用于hcv治疗的3’,5’-二-o-酰化核苷的制作方法

专利名称：：用于hcv治疗的3’,5’-二-o-酰化核苷的制作方法用于HCV治疗的3'，5，-二-0-酰化核苷本发明提供了3，，5，-二-0-酰化核苷，其为丙型肝炎病毒(HepatitisCVirus,HCV)RNA依赖性RNA病毒聚合酶的抑制剂的前体药物。当经口施用时，这些化合物可以轻易地从胃肠道(GItract)吸收，并且有效地在体内回复为母体核苷。这些前体药物抑制RNA依赖性的RNA病毒复制，并且用作HCVNS5B聚合酶的抑制剂、用作HCV复制的抑制剂、以及用于哺乳动物治疗丙型肝炎感染。具体而言，本发明涉及酰化的嗜咬核苷的用途，当经口施用核苷时，所述嘧啶核普提供改善的药物吸收，并且所述嘧淀核苷优于先前公开的前体药物。丙型肝炎病毒是全世界主要的健康问题，并且是慢性肝疾病的主要原因。(Boyer，N.等人J.Hepatol.200032:98-112)。感染了HCV的患者有恶化为肝硬化、并随后恶化为肝细胞癌的风险，因此，HCV是肝移植的主要指征。根据世界卫生组织(WorldHealthOrganization)，全世界有超过2亿的感染个体，每年至少有3百万至4百万人感染。一旦感染，大约20%的人清除病毒，但剩下的人将在余生携带HCV。10-20%的慢性感染个体最终恶化为肝损坏的肝石更化或癌症。该病毒疾病通过污染的血液和血液制品、污染的针头而肠胃外地传染，或者通过性传染，并且由感染的母体或携带HCV的母体垂直传染给其子代。目前对HCV感染的治疗限于单独地或者联合核苷类似物利巴韦林(ribavirin)地使用重组干扰素a的免疫疗法，这种疗法由于抗性快速发展而在临床上的益处有限。迫切需要有效治疗慢性HCV感染的改进的治疗剂。目前，仅有有限数量的改善疗法能用来治疗HCV感染。下列文献综述了新的以及现存的治疗HCV和抑制HCVNS5B聚合酶的治疗方法R.G.Gish，Se附.I/iw.199919:5;DiBesceglie，A.M.和Bacon,B.R,，S"^i,折c爿附^7c朋，1999年10月80-85;G.Lake-Bakaar，"对慢性丙型肝炎病毒肝病的当前和未来疗法(CurrentandFutureTherapyforChronicHepatitisCVirusLiverDisease)"，Cm/t.Z)rwgr"rg.//i/e"D/s.20033(3):247-253;P.Hoffmann等人，"实验性治疗丙型肝炎病毒感染的最近专利(RecentpatentsonexperimentaltherapyforhepatitisCvirusinfection)(1999-2002)"，Qp/".77^/",200313(11):1707-1723;F.F.Poordad等人"2000-2002年间丙型肝炎治疗的进展(DevelopmentsinHepatitisCtherapyduring2000-2002)，，，五平0/7/".五附一/igZ)r^20038(l):9-25;M.P.Walker等人，"用于治疗慢性丙型肝炎的有前景的候选物(PromisingCandidatesforthetreatmentofchronichepatitisC)"，￡"平/"v^餘.Z)r"gs200312(8):1269-1280;S,L.Tan等人，"丙型肝炎治疗法当前现状和浮现的策略(HepatitisCTherapeutics:CurrentStatusandEmergingStrategies)",胸""及ev.Z)尸"g2002l:867-881jR.DeFrancesco等人"对丙型肝炎病毒的治疗将进入一个新的时代NS3-4A丝氨酸蛋白酶和NS5BRNA依赖性RNA聚合酶的抑制剂(ApproachinganeweraforhepatitisCvirustherapy:inhibitorsoftheNS3-4AserineproteaseandtheNS5BRNA-dependentRNApolymerase)",JwftV/m//仏200358:1-16;Q.M.Wang等人"丙型肝炎病毒编码的蛋白抗病毒治疗的乾(HepatitisCvirusencodedproteins:targetsforantiviraltherapy)",Z)n/gso/^e200025(9):933-8-944;J.A.Wu和Z.Hong,"用于抗HCV化学治疗的靶向NS5B依赖的RNA聚合酶(TargetingNS5B-DependentRNAPolymeraseforAnti-HCVChemotherapy)",C"r.ZVg7^g.-/w/Z>&.20033:207-219。这些综述引用了当前的在发展过程多个阶段的化合物。联合两种或者三种作用于相同或者不同靶点的抗病毒剂的联合疗法已经成为标准的抗病毒疗法来避免或者减緩病毒抗性林的出现，并且上述综述中公开的化合物可以用于与本发明的化合物联合的联合疗法，因此这些综述以其整体引入本文作为参考。利巴韦林(l画((2R,3R，4S，5R)-3,4-二羟基-5-羟甲基-四氢呋喃-2-基)-lH-[l,2，4三唑-3-羧酸酰胺；VIRAZOLE⑧)是合成的、非干扰素诱导的广镨抗病毒核苷类似物。利巴韦林具有在体外抵抗一些DNA和包括黄病毒科(F/"WWnV/fle)在内的RNA病毒的活性(G.L.Davis，(7flWwewte/<^v2000118:S104-S114)。在单一疗法中，利巴韦林在40%的患者中将血清氨基转移酶的水平降低至正常水平，但其不降低HCV-RNA的血清水平。利巴韦林也显示出显著的毒性，并且已知为诱发贫血。利巴韦林尚未被批准来在单一疗法中抵抗HCV，但批准该化合物在与干扰素oc-2a和干扰素cc-2b的联合疗法中。韦拉米啶(Viramidine)是在肝细胞中转变为利巴韦林的前体药物。干扰素(IFN)可以用来治疗慢性肝炎已经将近十年。IFN为免疫细胞响应病毒感染产生的糖蛋白。认识到有两种不同类型的干扰素1型包括几种干扰素cx和一种干扰素P，2型包括干扰素Y。1型干扰素主要由感染的细胞产生，并且保护临近细胞免于从头感染。IFN抑制许多病毒的病毒复制，其中包括HCV，并且当用作丙型肝炎感染的唯一治疗时，IFN将血清HCV-RNA抑制到不可检测的水平。额外地，IFN常态化血清的氨基转移酶水平。不幸的是，IFN的效果是暂时的。停止治疗会导致70%的复发率，并且仅有10-15%显现出具有正常血清丙氨酸转移酶水平的持续病毒学反应(L.-B.Davis，见上文)早期IFN疗法的一个限制是该蛋白质从血液的快速清除。IFN与聚乙二醇(PEG)的化学衍生物产生具有基本改善的药物代谢动力学性质的蛋白质。PEGASYS⑧为干扰素ot-2a与40kD分支的单甲氧基PEG的缀合物，并且PEG-INTRON⑧为干扰素oc-2b与12kD单甲氧基PEG的缀合物。(B.A.Luxon等人，C7/汰7T^m/;.2002;24(9):1363-1383;A.Kozlowski和J.M.Harris,/Ow"o/.及e/efl^,200172:217-224)。目前，批准干扰素oc-2a和干扰素ot-2b作为治疗HCV的单一疗法。ROFERON-A⑧(Roche)是重组形式的干扰素ot-2a。PEGASYS⑧(Roche)是聚乙二醇化(即聚乙二醇修饰的)形式的干扰素oc-:2a。INTRON-A(ScheringCorporation)是重组形式的干扰素oc-2b，并且PEG-INTRON(ScheringCorporation)是聚乙二醇化形式的干扰素oc-2b。其它形式的干扰素oc、以及干扰素P、Y、t和co目前正在临床研制来治疗HCV。例如InterMune的INFERGEN⑧(干扰素alphacon國l)、Viragen的OMNIFERON⑧(天然干扰素)、HumanGenomeSciences的ALBUFERON、Ares-Serono的REBIF⑧(干扰素卩-la)、BioMedicine的co干扰素、AmarilloBiosciences的口月良干扰素oc、以及InterMune的干扰素Y、干扰素t和干扰素Y-lb正在研制中。对于HCV，利巴韦林和干扰素-oc的联合疗法代表着目前最适的疗法。联合利巴韦林和PEG-IFN(见下文)在54-56%的患者中产生持续的病毒反应(SVR)。