专利名称：一种喹唑啉二硫二氮衍生物的制备方法
技术领域：
本发明设计 一 种N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙 萄-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺制备方法，属于放射性药物标记 前体化合物合成技术领域。
背景技术：
N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)
氨蜀甲酰甲基]]乙酰胺(简称IQNS)，其结构式如上，分子式为C22H25IN602S2， 可以与同位素锝方便地形成稳定的络合物99mTc-IQNS。
肿瘤受体显像是21世纪肿瘤核医学的一个新领域，近年来从分子医学水平 上探讨受体功能与肿瘤产生及发展的关系，并用于诊断治疗，是国际上医学科 学研究领域的前沿。利用放射性核素进行肿瘤受体显像，是分子核医学应用于 肿瘤医学研究的新技术。
表皮生长因子受体(EGFR)是一种具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白受体。 EGFR几乎在所有人类上皮源性肿瘤中均有较高的表达，如非小细胞癌、乳腺癌、 食管癌、胃癌、膀胱癌等。EGFR与配体结合或受辐射刺激后，其分子形成二聚 体并内陷，使细胞内酪氨酸激酶磷酸化，通过激活细胞内多条重要的信号传导 通路来发挥作用。抑制EGFR酪氨酸激酶活性，可以抑制肿瘤生长。以EGFR 为靶点进行靶向治疗肿瘤是当今癌症治疗中十分活跃的领域之一，在临床研究 中已经取得显著的疗效。
放射性核素标记EGFR抑制剂用于肿瘤的早期定性、定位诊断、优化治疗 方案、判断疗效以及靶向放射治疗正引起越来越多的肿瘤学者的注意。国外有 用18F, UC和1241标记4-氨基喹唑啉类EGFR抑制剂用于EGFR受体显像的研究， 而关于99mTc标记氨基喹唑啉类EGFR抑制剂报道较少。99mTc具有良好的性质 适合SPECT显像，以及99mTc方便易得，因此设计99mTc标记4-氨基喹唑啉类 EGFR抑制剂具有更好的临床推广意义。
99mTc-IQNS是我们设计的一种新型的4-氨基喹唑啉类EGFR受体显像剂。 在CA上无登记号，国内外也没有相关报道。IQNS与其他辅料一起混合经冷冻 干燥可方便地制得药盒，药盒的稳定性较好，标记率达95%以上，方便进一步 用于生物学特性的研究。
发明内容
本发明的目的是提供一种N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-萄-2-[N-(2-巯基
4乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的制备方法，用于制备锝标记 的放射性药物99mTc-N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙 基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺，用于肿瘤EGFR受体显像。 本发明的技术方案
一种N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基 乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的制备方法，其特征是反应方程式为<formula>formula see original document page 5</formula>
(1) 、化合物I 4-氯-6-硝基喹唑啉的合成
6-硝基喹唑啉酮和过量摩尔比的氯化亚砜，在N， N-二甲基甲酰胺催化下， 回流3小时，减压蒸出多余的氯化亚砜，得化合物I，化合物I 0'C保存，无需 纯化直接用于下一步反应；
(2) 、化合物II 6-硝基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉的合成
将化合物I和2.5倍化合物I摩尔量的间碘苯胺溶于异丙醇，先室温搅拌 10min，产生亮黄色沉淀，然后再升温回流反应4小时，冷却，过滤，异丙醇洗 涤，真空80。C烘干，得化合物II;
(3) 、化合物III 6-氨基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉的合成 室温搅拌下，将化合物II加入5倍化合物II摩尔量的氯化亚锡二水合物的
