专利名称：过氧化苯甲酰快速检测试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种过氧化苯甲酰快速检测试剂盒。
背景技术：
过氧化苯甲酰(Benzoyl Peroxide，简称BPO或BP)作为增白剂已被广泛应用于小麦面粉的漂白。其基本原理是过氧化苯甲酰能使小麦粉中类胡萝卜素的共轭双键被氧化而破坏，从而使小麦粉的色泽得以提高和改善。然而，过量添加过氧化苯甲酰，不仅影响了面粉制品的口感，同时也产生大量过氧化苯甲酰的分解产物，不利于人体健康。自2011年 5月1日起，中华人民共和国卫生部禁止在面粉生产中添加过氧化苯甲酰。目前各种检测过氧化苯甲酰含量的方法主要有高效液相色谱法，化学发光和电化学分析法等。这些方法样品前处理繁琐耗时，成本高，不易推广使用。因此，有必要建立一种能灵敏快速检测过氧化苯甲酰含量的新方法，为基层质检部门提供技术支持。荧光分析方法不但具有灵敏快速，可实现可视化检测等特点，且因预处理简单、成本低而受到普遍重视。但是，目前很少有荧光法检测过氧化苯甲酰含量的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种过氧化苯甲酰快速检测试剂盒。本发明提供的苯基硼酸酯化合物，其结构式如式I所示
权利要求
1.式I所示苯基硼酸酯化合物，
2.一种制备权利要求1所述化合物的方法，包括如下步骤在催化剂存在的条件下，将 7-羟基吩恶嗪酮钠盐与2-溴甲基苯硼酸频哪醇酯混勻进行反应，反应完毕得到所述式I所示苯基硼酸酯化合物。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述催化剂选自有机碱和无机碱中的至少一种；所述7-羟基吩恶嗪酮钠盐、2-溴甲基苯硼酸频哪醇酯和催化剂的投料摩尔比为 1 0.5 5 0.5 5，具体为 1 1 1 或 1 4 4 或 1 1-4 1 ；所述反应步骤中，温度为O°C 60°C，优选30°C，时间为1 M小时。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述有机碱选自三乙胺和吡啶中的至少一种；所述无机碱选自碳酸钾、氢氧化钠、碳酸钠和碳酸氢钠中的至少一种；所述反应在有机溶剂中进行；所述有机溶剂选自N，N-二甲基甲酰胺、三乙胺、四氢呋喃和乙腈中的至少一种。
5.一种过氧化苯甲酰检测试剂盒，包括试剂储备液1和试剂储备液2 ；其中，所述试剂储备液1为缓冲液；所述试剂储备液2为权利要求1所述化合物的溶液。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于所述试剂储备液1中，所述缓冲液为pH 值为6 9的有机溶剂的磷酸盐缓冲液，所述磷酸盐选自Na2HP04、NaH2P04和KH2PO4中的至少一种；所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、二甲基亚砜、四氢呋喃、乙腈和1，4- 二氧六环中的至少一种；所述缓冲液中，所述磷酸盐的浓度为0. 01 0. 5M，具体为0. 02M ；所述有机溶剂在所述缓冲液中的体积百分浓度为 60%，具体为10% ；所述试剂储备液2中，所述权利要求1所述化合物的溶液的浓度为1-100 μ Μ,具体为 3-10 μ M ；溶剂选自乙腈、甲醇、乙醇、1，4_ 二氧六环和四氢呋喃中的至少一种，具体为乙腈。
7.根据权利要求5-6任一所述的试剂盒，其特征在于所述过氧化苯甲酰快速检测试剂盒由所述试剂储备液1和试剂储备液2组成。
8.权利要求5-7任一所述试剂盒在检测过氧化苯甲酰含量中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于所述检测过氧化苯甲酰含量的方法，包括如下步骤1)制作标准曲线a)以550nm作为激发波长，测定一系列不同浓度的过氧化苯甲酰标准品的溶液在发射波长为585nm处的荧光强度，记为F ；并测定试剂空白在发射波长为585nm处的荧光强度， 记为Ftl，以过氧化苯甲酰的浓度C为横坐标，荧光强度变化值AF为纵坐标，绘制标准曲线；其中，^F = F-F0 ；所述一系列不同浓度的过氧化苯甲酰标准品的溶液由权利要求5-8 任一所述过氧化苯甲酰检测试剂盒中的试剂储备液1、试剂储备液2和过氧化苯甲酰的标准储备溶液混勻并用水和乙醇稀释而得； 2)检测待测样品中过氧化苯甲酰的含量将所述步骤1)所述过氧化苯甲酰标准品替换为所述待测样品，按照所述步骤1)所述方法检测所述待测样品在发射波长为585nm处的荧光强度，记为F’，将所述F’代入所述步骤1)所得标准曲线，得到所述待测样品中过氧化苯甲酰的浓度，进而得到所述待测样品中过氧化苯甲酰的含量。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于所述一系列不同浓度的过氧化苯甲酰标准品的溶液中，所述过氧化苯甲酰的浓度依次为0、0. 5、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、 24,26 禾口 30μΜ ；所述一系列不同浓度的过氧化苯甲酰标准品的溶液的体积均为3mL ； 所述过氧化苯甲酰的标准储备溶液中，溶剂为乙醇；所述过氧化苯甲酰的标准储备溶液的浓度为ImM ；所述权利要求5-7任一所述过氧化苯甲酰检测试剂盒中的试剂储备液1和所述试剂储备液2的体积比为2. 5mL 9 μ L ；所述步骤1)所述标准曲线对应的线性回归方程为AF = 56.2XC+39. 1，其中，C为所述过氧化苯甲酰的浓度，单位为Pg/mL。
全文摘要
本发明公开了一种过氧化苯甲酰快速检测试剂盒。本发明提供的过氧化苯甲酰检测试剂盒，包括试剂储备液1和试剂储备液2；其中，试剂储备液1为缓冲液，试剂储备液2为含resorufin荧光团的苯基硼酸酯的溶液。本发明具有操作简便，成本低，快速高效灵敏等优点，易于推广和应用，在食品、医药等领域中有着巨大的应用前景。
文档编号C07F5/02GK102532177SQ20111043604
公开日2012年7月4日 申请日期2011年12月22日 优先权日2011年12月22日
发明者刘洋, 刘清珺, 史文, 张经华, 李照, 陈巍, 马会民 申请人:中国科学院化学研究所, 北京市理化分析测试中心