专利名称：一种丹参酮iia的制备方法
技术领域：
本发明具体的涉及ー种丹參酮IIA的制备方法。
背景技术：
丹參是我国传统医药中最常用药物之一，来源于唇型科鼠尾草属植物丹參(Salvia miltiorrhiza Bunge)的干燥根及根莖。丹參最早记载于《神农本草经》，被列为上品药物，主要用于心脑血管疾病的治疗。2005年《药典》(中药部)记载，丹參具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦的功效。丹參的活性成分分为脂溶性和水溶性两部分。丹參水溶性部分是以丹酚酸B为代表的酚酸类化合物，而丹參的脂溶性活性成分为丹參酮，是萜菲醌类化合物，其化学成分主要有丹參酮I，丹參酮II A，隐丹參酮等，它们都是ニ萜醌类的四环化合物，在丹參药材和其 制剂中，丹參酮II A，隐丹參酮的含量最高。《药典》中規定，丹參中丹參酮IIA含量不少于O. 2%，丹酚酸B含量不少于3%。目前市售的丹參药物根据给药方式可分为两大类(I)丹參ロ服药物主要有丹參片、复方丹參片和复方丹參滴丸几种；(2)丹參注射药物主要有丹參注射液、丹參酮IIA磺酸钠注射液、丹參多酚酸盐注射液，其中后两者有效成分明确，质量控制严格，是市场上的质量较高的丹參注射液。我国丹參产量巨大、价格低廉，但是丹參脂溶性活性成分含量较低，而其药品价格较高。提高其主要活性成分丹參酮II A含量，对于中药丹參的进ー步开发利用，具有重要的意义。孟召全等人发表的“丹參酮II A的分离纯化”(孟召全，陈鸿楠，钱捷等.丹參酮IIA的分离纯化[J].中国实验方剂学杂志.2010. 16(2) :6_7)中采用大孔吸附树脂HPD-100提纯，提纯后纯度达到42%，收率为80%。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是现有的丹參酮II A的提取分离方法中，收率和纯度都很低，且无法实现エ业化的缺陷，而提供了ー种丹參酮II A的制备方法。本发明的制备方法不仅产物收率高，且可以达到很高的产物纯度。本发明的方法可以进行放大生产，具有一定的应用价值。本发明人经过大量研究，发现采用一种特别选择的大孔反相吸附树脂对丹參脂溶性成分进行分离，可得到很高收率的丹參酮IIA。本发明人还进ー步优化了吸附洗脱条件，使得丹參酮IIA的收率大于85%，且纯度大于70%，并且可通过两次结晶使得丹參酮IIA的纯度达到98%以上，收率大于60%。因此，本发明涉及ー种丹參酮IIA的制备方法，其包含下列步骤将丹參脂溶性成分用大孔反相吸附树脂进行柱层析分离，即可；其中，所述的大孔反相吸附树脂的參数如下粒径为50 100 μ m，孔径为90 110人，介质为聚苯こ烯-ニこ烯苯。所述的孔径较佳的为100 A。所述的大孔反相吸附树脂更佳的为深圳纳微科技公司生产的大孔反相吸附脂，型号为匪PS100，其粒径为50-100 μ m，孔径为100人，树脂骨架为聚苯こ烯-ニこ烯苯。所述的大孔反相吸附树脂在使用前，较佳的先进行预处理，预处理的方法可为本领域常规的预处理该类树脂的方法。优选的方法如下用酸水溶液冲洗树脂，再用去离子水洗到中性，即可。其中，所述的酸水溶液中的酸可为无机酸，如盐酸，其摩尔浓度较佳的为O. 5 2. 5N，优选IN。酸水溶液较佳的为酸的丙酮水溶液，丙酮的体积浓度较佳的为60 90%,优选70%。酸水溶液的用量较佳的为2 5个柱体积，优选2 3个柱体积。更佳的预处理步骤如下将含IN盐酸的70%丙酮水溶液冲洗树脂，用量为3BV，再用去离子水洗到中性。其中，所述的丹參脂溶性成分可由本领域常规的提取丹參脂溶性成分的方法制得，较佳的包含下列步骤将丹參醇提物混于pH为5 8的水中，过滤，得滤渣，即可。