制备多西他赛的方法以及其中使用的中间体的制作方法

专利名称：：制备多西他赛的方法以及其中使用的中间体的制作方法
技术领域：
：本发明涉及制备多西他赛的新方法以及其中使用的中间体。
背景技术：
：作为一种萜烯紫杉烷衍生物，式(I)的多西他赛是具有广谱抗肿瘤和抗白血病活性的强效抗肿瘤化疗剂，并且已得到批准作为治疗卵巢癌和乳腺癌的市售治疗剂，其中Ph是苯基；Ac是乙酰基；Bz是苯甲酰基；以及Boc是叔丁氧基羰基。以后，Ph、Ac、Bz和Boc都具有如上的相同定义。制备多西他赛的半合成法以及合成法都已被广泛研究。由式(X)的10-脱乙酰基浆果赤霉素III制备多西他赛的通用方法包括4个步骤(a)选择性地在式(n)的脱乙酰基浆果赤霉素m的7-羟基和io画羟基中引入保护基；(b)使步骤(a)中得到的化合物与噁唑烷衍生物或其盐在縮合剂存在下进行縮合反应；(c)使所得产物的噁唑烷环开环；以及(d)由步骤(c)得到的化合物中脱除7-和10-羟基保护基。HO.'pOH然而，为此报道的许多已知合成方法在进行步骤(a)之选择性引入保护基方面都不能令人满意。也就是说，反应路线(A)中所示的步骤(a)不能以足够高的选择性实施，而且难以纯制式(IVa)的10-脱乙酰基浆果赤霉素III产物，该产物在用于制备多西他赛时，最终产物的产量非常低，而且纯制过程非常复杂。反应路线fA)仰(IVa)其中P是羟基保护基。例如，如反应路线(B)所示，第0253738号欧洲专利或者[Gueritte等，Tetrahedron,42,4451(1986)]披露了制备具有经保护的7-和10-羟基的式7(ivb)的io-脱乙酰基浆果赤霉素in的方法，其包括使式(n)的io-脱乙酰基浆果赤霉素m与3当量的2,2，2-三氯乙基氯甲酸酯在吡啶中于8(TC下反应，但是所希望的式(IVb)的IO-脱乙酰基浆果赤霉素III的产率为85~87%，而具有经保护的7-、10-和13-羟基的式(a)的10-脱乙酰基浆果赤霉素III仅作为副产物以812。/。的量制得。在此情况下，所述产物必须通过柱色谱进行纯制，然后用于制备多西他赛。反应路线(B)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>另外，如国际专利公布WO04/33442中所披露的(反应路线C)，具有经保护的7-和10-羟基的式(IVc)的10-脱乙酰基浆果赤霉素III的产率为83~86%,而具有经保护的7-、10-和13-羟基的式(b)的10-脱乙酰基浆果赤霉素III以及具有经保护的7-或10-羟基的式(c)和(d)的10-脱乙酰基浆果赤霉素m衍生物仅以副产物被共同制备，其产率分别为8~14%和0~3%。因此，该方法也具有与第0253738号欧洲专利类似的问题。反应路线(C)DCA—OHC1pDCA"CJ(2.3叫>—》M.c.n比啶(-3:1)HCTa—DCA-CIsCHCljCOCI(IVc>仰(83-肪％)DCA-o0,DCADCA,(6*，4%),DCAHer.DCA-q,o0H再者，如第6500966号美国专利所披露的(反应路线D)，使用三氯乙酰基保护基制备具有经保护的7-和10-羟基的式(IVd)的10-脱乙酰基浆果赤霉素III，其产率为37~45%，而具有经保护的7-、10-和13-羟基的式(e)的10-脱乙酰基浆果赤霉素III以及一种未知的白色固体则以副产物的形式制得。因此，该方法也有与以上方法类似的困难。反应路线(D)因此，本发明的发明人试图高选择性地制备具有经保护的7-和10-羟基的io-脱乙酰基浆果赤霉素m，该产物能够容易地通过重结晶进行纯制，以及试图制备能够有效地用于偶联反应中的噁唑烷衍生物。结果是，本发明的发明人发现一种高产率地制备多西他赛的新的改进方法。
发明内容因此，本发明的目的是提供制备多西他赛的新方法，以及在此所用的中间体。根据本发明的一个方面，其提供制备式(I)的多西他赛的方法，该方法包括以下步骤(i)在碱存在下使式(ii)的io-脱乙酰基浆果赤霉素ni与式(m)的苯甲酰卤反应，得到具有经保护的7-和10-羟基的式(IV)的化合物；(ii)在縮合剂存在下使式(IV)的化合物与式(V)的噁唑烷衍生物或其盐进行偶眹反应，得到式(VI)的具有噁唑烷侧链的紫杉烷化合物；(iii)在有机溶剂中于酸存在下使式(VI)化合物的侧链进行开环反应，得到具有经保护的7-和10-羟基的式(VII)的多西他赛；以及(iv)在溶剂中用碱脱除式(VII)化合物的7和10位处的保护基<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>其中Ph是苯基；Ac是乙酰基；Bz是苯甲酰基；Boc是叔丁氧基羰基；R是4-甲氧基苯基、异丙基或叔丁基;B是R'和R"分别独立地是氢或硝基；以及X是卤素。