SVR处理80%的2型和3型的HCV。(Walker，见上文)。不幸的是，这种联合也产生副作用，这提出了临床上的挑战。抑郁、流感样症状以及皮肤反应与皮下施用的IFN-oc相关，且溶血性贫血与持续的利巴韦林治疗相关。目前处于临床前或者临床研制中、治疗丙型肝炎病毒感染的其它大分子化合物包括Schering-Plough的白细胞介素-10、Intemeuron的IP-SOl、Vertex的Merimebodib(VX-497)、RPI的HEPTAZYME、IdunPharma的IDN-6556、XTL的XTL-002、Chiron的HCV/MFS9、NABI的CIVACIR⑧(丙型肝炎免疫球蛋白)、SciClone的ZADAXIN⑥(胸腺素oc-l)、SciClone的胸腺素加上聚乙二醇化的干扰素、CEPLENE、Innogenetics的乾向E2的治疗性疫苗、Intercell的治疗性疫苗、Epimmune/Genencor的治疗性疫苗、Merix的治疗性疫苗、Tripep的治疗性疫苗Chron-VacC。核酶靶向于HCVRNA。核酶是具有催化序列特异性切割RNA的核酸内切酶活性的、短的天然存在的分子。备选方法是使用结合RNA、并且刺激RNA酶H介导的切割的反义寡核苷酸。现在，已经鉴定出许多进行抗HCV疗法的药物研发的潜在分子靶点，其中包括但不限于NS2-NS3自身蛋白酶、NS3蛋白酶、NS3解旋酶和NS5B聚合酶。RNA依赖性RNA聚合酶对于单链、正义的RNA基因組复制是绝对必需的。这个酶已经引起药用化学家的极大兴趣。NS5B聚合酶的核苷抑制剂可以用作不能链延伸的非天然底物，或者作为与天然核苷酸竟争结合聚合酶的竟争性抑制剂。要行使链终止子的功能，核苷类似物必须被细胞摄入，并且在体内转变为三磷酸酯来竟争聚合酶核苷酸结合位点。向三磷酸酯的转变通常通过将额外的结构需求传递给潜在的核苷聚合酶抑制剂的细胞激酶介导。不幸的是，这将对核苷作为HCV复制抑制剂的直接评估限制为能够原位磷酸化的基于细胞的测试法。B=腺嘌呤胸苷,尿嘧啶,胞苷,鸟噪呤和次黄嘌呤2P-甲基核苷1由E.Walton等人(/.C&附.196912(2):306-309)首次描述。取代的核苷的酯已经用在合成顺序中作为被保护的碳7JC化合物中间体(E.Walton，GB12909654，1970年10月21日公开)。当碱基为胞苷时，酰化的衍生物通常为2的二酯和三酯，其中氨基取代基被酰化(E.Walton，见上文，J.L.Clark等人/7kTWC7^附.200548(17):5504-5508;R.E.Harry-O'kuru等人丄Org.CTie附.199762(6):1754-1759;J.-P.Sommadossi等人WO2004002422)。酯中间体一般为更可能提供结晶化合物的苯甲酸酯或苯乙酸酯。已经报道了4-氨基-l-((2R，3R，4R，5R)-3，4-二羟基-5-羟曱基-3-甲基-四氢呋喃-2-基)-lH-嘧啶-2-酮衍生物的抗病毒活性(E.Walton,/M^/CAe附.见上文)。在2001年11月29日公开的WO0190121中,J.-P.Sommadossi和P.Lacolla公开并例证了式1和2的l，-烷基-以及2，-烷基核苷的抗-HCV聚合酶活性。在2001年12月6日公开的WO01/92282中，J.-P.Sommadossi和P.Lacolla公开并例证了用式1和2的l，-烷基-以及2，-烷基核苦治疗黄8病毒属(F/"WWr附")和痙疫病毒属(尸e幼V/r附")。在2003年4月3日公开的WO03/026675中，G.Gosselin公开了治疗黄病毒属和痕疫病毒属的4，-烷基核苷3。在2004年6月3日公开的WO2004/046331中，J.-P.Sommadossi等人公开了2，-分支的核苷以及黄病毒科突变。在2003年4月3日公开的WO03/026589中，G.Gosselin等人公开了用4，-修饰的核普治疗丙型肝炎病毒的方法。在2005年2月3日公开的WO2005009418中，R.Storer等人公开了治疗由黄病毒科(包括HCV)引起的疾病的嘌呤核苷类似物。其它专利申请公开了一些核苷类似物治疗丙型肝炎病毒感染的用途。在2001年5月10日公开的WO01/32153中，R.Storer公开了治疗病毒疾病的核苷衍生物。在2001年8月23日公开的WO01/60315中,H.Ismaili等人公开了用核苷化合物治疗或者预防黄病毒感染的方法。在2002年3月7日公开的WO02/18404中，R.Devos等人公开了治疗HCV病毒的4，-取代的核苷酸。在2001年10月25日公开的WO01/79246中，K.A.Watanabe公开了治疗病毒疾病的2，-或3，-羟曱基核苷化合物。在2002年4月25日公开的WO02/32920和2002年6月20日公开的WO02/48165中，L.Stuyver等人公开了治疗病毒疾病的核苷化合物。在2003年12月24日公开的WO03/105770中，B.Bhat等人公开了一系列用于治疗HCV感染的碳环核苷衍生物。在2003年1月22日公开的WO2004/007512中，B.Bhat等人公开了抑制RNA依赖的RNA病毒聚合酶的核苷化合物。在这些出版物中公开的核苷主要是2，-甲基-2'-羟基取代的核苷。在2002年7月25日公开的WO2002/057425中，S.S.Carroll等人公开了抑制RNA依赖的病毒聚合酶的核苷衍生物、以及治疗HCV感染的方法。在2002年7月25日公开的WO02/057287中，S.S.Carroll等人公开了相关的2oc-曱基和2P-甲基核糖衍生物，其中碱基为任选取代的7H-吡咯并[2，3-d嘧咬基5。相同申请公开了3P-曱基核苷的一个实例。S.S.Carroll等人(7.Oie附.2003278(14):11979-11984)公开了通过4画氨基-l-((2R，3R，4R，5R)-4-羟基-5-羟甲基-3-曱氧基-四氢呋喃-2-基)-lH-嘧啶-2-酮(5a)抑制HCV聚合酶。在2004年1月29日公开的WO2004/00卯20中，D.B.Olsen等人公开了一系列作为RNA依赖的RNA病毒聚合酶的抑制剂的硫代核苷衍生物。Emory大学题为"2'-氟代核苷，，的PCT公开号WO99/43691公开了一些2'-氟代核苷治疗HCV的用途。Emory大学题为"2'-氟代核苷"的美国专利号6,348,587公开了用于治疗乙型肝炎、HCV、HIV以及异常细胞增殖的2'-氟代核苷家族。2'氟取代的两种构型都进行了公开。Eldrup等人(口头讲演V，丙型肝炎病毒，黄病毒科；关于抗病毒研究的第16次国际会议(OralSessionV，HepatitisCVirus,Flaviviridae;16thInternationalConferenceonAntiviralResearch)(2003年4月27日，Savannah,Ga.))描述了抑制HCV的2，修饰核苷的结构活性关系。Bhat等人(口头讲演V，丙型肝炎病毒，黄病毒科；关于抗病毒研究的第16次国际会议(2003年4月27日，Savannah,Ga.);pA75)描述了可能作为HCVRNA复制抑制剂的核苷类似物的合成以及药物代谢动力学性质。作者报道了2，-修饰的核苷在基于细胞的复制子测试中表现出强效的抑制活性。Olsen等人(口头讲演V，丙型肝炎病毒，黄病毒科；关于抗病毒研究的第16次国际会议(2003年4月27日，Savannah,Ga.)pA76)也描述了2'-修饰的核苷对HCVRNA复制的影响。已经证实，单独、以及联合核苷抑制剂、以及联合蛋白酶抑制剂的HIV逆转录酶的非核苷变构抑制剂是有效的疗法。