碘对比剂诱导急性肾损伤动物模型建立方法
【专利摘要】本发明公开了一种碘对比剂诱导急性肾损伤动物模型建立方法；旨在提供一种成本低、使用方便、模型性能稳定、适应性广的对比剂急性肾脏损伤动物模型的构建方法；本发明提供的技术方案是这样的：一种碘对比剂诱导急性肾损伤动物模型建立方法，该方法采用SD大鼠作为动物模型，将碘对比剂静脉注射于SD大鼠，剂量为100?150mg/kg，一次性大量团注给药，构建为动物模型。
【专利说明】
砩对比剂诱导急性肾损伤动物模型建立方法
技术领域
[0001] 本发明公开了一种急性肾损伤动物模型建立方法，具体的说，是碘对比剂诱导急 性肾损伤动物模型建立方法。
【背景技术】
[0002] 至今CIAKI确切的发病机制尚不明确，多数学者认为CIAKI是由多种机制协同作用 而引发的疾病，宏观上其主要发病机制大致分为肾血流动力学改变和直接肾细胞毒性作用 二大类。
[0003] 1、肾脏血流动力学变化
[0004] 实验表明，注射碘对比剂后对人体血流动力学的影响呈双向表现，肾血管首先短 暂扩张20mim，然后痉挛性血管收缩4h甚至更长。临床早期出现渗透性利尿，继而肾血流量 降低及肾小球滤过率减少。其机制可能为使用对比剂后血浆渗透压增高，导致血容量增加， 血管扩张，由于血浆渗透压增高而产生渗透性利尿，使水钠及其他电解质排泄增加;渗透性 利尿后，血容量减少引起肾素-血管紧张素释放，从而使肾血管产生收缩。
[0005] 2、直接肾细胞毒性作用
[0006] 碘对比剂肾毒性作用的机制主要包括两方面:渗透毒性及组分中与黏度相关的毒 性。多数文献认为对比剂渗透压及黏度可能是导致对比剂肾病发生的重要因素。
[0007] ①对比剂渗透压对肾脏的损害:主要表现为直接肾小管毒性。应用高渗对比剂后， 肾组织活检可见局灶性或弥漫性近端肾小管上皮细胞空泡形成，这是对比剂肾细胞毒性的 最直接证据，也是渗透性肾病的组织学特征。Zager等研究表明，含碘对比剂可以导致肾小 管细胞线粒体损伤、细胞色素C释放和破坏质膜完整，使肾髓质局部氧分压降低。对211名患 者10天内行肾动脉造影或静脉肾盂造影，进行肾组织活检，其中47例发现渗透性肾病变证 据;29例伴有肾小管萎缩和(或)坏死。Herts等临床研究显示，静脉注射高渗对比剂肾孟造 影后肾血浆流量减少与对比剂有关，其减少程度取决于对氨基马尿酸清除率，Ih时影响达 顶峰，以后逐渐降低，到2h时基本恢复正常;低渗对比剂影响比高渗对比剂影响轻。
[0008] ②对比剂黏度对肾脏的影响:在正常情况下，肾小管内液体粘度低于血浆，使用高 粘度对比剂(特别是二聚体等渗对比剂)后，集合小管内流体阻力及肾小管内压力增加，使 肾小球滤过率和髓质血流减少。由于超滤作用，肾小管对黏度变化更为敏感，黏度升高可导 致肾小管尤其是集合管内阻力增加，肾间质压力增加，从而影响肾脏滤过功能。Hardiek等 人研究发现在体外培养的条件下，渗透压相同而粘滞度不同的碘帕醇和甘露醇对肾小管细 胞的毒性并不相同，碘帕醇对肾小管的抑制作用强于甘露醇。黏度增加可使对比剂滞留时 间延长，Yamazaki等研究显示，重度肾皮质对比剂滞留者发生CIN风险增加，但与CIN发生率 并非平行。目前，碘对比剂急性肾脏损伤动物模型的建立方法国内外文献尚未报道。
【发明内容】
[0009] 针对上述问题，本发明提供的目的是提供一种成本低、使用方便、模型性能稳定、 适应性广的对比剂急性肾脏损伤动物模型的构建方法。
[0010] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案是这样的：
[0011] -种碘对比剂诱导急性肾损伤动物模型建立方法，该方法采用SD大鼠作为动物模 型，将碘对比剂静脉注射于SD大鼠，剂量为100-150mg/kg，一次性大量团注给药，构建为动 物模型。
[0012]优选的，上述的碘对比剂诱导急性肾损伤动物模型建立方法，所述的SD大鼠重量 为 150-200 克。
[0013]优选的，上述的碘对比剂诱导急性肾损伤动物模型建立方法，所述的碘对比剂为 复方泛影葡胺注射液。
[0014] 与现有技术相比，本发明提供的技术方案具有如下技术优点：
[0015] 1.本发明针对碘对比剂诱导急性肾脏损伤提供一种良好的动物模型；
[0016] 2.本发明机理明确、重现性好；
[0017] 3.本发明成功率高、性能稳定；