根据本发明的另一个方面，其提供式(iv)的化合物，该化合物可用作制备式(I)之多西他赛的中间体，其中Ac和Bz具有如上所述的定义；以及B是4-硝基苯甲酰基、3,5-二硝基苯甲酰基或2，4-二硝基苯甲酰基。根据本发明的再一个方面，其提供式(Va)的化合物，该化合物可用作制备式(I)之多西他赛的中间体，其中Boc是叔丁氧基羰基；以及Ri是异丙基或叔丁基。根据本发明的另一个方面，其提供制备式(Va)的化合物的方法，该方法包括以下步骤(i)使溶解在溶剂中的式(Vin)的(2R，3S)-3-苯基异丝氨酸甲基酯甲酸加成盐与异丁醛或三甲基乙醛反应，并向其中添加二叔丁基二碳酸酯，得到式(IX)的噁唑烷环化合物；以及(ii)在碱存在下使式(IX)的化合物进行水解BOOo一B12R其中Boc是叔丁氧基羰基；以及R'是异丙基或叔丁基。具体实施例方式根据本发明之制备多西他赛的方法的特征在于在与式(IV)化合物的偶联反应中使用其中7-和10-羟基选择性地用具有一个或多个任选的硝基取代基的苯甲酰基保护的式(IV)化合物和式(V)化合物。本发明的式(I)的多西他赛可根据反应路线(E)中所示的方法来制备。13反应路线(E)HQpOHQ'P0一8步骤(ii)HO、"(II)(IV)R、2.縮合剂3.活化剂po-BR、碱(VI)步骤(iv)BQeOH5Bz0Ac2.碱HQ,OOH步骤(iii)rBoc、HoUf1(VII)1.酸Ph一(I)其中B、X和R具有与上述相同的定义,在步骤(i)中，式(II)的10-脱乙酰基浆果赤霉素III在碱存在下与式(III)的苯甲酰基卤(B-X)反应，得到新的化合物，具有经选择性保护的7_和10_羟基的式(IV)化合物，其是本发明中使用的关键的中间体。该反应可优选在20'C至6(TC的温度范围下迸行。该反应中所用的苯甲酰基卣可以是4-硝基苯甲酰氯、3，5-二硝基苯甲酰氯、或l，4-二硝基苯甲酰基氯甲苯，优选为3,5-二硝基苯甲酰氯。该产物可以容易地由诸如甲醇的溶剂中重结晶来纯制，特别是在使用3，5-二硝基苯甲酰氯时，由此以高收率得到纯的式(IV)的脱乙酰基浆果赤霉素III。在该反应中，以式(II)的化合物计，苯甲酰卤的使用量可以是2-5当量。该反应中使用的碱可以是胺，如吡啶和三乙胺，而可以在该反应中使用的溶剂是氯仿、二氯甲烷或乙酸乙酯。在步骤(ii)中，步骤(i)中得到的式(IV)化合物与式(V)的噁唑烷衍生物或其盐在縮合剂存在下在溶剂中进行偶联反应，得到具有噁唑垸侧链的式(VI)的紫杉烷衍生物。该反应可在0'C至8(TC的温度范围内进行，而且以式(IV)的化合物计，式(V)化合物的使用量可以是1.5-5当量。该反应中所用的溶剂可以是乙酸乙酯、乙酸甲酯、氯仿或二氯甲垸，而该反应中所用的縮合剂可以是二环己基碳二亚胺，以式(IV)的化合物计，其用量为l-5当量。另外，可在反应混合物中添加活化剂如胺(例如，4-二甲基氨基吡啶和吡啶)，以式(IV)的化合物计，其量低于化学计量量。如此得到的式(VI)的紫杉烷衍生物可由甲醇-己垸混合物或者乙腈-水混合物中重结晶，以得到经纯制形式的式(VI)化合物。在步骤(iii)中，在步骤(ii)中得到的具有噁唑烷侧链的式(VI)化合物在有机溶剂中在酸存在下进行开环反应，得到具有经保护的7-和10-羟基的式(VII)的多西他赛。该开环反应中所用的酸可以是盐酸、硫酸、甲酸或对甲苯磺酸，以式(IV)的化合物计，其使用量为1-100当量。该反应中所用的有机溶剂可以是氯仿、乙酸乙酯、乙酸甲酯、二氯甲垸、四氢呋喃、以及它们的混合物。当R为4-甲氧基苯基时，所得的式(VII)化合物可以不用失去叔丁氧基羰基而得到。然而，当R是异丙基或叔丁基时，该叔丁氧基可以被除去。在此情况下，式(II)的化合物可通过以下方法得到用合适的碱中和所述反应溶液，向其中添加水，并向所得的溶液内添加二叔丁基二碳酸酯。由此得到的式(II)化合物可容易地通过在二乙基醚-己烷的混合物或者乙腈-水的混合物中重结晶来纯制。在步骤(iv)中，式(vn)化合物的保护基B在碱存在下在溶剂中被除去，以得到式(I)的多西他赛。