专利名称：用反式肉桂酸酶法合成l－苯丙氨酸的后提取新工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及酶法合成氨基酸过程中的分离工艺，具体地说是用反式肉桂酸酶法合成L-苯丙氨酸的后提取新工艺。
L-苯丙氨酸作为一种氨基酸是构成蛋白质的基本单位，是与生命密切相关的最基本的物质，世界各国都把发展氨基酸产业放在重要位置上。L-苯丙氨酸是一种人体必需的氨基酸，广泛应用于医药、食品等行业，开展L-苯丙氨酸提取分离、精制等工业化技术与工艺研究，对推动我国氨基酸工业发展，改善人民生活具有重要意义。
本发明所述的后提取新工艺主要是指用L-苯丙氨酸解氨酶(PAL)转化反式肉桂酸生产L-苯丙氨酸过程中的后提取新工艺。在合成结束后的酶转化液中，除了产品L-苯丙氨酸外，还有未反应的肉桂酸、氨水、酵母及其自溶水解产物、部分发酵液和色素及其他杂质，其中酵母自溶水解产物主要是培养过程中释放的蛋白质，部分蛋白质又进一步水解为多肽类，在残存的发酵液中同样也含有这些物质，造成产品纯度不够，给后提取造成很大障碍，另外，色素的存在影响了产品的色泽也是必须解决的问题之一。
在科研过程中，一般采用的是纸层析法、高效液相色谱或高氯酸非水滴定等方法来测定L-苯丙氨酸的含量，工业化的研究多在于离交，存在成本高、收率低，产品纯度不够的缺点。
《江苏化工》公开了一种L-苯丙氨酸真空蒸发冷却结晶过程的研究(《江苏化工》1999年2月，VOL27，NO.1，14-17)。CN1133285A公开了一种萃取分离L-苯丙氨酸和反式肉桂酸的方法。
本发明针对酶转化液的成份特点所设计的提取工艺，旨在高收率地获得色泽好、晶形完整、高纯度的L-苯丙氨酸成品。
本发明的具体工艺是采用三种方法相结合，一是转化液离心后，先脱氧，然后加入磷酸调PH值至2～3，使肉桂酸结晶出来；二是加热清液至90～100℃，使其中的蛋白类物质变性而凝固；三是用Ca(OH)2来去除清液中的磷酸根离子。
本发明的工艺首先把前两种方法接合起来，加入磷酸后立即升温至90～100℃，保持0.5～1h，一方面磷酸把肉桂酸结晶出来；另一方面，磷酸对蛋白质类物质有絮凝作用，同时加热可进一步促进蛋白质变性凝固，从而可彻底去除蛋白质类物质，过滤出肉桂酸后，按摩尔比磷酸∶Ca2+＝1∶1.5加入氢氧化钙，由于磷酸钙的KSP＝1×10-25，可以去除磷酸根离子而不会影响产品的灰份，在过滤磷酸钙的同时，所形成的磷酸钙滤饼可吸附其中的色素起到良好的脱色作用，并对凝固的蛋白类物质有过滤作用。
分离后再经真空浓缩、干燥等常规工序后，即可获得高纯度的L-苯丙氨酸成品，纯度99％以上，产品色泽好、晶形完整、收率达94％以上。
非限定实施例叙述如下1、取L-苯丙氨酸含量为56.2g/L的酶转化液2L，离心后，-0.09Mpa、60℃脱氨至PH 7.0，氨回收重复利用，100℃加入分析纯磷酸(86％)调PH至2.5，保持1小时，过滤除去肉桂酸等，取磷酸摩尔数1.5倍的Ca(OH)2加入滤液中中和，形成Ca3(PO4)2沉淀，过滤，并使清液通过所形成的Ca3(PO4)2滤饼2～3次达到进一步脱色的目的，最后-0.09Mpa、60℃浓缩、干燥后得到成品108.4g，收率96.4％，纯度99.8％。
2、操作同实施例1，取L-苯丙氨酸含量为56.2g/L的酶转化液2L，离心脱氨后加磷酸调PH至3.0，90℃保持0.5小时，过滤，滤液用Ca(OH)2中和，再经过滤、浓缩、干燥得到成品107.25g，收率95.4％，纯度99.6％。
3、操作同实施例1，取L-苯丙氨酸含量为56.2g/L的酶转化液2L，离心脱氨后加磷酸调PH至2.0，95℃保持1小时，过滤，滤液用Ca(OH)2中和，再经过滤、浓缩、干燥得到成品107.86g，收率95.9％，纯度99.7％。
4、操作同实施例1，取L-苯丙氨酸含量为56.2g/L的酶转化液2L，离心脱氨后加磷酸调PH至2.5，90℃保持45分钟，过滤，滤液用Ca(OH)2中和，再经过滤、浓缩、干燥得到成品108.86g，收率96.8％，纯度99.7％。
权利要求
1.一种用反式肉桂酸酶法合成L-苯丙氨酸的后提取新工艺，包括脱氨、酸化、过滤、中和、过滤、浓缩、干燥各单元过程，其特征在于把酸化与加热的方法相结合，即用磷酸酸化至PH 2～3后于90～100℃条件下保持0.5～1小时，过滤分离得到的滤液用Ca(OH)2中和。
全文摘要
用反式肉桂酸酶法合成L－苯丙氨酸的后提取新工艺,转化液离心脱氨后,用磷酸酸化并升温至90～100℃,过滤分离后用Ca(OH)
文档编号C07C227/40GK1349977SQ0011906
公开日2002年5月22日 申请日期2000年10月20日 优先权日2000年10月20日
发明者马士忠, 王纲群, 张晓斌, 冯立文, 高仰哲, 朱武军, 左美林, 王岩 申请人:安徽省科苑应用技术开发(集团)股份有限公司