[0018] 4.可以做病理形态学对比分析，还可以进行统计学处理、分析；
[0019] 总而言之，本发明提供的动物模型的建立方法，为肾脏损伤的发病学、治疗学和药 效学的研究奠定了重要的实验基础;该动物模型的建立，将为碘对比剂诱导急性肾脏损伤 疾病提供有效的研究载体，为预防和治疗碘对比剂使用后导致肾脏损害方面疾病取得更大 的突破，提尚治疗的有效性。
【附图说明】
[0020] 图1注射碘对比剂后20分钟后肾脏病理组织学变化(80X，200X，400X );
[0021] 图2注射碘对比剂后24小时后肾脏病理组织学变化(80X，200X，400X );
[0022] 图3注射碘对比剂后48小时后肾脏病理组织学变化(80X，200X，400X );
【具体实施方式】
[0023]下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围内所做的有限次的修改，仍在本发明 的权利要求保护范围之内。
[0024] 实施例
[0025] 一、实验动物与材料
[0026] 30只健康雄性SD大鼠（清洁级），购中山大学实验动物中心。
[0027] 碘对比剂(复方泛影葡胺注射液，370mg/ml，6ml/kg):购自无锡济民可信山禾药业 股份有限公司。
[0028]二、试验方法
[0029] 将健康SD大鼠随机分成两组，分别为对照组，模型组各15只。对照组(Control)在 实验过程中注射5%葡萄糖溶液;模型组尾静脉注射给予碘对比剂(复方泛影葡胺注射液， 370mg/ml，6ml/kg)，一次性大剂量团注。该试验用于检测急性肾脏损伤动物模型的制备效 果。
[0030] 三、实验结果：
[0031] I.各组SD大鼠血清中Crea和Bun水平
[0032]分别在注射碘对比剂20分钟、24小时、48小时，采集各组大鼠血液，分离血清，利用 全自动生化分析仪检测各组SD大鼠血清中Crea、BUn水平。结果显示，注射碘对比剂后，模型 组血清中Crea和Bun水平明显高于对照组，见(表1、2)。
[0033]表1.注射对比剂前后肾脏Crea值(均数土标准差;umol/L).
[0036] 注：*Ρ〈〇·〇5。
[0037] 表2注射对比剂前后肾脏Bun值(均数土标准差;mmol/L).
[0039] 注：*Ρ〈0·05。
[0040] 图1注入碘对比剂20分钟肾脏:镜下观察肾小球结构清晰，未见明显肿胀、萎缩及 纤维化。部分区近曲小管上皮细胞浊肿，个别有溶解。部分区远曲小管管腔变窄，上皮个别 细胞溶解、消失。间质血管扩张、少量充血。集合管未见各类管型。
[0041] 图2注入碘对比剂24小时肾脏:镜下观察肾小球结构清晰，少量明显肿胀、未见萎 缩及纤维化。部分区近曲小管和远曲小管上皮细胞浊肿，未见脂肪变性、玻璃样变及坏死等 改变。间质多数血管扩张、充血。集合管未见各类管型。毛细血管大部分扩张，破裂出血。
[0042] 图3注入碘对比剂48小时肾脏:镜下观察肾小球结构清晰，明显肿胀、萎缩。部分区 近曲小管和远曲小管上皮细胞浊肿，脂肪变性、玻璃样变及坏死等改变。间质多数血管扩 张、充血。集合管未见各类管型。毛细血管大部分扩张，出血。
[0043] 总之，从图1至图3也可以看出，注入碘对比剂后，大鼠肾小管的损害明显早于肾小 球的损害，且持续时间更长。
[0044]以上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所作的任 何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种碘对比剂诱导急性肾损伤动物模型建立方法，其特征在于，该方法采用SD大鼠 作为动物模型，将碘对比剂静脉注射于SD大鼠，剂量为100-150mg/kg，一次性大量团注给 药，构建为动物模型。2. 根据权利要求1所述的碘对比剂诱导急性肾损伤动物模型建立方法，其特征在于，所 述的SD大鼠重量为150-200克。3. 根据权利要1所述的碘对比剂诱导急性肾损伤动物模型建立方法，其特征在于，所述 的碘对比剂为复方泛影葡胺注射液。
【文档编号】A61K49/04GK105963716SQ201610511973
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年6月30日
【发明人】张水兴, 陈文波, 张斌, 董羽颢
【申请人】广东省人民医院