在该反应中，所述碱可以是吗啉、二乙胺、氨、甲胺、或叔丁基胺，以式(VII)的多西他赛计，其用量为1-40当量，而所述溶剂优选为Q.3醇，最优选为甲醇。另外，本发明之步骤(ii)中所用的式(V)的噁唑烷衍生物可如下制备。反应路线(F)R^=QMHeRiCHQ(脂族醛)"、3水解B3C0陶其中W具有与上述相同的定义。在该反应中，将脂族醛(111(:110)如异丁醛或三甲基乙醛与二叔丁基-二碳酸酯一起添加至式(VIII)的(2R,3S)-3-苯基异丝氨酸甲基酯甲酸加成盐中，后者溶解在诸如氯仿、乙酸乙酯、乙酸甲酯、二氯甲烷和四氢呋喃的溶剂中，以得到具有N-叔丁基羰基的式(IX)的噁唑烷环化合物。接着，所得的化合物可用合适的碱进行水解，得到式(Va)的噁唑烷衍生物，而用于该反应中的所述碱可以是氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾。另外，当式(V)的化合物中的R为4-甲氧基苯基时，该化合物可根据第1995-0703547号韩国专利公开来制备。根据本发明的方法，可以高产率制备高纯度的多西他赛，而这在现有技术中是不能实现的。以下实施例用于进一步说明本发明，而不是对其范围的限制。实施例h制备7，10-(双-3'，5'-二硝基苯甲酰萄-10-脱乙酰基浆果赤霉素III(式(IV)的化合物)将ll.Og的10-脱乙酰基浆果赤霉素III溶解在28W吡啶与55W氯仿的混合物中，然后向其中缓慢地滴加ll.Og的3,5-二硝基苯甲酰氯，并同时将反应温度保持在38-42'C。在减压下由其中除去吡啶，得到7,10-(双-3'，5'-二硝基苯甲酰基)-10-脱乙酰基浆果赤霉素in，产率为97.1%，并含有0.3%的7-或10-(3',5'-二硝基苯甲酰基)-10-脱乙酰基浆果赤霉素111以及0.9%的7，10,13-(三-3',5'-二硝基苯甲酰基)-10-脱乙酰基浆果赤霉素111作为副产物。向残留物中滴加IIO^甲醇与50^lNHC1的混合物，剧烈搅拌1小时，然后过滤。所得的固体加至220rM甲醇中，在室温下搅拌1小时，然后过滤。该固体进行干燥，得到标题化合物(16.9g;产率:93%;纯度98,5%)。b.p.:234。C;aD23=-77.8。(c=l，CHCl3);IR(KBr，cm")3458，3103,2949，1739,1717，1628,1600,1550，1453,1343，1273，1167，1109,1071,973,918，835,716;'H-腹R(CDC13，300MHz)S9.27(m,1H)，9.20(m，1H)，9.04(m，2H),8.77(m,2H)，8.14(d，J=7.5Hz，2H)，7.50-7.68(m，3H)，6.65(s，1H),5.94(dd，J=7.0Hz,J=10.0Hz，1H)，5.74(d,J=7.0Hz，1H)，5.07(d，J-9.0Hz，1H)，4.94-4.98(m,1H)，4.41(d，J=8,4Hz，1H)，4.23(d，J=8.4Hz,1H),4.13(d,J=6.7Hz，1H)，2.84-2.95(m，1H),2.35-2.42(m，2H)，2.37(s，3H),2.21(s,3H)，1.99-2.07(s，1H)，2.00(s，3H)，1.27(s，3H)，1.23(s，3H);元素分析C43H4QN4O20;理论值C，55.37;H,4.32;N，6.01;实测值C，55.42H，4.29N,6.13.实施例2:制备(2议，48，5议)-3-叔丁氧基羰基-2-异丙基-4-苯基-1，3-噁唑烷-5-羧酸(式(Va)的化合物)(2-1)制备(211，48,511)-3-叔丁氧基羰基-2-异丙基-4-苯基-1,3-噁唑烷-5-羰基甲基酯5g的(2R,3S)-3-苯基异丝氨酸甲基酯甲酸盐溶解在1.6W吡啶与100mCHCl3的混合物中。向其中滴加1.8n^的异丁醛，并搅拌2小时，同时将溶液温度保持在50'C。所得的溶液冷却至室温。向其中分少量添加3g的NaHC03，并搅拌1小时。该反应混合物中的固体过滤，并向滤液中缓慢滴加4.4g的二叔丁基-二碳酸酯。所得的溶液在室温下搅拌12小时，然后减压除去溶剂，得到未经纯制形式的标题化合物(7.24g;产率100%)。