其中，所述的PH值较佳的为6 7。过滤前，较佳的还进行振荡混合的步骤。其中，所述的丹參醇提物可由本领域常规的制备丹參醇提物的方法制得，较佳的 包含下列步骤将粉碎后的丹參药材用こ醇水溶液浸泡，然后离心，取上清液，浓缩，即可。其中，所述的粉碎后的丹參药材的粒径较佳的为20 50目，更佳的为20目。所述的こ醇水溶液与粉碎后的丹參药材的体积质量比较佳的为5 10L/Kg，更佳的为6 8L/Kg。所述的こ醇水溶液的体积浓度较佳的为70% 100%，优选90%以上。所述的浸泡的温度较佳的为60 80°C。所述的浸泡的时间较佳的为O. 5 2小时，更佳的为I小时。所述的浸泡和离心的次数较佳的为I 3次，更佳的为2次。所述的浓缩较佳的为浓缩至干，可通过旋转蒸发仪在35 50°C (优选40°C )的温度下蒸干。所述的丹參醇提物的最佳的制备方法如下将丹參干药材粉碎过20目筛，用70 100 %こ醇的水溶液在60 800C下浸泡提取Ih后离心取上清液，其中所述的こ醇的水溶液与丹參干药材的体积质量比为6 8L/Kg，此操作重复两次，合并两次上清液，在40°C下旋蒸至干，得到丹參醇提物。本发明中，所述的用大孔反相吸附树脂进行柱层析分离的方法和条件均可为本领域常规的用大孔反相吸附树脂进行柱层析分离的方法和条件，本发明人经过大量研究，摸索出以下特别优选的步骤和条件以体积浓度60% 95%的こ醇水溶液为洗脱剂，将丹參脂溶性成分用大孔反相吸附树脂进行柱层析分离，即可。大孔反相吸附树脂的种类同前所述。较佳的，在所述的柱层析分离中，收集丹參酮IIA的纯度大于70%的洗脱液，SP可。其中，所述的柱层析分离的步骤较佳的如下将丹參脂溶性成分上柱后，先用体积浓度60 % 70 %的こ醇水溶液进行洗脱除杂，再用体积浓度90 % 95 %的こ醇水溶液进行洗脱，收集丹參酮IIA的纯度大于70%的洗脱液，即可。其中，所述的体积浓度为60% 70%的こ醇水溶液的用量较佳的为2-4个柱体积，优选3个柱体积，体积浓度90% 95%的こ醇水溶液的用量较佳的为2 4个柱体积，优选3个柱体积。本发明中，丹參酮IIA的纯度的检测方法可为本领域常规的检测方法，如通过HPLC或GC等方法，以丹參酮IIA纯品为对照进行检测。
本发明中，在将丹參脂溶性成分用大孔反相吸附树脂进行柱层析分离之前，较佳的，先将丹參脂溶性成分溶于体积浓度60% 70%的こ醇水溶液中，得丹參脂溶性成分的こ醇溶液，再上柱进行柱层析分离。本发明中，所述的大孔反相吸附树脂的质量(或体积)可按本领域常规知识进行选择，较佳的，前述的粉碎后的丹參药材与树脂的体积比为50 200g/L，更佳的为100 150g/L。树脂柱的规格可为本领域常规规格，较佳的为高径比为5 : I 3 : 1，优选4 I。本发明中，在大孔反相吸附树脂柱层析分离结束后，较佳的还包含下列步骤将柱层析分离所得物质进行本领域常规的结晶步骤，得丹參酮IIA晶体，即可。其中，所述的结晶步骤较佳的包含下列步骤(I)将柱层析分离所得的洗脱液浓缩，得浓缩物，用丙酮溶解，向所得丙酮溶液中滴加蒸馏水至溶液出现浑浊，将所得浑浊液于2-8°C (优选4°C)条件下静置24 72小时 (最佳48小时)，得丹參丽IIA粗晶体；(2)将步骤(I)所得粗晶体用蒸馏水洗，再用丙酮溶解后加入蒸馏水，至溶液出现浑浊，将所得浑浊液于2-8°C (优选4°C )条件下静置24 72小时(最佳48小吋)，得隐丹參酮IIA晶体。步骤(I)中，所述的浓缩为常规操作，可以是浓缩至干。丙酮的体积较佳的为至浓缩物溶解即可，更佳的，其体积为所述浓缩物体积的2 4倍(优选2倍)。