复合生物制剂在制备果蔬类产品保鲜剂中的用途的制作方法

本发明涉及果蔬类产品保鲜剂，特别涉及复合生物制剂在制备果蔬类产品保鲜剂中的用途，本发明属于农业生产
技术领域：
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背景技术：
：草莓是浆果类果实，果皮极薄，在收获和运输过程中易受伤害，一般采后仅数小时就会出现水渍状白斑，在常温下1～2d就变色、变味，出现凹陷，直至软化腐烂，导致草莓的销售半径有限，对城市采摘消费来说，未消费完毕就已经变质，无法发挥出其最大商品价值，造成严重的浪费。同时，北方温室草莓采收期长达5个月，用药安全始终是消费者关注的问题，追求天然环保是目前消费者普遍的要求。因此，以符合有机产品国家标准的物质处理草莓延长果实的贮藏期或货架寿命，是生产中急待解决的问题。陈迪新等发明了一种能够提高草莓品质和延长其贮藏期的保鲜方法，首先在绿茶茶叶中提取茶多酚，后加入无水氯化钙备用，然后利用乙醇溶液在香樟根、姜和蒜抽提汁液，在抽提液中依次加入一定量的乙酸溶液和壳聚糖，两种溶液等质量配比制备成保鲜液，采用该保鲜液对水果进行处理并储存。张红印等公开了一种用于防治草莓采后病害的方法。将草莓放入50－55℃的水浴锅中，热水处理30秒钟－1分钟，取出风干，再浸入1×108－1×109个/ml的罗伦隐球酵母溶液中，浸泡10秒左右的时间后马上取出，再风干，放在塑料筐中，用保鲜膜密封后，放在室温或冷藏(2－4℃)条件下存放，可以有效地防治草莓的灰葡萄孢、匍枝根霉等引起的病害，降低草莓的腐烂率。母军等公开了一种蔬果保鲜液及其制备方法，包括壳聚糖和竹酢液或木酢液。每100ml该复合蔬果保鲜液含有组分如下：竹酢液或木酢液1－20ml，壳聚糖0.2－2g。在竹酢液或木酢液中加入壳聚糖，搅拌溶解制成复合蔬果保鲜液，该蔬果保鲜液配方简单，对蔬果抗菌气调的保鲜作用显著，能有效的保持蔬果的水分颜色。贺军民研究发现草莓采摘后分别浸入蒸馏水(对照)、5％cacl2溶液中，真空渗入5min后取出测硬度，结果钙处理果实硬度是对照的5倍。(ga3和钙处理对草莓采后硬度变化、细胞膜透性及丙二醛含量的影响[j].陕西农业科学，1998(3)：26-27.)杨福臣设计了4个浓度的cacl2溶液浸泡草莓果实，晾干后置于0～2℃、相对湿度90％～95％冷库中贮藏，以2％氯化钙处理效果最好，但第9天后也基本腐烂。(钙处理对草莓保鲜效果的影响贵州农业科学2010，38(10):180～182)以上几种方法虽然对草莓贮藏均有效果，但缺陷明显：首先要制备保鲜液，而保鲜液制备费时费力，且质量不容易被生产者把握；其次果实都需要在保鲜液中浸泡，然后晾干，这个工序需要大量的浸泡缸和风干货架，较原来增加了三道工序，使果实间相互碰撞引起的二次伤害的风险提高。对生产者而言，投入增加，用工成本也增加，生产中可操作性极差。技术实现要素：针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种能够降低蔬果类产品，特别是浆果类果实采后腐烂率，延长其货架期的方法。为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：本发明使用复合生物制剂从草莓植株定植后随水冲施两次，每半月一次，每次1-2l/亩；结果后，使用复合生物制剂按照300-500倍稀释，喷施，每两周一次；开花后施用大量元素水溶肥，每星期施用一次。生长期间观测长势、病虫害发生、开花结果时间、采收数量等情况，做好日常记录。4月份在果实成熟后，上午采收成熟度一致、无病害、无畸形的九分熟新鲜复合生物制剂处理组和对照组草莓。