专利名称：一种瓜蒌籽粗蛋白的提取工艺的制作方法
技术领域：
本发明属于食品医药技术领域，具体涉及到一种瓜蒌籽粗蛋白的提取 工艺。
背景技术：
瓜蒌又名天瓜、药瓜、野苦瓜、栝蒌等。为葫芦科瓜蒌属多年生草质 藤本植物。瓜蒌全身都是宝果实、茎叶、根块均可入药。整个干燥果实 中药名称全瓜蒌，果壳称瓜蒌皮，种子称瓜蒌籽，其药用与食用价值极高: 据《本草纲目》记载有健胃、润肺、化痰、散结、滑肠作用，主治痰热咳 嗽、肺痰咳血、胸闷、消湾、和便秘等症。现代医药学研究证明瓜蒌籽有扩张心脏冠脉、增加冠脉流量作用， 对急性心肌缺血有明显的保护作用，对离体绒癌细胞增殖和艾滋病毒具有 强烈的抑制作用，对糖尿病有一定的治疗作用，对高血压、高血脂、高胆 固醇有辅助疗效，同时能提高肌体免疫功能并有瘦身美容之功效。瓜萎籽的主要成分包括蛋白质类、油脂类、氨基酸类、挥发油类、甾 醇类、三萜类及无机原素类。瓜萎籽蛋白是一种碱性植物蛋白质，具有多 种生理功能，如引产抗孕、免疫抑制等功能，并能抑制人艾滋病病毒(HIV) 的复制和繁殖，其在食品和医疗上的用途越来越引起研究人员重视。然而 关于瓜蒌籽蛋白质提取工艺的研究目前还处于起步阶段，因此，研究出一 种科学提取工艺，将对瓜蒌籽蛋白质在食品及医疗方面的研究和应用起到 很大的推动与促进作用。
发明内容
本发明的目的在于针对目前瓜蒌籽蛋白质提取工艺尚属空白，提供一 种工艺简单、实用、蛋白质得率高的瓜蒌籽粗蛋白提取工艺。本发明的瓜蒌籽粗蛋白提取工艺包括以下步骤1) 将瓜蒌籽干燥、粉碎后过20 40目筛，用超临界C02萃取法提取 油脂；2) 用碱溶酸沉法从剩余渣滓中提取蛋白，工艺参数为料液中残渣 与稀碱液的质量体积比(w/v)为1:5 1:40，稀碱液质量浓度为0. 5 5%、 提取时间为30 120min、提取温度为40 80°C，酸沉后冷冻离心得粗蛋 白提取物，干燥。干燥后可称重并计算蛋白得率。所述油脂的超临界萃取条件为萃取压力为10 35MPa，分离压力为 6 10MPa，萃取温度为30 6(TC，分离温度为30 60。C， C02流量为10 80L/h，萃取时间为1 5h。所述稀碱液优选氢氧化钠稀溶液。所述酸沉离心条件为用1 2mol/L盐酸调节pH为3. 8 4. 2，最优 选为4. 1，温度为0 5"C，沉降时间为8 15小时；在0 5'C下，1400 1600r/min离心15 25min。发明人通过研究得到所述稀碱液提取法最优选的工艺参数为料液中 残渣与稀碱液的质量体积比(w/v)为1: 20、稀碱液质量浓度为2%、提 取时间为60min、提取温度为70'C。本发明的瓜蒌籽粗蛋白的提取工艺具有以下优势1、 本发明的工艺对瓜蒌籽蛋白质在食品及医疗方面的研究和应用起 到很大的推动与促进作用；2、 本发明的提取工艺操作简便，粗蛋白得率高，所采用化学试剂价 廉易得、无毒安全，便于产业化实施。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步说明，以下实施例是为了更好地阐述本发明，而不是用来限制本发明的范围，本发明可以按发明内容所述的 任一方式实施。 实施例11、 原料、试剂与仪器设备1) 本发明供试瓜蒌籽原料由湖南威龙瓜蒌公司提供。2) 试剂与仪器设备如下试剂液态二氧化碳，氢氧化钠(分析纯)，氯化钠(分析纯)，稀盐 酸，蒸馏水。仪器设备HA121-50-01C型超临界萃取装置系统，余姚市东方电工仪 器厂HH. W21. 420型电热恒温水箱，上海-恒科学仪器有限公司DHG^9620A型 电热恒温鼓风干燥箱，SevenEasy型精密酸度计，LD5-10型台式离心机，TDZ4B 型低速离心机，AUY120型电子分析天平。2、 瓜蒌籽粗蛋白的提取过程1) 采用超临界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蒌籽100克，粉碎后过30目筛，置于超临界萃取釜中萃 取油脂，超临界萃取条件为萃取压力为20MPa，分离压力为8MPa，萃取 温度为45。C，分离温度为45。C， C02流量为45L/h，萃取时间为3h，回收 油脂。2) 通过碱溶酸沉从剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液残渣中加入1Q/。的氢氧化钠溶液，其中料液残渣与 稀氢氧化钠溶液质量体积比(w/v)为l: 10，在5(TC下提取60min。用2mol/L盐酸将上述提取液pH值调至4. 1，在3"C下沉降11小时。 在3'C下，以1500r/min离心20min，得粗蛋白提取物，干燥后称重为7. 44 克，计算粗蛋白质得率。计算公式为粗蛋白得率(％)=干燥后粗蛋白提 取物重量/干燥瓜蒌籽重量X 100%，结果为7. 44%。