专利名称：丹参酮衍生物及其制备和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域。具体地说，本发明提供用于治疗心脑血管的药物丹参 酮衍生物及其制备和用途---丹参酮II A磺酸钠水合物及其制备方法和用途。本发明还涉 及本发明丹参酮II A磺酸钠水合物的制备和在制备心脑血管病预防和治疗的药物中的应用。
背景技术：
丹参酮II A(tanshinone II Α)是从我国中药丹参中提取得到的。丹参酮II A磺酸 钠是由丹参酮II A(Tanshinone II A)(化学学报，1978，3 :199-206)，经磺化后得到的，药物 的水溶性强，疗效比丹参酮II A强。丹参酮II A磺酸钠能明显抑制高钾引起的钙内流增加， 与传统的钙拮抗剂维拉帕米有相似的作用。丹参酮II A磺酸钠通过对KATP、KCa的钾通道 开放和钙通道阻滞的协同或联合作用，可明显减少血管平滑肌上的自发电活动，引起血管 舒张，在心血管疾病的治疗中具有重要的应用价值。到目前为止，国内外公开的文献仅报道 了丹参酮 II A 磺酸钠(Tanshinone II A Sulfonate sodium, C19H17NaO6S,分子量396. 39)， 尚没有报道丹参酮II A磺酸钠结晶水合物及其制备方法和用途。发明内容
本发明的发明人在研究中令人意外地发现，含有结晶水的丹参酮II A磺酸钠(即， 丹参酮II A磺酸钠水合物)的引湿性远低于不含结晶水的丹参酮II A磺酸钠，并且含有结 晶水的丹参酮II A磺酸钠比不含结晶水的丹参酮II A磺酸钠更能稳定的存在，便于储存和 运输，并在室温下具有良好的水溶性，更易于制成水溶性的制剂。此外，与丹参酮II A磺酸 钠无水物相比，本发明的丹参酮II A磺酸钠水合物具有良好的滑动性，从而改善制剂的可 操作性。基于上述发现，本发明的发明人完成了本发明。
一方面，本发明提供丹参酮II A磺酸钠结晶水合物，其分子式为C19H17NaO6S ·ηΗ20， 其中η = 0. 5 4. 0。
在一个实施方案中，本发明提供丹参酮II A磺酸钠水合物，其分子式为 C19H17NaO6S · ηΗ20，其中 η = 0. 5 3. 0 或 η = 0. 5 2. 5。
在一个具体实施方案中，本发明提供丹参酮II A磺酸钠水合物，其中η = 2. 5。
在另一个具体实施方案中，本发明提供丹参酮II A磺酸钠水合物，其中η = 1. 5。
在另一个具体实施方案中，本发明提供丹参酮II A磺酸钠水合物，其中η = 0. 5。
本发明的丹参酮II A磺酸钠水合物可具有不同的晶型，例如，从甲醇-水、乙 醇-水或丙酮-水为结晶或重结晶体系而制备出来的丹参酮II A磺酸钠0. 5、1. 5,2. 5,3. 5 水合物的χ-射线粉末衍射图谱可以有所不同。
另一方面，本发明提供具有粉末X射线衍射特征的丹参酮II A磺酸钠1.5水合物。
在一个实施方案中，利用粉末X射线衍射法测量，在衍射角2 θ (3-80° )测量范围 内，本发明的丹参酮II A磺酸钠0.5水合物可以在包括如下2 θ值的位置具有相应的特征值约 3. 7,7. 6,9. 0,9. 6，15. 3,22. 0,26. 0,27. 6,29. 8。