已经描述了一些类型的非核苷HCVNS5B抑制剂，并且这些非核苷HCVNS5B抑制剂目前处于研制的多个阶段，其中包括苯并咪唑(H.Hashimoto等人WO01/47833，H.Hashimoto等人WO03/000254，P.L.Beaulieu等人WO03/020240A2;P.L.Beaulieu等人US6,448,281Bl;P.L.Beaulieu等人WO03/007945Al);p引味(P.L.Beaulieu等人WO03/0010141A2);苯并瘗二溱(D.Dhanak等人WO01/85172Al;D.Dhanak等人WO03/037262A2;K.J.Duffy等人WO03/099801Al，D.Chai等人WO2004052312，D.Chai等人WO2004052313,D.Chai等人WO02/098424,J.K.Pratt等人WO2004/041818Al;J.K.Pratt等人WO2004/087577Al)、嚷汾(C.K.Chan等人WO02/100851);苯并瘗吩(D.C.Young和T.R.BaileyWO00/18231);P-酮基丙酮酸(S.Attamura等人US6,492,423Bl，A.Attamura等人WO00/06529);嘧咬(C.Garddli等人WO02/06246Al);嘧咬二酮(T.R.Bailey和D.C.YoungWO00/13708);三唤(K,H.Chung等人WO02/079187Al);绕丹宁衍生物(T.R.Bailey和D.C.YoungWO00/10573，J.C.Jean等人WO01/77091A2);2，4-二氧代吡喃(R.A,Love等人EP256628A2);苯丙氨酸衍生物(M.Wang等人《/Oie附.2003278:2489-2495)。NS3蛋白酶作为发现新的抗HCV疗法的主要靶点浮现。在1998年5月28日公开的WO98/22496中，M,R.Attwood等人公开了蛋白酶基于机制的活性位点抑制剂(M.R.Attwood等人,Jwriw'm/C7^附&^);"wdC^附W/^m/^199910:259-273;M.R.Attwood等人，制备和使用氨基酸衍生物作为抗病毒剂(Preparationanduseofaminoacidderivativesasanti-viralagents),德国专利公开DE19914474)。在1998年4月30日公开的W098/17679中，R.D.Tung等人公开了NS3蛋白酶的基于机制的肽抑制剂。在1999年2月18日公开的WO99/07734和1999年8月9日公开的WO00/09543中，MLlinas-Bnmet等人公开了HCV蛋白酶的肽抑制剂。在2000年10月12日公开的WO00/59929中，Y.S.Tsantrizos等人公开了为HCVNS3蛋白酶强效抑制剂的大环三肽。一系列来自Boehringer-Ingleheim的相关专利爿^开了相关的蛋白酶抑制剂，并导致了三肽衍生物BILN2061的鉴定(M.Llinas-Brimet等人5Zorg.AfW,C7^附.丄e汰200010(20):2267陽70;/AfWC7^附.200447(26):6584-94;/C7ie附.200447(7):1605-1608;C&附.200342(12):1356-60)。已经^Hf了Bristol-MyersSquibb鉴定的其它三肽抑制剂，特别是在2003年12月4日公开的WO03/099274、2004年4月22日公开的WO2004/032827、2003年7月3日公开的WO03/053349、2005年5月26日公开的WO2005/046712、以及2005年6月9日公开的WO2005/051410。在2004年8月26日公开的WO2004/072234和2004年11月4日公开的WO2004/093798中，EnantaPharmaceuticals公开了其它的三肽蛋白酶抑制剂。在2005年4月28日公开的WO2005/037214,L.M.Blatt等人也公开了抑制HCVNS3蛋白酶的其它三肽衍生物。在2005年4月7日公开的WO2005/030796中，S.Venkatraman等人公开了HCVNS3丝氨酸蛋白酶的大环抑制剂。在2005年6月30日公开的WO2005/058821中，F.Velazquez等人公开了HCVNS3/NS4a丝氨酸蛋白酶的抑制剂。在2002年6月20日公开的WO02/48172中，Z.Zhu公开了作为NS3蛋白酶抑制剂的二芳基肽。在2002年1月31日公开的WO02歸87和WO02/08256中，A.Saksena等人公开了HCVNS3蛋白酶的肽抑制剂。在2002年1月31日公开的WO02/08251中，M.Lim-Wilby等人公开了NS3蛋白酶的肽抑制剂。在1999年12月21日公开的US6,004,933中，L.W.Spruce等人公开了抑制半胱氨酸蛋白酶(包括HCV内肽酶)的杂环肽衍生物。也正在研究基于非底物的NS3蛋白酶抑制剂例如2，4，6-三羟基-3-硝基-苯曱酰胺衍生物(SudoK.等人，55及C1997238:643-647;SudoK.等人Jw"v/m/C7^附^07"w^C7^附W/^ni/y;19989:186)，其中包括RD3-4082和RD3-4078,前者在酰胺上用14碳链进行了取代，并且后者加工了对苯氧基苯基基团。SCH68631(—种菲醌)是HCV蛋白酶抑制剂(ChuM.等人rem^WfwiLe汰199637:7229-7232)。在相同作者给出的另一实例中，从12真菌灰黄青霉(尸emc/肌M附gr/wo/w/v"附)分离的SCH351633被鉴定为蛋白酶抑制剂(ChuM.等人，C7^附，Ze汰19999:1949-1952)。通过设计基于大分子水蛭蛋白酶抑制剂(eglin)c的选择性抑制剂达到了抗HCVNS3蛋白酶的纳摩尔功效。从水蛭分离的水蛭蛋白酶抑制剂c是几种丝氨酸蛋白酶的强效抑制剂，其中所述的丝氨酸蛋白酶例如灰色链霉菌gWw附)蛋白酶A和B、oc-糜蛋白酶、类胰凝乳蛋白酶(chymase)和枯草杆菌蛋白酶(QasimM.A.等人，祝oc/^附/拚j;199736:1598-1607)。瘗唑烷衍生物在用NS3/4A融合蛋白质和NS5A/5B底物的反相HPLC测试中显示相关的抑制作用(SudoK,等人Jw,/Wm/及^^wr^199632:9-18)，尤其是具有用长的烷基链进行取代的稠合的肉桂酰部分的化合物RD-1國6250、RD46205和RD46193。瘗峻烷和N-苯甲酰苯胺由N.Kakiuchi等人在尸^B5"丄".1998421:217-220中、以及N.Takeshita等人/4w"/.祝oc&附.1997247:242-246中进行鉴定。在ScheringCorporation于2002年1月31日公开的WO02/08198和BristolMyersSquibb于2002年6月20日公开的WO02/48157中公开了作为HCV的NS3丝氨酸蛋白酶抑制剂的咪唑烷酮。在2002年6月20日公开的WO02/48116中，P.Glunz等人公开了NS3蛋白酶的嘧啶酮抑制剂。抗HCV的其它酶学靶点包括HCVIRES位点(内部核糖体进入位点)和HCV解旋酶。IRES抑制剂已由Immusol，RigelPharmaceuticals(R803)和Anadys(ANA245和ANA246)报道。Vertex公开了HCV解旋酶的抑制剂。能够抑制抗性突变林的联合疗法已经成为充分建立的抗病毒化学疗法。本文公开的核苷抑制剂可以与其它核苷HCV聚合酶抑制剂、非核苷的HCV聚合酶抑制剂、以及HCV蛋白酶抑制剂联合。随着其它类型的HCV药物例如病毒进入抑制剂、解旋酶抑制剂、IRES抑制剂、核酶以及反义寡核苷酸的出现和研制，它们也将是联合疗法的良好候选。干扰素衍生物已经成功地与利巴韦林和千扰素进行了联合，并且化学修饰的干扰素将用于与本文公开的核苷联合。本发明的目的在于提供治疗感染了丙型肝炎病毒的宿主的新型化合物、方法和纟且合物。核苷衍生物通常是强效的抗病毒(例如HIV、HCV、单纯疱疹病毒(We/T^s/柳/;/e;C、CMV)和抗癌的化学治疗剂。不幸的是，它们的实际使用通常受两因素限制。首先，不佳的药物代谢动力学性质通常限制核普从消化道吸收和限制了核苷衍生物的细胞内浓度，以及，第二，最适度以下的物理性质限制了用来增强活性成分递送的制剂选择。Albert引入术语前体药物来描述缺少内在生物学活性、但能够代谢转化为活性药物物质的化合物(A.Albert,Se&"/veChapmanandHall,London,1951)。