用于蛋白质、肽和其它分子的改进的f-18标记的方法和组合物的制作方法

专利名称：用于蛋白质、肽和其它分子的改进的f-18标记的方法和组合物的制作方法
用于蛋白质、肽和其它分子的改进的F-18标记的方法和组合物相关申请本申请要求2009年12月4提交的美国临时专利申请No. 61/266，773 ;2010年2月8日提交的61/302，280 ;2010年3月22日提交的61/316，125 ;2010年5月24日提交的61/347，486 ；2010 年 9 月 10 日提交的 61/381，720 和 2010 年 9 月 30 日提交的 61/388，268的优先权。将每个优先权申请通过弓I用整体并入本文。序列表本申请包括已通过EFS-Web以ASCII格式提交的并且通过引用整体并入本文的序列表。2010年12月2日创建的所述ASCII拷贝命名为MM31W07. txt并且大小为16,889个字节。 领域本发明涉及利用在例如PET或NMR体内成像中使用的18F或19F标记肽或其它分子的方法。优选地，18F或19F与铝或另一种金属通过螯合部分连接为缀合物[复合物]，所述螯合部分可共价连接至蛋白质、肽或其它分子。通过使用本文中描述的技术，高特异活性的18F或19F标记的分子可在30分钟或更短内制备并且适合用于成像技术而无需标记分子的HPLC纯化。标记可在适合于体内直接使用的盐水介质中存在。在替代实施方案中，可加入有机溶剂来提高标记的效率。标记分子在体内条件下是稳定的，尽管为了某些目的，例如试剂盒配制，可加入稳定剂例如抗坏血酸、海藻糖、山梨醇或甘露醇。在其它替代实施方案中，可用铝预先加载螯合部分，将其冻干以用于贮存，然后用18F或19F进行标记。背景正电子发射断层摄影(PET)已经成为诊断医学中最重要的功能成像模式之一，具有极高的灵敏度(fmol)、高分辨率(4-10mm)和可被适当定量的组织堆积(tissueaccretion) (Volkow 等，1988,1988, Am. J. Physiol. Imaging 3:142)。尽管[18F]2_ 脱氧-2-氟-D-葡萄糖([18F]FDG)是肿瘤学中最广泛使用的功能成像剂(Fletcher等，2008，J. Nucl. Med. 49:480),但在开发功能成像的其它标记化合物以补充或增进解剖成像方法中存在浓厚兴趣(Torigian等，2007，CA Cancer J. Clin. 57:206)，特别是目前使用的组合型PET/计算机断层摄影系统。因此，需要具有使放射正电子的放射性核素与各种生物学和医学目标分子缀合的简易方法。肽或其它小分子可以用正电子发射体18F、64CU、nC、66Ga、68Ga、76Br、94mTc、86Y和124I来标记。PET同位素的较低发射能量是期望的，以使正电子在产生被PET相机成像的两个511keV Y射线之前从靶位点移行的距离最短。许多发射正电子的同位素在其衰变链中还具有其它发射，例如Y射线、α粒子或β粒子。还期望具有是纯正电子发射体的PET同位素，以使任何剂量测定问题最小化。同位素的半衰期也是重要的，因为半衰期必须足够长以使同位素连接至靶向分子，分析产物，将其注入患者，并使得产物定位、从非靶组织清除并然后成像。如果半衰期太长，则比活度可能不能高至足以获得清晰图像所需的足够光子，而如果半衰期太短，则生产、商业分销和生物分布所需的时间可能不足。由于其较低的正电子发射能量，不存在侧向发射以及适当的半衰期，18F(i3+635keV 97%，t1/2110分钟)是最广泛使用的PET发射同位素之一。