在另一个实施方案中，利用粉末X射线衍射法测量，在衍射角2 θ (3-80° )测量范 围内，本发明的丹参酮II A磺酸钠1. 5水合物可以在包括如下2 θ值的位置具有相应的特 征值约 3. 7,6. 2,7. 3,8. 8,9. 2，11. 5，14. 7，15. 4，17，17. 7,20. 6,21. 2,25. 9，27. 1,27. 6， 29. 4。
在另一个实施方案中，利用粉末X射线衍射法测量，在衍射角2 θ (3-80° )测量 范围内，本发明的丹参酮II A磺酸钠2. 5水合物可以在包括如下2 θ值的位置具有相应的 特征值约 3. 7,4. 3,6. 2,7. 3,8. 8,9. 3，11. 5，14. 7，15. 4，17，17. 7,21. 2,25. 9,27. 3,27. 6， 29. 4。
再一方面，本发明提供本发明丹参酮II A磺酸钠结晶水合物的制备方法，该方法 包括
方法A 将丹参酮II A于反应容器中，加醋酸、醋酐、丙酸、丙酸酐、C1-C6低取代卤 代烃，包括二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、四氯乙烷中的一种或者数种，搅拌，加醋酸、醋酐、丙 酸、丙酸酐中的一种或者数种的硫酸或发烟硫酸或氯磺酸的溶液，滴加完毕后，在30°C以下 搅拌0. l_6h，将反应物慢慢倒入水中，加氯化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠一种或数种的 溶液(优选其饱和溶液)，待沉淀充分析出，过滤，沉淀物用饱和氯化钠溶液或饱和硫酸钠 溶液洗一次或数次，再用水或C1-C6低分子醇，包括甲醇、乙醇、异丙醇的一种或数种洗一 次或数次，过滤，用无水乙醇回流除去残存的氯化钠，浓缩，所得的固体用水、C1-C6低分子 醇，包括甲醇、乙醇、异丙醇等，C3-C6低级酮，其中包括丙酮、丁酮、异己酮等，C2-C8的低级 酯，其中包括醋酸丁酯、乙酸乙酯、甲酸乙酯等，C1-C6低取代卤代烃，包括二氯甲烷、二氯乙 烷、氯仿等，C2-C6低级醚，包括乙醚、甲乙醚、异丙醚等，C5-C10的直链或支链烷烃或环烷 烃，包括戊烷、正己烷、石油醚、环己烷等，芳香烃，其中包括苯，甲苯等中的一种或几种，进 行结晶，放置，冷却，待结晶析出，过滤，干燥，得丹参酮II A磺酸钠结晶水合物，这种结晶过 程进行一次或数次，以便获得纯化更高的产物；或者
方法B 将丹参酮II A于反应容器中，加醋酸、醋酐、丙酸、丙酸酐、C1-C6低取代卤 代烃，包括二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、四氯乙烷中的一种或者数种，搅拌，加C1-C6低取代 卤代烃，包括二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、四氯乙烷等中的一种或者数种的氯磺酸溶液，滴加 完毕后，在30°C以下搅拌0. l-6h，将反应物慢慢倒入水中，分离有机层，所得的水溶液层中 加氯化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠一种或数种的饱和溶液，放置，待沉淀充分析出，过 滤，沉淀物用饱和氯化钠溶液或饱和硫酸钠溶液洗一次或数次，再用水或C1-C6低分子醇， 包括甲醇、乙醇、异丙醇等的一种或数种洗一次或数次，所得的固体用水、C1-C6低分子醇， 