aD23=-24.0o(c=l,CHCl3);IR(KBr，cm-1)3499，3395，3090，3064,3032，42974，2933，2876，1757,1705，1456，1367，1253,1164，1115，1092，1018，942，849，764，698，600，465;，H-顧R(CDC13，300MHz)S7.27-7.40(m,5H)，5.32(d,J=7.1Hz，1H),5.20(b，1H),4.73(d，J=4.7Hz,1H),3.81(s,3H)，2.00(m，1H)，1.40(s,9H)，1.06(d,J=6.8Hz3H),0.97(d,J=6.8Hz，3H);元素分析d9H27N,Os;理论值C，65.31;H，7.79;N，4.01;实测值C,65.43H，7.71N，4.12.(2-2)制备(211,48,511)-3画叔丁氧基羰基-2-异丙基-4-苯基-1,3画噁唑烷-5-羧酸将7g在(2-l)中得到的化合物溶解在35W甲醇中。向其中滴加7^的3N氢氧化锂，并在室温下搅拌2小时。减压下由其中除去20W的甲醇，并向其中添加20W的水。该水-甲醇溶液用每份30^的己烷洗涤2次，然后在0'C下向其中添加40W的乙酸乙酯。所得的混合物通过添加7W的3NHC1进行中和，并同时剧烈搅拌。有机层进行分离，而含水层用40W的乙酸乙酯进行萃取。合并的有机层在无水硫酸钠上进行干燥，过滤，并在减压下由滤液中除去有机溶剂，得到标题化合物(4.7g;产率98,5%).aD23=+0.1°(溶剂CHC13C=1);IR(KBr,cm")3065，3034,2974，2934，2876，1757，1706，1673,1470，1456，1368，1255，1164，1093，蘭，941，848，762，699，595，464;iH-NMR(CDC13,300MHz)S9,65(brs，1H)，7.14-7.54(m,5H),5.35(d,J=7.2Hz，1H)，5.27(b,1H),4.75(d，J=4.8Hz，1H),2.00(m，1H),1.42(s，9H)，1.07(d，J=6.8Hz3H)，0.98(d，J=6.8Hz，3H);元素分析QsH^NiOs;理论值:C，64.46;H,7.51;N,4.18;实测值C,64.43H，7.48N，4.19.实施例3:制备(2R，4S，5R)-3-叔丁氧基羰基-2-叔丁基-4-苯基-l，3-噁唑烷誦S-羧酸(式(Va)的化合物)(3-1)制备(211，48,510-3-叔丁氧基羰基-2-(4-叔丁基)-4-苯基-1，3-噁唑烷-5-羰基甲基酯重复实施例2之(2-l)的方法，但使用三甲基乙醛替代异丁醛，得到标题化合物(7.53g;产率100%)。aD23=+0.5o(c=l，CHCl3);IR(KBr，cm")3063,2974，2934,1756，1710,1480，1451，1367，1351，1254，1163，948,879,778，697;'H-NMR(CDC13，300MHz)S7.27-7.44(m,5H)，5.46(s,1H)，5,41(d，J=4.2Hz,1H)，4.73(d,J=4.2Hz,1H)，3.83(s,3H),1.47(s,9H)，0.83(s,3H);元素分析C2。H29^05;理论值C，66.09;H,8.04;N,3.85;实测值C,66.13H,7.98N,3.88.(3-2)制备(2&48,511)-3-叔丁氧基羰基-2-叔丁基-4-苯基-1,3-噁挫垸-5-羧酸重复实施例2之(2-2)的方法，但使用在(3-l)中制备的(2R，4S,5R)-3國叔丁氧基羰基-2-(4-叔丁基)-4-苯基-l,3-噁唑烷-5-羰基甲基酯，得到标题化合物(2.9g;产率41%)。aD23=+20.2。(c=l，CHCl3);IR(KBr，cm")31679，3064,2975,2910,1711,1497,1480,1368，1256,1163，1098，1032,948，881，758，697;H-NMR(CDC13，300MHz)S9.65(brs,1H)，7.54-7.14(m，5H),5.35(d，J=7.2Hz,1H)，5.27(s，1H)，4.75(d，J=4.8Hz，1H)，2.00(m,1H),1.42(s,9H)，1.07(d，J=6.8Hz3H)，0.98(d，J=6.8Hz，3H);元素分析(:1911271^05;理论值C，65.31;H，7.79;N,4.01;实测值C，65.33H,7.68N，4.12.