专利名称：24(r)-拟人参皂苷元dq的制备方法及其药物用途的制作方法
技术领域：
本发明属于医药领域。人参作为百草之王，在心肌缺血的治疗上具有较为明确的作用，国外的研究和报 道也证明了人参对心血管有明显的改善(Mary Anne Koda-Kimble等原著，《临床药物治疗 学总论(第八版)》，人民卫生出版社)。我们经过对人参单体皂苷的定向修饰，得到M(R)-拟 人参皂苷元DQ，具有良好的抗脑缺血活性。24 (R)-拟人参皂苷元DQ分子式C3tlH52O4,分子量476. 4，属奥克梯隆型四环三萜。 结构式如下脑缺血是一个在时间和空间上多环节多变量的病理生理过程，其发病机理复杂，尚未 完全阐明。目前的治疗途经主要集中在阻断兴奋性氨基酸递质或受体、溶栓、清除自由基、 阻断钙通道等。但是根据这些理论而采取的治疗措施和研制的治疗药物目前却没有获得理 想的疗效，有的甚至产生严重的不良反应。
发明内容
本发明提供一种M (R)-拟人参皂苷元DQ的制备方法及其药物用途。本制备方 法科学合理，成本低廉，适合于工业化生产，及提供一种抗脑缺血的药物。本发明采取的技术方案包括下列步骤(一)取人参皂苷1.0kg，加水溶解，加于已处理好的大孔吸附树脂柱上，359Γ55%乙醇洗 脱至无皂苷反应，继而以609Γ90%乙醇洗脱；(二)洗脱液蒸干后，加入氢氧化钠水解，水解物调PH至中性，加于大孔吸附树脂柱ΑΒ-8 上，脱盐后，用609Γ90%乙醇洗脱；(三)洗脱液蒸干后，氧化，将氧化物调节PH至中性，用水沉淀；沉淀进行硅胶柱层析， 以 石油醚-乙酸乙酯广5 1洗脱，收集含M (R)-拟人参皂苷元DQ的洗脱液部分，回收溶剂 至干，重结晶，得产物。
背景技术：
本发明人参皂苷包括人参总皂苷、人参茎叶总皂苷、人参果总皂苷、人参花总皂 苷、西洋参茎叶总皂苷、西洋参总皂苷、西洋参果总皂苷或西洋参花总皂苷。本发明步骤(一)大孔吸附树脂包括AB-8、Dltll、D4tl2tl。本发明氧化剂包括H2O2、间氯过氧苯甲酸、高锰酸钾。本发明重结晶溶剂包括甲醇、乙醇、乙酸乙酯。本发明M (R)-拟人参皂苷元DQ在制备防治局部及全脑缺血所致的脑组织损伤 的药物中的应用。本发明M (R)-拟人参皂苷元DQ在制备治疗短暂性脑缺血发作、脑血栓、脑梗塞 的药物中的应用。当本发明用于制备防治局部及全脑缺血所致的脑组织损伤的药物、及治疗短暂性 脑缺血发作、脑血栓、脑梗塞的药物时，其口服或胃肠外给药，均是安全的，在口服情况下， 其可以任何常规形式给药，如散剂、粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、溶液剂、悬浮液、糖浆、口腔含 片、舌下含片等；当该药物肠胃外给药时，可采取任何常规形式，例如静脉内注射剂、软膏 剂、栓剂、和吸入剂等。本发明制备防治局部及全脑缺血所致的脑组织损伤的药物、及治疗短暂性脑缺血 发作、脑血栓、脑梗塞的药物是由有效成分单体或有效成分与固体或液体的赋形剂一起构 成的，这里使用的固体或液体的赋形剂在本领域是众所周知的，下面举几个具体例子，散剂 是内服的粉末剂，它的赋形剂有乳糖、淀粉、浆糊精、碳酸钙、合成或天然硫酸铝、氧化镁、硬 脂酸镁，碳酸氢钠、干燥酵母等；溶液剂的赋形剂有水、甘油、1，2_丙二醇、单糖浆、乙醇、乙 二醇、聚乙二醇、山梨糖醇等；软膏剂的赋形剂可以使用脂油，含水羊毛脂、凡士林、甘油、蜂 腊、木腊、液体石腊、树脂、高级腊等组合成的疏水剂或亲水剂。本专利方法的优点在于提供了以人参总皂苷为原料，通过结构修饰半合成了生 物活性很强的M (R)-拟人参皂苷元DQ奥克梯隆型四环三萜的方法，，并达到了工业化生 产水平。本发明还提供了一种新型的防治局部及全脑缺血所致的脑组织损伤的药物、及治 疗短暂性脑缺血发作、脑血栓、脑梗塞的药物。有效物质的剂量可以根据给药方式，病人的 年龄和体重及病情严重程度和其它类似的因素而改变，口服量为30 mg I40mg，每日两次 服用；注射，10 mg 120 mg，每日一次。