包括甲醇、乙醇、异丙醇等，C3-C6低级酮，其中包括丙酮、丁酮、异己酮等，C2-C8的低级酯， 其中包括醋酸丁酯、乙酸乙酯、甲酸乙酯等，C1-C6低取代卤代烃，包括二氯甲烷、二氯乙烷、 氯仿等，C2-C6低级醚，包括乙醚、甲乙醚、异丙醚等，C5-C10的直链或支链烷烃或环烷烃， 包括戊烷、正己烷、石油醚、环己烷等，芳香烃，其中包括苯，甲苯等中的一种或几种，进行结 晶，放置，冷却，待结晶析出充分，过滤，干燥，得丹参酮II A磺酸钠结晶水合物，这种结晶过 程可进行一次或数次。
在一个实施方案中，制备丹参酮II A磺酸钠水合物所用的结晶或重结晶溶剂优选 是水、甲醇、乙醇、异丙醇，丙酮、丁酮、异己酮、乙酸甲酯、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、乙醚、异丙醚、石油醚和苯中的一种或几种。
本发明的产物的干燥方式可以为在不同温度(如20-100°C)、干燥时间(1小时到 数日)、或附有其它干燥剂(包括硅胶，五氧化二磷、无水氯化钙、无水硫酸钠等)的环境条 件下、或使用常压或减压的方式对最后的产物进行干燥。其干燥温度优选在60°C或以内。
再一方面，本发明提供药物组合物，其包含本发明的丹参酮II A磺酸钠水合物，以 及药学上可接受的载体。
在一个实施方案中，本发明的药物组合物被制备成注射用冻干粉针制剂、无菌分 装粉针制剂、大输液制剂、小水针注射剂以及经胃肠道给药的制剂等制剂。
用于经肠道给药制剂包括片剂、胶囊、颗粒剂，其中可含有药学上可接受的填充 剂，如淀粉、变性淀粉、乳糖、微晶纤维素、环糊精、山梨醇、甘露醇、磷酸钙、氨基酸等；药学 上可接受的崩解剂，如淀粉、变性淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、 低取代羟丙基纤维素、表面活性剂；药学上可接受的润湿剂和粘合剂，如胶化淀粉、甲基纤 维素、羧甲基纤维素、乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、海藻酸及其盐；药学上可接受的润滑剂 和助流剂，如硬脂酸、硬脂酸镁、聚乙二醇4000-8000、滑石粉、微粉硅胶、十二烷基硫酸镁 等；药学上可接受的甜味剂和香精，如阿斯巴甜、甜蜜素、糖精钠、三氯蔗糖、食用香精等。
本发明的丹参酮II A磺酸钠水合物可以被制备成冻干粉针制剂，例如通过如下方 法制备取丹参酮II A磺酸钠水合物，可以加药学上可接受的助溶剂、冻干支持剂或辅形 剂、稳定剂、注射用水，搅拌使溶解，若需要，可用药学上可接受的酸碱调节PH为3. 5 8. 5， 加活性碳0. 005 0. 5 % (W/V)搅拌15 45min，过滤，补水，无菌过滤，按5 80mg/瓶 (以主药计)分装，冷冻干燥，压塞，得成品。
本发明的丹参酮II A磺酸钠水合物还可以被制备成小容量注射液，例如通过如下 方法制备丹参酮II A磺酸钠水合物加注射用水和药学上可接受的附加剂，例如药学上可 接受的PH调节剂、药学上可接受的抗氧剂、惰性气体，过滤、除菌制成灭菌小容量注射液， 其PH值在3. 5 8. 5之间。
所述药学上可接受的冻干支持剂或辅形剂可以含有乳糖、葡萄糖、甘露醇、山梨 醇、木糖醇、右旋糖酐、氨基酸或其盐(包括甘氨酸、牛磺酸、精氨酸等)、磷酸二氢钠、磷酸 氢二钠、去氧胆酸钠等的一种或几种。