最近，对前体药物进行了综述(P.Ettmayer等人，/.C7^附.200447(10):2393-2404;K.Beaumont等人，Cmit.Z>rwgAfe似6.20034:461-485;H.Bundgaard,前体药物的设计多种官能团和化学实体的生物可转化的衍生物(Z)es/gwjProflfrwgs:5/orevw'6/edmVWves/or书中，H.Bundgaard(编著)ElsevierSciencePublishers,Amersterdam1985;G.M.Pauletti等人爿rfv.Z)e/Zv.及ev.199727:235-256;R.J.Jones和N.Bischofberger,颠/Wm/紐199527;1-15以及C.R.Wagner等人，AfW.及d/ev.200020:417-45)，并且这些参考文献在此处以其整体引入作为参考。虽然转化可以通过特异性酶通常为水解酶来催化，但活性化合物也可以通过非特异的化学方法再生。可药用前体药物指的是在宿主中进行代谢例如水解或氧化来形成本发明化合物且不形成毒理学问题的片段的化合物。前体药物的一般实例包括具有与活性化合物的功能部分连接的生物学不稳定保护基团的化合物。已经利用对糖部分上羟基的烷基化、酰化或者其它亲脂修饰来设计前体核苷酸(pronucleotides)。这些前体核苷酸可以在体内水解或脱烷基化来产生活性化合物。限制口服生物利用度的因素通常是从胃肠道的吸收和通过肠壁和肝的首过(first-pass)排泄。最佳化的穿过胃肠道的跨细胞吸收需要D(7.4)大于0。然而，分配系数的最佳化不保证成功。前体药物必须避免肠细胞中的主动排出转运蛋白。在肠细胞中细胞内的新陈代谢可以导致被动运输、或者通过排出泵将代谢产物主动运输回消化道内腔。前体药物必须设计为在到达靶细胞或受体之前避免在血液中的不希望的生物转化。肽转运蛋白(PEPT蛋白质)为定位在肠和肾脏上皮细胞刷状缘膜中的质子偶联的主动转运系统，其在蛋白质和氨基酸的吸收中发挥重要作用。这个发现即这些转运系统能够介导与氨基酸连接的药物的摄入为药物递送提供了有力工具(T.Terada和K.Inui，Z)r"gAf""6.20045(1):85-94;E.DeClercq和H.J.Field,5n7./尸/^f附flco/.2006147(1):1-11)。发现抗疱渗的核苷无环鸟脊(acyclovir)和更昔洛韦(ganciclovir)当连接于L-氨基酸酯时，通过PEPT蛋白质有效地转运入细胞(H.Han等人，尸/^r附.199815(8):1154-1159;C.U.Nielsen和B，Brodin，20034(5):373-388)。发现无环鸟苷和万乃洛韦(valacyclovir)的L-缬氨酸酯(L-valinylester)为PEPT摄入的底物(G.M.Friedrichsen等人/尸Aar附.200216(1-2):1-13;A.Guo等人/尸/^r附.五x/;.7T^r.1999289(32):29509-29514;M.E.Ganapathy等人，祝oc/iem.J,V/^".及仏CV7/wm"w，1998246(2):470-475)。在2004年1月8日公开的WO2004/003000中，J,P.Sommadossi等人公开了l'-、2'-、3'-和4'-取代的P-D和P-L核苷的2'-和3'前体药物。在2004年1月8日公开的WO2004/002422中，公开了治疗黄病毒科感染的2'-C-甲基-3'-0-缬氨酸酯呋喃核糖基(ribofuransyl)胞苷。Idenix报道了相关化合物NM283的临床试验，其中认为NM283为1的缬氨酸酯4(B=胞嘧淀)。在2004年1月8日公开的WO2004/002999中，J.-P.Sommadossi等人公开了治疗黄病毒感染(其中包括HCV感染)的、l'、2'、3'或4'分支的核苷的一系列2'或3'前体药物。在2004年6月24日公开的WO2004/052899中，R.Storer等人公开了制备2|3-甲基-胞嘧"定的3'-0-缬氨酰基(valinyl)衍生物的方法。在2004年7月15日公开的WO2004/058792中，R.Storer等人公开了制备3'-0-缬氨酰基衍生物的一步法。在2005年1月25日发行的US6,846,810中，J.A.Martin等人公开了用作治疗HCV感染患者的作为前体药物的4'-叠氮基-胞嘧啶的酰基衍生物。在美国系列号11/635898中，K.Sarma等人公开了用于治疗HCV感染患者的2'-脱氧-2'-0^氟代-2'-卩-甲基-胞苷的二酰基衍生物。在2006年2月23日公开的美国公开号2006/00408卯中，J.A.Martin等人公开了用于治疗HCV感染患者的4'-叠氮基-阿糖胞苷及其前体药物。本发明涉及4-氨基-l-((2R，3R，4R，5R)-3，4-二羟基-5-羟甲基-3-甲基-四氢呋喃-2-基)-l/T-嘧啶-2-酮的新型二-酰基衍生物(1，也称为(2R)-2P-甲基-胞苷)及其K合物、溶剂合物和酸加成盐其中，R'独立地选自C2.s未分支或者分支的烷基、Cw未分支或者分支的烯基、C3-S环烷基和C2-s卤代烷基。本发明的化合物用于治疗HCV介导的病症。本发明进一步包括在单独或联合疗法中用本发明的化合物治疗HCV感染患者的方法、以及包含所述化合物的药物组合物。本发明进一步涉及制备二酰基衍生物的方法。已经公开了4-氨基-l-((2R，3R，4R，5R)-3，4-二羟基-5-羟甲基-3-曱基-四氢呋喃-2-基)-1//-嘧淀-2-酮1-4的HCV聚合酶抑制活性(J,P.Sommadossi等人，Ji丄X)。在临床应用中，期望在最小化病毒突变可能性的条件下提供高血液水平的1-4来快速抑制HCV聚合酶、并因此降低病毒水平，以及来篩选抗性菌林。用母体核苷很难达到充分高的水平。前体药物能够改善化合物的药物代i射动力学和物理学性质，并因此最佳化生物利用度。缬氨酸酯1-5已经作为1-4的前体药物进行了研究。虽然前体药物候选物看起来容易想象，但鉴定具有适当物理化学和药物代谢动力学性质的化合物、体内转换以及安全特性是需要大量试验的复杂、多学科问题。鉴定经口递送的前体药物的障碍包括，在施用后快速并且有效释放活性部分的同时维持足够的水溶性、亲脂性以及化学稳定性。必须最小化前体药物的非酯酶代谢和转运蛋白介导的清除(K.Beaumont等人C"/r.Z^"gM""6.20034(6):461-485)。同样地，细胞色素P4so酶的抑制作用或诱导作用能够产生不希望的药物-药物相互作用，这是我们不希望的。现在发现，I-4的二酯是优良的前体药物，并且提供实质上更高血液水平的1-4。在本发明的一个实施方案中，提供了根据式I的化合物，其中R'如本文上文定义。在本发明的另一个实施方案中，提供了根据式I的化合物，其中R1为乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基。此外，在本发明的另一个实施方案中，提供了根据式I的化合物，其中W为乙基或异丙基。此外，在本发明的另一个实施方案中，提供了根据式I的化合物，其中W为异丙基、并且化合物为盐酸盐、甲磺酸盐、半硫酸盐(hemisulfate)或石充酸盐。本发明的另一个实施方案为如上定义的根据式I的化合物或其水合物、溶剂合物或酸加成盐作为治疗由HCV介导的疾病的抗病毒剂的用途。本发明的另一个实施方案为如上定义的根据式I的化合物或其水合物、溶剂合物或酸加成盐作为抗病毒剂与至少一种免疫系统调节剂和/或至少一种抗病毒剂联合地治疗由HCV介导的疾病的用途。本发明的另一个实施方案是如上定义的根据式I的化合物或其水合物、溶剂合物或酸加成盐用于制备治疗由HCV介导的疾病的药物的用途。本发明的另一个实施方案是如上定义的根据式I的化合物或其水合物、溶剂合物或酸加成盐与至少一种免疫系统调节剂和/或至少一种抑制HCV复制的抗病毒剂联合来制备治疗由HCV介导的疾病的药物的用途。此外，在本发明的另一个实施方案中提供了治疗由HCV介导的疾病的方法，其中包括向需要其的患者施用治疗有效量的根据式I的化合物或其水合物、溶剂合物或酸加成盐，其中W选自Cw未分支或者分支的烷基、C2—5未分支或者分支的烯基、C2_5卣代烷基和Cw环烷基。此外，在本发明的另一个实施方案中提供了治疗由HCV介导的疾病的方法，其中包括向需要其的患者施用0.1-10g/天的根据式I的化合物或其7jC合物、溶剂合物或酸加成盐，其中W选自(^2.5未分支或者分支的烷基、C2-s未分支或者分支的烯基、(:2.5闺代烷基和<:3_5环烷基。