浓盐酸中，搅拌2小时，过滤，水洗，将滤渣悬浮于水中，滴加氨水调pH至8 呈碱性，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得粗品，以甲醇三氯
甲烷体积比i: io混合溶剂为淋洗剂，柱层析纯化得化合物ni;
(4) 、化合物IV N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-氯乙酰胺的合成干燥的四氢呋喃中，加入2.5倍化合物III摩尔量的三乙胺和0.5倍化合物III摩尔量的4-二甲氨基吡啶搅拌15分钟，将化合物III等摩尔量的氯乙酰氯滴加到反应液中，继续搅拌30min，缓慢升至室温搅拌1小时，加入饱和碳酸氢钠溶液，减压蒸出四氢呋喃，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，蒸干得粗品，以甲醇三氯甲垸体积比1 : 20混合溶剂为淋洗剂，柱层析纯化得化合物IV;
(5) 、化合物V N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-蜀-2-[N-(4-甲氧基苄巯基乙萄-N-[[N-[2-(4-甲氧基苄巯基)乙基]氨萄甲酰甲基]]乙酰胺的合成
将化合物IV和N-(2-(4-甲氧基苄巯基)乙基)-2-(2-(4-甲氧基苄巯基)乙基氨基)乙酰胺等摩尔反应，5倍化合物IV摩尔量的碳酸钾缚酸剂，化合物IV等摩尔量的碘化钾催化剂，以无水乙腈为反应介质，回流反应24小时，薄层层析检测反应完全，旋干无水乙腈，加入水和二氯甲烷体积比l : l进行分层，有机层水洗至中性，无水硫酸钠干燥，旋干得粗品，以甲醇三氯甲烷体积比1 : 30混合
溶剂为淋洗剂，柱层析得化合物V;
(6) 、化合物VI N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的合成
控温0。C， N2保护下，将化合物V溶解于三氟乙酸，加2.3倍化合物V摩尔量的干燥苯甲醚，搅拌30min，再加入2倍化合物V摩尔量的醋酸汞，搅拌30min，真空浓縮，得粘稠油状物，油泵抽30min，加入干燥乙醚，超声震荡5min，有黄色固体生成，过滤，滤渣油泵抽干，溶解于无水乙醇-四氢呋喃混合溶剂中，通干燥H2S反应30min，离心除去黑色粉末状硫化汞，倾出三氟乙酸盐的乙醇溶液，常温下蒸千，油泵抽30min，得黄色固体，即化合物VI的三氟乙酸盐。
本发明的有益效果本发明合成的^[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-蜀-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨蜀甲酰甲基]]乙酰胺(IQNS)，分子式为<:2211251^0282，可以与同位素锝方便地形成稳定的络合物"，c-IQNS。IQNS与其他辅料一起混合经冷冻干燥可方便地制得药盒，药盒的稳定性较好，标记率达95%以上，方便进一步用于生物学特性的研究。
具体实施例方式
实施例1
4-氯-6-硝基喹唑啉(I)
6-硝基喹唑啉酮(9.55g， 50mmol)和200ml氯化亚砜，3滴DMF催化下，回流3小时，得到澄清溶液，减压蒸出多余的氯化亚砜，得产物I，产物I零度保存，无需纯化直接用于下一步反应。Mp=129'C， iH-NMR(DMSO)S: 8.78(1H，d)，8.56(1H，dd)， 8.43(1H，s)， 7.88(1H,d)。
6实施例2
6-硝基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉(II)
将化合物I(lOg， 0.048mol)和间碘苯胺(26g， 0.12mol)溶于异丙醇，先室温搅拌10min，产生亮黄色沉淀，然后再升温回流反应4小时，冷却，过滤，异丙醇洗涤，真空80。C烘干，得产物H(15.05g， 80%)。 MS(m/z)393(m+l)+，iH-NMR(DMSO)S: 10.56(1H，s)， 9.65(1H,d)， 8.77(1H,s)， 8.59(1H,dd)，8.27(1H,brs)， 7.96(2H，m)， 7.54(1H,d)， 7.23(1H，t)。
