专利名称：一种混合生育酚的分离提纯方法
技术领域：
本发明涉及分离工程技术领域，特别是涉及一种混合生育酚的分离提纯方法。
背景技术：
维生素E又名生育酚，是人体必需的维生素之一，它包括α、β、δ、Y型生育酚和相应的生育三烯酚等8种物质，具有清除自由基、抗癌、抗心血管疾病、提高免疫力和抗衰老的作用。维生素E的来源有化学合成和天然品两大类。天然维生素E为具有生理活性的右旋体，即d型，而人工合成品为消旋体，即d型和I型的混合物，天然维生素E的生物活性是合成品的2倍以上，生物吸收度也比合成品高，并且具有更好的食用安全性。
目前研究发现，油脂的脱臭馏出物中富含天然维生素E，由于脱臭馏出物中组分复杂，且天然维生素E的各种异构体之间结构差异极小，采用一般的方法往往得到的是混合生育酚，很难得到高纯度的天然维生素E的各种单体，要得到高纯度的维生素E的单体必须先对原料进行处理，使目标产物尽可能的集中为维生素E的各种单体，然后利用这几种单体物理结构上的差异，使用特殊的分离工艺进行处理。目前的方法主要有溶剂萃取法、分子蒸馏法、色谱法、超临界二氧化碳萃取精致法、树脂吸附法等。在专利CN101323067A中公开了一种以脱臭馏出物为原料，制得生育酚浓缩液，然后将生育酚浓缩液上硅胶层析柱分离，再经过不同有机溶剂洗涤分别得到脂肪酸酯、高含量混合生育酚和植物留醇，但是这种方法得到的只是混合生育酚，不能得到生育酚的各种单体。在专利CN1234703C中公开了一种以脱臭馏出物为原料，经过水解酸化等步骤制备混合生育酚，虽然制得的生育酚的含量在95%以上，但这也只是各种生育酚单体的混合物，无法得到纯度较高的各种生育酚单体。在专利CN102432584A中公开了一种使用反向层析柱从混合生育酚分离制备天然维生素E单体的方法，该方法虽然可实现原料一次上柱分离得到3种天然维生素E单体，但是该方法中使用了成本高的反向层析硅胶，并且制作反向硅胶柱时，往往会导致因硅胶填料不实而影响最终的分离效果。在专利CN101445498A中提到了一种生育酚同系物的分离方法，该方法是以经过树脂提纯的天然维生素E为原料，采用离子交换固定床置换色谱操作分离生育酚同系物，但该方法所得的β + Υ生育酚单体和δ生育酚单体的纯度较低，并且分离不完全。
发明内容
本发明的目的是针对目前提纯工艺复杂成本高、分离效果以及分离单体纯度不理想的问题，提供一种操作简单，成本低，且分离单体纯度高，总体收率好的混合生育酚的分离提纯方法。本发明的目的可以通过以下技术方案实现一种混合生育酚的分离提纯方法，该方法采用阴离子交换树脂柱进行提纯，包括下列步骤(I)将混合生育酚溶解于溶剂A中，配成质量百分数为5% 20%的上柱液，其中所述溶剂A为醇类、酯类、烃类有机溶剂中的一种或两种；(2)将所述上柱液上柱，上柱液在阴离子交换树脂柱中的停留时间为I IOh ;(3)用溶剂B对阴离子交换树脂柱进行洗脱，收集得到洗脱液I，其中所述溶剂B为醇类溶剂、烃类溶剂中的一种或两种；(4)用溶剂C对阴离子交换树脂柱进行洗脱，收集得到洗脱液II，其中所述溶剂C为醇类溶剂和有机酸溶剂的混合；所述醇类溶剂为甲醇或乙醇，所述有机酸溶剂为乙酸、丙酸、乳酸中的一种；(5)将上述洗脱液1和洗脱液II除去溶剂，分别得到d-(i3 + Y)生育酚和d-δ生育酚。在本发明中，优选地，所述醇类溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的一种或多种，更优选为甲醇、乙醇中的一种或两种，最优选为乙醇。在本发明中，优选地，所述烃类溶剂为正己烷、环己烷中的一种或两种。在本发明中，优选地，选用的阴离子交换树脂柱是以强碱性或弱碱性阴离子树脂作为柱子填充剂。在本发明步骤(I)中，上柱液中混合生育酚的浓度是保证最终分离效果的重要因素，如果柱体中的上柱液浓度过高，将导致洗脱液I中含有洗脱液II中的混合生育酚单体，从而影响了分离单体的纯度。在本发明中，优选上柱液中混合生育酚的质量百分数为5% 12%,更优选为7% 10%。在本发明步骤⑵中，上柱液在阴离子交换树脂柱中需要停留I IOh后，才可以用溶剂进行洗脱，目的是为了让混合生育酚被柱子中的树脂充分吸附，防止生育酚因吸附不完全而被过早地洗脱，导致分离效果差。本发明优选的停留时间为2 5h。在本发明中，优选地，所述溶剂A为甲醇、乙醇、正己烷、乙酸乙酯中的一种或两种，更优选为乙醇和正己烷的混合溶剂。