根据本领域常识，在静置结晶后，可通过抽滤得到丹參酮IIA粗晶体。步骤(2)中，所述的蒸馏水洗的次数可为I 3次，毎次用蒸馏水洗涤的用量与粗晶体的体积质量比较佳的为10 20L/kg。步骤(2)中所述丙酮的体积较佳的为至粗晶体溶解即可，其体积更佳的为所述粗晶体体积的2 4倍(优选2倍)。本发明中，在上述结晶步骤之后，得到的晶体的纯度大于98 %，收率大于60 %(HPLC 检测)。本发明中，最佳的，所述的丹參酮IIA的制备方法包含下列步骤I、取一定量丹參干药材粉碎过20目筛，用体积浓度70-100%こ醇的水溶液在60-80°C下浸泡提取Ih后离心取上清液，所述的こ醇水溶液与粉碎过筛后的丹參药材的体积质量比为6-8L/Kg，此操作重复两次，合并两次上清液，在40°C下旋蒸至干，得到丹參醇提物。2、用pH7_8的水溶解丹參醇提物，振荡混合后过滤，滤渣即为丹參脂溶性成分
3、用体积浓度60-70 %的こ醇溶解丹參脂溶性成分，上大孔反相吸附树脂NMPS-100吸附，用3倍柱体积的60-70%こ醇除杂，用90-95%的こ醇洗脱树脂，分步收集，将分步收集的样品HPLC分析，将纯度达到70%以上的样品混合。4、将混合液浓缩至干，以2倍样品体积丙酮溶解，向丙酮溶液中慢慢滴加蒸馏水至溶液出现浑池，将浑浊液放置于4°C冰箱静置过夜结晶，得到丹參酮IIA粗晶体，抽滤，蒸馏水洗粗晶体一次，再用2倍样品体积丙酮溶解后加入少量蒸馏水，于4°C冰箱中静置过夜结晶，得到丹參酮IIA晶体，HPLC检测其纯度大于98%。本发明中，上述各优选技术特征可在不违背本领域常识的前提下任意组合，即得本发明的各较佳实例。除特殊说明外，本发明所用的试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于(I)本发明的制备方法中，得到的丹參酮IIA不仅收率较高，且可以达到很高的纯度。(2)本发明的方法可以进行放大生产，具有一定的应用价值。
具体实施例方式下面用实施例来进ー步说明本发明，但本发明并不受其限制。下述各实施例中丹參来源丹參干药材(产地河南)HPLC条件如下甲醇水=75 25进样量10 μ I 柱温 35°C流速 O. 8ml/min停止时间20min检测波长UV 270nmAgilent Eclipsepius C18 柱 5 μ m 4. 6X 250nm实施例中的BV表示柱体积，为本领域常规单位。以下各实施例中，原料丹參药材中的丹參酮II A含量均按本领域常规检测方法进行測定，丙酮水溶液和こ醇水溶液的浓度均为体积浓度。实施例I取IOOg经粉碎过20目筛的丹參药材粉末(丹參酮IIA含量为O. 53% (重量百分比)，加600mL含70%こ醇的水溶液在60°C下浸泡提取Ih后离心，取上清液，此操作重复两次，合并两次上清液，在40°C下旋蒸除去こ醇，得到丹參醇提物浓缩液。用PH7的水溶解丹參醇提物，振荡混合后过滤，滤渣即为丹參脂溶性成分。用70%的こ醇溶解丹參脂溶性成分。取预处理后的大孔反相吸附树脂匪PS-1001L (树脂预处理步骤采用含IN盐酸的70%丙酮水溶液冲洗树脂，用量约为3BV，再用去离子水洗到中性)装于Φ80Χ350πιπι层析柱中，将丹參脂溶性成分こ醇溶液上NMPS-100。上柱后先用5BV含60%こ醇的水溶液除杂，再用4BV含90%こ醇将丹參酮II A集中洗下，分步收集洗脱液，并通过HPLC检测，将丹參酮II A纯度大于70%的洗脱液混合。混合液的纯度为75.6%，此步的收率为86. 5%。将混合液浓缩至干，以2倍样品体积丙酮溶解，向丙酮溶液中慢慢滴加蒸馏水至溶液出现浑浊，将浑浊液放置于4°C冰箱静置过夜结晶，得到丹參酮II A粗晶体，抽滤，蒸馏水洗粗晶体一次，再用2倍样品体积丙酮溶解后加入少量蒸馏水，于4°C冰箱中静置过夜结晶，得到丹參酮II A晶体，HPLC检测其纯度大于98. 2%，结晶质量为323. 8mg，收率