此外，在另一实施方案中，剂量为在0,5-7g/天之间，并且在进一步的实施方案中，剂量为在1.0-6.0g/天之间。在本发明的另一个实施方案中提供了治疗由HCV介导的疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者共施用治疗有效量的根据式I的其中R1选自<:2.5未分支或者分支的烷基、Cw未分支或者分支的烯基、(:2.5囟代烷基和C3_5环烷基的化合物或其7K合物、溶剂合物或酸加成盐和治疗有效量的至少一种免疫系统调节剂和/或至少一种抑制HCV复制的抗病毒剂。在本发明的另一个实施方案中提供了治疗由HCV介导的疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者共施用治疗有效量的根据式I的其中R1选自<:2.5未分支或者分支的烷基、(:2.5未分支或者分支的烯基、<:2_5卣代烷基和C3_5环烷基的化合物或其水合物、溶剂合物或酸加成盐和治疗有效量的至少一种免疫系统调节剂，其中所述的免疫系统调节剂为干扰素、白细胞介素、肿瘤坏死因子或者集落刺激因子。在本发明的另一个实施方案中提供了治疗由HCV介导的疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者共施用治疗有效量的根据式I的其中R1选自C2-s未分支或者分支的烷基、C2，5未分支或者分支的烯基、Cw卣代烷基和C3_s环烷基的化合物或其7JC合物、溶剂合物或酸加成盐和治疗有效量的至少一种免疫系统调节剂，其中所述的免疫系统调节剂为干扰素或者化学衍生的干扰素。在本发明的另一个实施方案中提供了治疗由HCV介导的疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者共施用治疗有效量的根据式I的其中R1选自<:2.5未分支或者分支的烷基、C2-s未分支或者分支的烯基、<:2-5离代烷基和C3_5环烷基的化合物或其水合物、溶剂合物或酸加成盐和治疗有效量的至少一种其它抗病毒化合物。在本发明的另一个实施方案中提供了治疗由HCV介导的疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者共施用治疗有效量的根据式I的其中R1选自(:2.5未分支或者分支的烷基、Cw未分支或者分支的烯基、(:2.5卣代烷基和C3_5环烷基的化合物或其水合物、溶剂合物或酸加成盐和治疗有效量的至少一种其它抗病毒化合物，其中所述的抗病毒化合物为HCV蛋白酶抑制剂、另一种核苷HCV聚合酶抑制剂、非核苷HCV聚合酶抑制剂、HCV解旋酶抑制剂、HCV51发酶抑制剂或HCV融合抑制剂。在本发明的另一个实施方案中提供了包含与至少一种可药用载体、稀释剂或赋形剂混合的、根据式I的其中RJ选自Cw未分支或者分支的烷基、C2_5未分支或者分支的烯基、C^卣代烷基和C3—5环烷基的化合物或其7jC合物、溶剂合物或酸加成盐的药物组合物。在本发明的另一个实施方案中提供了制,备根据式I的其中Ri选自C2_5未分支或者分支的烷基、C2-s未分支或者分支的烯基、C2-5卣代烷基和C3.5环烷基的化合物或其水合物、溶剂合物或酸加成盐的方法，所述方法包括下文列举以及在实施例中例证的步骤(/)-(v)。所述方法包括在碱性含水有机介质中处理I,其中所述碱性含水有机介质可以是在存在DMAP和足够的碱来维持溶液的pH至少为大约7.5时，与本文定义的酰化剂匀质或者双相性。本方法允许酰化作用，但不伴随与杂环碱的反应。本发明进一步的实施方案为在碱性反应条件下进行核苷I的选择性O-酰化作用来提供O-酰基核苷II的方法其中W选自C2—5未分支或者分支的烷基、Cw未分支或者分支的烯基、Cw环烷基、Cw卣代烷基，以及任选取代的苯基，所述方法包括下列步骤(/)在多相的含水溶剂混合物中溶解II和DMAP，并添加水性碱来调节pH为大约7.5至大约12;任选地加入足够的饱和水性NaCI来产生二相性的反应混合物；(///)添加酰化剂和额外的碱，足以维持pH为大约7.5至大约12;(/v)监测反应，并在转化达到满意水平时停止加入所述酰化剂和所述碱；(v)任选地将O-酰基核苷接触可药用酸来形成O-酰基核苷的酸加成盐。本文所用词语"一，，或"一种，，实体指的是一种或多种实体；例如一种化合物指的是一种或者多种化合物或者至少一种化合物。诸如此类，术语"一个"、"一个或多个"、以及"至少一个"在本文可以互换使用。词语"如上文定义"指的是说明书提供的第一个定义。术语"独立地，，在本文用来表示应用于任意一种情况中的变量，而不考虑在相同化合物中存在或者不存在具有相同或不同定义的变量。因此，在化合物中，当R1出现两次并且定义为"独立地选自<:2_5未分支或者分支的烷基、Cw未分支或者分支的烯基、Cw环烷基和C2—5卣代烷基"时，两个W可以是相同的，或者两个W可以具有不同含义。如本文所用的术语"任选的"或"任选地"表示其后描述的事件或情形可以但不需要出现，并且该描述包括事件或情形出现的情况和不出现的情况。术语"独立地"在本文用来表示应用于任意一种情况中的变量，而不考虑在相同化合物中存在或者不存在具有相同或不同定义的变量。因此，在化合物中，当R1出现两次并且定义为"独立地选自Cw未分支或者分支的烷基、C2-5未分支或者分支的烯基、Q-5环烷基和C2-5商代烷基"时，两个R1可以相同或者彼此不同。术语"烯基，，在本文用来表示具有2-10个碳原子且具有1个或者2个烯属双键[优选一个烯属双键I的未被取代的烃链。如本文所用的"<:2_5烯基"指的是由2-5个碳组成的烯基。实例为乙烯基、l-丙烯基、2-丙烯基(烯丙基)或2-丁烯基(巴豆基)。如本文所用，术语"烷基"表示含有l-10个碳原子的未分支或分支的链、饱和的、单价烃残基。如本文所用，"Qr5烷基"指的是由2-5个碳组成的烷基。烷基的实例包括但不限于乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基或戊基、异戊基、新戊基。如本文所用，术语"环烷基"表示含有3-8个碳原子的饱和碳环，即环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基或环辛基。如本文所用，"C3_5环烷基"指的是在碳环中由3-5个碳组成的环烷基。如本文所用，术语"卣代烷基"表示如上文定义的未分支或分支的链烷基，其中l个、2个、3个或多个氢原子被卣素取代。如本文所用，"C2-s卤代烷基"指的是由2-5个碳和1-11个卣素取代基组成的卣代烷基。实例为l-氟代曱基、l-氯代曱基、l-溴代甲基、l-碘代甲基、三氟甲基、三氯曱基、三溴曱基、三捵甲基、l-氟代乙基、l-氯代乙基、l-溴代乙基、1-碘代乙基、2-氟代乙基、2-氯代乙基、2-溴代乙基、2-碘代乙基、2，2-二氯乙基、3-溴代丙基或2,2,2-三氟乙基。如本文所用，术语"二-酰基"指的是如本文所述衍生的核苷化合物，其中3'-和5'-羟基为酯-0C(O)R1,其中R1如权利要求1定义。如本文所用，术语"酰化剂"指的是酐或者酰基卣。如本文所用，术语"酐"指的是通用结构为Wc(0)-0-C(0)I^的化合物，其中W如权利要求1定义。如本文所用，术语"酰基卣"指的是通用结构为RC(0)X的化合物，其中X为卤素。术语"酰基咪唑"指的是通用结构为R'C(0)X的化合物，其中X为N-咪唑基。如本文所用，术语化合物的"活化的衍生物"指的是使化合物在预期化学反应中活化的最初化合物的瞬时活性形式，其中所述的最初化合物仅为适当活性或者无活性。活化作用通过在分子内形成具有比最初化合物更21高能量的^f汙生物或化学基来完成，这使得活化的形式更加容易与另一试剂反应。在本发明的上下文中，羧基的活化作用尤为重要，并且在下文更加详细地描述了活化羧基的相应活化剂或基团。本发明特别的兴趣在于羧酸酐和羧酸的酰氯。如本文所用，词语"多相的含水溶剂混合物"指的是产生两相或多相混合物的水和有机共溶剂的混合物。这种多相的含水溶剂混合物可以得自具有有限水溶性的共溶剂，或者可以调整水性组分的离子强度来限制在水相中共溶剂的溶解性。术语"碱金属氢氧化物"指的是式为MOH的化合物，其中M为锂、钠、钾或铯，"碱金属碳酸氢盐"指的是化合物MHC03,其中M为钠或钾，并且"碱金属碳酸盐"指的是化合物M2C03，其中M为钠或钾。