细胞生物量变化，在192h时0D600达到最高值1.6并维持到24011不变。对石油烃的降解率随时间变化而增高，在第240h达到最大值为94.36%。
【附图说明】
[0019]图1.分支杆菌cpl在10°C，pH为7.2，200rpm下降解石油烃的细胞生物量变化。
[°02°] 图2.分支杆菌cpl在10°C，pH为7.2，200rpm下10天内对石油经的降解率。
【具体实施方式】
[0021]通过下面结合具体实例将有助于进一步理解本发明，但本发明的保护范围并不限制于此:
[0022]实施例1
[0023]配置无机盐培养基，硝酸钠0.5g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸铵4g/L、NaC 120g/L，硫酸镁2g/L。加入微量元素5mL/L，调节pH到6.5。将I OOmL的无机盐培养基分装在250mL的三角瓶中，密封后在121°C的高温下灭菌20分钟，冷却至室温后，加入初始0D600为0.1的分支杆菌cpl。在接种后的无机盐培养基中加入经过灭菌和过0.22微米的油膜的石油烃。放置于5°C，ISOrpm的摇床中进行培养10天后，用正己烷萃取剩余的石油烃，通过比较前后石油烃含量的变化得到石油烃的降解率为56.37%。
[0024]实施例2
[0025]配置无机盐培养基，硝酸钠lg/L、磷酸二氢钾lg/L、磷酸二氢钾lg/L、硫酸铵2g/L、NaC130g/L，硫酸镁0.5g/L。加入微量元素10mL/L，调节pH到6.5。将10mL的无机盐培养基分装在250mL的三角瓶中，密封后在121°C的高温下灭菌20分钟，冷却至室温后，加入初始0D600为0.1的分支杆菌cpl。在接种后的无机盐培养基中加入经过灭菌和过0.22微米的油膜的石油烃。放置于10°C，200rpm的摇床中进行培养12天后，用正己烷萃取剩余的石油烃，通过比较前后石油烃含量的变化得到石油烃的降解率为87.90%。
[0026]实施例3
[0027]配置无机盐培养基，硝酸钠2g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、硫酸铵38/1、他(:15(^/1，硫酸镁1.58/1。加入微量元素15111171，调节?!1到7.5。将1001^的无机盐培养基分装在250mL的三角瓶中，密封后在121°C的高温下灭菌20分钟，冷却至室温后，加入初始0D600为0.1的分支杆菌cpl。在接种后的无机盐培养基中加入经过灭菌和过0.22微米的油膜的石油烃。放置于15°C，250rpm的摇床中进行培养16天后，用正己烷萃取剩余的石油烃，通过比较前后石油烃含量的变化得到石油烃的降解率为63.49%。
[0028]实施例4
[0029]配置无机盐培养基，硝酸钠lg/L、磷酸二氢钾lg/L、磷酸二氢钾lg/L、硫酸铵lg/L、NaCl 30g/L，硫酸镁0.5g/L。加入微量元素I OmL/L，调节pH到7.2。将10mL的无机盐培养基分装在250mL的三角瓶中，密封后在121°C的高温下灭菌20分钟，冷却至室温后，加入初始0D600为0.1的分支杆菌cpl。在接种后的无机盐培养基中加入经过灭菌和过0.22微米的油膜的石油烃。放置于10°C，200rpm的摇床中进行培养5天后，用正己烷萃取剩余的石油烃，通过比较前后石油烃含量的变化得到石油烃的降解率为29.61 %。
[0030]实施例5
[0031]配置无机盐培养基，硝酸钠lg/L、磷酸二氢钾lg/L、磷酸二氢钾lg/L、硫酸铵lg/L、NaCl 30g/L，硫酸镁0.5g/L。加入微量元素I OmL/L，调节pH到7.2。将10mL的无机盐培养基分装在250mL的三角瓶中，密封后在121°C的高温下灭菌20分钟，冷却至室温后，加入初始0D600为0.1的分支杆菌cpl。在接种后的无机盐培养基中加入经过灭菌和过0.22微米的油膜的石油烃。放置于10°C，200rpm的摇床中进行培养8天后，用正己烷萃取剩余的石油烃，通过比较前后石油烃含量的变化得到石油烃的降解率为86.14%。
[0032]实施例6
[0033]配置无机盐培养基，硝酸钠lg/L、磷酸二氢钾lg/L、磷酸二氢钾lg/L、硫酸铵lg/L、NaCl 30g/L，硫酸镁0.5g/L。加入微量元素I OmL/L，调节pH到7.2。将10mL的无机盐培养基分装在250mL的三角瓶中，密封后在121°C的高温下灭菌20分钟，冷却至室温后，加入初始0D600为0.1的分支杆菌cpl。在接种后的无机盐培养基中加入经过灭菌和过0.22微米的油膜的石油烃。放置于10°C，200rpm的摇床中进行培养10天后，用正己烷萃取剩余的石油烃，通过比较前后石油烃含量的变化得到石油烃的降解率为94.36%。
【主权项】
1.一种低温下微生物降解石油污染物的方法，其特征在于步骤如下:(一)首先配置用于石油污染物降解的基础无机盐培养基，将10mL的无机盐培养基分装在250mL的三角瓶中，密封后在121°C的高温下灭菌20分钟，冷却至室温待用；(二)选择耐低温和耐高盐的分支杆菌cpl加入到无机盐培养基中，初始0D600为0.1;(三)将石油烃过0.22微米的油膜，除去内部的杂菌后，取出0.5mL加入到接种后的无机盐培养基中；(四)摇床培养后，每隔24小时取样并测量培养基中的菌体浓度以及剩余石油烃的浓度。2.根据权利要求1所述一种低温下微生物降解石油污染物的方法，其特征在于步骤(一)中所用到的无机盐培养基的配方是:硝酸钠0.5-2g/L、磷酸二氢钾0.5-1.5g/L、磷酸二氢钾0.5-1.58/1、硫酸铵2-48/1、他(:120-5(^/1，硫酸镁0.5-28/1，微量元素5-15111171，利用2mol/L的NaOH和2mol/L的HCl调节无机盐培养基的pH到6.5-7.5。3.根据权利要求2所述的一种低温下微生物降解石油污染物的方法，其特征在于所用到的其中的微量元素的每升培养液中配方是:0.2g Na2MoO4.2H20，0.3g CuSO4.5H20，0.5gZnSO4.7H20,2.0gFeSO4.7H20,1.0g CaCl2,NaS045.0g,ZnSO4.4H20 0.4g和0.5g H3BO3o4.根据权利要求1所述的一种低温下微生物降解石油污染物的方法，其特征在于步骤(四)中所用到降解石油污染物培养条件为转速为180-250rpm，培养温度为5°C_15°C，培养时间为10-16天;所述的菌株为分支杆菌cpl。
【专利摘要】一种研究低温高盐条件下石油降解的方法，按照以下的方法步骤进行低温高盐条件下的利用微生物对石油污染物进行降解：分支杆菌cp1在10℃，pH为7.2，200rpm下降解石油烃的细胞生物量变化，在192h时OD600达到最高值1.6并维持到240h不变。对石油烃的降解率随时间变化而增高，在第240h达到最大值为94.36％。
【IPC分类】A62D3/02, C12R1/32, A62D101/20
【公开号】CN105582637
【申请号】CN201610104309
【发明人】李亮亮
【申请人】李亮亮
【公开日】2016年5月18日
【申请日】2016年2月25日