常规地,18F通过将其结合至碳原子而连接至化合物(Miller等,2008, Angew ChemInt Ed 47:8998-9033),但是也已经报道了连接至娃(Shirrmacher 等，2007, Bioconj Chem18:2085-89 ;Hohne 等，2008，Bioconj Chem 19:1871-79)和硼(Ting 等，2008，FluorineCheml29:349-58) ο结合至碳通常涉及多步合成，包括多个纯化步骤，这对具有110分钟半衰期的同位素而言是有问题的。目前用于肽的18F标记方法通常包括标记低比活度试剂，HPLC纯化试剂，然后缀合至目标肽。缀合物通常在缀合后再次纯化以获得期望的标记肽比活度。一个实例是 Poethko 等(J. Nucl. Med. 2004 ;45:892-902)的标记方法，其中4_[18F]氟苯甲醒被首先合成并纯化(Wilson等，J. Labeled Compounds andRadiopharm. 1990 ;XXVIII: 1189-1199)，然后缀合至肽。然后通过HPLC纯化肽缀合物以去
除用来促进缀合完全的过量肽。其它实例包括用以下物质标记琥珀酰[18F]氟代苯甲酸酯(SFB)(例如，Vaidyanathan 等，1992, Int. J. Rad. AppI. Instrum. B 19:275),其它酸基化合物(Tada 等，1989, Labeled Compd. Radiopharm. XXVII: 1317 ;Wester 等，1996, Nucl. Med.Biol. 23:365 ;Guhlke 等，1994，Nucl. MEd. Biol 21:819)或点击化学加合物(Li 等，2007，Bioconjugate Chem. 18:1987)。这些方法的总合成和配制时间范围为1-3小时,大部分时间用于标记肽的HPLC纯化以获得体内靶向所需的比活度。对于2小时的半衰期，使18F与肽连接所需的所有操作是很大的负担。这些方法也操作冗长并且需要使用专门设计来产生标记产物的设备和/或需要专门专业化学人员的努力。它们也不利于可常规用于临床环境的试剂盒配制。需要快速简单的18F标记靶向部分(例如蛋白质或肽)的方法，所述方法产生用于适合检测和/或成像的比活度和体内稳定性的靶向构建体，同时最大限度减少对专门设备或高度培训人员的需求并减少操作人员暴露于高水平放射。更优选地，需要制备用于预靶向技术的18F标记的靶向肽。还需要可提供进行这种新方法所需的组合物的预包装试剂盒。概述在各种实施方案中，本发明涉及关于用于PET或NMR成像的18F-或19F标记分子的组合物和方法。如本文中所论述，当本申请提及18F时，本领域技术人员将了解可利用18F、19F或另一种金属(例如68Ga)结合放射性核素。在示例性方法中，将18F与金属结合，并且将18F-金属复合物连接至肽或其它分子上的配体。如下文中所描述的，IIIA族的金属(铝、镓、铟和铊)适合于18F结合，尽管铝是优选的。也可以使用镥。金属结合配体优选为螯合剂例如N0TA、NETA，D0TA、DTPA和在下文更详细讨论的其它螯合基团。或者，可以首先使金属或分子连接，然后添加18F来结合所述金属。本领域技术人员将了解，实际上任何递送分子可连接至18F以用于成像目的，只要其含有可以被修饰而不影响递送分子与细胞或组织靶受体之间的配体-受体结合相互作用的可衍生化基团。尽管下文实施例主要关注18F-标记的肽部分，但是许多其它类型的递送分子，例如寡核苷酸、激素、生长因子、细胞因子、趋化因子、血管生成因子、抗血管生成因子、免疫调节剂、蛋白质、核酸、抗体、抗体片段、药物、白介素、干扰素、寡糖、多糖、脂质等可以被18F-标记并用于成像目的。