61.1%。
实施例2取IOOg经粉碎过20目筛的丹參药材粉末(丹參酮IIA含量为O. 53% (重量百分比)，加700mL含80%こ醇的水溶液在70°C下浸泡提取Ih后离心，取上清液，此操作重复两次，合并两次上清液，在40°C下旋蒸除去こ醇，得到丹參醇提物浓缩液。用pH7的水溶解丹參醇提物，振荡混合后过滤，滤渣即为丹參脂溶性成分。用60%的こ醇溶解丹參脂溶性成分。
取预处理后的大孔反相吸附树脂匪PS-1001L (树脂预处理步骤采用含IN盐酸的70%丙酮水溶液冲洗树脂，用量约为3BV，再用去离子水洗到中性)装于Φ80Χ350πιπι层析柱中，将丹參脂溶性成分こ醇溶液上NMPS-100。上柱后先用5BV含60%こ醇的水溶液除杂，再用4BV含90%こ醇将丹參酮II A集中洗下，分步收集洗脱液，并通过HPLC检测，将丹參酮II A纯度大于70%的洗脱液混合。混合液的纯度为75. 2%，此步的收率为86. 1%。将混合液浓缩至干，以2倍样品体积丙酮溶解，向丙酮溶液中慢慢滴加蒸馏水至溶液出现浑浊，将浑浊液放置于4°C冰箱静置过夜结晶，得到丹參酮II A粗晶体，抽滤，蒸馏水洗粗晶体一次，再用2倍样品体积丙酮溶解后加入少量蒸馏水，于4°C冰箱中静置过夜结晶，得到丹參酮II A晶体，HPLC检测其纯度大于98. I %，结晶质量为320. lmg，收率60. 4%。实施例3取IOOg经粉碎过20目筛的丹參药材粉末(丹參酮IIA含量为O. 53% (重量百分比)，加700mL含90%こ醇的水溶液在80°C下浸泡提取Ih后离心,取上清液,此操作重复 两次，合并两次上清液，在40°C下旋蒸除去こ醇，得到丹參醇提物浓缩液。用PH7的水溶解丹參醇提物，振荡混合后过滤，滤渣即为丹參脂溶性成分。用70%的こ醇溶解丹參脂溶性成分。取预处理后的大孔反相吸附树脂匪PS-1001L (树脂预处理步骤采用含IN盐酸的70%丙酮水溶液冲洗树脂，用量约为3BV，再用去离子水洗到中性)装于Φ80Χ350πιπι层析柱中，将丹參脂溶性成分こ醇溶液上NMPS-100。上柱后先用5BV含60%こ醇的水溶液除杂，再用4BV含95%こ醇将丹參酮II A集中洗下，分步收集洗脱液，并通过HPLC检测，将丹參酮II A纯度大于70%的洗脱液混合。混合液的纯度为76. 4%，此步的收率为86. 9%。将混合液浓缩至干，以2倍样品体积丙酮溶解，向丙酮溶液中慢慢滴加蒸馏水至溶液出现浑浊，将浑浊液放置于4°C冰箱静置过夜结晶，得到丹參酮II A粗晶体，抽滤，蒸馏水洗粗晶体一次，再用2倍样品体积丙酮溶解后加入少量蒸馏水，于4°C冰箱中静置过夜结晶，得到丹參酮II A晶体，HPLC检测其纯度大于98. 5%，结晶质量为330. 2mg，收率
62.3%。实施例4取IOOg经粉碎过20目筛的丹參药材粉末(丹參酮II A含量为O. 53% (重量百分比)，加800mL含100%こ醇的水溶液在70°C下浸泡提取Ih后离心，取上清液，此操作重复两次，合并两次上清液，在40°C下旋蒸除去こ醇，得到丹參醇提物浓缩液。用PH7的水溶解丹參醇提物，振荡混合后过滤，滤渣即为丹參脂溶性成分。用70%的こ醇溶解丹參脂溶性成分。取预处理后的大孔反相吸附树脂匪PS-1001L (树脂预处理步骤采用含IN盐酸的70%丙酮水溶液冲洗树脂，用量约为3BV，再用去离子水洗到中性)装于Φ80Χ350πιπι层析柱中，将丹參脂溶性成分こ醇溶液上NMPS-100。