在本发明中，优选地，所述溶剂B为醇类溶剂和烃类溶剂的混合，更优选为乙醇和正己烷的混合。在溶剂B中，烃类溶剂的质量百分数优选为1% 20%，更优选为5% 10%。在本发明中，优选地，所述溶剂C为乙醇和乙酸的混合溶剂。在本发明中，优选地，在所述溶剂C中，有机酸溶剂的质量百分数为4% 6%。本发明的混合生育酚的分离提纯方法具有以下优点1.采用阴离子交换树脂吸附法进行分离提纯，提取工艺的步骤简单，设备易得可反复使用，且溶剂可回收循环利用，降低了成本，减少了环境污染。2.采用本发明的工艺条件，提取得到的d- (β + Υ)生育酚单体和d-δ生育酚单体品质好、无固形物，并且分离完全，不同时段得到的洗脱液无交叉现象，所得天然维生素E总含量在85%以上，单体纯度可达85%以上，混合生育酚的总受率高达80%以上。
具体实施例方式下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。在本发明中，所述混合生育酚的纯度为30% 60%，混合生育酚可以来自如以大豆油、菜籽油、花生油、葵花籽油等油脂的脱臭馏出物为原料，经过酯化、冷析、结晶、分子蒸馏等过程得到质量含量为50%左右的混合生育酚。本发明使用的阴离子交换树脂柱可在市场上购得，如安徽三星树脂科技有限公司的201X4(711)强碱性阴离子交换树脂柱。实施例1将50g含有天然维生素E 50%的混合生育酚加入到200g甲醇和乙酸乙酯的混合溶剂中，配成质量浓度为10%的上柱液，其中甲醇和乙酸乙酯的质量百分比为9:1。 将所得上柱液上柱后，控制流速在30-35滴/分钟，以保证上柱液在树脂柱中的停留时间为3小时。用500g乙醇和正己烷的混合溶剂洗脱，其中乙醇和正己烷的质量百分比为19:1，收集得到302.1g洗脱液I ;再用300g含有质量百分比为5%乙酸的乙醇溶液进行洗脱，收集得到311. 5g洗脱液II ;将所得洗脱液I和洗脱液II减压蒸除溶剂，分别得到d- (β + γ)生育酚单体15. 2g，天然维生素E总含量为90. 2%，其相对含量为87. 1%，和d_ δ生育酚单体7. 2g，天然维生素E总含量为88. 3%，其相对含量为90. 8%，混合生育酚的总收率80. 3%。实施例2将50g含有天然维生素E 30%的混合生育酚加入到300g乙醇和正己烷的混合溶剂中，配成质量浓度为7. 14%的上柱液，其中乙醇和正己烷的质量百分比为19:1。将所得上柱液上柱后，控制流速在45-50滴/分钟，以保证上柱液在树脂柱中的停留时间为2小时。用500g异丙醇和正己烷的混合溶剂洗脱，其中异丙醇和正己烷的质量百分比为9:1，收集得到397. 6g洗脱液I ;再用300g含有质量百分比为4%丙酸的乙醇溶液进行洗脱，收集得到306. 2g洗脱液II ;将所得洗脱液I和洗脱液II减压蒸除溶剂，分别得到d- ( β + Y )生育酚单体9. 5g，天然维生素E总含量为86. 4%，其相对含量为86. 9%，和d_ δ生育酚单体5. 2g，天然维生素E总含量为87. 9%，其相对含量为91%，混合生育酚的总收率85. 5%。实施例3将50g含有天然维生素E 40%的混合生育酚加入到200g甲醇和正己烷的混合溶剂中，配成质量浓度为8%的上柱液，其中甲醇和正己烷的质量百分比为19:1。将所得上柱液上柱后，控制流速在8-10滴/分钟，以保证上柱液在树脂柱中的停留时间为10小时。用600g乙醇和正己烷的混合溶剂洗脱，其中乙醇和正己烷的质量百分比为4:1，收集得到395. 2g洗脱液I ;再用300g含有质量百分比为6%乙酸的甲醇溶液进行洗脱，收集得到310. 5g洗脱液II ;将所得洗脱液I和洗脱液II减压蒸除溶剂，分别得到d- (β + γ)生育酚单体13. 7g，天然维生素E总含量为85. 9%，其相对含量为86. 3%，和d_ δ生育酚单体5. 2g，天然维生素E总含量为86. 6%，其相对含量为88. 2%，混合生育酚的总收率81. 4%。实施例4