下文实施例中描述的用于18F或其它试剂的预靶向递送的可靶向构建体肽包括但不限于 IMP 449, IMP 460, IMP 461, IMP 467, IMP469, IMP 470, IMP 471, IMP 479, IMP 485和MP 487，其包含螯合部分，所述螯合部分包括但不限于DTPA、ΝΟΤΑ、苄基-ΝΟΤΑ、NOTA的烷基或芳基衍生物、NODA-GA, C-NETA、琥珀酰-C-NETA和双-叔丁基-N0DA。在某些实施方案中，示例性18F-标记的肽可在使用双特异性或多特异性抗体或抗体片段的预靶向方法中用作可靶向构建体。在 这种情况下，抗体或片段将包括疾病或病症相关靶的一个或多个结合位点，所述靶例如肿瘤相关抗原或自身免疫疾病相关抗原或病原生物产生或展示的抗原，所述病原生物例如病毒、细菌、真菌或其它微生物。第二结合位点将特异性结合至可靶向构建体。使用双特异性或多特异性抗体进行预靶向的方法是本领域公知的(参见例如，美国专利No. 6，962，702，将其实施例部分通过引用并入本文)。类似地，结合可靶向构建体的抗体或其片段也是本领域公知的，例如与HSG(组胺琥珀酰甘氨酸)结合的679单克隆抗体或与In-DTPA结合的734抗体(参见，美国专利No. 7，429，381、7，563，439,7, 666，415和7，534，431，将所述每个专利的实施例部分通过引用并入本文)。一般在预靶向方法中，首先施用双特异性或多特异性抗体并允许结合至细胞或组织靶抗原。在未结合抗体从循环中清除适量时间之后，例如18F-标记的可靶向构建体施用给患者并结合至集中于靶细胞或组织的抗体，然后例如通过PET扫描进行成像。在替代实施方案中，直接结合受体的分子例如生长抑素、奥曲肽、铃蟾肽、叶酸或叶酸类似物、R⑶肽或其它已知的受体配体可被标记并且用于成像。受体靶向性试剂可包括例如ΤΑ138,—种整联蛋白α ν β 3受体的非肽拮抗剂(Liu等,2003, Bioconj. Chem. 14 1052-56)。使用金属螯合剂的受体靶向成像的其它方法在本领域是己知的并且可用于实施所要求保护的方法(参见例如，Andre等,2002, J. Inorg. Biochem. 88:1-6 ;Pearson等，1996，J. Med.，Chem. 39:1361-71)。可以被成像的疾病或病症的类型仅受用于靶向与疾病或病症相关的细胞或组织的适合递送分子的可用性限制。许多此类递送分子是己知的。例如，与患病组织或靶(例如癌症)结合的任何蛋白质或肽可以通过所公开的方法用18F标记并用于检测和/或成像。在某些实施方案中，此类蛋白或肽可以包括但不限于结合肿瘤相关抗原(TAA)的抗体或抗体片段。任何己知的TAA结合抗体或片段可以通过所描述的方法用18F标记并用于肿瘤的成像和/或检测，例如通过PET扫描或其它己知技术。某些替代实施方案包括使用点击化学反应将金属-18F-螯合部分连接至分子。优选地，所述点击化学包括靶向分子例如抗体或抗原结合抗体片段(包含激活部分例如炔、硝酮或叠氮基)与连接至一个或多个螯合基团并且包含对应的反应性部分例如叠氮化物、炔或硝酮的螯合部分或载体分子的反应。当靶向分子包含炔时，螯合部分或载体将包含叠氮化物、硝酮或类似的反应性部分。点击化学反应可在体外发生以形成高度稳定的标记的靶向分子，随后将所述分子给受试者施用。附图简述下列附图被包括以示例性说明本发明的特定实施方案并且不意味着限制所要求保护的主题的范围。图I. 18F标记试剂在携带肿瘤的裸小鼠中的生物分布，通过显微PET成像。每个左肋携带小的皮下LS174T肿瘤的3只裸小鼠在注射以下任一个之后的冠状切片(A) [18F]FDG、(B)用抗-CEA X 抗-HSGbsMAb 预靶向的 Al [18F] IMP449, (C)单独的 Al [18F] IMP449 (未用bsMAb预靶向)。