具体实施例方式实施例1(一)取人参总皂苷1.0kg，加水溶解，加于已处理好的大孔吸附树脂柱AB-8上，35%乙 醇洗脱至无皂苷反应，继而以60%乙醇洗脱；(二)洗脱液蒸干后，加入氢氧化钠水解，水解物调PH至中性，加于大孔吸附树脂柱AB-8 上，脱盐后，用60-90%乙醇洗脱；(三)洗脱液蒸干后，H2O2氧化，将氧化物调节pH至中性，用水沉淀；沉淀进行硅胶柱层 析，以石油醚-乙酸乙酯1 1洗脱，收集含M (R)-拟人参皂苷DQ的洗脱液，回收溶剂至 干，用甲醇重结晶，得产物。实施例2(一)取人参茎叶总皂苷1.0kg，加水溶解，加于已处理好的大孔吸附树脂Dltll柱上，45% 乙醇洗脱至无皂苷反应，继而以75%乙醇洗脱；(二)洗脱液蒸干后，加入氢氧化钠水解，水解物调PH至中性，加于大孔吸附树脂柱AB-8 上，脱盐后，用60-90%乙醇洗脱；(三)洗脱液蒸干后，用间氯过氧苯甲酸氧化，将氧化物调节PH至中性，用水沉淀；沉淀 进行硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯3 1洗脱，收集含M (R)-拟人参皂苷DQ的洗脱液， 回收溶剂至干，乙醇重结晶，得产物。实施例3(一)取西洋参茎叶总皂苷1.0kg，加水溶解，加于已处理好的大孔吸附树脂D4tl2tl柱上， 55%乙醇洗脱至无皂苷反应，继而以90%乙醇洗脱；(二)洗脱液蒸干后，加入氢氧化钠水解，水解物调PH至中性，加于大孔吸附树脂柱AB-8 上，脱盐后，用90%乙醇洗脱；(三)洗脱液蒸干后高锰酸钾，氧化，将氧化物调节PH至中性，用水沉淀；沉淀进行硅胶 柱层析，以石油醚-乙酸乙酯5 1洗脱，收集含M (R)-拟人参皂苷DQ的洗脱液，回收溶剂 至干，乙酸乙酯重结晶，得产物。下边结合药效学实验进一步说明本发明。[材料]24 (R)-拟人参皂苷元DQ:由吉林圣亚医药科技有限公司提供，批号100107。注射用灯盏花素，昆明龙津药业有限公司提供，规格50 mg，批准文号国药准字 Z5302066，批号:100412ο对照品生理盐水，内蒙古康源药业有限公司。规格250ml，批号091015。实验动物=Wistar大鼠，SCXK-(吉》007_0003。昆明小鼠，SCXK-(吉)2003-0001。 吉林大学基础医学院动物实验中心提供。[试验方法]1、大脑中动脉结扎致大鼠局部脑缺血试验。2、小鼠断头法耗能耐受试验。[试验主要步骤]1、预先给大鼠口服不同剂量的药物3天。于第3天给药后1小时，乌拉坦(1.5g/kg) 麻醉后，固定，手术，结扎大脑中动脉；术后6J4小时评价大鼠行为活动积分。M小时，处 死大鼠，取脑，将脑分切五片，4%红四氮唑染色，10%福尔马林固定M小时。取出称重坏死 组织。2、预先给小鼠口服不同剂量的药物7天。于第7天给药后1小时，将小鼠断头张口 到停止张口时间。取鼠脑勻浆。-30°C保存，备测乳酸(LA)，乳酸脱氢酶(LDH) ,ATP,ATPase, 肌酸激酶(CK)，MDA。3、ATP测定用钼酸铵法。LDH，CK用试剂盒测定。MDA用硫代巴比妥酸法测定。[动物给药后反应] 1、定量半定量观察指标 1.1大鼠行为活动积分 提尾法(距地面1尺)左肩内旋，左前肢内收无张力，4分 左肩内旋，左前肢内收，3分 有一定内旋内收，2分 左肩内旋，有一定张力，1分 无内旋内收，0分动物置平滑地板上，推左(右)肩向对侧移动，检查抵抗力。