本领域技术人员理解能用来维持pH在预期范围的其它碱，并且其它碱在本发明的范围之内。本申请中使用的缩写包括乙酰基(Ac)、大气(Atm)、高压液相色语(HPLC)、甲基(Me)、乙腈(MeCN)、丁基(Bu)、曱醇(MeOH)、熔点(mp)、MeSOH甲磺酰基或Ms)、质谱(ms)、曱基叔丁基醚(MTBE)、二氯甲烷(DCM)、丙基(Pr)、磅每平方英寸(psi)、吡咬(pyr)、室温rt或RT、N，N-二甲基乙酰胺(DMA)、4-N，N-二甲基氨基吡啶(DMAP)、三乙胺(Et3N或TEA)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、薄层层析(TLC)、乙酸乙酯(EtOAc)、四氢呋喃(THF)、乙醚(EtzO)、乙基(Et)、4-Me-C6H4S02-或曱苯磺酰基(Ts)、异丙基(Z-Pr)、乙醇(EtOH)。当用于烷基部分时，包括字首法正(n)、异(Z-)、仲(mc-)、叔(teW-)和新("")在内的常规命名法具有其习惯含义。(J.Rigaudy和D.P.Klesney，iVo附ewc/a似i^,wOgflmcC7^/w^y，IUPAC1979PergamonPress,Oxford.)。表1给出了本发明包括、并且在本发明范围内的代表性化合物的实例。提供下列这些实施例和制剂来使本领域技术人员更加清楚地理解和使用本发明。它们不理解为限制本发明的范围，而仅仅用作例证及其代表。一般而言，本申请所用命名法基于产生IUPAC系统命名法的BdlsteinInstitute计算机系统AUTONOMTMv.4.0。如果在所述结构和该结构给定的名称之间存在偏差，那么以所述结构为准。此外，如果结构的立体化学或部分结构没有用例如加粗或虚线标识，那么结构或者部分结构理解为包含其所有立体异构体。表l中显示了这些环结构的计数系统。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>AUC(cyt)为母体胞苷核苷1-5曲线下的面积母体核苷为了进一步评估在人受体中的可能作用方式，对推定的前体药物评估了通过Caco-2细胞的运输。Caco-2细胞通常用来评估分子的潜在吸收/通透性(G.Gaviraghi等人，在户/ra簡flrcoA:Z""/c0/^附/z"&》wrese"rc/r.^/o/6>g/ai/，JPAfl,附flcoA:,Vie,Zc做"0附/7"toAVw"//S^m&g/es.—书中，B.Testa等人编辑，WileyInterscienceVCH,Zurich2001pp3-14)。发现1-4的C2-4烷基二酯的Caco-2通透性是可以接受的。本发明的化合物可以通过在水性有机溶剂中酰化1-4而方便地一步制备。溶剂可以是同质的水性溶液或者两相溶液。水性有机溶剂的pH通过加入碱中和酰化作用产生的酸来维持在高于7.5。碱可以是碱或碱金属氢氧化物或叔胺。反应在存在DMAP下进行，其中DMAP在本领域已知为酰化作用的催化剂。本方法的优点是可以获得预期产物而不酰化杂环碱。不需要保护基团，这排除了对保护/脱保护步骤的需要。该方法在所附实施例中进行了描述。本发明的化合物可以制剂成非常多的经口施用剂量形式和载体。经口施用可以是片剂、包衣片剂、硬明胶胶嚢和软明胶胶嚢、溶液、乳剂、糖浆剂或悬浮液形式。在其它施用途径中，当通过栓剂施用时，本发明的化合物是有效的。最方便的施用方式是通常的经口施用，其中使用可以根据疾病的严重性和患者对抗病毒药物的反应进行调整的常规的日剂量方案。本发明的化合物及其可药用盐可以与一种或多种常规赋形剂、载体或稀释剂一起放置成为药物组合物和单位剂量的形式。药物组合物和单位剂量形式可以包含常规比例的常规成分，具有或不具有额外的活性化合物或成分，并且单位剂量形式可以包含与所用预期日剂量范围同量的任意合适有效量的活性成分。药物组合物可以采用固体例如片剂或填充的胶嚢、半固体、粉末、持续释放的制剂，或者液体例如溶液、悬浮液、乳剂、酏剂或口服用途的填充胶嚢，或者用于直肠或阴道施用的栓剂形式，或者肠胃外用途的无菌注射溶液。一般的制剂包含大约5%至大约95%的活性化合物(W/W)。术语"制剂"或"剂量形式"旨在既包括活性化合物的固体制剂也包括活性化合物的液体制剂，并且本领域技术人员理解，活性成分可以根据靶器官或组织和预期剂量以及药物动力学参数而在不同制剂中存在。本文所用术语"赋形剂，，指的是在制备药物组合物中有用的、通常安全、无毒并且既非生物学上不期望也非其它方面不期望的化合物，并且包括在兽医用途以^A药物用途上都可接受的赋形剂。可以仅施用本发明的化合物，但通常考虑预期的施用途径和标准的药物实践而在与一种或多种适当的药物赋形剂、稀释剂或载体的混合后施用。活性成分的"可药用盐"形式最初也可以对活性成分赋予非盐形式没有的期望的药物代谢动力学性质，并且甚至可能积极地影响活性成分在其体内治疗活性方面的药物代谢动力学。名词化合物的"可药用盐"表示可药用并且具有母体化合物预期药理学活性的盐。此类盐包括(l)与无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等或者与有机酸例如羟乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、竿果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、曱磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲M酸、樟脑磺酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、水杨酸、己二烯二酸等形成的酸加成盐。应当理解的是，所有谈及的可药用盐都包括同一酸加成盐如本文定义的溶剂加成形式(溶剂合物)或结晶形式(多晶型物)。固体形式制剂包括粉剂、片剂、丸剂、胶嚢剂、栓剂和可分散颗粒剂。固体载体可以是一种或多种也可以起稀释剂、调味剂、助溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或装胶嚢材料作用的物质。在粉剂中，载体通常为细微分开的固体，其是含细微分开的活性成分的混合物。在片剂中，活性成分通常以适当比例与具必需的结合能力的栽体混合，并压制成预期形状和大小。合适载体包括但不限于碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、黄蓍、曱基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。除了活性成分外，固体形式制剂还可以包含着色剂、香料、稳定剂、緩沖液、人造和天然的增甜剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。液体制剂也适合经口施用，其包括乳剂、糖浆剂、酏剂和水悬浮液的液体制剂。这些包括旨在使用前不久才转变为液体形式制剂的固体形式制剂。乳剂可以在溶液例如含水丙二醇溶液中制备，或者可以包含乳化剂，例如卵磷脂、失水山梨糖醇单油酸酯(sorbitanmonooleate)或阿拉伯胶。水悬浮液可以通过在含粘性物质例如天然的或合成的树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其它熟知的助悬剂的水中^:经细微分开的活性成分来制备。可以将本发明的化合物制剂为用作栓剂施用。首先熔化低熔点蜡例如脂肪酸甘油酯的混合物或可可脂，并将活性成分例如通过搅拌进行均匀分散。然后将熔化的匀质混合物倾倒进入合适大小的模具，随后冷却并凝固。可将本发明的化合物制剂为用于阴道施用。除了活性成分外，还包含本领域已知的适当载体如阴道栓剂、塞剂、乳剂、凝胶剂、糊剂、发泡剂或喷雾剂。Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy1995，E.W.Martin编辑，Mack出版公司，第19版，伊斯顿，宾西凡尼亚一书中描述了合适的制剂和药用栽体、稀释剂和赋形剂。熟练的制剂科学家可以在说明书教义之内改变制剂来提供许多针对特定施用途径的制剂，而不使本发明组合物不稳定或影响其治疗效果。例如通过轻微改变(例如形成盐)可轻易地实现对本化合物的修饰来使其更加可溶于水或其它载体，这为本领域技术人员所熟知。