在成像期结束时给出从动物取出的组织的生物分布数据，表示为每克百分比注射剂量(%ID/g)。缩写:B，骨髓;H，心脏；K,肾；Τ，肿瘤。图2.给至在上肋携带35-mg LS174T人结肠直肠癌异种移植物的裸小鼠的预靶向Alt18F] IMP 449的动态成像研究。上方三个图分别显示冠状、径向和横向截面，经120分钟的成像期在6个不同的5分钟间隔取自集中于肿瘤外周位置的身体区域。每个剖视图中左侧第一个图像显示十字线交叉处肿瘤的定位，由箭头突出显示。动物在成像期间向其右侧部分倾斜。下方2个图显示其它冠状和径向截面，其集中于冠状截面更前方的平面以突出显示在肝和肠中的分布，而径向视图在身体中更中心地交叉。缩写Cor，冠状；FA，前臂；H，心脏；K，肾；Lv，肝；Sag，径向；Tr，横向；UB，膀胱。图3. 18F-标记的MP 468铃蟾肽类似物的体内组织分布。
图4.在注射后2h，AR42J肿瘤携带小鼠(n=5)中18F-IMP 466和68Ga-IMP 466的生物分布对比。作为对照，单独组的小鼠(n=5)接受过量未标记的奥曲肽以证明受体特异性。图5.在注射后2h，颈部具有s. c. AR42J肿瘤的小鼠中18F_MP466和68Ga-MP 466的PET/CT扫描的冠状切片。清晰可见在肿瘤和肾中的累积。图6.在静脉内注射68Ga-MP 288后I小时，具有皮下LS174T和SK-RC52肿瘤的BALB/c 裸小鼠中 6. Onmol 125I_TF2 (O. 37MBq)和 O. 25nmol 68Ga-IMP 288(5MBq)的生物分布。值以平均值土标准偏差给出(n=5)。图7.在用6. Onmol TF2预靶向之后静脉内注射后I小时，5MBqFDG和5MBq68Ga-IMP288 (O. 25nmol)的生物分布。值以平均值土标准偏差给出(n=5)。图8.在右后腿具有皮下LS174T肿瘤(O. Ig)(亮箭头)并且在左大腿肌肉具有炎症(暗箭头)的BALB/c裸小鼠的PET/CT图像，所述小鼠接受了 5MBq 18F-FDG并且在一天后以 16 小时的间隔接受 6. OnmoITF2 和 5MBq 68Ga-IMP 288 (O. 25nmol)。动物在 18F-FDG 和68Ga-IMP288注射后一小时被成像。图显示FDG-PET扫描的3D体积透视(A)、肿瘤区域的横截面⑶，以及预靶向免疫PET扫描的3D体积透视(C)、肿瘤区域的横截面⑶。图9.在之前16小时6. Onmol TF2，静脉内注射后I小时，O. 25nmol Al18F-IMP449 (5MBq)的生物分布，没有预靶向的A118F_MP449的生物分布，或Al [18F]的生物分布。值以平均值土标准偏差给出。

图10.以16小时的间隔静脉内接受6. Onmol TF2和O. 25nmoIAl 18F-IMP449 (5MBq)的、在右侧具有皮下LS174T肿瘤(O. Ig)(箭头)的BALB/c裸小鼠的静态PET/CT成像研究。动物在注射Al18F-MP449之后I小时被成像。图显示3D体积透视(A)后视图，以及在肿瘤区域的横截面(B)冠状、(C)径向。
11. IMP 479 (SEQ ID NO: 35)的结构。图 12. IMP 485 (SEQ ID NO: 36)的结构。图13. IMP 487 (SEQ ID NO: 37)的结构。图14. 二-叔丁基-N0DA-MPAA 的合成。图15. NOTA的马来酰亚胺缀合物的合成。