实施例4:制备多西他赛(式(I)的化合物)(4國1)制备(2R，4S,5R)-3-叔丁氧基羰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-l，3-噁唑19垸-5-羰基7，10-(双-3",5"-二硝基苯甲酰基)-10-脱乙酰基浆果赤霉素III(式(VI)的化合物)将9.3g在实施例l中得到的7，10-(双-3',5'-二硝基苯甲酰基)-10-脱乙酰基浆果赤霉素III、10g(2^48，511)-3-叔丁氧基羰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-l,3-噁唑烷-5-羧酸(根据国际专利公布WO1994/07878制备的)和61mg4-(二甲氨基)卩比啶溶解在180n^乙酸乙酯中，由此得到的溶液进行搅拌，并同时将温度保持在40'C。向其中添加5.2g的二环己基碳二亚胺并搅拌30分钟，接着通过过滤分离所得的二环己基脲。所得的滤饼用20W的乙酸乙酯洗涤，合并的有机层接着顺序地用30W的lN盐酸和30W饱和碳酸氢钠溶液洗涤，然后在无水MgS04上干燥，过滤，而有机溶剂在减压下由滤液中除去。向残留物中添加13m^甲醇与i30W己垸的混合物，搅拌3小时并过滤。向所得的残留物中添加130W的乙腈和65W的水，该混合物搅拌3小时，然后过滤，得到标题化合物(13.1g;产率:100%)。^-NMR(CDC13，300MHz)S9.26(m,1H),9.20(m，1H)，9.01(m，2H),8.74(m,2H)，8.05(d，J=7.5Hz，2H)，7.66(m，1H)，7.53(m,2H)，7.50(m，8H),6.93(m，d=8.4Hz)，6.52(s，1H)，6.40(m，1H),6.16(m，1H)，5.78-5.84(m，1H)，5.73(d，J=7.2Hz)，5.45(m，1H),4.96(d，J=8.5Hz)，4.61(d，J=5.0Hz,1H)，4.32(d,J=8.6Hz，1H)，4.17(d，J=8.6Hz，1H),3.95(d，J=7.1Hz，1H)，3.80(s，3H)，2.82-2.86(m，1H)，2.14-2.27(m,2H)，1.95-2.04(m,2H)，1.95(s，3H),1.65(s,3H)，1.59(s,3H)，1.34(s,3H),1.26(s，3H)，1.05(s:元素分析C65H63N5025;理论值C，59.40;H，4.83;N，5.33;实测值C，59.35H，4.86N,5.42.(4-2)制备13-[(2'R，3'S)-3-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基-2-羟基丙酰基]7，10-(双-3",5"-二硝基苯甲酰基)-10-脱乙酰基桨果赤霉素m(式(VII)化合物)将13.1g在(4-1)中得到的(211，48,510-3-叔丁氧基羰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-l，3-噁唑烷-5羰基7,10-(双-3"，5"-二硝基苯甲酰基)-2010-脱乙酰基浆果赤霉素111溶解在130m^乙酸乙酯中。向其中添加60W的37(w/w)%HC1水溶液，并在室温下搅拌3小时。有机层分离并用20W的饱和碳酸氢钠溶液洗涤，然后在无水MgS04上干燥，过滤并在减压下由滤液中除去有机溶剂。所得的固体溶解在120^的二乙基醚中，接着向其中缓慢滴加240W己烷。该混合物在室温下搅拌3小时，然后过滤。所得的固体溶解在33W的乙腈中，接着向其中缓慢滴加77^的水。所得的溶液在室温下搅拌3小时，然后通过过滤除去溶剂，得到标题化合物(10.8g;产率91%)。b.p.:173。C;aD23=-8.9°(c=4,CHCl3);IR(KBr,cm-1)3543，3432,3101,2978，2900,1736，1628，1548，1494,1455,1368，1345,1269，1163,1095，1070，978,920，730,718;^-NMR(CDC13,300顧z)59.27(m,1H)，9.21(m，1H)，9.03(m，2H)，8.87(m，2H),8.15(d，J=7.5Hz,2H)，7.65(m，1H),7.54(m,2H)，7.40-7.43(m,5H)，6.63(s,1H),6.27(m，1H),5.88(m,1H)，5