本领域技术人员还熟知，对特定化合物的施用途径和剂量方案进行改变以便本化合物的药物代谢动力学在患者中达最大有利效果。本文所用术语"治疗有效量"表示在个体中减轻疾病症状所需要的量。在每种特定情况中，都将剂量调整为个体需要量。剂量可以在大范围内变化，这取决于很多因素，例如待治疗疾病的严重性、患者的年龄和总体健康状态、患者正在接受治疗的其它药物、施用途径和形式以及相关医生的偏爱和经验。对于经口施用，大约0.1至大约10g/天的日剂量在单一疗法中和/或在联合疗法中是适当的。优选的日剂量在大约0.5至大约7.5g/天之间、更加优选1.5至大约6.0g/天之间。一般地，治疗以大的起始"负荷剂量(loadingdose)"开始来快速降低或者消除病毒，然后减少剂量至足以防止感染复发的水平。本文所述治疗疾病的普通技术人员能够不需要过多实验而仅依赖个人知识、经验和本发明的公开确定本发明化合物对所给疾病和患者的治疗有效量。治疗功效可以通过肝功能和肝脏代谢功能测试确定，其中所述的肝功清蛋白质(例如白蛋白、凝固因子、碱性磷酸酶、转氨酶(例如丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶)、5，-核苷酶、y-谷氨酰基转肽酶等)、胆红素的合成、胆固醇的合成、以及胆汁酸的合成，并且其中所述的肝脏代谢功能测试包括但不限于糖代谢、氨基酸和氨代谢。备选地，治疗功效可以通过检测HCV-RNA来监测。这些结果使得可以优化剂量。在本发明的实施方案中，活性化合物或盐可以与另一种抗病毒剂例如利巴韦林、另一种核苷HCV聚合酶抑制剂、另一种HCV非核苷聚合酶抑制剂、HCV蛋白酶抑制剂、HCV解旋酶抑制剂或HCV融合抑制剂组合施用。当活性化合物或其衍生物或盐与另一种抗病毒剂组合施用时，活性会超过母体化合物。当治疗为联合疗法时，该施用可以与核苷衍生物的施用同时或相继进行。因此，本文所用"同时施用"包括在同一时间或者在不同时间施用药剂。在同一时间施用两种或多种药剂可以通过包含两种或多种活性成分的单一制剂或者通过基本同时施用两种或多种具单一活性药剂的剂量形式实现。应当理解的是，本文谈及治疗时扩展至预防和治疗存在的疾病。此外，如本文所用的术语"治疗"HCV感染，也包括治疗或预防与HCV感染关联或由HCV感染介导的疾病或者病症或其临床症状。实施例1丙酸(21^，311，411，511)-5-(4-氨基-2-氧代-2好-嘧啶-1-基)-4-羟基-4-甲基-3-丙酸基-四氢呋喃-2-基甲基酯；盐酸盐9(1-1)向在THF(15mL)和H20(7mL)中的1-4(1.0g，3.89mmol)溶液中加入TEA(4.72g，33.87mol),并将反应混合物冷却至5'C。在将反应混合物的温度维持在0。C以下的同时，緩慢加入丙酰氯(1.44g，15.45mmol)。通过hplc监测反应，并在最初加入结束之后，在仍然存在单丙酸酯时，加入额外的丙酰氯(0.72g，7.77mmo1)，并在室温搅拌反应过夜。将反应混合物冷却至0'C，并将pH用浓HC1调整为大约6.5。将混合物在EtOAc(30mL)和H20(15mL)之间分配，并分离各相。用EtOAc(2x25mL)提取7JC相，并用27稀释的盐水(2x20mL)洗涤合并的有机提取物、将其干燥(Na2S04)、过滤、并在真空中浓缩来提供作为油的游离碱。将油溶解在IPA(5mL)中，用HC1在IPA中处理(lmL的大约4NHC1),并在真空中浓缩。将残余物从IPA/MTBE/乙酸异丙酯(1:3:15)中再结晶，过滤所得结晶，用乙酸异丙酯洗涤，并在真空中在80。C干燥来提供0.95g(60.1。/o)的1-1。实施例2异丁酸(2R，3R，4R,5R)-5-(4-氨基-2-氧代-2好-嘧啶-l-基)-4-羟基-3-异丁酰氧基-4-曱基-四氢呋喃-2-基甲基酯；盐酸盐(I-2)向1-4(0.50g，1.94mmol)、DMAP(0.026g，0.21mmol)、THF(8mL)和H20(4mL)的溶液中加入TEA(2.36g，16.93mmol)，并将反应混合物冷却至大约-5。C。以允许将反应温度维持在0。C以下的速率逐滴加入异丁酰氯(0.93mL，8.75mmol)。通过HPLC-MS监测反应。加入额外份数的0.41g和0.21g异丁酰氯(共1.55g，14.58mmol)来除去单酰化副产物(通过hpk测定)。反应物在RT搅拌过夜，冷却至0'C，并用浓HCl将pH调整为pH6.5。将混合物在EtOAc(30mL)和H20(15mL)之间分配，并分离相。用EtOAc(2xl5mL)提取水相，并接下来依次用稀释的盐水(20mL)、稀释的NaHCO3(20mL)、稀释的盐水(15mL)洗涤合并的有机提取物，将其干燥(Na2S04)，过滤，并在真空中浓缩来提供作为油的游离碱。将油溶解在IPA(5mL)中，用HCl在IPA中处理(lmL的大约4NHCl),并在真空中浓缩。将残余物从IPA/MTBE(1:10)中再结晶，过滤所得结晶，用MTBE洗涤，并在真空中在80。C干燥来提供0.61g(72.6。/o)的1-2。实施例3戊酸(2R，3R，4R，5R)-5-(4-氨基-2-氧代-2/r-嘧啶-l-基)-4-羟基-4-甲基-3-戊酰基氧基-四氢呋喃-2-基甲基酯；盐酸盐(I-3)向I画4(0.4卯g，l.卯mmol)、DMAP(0.026g，0.21mmol)、THF(7mL)和H20(3mL)的溶液中加入TEA(2.31g，16.59mmol)，并将反应混合物冷却至大约0'C。以允许将反应温度维持在5。C以下的速率逐滴加入戊酸酐(1.6g，2.57mmol)。通过HPLC-MS监测反应。加入两份0.32g戊酸酐(共282.24g，11.99mmol)来除去单酰化副产物。反应混合物冷却至0°C，并用浓HC1将pH调整为pH6.8。将混合物在EtOAc(30mL)和H20(15mL)之间分配，并分离相。用EtOAc(2xl5mL)提取水相，并依次用稀释的NaHCO3(2x20mL)和水(lx20mL)洗涂合并的有机提取物，将其干燥(Na2S04)，过滤，并在真空中浓缩来提供作为油的游离碱。将油溶解在IPA(5mL)中，用HCl在IPA中处理(0.8mL的大约4NHCl),并在真空中浓缩。将残余物从IPA/MTBE/庚烷(1:0.5:10;15mL)中再结晶，过滤所得结晶，并用庚烷洗涤，并在真空中于80。C、N2下干燥来提供0.88g(55.7。/o)的1-3。实施例4在大鼠中测定药物代谢动力学参数使用重200-250g的完整雄性IGSWistarHanRatsCrl:WI(GLx/BRL/Han)IGSBR(Hanover-Wistar)大鼠。实验化合物的每个剂量水平使用三组大鼠。在整个实验中允许动物正常获取食物和水。将测试物制剂成含有Captex355EP、CapmulMCM、EtOH和丙二醇(30:20:20:30)、剂量相当于10mg/kg1-5的水性悬浮液，并将其通过管饲法经口施用。将受处理的大鼠在0.25、0.5、1、3、5、和8小时从颈静脉插管、在24小时通过心脏穿刺采集血液样品(0.3mL)。向取样过程中保存在水上的样品中加入草酸钾/NaF。立即在-4。C的冷冻离心机中离心样品，并将血浆样品保存在-80。C水箱直至分析。血浆等份(0.05mL)与0.1mL乙腈混合。加入内部标准(在水中的0.05mL)和0.02mL空白溶剂。通过混合0.05mL未处理的大鼠的血浆等份和O.lmL乙腈、0.02mL在甲醇:水(1:1)中的标准溶液等份和0.05mL在水中的内部标准等份来制备校准标准品。将每一血浆样品和校准标准品充分涡旋，然后以3000转/分钟离心5分钟来沉淀蛋白质。将离心的上清(每种100|nL)转移入含有200iliL水流动相的96孔板中来进行LC/MS/MS分析。样品分析一用配有串联质谱(HPLC/MS/MS)的高压液相色镨分析前体药物。使用ThermoAquasilC184.6x50mm柱(5jLiM)进行分离。使用电喷射离子化(ESI)进行离子化过程。流动相A含有在具0.1%甲酸的水中的5mM醋酸铵，并且流动相B含有具0.1%甲酸的MeOH。以1mL/分钟的流动速率进行梯度洗脱。实施例5Caco2方法材料Krebs-Henseleit緩冲剂的粉末、氯化钓二水合物和碳酸氢钠购自Sigma(St.Louis，MO)。