详细描述提供下述定义以帮助理解本文公开内容。未明确定义的术语根据其明显且普通的含义使用。本文使用的术语“一(a)”或“一个(an)”可以表示一个或超过一个的项目。本文使用的术语“和”和“或”可以用来表示合取或析取。即，除非另有说明，否则两个术语都应该被理解为等价于“和/或”。本文使用的“约”表示在数字的正或负10%之内。例如，“约100”指90和110之
间的任何数字。本文使用的“肽”指长度为2至100个氨基酸残基、更优选长度为2至10个、更优
选在2至6个氨基酸的天然存在或非天然存在氨基酸的任何序列。“氨基酸”可以是L-氨基酸、D-氨基酸、氨基酸类似物、氨基酸衍生物或氨基酸模拟物。本文使用的术语“病原休”包括但不限于真菌、病毒、寄生虫和细菌，包括但不限于人免疫缺陷病毒(HIV)、疱疹病毒、巨细胞病毒、狂犬病毒、流感病毒、乙型肝炎病毒、仙台病毒、猫白血病病毒、呼肠孤病毒、脊髓灰质炎病毒、人血清细小样病毒、猿猴病毒40、呼吸道合胞病毒、小鼠乳腺瘤病毒、水痘-带状疱疹病毒、登革病毒、风疹病毒、麻疫病毒、腺病毒、人T细胞白血病病毒、埃-巴二氏病毒、鼠白血病病毒、腿腺炎病毒、水疱性口炎病毒、辛德毕斯病毒、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒、疣病毒、蓝舌病毒、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、嗜肺军团菌(Legionella pneumophilia)、酿胺链球菌(Streptococcus pyogenes)、大肠杆菌(Escherichia coli)、淋病奈瑟菌(Neisseriagonorrhoeae)、脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis)、月市炎球菌属(Pneumococcus)、乙型流感嗜血杆菌(Hemophilis influenzaeB)、苍白密螺旋体(Treponema pallidum)、莱姆病螺旋体(Lyme disease spirochetes)、绿胺假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae)、流产布鲁氏杆菌(Brucella abortus)、结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)和破伤风梭菌(Chlostridium tetani)。本文使用的“辐射分解保护剂”指可添加至18F-标记的复合物或分子以减小18F-标记的复合物或分子被辐射分解的分解速率的任何分子、化合物或组合物。可以使用任何己知的辐射分解保护剂，包括但不限于抗坏血酸。18F标记技术用18F标记分子的各种技术是己知的。表I列出了几种较普遍报道的氟化程序的性质。通过碳标记的肽经常包括通过亲核取代18F-结合至辅基，通常以2或3个步骤，其中所述辅基被标记并纯化，连接至化合物，然后再次纯化。该一般方法已经用于经酰胺键、醛和“点击化学”连接辅基(Marik 等，2006，Bioconjug Chem 17:1017-21 ;Poethko 等，2004，J Nucl Med 45 892-902 ;Li 等，2007，Bioconjug Chem 18:989-93)。最常见的酰胺键形成试剂是4-18F氟代苯甲酸N-琥珀酰亚胺酯(18F-SFB),但是已经测试了许多其它基团(Marik等，2006)。在一些情况下，例如当使用18F-标记的活性酯酰胺形成基团时，可能有必要在偶联反应期间保护肽上的某些基团，之后将它们裂解。该18F-SFB试剂的合成以及随后与肽的 缀合需要许多合成步骤并耗费约2-3小时。