所述药学上可接受的PH调节剂可以是药学上可接受的无机酸或有机酸、无机碱 或有机碱，也可以是广义的路易斯酸或碱，可以含有一种或者几种，可以是盐酸、磷酸、丙 酸、醋酸及醋酸盐、如醋酸钠等，乳酸以及乳酸药用盐、枸橼酸药用盐、碳酸钠、碳酸氢钠、碳 酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸盐、酒石酸及其药用盐、硼砂、硼酸、丁二酸、己酸、己二 酸、反丁烯二酸、顺丁烯二酸、三羟基氨基甲烷、二乙醇胺、乙醇胺、异丙醇胺、二异丙醇胺、 2-氨基-2-(羟甲基)1，3_丙二醇胺、1，2_己二胺、N-甲基葡萄胺、二异丙胺以及它们的盐， 多羟基羧酸及药用盐，如葡萄糖醛酸、葡萄糖酸、乳糖酸、苹果酸、苏糖酸、葡庚糖酸、氨基酸 及氨基酸盐等中的一种或者几种。
所述药学上可接受的抗氧剂和稳定剂可以是亚硫酸、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、焦 亚硫酸盐、连二亚硫酸盐、硫代硫酸盐，有机硫化合物硫脲、谷胱甘肽、二巯基丙醇、巯基乙 酸及盐、硫代乳酸及盐、硫代二丙酸及盐、苯酚类化合物，如没食子酸及盐、咖啡酸、咖啡酸 盐、阿魏酸、阿魏酸盐、二叔丁基对苯酚、2，5_ 二羟基苯甲酸、2，5_ 二羟基苯甲酸盐、苯酚或5其衍生物、水杨酸或其盐；氨基酸以及其盐；抗坏血酸及抗坏血酸盐、异抗坏血酸及异抗坏 血酸盐、烟酰胺、酒石酸、硝酸盐、磷酸盐、醋酸药用盐、柠檬酸盐、EDTA及EDTA盐、如EDTA 二钠、EDTA四钠、N-二(2-羟乙基)甘氨酸、α-环糊精、β-环糊精、Y-环糊精、葡糖 基-环糊精(G1-CYD)、麦芽糖基-β-环糊精、羟丙基β-环糊精、2-羟丙基β-环糊精 (2-ΗΡ- β -CYD)、3-羟丙基 β -环糊精(3-ΗΡ- β -CYD)、磺丁醚-β -环糊精(SBE- β -CD)，如 (SBE7- β -⑶)、SBE4- β -⑶等中的一种或者几种。
所述药学上可接受的助溶剂可以是葡萄糖、木糖醇、山梨醇、甘露醇、烟酰胺、N-甲 基葡萄胺、N-乙基葡萄胺、磷酸及药学上可接受的磷酸盐(可以是磷酸二氢钠、磷酸氢二 钠、磷酸钠、磷酸二氢钾等)、乳酸、乳酸钠、枸橼酸、枸橼酸钠、多羟基羧酸及药用盐(如葡 萄糖醛酸、葡萄糖酸、乳糖酸、苹果酸、苏糖酸、葡庚糖酸等或其药用盐)、氨基酸及氨基酸 盐(可以是盐酸精氨酸、盐酸赖氨酸等)、盐酸、硫酸、酒石酸、吐温20-80、泊洛沙姆(包 括泊洛沙姆124，188，237，338，407等)、聚乙二醇200-2000、乙醇、乙二醇、丙三醇、葡糖 基-环糊精(G1-CYD)、麦芽糖基-β-环糊精、羟丙基β-环糊精、2-羟丙基β-环糊精 (2-ΗΡ- β -CYD)、3_ 羟丙基 β -环糊精(3-ΗΡ- β -CYD)、磺丁醚-β -环糊精(SBE- β -CD)，如 (SBE7-β -⑶)、SBE4-β -⑶等、以及水等中的一种或者几种。
所述药学上可接受的等渗调节剂可以是葡萄糖、果糖、木糖醇、山梨醇、甘露醇、转 化糖、麦芽糖、右旋糖酐、氯化钠、氯化钾、乳酸钠等中的一种或几种。
本发明的丹参酮II A磺酸钠水合物可作为钙拮抗剂用于预防或治疗人和哺乳动 物的冠心病、心绞痛、心肌梗死，心律失常、缺血性脑病，包括脑血栓、脑栓塞；末梢循环障碍 疾病如各种动脉闭塞症、脉管炎、糖尿病引起的微循环障碍、高血压、高脂血症等疾病。