无阻力者，3分有一定阻力，但不对称，2分 基本正常，但不对称，1分 正常，0分。
置金属网上，观察两前肢张力。无能力者，3分有一定张力，很弱，抓持时间很短，2分 有张力，且较对侧弱，1分 双侧张力相等，0分 满分总计10分1.2坏死组织重量1.3断头张口持续时间。1. 4 LA, LDH, CK, ATP, ATPase, MDA2、观察时间。大鼠局部脑阻塞，观察时间为M小时，其它为5-10分钟。[剂量设置]1、给药 7 天。设三个剂量组10mg/kg，20mg/kg，40mg/kg。[给药方法] 1、静脉给药。2、1 次 / 天。[试验结果]1、大鼠大脑中动脉结扎致局部脑缺血作用。表1局部脑缺血大鼠不同时间行为积分值(χ士S)
权利要求
1.一种M (R)-拟人参皂苷元DQ的制备方法，包括下列步骤(一)取人参皂苷1.0kg，加水溶解，加于已处理好的大孔吸附树脂柱上，359Γ55%乙醇洗 脱至无皂苷反应，继而以609Γ90%乙醇洗脱；(二)洗脱液蒸干后，加入氢氧化钠水解，水解物调PH至中性，加于大孔吸附树脂柱ΑΒ-8 上，脱盐后，用609Γ90%乙醇洗脱；(三)洗脱液蒸干后，氧化，将氧化物调节PH至中性，用水沉淀；沉淀进行硅胶柱层析， 以石油醚-乙酸乙酯广5 1洗脱，收集含M (R)-拟人参皂苷元DQ的洗脱液，回收溶剂至 干，重结晶，得产物。
2.根据权利要求1所述的M(R)-拟人参皂苷元DQ的制备方法，其特征在于本发明 人参皂苷包括人参总皂苷、人参茎叶总皂苷、人参果总皂苷、人参花总皂苷、西洋参茎叶总 皂苷、西洋参总皂苷、西洋参果总皂苷或西洋参花总皂苷。
3.根据权利要求1所述的M(R)-拟人参皂苷元DQ的制备方法，其特征在于步骤 (一)大孔吸附树脂包括AB-8、Dltll、D4ffi0。
4.根据权利要求1所述的M(R)-拟人参皂苷元DQ的制备方法，其特征在于氧化剂 包括H2O2、间氯过氧苯甲酸、高锰酸钾。
5.根据权利要求1所述的M(R)-拟人参皂苷元DQ的制备方法，其特征在于重结晶 溶剂包括甲醇、乙醇、乙酸乙酯。
6.24 (R)-拟人参皂苷元DQ在制备防治局部及全脑缺血所致的脑组织损伤的药物中 的应用。
7.24 (R)-拟人参皂苷元DQ在制备治疗短暂性脑缺血发作、脑血栓、脑梗塞的药物中 的应用。
全文摘要
本发明涉及一种24(R)-拟人参皂苷元DQ的制备方法及其药物用途，属于医药领域。取人参皂苷1.0kg，加水溶解，加于已处理好的大孔吸附树脂柱上，35%~55%乙醇洗脱至无皂苷反应，继而以60%~90%乙醇洗脱；洗脱液蒸干后，加入氢氧化钠水解，水解物调pH至中性，加于大孔吸附树脂柱AB-8上，脱盐后，用60%~90%乙醇洗脱；洗脱液蒸干后，氧化，重结晶，得产物。本发明在制备防治局部及全脑缺血所致的脑组织损伤、治疗短暂性脑缺血发作、脑血栓、脑梗塞的药物中的应用。
文档编号C07J17/00GK102050860SQ201010575130
公开日2011年5月11日 申请日期2010年12月7日 优先权日2010年12月7日
发明者任媛媛, 刘传贵, 刘金平, 李平亚, 杜秀娟, 胡军会 申请人:吉林圣亚医药科技有限公司