Poethko等(2004)开发了一种更简单、更有效的18F-肽标记方法，其中4_18F_氟代苯甲醒试剂通过月亏键合在约75-90min内缀合至肽,包括离心干燥(dry-down)步骤。更新的“点击化学”方法在铜催化剂存在下用乙炔或叠氮化物将18F-标记分子连接至肽(Li等，2007 ;Glaser 和 Arstad，2007，Bioconjug Chem 18:989-93)。叠氮化物与乙炔基团之间的反应形成三唑连接，该连接是非常稳定的并且在肽上非常有效地形成而无需保护基。使用离心干燥步骤，点击化学在约75-90分钟内以良好收率( 50%)产生18F-标记的肽。表I.选择的18F-肽标记方法的概述
权利要求
1.ー种用18F或19F标记分子的方法，所述方法包括将18F或19F与IIIA族金属的复合物连接至螯合部分，其中将所述螯合部分缀合至所述分子或将所述螯合部分随后连接至所述分子。
2.权利要求I所述的方法，其中将所述螯合部分缀合至所述分子。
3.权利要求I所述的方法，其中将所述螯合部分随后连接至所述分子并且所述方法还包括将所述螯合部分连接至所述分子。
4.权利要求I所述的方法，其中所述分子为蛋白质或肽。
5.权利要求I所述的方法，其中所述分子为选自抗体、单克隆抗体、双特异性抗体、多特异性抗体、抗体融合蛋白和抗原结合抗体片段的靶向分子。
6.权利要求5所述的方法，其中将所述螯合部分缀合至可靶向构建体。
7.权利要求6所述的方法，其还包括； c)给受试者施用所述靶向分子； d)允许充足的时间以便所述靶向分子结合靶抗原；和 e)随后给所述受试者施用所述可靶向构建体，其中所述可靶向构建体结合所述靶向分子。
8.权利要求I所述的方法，其中所述IIIA族金属选自铝、镓、铟、镥和铊。
9.权利要求I所述的方法，其中所述IIIA族金属为铝。
10.权利要求I所述的方法，其中所述螯合部分选自DOTA、TETA、NOTA、NODA、NODA衍生物、(叔丁基)2NODA、NODA-MPAA, ΝΕΤΑ、C-NETA, L-NETA, S-NETA 和 ΝΟΤΑ 衍生物。
11.权利要求6所述的方法，其中所述可靶向构建体选自ΜΡ448、IMP449、IMP 460、IMP 461、頂P 462、頂P 465、頂P 466、頂P 467、頂P 468、頂P 469、頂P 470, IMP 471、頂P473、IMP 479、IMP 485、IMP 486 和 MP 487。
12.权利要求I所述的方法，其中所述18F或19F标记分子在所述方法开始后不到30分钟内产生。
13.权利要求7所述的方法，其还包括使用PET扫描以成像所述受试者中所述18F标记分子的分布。
14.权利要求I所述的方法，其中将所述18F或19F复合物在含水介质中连接至所述螯合部分。
15.权利要求I所述的方法，其中向所述介质中添加有机溶剂以将18F或19F复合物连接至螯合部分。
16.权利要求I所述的方法，其中通过微波辐射将所述18F或19F复合物连接至所述螯合部分。
17.权利要求I所述的方法，其中通过加热将所述18F或19F复合物连接至所述螯合部分。
18.权利要求5所述的方法，其中通过停靠和锁定技术制备所述靶向分子。
19.权利要求18所述的方法，其中所述靶向分子为TF2或TF10。
20.权利要求3所述的方法，其中通过点击化学反应将螯合部分连接至所述分子。
21.权利要求3所述的方法，其中通过马来酰亚胺-巯基反应将所述螯合部分连接至所述分子。
22.权利要求6所述的方法，其中放射性标记的可靶向构建体的收率为至少85%。
23.权利要求6所述的方法，其中所述可靶向构建体的比放射性活度为至少115GBq/μ mol ο
24.权利要求6所述的方法，其中在放射性标记之前冻干所述可靶向构建体以用于贮存。