上柱后先用5BV含60%こ醇的水溶液除杂，再用4BV含95%こ醇将丹參酮II A集中洗下，分步收集洗脱液，并通过HPLC检测，将丹參酮II A纯度大于70%的洗脱液混合。混合液的纯度为77. 3%，此步的收率为87.3%。将混合液浓缩至干，以2倍样品体积丙酮溶解，向丙酮溶液中慢慢滴加蒸馏水至溶液出现浑浊，将浑浊液放置于4°C冰箱静置过夜结晶，得到丹參酮II A粗晶体，抽滤，蒸馏水洗粗晶体一次，再用2倍样品体积丙酮溶解后加入少量蒸馏水，于4°C冰箱中静置过夜结晶，得到丹參酮II A晶体，HPLC检测其纯度大于98.9%，结晶质量为333. 9mg，收率
63.0%。实施例5取IOOg经粉碎过20目筛的丹參药材粉末(丹參酮II A含量为O. 53% (重量百分比)，加800mL含100%こ醇的水溶液在70°C下浸泡提取Ih后离心，取上清液，此操作重复两次，合并两次上清液，在40°C下旋蒸除去こ醇，得到丹參醇提物浓缩液。用PH8的水溶解丹參醇提物，振荡混合后过滤，滤渣即为丹參脂溶性成分。用70%的こ醇溶解丹參脂溶性成分。取预处理后的大孔反相吸附树脂匪PS-1001L (树脂预处理步骤采用含IN盐酸 的70%丙酮水溶液冲洗树脂，用量约为3BV，再用去离子水洗到中性)装于Φ80Χ350πιπι层析柱中，将丹參脂溶性成分こ醇溶液上NMPS-100。上柱后先用5BV含70%こ醇的水溶液除杂，再用4BV含90%こ醇将丹參酮II A集中洗下，分步收集洗脱液，并通过HPLC检测，将丹參酮II A纯度大于70%的洗脱液混合。混合液的纯度为78.8%，此步的收率为88. 2%。将混合液浓缩至干，以2倍样品体积丙酮溶解，向丙酮溶液中慢慢滴加蒸馏水至溶液出现浑浊，将浑浊液放置于4°C冰箱静置过夜结晶，得到丹參酮II A粗晶体，抽滤，蒸馏水洗粗晶体一次，再用2倍样品体积丙酮溶解后加入少量蒸馏水，于4°C冰箱中静置过夜结晶，得到丹參酮IIA晶体，HPLC检测其纯度大于99. 3 %，结晶质量为345. lmg，收率65. 1%。实施例6取IOOg经粉碎过20目筛的丹參药材粉末(丹參酮IIA含量为O. 53% (重量百分比)，加600mL含80%こ醇的水溶液在80°C下浸泡提取Ih后离心，取上清液，此操作重复两次，合并两次上清液，在40°C下旋蒸除去こ醇，得到丹參醇提物浓缩液。用pH8的水溶解丹參醇提物，振荡混合后过滤，滤渣即为丹參脂溶性成分。用70%的こ醇溶解丹參脂溶性成分。取预处理后的大孔反相吸附树脂匪PS-1001L (树脂预处理步骤采用含IN盐酸的70%丙酮水溶液冲洗树脂，用量约为3BV，再用去离子水洗到中性)装于Φ80Χ350πιπι层析柱中，将丹參脂溶性成分こ醇溶液上NMPS-100。上柱后先用5BV含60%こ醇的水溶液除杂，再用4BV含90%こ醇将丹參酮II A集中洗下，分步收集洗脱液，并通过HPLC检测，将丹參酮II A纯度大于70%的洗脱液混合。混合液的纯度为76. 9%，此步的收率为87. 0%。将混合液浓缩至干，以2倍样品体积丙酮溶解，向丙酮溶液中慢慢滴加蒸馏水至溶液出现浑浊，将浑浊液放置于4°C冰箱静置过夜结晶，得到丹參酮II A粗晶体，抽滤，蒸馏水洗粗晶体一次，再用2倍样品体积丙酮溶解后加入少量蒸馏水，于4°C冰箱中静置过夜结晶，得到丹參酮II A晶体，HPLC检测其纯度大于98. 6%,结晶质量为279. 7mg,收率61 %。实施例7取IOOg经粉碎过20目筛的丹參药材粉末(丹參酮II A含量为O. 