实施例21、 采用超临界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蒌籽100克，粉碎后过40目筛，置于超临界萃取釜中萃 取油脂，超临界萃取条件为萃取压力为35MPa,分离压力为9MPa，萃取 温度为55'C，分离温度为45'C， CO2流量为60L/h，萃取时间为3h，回收 油脂。2、 通过碱溶酸沉从剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液残渣中加入2%的氢氧化钠溶液，其中料液残渣与 稀氢氧化钠溶液质量体积比(w/v)为l: 10，在60。C下提取75min。用1. 5mol/L盐酸将上述提取液pH值调至3. 8，在4'C下沉降14小时。 在3"C下，以1600r/min离心15min，粗蛋白提取物干燥后称重为8. 78克， 计算粗蛋白质得率为8. 78%。实施例31、 采用超临界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蒌籽100克，粉碎后过20目筛，置于超临界萃取釜中萃 取油脂，超临界萃取条件为萃取压力为15MPa，分离压力为9MPa，萃取 温度为45。C，分离温度为55'C, CO2流量为70L/h，萃取时间为4h，回收 油脂。2、 通过碱溶酸沉从剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液残渣中加入3%的氢氧化钠溶液，其中料液残渣与 稀氢氧化钠溶液质量体积比(w/v)为l: 10，在70。C下提取90min。用1. 2mol/L盐酸将上述提取液pH值调至4. 0，在4'C下沉降14小时。 在3t下，以1400r/min离心25min，粗蛋白提取物干燥后称重为8. 38克， 计算粗蛋白质得率为8. 38%。实施例41、 采用超临界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蒌籽100克，粉碎后过30目筛，置于超临界萃取釜中萃 取油脂，超临界萃取条件为萃取压力为20MPa，分离压力为10MPa，萃 取温度为30'C，分离温度为35'C, CO2流量为70L/h，萃取时间为4h，回 收油脂。2、 通过碱溶酸沉从剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液残渣中加入1%的氢氧化钠溶液，其中料液残渣与 稀氢氧化钠溶液质量体积比(w/v)为l: 15，在70。C下提取75min。用1. 8mol/L盐酸将上述提取液pH值调至4. l，在4。C下沉降10小时。 在3。C下，以1400r/min离心25min，粗蛋白提取物干燥后称重为8. 19克， 计算粗蛋白质得率为8. 19%。
实施例5
1、 采用超临界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蒌籽100克，粉碎后过30目筛，置于超临界萃取釜中萃 取油脂，超临界萃取条件为萃取压力为35MPa，分离压力为7MPa,萃取 温度为40'C，分离温度为45'C， CO2流量为50L/h，萃取时间为5h，回收 油脂。2、 通过碱溶酸沉从剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液残渣中加入2%的氢氧化钠溶液，其中料液残渣与 稀氢氧化钠溶液质量体积比(w/v)为l: 15，在50'C下提取90min。用1. 2mol/L盐酸将上述提取液pH值调至4. O，在3。C下沉降15小时。 在3。C下，以1500r/min离心20min，粗蛋白提取物干燥后称重为8. 22克， 计算粗蛋白质得率为8.22 %。
实施例6
1、采用超临界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蒌籽100克，粉碎后过30目筛，置于超临界萃取釜中萃 取油脂，超临界萃取条件为萃取压力为30MPa，分离压力为7MPa，萃取 温度为5(rC，分离温度为35。C， CO2流量为60L/h，萃取时间为4.5h，回 收油脂。2、通过碱溶酸沉从剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液残渣中加入3%的氢氧化钠溶液，其中料液残渣与 稀氢氧化钠溶液质量体积比(w/v)为l: 15，在6(TC下提取60min。用2mol/L盐酸将上述提取液pH值调至4. 1 ，在4。C下沉降14小时。 在3'C下，以1500r/min离心20min，粗蛋白提取物干燥后称重为8. 93克， 计算粗蛋白质得率为8. 93%。