每组500个果左右，采后2小时内立即运回实验室，处理组和对照组果实分别分装到塑料筐中，上面覆盖一层保鲜膜防止失水。置于室温下(18℃±1℃、相对湿度80-85％)贮藏，每天观测外观和腐烂率，并取样测试可溶性固形物含量；同时，做4℃冷藏温度的贮藏实验。实验结果表明，使用复合生物制剂处理的草莓相较于对照组可溶性固形物含量以及硬度高，且能够降低草莓的腐烂率及腐烂指数。因此，在上述研究的基础上，本发明提出了复合生物制剂在制备果蔬类产品保鲜剂中的用途，所述的复合生物制剂是由枯草芽孢杆菌发酵液、拟康氏木霉发酵液、水溶性甲壳素、味精残液、黄腐酸钾组成；各组分重量份数为：枯草芽孢杆菌发酵液40份、拟康氏木霉发酵液40份、水溶性甲壳素1份、味精残液9份、黄腐酸钾10份；所述枯草芽孢杆菌发酵液是由保藏号为cgmccno.1442的枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)baci发酵制得，枯草芽孢杆菌发酵液活菌数≥1×109个/ml；所述拟康氏木霉发酵液是由保藏号为cgmccno.1443的拟康氏木霉(trichodermapseudokiningii)tripi发酵制得，拟康氏木霉发酵液中有效孢子浓度≥3×108个/ml；所述水溶性甲壳素分子量m为1.5×105，黏度为100mpa，脱乙酯度dac≥90％，纯度≥90％；所述味精残液为通过谷氨酸发酵生产味精后留下的废母液，其中：氨基酸≥17.5％、b≥1.2mg/g、zn≥0.5mg/g、fe≥1.8mg/g、有机质≥32.4％；所述黄腐酸钾规格为：细度＜120目，水可溶物＞99.7％，水溶性黄腐酸＞50％，氧化钾9.7％，氮2.8％，磷0.6％，有机质55％。该生物制剂已记载在公开号为cn102428966b，发明名称为“一种作物病害防治复合生物制剂及其应用”的专利申请中，公开日期为2014年10月22日。在本发明中，优选的，所述的果蔬类产品为浆果类果实。更优选的，所述的浆果类果实为草莓。在本发明中，优选的，所述的复合生物制剂具有提高果蔬类产品的可溶性固形物含量以及硬度，降低腐烂率及腐烂指数的作用。进一步的，本发明还提出了一种提高果蔬类产品保鲜期的方法，包括以下步骤：将所述的复合生物制剂按照300-500倍稀释，从定植后随水冲施两次，每半月一次，每次1-2l/亩；结果后，复合生物制剂按照300-500倍稀释，使用稀释后的复合生物制剂喷施，每两周一次。在本发明所述的方法中，优选的，所述的果蔬类产品为浆果类果实。更优选的，所述的浆果类果实为草莓。相较于现有技术，本发明的有益效果是：本发明着眼于实践的可行性和生产的可操作性，在草莓的生长季节，施用符合有机产品国家标准的复合益生菌制剂，根据草莓生长特性定期对叶片进行喷施，达到降低采后腐烂延长货架期的目的。由于益生菌本身对防治作物植株病害有一定的作用，所以种植者非常乐意使用该方法，并没有增加额外的劳动成本和设备投入，而提高了果蔬的品质和流通时间，降低了损耗，操作容易掌握，推广性强。附图说明图1为复合生物制剂处理对圣诞红草莓腐烂率的影响；图2为复合生物制剂处理对圣诞红草莓腐烂指数的影响；图3为复合生物制剂处理对圣诞红草莓硬度的影响；图4为复合生物制剂处理对圣诞红草莓可溶性固形物的影响；图5为处理组以及对照组果实表面的细菌菌落数和真菌菌落数测定结果；图6为复合生物制剂处理对圣诞红草莓4℃低温贮藏条件下腐烂率的影响；图7为复合生物制剂处理对圣诞红草莓4℃低温贮藏条件下腐烂指数的影响；图8为复合生物制剂处理对圣诞红草莓4℃低温贮藏条件下硬度的影响；图9为复合生物制剂处理对圣诞红草莓4℃低温贮藏条件下可溶性固形物的影响。