实施例3
6-氨基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉(in)
室温搅拌下，将产物II(lOg， 0.026mol)加入到氯化亚锡二水合物(28.9g，0.13mol)的100ml浓盐酸中，搅拌2小时，过滤，水洗，将滤渣溶于水中，滴加氨水调pH至碱性，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得粗品，以甲醇三氯甲垸(1: 10)为淋洗剂，柱层析纯化得产物m(4.24g， 45%)。MS(m/z)363(m+l)+， iH誦NMR(DMSO)S: 9.37(1H,s)， 8.35(1H，s)， 8.32(1H,t)，7.92(1H,dd)， 7.52(1H,d)， 7.39(1H，d)， 7.32(1H,d)， 7.24(1H，dd)， 7.13(1H,t)， 5.60(2H，br s)。
实施例4
N-[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-氯乙酰胺(IV)
冰浴下，化合物in(2g， 5.5mmo1)溶于干燥的四氢呋喃中，加入三乙胺(1.40g， 13.8mmol)和4-二甲氨基吡啶(0.034g， 0.28mmol)搅拌15分钟，将氯乙酰氯(0.62g， 5.5mmol)的四氢呋喃溶液滴加到反应液中，继续搅拌30min，缓慢升至室温搅拌1小时，加入饱和碳酸氢钠溶液，减压蒸出THF，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，蒸干得粗品，以甲醇三氯甲烷(1: 20)为淋洗剂，柱层析纯化得产物IV(1.52g， 63%)。 MS(m/z)439(m+l)+， 'H隱NMR(DMSO)S: 10.6(1H,s)，9.90(1H，s)， 8.71(1H，s)， 8.57(1H，s)， 8.26 (1H，m)， 7.82(2H,m)， 7.45(1H,d)，7.19(2H,m)， 4.36(2H,s)。
实施例5
N_[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(4-甲氧基苄巯基乙萄-N-[[N-[2-(4-甲氧基苄巯基)乙萄氨基]甲酰甲基]]乙酰胺(V)
将化合物IV(1.5g， 3.42mmol)和N-2- (4-甲氧基苄巯基)乙基)-2- (2- (4-甲氧基苄巯基)乙基氨基)乙酰胺(1.48g， 3.42mmo1)，碳酸钾(2.36g， 17.1mmo1)缚酸剂，碘化钾(0.57g， 3.42mmol)催化剂，以无水乙腈为反应介质，回流反应24小时，TLC反应完全，旋干无水乙腈，加入水和二氯甲烷分层，有机层水洗至中性，无水硫酸钠干燥，旋干得粗品，以甲醇三氯甲垸(1: 30)为淋洗剂，柱层析产物V(1.08g， 38%)。 MS(m/z)837(m+l)+， ！H-画R(DMSO)S: 10,1(1H)，
78.7(1H)， 8.6(1H)， 8.2(1H)， 7.7~1.9,， 7.5(1H)， 7.1(5H)， 6.7~6.8(5H)，3.8~3.9(6H)， 3.7(2H)， 3.5(2H)， 3.4(2H)， 3.3(2H)， 3.2(2H)， 2.8(2H)， 2.6(4H)。实施例6
N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺(VI)
控温0。C， N2保护下，将化合物V(0.5g， 0.6mmol)溶解于10mL三氟乙酸，加(0.15mL， 1.38mmol)干燥苯甲醚，搅拌30min，再加入(0.39g， 1.20mmol)醋酸汞，搅拌30min，真空浓縮，得粘稠油状物，油泵抽30min，加入干燥乙醚，超声震荡5min，有黄色固体生成，过滤，滤渣油泵抽干，溶解于无水乙醇-四氢呋喃混合溶剂中，通干燥H2S反应30min，离心除去黑色粉末状硫化汞，倾出三氟乙酸盐的乙醇溶液，常温下蒸干，油泵抽30min，得黄色固体VI的三氟乙酸盐(0.12g, 29%)。 MS(m/z)597(m+l)+,由于化合物VI易吸湿氧化，故未进行核磁表征，充氮气保护低温保存，以备""^Tc标记，进一步研究其生物学特性。
8
权利要求