Caco-2细胞(传代100代)得自RocheBasel。Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM)/高培养基、4-(2-羟乙基)-l-艰，秦乙烷-磺酸(HEPES)以及牛血清得自JRHBioscience(Lenexa，KS)。MEM非必需氨基酸、L-谷氨酰胺、青霉素和链霉素得自GIBCOLabs,LifeTech.LLC(GrandIsland,NY)。Snapwe11细胞培养插入物(6.5mm直径，1.12cm2，0.4pm孔径大小)得自Costar(Cambridge，MA)。细胞培养细胞在75-cm2烧瓶中生长，并维持37。C、5%(:02和95%空气的环境。培养基由补充了5%牛血清、25mMHEPES、1%MEM非必需氨基酸、1。/oL-谷氨酰胺、100U/mL青霉素和100iag/mL链霉素的DMEM/高培养基组成。培养物每周以1-3的分离比传代。对于通透性研究，将代数为110-120的Caco-2细胞以400,000个细胞/cm2的密度铺板在Snapwell插入皿的Transwdl聚碳酸酯滤器上，并在使用前培养7天。Krebs-Henseleit緩沖剂按照包装说明制备含有10mM葡萄糖和2.5mMCaCl2、pH6.5和7.4的Krebs-Henseleit碳酸氢盐緩沖液。将粉末盐定量地用MiUipore水溶解在大约90%的所需体积中。在用1NHC1或1NNaOH调节pH之前加入氯化钙二水合物和碳酸氢钠。加入额外的Millipore水使溶液达到终体积。溶液用0.22微米孔径的膜过滤除菌，并保存在冰箱(20。C)中直至使用。细月包制备从CellCultureCoreFacility获得分化的细胞，并在37。C、在5%C02和95%空气的环境下平衡。将含有caco-2单层的Snapwdls插入皿在37°C、平衡的Krebs-HensdeitpH7.4緩冲液中漂洗。方法使用细胞插入皿作为扩散室。在室顶端和基底的Krebs-Henseleit緩沖液的pH分别为6.5和7.4，并且在顶端一側的底物初浓度为100^M。将具测试化合物的细胞在37°C、5%C02和95%空气的环境下在顶端室中预孵育大约30分钟。当将在pH6.5的Krebs-Henseleit緩沖液中含有100化合物的细胞插入皿转移进入在基底室中含有预平衡緩冲液的新平板时，起始实验。收集0分钟时供体侧、30分钟时供体和受体两侧的样品进行分析。实验后控制使用LuciferYellow评估扩散系统的性能。在对测试化合物进行最后采用之后，向顶端室中加入LuciferYellow来产生100pM的初浓度。孵育60分钟之后，从基底室取出250^iL，并进行测试。计算渗透系数(P叩p)使用下列公式计算Papp:VxdCP卿---(oW秒)AxC。xdt其中V为受体溶液体积(cm3)，A为Snapwell插入皿的表面积(cm2)，C。为初浓度(nM)，并且dC/dt为受体室中浓度对时间的变化，即受体室中浓度对时间的斜率(nM/分钟)。校准每个采样时间点的浓度来计算实验中从供体插入皿移动或转移入新板的部分。实施例6主题化合物的代表性药物组合物用于经口施用的湿颗粒制剂的组合物(A)___成分_%wt./wt颗粒内(Intragramilar)有效成分(I-2)50.0甘露糖醇(PartechM200)USP39.0聚乙烯吡咯烷酮K30USP5.0交联羧甲纤维素钠NF纯化水USP颗粒夕卜(Extragramilar)交联羧曱纤维素USP4.0用于颗粒化2.0将成分混合，粒化，并分配入含有大约500mg活性化合物的硬明胶胶嚢中。用于经口施用的组合物(B)成分%wt./wt.有效成分(I-2)50.0甘露糖醇(PartechM200)USP30.0聚乙烯吡咯烷酮K30USP5.0交联羧甲纤维素钠NF9.5微晶纤维素5.0硬脂酸镁0.5将成分组合，并用溶剂例如水一使其粒化。然后干燥制剂，并用适当的制片机将其制成含有大约500mg活性化合物的片剂。用于经口施用的组合物(C)__成分%wt./wt.活性化合物羧曱基纤维素对羟基苯甲酸甲酯对羟基苯甲酸丙酯'〗'J6glg0.15g0.05g0.035mL0.5mg补充至100mL适量，将pH调整为约4混合成分形成经口施用的悬浮液。<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>聚乙二醇IOOO74.5%_聚乙二醇4000_24.5%_将成分熔化在一起，在蒸汽浴中混合，并倾入含有总重量2.5g的模具。上述说明书或者下列权利要求(以其特定形式或者以执行所公开功能的方式表达)中公开的特征或者获得所公开结果的方法或过程根据需要可以分开或任意组合所述特征地用来以其不同形式实现本发明。为了清楚和理解，上述发明已经通过示例和实例在一些细节上进行了描述。本领域技术人员显而易见，可以在附加的权利要求书范围之内进行改变和变更。因此，应当理解，上述描述旨在示例说明而非限制。因此本发明的范围不应当参考上述描述来确定，相反应当参考下附权利要求和该权利要求所赋予的等同物的全部范围来确定。本申请中引用的所有专利、专利申请和出版物在此处以其整体为了所有的目的以相同的程度引入作为参考，就如同每一专利、专利申请或出版物单独引入一样。权利要求1.式I的化合物及其水合物、溶剂合物和酸加成盐其中R1独立地选自C2-5未分支或分支的烷基、C2-5未分支或分支的烯基、C3-5环烷基和C2-5卤代烷基。2.根据权利要求1的化合物，其中W为乙基、正丙基、异丙基、正丁基或异丁基。3.根据权利要求2的化合物，其中R1为乙基或异丙基。4.根据权利要求3的化合物，其中R'为异丙基，并且化合物为盐酸盐、曱磺酸盐、半硫酸盐或硫酸盐。5.如权利要求1至4中任意一项所述的根据式I的化合物或其7K合物、溶剂合物或酸加成盐的用途，用作治疗由HCV介导的疾病的抗病毒剂。6.如权利要求1至4中任意一项所述的根据式I的化合物或其水合物、溶剂合物或酸加成盐的用途，用作抗病毒剂与至少一种免疫系统调节剂和/或至少一种抑制HCV复制的抗病毒剂联合来治疗由HCV介导的疾病。7.如权利要求1至4中任意一项所述的根据式I的化合物或其水合物、溶剂合物或酸加成盐的用途，用于制备治疗由HCV介导的疾病的药物。8.与至少一种免疫系统调节剂和/或至少一种抑制HCV复制的抗病毒剂联合的、如权利要求1至4中任意一项所述的根据式I的化合物或其水合物、溶剂合物或酸加成盐的用途，用于制备治疗由HCV介导的疾病的药物。9.治疗由丙型肝炎病毒(HCV)介导的疾病的方法，所述方法包括向需要其的哺乳动物施用治疗有效量的根据权利要求l的化合物。10.权利要求9的方法，其中将化合物向患者施用0.1至10g/天的剂量。11.根据权利要求10所述的方法，其中向患者施用0.5至7.5g/天的12.根据权利要求ll所述的方法，其中向患者施用1.0至6.0g/天的剂量。13.权利要求9的方法，其还包括施用至少一种免疫系统调节剂和/或至少一种抑制HCV复制的抗病毒剂。14.药物组合物，其包含与至少一种可药用载体、稀释剂或赋形剂混合的、治疗有效量的根据权利要求l所述的化合物。15.在碱性反应条件下进行核普I的选择性O-酰化作用来提供O-酰基核苷II的方法其中W选自C2-4未分支或者分支的烷基、C^未分支或者分支的烯基、<:3.6环烷基、<:2.5卣代烷基，以及任选取代的苯基，所述方法包括下列步骤(/)在多相的含水溶剂混合物中溶解II和DMAP，并添加水性碱来调节pH为大约7.5至大约12;(//)任选地加入足够的饱和水性NaCl来产生二相性的反应混合物；添加酰化剂和额外的碱，足以维持pH为大约7.5至大约12;(Zv)监测反应，并在转化达到满意水平时停止加入所述酰化剂和所述械；(v)任选地将O-酰基核苷接触可药用酸来形成O-酰基核苷的酸加成盐。全文摘要具有其中R₁如本文定义的式I化合物为丙型肝炎病毒NS5b聚合酶抑制剂。也公开了抑制肝炎复制的组合物和方法，制备所述化合物和用于所述方法的合成中间体的方法。文档编号C07D405/04GK101460488SQ200780020565公开日2009年6月17日申请日期2007年3月26日优先权日2006年4月4日发明者K·萨尔马申请人:弗·哈夫曼-拉罗切有限公司