25.权利要求24所述的方法，其中将所述可靶向构建体在选自山梨醇、甘露醇和海藻糖的填充剂中冻干。
26.权利要求I所述的方法，其中将所述螯合部分在3.8至4. 5的pH下连接至18F或19F复合物。
27.权利要求7所述的方法，其中所述靶向分子结合患病细胞或病原体并且还包括通过18F标记分子的PET成像或19F标记分子的NMR成像来检测、诊断或成像所述疾病或病原体的存在。
28.权利要求27所述的方法，其中所述疾病选自癌症、心血管疾病、传染性疾病、炎性疾病、自身免疫疾病、免疫功能障碍疾病、移植物抗宿主病、器官移植排斥和神经疾病。
29.权利要求28所述的方法，其中所述靶向分子结合抗原，所述抗原选自碳酸酐酶IX、CCCL19、CCCL21、CSAp、CD1、CDla、CD2、CD3、CD4、CD5、CD8、CDl 1A、CD14、CD15、CD16、CD18、CD19、IGF-1R、CD20、CD21、CD22、CD23、CD25、CD29、CD30、CD32b、CD33、CD37、CD38、CD40、CD40L、CD45、CD46、CD52、CD54、CD55、CD59、CD64、CD66a_e、CD67、CD70、CD74、CD79a、CD80、CD83、CD95、CD126、CD133、CD138、CD147、CD154、CXCR4、CXCR7、CXCL12、HIF-1a 、AFP、PSMA、CEACAM5、CEACAM-6、c-met、B7、纤连蛋白的 ED-B、因子 H、FHL-U Flt_3、叶酸受体、GROB,HMGB-1、缺氧诱导因子(HIF)、HMl. 24、胰岛素样生长因子-1 (ILGF-I)、IFNi、IFN-a、IFN-β、IL-2、IL-4R、IL-6R、IL-13R、IL-15R、IL-17R、IL-18R、IL-6、IL-8、IL-12、IL-15、IL-17、IL-18、IL-25、IP-10、MAGE、mCRP、MCP-1、MIP-1A、MIP-1B、MIF、MUCl、MUC2、MUC3、MUC4、MUC5、NCA-95、NCA-90、la、HMl. 24、EGP-1、EGP-2、HLA-DR、生腱蛋白、Le (y)、RANTES,T101、TAC、Tn 抗原、Thomson-Friedenreich 抗原、肿瘤坏死抗原、TNF- a、TRAIL 受体(Rl 和R2)、VEGFR、EGFR、PIGF、补体因子 C3、C3a、C3b、C5a、C5 和癌基因产物。
30.权利要求28所述的方法，其中所述传染性疾病与病原体相关，所述病原体选自真菌、病毒、寄生虫、细菌、人免疫缺陷病毒(HIV)、疱疹病毒、巨细胞病毒、狂犬病毒、流感病毒、こ型肝炎病毒、仙台病毒、猫白血病病毒、呼肠孤病毒、脊髄灰质炎病毒、人血清细小样病毒、猿猴病毒40、呼吸道合胞病毒、小鼠乳腺瘤病毒、水痘-帯状疱疹病毒、登革病毒、风疫病毒、麻疫病毒、腺病毒、人T细胞白血病病毒、埃-巴ニ氏病毒、鼠白血病病毒、腿腺炎病毒、水疱性口炎病毒、辛德毕斯病毒、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒、疣病毒和蓝舌病毒、无乳链球菌、嗜肺军团菌、酿脓链球菌、大肠杆菌、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、肺炎球菌属、こ型流感嗜血杆菌、苍白密螺旋体、莱姆病螺旋体、绿脓假单胞菌、麻风分枝杆菌、流产杆菌、结核分枝杆菌和破伤风梭菌。