具体实施方式下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。实施例1复合生物制剂在草莓保鲜中的应用1、试验处理(1)试验基地位于北京昌平区崔村镇北京春禾盛辉虫乐农庄，占地180亩，其中草莓20亩，草莓品种为“圣诞红”，种苗购买于本地，8月底定植，高垄栽培，用量为6000株/亩。(2)材料与方法：复合生物制剂：其是由枯草芽孢杆菌发酵液、拟康氏木霉发酵液、水溶性甲壳素、味精残液、黄腐酸钾组成；各组分重量份数为：枯草芽孢杆菌发酵液40份、拟康氏木霉发酵液40份、水溶性甲壳素1份、味精残液9份、黄腐酸钾10份；所述枯草芽孢杆菌发酵液是由保藏号为cgmccno.1442的枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)baci发酵制得，枯草芽孢杆菌发酵液活菌数≥1×109个/ml；所述拟康氏木霉发酵液是由保藏号为cgmccno.1443的拟康氏木霉(trichodermapseudokiningii)tripi发酵制得，拟康氏木霉发酵液中有效孢子浓度≥3×108个/ml；所述水溶性甲壳素分子量m为1.5×105，黏度为100mpa，脱乙酯度dac≥90％，纯度≥90％；所述味精残液为通过谷氨酸发酵生产味精后留下的废母液，其中：氨基酸≥17.5％、b≥1.2mg/g、zn≥0.5mg/g、fe≥1.8mg/g、有机质≥32.4％；所述黄腐酸钾规格为：细度＜120目，水可溶物＞99.7％，水溶性黄腐酸＞50％，氧化钾9.7％，氮2.8％，磷0.6％，有机质55％。该生物制剂已记载在公开号为cn102428966b，发明名称为“一种作物病害防治复合生物制剂及其应用”的专利申请中，公开日期为2014年10月22日。复合生物制剂的使用方法：复合生物制剂按照300-500倍稀释，处理组使用稀释后的复合生物制剂从定植后随水冲施两次，每半月一次，每次1-2l/亩；结果后，复合生物制剂按照300-500倍稀释，使用稀释后的复合生物制剂喷施，每两周一次。处理3个棚。同时设不使用复合生物制剂处理的组作为对照组，对照组3个棚。其他管理按常规进行。生长期间观测长势、病虫害发生、开花结果时间、采收数量等，做好日常记录。(3)果实采后实验方法：在中国农业大学食品学院实验室进行。4月份在果实成熟后，上午采收成熟度一致、无病害、无畸形的九分熟新鲜复合生物制剂处理组和对照组草莓。每组500个果左右，采后2小时内立即运回实验室，同时，无菌操作采摘9个果实左右分装到3个无菌袋中带回。处理组和对照组果实分别分装到塑料筐中，上面覆盖一层保鲜膜防止失水。置于室温下(18℃±1℃、相对湿度80-85％)贮藏，每天观测外观和腐烂率，并取样测试可溶性固形物含量；同时，做4℃冷藏温度的贮藏实验。2、观测内容及方法(1)病害观察：肉眼观察整个生长期的植株上的病害产生情况，并记录。(2)硬度的测定：将草莓赤道部位用italy公司出产的硬度计固定，上调2mm，记录数据。每个果转两次，重复十个果。(3)可溶性固形物的测定：用wyt-4型手持折光仪测定。(4)腐烂率和腐烂指数：在至少30个果实组中，计算腐烂的果实占总果实的比例。按果实腐烂面积大小将果实划分为4级：0级:无腐烂；1级:腐烂面积小于果实面积的10％；2级:腐烂面积占果实面积的10％～30％；3级:腐烂面积大于果实面积的30％。按下式计算腐烂指数:腐烂指数＝σ(腐烂级别×该级果实)最高腐烂级别×总果实×100(5)细菌总数和真菌数测试：将草莓置于无菌袋中采回。加入3个草莓为一组，在超净工作台中将草莓放入无菌瓶中，加入无菌水20ml摇床低速转摇1小时，将草莓取出加入第二瓶无菌水中振瑶30分钟，再取出草莓加入第三瓶无菌水中振瑶半小时。