实施例71、 采用超临界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蒌籽100克，粉碎后过40目筛，置于超临界萃取釜中萃 取油脂，超临界萃取条件为萃取压力为28MPa，分离压力为8MPa，萃取 温度为40'C，分离温度为5(TC， CO2流量为50L/h,萃取时间为2h，回收 油脂。2、 通过碱溶酸沉从剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液残渣中加入1%的氢氧化钠溶液，其中料液残渣与 稀氢氧化钠溶液质量体积比(w/v)为l: 20，在6(TC下提取90min。用1. 6mol/L盐酸将上述提取液pH值调至3. 8，在4。C下沉降14小时。 在3'C下，以1400r/min离心25min，粗蛋白提取物干燥后称重为8. 32克， 计算粗蛋白质得率为8.32%。实施例81、采用超临界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蒌籽100克，粉碎后过30目筛，置于超临界萃取釜中萃 取油脂，超临界萃取条件为萃取压力为20MPa，分离压力为7MPa，萃取 温度为45'C，分离温度为45'C, CO2流量为60L/h，萃取时间为3h,回收 油脂。2、通过碱溶酸沉从剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液残渣中加入2%的氢氧化钠溶液，其中料液残渣与 稀氢氧化钠溶液质量体积比(w/v)为l: 20，在70。C下提取60min。用1. 2mol/L盐酸将上述提取液pH值调至4. l,在4。C下沉降14小时。 在3。C下，以1400r/min离心25min，粗蛋白提取物干燥后称重为9. 04克， 计算粗蛋白质得率为9. 04%。实施例91、 采用超临界C02萃取法提取油脂取干燥后瓜蒌籽100克，粉碎后过20目筛，置于超临界萃取釜中萃 取油脂，超临界萃取条件为萃取压力为30MPa，分离压力为8MPa，萃取 温度为40'C,分离温度为3(TC， CO2流量为50L/h，萃取时间为3h，回收 油脂。2、 通过碱溶酸沉从剩余渣滓中提取蛋白在提取油脂后的料液残渣中加入3%的氢氧化钠溶液，其中料液残渣与 稀氢氧化钠溶液质量体积比(w/v)为l: 20，在5(TC下提取75min。用1. 2mol/L盐酸将上述提取液pH值调至4. 0，在4'C下沉降14小时。 在3'C下，以1400r/min离心25min，粗蛋白提取物干燥后称重为8. 96克， 计算粗蛋白质得率为8. 96%。
权利要求
1、一种瓜蒌籽粗蛋白的提取工艺，其特征在于，包括以下步骤1)将瓜蒌籽干燥、粉碎后过筛，用超临界CO2萃取法提取油脂；2)用碱溶酸沉从剩余渣滓中提取蛋白，工艺参数为∶料液中残渣与稀碱液的质量体积比(w/v)为1∶5～1∶40，稀碱液浓度为0.5～5％、提取时间为30～120min、提取温度为40～80℃，酸沉后冷冻离心得粗蛋白提取物，干燥。
2、 根据权利要求l所述的一种瓜蒌籽粗蛋白的提取工艺，其特征在于， 瓜蒌籽干燥、粉碎后过20 40目筛。
3、 根据权利要求l所述的一种瓜蒌籽粗蛋白的提取工艺，其特征在于， 油脂的超临界C02萃取条件为萃取压力为10 35MPa,分离压力为6 10MPa， 萃取温度为30 60°C,分离温度为30 60°C, 0)2流量为10 80L/h，萃取时 间为l 5h。
4、 根据权利要求l所述的一种瓜蒌籽粗蛋白的提取工艺，其特征在于， 所述稀碱液为氢氧化钠稀溶液。
5、 根据权利要求1 4任一项所述的一种瓜蒌籽粗蛋白的提取工艺，其 特征在于，所述料液残渣与稀碱液的质量体积比为1: 20、稀碱液质量浓度为 2%、提取时间为60min、提取温度为7(TC。
6、 根据权利要求l所述的一种瓜蒌籽粗蛋白的提取工艺，其特征在于， 所述酸沉离心条件为所述酸沉离心条件为用1 2mol/L盐酸调节pH为 3. 8 4. 2，温度为0 5°C，沉降时间为8 15小时；在0 5°。下，1400 1600r/min离心15 25min。
7、 根据权利要求6所述的一种瓜蒌籽粗蛋白的提取工艺，其特征在于， 所述酸沉离心条件为用1 2mol/L盐酸调节pH为4. 1。
全文摘要
本发明公开了一种瓜蒌籽粗蛋白的提取工艺，包括以下步骤1)将瓜蒌籽干燥、粉碎后过筛，用超临界CO<sub>2</sub>萃取法提取油脂；2)通过碱溶酸沉从剩余渣滓中提取蛋白，工艺参数为料液中残渣与稀碱液的质量体积比(w/v)为1∶5～1∶40，稀碱液质量浓度为0.5～5％、提取时间为30～120min、提取温度为40～80℃，酸沉后冷冻离心得粗蛋白提取物，干燥。本发明工艺简单实用、粗蛋白得率高，便于产业化实施。
文档编号C07K1/30GK101215319SQ20081003052
公开日2008年7月9日 申请日期2008年1月21日 优先权日2008年1月21日
发明者李赤翎 申请人:长沙理工大学