.80(d，J=6.9Hz,1H)，5.38(d,J=9.4Hz,1H),5.28(m，1H),5.03(d,J=8.1Hz,1H)，4.67(d,J=3.1Hz，1H),4.41(d，J=8.6Hz,IH)，4.26(d，J=8.6Hz,IH)，4.07(d，J=6.7Hz,IH)，3.34(d,J=5.3Hz,1H),2.87(m，1H),2.46(s,3H)，2.42(m,2H),2.01-2.05(m，3H),2.01(s，3H),1.87(s，IH)，1.59(s，3H)，1.39(s,3H),1.36(s,9H),1.32(s:元素分析C57H57N5024;理论值C，57.24;H，4.80;N，5.86;实测值C,57.21H，4.88N，5.90.(4-3)制备多西他赛将6g在(4-2)中制备的13-[(2'11,3'8)-3-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基-2-羟基丙酰基]7,10-(双-3"，5"-二硝基苯甲酰基)-10-脱乙酰基浆果赤霉素m添加至30W甲醇与6W吗啉的混合物中，而所得的混合物在室温下搅拌3小时。向其中滴加50iM的乙酸乙酯，然后在(TC下向其中缓慢滴加70n^的lNHCl。有机层分离并在无水MgS04上干燥，过滤，并在减压下由滤液中除去有机溶剂。所得的残留物进行硅胶柱色谱纯制，得到白色固体的标题化合物(3.6g;产率；90%)。b.p.:195°C;aD23=-43.9。(c=0.74，乙醇)；IR(KBr,cm")3652，3487，3367，2978，2936,2903，1711，1603，1498，1367，1267,1244，1175,1093，1071,1023,976,896，709;and'H-NMR(CDC13,300MHz)S8.11(d,J=7.2Hz,2H),7.61(m,1H),7.51(m，2H)，7.28-7.42(m，5H)，6.23(m，1H),5.69(d，J=7.0Hz，IH)，5.45(d,J=9.6Hz，IH)，5.29(m,IH)，5,22(s，IH)，4.96(m,1H),4.64(m,1H),4,33(d，J=8.4Hz,IH)，4.19-4.24(m，3H)，3.93(d,J=6.9Hz，IH)，3.37(d,J=5.4Hz,IH)，2.562.65(m，IH)，2.39(s，3H),2,27-3.1(m,2H)，1.82-L91(m，IH)，1.86(s,3H),1.78(s,3H)，1.70(s,IH)，1.54(b，IH)，1,36(s,9H),1.26(s,3H),1.15(s，9H).实施例5:制备多西他赛(式(I)的化合物)(5-1)制备(211,48，5化)-3-叔丁氧基羰基-2-异丙基-4-苯基-1,3-噁唑烷-5-羰基7，10-(双-3"，5"-二硝基苯甲酰基)-10-脱乙酰基浆果赤霉素m(式(VI)的化合物)重复实施例4之(4-l)的方法，但使用在实施例2中得到的(211，48，511)-3-叔丁氧基羰基-2-异丙基-4-苯基-l，3-噁唑烷-5-羧酸替代(2R,4S,5R)-3-叔丁氧基羰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-l,3-噁唑烷-5-羧酸作为噁唑烷衍生物，得到标题化合物(6.3g;产率100%)。b.p.:234。C;aD23=-52.90(c=l,CHCl3);IR(KBr，cm")3446，3103,2975，2901,1738,1719,1629,1599,1548,1458，1344,1269，1163,1095,1072,1004，981，920,836,729，718;iH-NMR(CDC13，300MHz)59.27(m,1H),9.21(m,1H),9.03(m,2H)，8.76(m，2H)，8.09(d,J=7.2Hz,2H)，7.68(m,1H),7.54(m,2H)，7,40(m,5H),6.63(s，1H),6.33(m，1H),5.88(m,IH)，5.78(d，J=7.1Hz，1H),5.31(d，J=6.9Hz，IH)，5.26(d，J=5.1Hz，IH)，4.98(d，J=9.4Hz，IH)，4.75(d，J=5.1Hz，IH)，4.36(d，J=8.5Hz,1H),4.21(d,J=8.5Hz,IH)，4.05(d,J=227.2Hz,1H)，2.82-2.90(m，1H)，2.20-2.36(m,2H)，1.95-2.04(m,2H),2.09(s，3H),2.03(s,3H),1.99(s，3H)，1.83(s，1H),1.40(s，9H)，1.30(s,3H),1.26(s，3H),1.12(d,J=6.9Hz，3H),1.04(d,J=6.9Hz,3H);元素分析:C61H63N5024;理论值C，58.60H,5.08N，5.60;实测值C，58.49H,5.07N，5.68.