斑马鱼化疗后巨噬细胞吞噬 功能降低t吴型； -正常对照组:不作任何处理，暴露于3mL养鱼用水中； -墨汁对照组:血液循环注射墨汁，暴露于3mL养鱼用水中； -除正常对照组及生理盐水对照组外，其余各组均血液循环注射去水卫矛醇及墨汁，诱 导化疗后巨噬细胞吞噬功能降低模型，模型组暴露于3mL养鱼用水中，样品组分别暴露于同 体积 l/l〇PQQ、l/3PQQ 及 PQQ 中； -每个实验组均处理30尾斑马鱼； -PQQ暴露处理结束后，中性红染色，每组随机选取15尾斑马鱼，在显微镜下观察、拍照 并保存； -统计巨噬细胞吞噬个数(N)。统计学处理结果以Mean土 SE表示； -PQQ对巨噬细胞吞噬功能降低症的治疗效率计算公式如下：
-统计学分析采用方差分析和Dunnett's T-检验，p〈 0.05为差异性显著； -提供具有代表性的实验图谱。
[0034] (34)、实验结果 1/10PQQ、1/3PQQ及PQQ对去水卫矛醇诱导的巨噬细胞吞噬功能下降的治疗效率分别 为-30·4%、23·9%及78·3%;与模型组比较，1/10PQQ与 1/3PQQ组 p>0·05;PQQ组p〈0·05，显示 PQQ组能显著提高巨噬细胞的吞噬功能，详见表2、图4、图5和图6。在图4中，A:正常对照组， B:生理盐水对照组，C:模型组，D: I /I OPQQ组，E: I /3PQQ组，F: PQQ组。在图5中，A: I/1OPQQ组， B:1/3PQQ组，C:PQQ组。在图6中，方框内黑色巨噬细胞为巨噬细胞进行了吞噬，A:正常对照 组，B:生理盐水对照组，C:模型组，D: I /I OPQQ组，E: I /3PQQ组，F: PQQ组。
[0035] 表2 PQQ对化疗后巨噬细胞吞噬功能的影响(/3 =15，Mean 土 SE)
注:与模型组比较*p〈〇.〇5。
[0036] (35)、实验结论 1/10PQQ、1/3PQQ及PQQ对巨噬细胞吞噬功能减少症的治疗效率分别为-30.4%、23.9%及 78.3%;与模型组比较，1/10PQQ与1/3PQQ组p>0.05;PQQ组p〈0.05，说明PQQ能增强化疗后巨 噬细胞的吞噬功能。
[0037]本发明由于将PQQ应用在化疗后的辅助治疗中，提高了人体免疫力，PQQ对化疗后 的贫血症有治疗作用，而且能增强化疗后巨噬细胞的吞噬功能，具有有效减轻化疗毒副作 用、见效十分明显和提高人体免疫力等优点。
【主权项】
1. 吡咯喹啉醌在化疗后的辅助治疗中的应用。2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于:所述吡咯喹啉醌在化疗后的治疗贫血症方 面的应用。3. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于:所述吡咯喹啉醌在化疗后增强巨噬细胞的 吞噬功能方面的应用。4. 根据权利要求1-3中任何一项权利要求所述的应用，其特征在于:所述组合物的剂型 包括:片剂、粉末剂、丸剂、糖浆、胶囊、溶液剂或栓剂。5. 根据权利要求1-3中任何一项权利要求所述的应用，其特征在于:所述吡咯喹啉醌是 通过微生物发酵制成的。
【文档编号】A61P7/06GK105963297SQ201610309904
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年5月11日
【发明人】周新中
【申请人】深圳市太生源健康产业有限公司