将第一，第二，第三瓶水分别进行0-7倍体积的梯度稀释。涂布与细菌和真菌培养基中。最后将3次菌落数加和，即为果实表面菌含量。每个处理3组平行。3、数据统计及图形分析：用excel2003统计分析所有数据，计算标准误差并制图；用spss软件进行方差分析和显著性差异。4、试验结果和分析(1)草莓生长期病害的情况在加强管理的情况下，对照组以及处理组均无明显病害发生。(2)复合生物制剂处理对草莓果实腐烂率和腐烂指数的影响图1、图2、表1、表2结果显示，在常温贮藏实验条件下，第四天，与对照比，使用复合生物制剂处理可显著降低果实腐烂率43.7％和腐烂指数49.0％。表1复合生物制剂处理对圣诞红草莓腐烂率的影响腐烂率0d1d2d3d4d处理组0％20％24％28％36％对照组0％32％36％44％64％表2复合生物制剂处理对圣诞红草莓腐烂指数的影响腐烂指数0d1d2d3d4d处理组0％9％13％18％25％对照组0％21％25％29％49％(3)复合生物制剂处理对草莓贮藏期硬度和可溶性固形物的影响如图3、图4、表3、表4所示：复合生物制剂处理可显著提高果实硬度22.2％和可溶性固形物含量25.3％(p<0.05)。在贮藏过程中可溶性固形物呈现逐渐降低的趋势，但处理组含量各时期均显著高于对照组(p<0.05)。贮藏第四天，对照组、处理组硬度分别为0.15kg/cm2、0.22kg/cm2，可溶性固形物含量分别为4.86％、5.67％。表3复合生物制剂处理对圣诞红草莓硬度的影响(kg/cm2)硬度0d1d2d3d4d处理组0.4470.4210.3450.2640.222对照组0.3690.3350.2620.2120.156表4处理对圣诞红草莓可溶性固形物的影响(％)可溶性固形物0d1d2d3d4d处理组10.48.97.86.35.6对照组8.37.26.45.64.8(4)复合生物制剂处理对草莓果实表面微生物的影响处理组以及对照组果实表面的细菌菌落数和真菌菌落数如图5所示，实验结果表明：复合生物制剂处理能够降低果实表面的细菌含量以及真菌含量。(5)4℃低温贮藏条件处理对果实腐烂率和腐烂指数的影响实验结果如图6、图7、表5以及表6所示，该结果表明在4℃低温贮藏实验条件下第8天，复合生物制剂处理可显著降低果实腐烂率52.4％和腐烂指数36.4％。(p<0.05)表5复合生物制剂处理对圣诞红草莓4℃低温贮藏条件下腐烂率的影响腐烂率0d2d4d6d8d处理组0％3％10％17％20％对照组0％21％25％33％42％表6复合生物制剂处理对圣诞红草莓4℃低温贮藏条件下腐烂指数的影响腐烂指数0d2d4d6d8d处理组0％1％4％6％7％对照组0％6％7％9％11％(6)4℃低温贮藏条件下复合生物制剂处理对果实硬度和可溶性固形物的影响实验结果如图8、图9、表7以及表8所示，该结果表明在4℃低温贮藏实验条件下，复合生物制剂处理可显著提高果实硬度和可溶性固形物含量。同时在低温贮藏状态下，复合生物制剂处理可显著减缓果实硬度的降低(p<0.05)。在贮藏过程中可溶性固形物呈现逐渐降低的趋势，但处理组含量各时期均显著高于对照组(p<0.05)。表7复合生物制剂处理对圣诞红草莓4℃低温贮藏条件下硬度的影响(kg/cm2)硬度0d2d4d6d8d处理组0.4470.4280.4030.3940.367对照组0.3690.3520.3300.3100.284表8复合生物制剂处理对圣诞红草莓4℃低温贮藏条件下可溶性固形物的影响(％)可溶性固形物0d2d4d6d8d处理组10.49.79.28.67.8对照组8.37.76.96.15.4当前第1页12