53% (重量百分比)，加700mL含70%こ醇的水溶液在80°C下浸泡提取Ih后离心，取上清液，此操作重复两次，合并两次上清液，在40°C下旋蒸除去こ醇，得到丹參醇提物浓缩液。用PH7的水溶解丹參醇提物，振荡混合后过滤，滤渣即为丹參脂溶性成分。用60%的こ醇溶解丹參脂溶性成分。取预处理后的大孔反相吸附树脂匪PS-1001L (树脂预处理步骤采用含IN盐酸的70%丙酮水溶液冲洗树脂，用量约为3BV，再用去离子水洗到中性)装于Φ80Χ350πιπι层析柱中，将丹參脂溶性成分こ醇溶液上NMPS-100。上柱后先用5BV含70%こ醇的水溶液除杂，再用4BV含95%こ醇将丹參酮IIA集中洗下，分步收集洗脱液，并通过HPLC检测，将丹參酮IIA纯度大于70%的洗脱液混合。混合液的纯度为75. 9%，此步的收率为86. 9%。将混合液浓缩至干，以2倍样品体积丙酮溶解，向丙酮溶液中慢慢滴加蒸馏水至溶液出现浑浊，将浑浊液放置于4°C冰箱静置过夜结晶，得到丹參酮II A粗晶体，抽滤，蒸馏水洗粗晶体一次，再用2倍样品体积丙酮溶解后加入少量蒸馏水，于4°C冰箱中静置过夜结晶，得到丹參酮II A晶体，HPLC检测其纯度大于98.4%，结晶质量为330. 2mg， 收率62. 8%。实施例8取IOOg经粉碎过20目筛的丹參药材粉末(丹參酮IIA含量为O. 53% (重量百分比)，加800mL含90%こ醇的水溶液在70°C下浸泡提取Ih后离心,取上清液,此操作重复两次，合并两次上清液，在40°C下旋蒸除去こ醇，得到丹參醇提物浓缩液。用pH8的水溶解丹參醇提物，振荡混合后过滤，滤渣即为丹參脂溶性成分。用60%的こ醇溶解丹參脂溶性成分。取预处理后的大孔反相吸附树脂匪PS-1001L (树脂预处理步骤采用含IN盐酸的70%丙酮水溶液冲洗树脂，用量约为3BV，再用去离子水洗到中性)装于Φ80Χ350πιπι层析柱中，将丹參脂溶性成分こ醇溶液上NMPS-100。上柱后先用5BV含70%こ醇的水溶液除杂，再用4BV含95%こ醇将丹參酮II A集中洗下，分步收集洗脱液，并通过HPLC检测，将丹參酮II A纯度大于70%的洗脱液混合。混合液的纯度为78. 2%，此步的收率为87.6%。将混合液浓缩至干，以2倍样品体积丙酮溶解，向丙酮溶液中慢慢滴加蒸馏水至溶液出现浑浊，将浑浊液放置于4°C冰箱静置过夜结晶，得到丹參酮II A粗晶体，抽滤，蒸馏水洗粗晶体一次，再用2倍样品体积丙酮溶解后加入少量蒸馏水，于4°C冰箱中静置过夜结晶，得到丹參酮II A晶体，HPLC检测其纯度大于99.0%，结晶质量为340. 3mg，收率
64.2%。
权利要求
1.ー种丹參酮IIA的制备方法，其包含下列步骤将丹參脂溶性成分用大孔反相吸附树脂进行柱层析分离，即可；其中，所述的大孔反相吸附树脂的參数如下粒径为50 100 μ m,孔径为90 110人，介质为聚苯こ烯-ニこ烯苯。
2.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的孔径为100人。
3.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的大孔反相吸附树脂为深圳纳微科技公司生产的大孔反相吸附脂，型号为匪PS100，其粒径为50-100 μ m，孔径为100人，树脂骨架为聚苯こ烯-ニこ烯苯。
4.如权利要求I 3任一项所述的制备方法，其特征在于所述的大孔反相吸附树脂在使用前，先进行预处理，预处理的方法如下用酸水溶液冲洗树脂，再用去离子水洗到中性，即可。