再一方面，本发明提供本发明的丹参酮II A磺酸钠水合物在制备药物中的用途， 所述药物用于治疗或预防人和哺乳动物的冠心病、心绞痛、心肌梗死、心律失常、缺血性脑 疾病、末梢循环障碍疾病，包括各种动脉闭塞症、脉管炎、糖尿病引起的微循环障碍、高血压 或高脂血症。
可替代地，本发明提供使用本发明的丹参酮II A磺酸钠水合物预防或治疗上述疾 病的方法，其包括将预防或治疗有效量的本发明的丹参酮II A磺酸钠水合物给予有此需要 的受试者。
用量用法一般情况下，于成人，肌内注射5-80mg/次，一日1_2次。静脉注射 5-80mg/次，以25%葡萄糖注射液20ml稀释。静脉滴注5_80mg，以5%葡萄糖注射液或 0.9%氯化钠注射液250 500ml稀释，一日1_2次。儿童减半量以上使用。经胃肠道给药 用量用法10 70kg体重的人或动物，一般情况下10 200mg/天，分1_3次给药；儿童减 半量以上使用。
参照中国药典(2005版)要求进行的引湿性试验证明，本发明的丹参酮II A磺酸 钠水合物比丹参酮II A磺酸钠无水物要低得多。
另外，参照中国药典(2005版)要求进行的加速稳定性试验证明，本发明的丹参酮 II A磺酸钠结晶水合物比丹参酮II A磺酸钠无水物具有更好的存储稳定性，因此能更长期 地稳定存储。
本发明的丹参酮II A磺酸钠水合物为红色或砖红色或棕红色结晶性粉末。不同 于丹参酮II A磺酸钠无水物因潮解导致在处理时要隔绝空气防止粘连等，本发明的丹参酮II A磺酸钠结晶水合物具有良好的滑动性，从而改善制剂的可操作性；并使制备的固体制 剂具有良好的溶出性能，使得其容易被吸收进入血液循环，改善生物利用度，并有利于快速 发挥其作用。
图1为丹参酮II A磺酸钠2. 5水合物的热分析图谱。
图2为丹参酮II A磺酸钠1. 5水合物的热分析图谱。
图3为丹参酮II A磺酸钠0. 5水合物的热分析图谱。
具体实施方式
热分析方法
测试条件Setaram公司ktsys 16，NETZSCH STA449C，样品量5mg左右，升温速 度10K/min，N2流速50ml/min，温度一般为室温 400°C左右。
令人意外的是，特征性的，本发明的水合物的热分析(TG-DTA或者TG-DSC)图谱的 失重平台下具有对应的吸热峰，热分析图谱显示出丹参酮II A磺酸钠的结晶水合物，如其 0. 5水合物、1. 5,2. 5水合物等。
粉末X衍射法
在武汉理工大学材料测试中心利用D/MX- III A X射线衍射仪，衍射角2 θ，扫描范 围3-80°，测定了丹参酮II A磺酸钠水合物的粉末X射线衍射图。
引湿试验
将丹参酮II A磺酸钠水合物和丹参酮II A磺酸钠无水物样品，取丹参酮II A磺酸 钠无水物和本发明的水合物约5g，置于干燥恒重的表面皿中，精密称重，25°C、相对湿度为 75%，分别于试验0小时和48小时取样，计算引湿增重的百分率。结果显示，丹参酮II A磺 酸钠无水物引湿性比本发明的丹参酮II A磺酸钠水合物高得多。
表1.引湿试验结果
权利要求
1.丹参酮衍生物，其特征在于丹参酮衍生物为丹参酮IIA磺酸钠水合物，其分子式为 C19H17NaO6S · ηΗ20，其中 η = 0. 5 4. 0。
2.根据权利要求1所述的丹参酮IIA磺酸钠水合物，其中η = 2. 5。
3.根据权利要求1所述的丹参酮IIA磺酸钠水合物，其中η = 1. 5。