31.权利要求28所述的方法，其中所述自身免疫疾病选自免疫介导的血小板减少症、急性特发性血小板減少性紫癜、慢性特发性血小板減少性紫癜、皮肌炎、斯耶格伦氏综合征、多发性硬化、西登哈姆舞蹈病、重症肌无力、系统性红斑狼疮、狼疮肾炎、风湿热、多腺性综合征、大疱性类天疱疮、糖尿病、亨-舍ニ氏紫癜、链球菌感染后肾炎、结节性红斑、高安动脉炎、艾迪生病、类风湿性关节炎、肉瘤样病、溃疡性结肠炎、多形性红斑、IgA肾病、结节性多动脉炎、強直性脊椎炎、古德帕斯丘综合征、闭塞性血栓性脉管炎、原发性胆汁性肝硬变、桥本氏甲状腺炎、甲状腺毒症、硬皮病、慢性活动型肝炎、多肌炎/皮肌炎、多软骨炎、寻常天疱疮、韦格納氏肉芽肿、膜性肾病、肌萎缩侧索硬化、脊髓痨、巨细胞动脉炎/多肌痛、恶性贫血、急进性肾小球肾炎和纤维化肺泡炎。
32.权利要求27所述的方法，其中所述靶向分子为选自hRl(抗-IGF-1R)、hPAM4 (抗-胰腺癌粘蛋白)、hA20 (抗-CD20)、hA19 (抗-CD19)、hIMMU31 (抗-AFP)、hLLl (抗-CD74)、hLL2(抗-CD22)、hMu_9 (抗-C SAp)、hL243 (抗-HLA-DR)、hMN-14 (抗-CEACAM5)、hMN-15 (抗-CEACAM6)、hRS7 (抗-EGP-1)和 hMN_3 (抗-CEACAM6)的抗体。
33.一种可靶向构建体，其包含连接至金属_18F、金属-19F或68Ga的螯合部分。
34.权利要求33所述的可靶向构建体，其中所述可靶向构建体选自IMP448、IMP 449、IMP 460、IMP 461、IMP 462、IMP 465、IMP466, IMP 467、IMP 468、IMP 469、IMP 470、IMP471、頂P 473、頂P 479、頂P 485、頂P 486 和 MP 487。
35.权利要求33所述的可靶向构建体，其中所述螯合部分选自DOTA、TETA、NOTA、NODA、NODA 衍生物、(叔丁基)2N0DA、N0DA-MPAA, ΝΕΤΑ、C-NETA, L-NETA, S-NETA 和 ΝΟΤΑ 衍生物。
36.权利要求32所述的可靶向构建体，其中所述螯合部分为NOTA或NODA的烷基或芳基衍生物。
37.一种组合物，其包含N0DA-MPAA。
38.权利要求37的组合物，其中将所述N0DA-MPAA缀合至分子。
39.权利要求37的组合物，其中将所述N0DA-MPAA与金属18F复合。
40.权利要求37的组合物，其中将所述N0DA-MPAA与Al-18F复合。
41.权利要求37的组合物，其中将所述N0DA-MPAA与68Ga复合。
42.ー种利用18F或19F标记分子的方法，其包括； a)在含水介质中将IIIA族金属连接至螯合部分以形成金属-螯合部分复合物，其中将所述螯合部分缀合至所述分子或随后将所述螯合部分连接至所述分子；和 b)将18F或19F添加至金属-螯合部分复合物，其中所述18F或19F结合所述金属。
43.权利要求42的方法，其中所述螯合部分为N0DA-MPAA。
全文摘要
本申请公开了合成和使用用于PET或MRI成像的68Ga、18F或19F标记分子的组合物和方法。优选地，通过与IIIA族金属形成复合物，且将该复合物结合至螯合部分来将18F或19F缀合至靶向分子，所述螯合部分可直接或间接连接至靶向分子。在其它实施方案中，68Ga、18F或19F标记的部分可包含与双特异性抗体组合使用以靶向疾病相关抗原的可靶向构建体。在更优选实施方案中，螯合部分或可靶向构建体可缀合至靶向分子例如抗体或抗体片段。
文档编号C07K1/13GK102666567SQ201080052555
公开日2012年9月12日 申请日期2010年12月2日 优先权日2009年12月4日
发明者C·A·德索扎, D·M·戈登堡, W·J·麦克布赖德 申请人:免疫医疗公司