(5-2)制备13-[(2'R，3'S)-3-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基-2-羟基丙酰基]7，10-(双-3〃，5"-二硝基苯甲酰基)-10-脱乙酰基浆果赤霉素m(式(VII)的化合物)将6.3g在(5-1)中制备的(2R,4S，5R)-3-叔丁氧基羰基-2-异丙基-4-苯基-l，3-噁唑烷-5-羰基7，10-(双-3"，5"-二硝基苯甲酰基)-10-脱乙酰基浆果赤霉素III溶解在63W甲酸、6.3W甲醇与32W氯仿的混合物中，该溶液在室温下搅拌12小时，然后在减压下蒸馏甲酸，得到一固体。向该残留物中滴加63W的乙酸乙酯。分离有机层，并用60W的饱和碳酸氢钠溶液洗涤，然后向其中滴加1.3g的二叔丁基-二碳酸酯。该混合物在室温下搅拌12小时，然后减压蒸馏以除去有机溶剂。所得的固体溶解在60W的二乙基醚中，然后向其中缓慢滴加120W己烷。所得的混合物在室温下搅拌3小时并过滤，得到一固体。所得的固体溶解在16W乙腈中，然后向其中缓慢滴加32W的水。所得的溶液在室温下搅拌3小时，接着通过过滤除去溶剂，得到标题化合物(4.2g;产率:70%)。(5-3)制备多西他赛(式(I)的化合物)重复实施例4之(4-3)的方法，但使用(5-2)中制备的化合物作为起始物，得到标题化合物(2.4g;产率85%)。实施例6:制备多西他赛(式(I)的化合物)(6-1)制备(211，48，511)-3-叔丁氧基羰基-2-叔丁基-4-苯基-1，3-噁唑垸-5-羰基7,10-(双-3"，5"-二硝基苯甲酰基)-10-脱乙酰基浆果赤霉素111(式(VI)的化合物)重复实施例4之(4-l)的方法，但使用在实施例3中得到的(211，48,510-3-叔丁氧基羰基-2-叔丁基-4-苯基-1，3-噁唑烷-5-羧酸替代(2R,4S，5R>3-叔丁氧基羰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-l，3-噁唑烷-5-羧酸作为噁唑垸衍生物，得到标题化合物(3.2g;产率100%)。b.p.:235。C;aD23=-6.4。(c=l,CHCl3);IR(KBr，cm")3445，3105，2975，1740,1718,1628,1549，1458，1344,1269,1163，1094，1070，978，729,718;'H-NMR(CDC13,300MHz)S9.28(m，1H),9.21(m,1H)，9.03(m,2H),8.77(m，2H),8.U(d，J=7.3Hz,2H),7.68(m，1H)，7.56(m，2H)，7.37-7.47(m,5H)，6.65(s,1H)，6.36(m，1H),5.91(m，1H),5.80(d，J=7.0Hz，1H),5.50(d，J=5.7Hz，1H)，5.46(s，1H),5.03(m，2H)，4.39(d,J=8.6Hz,1H),4.23(d,J=8.6Hz,1H),4.08(d,J=7.0Hz，1H),2.86-2.89(m,1H)，2.23-2.41(m,2H),2.13(s，3H),2.12(s，3H),2.09-2.04(m，1H),2.00(s,3H),1.88(s，1H)，1.44(s,9H),1.41(s，3H)，1.32(s,3H)，0.93(s,9H));元素分析C62H65N5024;理论值C，58.90;H,5.18;N，5.54;实测值C，58.86H,5,23N，5.60.(6-2)制备lHP'IU'S"-叔丁氧基羰基氨基-:3-苯基-l羟基丙酰基]7，10-(双-3",5"-二硝基苯甲酰基)-10-脱乙酰基浆果赤霉素111(式(VII)的化合物)重复实施例5之(5-2)的方法，但使用(6-l)中制备的化合物作为起始物，得到标题化合物(2.5g;产率83%)。