将50g含有天然维生素E 40%的混合生育酚加入到300g乙醇和正己烷的混合溶剂中，配成质量浓度为12%的上柱液，其中乙醇和正己烷的质量百分比为19:1。将所得上柱液上柱后，控制流速在45-50滴/分钟，以保证上柱液在树脂柱中的停留时间为2小时。用600g甲醇和正己烷的混合溶剂洗脱，其中甲醇和正己烷的质量百分比为19:1，收集得到414. 6g洗脱液I ;再用300g含有质量百分比为5%乳酸的乙醇溶液进行洗脱，收集得到296. 7g洗脱液II ;将所得洗脱液I和洗脱液II减压蒸除溶剂，分别得到d- (β + γ)生育酚单体13. 3g，天然维生素E总含量为85. 6%，其相对含量为86. 0%，和d_ δ生育酚单体5. 8g，天然维生素E总含量为87. 2%，其相对含量为85. 4%，混合生育酚的总收率82. 0%。实施例5将50g含有天然维生素E 60%的混合生育酚加入到200g乙醇和正己烷的混合溶 剂中，配成质量浓度为10%的上柱液，其中乙醇和正己烷的质量百分比为19:1。将所得上柱液上柱后，控制流速在95-100滴/分钟，以保证上柱液在树脂柱中的停留时间为I小时。用600g乙醇和正己烷的混合溶剂洗脱，其中乙醇和正己烷的质量百分比为19:1，收集得到501.1g洗脱液I ;再用300g含有质量百分比为5%乙酸的乙醇溶液进行洗脱，收集得到299. Og洗脱液II ;将所得洗脱液I和洗脱液II减压蒸除溶剂，分别得到d- (β + γ)生育酚单体18. 3g，天然维生素E总含量为85. 2%，其相对含量为85. 8%，和d_ δ生育酚单体10. 2g，天然维生素E总含量为85. 7%，其相对含量为88. 2%，混合生育酚的总收率81. 1%。以上所述，仅为本发明较佳具体实施方式
，但本发明的保护范围并不局限与此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种混合生育酚的分离提纯方法，所述方法采用阴离子交换树脂柱进行提纯，包括下列步骤 (1)将混合生育酚溶解于溶剂A中，配成质量百分数为5% 20%的上柱液，其中所述溶剂A为醇类、酯类、烃类有机溶剂中的一种或两种； (2)将所述上柱液上柱，上柱液在阴离子交换树脂柱中的停留时间为I IOh; (3)用溶剂B对阴离子交换树脂柱进行洗脱，收集得到洗脱液I，其中所述溶剂B为醇类溶剂、烃类溶剂中的一种或两种； (4)用溶剂C对阴离子交换树脂柱进行洗脱，收集得到洗脱液II，其中所述溶剂C为醇类溶剂和有机酸溶剂的混合，所述醇类溶剂为甲醇或乙醇，所述有机酸溶剂为乙酸、丙酸、乳酸中的一种； (5)将上述洗脱液I和洗脱液II除去溶剂，分别得到d-(i3+ Y)生育酚和d-δ生育酚。
2.如权利要求1所述的混合生育酚的分离提纯方法，其特征在于，所述醇类溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的一种或多种。
3.如权利要求1所述的混合生育酚的分离提纯方法，其特征在于，所述烃类溶剂为正己烷、环己烷中的一种或两种。
4.如权利要求1所述的混合生育酚的分离提纯方法，其特征在于，所述阴离子交换树脂柱为强碱性阴离子交换树脂柱或弱碱性阴离子交换树脂柱。
5.如权利要求1所述的混合生育酚的分离提纯方法，其特征在于，所述步骤(I)的上柱液中混合生育酚的质量百分数为5% 12%，所述步骤(2)中的停留时间为2 5小时。
6.如权利要求1所述的混合生育酚的分离提纯方法，其特征在于，所述混合生育酚的纯度为30% 60%。
7.如权利要求1所述的混合生育酚的分离提纯方法，其特征在于，所述溶剂A为甲醇、乙醇、正己烷、乙酸乙酯中的一种或两种。
8.如权利要求1所述的混合生育酚的分离提纯方法，其特征在于，所述溶剂B为醇类溶剂和烃类溶剂的混合，其中烃类溶剂的质量百分数为1% 20%。
9.如权利要求1所述的混合生育酚的分离提纯方法，其特征在于，在所述溶剂C中，有机酸溶剂的质量百分数为4% 6%。
全文摘要
本发明公开了一种混合生育酚的分离提纯方法，该方法采用阴离子交换树脂柱进行提纯，包括下列步骤将混合生育酚溶解于溶剂A中，配成质量百分比为5%～20%的上柱液后上柱，上柱液在树脂柱中的停留时间为1～10h后，用溶剂B对阴离子交换树脂柱进行洗脱，收集得到洗脱液Ⅰ，再用溶剂C对阴离子交换树脂柱进行洗脱，收集得到洗脱液Ⅱ，将洗脱液Ⅰ和洗脱液Ⅱ减压蒸除溶剂，分别得到d-(β+γ)生育酚和d-δ生育酚。采用本方法进行分离提纯，提取工艺的步骤简单，成本低，环境污染小，并且提取得到的d-(β+γ)生育酚单体和d-δ生育酚单体纯度高，混合生育酚的总收率高。
文档编号C07D311/72GK103012352SQ20121055540
公开日2013年4月3日 申请日期2012年12月19日 优先权日2012年9月3日
发明者张源仁, 王燕峰, 王嘉磊 申请人:宁波大红鹰生物工程股份有限公司