1、一种N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的制备方法，其特征是反应方程式为(1)、化合物I 4-氯-6-硝基喹唑啉的合成6-硝基喹唑啉酮和过量摩尔比的氯化亚砜，在N，N-二甲基甲酰胺催化下，回流3小时，减压蒸出多余的氯化亚砜，得化合物I，化合物I 0℃保存，无需纯化直接用于下一步反应；(2)、化合物II 6-硝基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉的合成将化合物I和2.5倍化合物I摩尔量的间碘苯胺溶于异丙醇，先室温搅拌10min，产生亮黄色沉淀，然后再升温回流反应4小时，冷却，过滤，异丙醇洗涤，真空80℃烘干，得化合物II；(3)、化合物III 6-氨基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉的合成室温搅拌下，将化合物II加入5倍化合物II摩尔量的氯化亚锡二水合物的浓盐酸中，搅拌2小时，过滤，水洗，将滤渣悬浮于水中，滴加氨水调pH至8呈碱性，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得粗品，以甲醇∶三氯甲烷体积比1∶10混合溶剂为淋洗剂，柱层析纯化得化合物III；(4)、化合物IV N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-氯乙酰胺的合成冰浴下，化合物III溶于干燥的四氢呋喃中，加入2.5倍化合物III摩尔量的三乙胺和0.5倍化合物III摩尔量的4-二甲氨基吡啶搅拌15分钟，将化合物III等摩尔量的氯乙酰氯滴加到反应液中，继续搅拌30min，缓慢升至室温搅拌1小时，加入饱和碳酸氢钠溶液，减压蒸出四氢呋喃，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，蒸干得粗品，以甲醇∶三氯甲烷体积比1∶20混合溶剂为淋洗剂，柱层析纯化得化合物IV；(5)、化合物V N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(4-甲氧基苄巯基乙基)-N-[[N-[2-(4-甲氧基苄巯基)乙基]氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的合成将化合物IV和N-(2-(4-甲氧基苄巯基)乙基)-2-(2-(4-甲氧基苄巯基)乙基氨基)乙酰胺等摩尔反应，5倍化合物IV摩尔量的碳酸钾缚酸剂，化合物IV等摩尔量的碘化钾催化剂，以无水乙腈为反应介质，回流反应24小时，薄层层析检测反应完全，旋干无水乙腈，加入水和二氯甲烷体积比1∶1进行分层，有机层水洗至中性，无水硫酸钠干燥，旋干得粗品，以甲醇∶三氯甲烷体积比1∶30混合溶剂为淋洗剂，柱层析得化合物V；(6)、化合物VI N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的合成控温0℃，N2保护下，将化合物V溶解于三氟乙酸，加2.3倍化合物V摩尔量的干燥苯甲醚，搅拌30min，再加入2倍化合物V摩尔量的醋酸汞，搅拌30min，真空浓缩，得粘稠油状物，油泵抽30min，加入干燥乙醚，超声震荡5min，有黄色固体生成，过滤，滤渣油泵抽干，溶解于无水乙醇-四氢呋喃混合溶剂中，通干燥H2S反应30min，离心除去黑色粉末状硫化汞，倾出三氟乙酸盐的乙醇溶液，常温下蒸干，油泵抽30min，得黄色固体，即化合物VI的三氟乙酸盐。
全文摘要
一种喹唑啉二硫二氮衍生物的制备方法，属于放射性药物标记前体化合物合成技术领域。本发明提供一种N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺(IQNS)制备方法，用于制备锝标记的放射性药物<sup>99m</sup>Tc-IQNS。IQNS与其他辅料一起混合经冷冻干燥可方便地制得药盒，药盒的稳定性较好，标记率达95％以上，方便进一步用于生物学特性的研究。
文档编号C07D239/94GK101665466SQ200910034320
公开日2010年3月10日 申请日期2009年8月24日 优先权日2009年8月24日
发明者周杏琴, 张建康, 徐希杰, 邹美芬, 钦晓峰 申请人:江苏省原子医学研究所