(6-3)制备多西他赛(式(I)的化合物)重复实施例4之(4-3)的方法，但使用(6-2)中制备的化合物作为起始物，得到标题化合物(1.5g;产率90%)。实施例5和6的多西他赛产物的分析和光谱结果与实施例4化合物的相同。根据本发明，通过引入3，5-二硝基苯甲酰氯，高度选择性地保护IO-脱乙酰基浆果赤霉素III的7-和10-羟基，由此能够以高达98%的纯度制备具有经保护的7-和io-二羟基的io-脱乙酰基浆果赤霉素ni，而且通过由甲醇中重结晶可容易地由其中除去副产物。上述结果与使用反应路线(II)-(IV)中提到的常规保护基所得到的化合物进行比较，如以下表l所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>如表1中所示，本发明制备多西他赛的方法与常规方法相比具有明显更高的产率。虽然已参考上述具体的实施方案描述了本发明，但应认识到，本发明还可进行各种改进和改变，而它们仍在随后的权利要求书所限定的本发明范围之内。权利要求1、制备式(I)的多西他赛的方法，该方法包括以下步骤(i)在碱存在下使式(II)的10-脱乙酰基浆果赤霉素III与式(III)的苯甲酰卤反应，得到具有经保护的7-和10-羟基的式(IV)的化合物；(ii)在缩合剂存在下使式(IV)的化合物与式(V)的噁唑烷衍生物或其盐进行偶联反应，得到具有噁唑烷侧链的式(VI)的紫杉烷化合物；(iii)在有机溶剂中于酸存在下使式(VI)化合物的侧链进行开环反应，得到具有经保护的7-和10-羟基的式(VII)的多西他赛；以及(iv)在溶剂中用碱脱除式(VII)化合物之在7和10位处的保护基其中Ph是苯基；Ac是乙酰基；Bz是苯甲酰基；Boc是叔丁氧基羰基；R是4-甲氧基苯基、异丙基或叔丁基；B是id="icf0003"file="A2007800459810003C2.tif"wi="20"he="14"top="194"left="53"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>R’和R”各自独立地是氢或硝基；以及X是卤素。2、权利要求l的方法，其中步骤(i)中所用的式(111)的苯甲酰卤是4-硝基苯甲酰氯、3,5-二硝基苯甲酰氯或1，4-二硝基苯甲酰氯。3、权利要求l的方法，其中以10-脱乙酰基浆果赤霉素III计，步骤(i)中所用的式(ni)的苯甲酰卤的量为2-5当量。4、权利要求l的方法，其中步骤(i)中所用的碱是吡啶或三乙胺。5、权利要求l的方法，其中步骤(ii)中所用的縮合剂是二环己基碳二亚胺。6、权利要求l的方法，其中在步骤(ii)期间进一步添加4-二甲氨基吡啶或吡啶作为活化剂。7、权利要求l的方法，其中步骤(iii)中所用的酸是盐酸、硫酸、甲酸或对甲苯磺酸。8、权利要求7的方法，其中以式(VI)的化合物计，步骤(iii)中所用的酸的量为1-100当量。9、权利要求l的方法，其中步骤(iv)中所用的碱是吗啉、二乙胺、氨、甲胺或叔丁基胺。10、式(IV)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中Ac是乙酰基；Bz是苯甲酰基；以及B是4-硝基苯甲酰基、3，5-二硝基苯甲酰基、或2，4-二硝基苯甲酰11、式(Va)的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(Va)其中Boc是叔丁氧基羰基；以及W是异丙基或叔丁基。12、制备式(Va)的化合物的方法，该方法包括以下步骤-(i)使溶解在溶剂中的式(VIII)的(2R，3S)-3-苯基异丝氨酸甲基酯甲酸加成盐与异丁醛或三甲基乙醛反应，并向其中添加二叔丁基二碳酸酯，得到式(IX)的噁唑烷环化合物；以及(ii)在碱存在下使式(IX)的化合物进行水解，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中Boc是叔丁氧基羰基；以及W是异丙基或叔丁基。全文摘要本发明涉及制备具有抗肿瘤和抗白血病活性的多西他赛的新方法，以及其中所用的中间体。文档编号C07D263/04GK101558051SQ200780045981公开日2009年10月14日申请日期2007年12月3日优先权日2006年12月14日发明者文荣,李宽淳,申优燮,郑载赫,金东骏,金南斗,金基净,长永佶申请人:韩美药品株式会社