5.如权利要求I 3任一项所述的制备方法，其特征在于所述的丹參脂溶性成分由下列方法制得将丹參醇提物混于pH为5 8的水中，过滤，得滤渣，即可。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述的pH值为6 7。
7.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述的丹參醇提物由下列方法制得将粉碎后的丹參药材用こ醇水溶液浸泡，然后离心，取上清液，浓缩，即可；其中，所述的粉碎后的丹參药材的粒径为20 50目；所述的こ醇水溶液与粉碎后的丹參药材的体积质量比为5 10L/Kg ;所述的こ醇水溶液的体积浓度为70% 100%;所述的浸泡的温度为60 800C ;所述的浸泡的时间为O. 5 2小时；所述的浸泡和离心的次数为I 3次。
8.如权利要求I 3任一项所述的制备方法，其特征在于所述的用大孔反相吸附树脂进行柱层析分离的方法包含下列步骤以体积浓度60% 95%的こ醇水溶液为洗脱剂，将丹參脂溶性成分用大孔反相吸附树脂进行柱层析分离，即可。
9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于所述的柱层析分离的步骤如下将丹參脂溶性成分上柱后，先用体积浓度60% 70%的こ醇水溶液进行洗脱除杂，再用体积浓度90% 95%的こ醇水溶液进行洗脱，收集丹參酮IIA的纯度大于70%的洗脱液，即可。
10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于所述的体积浓度为60% 70%的こ醇水溶液的用量为2-4个柱体积，体积浓度90% 95%的こ醇水溶液的用量为2 4个柱体积。
11.如权利要求I 3任一项所述的制备方法，其特征在于在将丹參脂溶性成分用大孔反相吸附树脂进行柱层析分离之前，先将丹參脂溶性成分溶于体积浓度60% 70%的こ醇水溶液中，得丹參脂溶性成分的こ醇溶液，再上柱进行柱层析分离。
12.如权利要求I 3任一项所述的制备方法，其特征在于在大孔反相吸附树脂柱层析分离结束后，还包含下列步骤将柱层析分离所得物质进行本领域常规的结晶步骤，得丹參酮IIA晶体，即可；其中，所述的结晶步骤包含下列步骤 (1)将柱层析分离所得的洗脱液浓缩，得浓缩物，用丙酮溶解，向所得丙酮溶液中滴加蒸馏水至溶液出现浑浊，将所得浑浊液于2-8°C条件下静置20小时以上，得丹參酮IIA粗晶体； (2)将步骤(I)所得粗晶体用蒸馏水洗，再用丙酮溶解后加入蒸馏水，至溶液出现浑浊，将所得浑浊液于2-8°C条件下静置20小时以上，得隐丹參酮IIA晶体。
13.如权利要求12所述的制备方法，其特征在于步骤⑴或⑵中，所述的将所得浑浊液静置的温度为4°C。
14.如权利要求12所述的制备方法，其特征在干步骤(I)中，丙酮的体积为所述浓缩物体积的2 4倍； 和/或步骤(2)中，所述的蒸馏水洗的次数为I 3次，毎次用蒸馏水洗涤的用量与粗晶体的体积质量比为10 20L/kg ； 和/或步骤(2)中，所述丙酮的体积为所述粗晶体体积的2 4倍。
全文摘要
本发明公开了一种丹参酮IIA的制备方法，其包含下列步骤将丹参脂溶性成分用大孔反相吸附树脂进行柱层析分离，即可；其中，所述的大孔反相吸附树脂的参数如下粒径为50～100μm，孔径为介质为聚苯乙烯-二乙烯苯。本发明的制备方法不仅产物收率高，且可以达到很高的产物纯度。本发明的方法还可以进行放大生产，具有一定的应用价值。
文档编号C07J73/00GK102675408SQ20111005961
公开日2012年9月19日 申请日期2011年3月11日 优先权日2011年3月11日
发明者卢亮, 吕静娴, 李继安, 郭瑞峰 申请人:上海医药工业研究院