4.根据权利要求1所述的丹参酮IIA磺酸钠水合物，其中η = 0. 5。
5.制备权利要求1至4任一项所述的丹参酮IIA磺酸钠水合物的方法，该方法包括方法A 将丹参酮II A于反应容器中，加醋酸、醋酐、丙酸、丙酸酐和C1-C6低取代卤代烃中的一种或者数种，搅拌，加醋酸、醋酐、丙酸和丙酸酐中的一种或者数种在硫酸或发烟 硫酸或氯磺酸中的溶液，滴加完毕后，在30°C以下搅拌0. 1-6小时，将反应物慢慢倒入水 中，加氯化钠、碳酸钠、碳酸氢钠和氢氧化钠一种或数种的溶液，待沉淀充分析出，过滤，沉 淀物用饱和氯化钠溶液或饱和硫酸钠溶液洗一次或数次，再用水或C1-C6低分子醇或其组 合洗一次或数次，过滤，所得的固体用水、C1-C6低分子醇、C3-C6低级酮、C2-C8低级酯、 C1-C6低取代卤代烃、C2-C6低级醚和芳香烃中的一种或几种进行结晶，冷却，放置，待结晶 析出，过滤，干燥，得丹参酮II A磺酸钠结晶水合物，纯化产物；或者方法B:将丹参酮II A于反应容器中，加醋酸、醋酐、丙酸、丙酸酐和C1-C6低取代卤代 烃中的一种或者数种，搅拌，加一种或者数种C1-C6低取代卤代烃的氯磺酸溶液，滴加完毕 后，在30°C以下搅拌0. 1-6小时，将反应物慢慢倒入水中，分离有机层，所得的水溶液层中 加氯化钠、碳酸钠、碳酸氢钠和氢氧化钠一种或数种的饱和溶液，放置，待沉淀充分析出，过 滤，沉淀物用饱和氯化钠溶液或饱和硫酸钠溶液洗一次或数次，再用水或C1-C6低分子醇 或其组合洗一次或数次，所得的固体用水、C1-C6低分子醇、C3-C6低级酮、C2-C8的低级酯、 C1-C6低取代卤代烃、C2-C6低级醚和芳香烃中的一种或几种进行结晶，放置，冷却，待结晶 析出充分，过滤，干燥，得丹参酮II A磺酸钠结晶水合物。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述结晶用溶剂选自水、甲醇、乙醇、异丙醇，丙 酮、丁酮、异己酮、乙酸甲酯、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、乙醚和苯中的一种或几种。
7.药物组合物，其包含权利要求1至4任一项所述的丹参酮IIA磺酸钠水合物，以及药 学上可接受的载体。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其中该药物组合物被制备成注射用冻干粉针制 剂、无菌分装粉针制剂、大输液制剂、小水针注射剂及经胃肠道给药的制剂。
9.权利要求1至4任一项所述的丹参酮IIA磺酸钠水合物在制备药物中的用途，所述 药物用于治疗或预防人和哺乳动物的冠心病、心绞痛、心肌梗死、心律失常、缺血性脑疾病、 末梢循环障碍疾病，包括各种动脉闭塞症、脉管炎、糖尿病引起的微循环障碍、高血压或高 脂血症。
全文摘要
本发明涉及丹参酮衍生物及其制备和用途，该衍生物具有较好的存储稳定性，适用于制备对制备人和动物的冠心病、心绞痛、心肌梗死，心律失常、缺血性脑病、末梢循环障碍疾病如各种动脉闭塞症、脉管炎、糖尿病引起的微循环障碍、高血压、高脂血症等疾病等的治疗或预防的药物中的应用。
文档编号C07J73/00GK102040644SQ20101054180
公开日2011年5月4日 申请日期2010年11月3日 优先权日2009年11月3日
发明者刘力 申请人:刘力